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沼泽红假单胞菌

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沼泽红假单胞菌相关的论坛

  • 假单孢菌的问题

    有没有大佬知道真空包装牛肉贮藏40d后假单胞菌还会不会生长?望老师不吝赐教

  • 【金秋计划】麻杏石甘汤治疗铜绿假单胞菌肺炎的药理作用及机制研究

    [size=15px][color=#595959]严重的[b]铜绿假单胞菌肺炎[/b]会引起[b]细胞因子风暴[/b]、过度的[b]促炎细胞因子释放[/b]、广泛的损伤和致命结局。强烈的炎症反应虽然是清除铜绿假单胞菌所必需的,但需要迅速减少以限制组织损伤。因此,开发新的辅助药物以降低[b]多重耐药铜绿假单胞菌肺炎[/b]的严重程[/color][/size][size=15px][color=#595959]度的[b]非抗生素治疗方法[/b]是[/color][/size][size=15px][color=#595959]一种可持续和有效的对抗多重耐药细菌的策略。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]中医是众所周知的肺炎治疗选择,中药可调节铜绿假单胞菌肺炎感染的宿主[/color][/size][size=15px][color=#595959]免疫[/color][/size][size=15px][color=#595959],如清肺消炎丸、疏风解毒胶囊、芪归银方等。[b]麻杏石甘汤[/b]([b]MXSG[/b])是一种有效治疗[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]呼吸道感染[/color][/size][size=15px][color=#595959]和细菌性肺炎[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]的中药。然而,MXSG治疗[b]急性铜绿假单胞菌肺炎[/b]的机制尚不清楚。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]该研究旨在观察MXSG对急性铜绿假单胞菌肺炎的治疗作用并探讨其可能的机制。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]采用[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱法[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]分析其化学成分[/color][/size][size=15px][color=#595959]。[/color][/size][size=15px][color=#595959]以最小抑菌浓度(MIC)评价其体外抑菌效果。[/color][/size][size=15px][color=#595959]将45只雄性BALB/c小鼠分为对照组、模型组、左氧氟沙星组、MXSG-L组(7.7 g/kg/d)、MXSG-H组(15.4 g/kg/d)。[/color][/size][size=15px][color=#595959]采用小鼠鼻内滴注铜绿假单胞菌建立急性铜绿假单胞菌肺炎模型。[/color][/size][size=15px][color=#595959]左氧氟沙星、MXSG口服灌胃,每日1次。[/color][/size][size=15px][color=#595959]治疗3 d后进行肺指数测定、显微CT、动脉血气[/color][/size][size=15px][color=#595959]分析、细菌负荷测定、HE染色。[/color][/size][size=15px][color=#595959]利用[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]网[/color][/size][size=15px][color=#595959]络药理学分析和转录组测序[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]预测[/color][/size][size=15px][color=#595959]MXSG治疗细菌性肺炎的潜在机制。[/color][/size][size=15px][color=#595959]免疫荧光、western blot、RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测相关基因的表达。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]铜绿假单胞菌体外MIC 500 mg/mL。[/color][/size][size=15px][color=#595959]在治疗急性铜绿假单胞菌肺炎模型中,MXSG显著改善了体重减轻、肺脏指数和肺部病变。[/color][/size][size=15px][color=#595959]MXSG处理也显著降低了细菌负荷,改善了氧饱和度。[/color][/size][size=15px][color=#595959]转录组、免疫荧光、Western blot和RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]分析显示,MXSG[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]通过[/color][/size][size=15px][color=#595959]IL-17信号通路[/color][/size][size=15px][color=#595959]和[/color][/size][size=15px][color=#595959]HIF-1α/IL-6/STAT3信号通路[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]治疗急性铜绿假单胞菌肺炎。 [/color][/size] [size=15px][color=#595959]该研究[/color][/size][b][size=15px][color=#595959]证实了MXS[/color][/size][size=15px][color=#595959]G治疗急性铜绿假单胞菌肺炎的疗效及作用机制,为其临床应用提供了科学依据[/color][/size][/b][size=15px][color=#595959]。[/color][/size]

  • “荧光假单胞菌”是“发光猪肉”的元凶

    猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光?昨天下午,北京市工商局对外揭晓“谜底”:通过抽检发现,这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”,与猪肉安全无关。  专家介绍称,该细菌并不可怕,对正常人群不具有致病性。  抽检未发现荧光增白物  近期,有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉,夜晚会发出荧光,担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发,且肉身上有检验检疫章(本报12月12日曾报道)。  近日,北京工商部门组织了抽检,由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测,结果显示,送检样本均未检出荧光增白物质,不过都检出了荧光假单胞菌。  猪肉煮熟可杀灭该细菌  “荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”,中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍,这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中,易生长繁殖。  王贺祥说,荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌,广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中,也是存在于人类肠道的正常细菌,对正常人群不具有致病性,不必对其恐慌。  如何杀灭猪肉上的细菌呢?王贺祥介绍,该菌在42℃就会停止生长,超过70℃,只需数秒即可杀死。  市工商局也表示,消费者购买到的“发光猪肉”,可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌,只要猪肉本身没有腐败变质,可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用,不会对人体健康产生影响。

  • 【求助】铜绿假单胞菌的计数

    请教各位有谁检测过铜绿假单胞菌,检测时做了几个稀释液应该怎样计数,例如下面的表格内容: 稀释度 原液 lO-1 lO-2 lO-3 lO-4 lO-5 lO-6 lO-7 lO-8 菌落数(CFU) 多不可计 多不可计多不可计多不可计 多不可计 16330 0 0

  • 【原创大赛】夏季包装饮用水铜绿假单胞菌浅析

    【原创大赛】夏季包装饮用水铜绿假单胞菌浅析

    最近地摊经济引起热议,大家各种有才点子,其中榜上有名的是“去篮球场卖水”。随着夏天到来,包装饮用水市场也“火热火热”的。出门在外,运动的、逛街的、户外工作的朋友们已经习惯了去路边的小店买水,瓶装水刚需又便捷;在室内有桶装饮用水,“吨吨吨……”喝个满足,喝个痛快,就很棒。[align=center][img=,690,468]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006081106021719_7752_3169908_3.png!w690x468.jpg[/img][/align][align=center][i][size=10px](图片来源:unsplash)[/size][/i][/align]但是,注意了,包装饮用水频上市场监督管理局抽查通报名单。五月至今,全国各地市场监督管理局发布的不合格食品通报中,出现多批次包装饮用水(密封于符合食品安全标准和相关规定的包装容器中,可供直接饮用的水[1])铜绿假单胞菌项目不合格,包括福建省2批次、深圳市3批次、内蒙古2批次、江西省9批次。[b][size=18px]█ 什么是铜绿假单胞菌?[/size][/b]铜绿假单胞菌( Pseudomonas aeruginosa,PA) 别名绿脓杆菌,需氧菌属,是一种条件致病菌, 广泛分布于各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等,易在潮湿的环境存活,对消毒剂、紫外线等具有较强的抵抗力。常以生物膜的形式附着在物体表面,即使在最低营养环境下,细菌总体数量仍然非常高[2]。铜绿假单胞菌最适生长温度为25-30℃,炎炎夏日,正是铜绿假单胞菌生长繁殖的高峰期。[b]对人体危害:[/b]对抵抗力较弱的人群,容易引起急性肠道炎、脑膜炎、败血症和皮肤炎症等疾病。[b]标准要求:[/b]根据GB 19298-2014《食品安全国家标准 包装饮用水》规定,铜绿假单胞菌在包装饮用水中不得检出。[size=18px][b]█ 可能造成包装饮用水铜绿假单胞菌不合格的原因?[/b][/size]1. 原料蓄水池周边环境差,水源污染严重;2. 原料水污染严重,杀菌过程未执行到位;3. 包装材料被污染,清洗消毒过程不彻底;4. 生产设备清洗消毒不彻底;5. 产品贮存、流通运输、销售环节卫生环境差;6. 产品贮存环境无通风,温度过高[b][size=18px]█ 应如何应对?[/size][/b][color=#ff0000][b]一、生产企业应对五到位,人机料法环,一步不能少。[/b][/color]1、人员管理关到位做好员工卫生管理,生产过程中避免人为带入的污染。2、机械设备洗消到位注意回收容器及设备管道等清洗消毒到位。回收容器配备自动刷洗消毒设备,保证内壁的清洗消毒彻底到位。3、原材料验收到位(1)以来自公共供水系统的水为生产用源水的,应定期监测pH值、电导率、余氯等水源水质情况;以来自非公共供水系统的地表水或地下水为生产用源水的,应监测水质波动情况(如水温等),判定水源是否受到外界影响产生异常[3]。(2)保证原材料质量达标;原材料贮存环境干净、卫生,离墙离地存放,保持通风干燥。(3)做好水源管控,水源选址远离污染源、蓄水池定时清洗消毒、水塔安装呼吸器。4、工艺、方法到位(1)严格要求每一个生产消毒工艺,不放松标准要求。(2)原料、产品检验方法依照相关国家标准执行。5、生产环境安全到位(1)清洁作业区对空气进行过滤净化处理,加装空气过滤装置并定期清洁,清洁作业区空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时应达到10000级且灌装局部达到100级,或整体洁净度达到1000级[3]。(2)准清洁作业区及清洁作业区应相对密闭,清洁作业区应安装初效和中效空气净化设备,保证空气循环次数10次/h以上[3]。[b][color=#ff0000]二、经营企业应注意:[/color][/b]卸货注意要离地;存放注意保持干燥通风、干净卫生。贮存注意温度不宜过高。[color=#ff0000][b]三、运输过程应注意:[/b][/color]车辆保持干净卫生,温度不宜过高。[i][size=12px]参考资料[1] GB19298-2014 食品安全国家标准 包装饮用水.[2]王辉,马筱玲,钱渊,等.临床微生物学手册[M]. 第11版.北京:中华医学电子音像出版社,2017:1010-1013.[3]饮料生产许可审查细则(2017版)[/size][/i]

  • 57.10 光合细菌生物转化槲寄生转化机理及其抗肿瘤作用物质基础初步研究

    作者:牛红军(山西医科大学)摘要: 目的:初步研究光合细菌生物转化槲寄生的转化机理,并且对光合细菌生物转化槲寄生培养液中具有细胞毒活性的蛋白质和总三萜类物质进行研究。 方法: 实验一:(1)采用pH计测定光合细菌转化槲寄生过程中培养液pH的变化趋势;(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳法获得光合细菌(PSB)蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱;(3)槲寄生提取液中添加吲哚,以PSB进行生物转化,通过HPLC法测定靛蓝的生成量来反映PSB加氧酶活性。 实验二:将光合细菌转化槲寄生培养液(PSBT)离心,得到PSBT上清液和菌体沉淀。菌体沉淀用超声波辅助冻融法破碎,离心,上清液即为PSBT菌体沉淀提取液。取PSBT上清液及PSBT菌体沉淀提取液,进行硫酸铵沉淀和透析,分别得PSBT上清液总蛋白提取液和菌体沉淀总蛋白提取液。取不同浓度的总蛋白质提取液,用MTT法测定细胞毒活性。 利用AKTA purifier 10层析系统,Hitrap Desalting和CM Fast Flow等层析柱,采用不同缓冲液体系对PSBT上清液总蛋白提取液进行蛋白质纯化。 实验三:采用紫外分光光度法对槲寄生提取物和PSBT中三萜类化合物进行比较研究;分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法(HPLC)对齐墩果酸进行定性分析和含量测定,HPLC色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18 (200mm×4.6mm, i.d.5μm),流动相为甲醇-0.18%的磷酸水(86:14),检测波长210nm,柱温25℃,流速1ml/min。结果: 实验一:(1)接种PSB后,纯PSB培养液pH缓慢上升,PSBT的pH迅速下降;(2)PSBT中菌体蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱与纯PSB培养液中菌体的电泳图谱不同;(3)未得到PSBT和纯PSB培养液中菌体的超氧化物歧化酶(SOD)电泳图谱;(4)加入吲哚后,PSBT中有靛蓝类物质生成,而纯PSB培养液中无靛蓝产生。 实验二:各蛋白质样品的细胞毒活性: (1)上清液总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50,mg/mL,按照槲寄生提取液中原药材含量计算,下同):①IC50200mg/mL:沼泽红假单胞菌转化槲寄生水浸提培养液(浸沼,JZ)是0.18,槲寄生水浸提培养基(浸对,JD)是20,球形红细菌转化槲寄生水浸提培养液(浸球,JQ)是60:②200mg/mLIC502000mg/mL:槲寄生水提培养基(水对,SD)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生水提培养液(水沼,SZ)和球形红细菌转化槲寄生水提培养液(水球,SQ);③IC502000mg/mL:球形红细菌转化槲寄生醇提培养液(醇球,CQ)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生醇提培养液(醇沼,CZ)和槲寄生醇提培养基(醇对,CD)。 (2)上清液总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JD是8,JZ是20,JQ是78,CQ是150;②200mg/mLIC502000mg/mL:SQ。 (3)菌体沉淀总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:SZ是84,CZ是122;②200mg/mLIC502000mg/mL:JQ和JZ;③IC502000mg/mL:纯球形红细菌培养液(球,Q)、纯沼泽红假单胞菌培养液(沼,Z)、SQ和CQ。 (4)菌体沉淀总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JZ是14,JQ是18;②200mg/mLIC502000mg/mL:CZ、CQ和SZ。 (5)其它蛋白样品对肿瘤细胞几乎没有抑制作用。 SZ上清液总蛋白、SQ上清液总蛋白和SD总蛋白在CM Fast Flow层析柱的各种层析条件下都至少得到一个穿透峰和一个洗脱峰,另外,SQ上清液总蛋白在pH5.0的缓冲液体系中还额外分离得到的一个洗脱峰;SZ上清液总蛋白和SQ上清液总蛋白都在pH6.5的缓冲液体系中多分离得到一个小穿透峰。 实验三:CQ和CZ的总三萜含量与CD相比分别增加36%、14.7%;CQ和CZ的齐墩果酸含量与CD相比分别增加925%、281%;SQ、SZ及SD的总三萜和齐墩果酸含量均很低。 结论: (1)培养液中加入槲寄生后,光合细菌参与槲寄生的生物转化反应的某些酶被抑制或激活;(2)各种蛋白质提取液中,PSB转化槲寄生水浸提培养液上清液总蛋白的抑瘤活性最大。各种浓度JZ上清液总蛋白、JQ上清液总蛋白和JD总蛋白的细胞毒活性随作用时间变化的规律不同,但都具有时间-剂量依赖性。由此可知:PSB生物转化后,蛋白质的抑瘤活性规律发生了变化,抑瘤活性的蛋白质组分发生了改变。(3)PSBT中有新的蛋白质组分生成,说明光合细菌可以转化槲寄生成分生成新的蛋白质;(4)槲寄生醇提培养基经过光合细菌生物转化后,总三萜和齐墩果酸含量均增加,球形红细菌转化生成总三萜和齐墩果酸的能力比沼泽红假单胞菌强。三萜类化合物含量的增加可能是PSBT抗肿瘤作用增强的部分物质基础。

  • 包装饮用水铜绿假单胞菌的检查方法

    包装饮用水铜绿假单胞菌的检查方法

    该资料就国家最新发布的GB 19298-2014 GB 《食品安全国家标准包装饮用水》中,对大肠菌群和铜绿假单胞菌的采样方案和微生物限量要求做了详细的图示。特别是铜绿假单胞菌滤膜法的检测,资料上演示了C6水中微生物膜过滤系统上的滤膜法正确操作过程,供检验人员参考。[img=,690,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811291101391320_3276_2443641_3.png!w690x336.jpg[/img][img=,690,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811291101383267_4896_2443641_3.png!w690x333.jpg[/img][color=#ff0000][b]详细资料请见附件。[/b][/color]

  • 【分享】求助 缺陷假单胞菌ATCC19146方面的资料

    [em09512][em09507]求助一下缺陷假单胞菌ATCC19146方面的资料,主要是其生物学特性的资料。因为做过滤验证,虽然知道用这个菌,但是它的好多相关信息都查不到,各位网友,谁有这这个菌的资料,谢谢共享一下。

  • 关于铜绿假单胞菌培养基的问题

    按国标要求,配好的培养基导入平板里面,置于黑暗处,于2度到8度保存,应该放在哪里好,是不是可以放在冰箱的。因为要防止干燥,在一个月内使用,那么培养不是凝固了,又不能煮溶,那么下次拿出来用的时候培养基不就是凝固的状态了,在凝固的状态下可以放滤膜上去,能培养铜绿假单胞菌吗?会不会有影响,正确的方法是怎么样的?有做过这个的吗?

  • 【原创大赛】包装饮用水中铜绿假单胞菌的检测和鉴定

    【原创大赛】包装饮用水中铜绿假单胞菌的检测和鉴定

    包装饮用水中铜绿假单胞菌的检测和鉴定[img=,690,513]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111925505308_7597_2166779_3.png!w690x513.jpg[/img][img=,690,443]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111926022842_4589_2166779_3.png!w690x443.jpg[/img][color=#404040]致病性[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]主要致病物质是[/color][color=red]内毒素[/color][color=#404040],此外尚有菌毛、荚膜、胞外[/color][color=#404040]酶和外毒素等多种致病因子。可引起局部化脓性炎症[/color][color=#404040],也可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃肠炎、心内[/color][color=#404040]膜炎 、脓胸,还可引起菌血症、败血症及引起婴儿严[/color][color=#404040]重的流行性腹泻。[/color][color=#404040][color=#404040] [/color][color=#404040]国内外污染情况[/color][color=#404040]- [/color][color=#404040]参考文献[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]国内污染情况:[/color][color=#404040] -[/color][color=#404040]瓶装天然矿泉水铜绿假单胞菌的检出率[/color][color=#404040]1.2[/color][color=#404040]%~[/color][color=#404040]23.6[/color][color=#404040]%;[/color][color=#404040] -[/color][color=#404040]瓶装饮用纯净水铜绿假单胞菌的检出率[/color][color=#404040]11.6[/color][color=#404040]%。[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]国外污染情况:[/color][color=#404040] -Richards[/color][color=#404040]等在[/color][color=#404040]104[/color][color=#404040]件检品中的[/color][color=#404040]4[/color][color=#404040]件分离到铜绿假单胞菌;[/color][color=#404040] -Rosenberg[/color][color=#404040]报告德国[/color][color=#404040]1.2[/color][color=#404040]%~[/color][color=#404040]10.2[/color][color=#404040]%的瓶装矿泉水检出铜[/color][color=#404040] 绿假单胞菌。[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]刚出厂的产品中铜绿假单胞菌数量较少,但有文献报[/color][color=#404040] 道[/color][color=#404040]5[/color][color=#404040]加仑桶装产品([/color][color=#404040]15[/color][color=#404040]~[/color][color=#404040]31[/color][color=#404040]天的保存期),铜绿假单胞[/color][color=#404040] 菌可生长繁殖达到 [/color][color=#404040]10^4 CFU/ml[/color][color=#404040]。[/color][/color][color=#404040][color=#404040]• [/color][color=#404040]国内卫生标准:[/color][color=#404040]0 CFU/250ml[/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#262626]二、实验室检验[/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040] [/color][color=red]GB 8538-2016 [/color][color=#404040]铜绿假单胞菌检测(滤膜法)[/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040]原 理 将250mL水样用孔径为0.45μm的滤膜过滤,并将滤膜移至CN琼脂培养基上,于36℃士1℃恒温箱中培养48h,能够在CN琼脂上生长并产生绿脓菌素,或者能够在CN琼脂上生长并且氧化酶呈阳性、紫外光(360±20nm)照射下能发荧光、能够利用乙酰胺产氨的革兰氏阴性无芽孢杆菌,经证实为铜绿假单胞菌,则其检测结果为阳性。[/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040][img=,690,513]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111930447074_3628_2166779_3.png!w690x513.jpg[/img][img=,690,496]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111930529842_4361_2166779_3.png!w690x496.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040]操作步骤-水样过滤 在100级的洁净工作台进行过滤操作。首先用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将250mL水样或稀释液通过孔径0.45μm的滤膜过滤,然后将过滤后的滤膜贴在已制备好的CN琼脂平板上,平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。[/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040][img=,690,518]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111939198094_2367_2166779_3.jpg!w690x518.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#404040][color=#262626][color=#404040][img=,690,504]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111941176488_2216_2166779_3.png!w690x504.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#262626][color=#404040][color=#404040]可疑菌落计数情况[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]计数所有显[/color][color=red]蓝色或绿色(绿脓色素)[/color][color=#404040]的菌落,初步判定为铜绿假单胞菌。(需要做绿脓菌素的测定)[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]计数滤膜上所有[/color][color=red]发荧光不产绿脓色素[/color][color=#404040]疑似铜绿假单胞菌菌落,并进行乙酰胺肉汤确定试验。[/color][color=#404040](在紫外线下检查滤膜时,应避免长时间在紫外光下照射,否则可能会将平板上的菌落杀灭,而导致无法在证实培养基上生长。)[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]将其它所有[/color][color=red]红褐色不发荧光[/color][color=#404040]的菌落进行氧化酶试验、乙酰胺肉汤、金氏[/color][color=#404040]B[/color][color=#404040]培养基确证实验。[/color][/color][/color][color=#262626][color=#404040][color=#404040][img=,690,520]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111942538578_905_2166779_3.png!w690x520.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#262626][color=#404040][color=#404040][img=,690,518]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111945093378_4789_2166779_3.png!w690x518.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#262626][color=#404040][color=#404040]纯 化• 营养琼脂:将需验证的可疑菌落划线接种营养琼脂培养基,于36℃±1℃培养 20h~24h,对可疑菌进行纯化[/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040] 将最初显红褐色的菌落进行[/color][color=red]氧化酶试验[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]氧化酶试验 :[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]原理:氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素[/color][color=#404040]C[/color][color=#404040]氧化,再由氧化型细胞色素[/color][color=#404040]C[/color][color=#404040]使对苯二胺氧化,生成有色的醌类化合物。[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]操作:取[/color][color=#404040]2[/color][color=#404040]~[/color][color=#404040]3[/color][color=#404040]滴新鲜配制的氧化酶试剂滴到放于平皿里的洁净滤纸上。用铂金丝接种环或玻璃棒,将适量的纯种培养物涂布在预备好的滤纸上。在[/color][color=#404040]10[/color][color=#404040]秒内显深蓝紫色的视为阳性反应。也可以按照商品化氧化酶测试产品的说明书进行该项测试。[/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040]产氨实验([/color][color=red]乙酰胺肉汤[/color][color=#404040])[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]原理:铜绿假单胞菌产生一种脱酰胺酶,可使乙酰胺经脱酰胺作用释放氨,滴加[/color][color=#404040]钠氏试剂(碘化汞钾),氨在碱性条件下与碘化汞钾作用,生成红色的络合物。[/color][color=#404040]• 操作:将纯培养物接种到装有乙酰胺肉汤的试管中,在36℃±1℃下培养20h~24h。然后向每支试管培养物加入1~2滴钠氏试剂,检查各试管的产氨情况,如表现出从[/color][color=red]深黄色到砖红色[/color][color=#404040]的颜色变化,则为阳性结果,否则为阴性。[/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040][img=,690,504]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810111959063912_4540_2166779_3.png!w690x504.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040]产荧光素实验([/color][color=red]金氏[/color][color=red]B[/color][color=#404040]培养基)[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]原理:蛋白胨提供氮源,磷酸盐促进荧光素的产生并抑制绿脓色素的产生,硫酸镁为荧光素的产生提供必须的阳离子,琼脂是培养基的凝固。[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]操作:将上述呈红褐色的且氧化酶反应呈阳性的培养物接种于金氏[/color][color=#404040]B[/color][color=#404040]培养基上,于[/color][color=#404040]36℃±1℃[/color][color=#404040]恒温箱培养[/color][color=#404040]24h[/color][color=#404040]~[/color][color=#404040]5d[/color][color=#404040]。 每天需取出在紫外灯下检查其是否产生荧光性,将[/color][color=#404040]5d[/color][color=#404040]内产生荧光的菌落记录为阳性。[/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040][img=,690,515]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810112001313728_3277_2166779_3.png!w690x515.jpg[/img][/color][/color][/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040]计数结果说明[/color][color=#404040]• [/color][color=#404040]菌落计数公式:[/color][/color][/color][color=#404040]N[/color][color=#404040]=[/color][color=#404040]P[/color][color=#404040]+[/color][color=#404040]F([/color][color=#404040]cF/nF[/color][color=#404040])[/color][color=#404040]+[/color][color=#404040]R([/color][color=#404040]cR/nR[/color][color=#404040])[/color][color=#404040][color=#404040][color=#404040][/color][color=#404040]- P[/color][color=#404040]是呈蓝[/color][color=#404040]/[/color][color=#404040]绿色的菌落数(所有证实为铜绿假单胞菌的菌落)。[/color][color=#404040]- F[/color][color=#404040]是没有绿脓色素但显荧光的菌落数。[/color][color=#404040]- R[/color][color=#404040]是呈红褐色的菌落数。[/color][color=#404040]- [/color][color=#404040]nF[/color][color=#404040]是进行产氨测试的显荧光菌落数。[/color][color=#404040]- [/color][color=#404040]cF[/color][color=#404040]是产氨阳性的显荧光菌落数。[/color][color=#404040]- [/color][color=#404040]nR[/color][color=#404040]是进行产氨、氧化酶、金氏[/color][color=#404040]B[/color][color=#404040]培养基上显荧光测试的红褐色菌落数。[/color][color=#404040]- [/color][color=#404040]cR[/color][color=#404040]是产氨、氧化酶、金氏[/color][color=#404040]B[/color][color=#404040]培养基上显荧光测试均呈阳性的红褐色菌落数。[/color][/color][/color][color=#262626][color=#404040][color=#A53010]′[/color][color=#404040]样品稀释:[/color][color=#404040] [/color][color=#404040]若样品污染严重,建议对样品进行稀[/color][color=#404040] 释,如[/color][color=#404040]10[/color][color=#404040]倍递增稀释:取[/color][color=#404040]30ml[/color][color=#404040]样液加入[/color][color=#404040] 至[/color][color=#404040]270ml[/color][color=#404040]无菌生理盐水中,混匀,以此类[/color][color=#404040] 推,进行系列稀释。[/color][color=#A53010]′[/color][color=#404040]报 告:[/color][color=#404040] 结果以 [/color][color=red]CFU/250ml[/color][color=#404040]计。[/color][/color][/color]

  • 沼泽地土壤浸提液无法检测出硝酸盐

    沼泽地中土壤鲜样,采用2mol的氯化钾进行浸提后上机,采用硫酸肼还原法进行检测。标准曲线0.997,1mg标样吸光度为0.44,样品加标也能正常检测出结果,但是样品吸光度为负数,无法检测出结果!这种情况是浸提方式有问题,还是样品硝酸盐含量太低?

  • 【讨论】万子红公开钻石业暴利秘密 万元钻戒成本三千

    除了钻石业,你认为还有什么行业会有这么大利润?某些仪器行业中会存在这么大的利润么?对于很多行业来说,成本,都是个不能说的秘密。但是,一旦有人讲出来,那原因一定不简单。相关链接:【讨论】在钻石检测中会用到哪些仪器?http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110607/3350583/【资料】Avantes光纤光谱仪在快速钻石检测中的应用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110607/3350577/公开“出厂价格”——钻石行业最大的秘密被公开 在钻石产业中,钻石珠宝商、钻石批发商与钻石切割厂在买卖交易钻石时,都会以国际钻石报价单(Rapaport Diamond Report)作为交易的价格参考。国际钻石报价单的钻石等级,依循美国宝石学院(GIA)的“4C标准”对钻石进行分级,任何一颗钻石,只要明确了其“4C标准”,都可以在报价单上找到其对应的基准价格。 但是,国际钻石报价单一直都是行业上游使用的“内部资料”,每周五由纽约钻石交易所提供给全球钻石珠宝商、批发商与钻石切割厂作为交易价格依据,只有得到认证的会员付费后才能获得。虽然国内一些网站和论坛上也可以零星查到一部分报价单,但时间上往往比较滞后。 然而,就在近期,却有人偏偏将报价单公布给消费者,这就使得钻石行业内最大的秘密——成本变得几乎透明。 这一事件一出,顿时在整个钻石行业中引起了轩然大波。而捅破这层窗户纸的搅局者叫万子红,他去年曾经参与创办了国内最早、最具影响力的量贩式钻石卖场——北京每克拉美钻石商场,其广告语“同样一颗钻,价钱省一半”,曾轰动了整个北京甚至全国市场。如今,他又另起炉灶,创办了全城热恋钻石商场,同样也是自营式量贩钻石卖场。 然而这一次,万子红似乎“做得更彻底”,将钻石行业的“内参”公之于众。“任何一位消费者,只要到我们店里,都可以在前台免费领取一份最新的国际钻石报价单,然后你就可以对应着报价单来计算出你所要钻石的出厂价格。”万子红告诉《中国经济周刊》。 “传统商场由于是商场与中间商(或称品牌商)的联营模式,中间商的利润平均要占到售价的42%,如果是品牌溢价更高的品牌商,这个比例会更高;进入商场后,商场一般要抽取营业额25%作为扣点。这就意味着,即使在行业平均水平之下,钻石的出厂成本价只占钻石销售价格的33%左右。”万子红说。 “我们这种自营量贩卖场直接从厂家进货,也无需交纳商场返点,只是在进货价格的基础上,加上房租、人工等销售成本以及合理的利润,就销售给消费者。目前,我们平均的加价率在17%左右,裸钻会更低。”万子红说,“因此,我们之所以能够便宜一半,其实没有什么奥秘,只是别人都卖得太贵而已。” “和黄金是在基础金价上向上加价不同,钻石则是以报价单基数为基础向下打折,报价单的价格其实是一个高点。如果采购量大的话,进货价格会更低。”一位不愿具名的业内人士告诉《中国经济周刊》,“所以,即使只加价17%,也并非像看上去赚得那么少。”

  • 运营在线面临挑战《宇星科技:“榜星”公司陷入造假沼泽》

    [size=6][b]宇星科技:“榜星”公司陷入造假沼泽[/b][/size][img]file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/[5UQ[BL(6~BS2JV6W%7DN6[%25S.png[/img]http://finance.qq.com/a/20130907/000494.htm数个省市环保局的禁令,将一家曾经风云在各大评选榜单的“明星”企业宇星科技发展(深圳)有限公司推向风口。本报记者经过多方调查与核实,过去三年间,因设备运营不力和监测数据造假,宇星科技收到数张地方环保部门的“通报单”,其中甚至包括全省市场禁入的指令。宇星科技曾被媒体描述为:“集环保监测设备、环境监测与应急指挥系统开发及环境治理软件等业务于一体的大型环保企业。”其竞争对手[url=http://stockhtm.finance.qq.com/sstock/ggcx/300203.shtml][color=#000000]聚光科技[/color][/url]在招股书引用的行业报告也显示,环境监测仪器、仪表行业中,已上市的聚光科技市场占有率第一,宇星科技紧随美国哈希之后,位列第三。不过,在2007年到2010年连续被风险投资基金热捧之后,宇星科技暴露的信用危机正令投资者望而却步。一位明确表示不会接单宇星科技的机构合伙人表示,“造假行为切实存在,处罚公开,这不能简单归结为行业现象,团队自身肯定有问题”。这场危机似乎远未停止。查出宇星科技造假的环保部华东督查中心,曾建议江西省环保厅取消宇星科技的第三方运营资格,但有媒体调查发现,宇星科技仅受到湖口县环保局一万元罚款,此后继续在金砂湾工业园内运营;虽然在河南省环保厅通报中屡次垫底,却仍在2013年获得该省数笔订单。对于宇星科技上述的禁止令和各地环保局指出的“造假”现象,本报记者将继续展开调查。[b]被禁止入市的“明星”公司[/b]今年7月,江苏省宿迁市进行市区污染源自动监控系统社会化运营维护项目的招标的过程中,宿迁市网络问政平台宣称接到举报:宇星科技“数据造假”、“运营不力”……这封举报信还将宇星科技在各地环保部门的通报记录悉数呈现。记者核查发现,最近的一次通报发生在2012年6月。宇星科技在运营中以自身生产的仪表替代广东省佛山市南海区水站原有进口设备,故意拖延故障设备维修期限,造成水站原有的仪表设备长期停机。据披露,2011年5月,通过政府采购的方式,宇星科技获得佛山市南海区水源水质自动监测站的一年运营资格。合同期间的两次半年审核中,宇星科技均领到“不及格”黄牌。南海区环保局人士向本报记者证实,环保局负责在南海第二水厂前端提取原水,实行24小时在线检测,而宇星公司负责水质自动站的所有设备运营维护。但由于维护不力,水站系统频繁出现故障,并长期处于停顿或半瘫痪状态。据称,南海环保局原本希望通过财政局采购中心对宇星科技进行行政处罚,但由于举证材料不全,最后只通过环保局网站做出了通报。合同期满后,环保局中止同宇星的合作,正在采购中心进行下一年度的采购。被南海环保局定性为运营不力的宇星科技,在江西湖口县和乌鲁木齐屯河区两地则被查出配合被监管企业“改动数据”。乌鲁木齐环保厅文件显示,宇星科技为屯河区某企业安装的在线监控设备停止运行后,数据仍在“正常”传输。经检查,该公司安装的在线监控设备仅为摆设,以其他方式使设备看上去在“正常运转”。类似的情况发生在江西湖口。2007年6月,宇星科技继签定湖口环保局监测中心建设合同后,又与湖口9家企业签定污染源监测建设合同——这些企业受地方环保局要求,在排放口安装在线监控设备。2010年10月16日,环保部华东督查中心的一次抽查发现,宇星科技为江西湖口金砂湾工业园诺贝尔(九江)高材料有限公司运营的出水总排口COD(化学需氧量)自动在线监控设备中,采样瓶、标样瓶均被矿泉水瓶代替,宇星方面工作人员与诺贝尔“自行商定”,“擅自停运该设备,并改动数据”。尽管督查中心建议江西省环保厅取消宇星科技的第三方运营资格,但此后一年媒体回访发现,宇星科技仍在金砂湾工业园内运营,仅受到湖口县环保局一万元罚款处罚。相比之下,广西壮族自治区给予的处罚较为严厉。2010年年中,某垃圾处理厂改扩建项目中标公示期间,宇星科技被知情者举报,其提供的马立峰一级注册建造师证书为伪造。广西住房和城乡建设厅下文,暂停宇星在广西参加投标活动和承揽新的工程业务,时间为2年。禁入期满后,宇星科技于今年3月才重新回到广西市场,中标一项农村饮水安全工程。不过,宇星科技在河南省得到的待遇却显得“优厚”。2013年,全省通报中排名靠后的宇星科技继续从河南省获得5笔订单,最近的一笔为上月中标河南省水资源管理系统取用水户水量监测建设工程II包。在本报获得的一份宇星科技财报中,河南省环保厅在其他应收账款项目中位居第一,以200万的履约[url=http://stockhtm.finance.qq.com/fund/djj_jjcx/159001.htm][color=#000000]保证金[/color][/url]估算,其投向宇星科技的订单总额在6000万人民币左右。[b]“击鼓传花”:寻找接盘者?[/b]宇星科技发展(深圳)有限公司前身为深圳市宇星科技发展有限公司,2002年3月由深圳市华利通科技有限公司、宁波大榭开发区通兴技术有限公司和沈阳市达讯技术有限责任公司共同出资设立,注册资本为100万元。历经数轮增资增股后,宇星在2005年3月进行了最为重要的一次股权结构变革:原有股东所持的股份全部转让给设于境外的公司GLOBALWIDE ASSETS MANAGEMENT LIMITED。2007年12月、2008年11月、2010年4月,宇星科技三次引入风险资本,领投方均为凯鹏华盈亚洲基金(KPCB),方源资本在B轮跟投。时任KPCB中国合伙人的钟晓林出任宇星科技董事。迅速扩展的数年内,宇星科技的注册资本逐次越过9500万、1.65亿,直至2011年10月的4亿人民币。在此期间,宇星公司频频亮相国内企业排行榜,“斩获”福布斯“最具潜力企业20强”头筹,以及两次德勤“高科技、高成长企业50强”。总裁李野时为宇星公司的对外代言人。从2005年起,宇星内部陆续传出上市计划;2010年福布斯颁奖礼上,李野公开发言表示,宇星科技“将来肯定要上市”,“如果有一个资金进来,可以迅速实现盈利模式。宇星科技目前应该说不缺钱,但是你给我十个亿、一百个亿我也可以给你花掉”。李野何许人也?据个人公开简历,李野毕业于南京通信工程学院通信工程专业,在出任宇星科技董事长之前,曾先后担任辽宁省东北微电子软件股份有限公司董事、副总经理,深圳市成功电气技术有限公司董事长、总经理。后者成立于2000年6月,是宁波成功信息产业股份有限公司(简称“甬成功”,股票代码000517)的控股子公司。这家来自宁波的[url=http://finance.qq.com/l/stock/shsgs/index.htm][color=#000000]上市公司[/color][/url]曾在2005年8月31日发布董事会公告,表示此前的年度财务报告经自查存在重大会计差错,涉及需调减期初未分配利润4522.39万元,但所涉及的具体年度及每年度的具体金额尚无法确认追溯调整。然而,在证监会规定的期限内,“甬成功”未能履行披露职责,导致公司股票从11月1日起停牌数月。李野作为承担主要责任的公司董事之一,在当年12月29日被深交所予以公开谴责,并记入上市公司诚信档案中。据披露,宇星科技的实际控制人为加拿大籍华人余仲。工商资料变更记录显示,2012年5月,余仲从幕后走上前台,取代李野成为公司法定代表人,而李野则继续担任公司总裁。根据可靠信源,由于[url=http://finance.qq.com/stock/xingu/][color=#000000]IPO[/color][/url]无望,从2012年开始,宇星科技就一直在寻找潜在的募资或者收购方,意向收购方包括国内唯一一家主业为[url=http://stockhtm.finance.qq.com/hcenter/index.htm?page=1020195][color=#000000]节能减排[/color][/url]、环境保护的中央企业——中国节能环保集团。但始终未果。一位知情的VC合伙人告诉本报,宇星暴露的信用危机令投资者却步,“造假行为切实存在,处罚公开,这不能简单归结为行业现象,团队自身肯定有问题”。公开材料,宇星科技2006年到2008年的加权销售增长超过200%,加权净利润增长率达到190%;而这一速度在2009年后明显放缓,2009至2011三年公司营收分别为5.6亿、7.1亿以及8.8亿。在2012年前三季度,公司应收账款突破11亿,而1年以内应收账款比例却在降低,2-3年期账龄的比重已从约18%攀升至近36%。今年6月28日,《南方周末》刊出一篇调查性报道《百亿在线监测工程:造假仅需垫几块砖》,将宇星科技作为第三方监测造假的典型案例。不止一位接触过该项目的投资人对宇星科技的营收状况提出了质疑。本报记者将继续对此进行调查。[b]商业模式困境:技术门槛低的红海?[/b]从成立时的默默无闻,到成为被追捧的环保概念公司,再到屡受通报的环保服务提供商,宇星科技走过了十年时间。2002年,初创的宇星科技和后来上市的聚光科技,同处环境监测的一片“荒漠”,据李野回忆,公司提供的产品,在国家不要求的情况下无人购买,从一开始就需要耐心地跟客户讲,“一定要一个政策监测环境质量”。而实际上,根据公司的财务数据,宇星并没有走出靠仪器仪表相关业务支撑主要营收的模式,三大主营业务中,环境监测系统始终占据主导。一位PE投资人评价认为,从行业的专业度划分来讲,宇星科技更应该被归入电子仪器业的范畴。但越过2010年,这一领域技术的国产化已取得实质性突破。在《国家环境保护“十二五”规划》中,四大发展方向为臭氧发生器、膜工艺、难降解的有机废水处理、污泥。“没有再提到仪器仪表”,通用投资咨询公司董事薛涛指出。正是在宇星科技原本擅长的污水监测领域,设备和监测技术已逐渐通行,薛涛告诉本报记者,行业竞争近年日趋白热化,缺乏技术优势的公司陷入低价竞争的漩涡。地方上的第三方环境监测服务多外包给小型公司,而设备购买往往需要通过环保局的采购线,因此通过政府关系以低价抢单,成为业内常见的现象。一位节能领域从业者向本报透露,被监测企业要求第三方监测公司篡改数据的情况时有发生。“在一个技术门槛低的红海领域,假如你不接单,客户很有可能选择其他愿意配合其修改监测数据的公司”,这位从业者说,“劣币驱逐良币”在所难免。“要么拼技术,要么拼资本”,薛涛说道,由于中国的竞争模型,低档次的环保器材企业比拼数量,生存环境愈发恶劣。而以重资产占据渠道的大型污水处理公司,生存周期更长。全国工商联环境服务业商会秘书长骆建华在接受本报记者采访时表示,即便第三方监测企业面对企业及地方政府的压力,“做监测的企业不做假数据,是最基本的要求”。在环保法修订案中,他建议参考美国的《清洁空气法》,将篡改监测数据的行为入刑,在行政约束力之外,提供另一道法律保障。[url=http://www.qq.com/?pref=article][img=,16,16]http://www.qq.com/favicon.ico[/img][size=14px][color=#5170a6]返回腾讯网首页[/color][/size][/url]

  • 146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]

    培养基及成分 1、Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种 2、 Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 :When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 3、Azotobacter Medium (固氮菌培养基) KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O   0.1g Na2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量) Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g Adjust (调) pH to 7.2 适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌 4、Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml :Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5、Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)、嗜热乳酸链球菌 6、Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌) 7、Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基) Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L 8、Glycerol Agar (甘油琼脂) Peptone (蛋白胨) 5g Beef extract (酵母膏) 3g Glycerol (甘油) 20g Top water (自来水) 1000ml Agar (琼脂) 15g pH 7.0-7.2 9、Rhizobium medium (根瘤菌培养基)AS 9 Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 800ml pH 7.2 :Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小时,经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围:大豆根瘤菌(慢生型)、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌(快生型)、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10、 Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11、 Glucose Asparagine (葡萄糖、天门冬素琼脂) Glucose (葡萄糖) 10g Asparagine (天门冬素) 0.5g K2HPO4 0.5g Water (水) 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围:刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌(绛红小单孢菌) 12、Gause′s Synthetic Agar (高氏合成一号琼脂) KNO3 1g Soluble starch(可溶性淀粉) 20g K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4 0.01g Agar (琼脂) 20g water (水) 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围:刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌(绛红小单孢菌)、白黄链霉菌、白色链霉菌、抗生链霉菌、双重轮丝链霉菌、产色链霉菌、烬灰链霉菌、天蓝色链霉菌、灭蚊链霉菌、红霉素链霉菌、青色链霉菌、球孢链霉菌、浅灰链霉菌、灰色链霉菌、吸水链霉菌、淡紫灰链霉菌、黄色长孢链霉菌、藤黄色链霉菌、细黄链霉菌、黑化链霉菌、玫瑰色链霉菌、华美链霉菌、嗜热链霉菌、委内瑞拉链霉菌、紫色直丝链霉菌、紫色链霉菌、绿色链霉菌 13、Wort Agar (麦芽汁琼脂) Dilute the world (without hop) to 12 Brix. Add 15g agar into 1000ml of the diluted word..Melt the agar by heating, then distribute the medium into tubes. Autoclave at 110 for 30 minutes. (将发酵啤酒的原料(未加酒花),稀释至12柏林,加琼脂15克,溶化后分装。15磅灭菌30分钟。) 适用范围:克鲁斯假丝酵母、郎比可假丝酵母、解脂假丝酵母、马其顿假丝酵母、拟热带假丝酵母、粗壮假丝酵母、皱褶假丝酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母、阿舒假囊酵母、白地霉、果香地霉、地霉属、异常汉逊酵母、异常汉逊酵母变种、阿拉伯糖醇汉逊酵母、施氏汉逊酵母、菅囊

  • 乳中嗜冷菌及对乳品品质的影响

    在生乳中的大部分嗜冷菌属于假单胞菌科,包括革兰氏阴性无芽孢的非发酵假单胞菌属。荧光假单胞菌是乳中最长分离的假单胞菌。草莓假单胞菌和恶臭假单胞菌重要性稍差。动物、种植物、水、土壤是乳中发现假单胞菌的主要来源。被污染的设备和空气提供了另外一个的污染来源。特别是在加工后,乳中只需要很少的菌量就能使冷藏设备中的乳在5天内腐败变质。这些微生物在乳中的生长繁殖导致的缺陷包括苦味和水果异味。虽然革兰氏阴性嗜冷菌对热没有抵抗力,但他们产生的热稳定的胞外蛋白水解酶和脂肪水解酶,能破坏热处理后的乳制品。其他的腐败革兰氏阴性杆菌包括不动杆菌、黄杆菌、嗜冷杆菌、产碱杆菌和腐败希瓦氏菌。1. 莫拉氏菌家族莫拉氏菌属于革兰氏阴性嗜冷菌,不能运动,无色素,为需氧球杆菌。他们有三类,不动杆菌属氧化酶阴性菌,莫拉氏菌属于氧化酶阳性菌,第三种为嗜冷杆菌。莫拉氏菌很少破坏乳,主要是因为它们缺乏充足的生化活性,不能发生蛋白水解和脂肪水解以产生异味。此外,它们在冷藏过程中会被假单胞菌的繁殖而超越。2. 产碱杆菌属产碱杆菌属于革兰氏阴性需氧短杆菌,不能代谢乳糖,可在水、土壤和乳中被发现。粪产碱菌可产生胞外多糖,是乳制品潜在的污染。产碱杆菌能够在冰箱温度下生长,产生不愉快的气味并降低乳制品的货架期。3. 腐败希瓦氏菌腐败希瓦氏菌属于革兰氏阴性杆菌,先前被认为是腐败假单胞菌属或腐败互生单胞菌。可在水、土壤和被污染的乳与乳制品中被发现,是导致污染奶油表面污斑的原因。4. 黄杆菌属黄杆菌是在水、土壤和乳中发现的革兰氏阴性微生物。它们可以水解酪蛋白并导致冷藏期中乳与乳制品的腐败变质。

  • 天然产物雷公藤红素抑制耐药金黄色葡萄球菌的直接靶点

    [size=15px][font=宋体]金黄色葡萄球菌([/font][font=&]Staphylococcus aureus[/font][font=宋体])是医院感染最常见的病原体,已成为全球主要的公共卫生威胁之一。随着“超级细菌”耐甲氧西林金黄色葡萄球菌([/font][font=&]MRSA[i][/i][/font][font=宋体])的出现和迅速传播,治疗金黄色葡萄球菌感染变得愈发困难,临床上迫切需要发现新的超级抗生素来应对超级细菌的威胁。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=宋体][b]天然产物雷公藤红素[i][/i]在体外和体内均能有效对抗[/b][/font][b][font=&]MRSA[/font][font=宋体],且雷公藤红素靶向Δ[/font][font=&]1-[/font][font=宋体]吡咯啉[/font][font=&]-5-[/font][font=宋体]羧酸脱氢酶(Δ[/font][font=&]1-Pyrroline-5-Carboxylate Dehydrogenase[/font][font=宋体],[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体])发挥抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]作用。机制上,[/font][font=宋体]雷公藤红素通过与[/font][font=&] P5CDH [/font][font=宋体]结合诱导氧化应激[i][/i]并抑制[/font][font=&] DNA [/font][font=宋体]合成。[/font][/b][font=宋体]这项研究的结果表明雷公藤红素是一种有前途的先导化合物,并证实[/font][font=&] P5CDH [/font][font=宋体]是开发抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]新型药物的潜在靶点。[/font][/size] [size=15px][b][font=&]1[/font][font=宋体]、雷公藤红素在体外表现出对抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]的强效活性[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]作者首先通过[/font][b][font=宋体]体外实验[/font][/b][font=宋体]发现雷公藤红素对[/font][font=&]MRSA USA300[/font][font=宋体]表现出显著的抗菌活性,最低杀菌浓度([/font][font=&]MBC[/font][font=宋体])为[/font][font=&]8μg mL ?1[/font][font=宋体],在浓度为[/font][font=&]1[/font][font=宋体]和[/font][font=&]2 μg mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体]时,雷公藤红素完全抑制了菌株的生长,根据[/font][font=&]MBC[/font][font=宋体]和[/font][font=&]MIC[/font][font=宋体]值确认雷公藤红素是一种很有前途的抗[/font][font=&] MRSA[/font][font=宋体]药物[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&]2[/font][font=宋体]、雷公藤红素在不同感染模型中表现出潜在的治疗能力[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]作者通过[/font][b][font=宋体]体内实验[/font][/b][font=宋体]评估雷公藤红素在[/font][font=&]3[/font][font=宋体]种不同感染模型(大蜡螟幼虫模型和两种小鼠感染模型)中的治疗能力,发现雷公藤红素提高了被[/font][font=&]MRSA USA300[/font][font=宋体]感染的大蜡螟幼虫的存活率,改善小鼠的[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]皮肤感染,提高[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]菌血症[i][/i]模型的存活率。这些结果表明雷公藤红素具有优异的体内抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size] [align=center][img=图片,1,]data:image/svg+xml,%3C%3Fxml version='1.0' encoding='UTF-8'%3F%3E%3Csvg width='1px' height='1px' viewBox='0 0 1 1' version='1.1' xmlns='http://www.w3.org/2000/svg' xmlns:xlink='http://www.w3.org/1999/xlink'%3E%3Ctitle%3E%3C/title%3E%3Cg stroke='none' stroke-width='1' fill='none' fill-rule='evenodd' fill-opacity='0'%3E%3Cg transform='translate(-249.000000, -126.000000)' fill='%23FFFFFF'%3E%3Crect x='249' y='126' width='1' height='1'%3E%3C/rect%3E%3C/g%3E%3C/g%3E%3C/svg%3E[/img][/align][align=center] [/align] [size=15px][b][font=&]3[/font][font=宋体]、多组学分析发现新型抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]靶点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]接着研究人员[/font][b][font=宋体]通过转录组学、蛋白质组学和代谢组学分析了[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]治疗后的细胞变化[/font][/b][font=宋体],揭示了雷公藤红素抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性的可能靶点,多组学分析表明雷公藤红素上调应激反应[i][/i]和氧化磷酸化,而下调氨基酸和核苷酸、天冬氨酸、谷氨酸和嘧啶代谢的生物合成。这些代谢通路与[/font][font=&]Δ1-[/font][font=宋体]吡咯啉[/font][font=&]-5-[/font][font=宋体]羧酸脱氢酶([/font][font=&]P5CDH, [/font][font=宋体]由[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]基因编码)相关。因此,作者推测[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]是抗菌药物开发的潜在靶点 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]4[/font][font=宋体]、[/font][font=&]P5CDH [/font][font=宋体]是一个潜在的抗菌靶点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][b][font=宋体]为了进一步确定[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]作为潜在的抗菌靶点,作者构建了[/font][font=&]MRSA USA300 rocA[/font][font=宋体]敲除菌株和补充菌株(Δ[/font][font=&]:: rocA [/font][font=宋体])[/font][/b][font=宋体],发现[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]缺失显著损害细菌生长,而补充菌株在生长方面与[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]相同。此外,突变后雷公藤红素对[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]的[/font][font=&]MIC[/font][font=宋体]由[/font][font=&]1[/font][font=宋体]变为[/font][font=&]8[/font][font=宋体]μ[/font][font=&]g mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体],而补充[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]基因后又恢复到[/font][font=&]1[/font][font=宋体]μ[/font][font=&]g mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体],说明雷公藤红素的抗菌活性部分是通过抑制[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]来实现的[/font][/size] [size=15px][b][font=&]5[/font][font=宋体]、雷公藤红素与[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]直接结合[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][b][font=宋体]由于蛋白质组学分析中雷公藤红素并没有显著影响[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]的表达,因此研究推测雷公藤红素通过靶向[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]并影响其功能来发挥抗菌活性。[/font][/b][font=宋体]接着通过分子对接、[/font][font=&]BLI[/font][font=宋体]、[/font][font=&]CETSA[/font][font=宋体]、圆二色谱和酶活性测定,证实雷公藤红素能够直接结合影响[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体],影响其酶活 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]6[/font][font=宋体]、[/font][font=&]K205A[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208A[/font][font=宋体]是[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]与雷公藤红素的关键结合位点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]接着,[/font][b][font=宋体]作者采用了分子对接和定点诱变技术揭示雷公藤红素结合位点[/font][/b][font=宋体]。分子对接成功预测出[/font][font=&]3[/font][font=宋体]个结合位点,分别为[/font][font=&]Lys205[/font][font=宋体]([/font][font=&]K205A[/font][font=宋体])、[/font][font=&]Glu208[/font][font=宋体]([/font][font=&]E208A[/font][font=宋体])和[/font][font=&]Asp209[/font][font=宋体]([/font][font=&]D209A[/font][font=宋体])。随后,作者构建了三个突变质粒并表达相关蛋白。[/font][b][font=&]BLI[/font][font=宋体]分析显示[/font][font=&]K205[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208[/font][font=宋体]突变后雷公藤红素结合能力显著降低,且不再抑制其酶活,表明[/font][font=&]K205[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208[/font][font=宋体]是结合的关键残基[/font][/b][/size] [size=15px][b][font=&]7[/font][font=宋体]、雷公藤红素促进氧化损伤[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]有文献报道[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]通过影响[/font][font=&]P5C-Pro[/font][font=宋体]循环的平衡进而对产生[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]至关重要,[/font][b][font=宋体]作者推测雷公藤红素可能通过氧化损伤发挥抗菌作用。通过对[/font][font=&]WT [/font][font=宋体]或[/font][font=&] Δ:: rocA [/font][font=宋体]组、[/font][font=&]Δ rocA[/font][font=宋体]组菌株采用雷公藤红素或乙醛酸([/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]抑制剂)[/font][/b][font=宋体],发现雷公藤红素扰乱[/font][font=&]P5C-Pro[/font][font=宋体]循环的平衡。此外,[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组的[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]水平升高。其中,雷公藤红素治疗组[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]升高最为显著,可能是因为雷公藤红素是一种多途径抗菌剂,可以通过多种方式刺激[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]生成。结果表明氧化损伤是雷公藤红素重要的抗菌机制[/font][/size] [size=15px][b][font=&]8[/font][font=宋体]、雷公藤红素诱导细菌死亡[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]为研究雷公藤红素处理后[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]死亡情况,作者用[/font][font=&]DAPI[/font][font=宋体]标记细胞中的[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体],在[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组均观察到染色体凝聚,提示有细菌死亡发生,特别是雷公藤红素处理的细菌出现了凋亡小体形成和萎缩等细菌死亡形态学特征。在[/font][font=&]TUNEL[/font][font=宋体]染色实验中,与未接受药物处理的[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]细胞相比,雷公藤红素处理的[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]细菌荧光较强,提示有[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]双链断裂出现 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]9[/font][font=宋体]、雷公藤红素抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]前面多组学结果发现雷公藤红素影响谷氨酸和嘧啶代谢的生物合成,该过程与[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成密切相关,[/font][b][font=宋体]作者推测雷公藤红素可能通过抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成发挥抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性。[/font][/b][font=宋体]结果显示,用雷公藤红素或抑制剂和[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]组处理的细菌中[/font][font=&]NADP+/NADPH[/font][font=宋体]比率降低,表明[/font][font=&]5-[/font][font=宋体]磷酸核糖的合成受到抑制。[/font][font=&]Asp[/font][font=宋体]是嘌呤和嘧啶合成的重要前体,作者发现[/font][font=&]Glu[/font][font=宋体]和[/font][font=&]Asp[/font][font=宋体]的减少。此外,作者观察到[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]含量下降。考虑到[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]能够影响蛋白质的表达,作者也观察到[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组的蛋白质含量均显著降低,表明[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]能够影响蛋白质的合成。总之,雷公藤红素可以抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成来对抗[/font][font=&]MRSA[/font][/size] [size=15px][b][font=宋体]总结[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]该研究表明,雷公藤红素对标准和临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株表现出强大的抗菌活性,并且耐药性发展水平较低。这种抗菌活性的机制被认为是基于与[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]的竞争性结合,从而激活多种途径。雷公藤红素是开发用于对抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌相关感染的新型抗生素药物的有希望的候选药物[/font][/size]

  • 细菌培养基

    Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种 . Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 :When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌

  • 【资料】生物农药--苏云金芽孢杆菌

    昆虫病原细菌广泛存在自然界,在不同的环境条件下,对昆虫数量的调节起着重要的作用。其中特别是某些芽孢杆菌已发展成为微生物杀虫剂,具有控制农林害虫的巨大潜力,是一种很有发展前途的防治害虫的新途径,在综合防治中越来越引起人们的重视。 自从19世纪末期开始研究家蚕、蜜蜂细菌病害的近一百年间,发现并被描述的昆虫病原细菌约有90多个种和亚种,它们大多属于真细菌纲(Eubacteria)的芽孢杆菌科(Bacilliacene)、假单孢菌科(Pseudomonadacea)和肠杆菌科(Enterobacteriaceae)。从防治害虫的角度来说,在这三科中以芽孢杆菌科最为重要。此科包括有两个属:芽孢杆菌属(Bacillus)和芽孢梭菌属(Clostridium)。在芽孢杆菌属中的乳状病芽孢杆菌(Bac.popillia)、缓死芽孢杆菌(Bac.lentimorbus)、苏云金芽孢杆菌(Bac.thuringiensis)的某些亚种以及球形芽孢杆菌(Bac.spuericus),目前在国内外均已发展成为防治农林害虫及卫生害虫的微生物杀虫剂。而且,迄今为止,昆虫病原细菌的主要研究力量也仍然集中在这些细菌上。 但是在这些众多的病原细菌中,真正能够开发成为一种具有实际应用价值杀虫剂的却并不多,目前应用最广泛的主要是形成芽孢的病原细菌。如乳状病芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64035]苏云金芽孢杆菌[/url]

  • 【分享】几种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)

    培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 :When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml :Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌) 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基) Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L 8. Glycerol Agar (甘油琼脂) Peptone (蛋白胨) 5g Beef extract (酵母膏) 3g Glycerol (甘油) 20g Top water (自来水) 1000ml Agar (琼脂) 15g pH 7.0-7.2 9. Rhizobium medium (根瘤菌培养基)AS 9 Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 800ml pH 7.2 :Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小时,经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围:大豆根瘤菌(慢生型)、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌(快生型)、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml 11. Glucose Asparagine (葡萄糖、天门冬素琼脂) Glucose (葡萄糖) 10g Asparagine (天门冬素) 0.5g K2HPO4 0.5g Water (水) 1000ml pH 7.2-7.4 适用范围:刺孢小单孢菌绛红变种、紫色小单孢菌(绛红小单孢菌) 12. Gause′s Synthetic Agar (高氏合成一号琼脂) KNO3 1g Soluble starch(可溶性淀粉) 20g K2HPO4 0.5g MgSO4.7H2O 0.5g NaCl 0.5g FeSO4 0.01g Agar (琼脂) 20g water (水) 1000ml pH 7.2-7.4

  • 问:常用菌种及培养基英文对照

    问:常用菌种及培养基英文对照答:Bacillus subtilis 枯草芽孢杆菌 Bacillus pumilus 短小芽胞杆菌 Staphylococcus aureus 金黄色葡萄球菌 Micrococcus luteus藤黄微球菌 Escherichia coli 大肠埃希杆菌 Saccharomyces cerevisiae啤酒酵母菌 Candida albicans 白色念珠菌 Aspergillus niger黑曲霉 Salmonella paratyphi B 乙型副伤寒沙门(氏)菌 Pseudomonas aeruginosa铜绿假单胞菌 Coliform 大肠菌群 Clostridium 梭菌 Nutrient agar 营养琼脂培养基 Rose Bengal agar Sodium 玫瑰红钠琼脂培养基 Nutrient broth medium营养肉汤培养基 Thioglycollate medium 硫乙醇酸盐流体培养基 Martin medium modified 改良马丁培养基 Bile salt lactose enrichment 胆盐乳糖培养基 0.1% peptone water medium 0.1% 蛋白胨水 pH 7.0 sodium chloride peptone buffer pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 Lactose bile salt fermentation medium 乳糖胆盐发酵培养基[

  • 【分享】细菌鉴定仪出现“不能鉴定细菌”的处理

    [size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析,探讨其发生原因、处理方法,以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4]  [b]一、材料与方法[/b][/size][size=4]  1. 仪器与试剂:VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡(生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4]  2. 试验菌株:1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定,其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4]  3.VITEK-AMS鉴定法:根据细菌表型特征,选择相应GNI+、GPI、YBC卡,严格按仪器操作说明进行,孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时,挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离,观察是否纯培养,若是,分别按同法及以下两法鉴定。否则, 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4]  4. 双歧检索鉴定法:根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表,依生化结果检索至属或种。[/size][size=4]  5. 常规鉴定法:按照全国临床检验操作规程[1]进行,并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献[2]进行。 [/size][size=4]  [b]二、结果[/b][/size][size=4]  1. UIO发生机率:总共1025株细菌鉴定中,共出现UIO 44株,占4.3%。其中GPI卡334株,出现UIO16株,占4.8%;GNI+卡631株,出现UIO 24株,占3.8%;YBC卡60株,出现UIO4株,占6.7%。[/size][size=4]  2.UIO发生原因:在44株出现UIO中,9株(0.9%)为待检细菌不纯,3株(0.3%)为浊度不合要求,2株(0.2%)为接种物孵育时间过长(超过48h),2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围(均为臭鼻克雷伯菌),1株(0.1%)为菌悬液不乳化(粘液型绿脓假单胞),其他如冲液时气泡过多,或其他原因不确定者27株(2.6%)。[/size][size=4]  3.处理:(1)9株不纯菌株,经纯培养后,重新上机,均能成功鉴定。(2)35株纯培养但报告UIO菌株中,18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果,并与常规分类法结果完 全一致。3株(0.3%)浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株,经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液,然后低速离心1~2 min(1 000r/min),取上清液比浊并调节到所需的浓度后,得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中,仅2株(1株为大肠埃希菌,另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果,其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等),虽能从双歧检索表获得结果,但与常规鉴定法结果不相符合,或出现矛盾的生化结果,需增加试验项目,按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4]  [b]三、讨论[/b][/size][size=4]  实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定,仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因(占近1/5),其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因(如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定)也不可忽视。正确处理这部分菌株,有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时,必须挑取纯培养菌落,可提高鉴定率,对确认为纯培养而无法鉴定者,可通过传统分类法,参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株,因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4]  参考文献[/size][size=4]  1,叶应妩,王毓三,主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京: 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4]  2,Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]

  • 生态系统最重要部分,请保护泥炭沼泽

    生态系统就是生物之间的相互影响绿色植物吸收光的能量,8%被光合作用固定住,而这8%有一半被呼吸作用损耗掉,而碳元素又被植物损耗掉,剩下的50%能量被叶子和茎杆储存在根部或果实,有部分存在生殖系统里,植物能量的传输有4种。细菌寄生在植物的根部,被植物所供养。碳在大气中以一种无机气体分子的形式存在。CO2经过光合作用,地球上生命赖以生存的基本物质是碳,碳才能以化合物的形态存在。光合作用是植物和一些微生物独有的功能,却造福地球上几乎所有的生命。光合作用,植物用这些简单的运作,保证生命的基础。光合作用的如何进行:——空气渗入树叶间,把树叶表面整个包住,在树叶组织内部循环,慢慢地渗透,内部包含绿色植物叶绿素的微小颗粒,这是利用太阳能,把水中的氢和CO2结合,产出碳水化合物—糖和淀粉的关键过程。空气先溶于叶管中,然后,从叶子进入植物叶皮,尽管在晚上叶工厂会关闭休息,但黎明到来,太阳会出来,光合作用又会开始,所以光合作用是生态系统中生产资料循环的基本过程。光、水营养和CO2,所有这些都是促进生产力发展的关键物质,

  • 洪泽湖鱼蟹死亡背后:淮河流域污染危机何解?

    淮河流域治污困局洪泽湖入湖河流主要为淮河,占湖泊来水量的70%以上,其次主要为新濉河、新汴河、徐洪河等。污染危机并非近些年才有。1994年,淮河流域第一次爆发大规模水污染。2008年被剑桥大学评为关于可持续发展的50部最佳著作之一、美国学者易明ELlizabeth C.economy的著作《一江黑水:中国未来的环境挑战》记载,1994年7月份,淮河上游因突降暴雨而开闸泄洪,“水经之处河水泛浊,渔业遭到毁灭性打击,将近2600完磅鱼类死亡,几千人出现恶心、腹泻、呕吐等症状。沿线自来水厂被迫停止供水达54天之久,百万淮河民众饮水告急。”污染在当时引起了决策层重视。1995年8月,国务院发布了我国第一步流域性水污染防治法规《淮河流域水污染暂行条例》。1996年6月,国务院又批准了《淮河流域水污染防治规划及“九五”计划》,提出“1997年以前治理所有工业污染,2000年以前让淮河水变清”的目标,并于1998年初启动为期三年的淮河治污“零点行动”。“零点行动”关停了沿线多家工厂,然而,投资600多亿的10年治污行动之后, 2004年7月20日,淮河流域再次爆发“有史以来最大”的污染。据《新民周刊》2014年8月12日的报道记载:“满河暗黑,怪味熏人,总长133公里带状体,如同巨大的黑蘑菇,一路浩浩荡荡杀奔洪泽湖……洪泽湖上氨氮超过平时的60倍,水质全为劣五类,养殖户们流着泪放弃了,眼睁睁望着所有的鱼蟹在3天内死光,湖面上一片死鱼死蟹。”淮河流域是相对富庶、繁荣的地区。改革开放之后,淮河干流、大小支流两岸雨后春笋般建立起数以万计的工厂。各种纸浆厂、化工厂、皮革厂推动了该地区的经济发展,同时也使得淮河成为四条污染最严重的河流之一。易明在《一江黑水:中国未来的环境挑战》中也分析了淮河流域几十年的污染与治理,将淮河流域的环境问题称之为“中国环境变迁的缩影”,以及“中国必须应对的,经济改革与环境因素交织所带来的挑战”。“淮河流域的人口与资源环境紧张关系在全国最为突出,这决定了淮河流域必然会在全国率先出现严重水污染。”长期研究此领域的李尚勇告诉界面新闻。据水利部官网数据,淮河流域包括湖北、河南、安徽、山东、江苏五省40个地(市)181个县(市),总人口为1.65亿人,平均人口密度为611人/平方公里,是全国平均人口密度的4.8倍,居各大江大河流域人口密度之首。“满足这么多人口的食物需求、生活需求,也意味着工业、城市生活污水和农业面源污染。”李尚勇表示:“在淮河流域‘平时拦污、暴雨集中泄污’是一种常态,区别只在于,是否被媒体‘逮住’并成功曝光。”界面新闻查阅到淮安和宿迁两市2016年7月制定的《洪泽湖生态环境保护规划文本》,其中提到,由于上游河南、安徽以及徐州地区的污水团不定期下泄,使得入湖河流污染严重,洪泽湖每年都要发生数次污染事故。同时,该《洪泽湖生态环境保护规划文本》提到:“新濉河超标的主要原因是河流自净能力差,受工业、城市生活污水、农业面源等污染负荷超过自净能力;新汴河超标主要原因是受上游客水影响,上游河南、安徽等地的污水团不定期下泄,使得水体污染严重。”跨流域污染难题何解尽管污染困局一时难解,但淮河流域的治污工作年年都在做,近几年治理力度在增加。“这次的污染事故并非没办法避免,跨省水污染的处理机制也早已有规可循。”方应君介绍,但在事件发生之时,联防机制并未生效。绿色江南公布的调研报告中提及,根据《中华人民共和国防洪法(2016 修正)》,在流域防汛抗洪的管理责任方面,淮河水利委员会是本次防汛抗洪的行政主管部门。而在流域水资源的污染防控方面,水利部国家环境保护局淮河流域水资源保护局是行政主管部门。根据《淮河流域水污染防治暂行条例(2011)年修订》》第25条规定:“淮河流域水闸应当在保证防汛、抗旱的前提下,兼顼上游下游水质,制定防污调控方案,避免闸控河道蓄积的污水集中下泄。”实际上,流域上游与下游的矛盾不仅在事前通知与预防,事后的赔偿机制与责任主体认定更常陷入无人埋单的困境。“因为很难找到明确的排污主体,追责往往困难,关键还在于平时建立上下游联动机制。” 方应君认为。其中一个正在试点的措施是跨流域生态补偿机制。目前,皖浙、云贵川等省份交界区域都在进行此机制的尝试。从2011年起,财政部、环保部牵头启动了新安江流域生态补偿机制试点,也是全国首个跨省流域的生态补偿机制试点。浙江、安徽两省以新安江水质“约法对赌”——以安徽、浙江两省跨界断面水质的监测数据为标准,若年度水质达到一定考核标准,浙江拨付给安徽1亿元,达不到的话,安徽拨付给浙江1亿元。这种机制的思路在于,因为水是从上游向下游流的,两省跨界断面水质的监测数据如果有问题,说明问题出在上游,如果在两省交界处监测到的数据没有什么问题,那就是下游的问题,不能让上游“背锅”。《工人日报》在2018年9月14日评论称:“假如安徽和江苏对洪泽湖也实行跨省横向生态补偿机制,在安微和江苏交界处进行日常监测,那本次事件就比较好解决了,可以将跨地区补偿经费用于对这些养殖户损失的补偿。”但黑水来临时,并没有假如。

  • 菌种的保存

    常用的有琼脂斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、沙土管保藏法、甘油冷冻管保藏法、低温冷冻保藏法等,方法很多。 我选用液体石蜡保存方法,该方法适用于不能分解液体石蜡的酵母菌、某些细菌(如芽孢杆菌属、乙酸杆菌属等)和某些丝状真菌(如:青霉属、曲霉属等),而某些细菌(如:固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌等)和一些真菌(如:卷霉菌、小克银汉霉、毛霉等)不宜采用此法进行保存。微生物检验常用以下菌种:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌药典也没有要求怎样保存,只说选用适宜的保存方法需要验证。但是肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌这些菌种用液体石蜡保存方法适合不?

  • 【转帖】146种培养基配方(细菌培养基与植物培养基)!

    培养基及成分 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂) Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g NaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2 [Note]:When cultivation of Bacillus,5mg of to MnSO4.H2O may be added . It is favorable to promote spore formation . 适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基) Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml [Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。) 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I ) Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌)、嗜热乳酸链球菌 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ) Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8 适用范围:植物乳杆菌(胚芽乳杆菌) 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY (蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基) Peptone(蛋白胨) 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 1g Distilled water (蒸馏水) 1L 8. Glycerol Agar (甘油琼脂) Peptone (蛋白胨) 5g Beef extract (酵母膏) 3g Glycerol (甘油) 20g Top water (自来水) 1000ml Agar (琼脂) 15g pH 7.0-7.2 9. Rhizobium medium (根瘤菌培养基)AS 9 Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 800ml pH 7.2 [Note]:Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小时,经滤纸过滤后加水补足到200毫升。) 适用范围:大豆根瘤菌(慢生型)、豇豆慢生根瘤菌、花生根瘤菌、紫云英根瘤菌、 大豆根瘤菌(快生型)、大豆根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、田菁根瘤菌 10. Mannitol Agar (甘露醇琼脂) Yeast extract (酵母膏) 5g Peptone (蛋白胨) 3g Mannitol (甘露醇) 25g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml

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