糖类抗原质控血

大家好，我想请问一下基于GC-MS的代谢组学技术，检测出来的糖类应该如何鉴别呢，因为糖的离子碎片都差不多，我怎么确定在那个保留时间出来的是哪种物质呢，有专门的非糖库么？常感谢。

糖类物质是大多数食品的主要成分之一，在一定程度上标志着营养价值的高低，是某些食品的主要质量指标。在食品加工工艺中，糖类对改变食品的形态、组织结构、物化性质以及色、香、味等感官指标起着十分重要的作用。食品中糖类含量的控制一方面可以合理的控制膳食，另一方面还可以有助于食品生产过程中的质量控制以及新食品的开发和研制。　　此外，对于一些特殊产品，如婴幼儿食品，糖尿病病人的无糖食品中，对于糖类物质含量的控制也是非常必要的。比如，英国“儿童食品运动”组织的“婴儿垃圾食品”调查中发现，亨氏旗下Farley原味甜饼干的糖分含量甚至比黑巧克力的糖分还高，而亨氏的芝士口味迷你饼干每百克中饱和脂肪含量高于同样重量的麦当劳大芝士汉堡的脂肪含量。而英国著名的恩贝儿牌(港译牛栏牌)婴幼儿食品中九分之一含糖量偏高。这样的高糖分、高脂肪的辅食对嗷嗷待哺的婴儿来说是很危险的。相关新闻见：http://www.instrument.com.cn/news/20120719/080399.shtml　　　　那么，　　食品中的糖类含量的控制多到底有什么重要的意义?　　糖类含量过多或者过少对人体健康有什么影响?　　如何检测食品中糖类物质的含量?　　我们在采购食品的过程中，在糖类含量这一方面有什么特别而要注意的事情吗?

家好，我想请问一下基于GC-MS的代谢组学技术，检测出来的糖类应该如何鉴别呢，因为糖的离子碎片都差不多，我怎么确定在那个保留时间出来的是哪种物质呢，有专门的非糖库么？常感谢。

省卫生厅去年以来抽检的10种降糖类保健食品样品4月中旬经北京市疾病预防控制中心检测报告显示：其中的2种产品违法添加化学药品，属于不合格产品，分别是从西宁城西唐康保健食品专卖店抽检到的标注为济南华尚鲁王科技有限公司、北京锐业制药有限公司生产的“典奥R糖利衡胶囊”，检测结果为苯乙双胍阳性；从青海九康医药连锁有限公司九康中心大药店抽检到的标注为西安亚太糖尿病研究所、陕西天龙生物科技有限责任公司生产的“益仁堂R蚁诺康TM蚁泰康胶囊”，检测结果为格列苯脲阳性。　目前，省卫生厅已对这两家销售单位依法行政告知并进行了监督检查，下达整改意见，责令公告收回违法添加化学药品的不合格产品。同时，依法将不合格产品检测报告及企业相关资料分别邮寄给了生产企业所在地卫生监督部门和该产品生产单位，予以协助查处。　去年以来，省卫生厅先后组织人员对西宁地区经营降糖类保健食品专卖店、商场、医药商店和超市进行了多次专项卫生监督检查和抽检。针对检查过程中发现的问题，省卫生厅提醒消费者购买保健食品时一定要仔细辨认标志标签和说明书，怀疑有卫生问题时可以举报投诉

从开始接触多糖到现在已经整整一年半了，从最初的懵懂，到现在对糖类研究的热爱，其实经历了不太长的时间。随着脂类，核酸和蛋白质研究的越来越透彻，更多的人们开始认识到糖类研究的重要性。初来乍到，深感自己的知识浅薄，很多东西都不会。无意中发现了仪器信息网，这里有很多好东东，可是却很少有人谈起糖类。所以真心期待可以有人在这里一起交流关于糖类的研究中的种种问题。希望可以认识更多喜欢糖类研究的朋友们。

朋友们: 有没有做糖类分析的朋友,氨基柱分离糖类的原理是什么,要理论深度呦.

【摘要】本文综述了β－内酰胺类抗生素高分子聚合物测定的国内外研究进展，介绍了聚合物测定的原理和具体方法，分析了目前在聚合物测定中存在的问题，并针对问题提出了处理建议。 【关键词】高分子聚合物、质控现状、测定方法 1、概述 抗生素是临床用量最大和较易发生不良反应的药物。其中最常见的一类不良反应就是过敏反应。多年来的研究已证明，在β－内酰胺类抗生素所致的速发型过敏反应中，药物分子本身只是半抗原，药物中存在的高分子聚合物才是引发速发型过敏反应的真正过敏原，因此严格控制抗生素中高分子聚合物的含量有着重要的意义。 本文综述了高分子聚合物测定方法在国内外的研究进展，对实际测定过程中遇到的问题作简单的分析和探讨。 2、高分子聚合物的分类 抗生素中的高分子杂质系指药品中分子量大于药物本身的杂质总称，其分子量一般在1000～5000Da，个别可达10000Da左右。β－内酰胺类抗生素中的高分子杂质按其来源通常被分为两类：外源性杂质和内源性杂质。 外源性杂质包括蛋白、多肽、多糖等类杂质或抗生素和蛋白、多肽、多糖等的结合物，来源于发酵工艺，如青霉素中的青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽等。 内源性杂质是指抗菌药物的自身聚合产物，聚合物既可来自生产过程，又可在储存中形成，甚至在用药时也可产生。对于现在的生产工艺，外源性的高分子杂质已经较少产生，对内源性聚合物的控制是当前抗生素高分子杂质质量控制的重点。 金少鸿等人的研究表明，高分子聚合物不仅能引发IgE介导的过敏反应，而且青霉素类的抗生素还能经胃肠道吸收而引发过敏反应。故对β－内酰胺类抗生素中的高分子聚合物进行严格的控制，可以保证临床用药的安全有效

糖类专用分离柱[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=19611]糖类专用分离柱[/url]

各位大神，请教下关于糖类等液质测试。 最近在做葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等等LCMS测试，但是标样买回来，10ppm的标样MS测试结果就十分不理想，只有葡萄糖和乳糖有明显出峰，我用的是ESI模式，是不是APCI模式会更好？

最近做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的糖类衍生，我先用肟化反应将糖类的羰基反应掉，然后用硅烷化试剂与羟基反应。现在发现能对单糖顺利衍生，而对二糖不能顺利衍生？可有做过类似衍生的同行，这问题到底出在哪里呢？是肟化试剂中吡啶的含水量高，还是衍生化试剂有问题？

我现在提取的混合物是有脂类糖类还有氨基酸，我想将提取物质干燥成粉末，但是直接将混合物干燥后成粘稠状，我怎样能讲混合液中的脂类和糖类物质去除呢？以便检测。麻烦各位懂得指点一下。

多糖类手性固定相在色谱中的应用郑 芸 方积年(中国科学院上海生命科学院上海药物研究所，上海201203)摘要　手性色谱技术是最重要的手性分离方法之一，它不仅可以快速地分析对映体纯度，也可以用于大量制备光学异构体。设计和发展高效的固定相是手性色谱技术的核心。在诸多的手性固定相中，多糖类手性固定相因品种繁多、耐用而被广泛应用。本文综述了多糖类手性固定相在高效液相色谱、模拟移动床色谱、超临界流体色谱及膜分离中的应用。共引用文献52篇。关键词　多糖，手性固定相，色谱，评述1 引 言　　近20年来，用色谱方法分离手性化合物取得了显著进展，已广泛应用于许多领域，如药物化学、不对称合成和生物分析等，不仅可以测定光学纯度，也可用于大量制备光学异构体。　　手性色谱技术的核心是设计和制备适用范围广的手性固定相(chiral stationary phase，CSP)。至今已制备出大量用于色谱的CSP，其中120多种已商品化。CSP可分为两大类：一类是由小分子固定在硅胶载体上构成(刷型或Pirkle型)，另一类是用光学聚合物固定在载体上制成，多孔胶状的聚合物也可直接用作CSP。其中Okamoto等发展的多糖类固定相是非常有用的分离工具，它们种类繁多、耐用而且负荷量大。其它广泛使用的手性固定相有衍生化的酒石酸CSP(Kromasil—TBB) ]、a１一酸性糖蛋白、Pirkle固定相、环糊精、聚丙烯酰胺和大环抗生素，如万古霉素、teicoplanin和瑞斯托菌素以及最新的用分子印记技术及仿生传感技术发展的CSP 。　　多糖，如纤维素和淀粉是自然界大量存在的有光学活性的生物聚合物。它们具有良好的精细结构，能拆分异构体，包括氨基酸衍生物和联苯衍生物的阻转异构体，但它们的手性识别能力不强，适用面也很窄，只能用于毛细管电泳(CE)分析中。半合成的经过改性的多糖适用范围则大大扩展，可用于LC、CE、SFC、TLC、膜分离及萃取中，既可用于分析也可用于制备。经研究发现，多糖类衍生物的手性识别能力与单糖残基的性质、连接位置和连接形式有关。2 高效液相色谱(HPLC)　　多糖类手性固定相在HPLC中的应用相当广泛，常见的商品化多糖类手性固定相及应用实例可参考相关文献。纤维素类多糖为刚性的线形结构，而淀粉类多糖具有螺旋形结构。据报道有84％的小分子外消旋化合物可用Chiralcel OJ、Chiralcel OD、Chiralpak AD、Chiralpak AS分离 。用HPLC分析对映体时，除了常用的UV或示差折光指数检测器，还可使用专门检测手性物质的旋光检测器和圆二色散检测器。这也是HPLC比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]和NMR光谱等其它分析方法的优越之处。　　为提高手性分离效果以利于检测，还可以对样品进行适当的衍生化。Fukushima 用荧光试剂DBD—PZ([4．[(N，N—dimethylamino)一sulfony1]－7一piperazino-2，1，3-benzoxadiazole])和DBD—COHz(4[[(N—hydrazinoformy1)methy1]一N—methy1]amino-7一[N，N一(dimethylamino)sulfony1]-2，1，3-benzoxadiazole)对(RS)-2一芳基丙酸类化合物进行了衍生化，并发现衍生物洗脱顺序发生改变。3 动态高效液相色谱(DHPLC)　　新发展的手性DHPLC方法 可用于研究高温时立体化学稳定的手性化合物，它可得到一系列受温度控制的平顶或峰形曲线，从而可以考察对映体互变的动态过程、动力学数据及对映体互变的能垒。一般在CSP上用色谱方法分离外消旋混合物，最多可以得到收率50％ 的两种纯的光学异构体。而在DHPLC中，利用CSP来达到对映体互变平衡，从而使分离和平衡合二为一，理论上可以从外消旋混合物中以100％收率得到一种纯的光学异构体。它的基本原理是外消旋混合物立体化学稳定在较低温度时对映体互变过程被抑制，而较高温度发生对映体互变。实验中让外消旋混合物先通过一个低温CSP柱子，将先洗脱出来的组分(A)继续通人第二个高温CSP柱子，收集后洗脱组分(B)。(A)进入第二个柱子后停留足够长时间达到对映体互变平衡，再继续洗脱，得到(A)和(B)。如果进行多次循环平衡、过柱，则可得到纯的对映体(B)。如Lorenz等用DHPLC分离一螺环化合物，该化合物可通过螺环处的C—O 键开环和闭环进行对映体互变。将它依次通过0℃和40℃ 的两根Chiralcel OD柱，平衡2h，即可得到32％ ee(enantiomerie excess，ee)的(+)一对映体。4 模拟移动床色谱(SMB)　　至今批次处理色谱在应用中仍占主导地位，但大规模制备需要大量CSP。CSP价格昂贵，而且产品的浓度低，洗脱液消耗量大，难以回收。SMB可以节省90％ 的流动相并得到更高的产率。在批次处理色谱中被分离组分在流动相的驱动力下移动，固定相只有一小部分起作用。在移动床色谱中，不仅流动相发生移动，固定相也要向相反方向移动，易洗脱的化合物(萃余液)随流动相移动，难洗脱的化合物(萃取液)随固定相移动。整个固定相的分离能力被持续利用，明显地提高了系统产率。但就技术而言很难移动固定相，因此采用模拟方式，SMB的环状柱子实际上是用许多小柱依次连接而成，有规律地改变进样口和出样口，可以达到和固定相移动相同的效果。SMB技术起于20世纪60年代UOP(Universal　Oil Products，Des Plaines，IL，USA)从C８ 中分离对二甲苯，后来该技术被广泛用于制药工业，以获得光学纯药物。其中应用于SMB的CSP约有70％是多糖类CSP。如Nagamatsu等用SMB方法替代以前的非对映体结晶的方法，用稍做改性的Chiralcel OF(cellulose 4-chlorophenyl carbamate)分离了一种制药工业的中间体喹啉甲瓦龙酸酯。Francotte等的研究还发现，SMB对于难溶的化合物，如formoterol尤为有用。而且可调节不同参数如进样率和萃取率来达到最佳纯度和产率。

[color=#444444]定性分析藻细胞分泌液中的主要组分（糖类和小分子酸），负责[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的老师说糖类他们不能检测会把柱子弄坏，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]的老师说含有糖类需要先衍生化。[/color][color=#444444]查阅了好久也不知道衍生化到底怎么做，怎么定性分析分泌液的组分。[/color][color=#444444]有没有大神指点一二，分泌液的组分主要有糖类和小分子酸，含量未知，如何进行衍生化转化糖类以便用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]检测啊？衍生化试剂和反应过程怎么选择呢[/color]

液相色谱的样品处理经常是用水，可是样品中得糖类无法除掉。你认为样品中的糖类对C18柱有影响吗？

小弟我最近在找多糖类的想光知识现在想知道有关的荧光性质但是一直找不到谁知道有相关知识介绍的书或文献啊谢谢把作者 书名或文章名告诉我 谢谢

[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39931.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物，又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。糖类在生命活动过程中起着重要的作用，是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。植物中最重要的糖是淀粉和纤维素，动物细胞中最重要的多糖是糖原。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]总糖含量检测可溶性总糖含量检测还原糖含量检测糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖)单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖)多糖含量检测可溶性固形物含量检测β-葡聚糖含量检测多糖检测植物样本：植物干样、鲜样[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]植物[/td][td]总糖含量检测 可溶性总糖含量检测 还原糖含量检测 糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖) 单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖) 多糖含量检测 可溶性固形物含量检测 β-葡聚糖含量检测[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测：环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务：高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享：HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询：实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

【序号】：1【作者】：王恒宇薛坤仑贺妍蓉【题名】：多糖类止血粉的研究现状与分析【期刊】：现代丝绸科学与技术. 【年、卷、期、起止页码】：2021,36(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iy_Rpms2pqwbFRRUtoUImHT0KOCb9-2L6C5jZapIq9TftsGriqKxsoxngcN3gItFO&uniplatform=NZKPT

[color=#444444]在公司的许多口服液产品中，大多有测可溶性固形物这一指标，记得有机化学中讲旋光度什么的，那是讲糖类的，还有一个是可溶性固形物和我们测定的总糖成正相关，想请教大家的就是，可溶性固形物仅指糖类吗？测可溶性固形物的是手持式折光仪，和悬光仪的测定原理一样吗？[/color]

如题，请问武汉哪里有测糖类的液相色谱呀，

11)，使糖基上的羟基去质子而带负电（因此糖类的分析一般是由负极进样的），直接进行电泳分离，用紫外(195 nm)检测，但这样检测限很高。为降低检测限，可以选用硼酸盐缓冲液，加入硼酸盐不仅会生成络合阴离子，而且会导致195 nm处的吸光度增加2~20倍，但这时，糖分子的吸光度还是很低，检出限只能限制在nmol水平。为进一步降低检测限，可采用间接紫外法，即在缓冲液中加入强紫外吸收物质，形成背景电解质，使无吸收的物质产生负吸收而进行检测的一种方法。但更多的是采用紫外或荧光衍生试剂，如2-氨基吡啶、2-氨基喹啉、8-氨基萘-1,3,6-三磺酸(ANTS)等对单糖进行标记，既可以使糖带上一定的电荷，也可以增加检测的灵敏度。或是采用质谱检测。聚糖包括寡糖和多糖。简单单糖的分析方法也适于简单寡糖的分析。多糖一般利用酸解或酶解的方法将其转化为寡糖后进行分析。多糖也可以直接在合适的条件下进行电泳，但这方面的报道不多。3 糖类化合物的毛细管电泳分析最新进展进行阐述3.1 多糖的直接测定一般而言毛细管常用的检测器是UV、荧光（包括激光诱导荧光）或是MS。但也有其他检测器的报道，如Mikus et al. 使用电导检测器测定了肝素原料中的肝素含量。文中肝素样品未经前处理，并且样品中含有等渗的生理盐水，通过一根300μm i.d. (650μm o.d.) 由乙烯丙烯氟化物制成的长21cm的毛细管作为分离毛细管，通过在运行电解质的添加高聚物（如右旋糖酐）改善分离的选择性，整个分析过程灵敏、快速、简单、并具有良好的重现性。比以往利用凝胶色谱法控制肝素质量有了很大的进步。另一种我们在药学工作中常见的多糖类物质就是淀粉。不同来源的淀粉如玉米淀粉、马铃薯淀粉中支链和直链淀粉的比例不同，造成其制剂学上性质的不同，而建立简便、快速、准确测定二者的含量的方法一直是分析工作者研究的方向。Herrero-Martinez 报道了使用毛细管电泳检测直链淀粉与支链淀粉比例的方法，原理是在缓冲液中加入碘，毛细管电泳作为分离手段，由于淀粉与碘具有亲和作用，可形成复合物并在560nm有吸收而被检测。整个分离过程仅用时7min，该研究中还使用到了气泡形的检测池，使其检测线达到了0.1mg/ml同样是利用亲和作用的原理，Anikó利用脂多糖与蛋白质具有强烈的亲和作用的特性。开发了一种新的检测内毒素的方法，原理是血红素与内毒素形成复合物并在415nm有吸收而被检测，与前述的实验方法不同，血

请教：谁有用近红外做过糖类的检测呢？用的是什么类型检测器的仪器？波长范围是多少？用了什么方法？谢谢各位～

想做些糖类的东西，可是没有这方面的经验，也不知道该用什么柱子。哪位大侠能给推荐几款性价比比较高的糖柱子。万分感谢

[align=center][font=DengXian]可溶性糖类的测定[/font][/align][font=DengXian]一、可溶性糖类的提取和澄清[/font] [font=DengXian]食品中可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖[/font][font=DengXian]及蔗糖等低聚糖。一般须将样品磨碎、浸渍成溶液（提取液），经过滤后再测定。[/font][font=DengXian]（一）提取[/font] 1. [font=DengXian]常用的提取剂有水及乙醇溶液。[/font] 2. [font=DengXian]提取液制备的原则[/font] [font=DengXian]⑴[/font] [font=DengXian]取样量与稀释倍数的确定[/font],[font=DengXian]使[/font]( 0.5[font=DengXian]—[/font]3.5mg / mL)[font=DengXian]。[/font] [font=DengXian]⑵[/font] [font=DengXian]含脂肪的食品，须经脱脂后再用水提取。[/font][font=DengXian]⑶[/font] [font=DengXian]含有大量淀粉、糊精及蛋白质的食品，用乙醇溶液提取。[/font][font=DengXian]⑷[/font] [font=DengXian]含酒精和二氧化碳的液体样品，应先除酒精、[/font]CO2[font=DengXian]⑸[/font] [font=DengXian]提取过程如用水提取，还要加入[/font]HgCl2,[font=DengXian]防低聚糖被酶水解。[/font][font=DengXian]（二）提取液的澄清[/font]1.[font=DengXian]作用[/font] [font=DengXian]沉淀一些干扰物质，使提取液清亮透明，以准确测量[/font][font=DengXian]糖类。[/font]2[font=DengXian]、常用澄清剂要符合三点要求[/font] 1[font=DengXian]）除干扰物质完全，不吸附被测物质糖[/font] 2[font=DengXian]）过量澄清剂不影响糖的测量[/font] 3[font=DengXian]）沉淀颗粒要小，操作简便[/font] 4[font=DengXian]）不改变糖类的比旋光度及理化性质[/font]3.[font=DengXian]使用澄清剂要注意的问题[/font][font=DengXian]应根据样液的种类、干扰成分的种类及含量进行选择，同时还要考虑所采用的分析方法。[/font][font=DengXian]如用直接滴定法测定时不能用硫酸铜－氢氧化钠溶液，以免在样液中引入[/font]Cu2+[font=DengXian]；用高锰酸钾滴定法测定时不能用乙酸锌－亚铁氰化钾溶液，以免在样液中引入[/font]Fe2+[font=DengXian]。[/font][font=DengXian]澄清剂的用量要适当。用量太少，达不到澄清的目的；用量太多，会使检测结果产生误差。[/font][font=DengXian]用醋酸铅作澄清剂时要除铅。但除铅剂在保证使铅完全沉淀的前提下尽量少用。[/font]

各位老师：蛋白质、脂肪、糖类快速检测的方法有哪些，要求最好是分光光度法，操作简单。

[size=4][b]1、糖类物质是烟草中的一类重要化合物。烟草中的水溶性糖，尤其是还原糖，与烟草的香味、吃味及焦油生成量密切相关。不同类型、不同产地、不同部位的烟草，其水溶性糖的含量大小不同，导致了烟草品质间的差异性。随着市场对卷烟产品质量要求的不断提高，建立烟草中各种单糖和低聚糖的测定方法，对烟草生产、改善卷烟配方和吸烟与健康的研究具有实际意义。目前，烟草中总糖和还原糖的测定方法主要有费林试剂法、近红外分光光度法、连续流动分析法、毛细管电泳法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法。高效液相色谱-示差折光检测法（RID）是一种快速、直接的糖分析方法，但RID基于色谱流出物光折射率的变化来连续检测样品浓度，要求恒温、恒流速，对工作环境要求较苛刻，无法进行梯度洗脱，且检测灵敏度不高。蒸发光散射检测器（ELSD）是一种质量检测器，基于不挥发的样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比而进行检测，对没有紫外吸收、荧光或电活性的物质以及产生末端紫外吸收的物质均能产生响应。ELSD稳定性好，灵敏度高，适宜于烟草中包括低含量的鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖等在内的糖类物质分析。本文采用Waters高效糖分析柱、乙腈-水作流动相、蒸发光散射检测器，实现了烟草中8种水溶性单糖和二糖的同时测定。方法准确、简便、快速，具有较强的实用性。[/b][/size][size=4][b]2、 高效液相色谱—蒸发光散射检测器分析糖类化合物　[/b]　[/size][size=3][b][size=4]摘　　要:介绍一种新型高效液相色谱检测器－蒸发光散射检测器，以及其于糖类等无荧光吸收，紫外吸收，或仅有末端紫外吸收化合物分析时的优点。并应用ＥＬＳＤ检测器，对７种糖类化合物进行高效液相色谱测定，获得了良好的结果。[/size][/b][/size][b][size=4]3、HPLC—ELSD法检测红豆杉细胞悬浮培养液中糖组分[/size][/b][size=3][b][size=3][b][size=4]摘　　要:建立了红豆杉细胞悬浮培养液中蔗糖、葡萄糖、果糖的HPLC的检测方法。样品经提取后，在Sugar PAK1型糖柱上以水为流动相，以Sedex55蒸发光散射检测器进行检测。蔗糖、葡萄糖、果糖的线性范围为10μg/ml-3000μg/ml。回收率分别为95．8％、94．4％、94．2％。[/size][/b][/size][size=4]讨论：[/size][size=4]1、你应用ＥＬＳＤ检测过糖类物质吗，检测的是什么样品，效果如何？[/size][size=4]2、你认为ＥＬＳＤ与ＲＩＤ比较在检测糖类上有什么优势，前者可能代替后者吗？[/size]3、药典中除了庆大霉素，还有药品检测用到了蒸发光散射检测器？相关链接：1、[size=2]蒸发光散射检测器在药物分析的应用 [/size][size=4][url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100430/2529733/[/url]　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　[/size][/b][/size]

在多糖类测定分子量时，计算理论板数用的葡萄糖是药典上的分子量为198的葡萄糖吗？需要先进样测定葡萄糖的理论板数吗？ 葡萄糖是小分子的，在凝胶色谱柱上 在最后出峰，与溶剂及小分子物质分不开，如何进行计算理论板数啊？？？

3、 取血蓝蛋白(lemocyanin) 25mg, 溶于10mmol/L PBS （pH8.0）液中（III液） 4、 将II液与III液混合，在磁力搅拌下逐滴加入I液（余下0.5ml） 5、 室温下避光搅拌1小时，逐滴加入余下的I液 6、 4度搅拌12小时 ;7、 静置10小时（4度） 8、 有蒸馏水使之充分透析（约48小时），得免疫原。 3、孕酮与与β-半乳糖苷酶偶联的N-羟琥珀酰亚胺酯法 1、 用二垩烷(dioxane)溶解孕酮-11-半琥珀酸酯，配成浓度为100m mol/L的溶液。 2、 加羟琥珀酰亚胺(N-hydroxysuccinimide) 100 m mol/L 和 DCC（二环已基碳化二亚胺），200 m mol/L, 4度反应16小时。 3、 用簿层扫描方法纯化(氯仿：水=9：1) 4、 按孕酮/酶摩尔浓度比约为10的比例，将上述溶液加入到酶液（用pH7.4，浓度50 m mol/L的磷酸缓冲液溶解）中。 5、 （二）含有氨基或可还原硝基半抗原的偶联 1、芳香胺类半抗原与蛋白质重氮化偶联的操作步骤 6g1、 用0.1 mol/L HCl溶液配制 4 m mol/L浓度的半抗原。 2、 滴加1％NaNO2(过量)，4度持续搅拌。NaNO2的加入量可用淀粉-碘化物试纸或在白色磁砖上加1％淀粉和50m mol/L KI进行监控。游离亚硝酸可将氧化物氧化成碘，碘再与淀粉反应变成蓝黑色。 3、 溶液变成蓝黑色后，继续反应15分钟。4、 用pH9.0、浓度为200m mol/L的硼酸或碳酸缓冲液溶解蛋白。 5、 边搅拌，边加入重氮化的半抗原（防止局部发生酸过量现象），调节pH到9.5。 6、 冰箱中搅拌反应2小时，不断调节pH到9.0。 7、 用PBS透析2天 8、 -20度保存（浓度为20mg/mL） 双功能的酰亚胺酯(imidate esters)可以氨基反应，形成脒。例如：用二甲基已二酰亚胺酯(dimethyladipimide)将去甲基三正喋呤(desmethylmortriptyline)与β-半乳糖苷酶偶联。2、、应用双功能酰亚胺酯（imidate esters）制备去甲基三正喋呤-与β-半乳糖苷酶标记特的操作步骤1、 用含5％（W/V）N-乙基吗啉的无水甲醇0.4ml,在室温下溶解570ug去甲基三正喋呤和488ug 二甲基已二酰亚胺酯(dimethyladipimide)(A液) 2、 取与β-半乳糖苷酶 100 ug, 溶于pH9.9的100 m mol/L碳酸缓冲液（含MgCl2 10m mol/L,2-巯基乙醇 10 m mol/L 0.1ml(B液)3、 将A液倒入B液。4、 20度反应90分钟后，加含NaCl 100 m mol/L, MgCl2 10 m mol/L和2-巯基乙醇 10 m mol/L、pH7.5的Tris-醋酸缓冲液(50m mol/L) 1ml, 终止反应。 5、 过sephadex G-25, 去除小分子物质，得酶标记物（约75％的酶与半抗原结合，但用三正喋呤代替去甲三正喋呤(demethylmortriptyline )进行偶联，则只有15％的酶与之结合。 （三）含巯基半抗原的偶联 可用马来酰亚胺方法与蛋白偶联。此外，将载体蛋白用溴乙酰胺(bromoacetamide)激活。或将载体蛋白与半抗原在pH4.0的醋酸缓冲液中，通过过氧化氢的作用形成二硫键，也可以将半抗原连接到蛋白质分子上。 （四）含羟基的半抗原偶联 醇类羟基通过形成半琥珀酸酯转化为羧基的操作步骤 1、 15g 2,2,2-三氯乙醇（2,2,2-trichloroethanol）,12g 琥珀酸酐(succinic anhydride)和8.7ml 三乙基胺(triethylamime)用100 ml乙酰乙酯溶解。 2、 加热回流1小时。 3、 减压蒸馏去溶剂，,残余物用5% NaHCO3水溶液溶解。4、 用乙醚洗涤两次，然后用H2SO4进行s酸化（pH到2.0）. 5、 用水洗涤固形物（为三氯乙基半琥珀酸酯）两次，用氯仿-已烷使其结晶（产量约75％，熔点88-89度） 6、 取2.5g 半琥珀酸酯溶于6.5ml 亚硫酰氯(thionyl chloride)中，65度加热30分钟。 7、 减压蒸发，干燥1小时（高度真空条件下）。 8、 将上述产生（2，2，2-三氯忆基琥珀酰氯）溶于15ml N,N-二甲基-乙酸乙酰胺(N,N-dimethylethylacetamide)中，室温搅拌反应2小时。 9、 65度真空蒸发后，用异丙醇使结晶析出来（得盐酸化的结晶---5`-酯约84％，熔点160度）。 10、用溶于二甲基甲酰胺中的锌和醋酸解离三氯乙酯，得f半抗原-半琥珀酸酯，这样引和的羧基可与蛋白质偶联（如用碳化二亚胺化）。 半抗原用NaIO4氧化其中的糖苷醇后再与蛋白质偶联的操作步骤 1、 20mg 腺苷溶于1ml 100m mol/L NaIO4溶液中，4度避光反应30分钟。2、 加1滴乙二醇(得A液) 3、 将A液加入到β-半乳糖苷酶液（20mg/ml,用150m mol/L NaCl,10m mol/L MgCl2水溶液溶解，用3％K2CO3调节pH至9.0）中 4、 4度反应2小时，期间不断调节pH9.0 5、 加入临时配制的50 mg/ml NaBO4溶液，用量为反应体积的1/10。 4度反应过夜。 6、 用含有MgCl2 10m mol/L,2-巯基乙醇 10 m mol/L、 NaCl 100 m mol/L的50 m mol/L磷酸缓冲液(pH7.4)透析(更换透析液数次) （五）含酮基或酮基半抗原的偶联是将酮基经羟胺类化合物处理变成肟类化合物，再进一步将肟类化合物中的羟基，衍变成羧基化合物，再进一步进行含羧基半抗原的偶联操作。这类羟胺类化合物主要有：氨氧乙酸aminoxy acetic acid 或羧甲氧胺carboxymethoxyl amine 或者盐酸羟胺酮基的类固醇分子中引入羧基的操作步骤 1、 在200ml 乙醇中，加入O-(羧甲基)羟胺 （O-(carboxyl)hydroxylamine）和酮基半抗原，使其浓度分别为10m mol/L 和4m mol/L H 2、 加热回流90分钟 3、 旋转蒸发，减少容积，然后加水至40ml，用乙醚抽提 4、 用水洗涤乙醚抽提物，用Na2SO4干燥成白色粉末。（六）、其他半抗原的偶联 虽含有游离基团，但因这些基团对于维其生物活性十分重要，因些不能直接用来与载体蛋白 偶联8制备雌二醇-6-肟的操作步骤 a、 雌二醇二醋酸盐的制备 1、 1g雌二醇溶于14ml 吡啶及3.5ml 醋酐中2、 加热回流1小时，冷却后倾入冰水中。 3、 收集白色晶体，得产物约1.1g（熔点126到127度）b、 雌二醇-6-酮-二醋酸盐的制备 4、雌二醇二醋酸盐1.1g，滴加冰醋酸3.8ml 溶解后加含0.93g CrO3的含水冰醋酸6.35ml (H2O:Hac=0.75:5.6) 5、室温搅拌1小时，静置24小时 6、用水稀释，用乙醚提取4次 7、用蒸馏水洗2次8、减压蒸馏，得结晶油状渣物。 9、用90度烘干20分钟，得粗制品约500mg 10、用11ml 无水乙醇溶解粗制品，再加1.1ml 冰醋酸及1.5g吉纳你特T试剂(Girad T)，回流1小时。 11、冷却后，用冰致冷的蒸馏水稀释，用2.5mol/LNaOH调节pH至6.0-6.2. 12、用乙醚抽提3次，弃去乙醚。 13、水层用浓盐酸酸化15、用乙醚抽提3次。16、合并乙醚抽提液，用0.125mol/L碳酸钠溶液洗1次，用蒸馏水洗3次。

为获得某蛋白（A）的特异性抗体，你用该蛋白免疫家兔，你将如何监控针对蛋白（A）抗原产生抗体的动态过程？（简述所选择方法的原理及步骤）期待您的解答，非常感谢。