植物通过调节控制细胞和生理性状的基因网络以应对寒冷,其中的转录因子是诱发相关响应的关键,挖掘耐寒相关转录因子有利于作物耐寒育种等研究。沈阳农业大学3月份发表的文章中,通过对花生品种进行耐寒性早期表型评估,利用比较转录组分析的方法,对两个耐寒能力不同的花生品种(NH5 and FH18)的87个转录因子家族共2328个转录因子进行分析,以发现表达差异显著的转录因子,为转录因子在花生应对寒冷中的复杂机制、研究耐寒花生的生物学功能等提供了依据与资源。
肽图分析是蛋白质鉴定,特别是重组蛋白鉴定的最常用的方法。它通过酶解(一般使用胰蛋白酶)将蛋白质打碎形成肽段,然后以可重现的方式进行肽段的分离和鉴定。肽图分析是一种非常有用的方法,已成为生物技术领域中最有价值的工具之一,它能检测和监控单个氨基酸改变、氧化、去酰胺化,以及其它降解形式。它还能直接检测常见的单克隆抗体修饰变异,如 N 端环化,C 端赖氨酸处理,N- 糖基化,以及内含子表达等非预期的变异。肽图是蛋白质及其酶解产物的指纹图谱,它能提供待测蛋白质的全面信息。肽图分析包含四个主要步骤,蛋白质的分离和纯化;肽键的选择性酶切;多肽的色谱分离;多肽的分析和鉴定。对测试样品与参考标准品或对照样品进行同步的酶解和分析。肽图应该包括足够数量的肽段以进行有效的分析;它不仅要提供蛋白质鉴定所需的必要信息,还应尽可能地涵盖完整的蛋白质序列。
本实验以罗红霉素对照品为分析对象,按照罗红霉素标准提高征求意见稿有关物质项下方法进行了分析。实验中分别尝试了资生堂CAPCELL PAK C18 MGII和C18 SPOLAR两款色谱柱对系统适用性溶液进行分析,如上图1、图2所示,两款色谱柱均可使罗红霉素保留时间在22分钟左右,A峰与B峰分离度、B峰与C峰分离度均大于1,谱图与标准图谱基本一致,满足标准要求。