葛根素对照品

[b]问题：[b][b][b][/b][/b]葛根素的检测，对照品的理论塔板数是？[/b]答案：=======================================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：HPLC基质：标准溶液应用编号：103695化合物：葛根素色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-219.html]Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理：对照品：精密称取葛根素对照品适量，用30%的乙醇溶解稀释至30μg/mL。色谱条件：色谱柱： Diamonsil C18（2） 250*4.6 mm，5 μm(Cat#：99603)流动相： 甲醇：0.1%磷酸=25.4：74.6流速： 0.9 mL/min柱温： 30 ℃检测器： 250 nm进样量： 10.0 uL文章出处：天津应用实验室关键字：葛根素、Diamonsil C18（2）、HPLC摘要：Diamonsil C18（2）检测葛根素。图谱：[img=`22.PNG]http://www.dikma.com.cn/u/image/2015/10/14/1444801757132111.png[/img]

[align=center]HPLC[font=宋体]法测定感冒清热颗粒中葛根素含量[/font][/align][b]1.[font=宋体]样品简介[/font][/b][font=宋体]感冒清热颗粒主要功效为疏风散寒，解表清热；用于风寒感冒，头痛发热，恶寒身痛，鼻流清涕，咳嗽咽干。[color=#333333]本文主要简介使用[/color][/font]HPLC[font=宋体]法测定感冒清热颗粒中葛根素含量。[/font][b]2.[font=宋体]仪器设备与试剂[/font]2.1[font=宋体]仪器设备[/font][/b][font=宋体]岛津[/font]LC-2010CHT[font=宋体]高效[color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/font][font=宋体]赛多利斯[/font]CPA225D[font=宋体]分析天平[/font][font=宋体]色谱柱：迪马[/font]Diamonsil PlusC18[font=宋体]（[/font]4.6mm×250mm×5μm[font=宋体]）[/font][b]2.2[font=宋体]对照品和试剂[/font]2.2.1[font=宋体]对照品[/font][/b][font=宋体]葛根素（中国食品药品检定研究院；[/font]110752-202217[font=宋体]；[/font]96.8[font=宋体]％）[/font][b]2.2.2[font=宋体]试剂[/font][/b][font=宋体]乙腈（色谱纯，赛默飞）；乙醇（色谱纯，阿拉丁）[/font][b]3[font=宋体]色谱条件、样品制备及检测方法[/font]3.1[font=宋体]色谱条件[/font][/b][font=宋体]以乙腈[/font]-[font=宋体]水（[/font]11[font=宋体]∶[/font]89[font=宋体]）为流动相；流速为[/font]1.0ml/min[font=宋体]；柱温为[/font]30℃[font=宋体]；检测波长为[/font]250nm[font=宋体]。理论板数按葛根素峰计算应不低于[/font]4500[font=宋体]。[/font][b]3.2[font=宋体]溶液制备[/font][/b][font=宋体]对照品溶液的制备：取葛根素对照品适量，精密称定，加[/font]30%[font=宋体]乙醇制成每[/font]1ml[font=宋体]含[/font]16μg[font=宋体]溶液，即得。[/font][font=宋体]供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约[/font]0.8g[font=宋体]〔规格（[/font]1[font=宋体]）〕，或取约[/font]0.4g[font=宋体]〔规格（[/font]2[font=宋体]）〕，或取约[/font]0.27g[font=宋体]〔规格（[/font]3[font=宋体]）〕，或取约[/font]0.2g[font=宋体]〔规格（[/font]4[font=宋体]）〕，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入[/font]30%[font=宋体]乙醇[/font]50ml[font=宋体]，密塞，称定重量，超声处理（功率[/font]250W[font=宋体]，频率[/font]33kHz[font=宋体]）[/font]20[font=宋体]分钟，放冷，再称定重量，用[/font]30%[font=宋体]乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。[/font][b]3.3[font=宋体]检测方法[/font][/b][font=宋体]分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各[/font]10μl[font=宋体]，注入[color=#3333ff]高效液相色谱仪[/color][/font]，测定，即得。[b]3.4[font=宋体]图谱数据[/font]3.4.1[font=宋体]对照品图谱[/font][/b][font='Calibri',sans-serif][img=,605,636]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308172034060831_8615_3170710_3.jpg!w690x515.jpg[/img][/font][b]3.4.2[font=宋体]供试品图谱[/font][/b][img=,605,662]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308172036389900_7367_3170710_3.jpg!w690x577.jpg[/img][b]4.[font=宋体]结果与讨论[/font][/b][font=宋体]由对照品图谱知，葛根素峰保留时间为[/font]13.126[font=宋体]，理论塔板数[/font]9252[font=宋体]（大于[/font]4500[font=宋体]），符合要求。[/font][font=宋体]因此，迪马[/font]Diamonsil Plus C18[font=宋体]（[/font]4.6mm×250mm×5μm[font=宋体]）色谱柱能满足感冒清热颗粒中葛根素含量分析要求。[/font]

以湘西野葛根为原料，经高速剪切破坏其组织细胞，偶联微波辅助提取其葛根素。实验探讨剪切时间、剪切速度、微波平均辐射功率、辐射时间对葛根素提取率的影响。并采用响应面法试验设计，确定其最佳提取工艺。实验结果表明最佳工艺参数为剪切时间6min，剪切速度6000r/min，微波辐射时间20s，微波功率467.27W，获取葛根素含量2.05mg/g。

大家好，不知有哪位好心人能给我提供葛根素的红外标准图谱，万分感谢

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=103235]HPLC法测定流感茶中葛根素的含量.[/url]

高效色谱法使酚红和葛根素两峰分离选用的流动相是什么?

[font=SimSun, STSong, &]求助，现有一款普通食品，葛根粉作为概念性添加，可使用固体饮料标准引进吗，那这样是不是不用对成分进行要求了？药食同源的葛根有对葛根素做规范性要求吗？[/font]

摘 要： 目的 利用近红外光谱简历注射用葛根素的含量定量分模型。方法 收集46个注射用葛根素样品的原始光谱，采用SG15点平滑作为光谱预处理方法，利用iPLS、方差分析法，手动选择法等变量选择方法选择近红外光谱的特征波段建立模型。采用Rc、RMSECV、RMSEP对模型进行评价。结果 基于iPLS法选择的变量，得到的建模结果较好，Rc=0.999、RMSECV=0.3234、RMSEP=0.3407模型的预测准确性较高。结论 近红外光谱分析技术可以有效的对葛根素进行含量测定，证实了该方法的有效性和可行性。关键词：近红外光谱；葛根素；定量分析在冷冻真空干燥流程中，当药品处于灌装前的料液状态时，此时的料液不稳定，大部分的中间体检验方法采用高效液相色谱法，由于此方法相对繁琐，使生产车间的等待时间过长，造成车间等待浪费，同时对产品质量造成一定的影响。为缩短检验时间，节约等待成本，提高产品质量，我们对现有分析方法进行筛选，最后将目光锁定在近红外光谱技术上面。以常规高效液相色谱法测定现有注射用葛根素冻干粉针中间体含量，然后测定相应含量下的近红外光谱参数，建立光谱参数与样品含量间的关系即标准曲线。然后经过不断重复性试验，建立成熟模型，进而用近红外光谱法替代高效液相色谱法，从而缩短料液的检测时间，节约生产成本。 1.材料与方法1.1试剂与试剂注射用葛根素（规格0.2 g，批号13100411，山东瑞阳制药有限公司),蒸馏水1.2 仪器与设备Thermo Fisher公司生产的AntarisⅡ傅里叶变换近红外光谱仪，光源为钨卤灯，检测器铟稼砷（InGaAs），玻璃样品管（内径4 mm），配套使用的Result光谱采集软件，TQ Analyst化学计量学软件；Matlab 2009化学计量学软件；电子天平（Sartorius BT224S，德国）；移液枪。1.3实验方法1.3.1 样品制备 精密称取注射用葛根素样品（含量49.06%）6.1150 g，至50 ml量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，得浓度为60 mg/ml的样品溶液，然后采用稀释法配制浓度为15mg/ml-60 mg/ml的其它样品溶液共46个。样品配制完毕后应混匀，以备光谱的采集。1.3.2近红外光谱的采集采用Antaris Ⅱ傅里叶变换近红外光谱仪收集原始光谱，扫描范围为10000-4000 cm-1，分辨率为8 cm-1，扫描次数32次。1.3.3光谱预处理方法选择采用SG15点平滑、一阶导数SG15点平滑、二阶导数SG15点平滑对原光谱进行处理，之后在全光谱（10000-4000 cm-1）范围内建立PLS 数学模型，用验证集样品对所建模型进行验证，以R2 、RMSECV 和PCs 参数作评判依据，从中选择最优的光谱预处理方法。1.3.4 光谱波段区间的优化分别采用iPLS、方差分析法、手动选择波段法筛选不同波段，采用最佳预处理方法建立PLS数学模型，并对模型进行验证，与全波段建模进行比较，选择光谱最优区间。2.结果与分析2.1 注射用葛根素的原始光谱图data:image/png;base64,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

[size=15px][font=&][font=宋体]对乙酰氨基酚（[/font][font=&]APAP[/font][font=宋体]）过量是药物性肝损伤的主要原因。[/font][font=&]Sirtuins 5[/font][font=宋体]（[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]）与各种肝脏疾病的发展有关。然而，其在[/font][font=&] APAP [/font][font=宋体]诱发的急性肝损伤（[/font][font=&]AILI[/font][font=宋体]）中的作用仍不清楚。[/font]SIRT5[/font][font=宋体]在[/font][font=&]AILI[/font][font=宋体]中显著下调，并且[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]耗竭加剧了体内和体外的线粒体氧化应激。从机制上讲，[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]在对乙醛脱氢酶[/font][font=&]2[/font][font=宋体]（[/font][font=&]ALDH2[/font][font=宋体]）的[/font][font=&]K385[/font][font=宋体]位点进行去琥珀酰化，从而保持[/font][font=&]ALDH2[/font][font=宋体]的酶活性，进而抑制炎症和线粒体氧化应激。此外，[/font][/size][font=宋体][size=15px]研究发现葛根素（[/size][/font][font=&][size=15px]puerarin[/size][/font][font=宋体][size=15px]）可促[/size][/font][size=15px][font=宋体]进[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]去琥珀酰化酶活性并缓解[/font][font=&]AILI[/font][font=宋体]。 [size=15px][b]1、AILI 中肝细胞SIRT5表达显著下调[/b][/size] [size=15px]作者首先通过RNA测序发现APAP[/size][font=宋体]处理[/font][size=15px]后，肝脏组织中 SIRT5 表达显著下调。进一步验证SIRT5参与AILI，发现APAP处理的小鼠血清ALT和AST水平均不同程度升高，且q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]、Western blott和免疫组化检测显示APAP处理后肝脏中SIRT5下调，表明SIRT5是AILI发展的关键介质 [/size][/font][/size][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]SIRT5 [/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]改善[/color][/font][font=&][color=#0070c0]APAP[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]诱导的肝毒性[/color][/font][/b][size=15px][font=宋体][size=15px] [/size] [size=15px]作者构建了SIRT5-KO小鼠和AAV介导的肝脏特异性SIRT5过表达小鼠，以进一步研究SIRT5在AILI中的作用。结果显示APAP处理后WT小鼠血清ALT和AST水平显著升高，且SIRT5-KO小鼠的血清ALT和AST水平升高更为明显，肝脏坏死显著加重，肝细胞死亡率更高，而SIRT5过表达显著改善APAP引起的肝脏损伤，肝细胞死亡率显著降低，结果表明 SIRT5 可减轻 APAP 诱导的肝毒性 [/size] [size=15px][b]3、SIRT5抑制APAP诱导的肝脏炎症[/b][/size] [size=15px]多项研究表明APAP 引起的肝毒性与炎症密切相关。作者发现接受APAP处理的SIRT5-KO小鼠CD11b和Ly6g阳性炎症细胞数量显著增加，肝脏中炎症细胞因子的水平显著升高，且NF-κB 信号的激活增加，而肝脏特异性SIRT5过表达小鼠则相反，这些结果表明SIRT5可抑制APAP诱导的AILI肝脏炎症 [/size] [size=15px][b]4、SIRT5 抑制AILI 中APAP诱导的线粒体氧化应激[/b][/size] [size=15px]在AILI过程中，细胞色素P450酶产生过量的毒性反应代谢物NAPQI，消耗GSH并与线粒体蛋白共价结合形成APAP加合物，导致线粒体功能障碍、ROS产生和线粒体细胞死亡因子的释放，最终导致肝细胞死亡。作者研究了SIRT5 KO或过表达对APAP诱导的线粒体氧化应激的影响，体内和体外实验结果表明SIRT5抑制了AILI期间的线粒体氧化应激 [/size] [size=15px][b]5、SIRT5缺乏导致AILI中蛋白质琥珀酰化全面增加[/b][/size] [size=15px]鉴于SIRT5在去琥珀酰化中的作用明确，作者采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析了APAP处理的WT和SIRT5-KO小鼠肝脏中的琥珀酰化。结果显示共有465种蛋白质中的953个位点表现出差异琥珀酰化，其中359种蛋白质中的802个位点显示琥珀酰化水平增加，而106种蛋白质中的151个位点显示琥珀酰化水平降低，结果表明SIRT5缺陷导致AILI中蛋白质琥珀酰化整体增加，这在体内和体外得到了进一步的验证 [/size] [size=15px][b]6、SIRT5在K385残基处使ALDH2去琥珀酰化[/b][/size] [size=15px]SIRT5缺乏导致参与线粒体氧化应激的关键酶ALDH2的琥珀酰化显著上调。进一步探索SIRT5调控ALDH2琥珀酰化的具体分子机制，免疫荧光发现SIRT5与ALDH2共定位，免疫共沉淀实验表明SIRT5与ALDH2互作，且SIRT5敲除显著上调了体内和体外ALDH2的琥珀酰化水平，但对ALDH2的总蛋白浓度没有影响，相反SIRT5过表达显著降低ALDH2的琥珀酰化水平。进一步检测发现SIRT5缺乏会抑制ALDH2的酶活性，而SIRT5过表达会增加ALDH2的活性。[/size] [size=15px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS显示ALDH2中三个位点（K370、K377、K385）琥珀酰化显著增加，其中K370和K385在不同物种中高度保守，作者通过将赖氨酸（K）突变为谷氨酸（E）模拟琥珀酰化，将K突变为精氨酸（R）模拟去琥珀酰化，发现K385是ALDH2上的关键琥珀酰化位点，且K385而非K370的琥珀酰化影响ALDH2的酶活性。此外，SIRT5主要通过对ALDH2在K385残基上的去琥珀酰化来减轻AILI [/size] [size=15px][b]7、ALDH2在K385残基处的去琥珀酰化可保护小鼠免受 AILI的侵害[/b][/size] [size=15px]为了研究ALDH2-K385去琥珀酰化在AILI中的作用，作者建立了AAV-GFP、AAV-ALDH2-WT和AAV-ALDH2-385K-E过表达转染小鼠，并对其进行APAP处理。结果显示APAP 给药增加ALDH2的琥珀酰化，而ALDH2-385K-E小鼠肝脏中ALDH2的琥珀酰化程度低于ALDH2-WT小鼠。此外，在APAP给药后，ALDH2-385K-E小鼠的转氨酶水平、肝坏死面积和肝细胞死亡增加，线粒体氧化应激和炎症加重。数据表明ALDH2在K385的去琥珀酰化可保护小鼠免受AILI的侵害 [/size] [size=15px][b]8、[/b][/size][size=15px][b]K385 [/b][/size][size=15px][b]位点ALDH2去琥珀酰化介导SIRT5对AILI的保护作用[/b][/size] [size=15px]为了研究SIRT5对ALDH2去琥珀酰化在体内AILI中的作用，作者通过尾静脉注射表达 AAV-GFP、AAV-ALDH2-WT或AAV-ALDH2-385K-E的相关AAV，在SIRT5-KO小鼠中过表达各种形式的ALDH2，这些小鼠随后接受APAP治疗。结果显示SIRT5缺乏显著升高血清转氨酶水平，在APAP处理后引起坏死和肝细胞死亡，而 ALDH2-WT的过表达显著改善了肝损伤。此外，ALDH2-WT小鼠的肝脏氧化和炎症明显减少，但ALDH2-385KE小鼠的肝脏氧化和炎症没有减少，数据表明ALDH2在K385处的去琥珀酰化介导了SIRT5对AILI的保护作用 [/size][size=15px][b]9、葛根素促进SIRT5减轻AILI[/b][/size] [size=15px]为探究SIRT5激动剂对AILI的治疗作用，作者通过虚拟筛选寻找能与SIRT5结合的天然化合物。根据对接结果筛选出10个亲和能最低的化合物，进一步考察其对SIRT5去琥珀酰化酶活性的影响，其中葛根素对SIRT5去琥珀酰化酶活性的提高最为显著。分子对接分析显示SIRT5能与葛根素结合，分子动力学模拟在原子水平上证实了SIRT5-葛根素复合物的结合稳定性和动力学。接着在体内验证了葛根素对APAP诱导的肝损伤的影响，发现葛根素组在APAP刺激后血清AST和ALT水平降低，肝脏坏死和肝细胞死亡减少，APAP 诱导的氧化应激和炎症明显被抑制。结果表明葛根素通过药理学激活SIRT5减轻AILI，提示葛根素是临床治疗AILI的一种有前途的药物[/size][/font][/size]

中药汤剂是中医临床用药的重要形式，由于中药成分复杂多样，化学成分存在游离态、结合态、络合态等多种化学结构形态，因此，汤液常包含了真溶液、胶体溶液、混悬液等多种相态分散体系。现代对中药汤剂质量的研究大多集中于汤液中化学成分的种类和含量，但中药成分在煎煮过程中极易发生相互作用，成分间产生范德华力、氢键、静电作用、π-π堆积等物理相互作用，或美拉德反应、氧化反应、水解反应等化学反应[1]，从而形成成分聚集体，影响汤液中中药成分的形态和含量。近年来，研究者发现中药汤剂中普遍存在纳米级颗粒[2]，尤其是中药成分在煎煮过程经非共价键作用力自组装形成的颗粒、凝胶、纤维等聚集体，常表现出抗炎、镇痛、抗菌等生物活性[3]。如完茂林等[4]研究发现，22种中草药水煎液中均存在大量纳米级颗粒；Zhang等[5]研究发现黄连解毒汤（Huanglian Jiedu Decoction，HJD）中产生的聚集物主要由黄芩苷和小檗碱相互作用形成；Li等[6]证实了小檗碱可分别与黄芩苷、汉黄芩苷通过静电作用和疏水作用共同驱动自组装成纳米粒；Tian等[7]发现通过大黄酸氢键分层、小檗碱π-π堆积与静电相互作用，形成小檗碱在内、大黄酸在外的核-壳纳米结构。除此之外，有研究者证实HJD水煎中化学成分结合而产生的聚集物具有确切的抗神经细胞损伤和抑制神经细胞凋亡的作用，且聚集物的效果优于上清液[5]；葛根芩连汤（Gegen Qinlian Decoction，GQD）的组成性聚集物比可溶性成分具有更强的降血糖和抗氧化活性[8]。关于中药汤剂成分互作形成纳米聚集体与其药效作用具有相关性，有待于进一步深入探索。 GQD出自东汉张仲景所著的《伤寒杂病论》，该方由君药葛根、臣药黄连、黄芩，佐使药甘草组成[9]，主要包括黄酮类、生物碱类、三萜类及三萜皂苷类等成分。GQD临床常用于治疗急性肠炎、细菌性痢疾、肠伤寒、胃肠型感冒等属表证未解，里热甚者，现代研究发现其具有解热抗菌、抗炎止泻、降糖调脂、抗心律失常、抗缺氧和增强免疫功能等药理作用[10-11]。抗肿瘤药物伊立替康（CPT-11）[12]临床应用过程常引起患者严重肠毒性，即迟发性腹泻，导致病人产生脱水、营养不良、电解质失衡、感染等症状，进而可能导致肾功能障碍、心脏疾病或免疫破坏，甚至死亡。目前，临床常用洛派丁胺、醋托啡烷、布地奈德等药物缓解腹泻[12-14]，但效果并不理想。课题组前期研究证实，GQD可显著缓解CPT-11所致的迟发性腹泻，通过降低小鼠腹泻发生率和死亡率，减轻小鼠肠道损伤，抑制炎症因子及降低肠道酶活性等来发挥减毒作用[15-16]，但其药效物质基础及作用方式有待于深入研究。 基于中药汤剂中广泛存在成分间相互作用形成聚集体，本研究拟选用源自GQD的6种有效成分（小檗碱、巴马汀、汉黄芩苷、黄芩苷、葛根素、甘草酸），考察成分间组合形成自组装纳米粒的能力和特性，同时基于GQD有效缓解CPT-11肠毒性的药理作用，考察制备得到的几种自组装纳米粒药效作用，从成分互作角度揭示GQD物质基础与药效的相关性，为揭示中药配伍煎煮科学内涵提供新思路。 1 仪器与材料 1.1 仪器与试剂 Agilent1260型高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]，美国安捷伦科技有限公司；DF-101S型集热式恒温加热磁力搅拌器，上海邦西仪器科技有限公司；Litesizer 500型纳米粒度及ζ电位分析仪，上海安东帕商贸有限公司；HT7800型透射电子显微镜，日立高新技术（上海）国际贸易有限公司；Scientz-10N型冷冻干燥机，宁波新芝生物科技有限公司；A50型紫外分光光度计，翱艺仪器上海有限公司；Thermo Scientific Nicolet iS5型傅里叶红外光谱仪，美国赛默飞世尔科技公司；MK3型酶标仪，芬兰雷勃集团公司；Fresco17型冷冻离心机，美国Thermo Scientific公司；UPR-Ⅱ-10T型优普系列超纯水器，四川优普超纯科技有限公司。 盐酸伊立替康（CPT-11），批号A0813A，质量分数≥99%，大连美仑生物技术有限公司；对照品小檗碱（批号AZBI1408）、汉黄芩苷（批号AF21110611）、黄芩苷（批号AZCD1316）、葛根素（批号AFBL0953）、巴马汀（批号AFCB0951）、甘草酸（批号AFCE1008），质量分数≥98%，成都埃法生物科技有限公司；肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α，批号20230804）、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β，批号20230628）、IL-10（批号20230628）的酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒，成都诺舟生物技术有限公司；Bradford蛋白浓度测定试剂盒，批号032023230523，碧云天生物技术有限公司；水为实验室超纯水；甲醇、甲酸、磷酸，色谱纯，上海西格玛奥德里奇贸易有限公司；四氢呋喃、丙酮，色谱级，成都市诺尔施科技有限责任公司。 1.2 动物 ICR种雄性小鼠，体质量（20±2）g，购自斯贝福（北京）生物技术有限公司，生产许可证：SCXK（京）2019-0010。动物实验均按照中国国家科学技术委员会颁布的“实验动物管理条例”和成都中医药大学动物实验伦理委员会批准的议定书（批准文号2020DL-126）规范执行。 2 方法与结果 2.1 组分纳米粒的制备 GQD中有黄连、黄芩、葛根、甘草4种药味，黄连代表性有效成分小檗碱和巴马汀，黄芩代表性有效成分汉黄芩苷和黄芩苷，葛根代表性有效成分葛根素，甘草代表性有效成分甘草酸。采用溶剂挥发法，分别制备小檗碱-汉黄芩苷自组装纳米粒（berberine-wogonoside nanoparticles，Ber-Wog NPs）、小檗碱-葛根素自组装纳米粒（berberine-puerarin nanoparticles，Ber-Pue NPs）、黄芩苷-葛根素自组装纳米粒（baicalin-puerarin nanoparticles，Bai-Pue NPs）、黄芩苷-巴马汀自组装纳米粒（baicalin-palmatine nanoparticles，Bai-Pal NPs）、黄芩苷-甘草酸自组装纳米粒（baicalin-glycyrrhizic acid nanoparticles，Bai-GA NPs）。 精密称定小檗碱3.36 mg溶解于磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS），精密称定汉黄芩苷4.60 mg溶解于四氢呋喃，按照两者物质的量比为1∶1，将有机相缓慢匀速滴加至水相，边滴加边搅拌，滴加完毕后于在磁力搅拌器上37℃恒温400 r/min搅拌1 h，待有机溶剂挥尽后，0.45 μm微孔滤膜滤过，即得Ber-Wog NPs。同法，制备Ber-Pue NPs、Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Bai-GA NPs。 2.2 组分纳米粒的表征 2.2.1 组分纳米粒理化性质 如图1所示，所形成的5种纳米粒均为透明溶液，其中Ber-Wog NPs、Ber-Pue NPs、Bai-Pal NPs呈淡黄色，Bai-Pue NPs和Bai-GA NPs呈无色，且静置稳定性较好。取10 μL样品溶液于碳膜铜网上，静置1 min后将多余液体从铜网边缘除去，将3%磷钨酸水溶液滴加1滴至铜网表面，负染2 min后用滤纸吸附多余染料，待液体挥干后采用透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）拍摄其形态，结果见图1，TEM显示5种纳米粒均呈现出球状型。量取1 mL纳米溶液，采用Litesizer 500纳米粒度仪测定纳米溶液粒径分布，如表1所示，结果显示5种纳米粒平均粒径均在200 nm左右，多分散指数（polydispersity index，PDI）均小于0.25，粒径分布较均匀，分散性较好。 2.2.2 包封率与载药量的测定 （1）小檗碱、巴马汀、葛根素的HPLC色谱条件[17]：色谱柱为Sunfire C18柱（150 mm×3.0 mm，3.5 μm）。流动相为水-甲醇，检测波长：346 nm（小檗碱、巴马汀），250 nm（葛根素）；体积流量1 mL/min；进样量10 μL；柱温25 ℃；梯度洗脱：0～10 min，30%甲醇；10～15 min，30%～82%甲醇；15～18 min，82%～85%甲醇；18～20 min，85%～30%甲醇。 （2）甘草酸的HPLC色谱条件[18]：色谱柱为Sunfire C18柱（150 mm×3.0 mm，3.5 μm）；流动相为0.1%磷酸水溶液-甲醇（25∶75）；检测波长250 nm；体积流量1.0 mL/min；进样量10 μL；柱温25 ℃；等度洗脱20 min。 （3）黄芩苷、汉黄芩苷的HPLC色谱条件[19]：色谱柱为Sunfire C18柱（150 mm×3.0 mm，3.5 μm）；流动相为0.1%甲酸水溶液-甲醇（35∶65）；检测波长280 nm；体积流量1.0 mL/min；进样量20 μL；柱温30 ℃；等度洗脱10 min。 （4）包封率与载药量的测定：分别精密量取0.5 mL Ber-Wog NPs、Ber-Pue NPs、Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Bai-GA NPs于超滤离心管中，在超速离心机上以30 000 r/min，离心半径为4.44 cm，超速离心20 min。取外管滤液0.2 mL，用甲醇定容至2 mL，超声20 min（频率40 kHz、功率100 W），按上述色谱条件测定游离药物质量浓度。 另取未经离心的纳米溶液0.2 mL，至2 mL量瓶中，按照“2.2.2”项下方法操作测定样品中小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、葛根素、巴马汀、甘草酸的含量，根据公式计算包封率和载药量，结果如表2所示。 包封率＝(投入药量－游离药量)/投入药量 载药量＝(投入药量－游离药量)/投入总药量 2.2.3 组分自组装纳米的光谱特性 （1）紫外光谱测定：分子发生相互作用后，会影响共轭基团电子排布，因此可根据紫外可见光谱的变化推测物质相互作用规律[20]。 采用紫外-可见吸收光谱在200～500 nm对自组装纳米进行扫描，并与2种游离成分的光谱进行对比。结果如图2所示，小檗碱的特征吸收峰在228、263、344 nm，汉黄芩苷的特征吸收峰在205、273 nm，Ber-Wog NPs在206、271、343 nm处出现较强吸收峰，具有与游离小檗碱和汉黄芩苷的特征，但Ber-Wog NPs的吸收峰出现从游离汉黄芩苷273～271 nm的微小蓝移，从游离小檗碱的344～343 nm的微小蓝移，表明小檗碱和汉黄芩苷在Ber-Wog NPs中存在非共价键作用。 同理，Ber-Pue NPs紫外光谱也具有游离小檗碱和葛根素的特征吸收峰，但存在从游离小檗碱的228、263、344 nm吸收峰蓝移至204、262、331 nm处，而游离葛根素的203、252 nm红移，表明小檗碱和葛根素在Ber-Pue NPs中存在非共价键作用。Bai-Pue NPs紫外光谱也具有游离黄芩苷和葛根素的特征吸收峰，但存在从游离黄芩苷的286、317 nm吸收峰蓝移至206、271、316 nm处，而游离葛根素的203、252 nm红移，表明黄芩苷和葛根素在Bai-Pue NPs中存在非共价键作用。 Bai-Pal NPs在205、275、329 nm处出现较强吸收峰，具有游离黄芩苷和巴马汀的特征吸收峰，但存在从游离黄芩苷的286 nm吸收峰蓝移至275 nm处，317 nm红移至329 nm处，而游离巴马汀的201、274 nm红移至205、275 nm处，341 nm蓝移至329 nm处，表明黄芩苷和葛根素在Bai-Pue NPs中存在非共价键作用。Bai-Ga NPs紫外光谱也具有游离黄芩苷和甘草酸的特征吸收峰，但存在从游离黄芩苷的286、317 nm吸收峰蓝移至271、316 nm处，而游离甘草酸的258 nm红移，表明黄芩苷和甘草酸在Bai-GA NPs中存在非共价键作用。由此可得，5种制剂自组装纳米粒存在两两成分间非共价键相互作用。 （2）傅里叶红外光谱的测定：采用傅里叶转换红外光谱仪对5种自组装纳米药物的光谱性质进行测定，扫描范围为4 000～400 cm?1，与其组成成分游离形式进行对比，分析分子间非共价键力的类型。如图3所示，Ber-Wog NPs中具有类似于游离小檗碱和汉黄芩苷的特征吸收带，但小檗碱中C＝N伸缩振动峰在1 601.58 cm?1处，在形成Ber-Wog NPs后向高波段移动至1 635.89 cm?1，汉黄芩苷中C-O伸缩振动峰1 129.50 cm?1，在形成Ber-Wog NPs后向高波段移动至1 145.97 cm?1，由此证明Ber-Wog NPs中小檗碱和汉黄芩苷存在π-π堆积作用。 同理，Ber-Pue NPs中具有类似于游离小檗碱和葛根素的特征吸收带，但小檗碱中的C-O伸缩振动峰在1 103.16 cm?1，在形成Ber-Pue NPs后向低波段移动至1 069.33 cm?1，葛根素中吡喃葡萄糖上的-OH的弯曲振动峰在1 407.22 cm?1，在形成Ber-Pue NPs后向高波段移动至1 457.19 cm?1，由此证明Ber-Pue NPs中小檗碱和葛根素存在氢键和π-π堆积作用。Bai-Pue NPs中具有类似于游离黄芩苷和葛根素的特征吸收带，但黄芩苷的C＝O的伸缩振动峰在1 660.82 cm?1，-OH的弯曲振动峰在1 407.30 cm?1，在形成Bai-Pue NPs后向低波段分别移动至1 636.98 cm?1和1 394.63 cm?1，葛根素中的C＝O的伸缩振动峰在1 632.42 cm?1，在形成Bai-Pue NPs后向高波段移动至1 636.98 cm?1，由此证明Bai-Pue NPs中黄芩苷和葛根素存在氢键和π-π堆积作用。 Ber-Pal NPs中具有类似游离黄芩苷和巴马汀的特征吸收带，但黄芩苷的C＝O的伸缩振动峰在1 660.82 cm?1，-OH的弯曲振动峰在1 407.30 cm?1，在形成Bai-Pal NPs后向低波数移动至1637.54 cm?1和1 397.39 cm?1，巴马汀中的C＝N的伸缩振动峰在1 604.41 cm?1，在形成Bai-Pal NPs后向低波段移动至1 554.87 cm?1，由此证明Bai-Pal NPs中黄芩苷和巴马汀存在氢键和π-π堆积作用。Ber-GA NPs中具有类似游离黄芩苷和甘草酸的特征吸收带，但黄芩苷的C＝O的伸缩振动峰在1 660.82 cm?1，-OH的弯曲振动峰在1 407.30 cm?1，在形成Bai-Pal NPs后向低波数移动至1 626.67 cm?1，-OH向高波数移动至1 418.16 cm?1，甘草酸中的伸缩振动峰C＝O在1 655.10 cm?1，在形成Bai-Pal NPs后向低波数移动至1 626.67 cm?1，由此证明Bai-GA NPs中黄芩苷和甘草酸存在氢键缔合。 2.3 组分自组装纳米的分子对接 PubChem数据库（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/ pccompound/）下载小檗碱、汉黄芩苷、黄芩苷、葛根素、甘草酸、巴马汀的SDF文件。用OpenBabel-2.4.1将SDF文件转换为MOL2文件。AutoDock Tools 1.5.7优化小分子结构，利用软件AutoDock Vina 1.1.2进行分子对接，记录最低结合能，一般认为结合能越低，结合性越好，通常认为结合能低于0时，能自发进行，且分子结合能小于?17.78 kJ/mol，分子与靶点有一定的结合活性；小于?23.01 kJ/mol，分子与靶点有较好的结合活性；小于?33.47 kJ/mol，分子与靶点的结合具有强烈的活性。因此，选择结合自由能（binding free energy，G）最低的对接模型，作为最适合分子模拟的结合模型[21]，并用PyMOL 2.5.7软件进行可视化处理。 结果如图4和表3所示，Ber-Wog NPs中存在分子间π-π堆积相互作用，小檗碱与汉黄芩苷的G为?17.15 kJ/mol；Ber-Pue NPs中存在氢键和π-π堆积相互作用，小檗碱与葛根素的G为?17.99 kJ/mol；Bai-Pue NPs中存在氢键和π-π堆积相互作用，黄芩苷与葛根素的G为?16.32 kJ/mol；Bai-Pal NPs中存在氢键和π-π堆积相互作用，黄芩苷与巴马汀的G为?18.41 kJ/mol；BAI-GA NPs中存在氢键，且黄芩苷与甘草酸的G为?24.27 kJ/mol。因此，采用分子对接模型表明所形成的5种自组装纳米的自组装机制均与成分间形成氢键和π-π堆积等非共价键作用相关。 2.4 组分自组装纳米缓解CPT-11所致迟发性腹泻作用研究 2.4.1 CPT-11致迟发性腹泻模型建立、分组与给药 取健康ICR雄性小鼠，体质量（20±2）g，实验开始前将小鼠适应性喂养1周，每天自由饮水、进食，随后分为7组，对照组、模型组、Ber-Wog NPs组、Ber-Pue NPs组、Bai-Pue NPs组、Bai-Pal NPs组、Bai-GA NPs组，每组各8只。除对照组外，其余组均以45 mg/kg剂量连续ip CPT-11，连续注射4 d，每天1次，建立CPT-11致迟发性腹泻模型[15,22]，对照组注射等量生理盐水。 自第1天造模开始，Ber-Wog NPs组按照20.0 mg/(kg?d)小檗碱和85.4 mg/(kg?d)汉黄芩苷剂量给予小鼠ig；Ber-Pue NPs组按照20.0 mg/(kg?d)小檗碱和19.4 mg/(kg?d)葛根素剂量ig，Bai-Pue NPs组按照20.0 mg/(kg?d)黄芩苷和30.6 mg/(kg?d)葛根素剂量ig；Bai-Pal NPs组按照20.0 mg/(kg?d)黄芩苷和9.9 mg/(kg?d)巴马汀剂量ig；Bai-GA NPs组按照20.0 mg/(kg?d)黄芩苷和63.4 mg/(kg?d)甘草酸剂量ig，对照组和模型组ig等量蒸馏水，持续给药10 d，每天2次，至第11天断颈处死小鼠，同时取结肠组织，用于后续检测。在给药期间每天记录小鼠体质量、粪便、状态等用于疾病活动指数（disease activity index，DAI）评分，按照表4标准进行DAI评分，S1、S2和S3分别代表体质量减轻评分、粪便状态评分和血便评分，根据下列等式计算出DAI评分。 DAI＝(S1＋S2＋S3)/3 通过SPSS 26.0软件分析多组数据之间的差异，实验数据用表示。计量资料采用独立样本t检验分析；多组间两两比较采用最小显著性差异（LSD）法检验。若P＜0.05说明差异有统计学意义。 2.4.2 小鼠一般情况 如图5-A所示，对照组小鼠体质量在实验期间逐渐增加。与对照组比较，模型组小鼠体质量逐渐下降；与模型组比较，而各制剂组可在一定程度上减缓小鼠体质量的减少，第10天小鼠体质量平均值为对照组（38.71±2.13）g、模型组（22.10±1.31）g、Ber-Wog NPs组（25.80±2.54）g、Ber-Pue NPs组（24.10±2.79）g、Bai-Pue NPs组（25.73±3.84）g、Bai-Pal NPs组（23.94±3.95）g、Bai-GA NPs组（26.53±3.97）g。如图5-B所示，根据DAI评分可得对照组小鼠大便正常，而小鼠在注射CPT-11的4 d后大便逐渐出现便稀湿软色黄，肛周污秽。各制剂组一定程度可缓解小鼠腹泻情况，未见明显便血，症状轻于CPT-11组。如图5-C所示，与对照组相比，模型组存活率为37.5%，Ber-Wog NPs、Ber-Pue NPs、Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Bai-GA NPs存活率分别为50.0%、75.0%、62.5%、62.5%、50.0%。如图5-D所示，对照组结肠壁厚薄适中，结肠黏膜完整且清晰可见成型的粪便，无红肿、充血等肉眼可见变化；与对照组相比，模型组结肠组织肠管缩小变细，其长度变短，结肠黏膜呈暗红色，充血水肿比较明显；与模型组相比，制剂组肠管稍变细，结肠黏膜比之色淡稍红，少见有充血、水肿和溃烂情况，可一定程度抑制CPT-11所致结肠萎缩，其中根据测量结肠平均长度发现制剂组中抑制CPT-11结肠萎缩的效果由高到低分别为Bai-Pue NPs、Ber-Pue NPs、Bai-GA NPs、Bai-Pal NPs、Ber-Wog NPs。 2.4.3 小鼠结肠组织病理形态学影响 如图6所示，对照组黏膜结构完整，基本无病变，细胞紧密排列，小鼠肠隐窝和绒毛清晰完整，胞核较清晰可见；模型组表示出严重的凝固性坏死，结肠黏膜可见缺损，黏膜肿胀，出血及炎性渗出，大量隐窝结构破坏，细胞核形态不一，并伴有大量细胞炎性浸润；Ber-Pue NPs组和Bai-GA NPs组黏膜组织无异常，基本无病变，且未看到黏膜中的炎性细胞浸润，隐窝及绒毛结构正常，细胞排列正常；而Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Ber-Wog NPs组均可见黏膜层少量细胞脱落，并伴有少量炎性细胞浸润，但与模型组相比，Bai-Pue NPs、Bai-Pal NPs、Ber-Wog NPs组可缓解结肠黏膜的出血及炎性渗出。 2.4.4 对小鼠结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-10含量的影响 CPT-11导致的迟发性腹泻发生时会有大量炎症细胞聚集，分泌大量炎症因子，其中TNF-α和IL-1β为促炎因子，IL-10为抑炎因子。各组对CPT-11所致的炎症因子的影响如表5所示，与对照组相比，模型组中TNF-α、IL-1β的表达显著升高（P＜0.05），IL-10含量显著降低（P＜0.05）；与模型组相比，各制剂组均能降低TNF-α的含量（P＜0.05），其中Ber-Pue NPs组相比Ber-Wog NPs与Bai-Pal NPs这2个制剂组显著降低（P＜0.05），Bai-GA NPs组相比Bai-Pal NPs组显著降低（P＜0.05）；与模型组相比，各制剂组均能降低IL-1β的含量（P＜0.05），其中Ber-Pue NPs组相比Ber-Wog NPs与Bai-Pal NPs这2个制剂组显著降低（P＜0.05），Bai-GA NPs相比Ber-Wog NPs与Bai-Pal NPs这2个制剂组显著降低（P＜0.05）；与模型组相比，各制剂组IL-10均显著升高（P＜0.05），其中Ber-Pue NPs组相比Ber-Wog NPs和Bai-Pal NPs这2个制剂组显著升高（P＜0.05）。 3 讨论 自组装纳米粒主要通过π-π堆积、范德华力、氢键、静电相互作用、卤键等非共价键的相互作用力结合形成，尤其是分子间氢键，自主装作用力主要由氢键之间或其他非共价键的协同作用所构成。分子之间通过氢键作用力结合时，可形成单一氢键和多重氢键，氢键的多重性越强，分子之间的结合能和稳定性越强[23]。如Li等[24]通过氢键和疏水相互作用自组装形成双氢青蒿素纳米颗粒；Wang等[25]将紫杉醇和桦木酸通过氢键和疏水作用形成自组装纳米粒。在本研究中，通过紫外可见吸收光谱和红外光谱实验表明，5种纳米粒的组装均是通过分子间非共价键作用形成；分子对接模型进一步提示，其形成机制与分子间静电相互作用或氢键相关。 在本研究中，为证实GQD中的成分是否具有结合成纳米粒的趋向性，选取GQD中含量较高的的主要有效成分小檗碱、汉黄芩苷、葛根素、黄芩苷、

[b][font=宋体][color=#7030a0]食药兼佳的“亚洲人参”——葛根[/color][/font][/b][font=宋体]我们常说的葛根分两种，《中华人民共和国药典》分列开为葛根及粉葛。葛根为豆科野葛的干燥根，粉葛为豆科甘葛藤的干燥根。他们是豆科植物亲兄弟。粉葛含淀粉率较野葛根高，故称粉葛，又因味甘甜也称甘葛。古代两者皆可药用，现在药用以野葛为主，食品以粉葛为主。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]老少皆宜的滋补品[/color][/font][/b][font=宋体]葛根作为食品在我国也有悠久的历史，且吃法多样。南北朝时期，陶弘景《本草经集注》：“人皆蒸食之”，那时人们爱将葛根蒸着吃；北宋?苏颂《本草图经》：“今人多作粉食”，将葛根磨成葛粉，加上些许配料，葛根就更美味了。[/font][font=宋体]葛根内含丰富的黄酮类化合物，如葛根素、大豆黄酮苷、花生素等营养成分，还有蛋白质、氨基酸、糖和人体必需的铁、钙、铜、硒等矿物质，是老少皆宜的滋补品。俗话常说“北有人参，南有葛根。”葛根曾被当成贡品进贡宫廷，也是南方一些地区常食蔬菜，较为出名的葛根吃法有桂花葛根羹、葛根粥、葛粉饭、葛粉汤、葛根茶等。人们还利用现代工艺开发出葛根醋饮品、葛根酒、葛根粉，葛根面条粉条、葛根口服液、葛根雪糕、葛根糖果等众多葛根食品。[/font][align=center][/align][b][font=宋体][color=#ffc000]解肌良药——葛根[/color][/font][/b][font=宋体][/font][font=宋体]葛根味甘、辛，性凉，归脾、胃、肺经，有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒的功效。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]解肌退热[/color][/font][/b][font=宋体]葛根甘辛性凉，轻扬升散，具有发汗解表，解肌退热的功效。外感表证发热，无论风寒与风热，都可使用。葛根既能辛散发表以退热，又长于缓解外邪郁阻、经气不利、筋脉失养所致的颈背强痛。通俗地讲，葛根就是治疗感冒发烧，肌肉酸疼的常用药。汉代医圣张仲景《伤寒论》中的“葛根汤”，至今仍是临床上常用的解表方。葛根汤主要用于治疗外感风寒之邪，侵犯经络，气血运行不畅，经络不通导致的肩背发紧、疼痛。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]生津止渴[/color][/font][/b][font=宋体]葛根甘凉，清热的同时能升脾胃清阳之气，而有生津止渴的功效。适用于各种原因引起的口渴，如邪入里耗气伤津的口渴，肺胃热盛伤津的口渴，阴虚内热津液不足的口渴，脾虚不能运化水液的口渴，以及消渴（多饮、多食、多尿症状）的口渴。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]透疹[/color][/font][/b][font=宋体]葛根味辛性凉，有发表散邪，解肌退热，透发麻疹的功效。葛根透疹的功效较薄荷弱，适用于麻疹初期。治疗麻疹初起，表邪外束，疹出不畅，常与升麻、芍药、甘草等同用，如升麻葛根汤（《阎氏小儿方论》）。若麻疹初起，已现麻疹，但疹出不畅，有发热咳嗽，或乍冷乍热的情况，常配伍牛蒡子、荆芥、蝉蜕、前胡等药，如葛根解肌汤（《麻科活人全书》）。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]升阳止泻[/color][/font][/b][font=宋体]葛根味辛升发，能促进脾升清阳之气，增强脾运化水湿的功能，达到缓解泻泄的作用。适用于脾虚不能运化水湿，脾气下陷，清阳不升导致的久泻不止；也用于治疗表证未解，邪热入里，身热，下利臭秽，肛门有灼热感，苔黄脉数，或湿热泻痢，热重于湿之证。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]通经活络[/color][/font][/b][font=宋体]葛根味辛能行，能通经活络，常与三七、丹参、川芎等活血化瘀药配伍用于治疗中风偏瘫，胸痹心痛，眩晕头痛。且葛根能直接扩张血管，使外周阻力下降，而有明显降压作用，能较好缓解高血压病人的“项紧”症状，临床常用于治疗高血压病颈项强痛。[/font][b][font=宋体][color=#00b050]解酒毒[/color][/font][/b][font=宋体]葛根味甘能解酒毒，常与陈皮、白豆蔻、枳椇子等理气化湿、解酒毒药同用治疗酒毒伤中，恶心呕吐，脘腹痞满。[/font][font=宋体]解肌退热、透疹、生津宜生用，升阳止泻宜煨用。[/font]

葛根配方颗粒特征图谱黄豆苷元对照品配制时，在水浴上加热溶解了，但是放冷就析出了，有大神可以指导一下吗？

如何计算加标回收率?葛根素的含量按式进行计算:公式Ｘ=c×V×1000m×1000×1000Ｘ:试样中葛根素的含量,单位为克每千克(g/Kg);C:由标准曲线求得进样液中葛根素的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);V: 试样定容体积, 单位为毫升(mL);m:试样质量, 单位为克(g);线形关系y=55.615+37.689样品的取样为0.0961g于 100ml容量瓶中, 进样10μL得峰面积2123.868165，样品的含量计算为39.03(g/Kg)加样回收率是这样做的,取样0.05174g,加对照品浓度1.89(mg/mL)1mL于 100ml容量瓶中,得峰面积2259.275025, 加样回收率如何算?

贵州的漫山遍野间生长的野生葛根，为一种天然的草本植物，自古以来就以其卓越的药用价值而闻名，被誉为山野之宝，其含有丰富的黄酮类化合物。医学世家出身的他，深谙养生之道，为了将这份天赋之宝分享给更多人，他决定展开一场关于葛根的独特酿酒之旅。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401060923240141_3881_1642069_3.png[/img]

2010版药典葛根饮片项下规定：除去杂质，洗净，润透，切厚片，晒干附录ⅡD炮制通则中切制项下表示：切制时，除鲜切、干切外，均应采用软化处理方法众所周知，葛根是属于鲜切的，那么饮片项下的润透，意义又何在？和通则中的鲜切，可不采用软化处理，该如何取舍而现有加工方式一般为：鲜葛根直接切制，烘干，既得。药典中要求为晒干（不宜用较高的温度烘干的，则用“晒干”或“低温干燥”）那么现有方式加工出的饮片是否为合格的饮片?因为药典中明确入药者均为饮片，并将中成药处方中药味全部改用饮片名表述，那么现有方式加工的“饮片”还能不能拿来投料呢？请大家不吝赐教