日落黄标准品

[align=center][img=,513,126]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706120922_01_3224499_3.jpg[/img][/align][align=left]序：自2010年以来，我们已经组织了39期草根比对，此活动纯属交流切磋之使用。我们希望更多的版友参与进来， 共同学习共同提高我们的仪器分析行业的水平。如果有想组织的，请与牛牛0322联系（站短或者QQ2850501193）[/align][align=center]草根能力比对之40期：[/align][align=center][b]果汁中柠檬黄、日落黄的检测[/b][/align][align=center] 首先感谢[color=#00b0f0]北京曼哈格生物科技有限公司[/color]为本次活动提供样品。本单位是[color=#33ccff]国家质检总局核准的标准物质研制单位[/color]。[/align][align=center][b]主要产品：[/b]农药标准物质、兽药标准物质、食品添加剂标准物质、保健品标准物质、化妆品标准物质、环境分析标准物质等。 [b]产品服务领域：[/b]食品分析、药物分析、环境分析等。第40期草根能力比主要是针对果汁中柠檬黄、日落黄的含量分析测定[/align][align=left][b]样品信息[/b][table=577][tr][td][b]样品名称[/b][/td][td][b]果汁中柠檬黄、日落黄[/b][/td][/tr][tr][td][b]检测项[/b][/td][td][b]柠檬黄、日落黄[/b][/td][/tr][tr][td][b]标准范围[/b][/td][td][b]不限[/b][/td][/tr][tr][td][b]检测方法/仪器[/b][/td][td][b]不限检测方法与仪器[/b][/td][/tr][tr][td][b]提供单位[/b][/td][td][color=#00B0F0][color=#00b0f0]北京曼哈格生物科技有限公司[/color][/color][/td][/tr][/table][/align][align=center][url=http://ng1.17img.cn/bbsfiles/files/2017/06/201706120950_01_3224499_3.docx?n=%e7%ac%ac40%e6%9c%9f%e8%8d%89%e6%a0%b9%e6%af%94%e5%af%b9%e6%8a%a5%e5%90%8d%e8%a1%a8.docx&tocken=1eabe663b25cc711fd6967edc95afcbd×=1497232496][img=,230,60]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610241639_614890_2908983_3.jpg[/img][/url][/align]请下载报名表填写后，发送到指定邮箱 [email=caogenbidui2@163.com][color=#0081d7]caogenbidui2@163.com[/color][color=#0081d7]。[/color][/email]欢迎大家报名参加，检验自己实验室的分析水平。[b][color=red]本次活动免费邮寄样品样品。[/color][/b]参与人员费用：[b][color=red]免费[/color][/b]参与人员名额：50份 数量有限哦报名邮件主题：草根能力比对之40期+报名者论坛ID报名时间：[b][color=red]即日起 至 2017年6月25日[/color][/b]样品发放时间：2017年6月26日[color=red]结果反馈时间：2017年7月10日止[/color][align=left][color=red]注：报名参与者请添加微信：xyz4077（小叶子），[b][color=#3333ff]备注：草根比对[/color][/b][/color][/align][align=left][color=red][b][color=#3333ff][img=,160,160]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/06/201706121020_01_3224499_3.jpg[/img][/color][/b][/color][/align][align=left][color=red][b][color=#3333ff][b]在本期活动报名结束后[/b]，会将参与者、本期活动的样品提供者及组织者加入本次活动微信群，促进大家的结果交流，同时，还会发放不定金额的[b][color=red]拼手气红包，[/color][/b]能获得多少，看各自运气啦~~热烈欢迎同行及各类有相关检测能力的实验室参加。因为样品数量有限，想参加的同学抓紧时间报名了。参加的同学都留个脚印，我们会不断更新帖子，个人论坛都会给您提醒。参加比对注意事项[color=red]特别说明：[/color]1、由于本次活动采取免费邮寄样品，免费提供样品的形式，欢迎大家积极参与，谢谢合作！报名参加比对提交报告结果的并发原创与大家共享分析过程的，有[b][color=red]100[/color][color=red]积分[/color][/b]奖励，最后汇总大家的原创分享，评选出本期活动的优秀者一名，论坛及合作单位颁发[b][color=red]优秀证书[/color][/b]及[b][color=red]精美礼品[/color][/b]。[b]注：所有奖励及惩罚将在活动结束后统一发放。[/b]2、以往有个别报名者未与实验室其他同事沟通，报名后拿到样品，未能在规定的时间内报出结果，浪费样品和大家的时间和精力，也失去了一次大家交流的机会，对于报名不报结果的实验室，不予奖励且会[b][color=red]扣除100积分[/color][/b]给予处罚，希望大家珍惜每次报名的机会。累计三次报名后，未报出结果的版友，将终身不得参与本活动。3、申请表填写：请认真填写申请表,特别是地址和联系方式,以方便快递及尽快接收到样品。4、样品邮寄：（1）本次比对纯属相互交流、学习，免费提供样品。报名表一定要填写完整正确，组织方会根据报名表进行快递单填写。（2）样品邮寄时间：2017年6月26日，报名后请大家保持手机通畅，方便接收样品。（3）[color=red]样品收到后请反馈样品已经收到：[/color]发邮件至[email=caogenbidui2@163.com][b][color=#0081D7]caogenbidui2@163.com[/color][/b][/email]5、检测结果反馈：1） 样品结果反馈时间：请于[color=red]2017[/color][color=red]年7月10日[/color]前将结果报告单以邮件的形式发送至（[b]caogenbidui2@163.com[/b]）2） 本次比对纯属技术交流自查自纠，请认真对待不要对结果，比对结果不会对实验室产生负面影响。3） 请在能力验证版面（[url=http://bbs.instrument.com.cn/forum_529.htm][color=#0081D7][/color][/url][color=#0081D7][url]http://bbs.instrument.com.cn/forum_529.htm[/url][/color]）发样品操作过程的话题，凡参与者可获得最多[b]100积分[/b]的奖励，[b][color=red]优秀者还可获得仪器信息网提供的精美礼品一份[/color][/b]。对于不报告者浪费比对样品的我们也要扣除100积分。6、检测结果汇总报告：本人会尽快将大家的结果以编号的形式进行汇总统计，并保证不会泄露大家的联系方式，请放心！如果有版友想策划草根能力比对，能提供测试样品，请与牛牛0322联系（[email=594695627@qq.com][color=#0081D7][/color][/email]2850501193）[b]草根能力比对组织申请表：[/b][color=#0081D7][url=http://bbs.instrument.com.cn/topic/5669421]往期回顾请点击进入》[/url][/color][/color][/b][/color][/align][align=center][url=http://ng1.17img.cn/bbsfiles/files/2017/06/201706120950_01_3224499_3.docx?n=%e7%ac%ac40%e6%9c%9f%e8%8d%89%e6%a0%b9%e6%af%94%e5%af%b9%e6%8a%a5%e5%90%8d%e8%a1%a8.docx&tocken=1eabe663b25cc711fd6967edc95afcbd×=1497232496][img=,230,60]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610241639_614890_2908983_3.jpg[/img][/url][/align][color=red]请大家认真填写电话和手机及所在地址，主要是方便邮寄样品另外报名不要用繁体字，不要发PDF格式的及扫描的，不便于登记。谢谢大家配合我们的工作.[/color][color=red]报名邮件格式：主题 ：第40期草根比对+论坛ID[/color][color=red]结果报告邮件格式： 主题： 第40期草根比对结果报告+样品编码[/color]

[align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]优乐美中苋菜红、亮蓝、柠檬黄、日落黄的测定回收率偏低[/color][/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209050906298925_3721_3490514_3.png[/img][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]图1 试样制备方法5.1.3[/color][/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209050906301405_7337_3490514_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]图2 色素提取方法[/color][/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209050906305545_5745_3490514_3.png[/img][/align][align=left][font='calibri'][size=13px]图3 样品优乐美[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][back=#ffffff]样品处理标准为GB 5009.35-2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定，上机测定后加标结果计算回收率为10%-30%较为偏低，以前做的饮料和糖果类不会产生此种情况，故提出以下几个问题望各位老师解答，不胜感激！！！[/back][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]一、样品为固体饮料（优乐美袋装）加入30ml水溶解后颜色为棕色且比较浑浊会对前加标的色素化合物产生干扰吗？[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]二、将pH调至6由于样品溶液较少使用ph计会造成损失，是否可使用pH试纸？[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]三、用乙醇-氨水-水混合液洗涤解吸聚酰胺粉时，如何判断色素是否完全解吸？[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]四、蒸发至近干时容器局部地区干燥无水现象会对结果造成影响吗？蒸发的温度使用水浴温度需控制多少℃？[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][color=#222222]五、甲醇-甲酸混合液、60℃pH4的水溶液洗涤3-5次每次使用量有具体要求吗？[/color][/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align]

[align=center][b]食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测[/b][/align][align=center][b]高效液相色谱法方法验证报告[/b][/align][align=center][b]SN/T 1743-2006[/b][/align][align=center][b]牛晓[/b][/align]一、方法概述适用范围：本标准适用食品中诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的液相色谱检测方法。原理：糖果、饮料中的人工合成着色剂用聚酰胺吸附法提取，过滤后，采用反相高效液相色谱技术进行分离测定，外标法定量。二、仪器与试剂1.仪器：1.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器。1.2天平：感量位0.001g和0.00001g。1.3涡旋混匀器。1.4 离心机：最大转速1000r/min。2. 试剂2.1聚酰胺粉：200目。2.2乙醇-氨溶液：取1mL氨水，加入100mL乙醇中70%。2.3甲醇-甲酸溶液：取60mL甲醇和40mL甲酸混匀。2.4 20%柠檬酸溶液，取200g柠檬酸溶液于1L水中 。2.5硫酸：10mL硫酸和100mL水混匀。2.6 10%钨酸钠水溶液：取10g钨酸钠溶解于100mL水中。2.7乙酸：色谱纯。2.8甲醇：色谱纯。2.9乙酸铵。2.10诱惑红标准品 来源：Dr.Ehrenstorfer GmbH 货号：C10125000三、样品的制备与保存3.1试样制备：从抽取得原始样品中取可食部分，均匀捣碎，液体样品混匀，将样品充分混匀，分出约500g，作为试样，装入清洁容器中，标明标记。3.2试样保存，将试样冷藏保存。3.3在抽样和制样过程中，必须防止样品收到污染。四、分析步骤4.1、标准曲线绘制4.1.1日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红标准品：纯度＞98%。4.1.2标准储备溶液：准确称取10.0mg诱惑红标品置于10mL容量瓶中，加pH为6的水到刻度，配成水溶液1000.0μg/mL。4.1.3标准工作液：准确移取储备液2.5μL、5.0μL、10.0μL、25.0μL、50.0μL、100.0μL、250.0μL于10mL容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，配成成浓度为0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL系列工作液。4.2样品的处理4.2.1提取：4.2.1.1果汁和汽水等样品：取50mL样品加热，驱除二氧化碳，然后用水稀释定容经0.45μm滤膜过滤后供液相色谱分析。4.2.1.2固体类样品：取已粉碎样品10g,加30mL乙醇-氨溶液溶解，置水浴上浓缩至20mL,用20%柠檬酸溶液调pH3.5-4.5，如需可加1mL10%钨酸钠溶液，使蛋白质沉淀，将上述溶液加热至70℃，加入聚酰胺粉1.0g,充分搅拌，用20%柠檬酸溶液调pH3.5-4.5,使色素完全被吸附，以3000r/min，离心3min,弃去离心后所得的上层清液，用甲醇和甲酸溶液洗去天然色素，再用水洗至溶液为中性，最后用乙醇-氨水溶液解析，至吸附剂为白色，收集解析液，加乙酸中和，定容至100mL，经0.45μm滤膜过滤后供液相色谱分析。4.3.仪器测定条件4.3.1色谱柱：XBP-C18柱，柱长150mm，内径4.6mm，粒径5.0μm。4.3.2流速：1.0mL/min。4.3.3柱温：30℃。4.3.4检测波长：254nm。4.3.5流动相A相：甲醇 B相：0.02mol/L乙酸铵溶液。[table][tr][td]时间/min[/td][td][align=center]A%(甲醇)[/align][/td][td][align=center]B%(0.02mol/L乙酸铵)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]95[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]80[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]18[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]25[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]25.01[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]95[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]40[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]95[/align][/td][/tr][/table]五、结果处理计算公式：[align=center][img=,279,75]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807281438514542_5819_2904018_3.png!w279x75.jpg[/img][/align]式中：X-样品中诱惑红的含量，单位为g/L；C-由标准曲线查得试样中诱惑红的浓度为μg/mL；V-试样溶的总体积，单位为mL；V1-样品移取体积，单位为mL；六、验证结果1.线性结果将标准系列工作溶液注入液相色谱仪中， 测定相应的峰面积，以混合标准系列工作溶液的质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。同时做空白实验。[u]Y=0.1084*X+06039R^2=0.9995[/u][align=center][img=,690,510]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807281436598072_7433_2904018_3.png!w690x510.jpg[/img][color=#ffc000] [/color][/align]以上结果表明诱惑红在1.0μg/mL～25.0μg/mL范围内，R[sup]^2[/sup]=0.9995，诱惑红浓度和峰面积呈线性关系，线性良好，符合要求。2.检出限结果将5.0μg/mL标准溶液逐级稀释至S/N=2.0，得出诱惑红的检出限为1.0mg/kg[color=#ff0000]，[/color]此检出限结果小于国标SN/T 1743-2006的定量检出限2.5mg/kg，故此方法满足条件。七、方法精密度（重复性）对LBF180700284样品分别进行6次加标重复性的测定，测定结果如下：[table][tr][td][align=center]测定编号[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]取样量（mL）[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]浓度（μg/mL）[/align][/td][td][align=center]6.1593[/align][/td][td][align=center]6.1804[/align][/td][td][align=center]6.1888[/align][/td][td][align=center]6.0971[/align][/td][td][align=center]6.1529[/align][/td][td][align=center]6.147[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]含量（g/L）[/align][/td][td][align=center]0.00616[/align][/td][td][align=center]0.00618[/align][/td][td][align=center]0.00619[/align][/td][td][align=center]0.00610[/align][/td][td][align=center]0.00615[/align][/td][td][align=center]0.00615[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]平均值（g/L）[/align][/td][td=6,1][align=center]0.00615[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]RSD%[/align][/td][td=6,1][align=center]0.53[/align][/td][/tr][/table]本方法的精密度为0.53%，符合SN/T 1743-2006中给出试样测试结果的精密度要求，因此，本次测定均符合要求。八、准确度验证（加标回收）对LBF180700284样品加标，取1000.0 μg/mL的标液0.25mL、0.30 mL、0.40mL同样品同步处理后，结果见下表：[table][tr][td=2,1][align=center]测定编号[/align][/td][td=6,1][align=center]诱惑红[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]序号[/align][/td][td][align=center]V1（ mL ）[/align][/td][td][align=center]V（mL）[/align][/td][td][align=center]C（μg/mL）[/align][/td][td][align=center]诱惑红含量（g/L）[/align][/td][td][align=center]平均值（ g/L ）[/align][/td][td][align=center]加标量（ g/L ）[/align][/td][td][align=center]回收率%[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1#[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][td=1,2][align=center]ND[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2#[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][td][align=center]/[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标1#[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]4.9280[/align][/td][td][align=center]0.00493[/align][/td][td][align=center]0.00493[/align][/td][td][align=center]0.00500[/align][/td][td][align=center]98.6[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标2#[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]5.9642[/align][/td][td][align=center]0.00596[/align][/td][td][align=center]0.00596[/align][/td][td][align=center]0.00600[/align][/td][td][align=center]99.3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]加标3#[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]50.0[/align][/td][td][align=center]8.2935[/align][/td][td][align=center]0.00829[/align][/td][td][align=center]0.00829[/align][/td][td][align=center]0.00800[/align][/td][td][align=center]103.6[/align][/td][/tr][/table]由上表可以看出脱氢乙酸在添加浓度0.00500g/L-0.00800g/L范围内，回收率在98.6%-103.6%之间相对标准偏差为2.69%，小于国标要求应小于10%，符合规定要求。九、总结从检出限、线性范围、重复性、回收率测试结果可知，均符合方法要求，本实验方法符合SN/T 1743-2006的要求。

[align=center]草根能力比对之果汁中柠檬黄、日落黄的检测能力验证经验分享[/align][align=left]一、前言 6月底报名参加了仪器信息网组织的第四十期草根能力比对：果汁中柠檬黄、日落黄的检测，7月3日收到组织方寄来的包裹，主要包含一瓶果汁样品和一包聚酰胺固相萃取柱（500mg/6mL×6支）（以下简称试用柱）。按照惯例，先检查样品的外包装、瓶口的密封性、核对实验室代码、样品编号等信息；测试之前认真阅读参试指导书和测试结果报告单，了解组织方对测试和结果报告的要求，例如测试方法、对数据结果的要求、检测结果上报日期等。[/align][align=center][img=,568,270]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301245_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 食品中合成着色剂的测定对我们而言是非常常规的项目，几乎每周都会有样品要求做此类检测，之前也多次参加过类似项目的能力验证，因此对于此次的能力验证还是胸有成竹的。 能力验证样品非常规食品，样品中待测物质的浓度可能超过或者低于常规样品的检测浓度，因此需要先对样品中待测物质的浓度做个粗略的测试，以确定后期前处理过程的取样量和标准溶液的浓度范围。此次能力验证的基质为果汁，依据以往的经验，果汁测定合成着色剂时的干扰组分较少，因此采取直接稀释、过滤膜的方式对样品进行粗略的测定。其目的有两个，一是计算待测组分的大概浓度范围；二是检查待测组分附近是否有干扰物。二、材料与方法 仪器条件：按照GB/T 5009.35-2003中的液相条件进行测试 色谱柱：CNW Athena C18-WP(250mm×4.6mm ,5μm) 流动相：甲醇：乙酸铵（0.02mol/L） 梯度洗脱：甲醇：20%~35%，3%/min；35%~98%，9%/min；98%继续保持2min 流速：1.0mL/min 柱温：30℃ 检测器：测试波长为254nm三、实验与讨论[/align][align=left] 实验一：样品稀释后直接进样 称取约5g果汁样品于25mL容量瓶中，用水稀释、混匀、定容，经0.45μm滤膜过滤后进样测定，测定结果见下图。[/align][align=center][img=,588,323]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301248_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 通过测试可以发现，果汁样品中待测组分柠檬黄的浓度较小，且附近有干扰物质存在，日落黄的浓度较高，不存在干扰峰，计算后得到果汁样品中柠檬黄的浓度大约为28mg/kg，日落黄的浓度大约为98mg/kg。 有些版友看了果汁样品稀释后进样的色谱图，可能觉得待测组分与干扰峰的分离度和峰形都还不错，应该可以直接定量了，如果真的这么做，很可能会出错，原因有两点：（1）果汁中不仅含有着色剂，通常还会含有甜味剂、防腐剂等添加剂，在此色谱条件下，这些物质也会出峰，如果仪器或者色谱柱等原因导致两者出峰完全重叠，则可能会出现定量不准确；（2）着色剂包含人工合成着色剂和天然着色剂两大类，GB 5009.35 测定的是人工合成着色剂，如果有天然着色剂也会产生干扰，从而引起定量的不准确，GB 5009.35中采用甲醇-甲酸混合溶液和水洗涤就是为了去除天然着色剂和一些水溶性的干扰物。实验二：参照GB 5009.35的方法进行样品前处理 称取约5g果汁样品于100mL烧杯中，加入少量水，加热到60℃，将1g聚酰胺粉倒入样品溶液中，搅拌，以G3垂融漏斗抽滤，然后用甲醇-甲酸（V:V=6:4）混合溶液洗涤，再用水洗至中性，抽干后用乙醇-氨水(V:V=7:3))混合溶液解析，直到色素完全解析，收集解析液，60℃砂浴中氮吹至近干，加水溶解并定容至25mL，经0.45μm微孔滤膜过滤后进样分析。[/align][align=center][img=,583,647]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301251_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 果汁样品经GB 5009.35方法处理后，4.3min的干扰峰明显变小，5.7min的干扰峰完全消失，5.0min和9.6min的色谱峰略有减小。[/align][align=left] 实验三：CNW Poly-sery PA SPE柱净化样品[/align][align=left] 尽管此次草根能力比对的组织者提供了聚酰胺固相萃取柱，但是数量有限，没敢轻易使用，而实验室备有从上海安谱实验科技股份有限公司（以下简称上海安谱）采购的CNW Poly-sery PA SPE固相萃取柱，数量充足，而且在平时测定人工合成着色剂时也有很好的表现，因此先用上海安谱的CNW Poly-sery PA SPE固相萃取柱对样品进行前处理。 称取约1g果汁样品于5mL试管中，用水将果汁样品转移至聚酰胺固相萃取柱中，并用水洗涤试管2~3次，洗涤液一并转移到固相萃取柱中，抽滤至近干，用甲醇-甲酸（V:V=6:4）混合溶液洗涤，再用水洗至中性，抽干后用乙醇-氨水(V:V=7:3)混合溶液解析，直到色素完全解析，收集解析液，60℃砂浴中氮吹至近干，加水溶解并定容至5mL，经0.45μm微孔滤膜过滤后进样分析。[/align][align=center][img=,580,702]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301255_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 测试结果见下图，仪器条件同实验一。[/align][align=center][img=,578,333]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301256_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]实验四：试用柱净化样品 样品净化过程和仪器条件同实验三，实验过程和实验结果见下图。[/align][align=center][img=,580,611]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301258_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]实验五：自制聚酰胺固相萃取柱净化样品 实验中用到的样品量很少，做完上述实验还剩许多样品，而且距离上报结果的时间还很宽裕，于是突发奇想，决定利用实验室采购的聚酰胺粉自制聚酰胺固相萃取柱，并对样品进行测定，一方面考察自制聚酰胺固相萃取柱的性能，另一方面与上述实验结果进行比对验证。 聚酰胺固相萃取柱的制作过程如下： 1、准备好原材料：锋利的剪刀、废弃的固相萃取柱、同规格的针筒、聚酰胺粉[/align][align=center][img=,586,286]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301300_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 2、用剪刀或美工刀等工具对固相萃取柱进行破拆，取出固相萃取柱中的筛板。筛板在使用前需要用甲醇、水、氨化乙醇等溶液进行清洗，防止有污染，同时防止之前使用过程中筛板有堵塞，影响后续的过柱。筛板烘干后装入合适的针筒中。 3、依据实验用量，称重装入适量的聚酰胺粉，夯实针筒中的聚酰胺粉，此次实验装入的聚酰胺粉质量为500mg。可以在聚酰胺粉上端再装入一个筛板，防止在使用和存放过程中填料发生松动。[/align][align=center][img=,578,293]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301301_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 到此，仅仅简单的几步就将聚酰胺固相萃取柱制作完成了，效果如何呢，用实验数据进行验证。样品净化过程和仪器条件同实验三，实验过程和实验结果见下图。[/align][align=center][img=,588,246]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301302_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 从上述实验可以看出：（1）三款聚酰胺固相萃取柱对待测人工合成着色剂均具有很好的吸附作用；（2）上样量选择1g时未发生柱容量饱和的现象；（3）乙醇-氨水(V:V=7:3)对待测人工合成着色剂具有很好的解析效果，解析液颜色为下深上浅，而且经过解析后聚酰胺固相萃取柱又恢复了原来的本色，解析非常完全；（4）采用聚酰胺固相萃取柱净化后5.7min的干扰峰完全消失，5.0min和9.6min处色谱峰的测定结果相近；（5）不同聚酰胺固相萃取柱对样品的净化效果略有差别，主要体现在4.3min干扰峰的净化效果方面，自制的聚酰胺固相萃取柱净化后4.3min处的干扰峰仍然很大，其峰高和峰面积与采用聚酰胺粉净化的结果相近，试用装聚酰胺固相萃取柱净化后4.3min处干扰峰明显减小，而用CNW Poly-sery PA SPE柱净化后4.3min处干扰峰完全消失，同时不影响5.0min和9.6min处待测组分的峰面积。实验六：标准曲线的绘制与含量计算 根据上述测定结果重新配制标准溶液，绘制标准曲线，进行含量计算。[/align][align=center][img=,588,535]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301303_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]实验七：回收率实验 取实验室中不含待测组分的果汁样品，称取一定质量的果汁样品5份，往样品中加入一定体积的柠檬黄、日落黄标准溶液，然后分别按照实验一、实验二、实验三、实验四和实验五的方法进行样品前处理，测定方法的回收率，测定结果如下表。[/align][align=center][img=,690,130]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301305_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 回收率测定结果表明，直接稀释进样和聚酰胺固相萃取柱净化样品后的回收率较高，聚酰胺粉吸附净化样品的回收率略低于其他两种方法。聚酰胺粉净化样品回收率低的原因有以下4种：（1）上样量或者聚酰胺粉的用量不合适，出现聚酰胺粉吸附过载或不完全吸附；（2）聚酰胺粉的质量要求不合适，未达到标准要求，从而出现不完全吸附；（3）解析过程中未完全解析；（4）其他操作过程中的损失，如样品转移、定容、酸洗、水洗等。 本次能力验证样品基质相对简单，而且实验一表明样品直接稀释后进样待测组分与干扰物质的分离度达到检测要求，实验三、实验四和实验五表明待测组分保留时间处没有其它成份的干扰，因此最终决定采用实验一的方法进行测定，并采用实验一的数据做为最终结果，避免做的多错的多，减少操作过程中的损失。 能力验证的实验到此结束，然而爱折腾的人会折腾个没完没了。测完柠檬黄、日落黄后想知道其他两个干扰峰是什么物质。凭借以往的经验，这两种物质为色素、甜味剂和防腐剂的可能性比较大，这三类物质是果汁中的常见添加剂。人工合成着色剂的可能性排除，原因为：（1）与5种人工合成着色剂的保留时间不一致；（2）酸洗、水洗后峰面积明显变小，GB 5009.35中除了赤藓红，其它人工合成着色剂不会出现这种情况。 排除了其他人工合成着色剂存在的可能，于是在上述仪器条件下测定甜味剂糖精钠和安赛蜜，防腐剂山梨酸和苯甲酸的单标及混合标准溶液，测定结果如下图。[/align][align=center][img=,588,854]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301307_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 通过上述测定，依据保留时间定性，4.4min的干扰物质可能为安赛蜜，5.7min的干扰物质可能是苯甲酸或糖精钠。实验室没有质谱，因此只能通过保留时间做个简单的判断。在此仪器条件下，糖精钠和苯甲酸的色谱峰发生了重叠，从而进一步表明，测定人工合成着色剂时需要通过酸洗和水洗来排除干扰，避免出现类似于糖精钠和苯甲酸重叠的现象。 8月初收到结果通知单，两种待测物质的结果评价均为满意，其中柠檬黄的测定值与指定值相同，进一步表明上述实验方法与结果的正确性。[/align][align=center][img=,407,419]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301309_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]四、小结 针对此次能力验证做个简单的小结，小结如下： （1）采用聚酰胺固相萃取柱净化样品测定人工合成着色剂时回收率高，试剂用量少，适用于样品的批量处理； （2）样品处理过程中吸附和解析的时候控制流速，可以先让其吸附/解析一会再抽滤，以保证吸附/解析完全； （3）不同聚酰胺固相萃取柱对样品的净化效果产生差别的原因，一方面可能与填料有关，因为实验二和实验五采用的是相同填料，4.3min处都存在较大的干扰峰，另一方面可能与水洗有关，标准中要求水洗至中性，因此水洗的次数会有差别，而安赛蜜是水溶性的，不同剂量的水对安赛蜜的去处能力也是不同的； （4）自制聚酰胺固相萃取柱的填料松散不一，填料上端不加筛板时，在样品前处理以及存放的过程中容易出现填料松动，以及填料随着试剂浮动的现象，可能会影响实验到实验数据的重复性； （5）破拆筛板的过程需要注意安全，如果想省事，可以直接购买筛板或者带筛板的空柱，然后自行装填填料； （6）GB/T 5009.35-2003方法已经失效，但是前处理方法与新标准相似，梯度方法略有差别，以往实验中采用旧标准的梯度洗脱条件对人工合成着色剂的分离状况可以满足实验要求，因此本次试验方法依然采用了GB/T 5009.35-2003的分析方法。[/align]

于近日收到月旭2.7um液相核壳色谱柱开始试用。1.两款色谱柱比较月旭2.7um 4.6*100mm Core-Shell BoltimateTM 另一款 5um 4.6*250mm C18http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667557_1643288_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900302158_01_1643288_3.jpg2. 柱效比较：以色素为指标进行比较分别是：柠檬黄、新红、日落黄、胭脂红、诱惑红、赤藓红、靛蓝、苋菜红、亮蓝、酸性红共10种。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900370945_01_1643288_3.png4.6*250mmC18http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900373953_01_1643288_3.png月旭柱流动相B 0.02mol/L 乙酸铵+5%甲醇 A 甲醇 梯度洗脱 普通柱 Time %A %B1 0.00 0.0 0.0 100.02 10.00 0.0 100.03 11.00 95.0 0.0 5.04 19.00 95.0 0.0 5.05 20.00 0.0 100.06 45.00 0.0 100.0月旭柱Time %B %C %D Flow Max.Press.1 0.00 0.0 0.0 100.02 5.50 0.0 0.0 100.03 6.00 10.0 0.0 90.04 10.00 10.0 0.0 90.05 19.00 70.0 0.0 30.06 19.10 90.0 0.0 10.07 29.00 90.0 0.0 10.08 29.50 0.0 0.0 100.09 35.00 0.0 0.0 100.0两相比较1).柱压的问题：月旭LP-C18 4.6*100mm 2.7μ 这款柱子在1mL/min、乙酸铵-甲醇流动相体系压力表现为170bar ，0.6 mL/min时是135bar，两者峰宽没有明显区别，因此采用0.6 mL/min。2）保留时间 从图中可以看出普通柱集中在21-36分钟，但由于峰较宽，所以分离度虽好，难以实现与杂质的有效分离月旭 在10-22分钟3）峰宽 月旭中 0.2分钟左右普通 0.6 分钟左右糕点样品图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900381728_01_1643288_3.png样品在色素峰出峰区域出现小峰，但由于标准品的峰宽较窄，所以不易引起误判，总结特点：节约仪器时间、节约流动相、改善了分离。月旭柱以普通柱的流动相进行洗脱时情况如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900383696_01_1643288_3.png进行调整后如下图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604290038_591882_1643288_3.png

今天偶然间查阅酱腌菜的色素使用情况，结果发现：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204011608_358795_1608710_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204011608_358796_1608710_3.jpg其中15项着色剂（胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、亮蓝）在生产中许可，可是GB 2760食品添加剂使用标准中唯独日落黄没有腌菜这类，意味着酱腌菜胭脂红、苋菜红、柠檬黄、亮蓝都可以加，为什么偏偏区别对待了日落黄，并且两个细则不一致呢？发生冲突，厂商认为加日落黄合格，检测机构判定不合格，这不是坑人嘛