隐形孔雀石绿

测定水产补品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿时，只出一个峰，帮帮忙出点主意

由于孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿均为脂溶性化合物,在鱼体内和环境中残留时间长,并有致突变、致畸和致癌的危险性,因此其是否可作为水产养殖业中使用的兽药在国际上引起了争论。加拿大于1992 年就禁止其作为鱼场杀菌剂使用,且加拿大和美国均规定在食用鱼等水产品中禁止检出孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿。欧盟于2002 年6 月颁布法令禁止其在作为食品鱼的鱼场中使用, 我国也于2002 年5 月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。但是,事实上,包括我国和英国在内的许多禁用孔雀石绿的国家,从对市场上销售的鱼类等水产品中孔雀石绿的监测情况来看,仍有在鱼场中非法使用孔雀石绿的现象。 基于这些在水产养殖业中非法使用孔雀石绿的现象,各国政府和消费者密切关注，由此引发各国加大力度进行孔雀石绿的监督检查,同时形成一些标准的检测体系。(一)我国的检测标准【 标准编号 】GB/T 19857—2005 【 标准名称 】水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定【 英文名称 】 Determination of malachite green and crystal violet residues in aquatic product【 起草单位 】上海出入境检验检疫局；厦门出入境检验检疫局；广东出入境检验检疫局；福建出入境检验检疫局；江苏出入境检验检疫局；北京出入境检验检疫局；宁波出入境检验检疫局。【 发布日期 】 2005-09-05【 实施日期 】 2005-09-05 【 标准编号 】 SC/T 3021-2004【 标准名称 】 水产品中孔雀石绿残留量的测定.液相色谱法【 英文名称 】 Determination of malachite green residues in fishery products High-performance of liquid chromatography【 起草单位 】 中国海洋大学 国家水产品质量监督检验中心【 发布日期 】 2004-01-17【 实施日期 】 2004-03-01 【 标准编号 】SN/T 1479-2004【 标准名称 】进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法【 发布日期 】2004-11-17【 实施日期 】2005-04-01【 发布单位 】国家质量监督检验检疫总局（二）美国的检测标准1.美国FDA规定的孔雀石绿及其代谢产物实验室检测标准 【 标准编号 】 LIB4363【 标准名称 】鱼和虾中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的LC-VIS法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]n法【 英文名称 】 Quantitative and Confirmatory Analyses of Malachite Green and Leucomalachite Green Residues in Fish and Shrimp【 起草单位 】U.S. Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center, Denver, CO【 发布日期 】 2005-11 【 标准编号 】LIB4333【 标准名称 】测定和确认鲑鱼中隐性孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]方法【 英文名称 】Determination and Confirmation of Leucomalachite Green in Salmon: Laboratory Information Bulletin 4333【 起草单位 】Animal Drugs Research Center, Food and Drug Administration, Denver, CO【 发布日期 】2004-11 【 标准编号 】LIB4334【 标准名称 】快速液相色谱法测定鲑鱼中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的方法【 英文名称 】Determination of Malachite Green and Leucomalachite Green in Salmon with In-Situ Oxidation and Liquid Chromatography with Visible Detection【 起草单位 】Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center Denver Federal Center, P.O. Box 25087 Denver, CO 80225-0087【 发布日期 】2004-11 【 标准名称 】美国FDA关于孔雀石绿检测方法4333和4334的补充【 英文名称 】Amendment: Application of Laboratory Information Bulletins 4333 and 4334 for the Determination of Leucomalachite Green and Malachite Green Residues in Catfish, Basa, Tilapia, Trout, and Shrimp 【 发布日期 】 2005-10 2. 美国AOAC协会期刊规定的液相色谱检测方法（J.AOAC Int.1995,78(6):1388-1393 ） 该方法常被等同采用。（三）日本修订孔雀石绿限量标准2006年5月30日，日本厚生劳动省发布食安发第0530002号通知，根据食品卫生法（1947年第233号法律）第11条第1项的规定，规定动物用医药品孔雀石绿是一种食品中不得含有的成分，并制定了孔雀石绿的试验方法，且试验方法的分析对象为孔雀石绿及隐性孔雀石绿。 该修订公布六个月后生效，即2006年11月30日起生效。 此次修订重新制定了孔雀石绿的试验方法，同时向《修订后食品卫生法第11条第3项的相关法令的调整》（2005年11月29日食安发第1129001号当职通知）的附表3中追加如下内容，自2006年11月30日起生效。 农药名称 检出界限（ppm） 孔雀石绿* 0.002 *孔雀石绿的分析对象包括：孔雀石绿及无色孔雀石绿（孔雀石绿的代谢物） 此次修订生效前，暂且施行厚生劳动省制订的一项标准，限量0.01ppm（2005年厚省劳动省告知第497号）。

流动相：乙酸铵：乙腈（0.1%甲酸）配标溶液：乙腈图1:8月15日配制跑的图的定量图图2:流动相图3:10月31日隐性孔雀石绿100ug/ml定性图（重新称量配制，之前冰箱停电7天，储备液不能用）图4:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图图5:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图，但是却检出孔雀石绿隐性孔雀石绿开封后用封口膜封上，常温干燥器中保存也容易氧化降解吗？[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313178837_3987_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313306243_2274_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314034736_9324_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314105064_2880_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314377934_6486_5595741_3.png[/img]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152821]饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法[/url]摘要建立了超高效液相色谱一串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取，提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化，使用u．PLC—MS／M进行检测。色谱条件：ACQUITY uPLC M BEH C】8柱(2．1 innl×100 rain i．d．，1．7 )，流动相乙腈0．1％甲酸溶液，梯度洗脱流速O．3 mL／min。采用电喷雾串联四极杆质谱检测。结果表明，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng／mL时线形良好，在1～100 g／kg的添加水平条件下平均回收率为68．5％ ～91．6％ ，该方法的检测限为1．0／zg,／kg。

国标[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法做水产品中孔雀石绿和结晶紫，发现隐性孔雀石绿和结晶紫的回收率越来越低，有时候甚至做不出回收，显性孔雀石绿回收又正常，还有隐性结晶紫两个离子对保留时间差别有点大，请问有朋友遇到这种情况吗，求解答

请教在隐性孔雀石绿&结晶紫的检测过程中,氧化剂可能是哪种成分.

准备申请这一项 但在方法确认实验过程中发现比如各自加标0.5 孔雀石绿回收0.4 隐性孔雀石绿回收0.6 这样看各自回收率都挺一般的但要是按照之和计还挺好的 虽然标准中要求结果报之和 但这样应该不可以吧？这二者实验中会发生转化吗？

最近最孔雀石绿实验，是用乙腈提取，过酸式氧化铝柱，液质分析，分别加孔雀石绿、隐性孔雀石绿各20ppb，最终结果孔雀石绿6ppb，隐性孔雀石绿26ppb，这个结果怎么解释？是孔雀石绿转化了吗。在第二天又单独加一个孔雀石绿回收，孔雀石绿4ppb，隐性孔雀石绿几乎没有，这个又怎么解释呢。

本人新人一枚，正在做孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]方法。结果发现无论是氘代孔雀石绿还是孔雀石绿都有很严重的拖尾现象（10 ng/ml），但隐形孔雀石绿没有。尝试过调整乙酸铵的比例，进样量，标准品浓度，结果都没有解决。请各位大神给点意见。前一个峰为孔雀石绿，后一个为隐形孔雀石绿。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801241936445882_6318_3255643_3.jpeg[/img]

最近测孔雀石绿改用国标，多次试验的结果却是发现隐性的相当不稳定，不知各路英雄有没有遇到这种情况，盼回复，先谢了。p.s今天太阳终于探出了头，希望给大家带来好的心情

最近发现的，跑氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标时（里面不含孔雀石绿和隐色孔雀石绿）竟然出现了孔雀石绿和隐色孔雀石绿本底，响应值还不低，这是怎么回事？？[font=&]配置了一个乙腈+水+2种内标混标，内标能打出来的同时，也能打出不低响应值的孔雀石绿和隐色孔雀石绿，但是乙腈+水进样，就没有任何本底了。[/font][font=&]之前怀疑是标的问题，可是换了另一家的还是一样啊。[/font][font=&]只要加了氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标，就能出孔雀石绿、隐色孔雀石绿的峰。求救！[/font]

求助各位大虾，孔雀石绿出峰后，为什么在隐性孔雀石绿的rt上又出了一次峰？调整流动相也消除不了，哪位能给解答一下呢？到底是什么原因？

按标准GB/T 20361-2006 用液相做，标准里面标物是用显性孔雀石绿，经硼氢化钾还原为隐性孔雀石绿，有几个问题：1、用来配标的硼氢化钾的量按标准加吗，如何确保孔雀石绿完全还原为隐性，看颜色吗？2、用显性孔雀石绿配的标线，跟隐性孔雀石绿配的标线，最后的定量结果差了将近一倍，为何隐性结果较大？哪位大神有类似经历吗，俺实在看不懂了。[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

求助！！问题1：检测孔雀石绿时加入盐酸羟胺溶液是为了防止隐形孔雀石绿氧化成孔雀石绿吗？问题2：加入对甲苯磺酸这个离子对试剂是什么作用？问题3：检测时水溶液的PH要控制在什么范围？是不是碱性条件下孔雀石绿就生成了醇碱了，影响结果？求大神解答！！！

[color=#444444]有哪位孔雀石绿和隐性孔雀石绿[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]法做，回收率做的比较好的，可不可以指导下前处理是怎么做的？[/color]

有这样一个问题请教各位老师。孔雀石绿（包括显性及阴性孔雀石绿和结晶紫）在水产品中的残留，除了养殖和运输过程中用药导致有残留，还有没有可能在加工生产过程中有污染？如果有，一般是什么途径？大家是否遇到过此类问题？查一些资料，说是，记号笔等都有可能污染，不知道大家的情况怎样？

一般做水产品检测兽药残留时，会用到一些标准品如孔雀石绿、沙星类等，如果过了有效期，还没用完，怎么处理呢？基本上按照CNAS认证规定还是只有销毁一条路了。标准品过期这个问题，很有必要讨论一下，因为一些标准品过期了，但有可能还有效，可以用来做其他有意义的研究，比如，可以用来做内部质量控制，就是在不通知人员样品含量的情况下，给他们送盲样，让他们来做人员间对比性试验，再根据相关检测标准判定对比性试验的结果，对内部质量控制起到帮助作用。但是，标准品的有效期规定也有一定的参照性，比如说，过了两年或5年，一些标准品的性质会发生变化，对定量分析会有影响等情况都有可能发生。举例，你的孔雀石绿和结晶紫标准品用了２年了，再重新配标准溶液时，也许显性还可以，但保留时间可能会提前，隐性的也有可能会差太多，比如，２ppb基本做不出来了，而且隐性孔雀石绿和隐性结晶紫都分不开了。。。。。来源：实验与分析

各位大虾，本人用国标方法检测孔雀石绿 结晶紫 隐性孔雀石绿 隐性结晶紫四种物质。流动相比率为：乙腈：5mM乙酸铵=75：:25 来检标准品样，孔雀石绿和结晶紫出现很长的拖尾现象。求好的解决方法

隐性孔雀石绿的回收很低,什么原因,请各位指导

Hp[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/ms中孔雀石绿与隐色孔雀石绿检测问题　　去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品(外标)，本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个(4度下)晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高?谢谢了!

[color=#f10b00]去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品（外标），本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个（4度下）晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高？谢谢了！[/color]

想请教一下大家，我最近在做孔雀石绿，按照国标中的鲜活水产品操作过程，内标定量。结果实验：孔雀石绿的回收率才56%，隐性孔雀石绿达到84.5%。通过结果数据，个人认为可能是：操作过程中，孔雀石绿损失率大于其内标的损失率，从而造成回收率低大家能帮着分析一下原因吗？？我看了许多贴子，分析认为：1、有说要按照加工水产品的方法来做2、实验操作过程需要避光吗？3、过中性氧化铝柱，流速需要控制吗？4、有认为可以用酸化乙腈提取？

我在做孔雀石绿优化，显性孔雀石绿和结晶紫出峰在0.6~0.7左右，隐性在2.5~3.0左右 这个现象是正常的吗？我连续走几针出峰没有改变，这个方法可以用吗？出峰时间是不是太早了？请各位老师帮帮忙！！！

前两天在做孔雀石绿的方法时，加了0.2ml2ppm孔雀石绿+4ppm隐性孔雀石绿的标准溶液，采用了两种方法，但是采用农业部标准的方法时只检测到了孔雀石绿，而用商检的方法却只检测到了隐性孔雀石绿，流动相是80+20。请教各位可能原因。（另外想说的是，两种方法是同时开始的，上机也是同时的）

最近做孔雀石绿等项目，发现孔雀石绿、隐色孔雀石绿都不存在空白干扰问题，但这两者的内标，空白干扰太高了。用全新的乙腈，直接装入进样小瓶，也会出很高的峰。考虑过仪器污染的问题，但孔雀石绿和隐色孔雀石绿反而没有干扰，所以目前还找不到原因。有版友遇到过吗？

刚接触[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]，在做孔雀石绿的项目，在空白试验都有孔雀石绿和结晶紫，隐性的没有。方法是按照国标的，拿乙腈提取。只是拿离心管加乙腈离心2次，每次10min，都有问题，不知道做过这个项目的大虾们，你们用的离心管是塑料的还是玻璃的。是不是乙腈会溶解塑料的啊？

今天做孔雀石绿 有些关于质谱的问题 想请教一下流动相是 乙腈：5mM乙酸铵 混标包括：孔雀石绿 银色孔雀石绿 结晶紫 隐色孔雀石绿-d55ppb是出峰正常，基线很平但做到0.5ppb或者更低时出现问题：1. 结晶紫 372-356 出峰后基线一路往上漂 飘得很高（杂峰很多）2.隐色孔雀石绿 331-316 基线及噪音很高 把峰给抬高很多求解答 谢谢

水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15011]SC/T 3021—2004[/url]说明一下：柱后氧化柱好象安谱有得卖，没有柱后氧化柱可以做孔雀石绿，但是不能做隐色孔雀石绿。