[align=center][b]HPLC测定不同来源山药中腺苷和脱氢表雄酮的含量[/b][/align] 山药(Dioscoreae Rhizoma)是薯蓣科植物薯蓣([i]Dioscorea opposita [/i]Thunb.)的干燥块茎，具有补脾养胃、生津益肺、补肾涩精的功能，是国家卫生部公布的药食两用的中药。然而在2015版《中国药典》一部中只收载了性状、鉴别、检查和浸出物等项目，缺少含量测定项指标，不足以对山药质量进行全面有效的控制。DHEA是人体肾上腺素的一种，国内外研究已经证实，DHEA对预防和治疗心血管疾病、增强免疫力、延缓衰老等均有一定效果，是山药中的重要活性成分之一。另外，腺苷具有舒张血管、降低血压、减慢心律、抑制血小板聚集、松弛血管平滑肌等生理活性。长期以来，由于对山药品种的评价和改良工作进展缓慢，目前仍然存在山药种植品种杂乱，缺乏综合性优良的品种。因此，本研究对包括野生山药在内的不同来源山药中的腺苷、DHEA含量进行测定，旨在为山药质量标准建立提供参考依据，也为山药品种驯化和选育提供一定的研究基础。[b][b]1 仪器和试药[/b][/b]LC-20AD高效液相色谱仪，配备紫外可见检测器(日本，岛津公司)；ME204电子天平(德国Mettler Toledo公司)，KQ-E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。脱氢表雄酮标准品(阿拉丁，批号为H1408213)，腺苷标准品(中国食品药品检定研究院，批号为110879-200202)；甲醇为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。山药样品采自河南省温县山药种植基地。[b][b]2 方法与结果2.1标准储备溶液的制备[/b][/b]精密称取腺苷对照品6.61 mg置25 mL容量瓶中，加15 %甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为264.40 μgmL[sup]-[/sup][sup]1[/sup]的腺苷标准品储备溶液。精密称取DHEA对照品7.62 mg置50 mL容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，配制成浓度为152.40 μgmL[sup]-[/sup][sup]1[/sup]的DHEA标准品储备溶液。[b][b]2.2样品的处理[/b][/b]2.2.1 腺苷样品的处理取本品粉末(过3号筛)约1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入15％甲醇l0 mL，密塞，摇匀，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用15％甲醇补足减失的重量，12000 rmin[sup]-[/sup][sup]1[/sup]离心15 min，取上清液，0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。2.2.2 DHEA样品的处理取本品粉末(过3号筛)约3.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇l5 mL，密塞，摇匀，称定质量，超声处理1 h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。[b][b]2.3 色谱条件[/b][/b]2.3.1 腺苷色谱条件：色谱柱：Aglient Extend XDB C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：磷酸盐缓冲液(pH6.5) -甲醇(94:6，[i]v/v[/i])；流速：1 mLmin[sup]-[/sup][sup]1[/sup]；柱温：30 °C； 检测波长：260 nm；进样量：10 μL。HPLC图见图1。2.3.2 DHEA色谱条件：色谱柱：Welch Ultimate XB-C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲醇-水(62:38，[i]v/v[/i])；流速：0.6 mLmin[sup]-[/sup][sup]1[/sup]；柱温：30 °C； 检测波长：204 nm；进样量：10 μL。HPLC图见图2。[img=,690,278]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907031540228286_5423_3451954_3.jpg!w690x278.jpg[/img][img=,690,300]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907031540280876_3707_3451954_3.jpg!w690x300.jpg[/img][b][b]2.4标准曲线的绘制[/b][/b]精密吸取腺苷标准品储备溶液0.5，1，3，5，8，10 mL分别置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件进样，以峰面积值 Y为纵坐标，腺苷浓度X为横坐标绘制标准方程为：[i]Y[/i]=34197.2[i] X[/i]+25515.1，[i]r[/i]=0.9999，表明腺苷在13.22 ~ 264.40 μgmL[sup]-[/sup][sup]1[/sup]浓度内与峰面积线性关系良好。精密吸取DHEA标准品储备溶液1 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，得15.24 μgmL[sup]-[/sup][sup]1[/sup]的DHEA使用溶液。分别精密吸取DHEA使用溶液0.5，1，3，5，8，10 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，按上述色谱条件进样，以峰面积值 Y为纵坐标，DHEA浓度X为横坐标绘制标准方程为：[i]Y[/i]=13042.7 [i]X[/i]-1836.3，[i]r[/i]=0.9999，表明DHEA在0.76 ~ 15.24 μgmL[sup]-[/sup][sup]1[/sup]浓度内与峰面积线性关系良好。[b][b]2.5 重复性试验[/b][/b] 取同一供试品粉末6份，精密称定，按“2.2”项下方法处理，按“2.3”项下色谱条件测定峰面积。结果腺苷和DHEA峰面积的RSD分别为1.87 %和1.91 % (n=6)，表明方法重复性良好。[b][b]2.6 精密度试验[/b][/b]精密吸取同一供试品溶液10 μL，按上述色谱条件连续进样6次，测定腺苷、DHEA峰面积值，其RSD分别为0.92 %和1.03 % (n=6)，表明仪器及进样精密度良好。[b][b]2.7 稳定性试验[/b][/b] 精密吸取同一供试品溶液，室温放置，分别在0，2，4，8，12，24，48 h进样分析。测定腺苷、DHEA峰面积值，其RSD分别为2.07 %和1.65 % (n=6)，表明供试品溶液在48 h内稳定性良好。[b][b]2.8 回收率[/b][/b]分别称取已知含量的样品6份，精密称定，分别加入相当含量的腺苷和DHEA对照品溶液，按“2.2”项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，分别进行测定，计算回收率。结果腺苷、DHEA平均加样回收率为98.10 % (RSD=1.40 %)和97.72 % (RSD=1.15 %)，结果见表1、2。[align=center][b]表1 山药样品中腺苷的加样回收率实验结果(n=6)[/b][/align][table][tr][td][align=center]取样量/g[/align][/td][td][align=center]样品中量/mg[/align][/td][td][align=center]添加量/mg[/align][/td][td][align=center]测得量/mg[/align][/td][td][align=center]回收率/%[/align][/td][td][align=center]平均回收率/%[/align][/td][td][align=center]RSD/%[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.5014[/align][/td][td][align=center]0.1604 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3141[/align][/td][td][align=center]96.88 [/align][/td][td=1,6][align=center]98.10[/align][/td][td=1,6][align=center]1.40[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.5011[/align][/td][td][align=center]0.1604 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3201[/align][/td][td][align=center]100.72 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.4989[/align][/td][td][align=center]0.1596 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3147[/align][/td][td][align=center]97.76 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.4997[/align][/td][td][align=center]0.1599 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3141[/align][/td][td][align=center]97.22 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.5001[/align][/td][td][align=center]0.1600 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3159[/align][/td][td][align=center]98.28 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.5012[/align][/td][td][align=center]0.1604 [/align][/td][td][align=center]0.1586[/align][/td][td][align=center]0.3154[/align][/td][td][align=center]97.74 [/align][/td][/tr][/table][align=center][b]表2 山药样品中DHEA的加样回收率实验结果(n=6)[/b][/align][table][tr][td][align=center]取样量/g[/align][/td][td][align=center]样品中量/mg[/align][/td][td][align=center]添加量/mg[/align][/td][td][align=center]测得量/mg[/align][/td][td][align=center]回收率/%[/align][/td][td][align=center]平均回收率/%[/align][/td][td][align=center]RSD/%[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.5013[/align][/td][td][align=center]0.0293 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0589[/align][/td][td][align=center]97.13 [/align][/td][td=1,6][align=center]97.72 [/align][/td][td=1,6][align=center]1.15 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.5024[/align][/td][td][align=center]0.0293 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0591[/align][/td][td][align=center]97.72 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.4997[/align][/td][td][align=center]0.0292 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0597[/align][/td][td][align=center]99.86 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.5001[/align][/td][td][align=center]0.0293 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0589[/align][/td][td][align=center]97.21 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.4987[/align][/td][td][align=center]0.0292 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0587[/align][/td][td][align=center]96.64 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1.5011[/align][/td][td][align=center]0.0293 [/align][/td][td][align=center]0.0305[/align][/td][td][align=center]0.0591[/align][/td][td][align=center]97.80 [/align][/td][/tr][/table][b][b]2.9 结果分析[/b][/b]精密称取不同来源的山药粉末，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，分别进样，记录峰面积积分值，外标法计算腺苷及DHEA的含量。结果如下表3所示。[align=center][b]表3 不同来源山药药材中腺苷及DHEA的含量([i]n[/i]=3)[/b][/align][table][tr][td][align=center]编号[/align][/td][td][align=center]样品来源[/align][/td][td][align=center]腺苷含量/%[/align][/td][td][align=center]DHEA含量/mg/kg[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]种植铁棍山药[/align][/td][td][align=center]0.032[/align][/td][td][align=center]19.50 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]野生山药1[/align][/td][td][align=center]0.027[/align][/td][td][align=center]5.38 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3[/align][/td][td][align=center]野生山药2[/align][/td][td][align=center]0.024[/align][/td][td][align=center]3.29[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]驯化野生山药雌株[/align][/td][td][align=center]0.037[/align][/td][td][align=center]24.05 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5[/align][/td][td][align=center]驯化野生山药雄株[/align][/td][td][align=center]0.040[/align][/td][td][align=center]62.25 [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]紫山药[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][td][align=center]ND[/align][/td][/tr][/table] 从测定结果看，不同来源山药中腺苷和DHEA含量差别较大，可能由于品种及生长环境的差异造成。研究表明，驯化野生山药雄株中腺苷和DHEA含量最高，显著高于野生山药中的含量，说明驯化过程对野生山药的改良起到了很好的积极作用。另外，驯化野生山药雄株中DHEA含量比公认的营养成分较高的铁棍山药高出3倍左右，进一步说明该山药品质的优异性。 另外，紫山药中并未检测到腺苷和DHEA两种成分的存在，这可能由于紫山药自身品种差异有关。[b][b]3 小结和讨论[/b][/b]3.1 DHEA提取条件优化 在DHEA测定前处理时，本实验曾根据李军等人的优化方法，采用甲醇-丙酮(6:4)超声提取、水浴蒸干、二氯甲烷多次萃取等主要工序对山药中DHEA进行提取，该方法提取效果较好，DHEA可以被较好的富集和检测。但是由于提取过程复杂，实验重复性和加样回收率较难控制。本实验采用甲醇、乙醇、甲醇-丙酮(1:1，[i]v/v[/i])等溶剂对山药样品进行超声1h提取，结果发现，四种溶剂提取效果没有明显差异，因此选用甲醇做为最终提取溶剂。 本实验采用的方法大大简化了山药中DHEA的提取过程，减少了有毒试剂的使用，缩短了提取时间，且提取率与李军的方法相比没有显著的差异。3.2 小结 本研究对山药中腺苷和DHEA成分的提取和测定条件进行优化，为山药质量标准建立和质量评价提供参考依据。另外，研究对包括野生、种植、驯化品种等不同来源山药中腺苷和DHEA指标含量进行测定，为山药品种的选育和驯化提供一定的研究基础。
我用丙酮做为溶剂，做苯酐的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]分析，发现丙酮峰拖尾很严重，经常将苯酐的成分峰覆盖了，分析数据不准确，什么原因？望指导！我用的是KB-5的色谱柱
我想做的是三磷酸腺苷二磷酸腺苷和磷酸腺苷,应该用什么柱子合适？
空白是水，无干扰；同一份对照品溶液，丙酮和丁醇前有时会出现干扰峰，有时不出现；同一个顶空瓶第一针出现，后面进样都未出现；进单独的丙酮溶液，只有丙酮前有干扰峰。仪器用的岛津GC-2010，顶空用的PE，顶空瓶和盖子用了安捷伦的和PE的新顶空瓶另外还更换了清洗程序，用新瓶子水洗-洗瓶机-烘箱120度烘干2小时，结果还是有的瓶子会出现干扰这个问题有可能出在哪啊。仪器、耗材？
请问甘油在丙酮里的溶解度是多少？
我做丙酮与甘油的反应，用什么色谱柱比较好，能得到较好的甘油的峰？KB-Wax怎么样？
求助，在使用乙酰丙酮方法测甲醛时，为何配制好的乙酰丙酮溶液颜色很黄？注：所用的乙酰丙酮原本无色，但乙酸铵有点回潮。
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]基线不稳，测得是丙酮-苯酐溶液
甲醛测定的测定方法:乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶后，412nm下进行分光光度测定。此法最大的优点是操作简便，性能稳定，误差小，不受乙醛的干扰，有色溶液可稳定存在12hr，；缺点是灵敏度较低，最低检出浓度为0.25mg/L，仅适用于较高浓度甲醛的测定；方法缺点是反应较慢，需要约60min；SO2对测定存在干扰(使用NaHSO3作为保护剂则可以消除)。
觉的自己丙酮吸多了，喉咙干，疼，有关系吗？需要吃点什么药呢？还是其他方法可以？
甘油氧化产物 甘油酸 甘油 甘油醛 二羟基丙酮 乳酸如何分啊 文献里写的ALLTECH有机酸住 不详细啊
我们实验室最近用乙酰丙酮法测定空气中的甲醛，发现标准系列灵敏度不如酚试剂法。请问大家用乙酰丙酮法测过甲醛没有，测的话，一般标准系列吸光度应该是多少呢？？？可否发出来做一个参考？非常感谢！！！
我做生物胺的柱前衍生，用的是10mg／ml的丹磺酰氯丙酮容液，但是配完之后丹磺酰氯很多都沉在底部并不溶解，用超声混匀后，用移液枪吸取能明显看到颗粒。然后将丹磺酰氯丙酮容液加进生物胺单标里混匀后会底部出现白色沉淀，是不是有发生什么化学反应？这个沉淀看了很多文献都没提到过。然后就是去跑液相，8个标品，只有精氨酸一直跑不出，时间感觉也很充足了，就是一直很平坦不出峰，是不是和上面的操作有关系啊？
测涂料中甲醛，乙酰丙酮分光光度法，乙酰丙酮溶液配制时乙酰丙酮要用重蒸馏的，怎么蒸馏
丙酮的理化性质、毒性及安全防护 丙酮 CH3COCH3 1、别名英文名 二甲基甲酮、阿西通、醋酮；Acetone、Dimethyl ketone、Propanone。 2、用途 用于有机溶剂、醋酐、氯仿、染料、石腊的精炼、橡胶、润滑油的制造。 3、制法 （1）通过玉米发酵法分馏制得。 （2）石油裂解法制得。 （3）木材干馏。 （4）醋酸钙加热。 （5）异丙醉催化脱氢。 4、现化性质 分子量： 58.08 熔点： 一94．6℃ 沸点： 56．48℃ 液体密度(15℃)： 797．2kg/m3 气体密度： 2．00kg/m3 压缩系数(14．2℃，90L 79～3699．38kPa)：0．00011l 临界温度： 236．5℃ 临界压力： 4782．54kPa 临界密度： 278kg/m3 气化热(0℃)： 563．79kJ/kg 比热容(气体，26～110℃，101．325kPa)： Cp=1452．37J/(kgK) 蒸气压(39．5℃)： 53．33kPa (25℃)： 30．17kPa 粘度(气体，0℃)： 0．00725mPas (液体，0℃)： 0．4013mPas 表面张力(丙酮一空气或蒸气，0℃)： 26．2mN/m 导热系数(0℃，气体)： 0．0096338W/(mK) (0℃，液体)： 0．177702W/(mK) 折射率： 1．3585 闪点： 一17．78℃ 燃点： 465℃ 爆炸界限： 2．6%一12．8% 最大爆炸压力： 872。79kPa 产生最大爆炸压力的浓度： 6.3% 最易引燃浓度： 4．5 燃烧热(液体，25℃)： 1791. 62kJ/mo1 毒性级别： 1 易燃性级别： 3 易爆性级别： 0 丙酮在常温压下为具有特殊芳香气味的易挥发性无色透明液体。易燃烧，其蒸气空气能形成爆炸性混合物，遇明火或高热易引起燃烧。化学性质较活泼。其液体比水轻。能与水、酒精、乙醚、氯仿、乙炔、油类及碳氢化合物相互溶解，能溶解油脂和橡胶。丙酮蒸气有麻醉效应。 丙酮与一些物质混合接触时的危险性如下表所示。 5、毒性 兔一经口 LD50:5300mg/㎏ 最高容许浓度：1000ppm(2400mg/㎏) 丙酮可经呼吸道、消化道和皮肤吸收。经皮肤吸收缓慢，量少，主要是驼过前两个途径。由于丙酮的水溶性强，它易溶解和吸收入血液中，很快分布于全身。丙酮属微毒类，其毒性主要是对中枢神经系统的麻醉作用。基蒸气对粘膜有中等程度的刺激作用。丙酮对皮肤无致敏作用，但有轻度刺激作用。 吸信蒸气急性中毒后主要表现为不同程度的麻醉状态。最初出现管乏力、恶心、头痛、头晕、容易激动。严重时可出现呕吐、气急、痉挛以及昏迷。液体能刺激眼睛。吞服反能刺激消化系统，产生麻醉与错迷等症状。 6、安全防护 丙酮要用玻璃羡慕或金属桶盛装。灌装时控制流速不可过快，防止产生静电。库内存放丙酮时，不应把库房堆满，在墙边，离顶栅、离柱子应留出一定的通道，以便进行防火检查及发生火灾时有效地进行消防施救。 发生火灾时可用抗溶性泡沫、二氧化碳、化学干粉、黄砂灭火。用水灭火可能无效，但可用来冷却火场中的容器，驱散蒸气，稀释和赶走流出的液体，保护去堵漏的人员。 丙酮流出时，首先要切断所有火原，穿戴好防毒面具、手套防护服等，用水冲洗，洗水经稀释后排入废水系统。
[img=,690,383]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/05/202305311322490753_1124_5655394_3.png!w690x383.jpg[/img]文献中丙酮粉制备的目的是什么？获得的沉淀用丙酮清洗是为了脱色脱脂吗？为什么要先把样品制作成丙酮粉在进行下一步实验呢？
为啥根据gb17657-2013，乙酰丙酮测甲醛做标曲时，会有个别浓度的溶液出现絮状物？
对动物组织样品进行脱色脱脂，然后提取蛋白，脱脂打算用的试剂是丙酮，就是在样品匀浆之后加入丙酮试剂浸提30min，然后倒出丙酮，这个过程重复3次，之后得到的样品是不是需要除去丙酮残留才可以提蛋白，可以直接提蛋白吗，还是要冻干磨成粉？
注射用腺苷蛋氨酸的测定和腺苷标准品的测定[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911021842_180183_1896702_3.jpg[/img]
我看文献，为啥氘代丙酮中的普通丙酮的信号是在2.09而不是2.05呢？
求问乙酰丙酮甲基氢和亚甲基氢在氘代氯仿中的化学位移是多少？
目的：介绍腺苷蛋氨酸的临床应用及研究进展，为其临床应用提供参考。方法：对近年来国内外的代表性文献进行归纳、总结。结果与结论：腺苷蛋氨酸除作为治疗肝病的常用药物外，还可用于胰腺炎、骨关节炎和抗抑郁等治疗，但其临床疗效和作用机制还有待进一步研究。同时还需注意其引起严重过敏反应和低血钾的不良反应。[em0805]
用ECD做食品中的碘，能用丙酮代替甲乙酮吗，谢谢
请各位大神指点：本人将100mg/L的甲酸取1mL，然后加镁带和盐酸还原成甲醛，再用乙酰丙酮法测试，吸光度仅为0.048，正常吗？附图为做的甲酸标线，清各位看看正常吗？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/12/201612012253_01_3129796_3.png
已酰丙酮与甲醛在一定温度下会反应显色，通过吸光度测试甲醛浓度，此时溶液体系中含有异丙醇会不会有影响？
检测涂料中甲醛需要用到蒸馏过的乙酰丙酮，求问如何蒸馏乙酰丙酮？
我用的是HJ 601-2011的方法测水体中甲醛，出现了两个问题：（1）刚配好的乙酰丙酮显色剂的吸光值0.018，是不是有点高？不知道大家做的空白吸光值多少？（2）自己做的甲醛质控样偏低，不知道问题出在哪？
很多资料上说，用乙酰丙酮法测甲醛的缺点有二氧化硫对测定有干扰，可以用亚硫酸氢钠作保护剂消除。我想问问：1、原理是什么？2、亚硫酸氢钠如何使用？（不是一加热就会生成二氧化硫吗？）3、可以用其它物质消除二氧化硫的干扰吗？
各位大侠，我们在实际操作中，会偶尔遇到有的样品本身背景颜色过滤不掉，以致加入显色剂后的显色效果不是很好，我们已经试过很多方法都过滤不掉背景颜色的，还有哪些会对乙酰丙酮显色有干扰，谢谢
我在做生物胺的实验 其中需要配10mg/mL的丹磺酰氯丙酮溶液 最后发现不溶 丹磺酰氯是新买新开封的 丙酮也开了瓶新的 超声效果也不理想 这是什么原因 有人能帮帮我吗
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