本文引用自cheney《蛋白胨和胰蛋白胨简介》蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大。不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在着各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。因此,蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。 不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone)、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。在国际市场上,胰蛋白胨也属于货紧价昂的短线品种之一。 胰酪蛋白胨质量标准及其检验标准: 常规各项理化指标: 1. 澄清度(磷酸盐、碱性沉淀):无沉淀、澄清 2. 2%水溶液:透明 3. 酸碱度:6-7 4. 氨基氮:≥3% 5. 色氨酸:≥0.8% 6. 胨含量:≥80% 7. 总氮:≥13% 8. 水份:≤5% 9. 灰份:≤6% 10. 氯化钠:≤0.2%胰蛋白胨特指用胰蛋白酶酶解酪蛋白生成的蛋白胨产物,与一般蛋白胨的区别在于酶解工艺处理上,属于水解度更高、胨分子量更小更均衡的蛋白胨。
蛋白胨水培养基( l )成分 蛋白胨 10g 水 l000ml 氯化钠 5g ( 2 )制法 取上述成分混合,微温使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,分装于小试管,121 ℃ 灭菌15 分钟。( 3 )用途 用于鉴别细菌能否分解色氨酸而产生靛基质的生化反应。 ① 靛基质试验取可疑菌落或斜面培养物,接种于蛋白胨水培养基中,置35 ℃ 培养24~48 小时,必要时培养4~5 天,沿管壁加人靛基质试液数滴,液面呈玫瑰红色为阳性,呈试剂本色为阴性。 ② 靛基质试液 称取对二甲氨基苯甲醛5g ,加入戊醇(或异戊醇)75ml ,充分振摇,使完全溶解后,再取盐酸25ml 徐徐滴入,边加边振摇,以免骤热导致溶液色泽变深.或称取对二甲氨基苯甲醛1g ,加人95 %乙醇95ml ,充分振摇,使完全溶解后,再取盐酸20ml 徐徐滴入。
我发现在做冻干粉针剂的无菌检查时,用0.9%氯化钠溶液溶解药品,后薄膜过滤?有一次,同事错用了pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,结果药粉都没溶解。在做一种药品的原料药的微生物限度检查时,一种用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,然后薄膜过滤。请问微生物无菌检查和限度检查时用的冲洗液,为什么有时候用0.9%氯化钠溶液,有时候用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液?如何去选择?依据是什么?谢谢!
为什么大肠菌群MPN法,GB4789.2-2003是用9管的乳糖胆盐,而GB5750做水时候要用15管法的乳糖蛋白胨,而改版后的新GB4789.2008.2中改用LST,其与乳糖胆盐相比又有什么优势呢?
我是做啤酒微生物检测的新手,做了2次菌落总数都没有成功,遇到几个问题请教一下;1.培养基中是用的蛋白胨代替的胰蛋白胨,可以吗?2.空白培养基上有菌落长出。(生理盐水和培养基是用的灭菌锅灭菌,移液管和培养皿是用的牛皮纸包好后160度干燥2小时灭菌。操作在无菌室内的超净工作台上。)个人觉得是不是移液管灭菌不好,培养皿一直都是这样灭菌的,做酵母的时候没有问题。3.有几个细菌长在培养基表面的,大部分长在培养基内部的,一点一点的,不知道是不是这样子的?
一、目的与要求(一)学习制备培养基的基本技术。(二)制备牛肉膏蛋白琼脂培养基。二、原理牛肉膏蛋白培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌培养基,这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,可供作繁殖之用,制作固体培养基时须加2%琼脂,培养细菌时,应用稀酸或稀碱将PH调至中性或微碱性。牛肉膏蛋白培养基的配方:牛肉膏0.5%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,pH7.4~7.6。三、材料与仪器(一)试剂 牛肉膏,蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。(二)其他 试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,乳胶管,弹簧夹,纱布,棉花,牛皮纸,线绳,pH试纸,电炉,台称。四、操作步骤(一)称量 根据用量按比例依次称取成分,牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯,蛋白胨易吸湿,称量时要迅速。(二)溶解 在烧杯中加入少于所需要的水量,加热,ZHU一加入各成分,使其溶解,琼脂在溶液煮沸后加入,融化过程需不断搅拌。加热时应注意火力,勿使培养基烧焦或溢出。溶好后,补足所需水分。(三)调PH 用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH调至所需范围。(四)过滤 趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利于某些实验结果的观察,如无特殊要求时可省去此步骤。(五)分装 按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三解瓶内,分装装置如实验图8所示;分装时注意,勿使培养基沾染在容器口上,以免沾染棉塞引起污染。1.液体分装 分装高度以试管高度的1/4左右为宜,分装三角瓶的量则根据需要而定,一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。2.固体分装 分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,斜面长度不超过管长的1/2。分装三解瓶,以不超过容积的1/2为宜。3.半固体分装 装置以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。(六)加棉塞 分装完毕后,在试管口或三解瓶口塞上棉塞(或泡沫塑料塞及试管帽等,以阻止外界微生物进入培养基而造成污染,并保证有良好的通气性能。(七)包扎 棉塞头上包一层牛皮纸,扎紧,即可进行灭菌。(八)保存 灭菌后的培养基放入37℃养箱中培养24小时,以检验灭菌的效果,无污染方可使用。
配营养琼脂时 换一瓶新蛋白胨 结果发现上次买的一批蛋白胨全成板块了 。。。 还能用吗???
请教各位老师,从一个资料上看说乳糖蛋白胨中的乳糖不能换成葡萄糖是因为葡萄糖经发酵产酸过多使PH达到4.5,使大肠杆菌死亡!这个说法对吗?还有大肠菌群的生长ph范围是多少。有根据吗?
乳糖蛋白胨灭菌完放在室内不放冰箱可以保存吗
乳糖蛋白胨的培养基,是需要自己培养还是买 成品?成品是否需要 检测纯度之类的???
我今天已经把装有乳糖蛋白胨的培养基115[size=2]℃[/size]20min高压灭菌好了,但样品明天才来,那我这培养基可以放到明天才用吗?
如果有盐存在,会对蛋白水溶液中的蛋白产生什么影响呢?
乳糖蛋白胨的培养基,是需要自己培养还是买 成品?成品是否需要 检测纯度之类的???这种合成品符合CMA的要求吗?如果厂家能提供成品的检测报告是否可以使用,,是否符合认定要求???
请教:双缩脲反应测定蛋白质含量时,绘制标准曲线时需要标准蛋白溶液,标准蛋白溶液要用什么蛋白质?我见有用酪蛋白的,可以用胶原蛋白吗?谢谢……
测蛋白时,用盐酸标准溶液滴定好,还是选择硫酸标准溶液合理?
用葡聚糖凝胶除蛋白溶液中的盐,很难过下去,有什么办法啊
各位前辈,大虾,小弟先***!我第一次做这种实验,目的是想把一种极低浓度的蛋白溶液中的蛋白浓度测出来。查了资料,认为folin-酚法比较适合。文献报道说该法的检查限最低能到5 μg/ml。按照中国药典第三部lowry法测蛋白含量,我拿牛血清白蛋白标准品配了一个50 μg/ml的浓度和5 μg/ml的浓度。50 μg/ml的浓度的样品,能显出蓝色,但不深。5 μg/ml的浓度基本都不显示,跟空白一样。可见光检测,5 μg/ml的浓度与空白的吸收值基本一致。且为负值。问题:1、请问该法,在5 μg/ml的浓度时,是否还能显出蓝色,至少肉眼能分辨出来。2、50 μg/ml的浓度时,显出的颜色淡还是深,可见光吸收大概是多少?3、我的操作可能出现哪些问题,影响实验结果。谢谢,前辈、大虾、学长们啦!小弟贵球!!!!!
各位前辈,大虾,小弟先***!我第一次做这种实验,目的是想把一种极低浓度的蛋白溶液中的蛋白浓度测出来。查了资料,认为folin-酚法比较适合。文献报道说该法的检查限最低能到5 μg/ml。按照中国药典第三部lowry法测蛋白含量,我拿牛血清白蛋白标准品配了一个50 μg/ml的浓度和5 μg/ml的浓度。50 μg/ml的浓度的样品,能显出蓝色,但不深。5 μg/ml的浓度基本都不显示,跟空白一样。可见光检测,5 μg/ml的浓度与空白的吸收值基本一致。且为负值。问题:1、请问该法,在5 μg/ml的浓度时,是否还能显出蓝色,至少肉眼能分辨出来。2、50 μg/ml的浓度时,显出的颜色淡还是深,可见光吸收大概是多少?3、我的操作可能出现哪些问题,影响实验结果。谢谢,前辈、大虾、学长们啦!小弟贵球!!!!!
[color=#444444]做完核磁的蛋白溶液在核磁管里胶凝了[/color][color=#444444]各位大佬有遇到这种情况吗?[/color][color=#444444]或者各位大佬怎么洗核磁管?[/color]
做了一个新工艺,做蛋白纯化的工艺,用到了铜离子(用在蛋白复性中),想在成品或原液中检测铜离子的残留,不知道哪里能做。成品样品体系:蛋白溶液蛋白浓度:0.3mg/ml缓冲液:25mM醋酸钠体系,pH4.5原液中就是蛋白浓度要高些。想测定到ppm级就可以了。
亲们,跑蛋白电泳时,0.05%的溴酚蓝水溶液怎么配比较好呢,因为它不溶于水。还有SDS溶液应该怎么配,它也不溶于水啊,一搅拌全是泡沫
盐溶液是盐水喷雾试验机的关键要素,对试样的损坏起决定作用。对盐溶液的要求主要有: 盐溶液配制用材——水和氯化钠的要求; 盐溶液的浓度; 盐溶液的PH值。 在不同标准中对盐水喷雾试验机用的盐溶液有不同的要求。
盐水喷雾试验乃针对各种材质之表面处理,包含涂料、电镀、无机及有机皮膜,阳极处理、防锈油等防腐处理后,测试其制品之耐腐蚀性。下面请跟随小编一起来了解一下盐溶液浓度在盐水喷雾试验机中所起到的作用。 众所周知,在做中性盐雾试验时,Nacl2的浓度与金属腐蚀失质量是息息相关的。盐水喷雾试验机在一定温度条件下,腐蚀速度主要是由两个因素来控制的,即盐溶液浓度和溶解在溶液中的氧含量。当溶液中氧含量能满足电化学反应时,腐蚀速度受盐浓度控制;反之,当盐浓度超过5%后,随浓度的增加,溶解的氧含量降低,无法满足电化学反应的需要,这时,腐蚀速度就由溶液中的氧的含量来控制。在5%左右浓度时腐蚀速度高,因此标准中一般都采用5%的Nacl2水溶液。 上面讲到了盐水喷雾试验机Nacl2盐溶液浓度是影响试验结果是否准确的主要因素,那么,如何来降低盐溶液浓度对于结果的影响呢。专家介绍,试验人员可定期对溶液浓度进行测量,测量时可采用密度法,一般5%的Nacl2溶液在25℃时的密度在1.029~1.041g/mL,用比重计即可快速准确地进行测量。 注:这里的试验样品主要是针对防腐涂料(如漆膜等),其他试验样品仅供参考。
高盐溶液的分析用ICP-AES是对其一个好的考验。欢迎大家讨论。
水质总大肠的最后一步复发酵实验,就是接种了EMB培养上的菌落应该是取10ML 的乳糖蛋白胨培养液还是5ML?[img=,654,120]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912101144341109_959_4064492_3.png!w654x120.jpg[/img]医疗废水上就写着取[img=,690,139]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/12/201912101148371298_8342_4064492_3.png!w690x139.jpg[/img]谢谢大家。
标曲样本的处理过程能先加沉淀蛋白溶剂,再加工作溶液吗?正常操作是先加工作溶液,如果调顺序会有什么影响?
高盐溶液会引起矩管进样管的堵塞,从而引起分析信号的漂移或者减小,而有的样品前处理就是用碱熔的,比如用过氧化钠或者硼酸锂盐高温熔融的,一般含盐量或者叫可溶性固体总量都不低的,对于这种样品你们是如何处理的?
大侠,在做总氰化物化验中,磷酸盐溶液很难溶解咋整?另外,我三个月前配置的磷酸盐溶液有少许白色絮状沉淀,还能用么,跪谢了
盐雾试验箱不同标准对盐溶液PH值的要求相同,但对测定PH值的环境温度规定不同:20±2℃,与配制环境温度接近,方便检测;35±2℃,与试验环境温度一致,可正确控制盐溶液喷雾时的PH值。温度对溶液的PH值的影响一般较小,如符合标准Q/SOIE04-2003的PH值为7的缓冲剂,20℃时的PH值为6.88,35℃时的PH值为6.84。不过,20℃时溶于盐溶液中的CO2在35℃喷雾时将挥发,导致盐雾的酸性降低、PH值升高。如在20℃或其他室温下调节和测定PH值,应将盐溶液先加热到35℃以上或用新煮沸过的水配制盐溶液。另一种方法是在室温调节和测定PH值,将盐溶液的PH值调节到略低于下限6.5,然后取该盐溶液50mL煮沸30S,冷却到室温后测定PH值,如测得的PH值在6.5~7.2之间,测配制的盐溶液满足35℃喷雾时盐雾的PH值要求。
原子吸收火焰法测高盐溶液中金属离子,如果溶液几乎达到饱和状态是不是不能测啊?