尿酸氧化节杆菌

[size=16px]氰尿酸检测仪是什么仪器氰尿酸检测仪通常用于测量尿液中的氰尿酸浓度。氰尿酸是一种有机化合物，它是尿液中的一种代谢产物，通常与痛风等疾病相关。氰尿酸检测仪是一种实验室仪器，用于定量测量尿液中氰尿酸的浓度，以帮助医生进行疾病诊断和监测病情。这些仪器通常基于化学分析原理或生化分析原理，可以自动化地进行样本的处理和测量。它们可以提供准确的氰尿酸浓度结果，有助于医疗诊断和治疗决策。不同型号的氰尿酸检测仪可能采用不同的技术和方法，但它们的主要目的是测量尿液中的氰尿酸浓度以监测患者的健康状况。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310310943534961_4781_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

玻尿酸，其实就是以前说的透明质酸。现在的它又保湿，又整形，在美容界十分风光。玻尿酸的保湿功效确实不错，不过如果用得不对，不仅不保湿，还会让皮肤更干燥。至于整形嘛，确实有作用，只是因为会被人体吸收，要常常补充才能维持效果。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109181643_317569_1609805_3.jpg玻尿酸（Hyaluronan，或Hyaluronic acid）还叫透明质酸时，还没这么有名气，改名叫玻尿酸后，突然就火了。透明质酸是一种高级多糖，由D-葡萄醛酸及N-乙酰葡糖胺组成，并且不含硫（这一点使它与别的粘多糖区别开来）。因为它有较强的携水能力，所以受到美容界的重用。

[align=center]双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法[/align][align=center]季学猛[/align][align=center]（南开大学 医学院, 天津 300071）[/align]摘 要：双歧杆菌在维护宿主健康方面具有重要作用，因此对其高密度培养条件的探索具有重要意义。目前，双歧杆菌的高密度培养主要受到培养基组分和培养条件的优化的影响。这里报道了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法。该方法使用补料与碱泵耦合的方法进行补料，通过控制发酵培养基的pH值来调节补料培养基的补入量。此外，本研究还进行了补料培养基的优化实验，通过调整氢氧化钠和葡萄糖浓度的比例，比较了不同补料培养基的发酵性能。实验结果表明该补料培养基及补料方法适用于两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、长双歧杆菌等多种双歧杆菌，而且能够达到较高的活菌密度。本研究提出的补料培养基及补料方法可为双歧杆菌的高密度培养提供有效的解决方案。关键词：双歧杆菌；高密度培养；补料培养基；补料方法；碱泵耦合中图分类号：G482[color=gray] [/color]文献标识码：A[align=center]A supplementary culture medium and supplementation method for high-density cultivation of Bifidobacterium[/align]JI Xuemeng（School of Medicine, Nankai University, Tianjin 300071, China）Abstract: Bifidobacterium plays a significant role in maintaining host health, making the exploration of high-density cultivation conditions crucial. Currently, the high-density cultivation of Bifidobacterium is mainly influenced by the optimization of culture medium components and cultivation conditions. Here, we report a supplementary culture medium and supplementation method for high-density cultivation of Bifidobacterium. The method utilizes coupling of supplementation with an alkaline pump to control the supplementation rate of the culture medium by adjusting its pH value. Furthermore, optimization experiments of the supplementation culture medium were conducted by varying the ratio of sodium hydroxide to glucose concentrations, comparing the fermentation performance of different supplementation culture media. Experimental results demonstrate that this supplementation culture medium and supplementation method are applicable to various Bifidobacterium strains such as Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium animalis, and Bifidobacterium longum, achieving high viable cell densities. The proposed supplementation culture medium and supplementation method in this study offer an effective solution for high-density cultivation of Bifidobacterium.Key words: Bifidobacterium high-density cultivation supplementary culture medium supplementation method alkaline pump coupling双歧杆菌广泛分布于动物和人类的肠道中，已经发现双歧杆菌在维护宿主健康方面起着极其重要的作用，双歧杆菌作为益生菌的功能特性已经引起了越来越多的关注[sup][back=yellow][1-3][/back][/sup]。双歧杆菌的益生菌制剂有潜力通过选择和加强有益菌群来调节肠道微生物群的组成和微生物平衡，从而更有利于人体健康。双歧杆菌制剂已被报道能改善肥胖相关特征、缓解便秘和增强免疫力[sup][back=yellow][4-6][/back][/sup]。双歧杆菌已经成为国内外正在快速发展的微生态制剂中的主要菌种之一。努力探索双歧杆菌的高密度生长条件，对于提高该菌的生产效率和应用推广具有重要意义。双歧杆菌的高密度培养条件的摸索主要涉及培养基组分和培养条件的优化。目前，MRS培养基是最常用的双歧杆菌等乳酸菌培养基，被广泛地用于双歧杆菌的发酵中[sup][back=yellow][7][/back][/sup]。双歧杆菌的最适生长 pH 值在 6.0-7.0 之间[sup][back=yellow][8][/back][/sup]，然而，由于双歧杆菌发酵过程中会产生有机酸等代谢副产物，导致培养过程中培养基的 pH 值不断地降低，限制细菌的生长[sup][back=yellow][9-11][/back][/sup]。为解除酸等代谢副产物对双歧杆菌生长的限制，一些创新型的发酵培养方法已经被提出，比如细胞周期培养、透析培养、细胞固定培养和嵌入法[sup][back=yellow][12-15][/back][/sup]。然而，这些方法在工业应用中受到了各种因素的限制。目前，分批的发酵罐内恒定pH培养方法仍然是主流，在发酵中通过添加碱性溶液来控制培养基的pH值，以减轻酸性生长抑制。在解除酸性生长抑制后，双歧杆菌的生长还受到渗透压和底物不足的限制[sup][back=yellow][16][/back][/sup]。许多营养物在高浓度下导致的高渗透压对细胞有抑制作用，而为了达到高细胞密度，又必须供给大量的营养物质。因此，为了双歧杆菌培养中有效地利用底物，必须优化培养过程以解决底物浓度和渗透压之间的矛盾。将浓缩营养物以与其消耗速率成比例地加入反应器中是一种有效的解决底物浓度和渗透压之间的矛盾的方法，为此产生了多种形式的补料喂养模型：间歇喂养，恒定喂养和指数喂养[sup][back=yellow][17-19][/back][/sup]。在间歇补料喂养中，通过周期性检查并补充生长基质中的葡萄糖含量达到稳定葡萄糖浓度的目的，然而，这种补料模型决定了必然需要大量人力。而且在对数生长阶段，细菌细胞快速消耗葡萄糖，因此在任何两个测量间隔期间可能发生底物缺乏，可能会导致补料不及时，进而影响细菌的生长。在恒定补料喂养中，饲料介质以恒定的流速持续添加到发酵培养基中。这种方法优点是减少了人力需求。但是，益生菌对葡萄糖的消耗速率不是恒定的，这就导致了低喂养速率可能导致细菌生长的底物不足，而高喂养速率会引起过量底物积累，也会抑制细菌生长。对于指数喂养模型，在益生菌前期生长阶段，指数喂养能够很好的耦合细菌对数生长。然而，在细菌对数生长后期，细菌生长速率趋缓，而流加速率继续指数增加会导致底物浓度迅速增加，进而对细菌菌株的生长能力造成不良影响。因此，指数喂养模型也不是合理的方法。综上所述，在益生菌菌株生长期间，这些方法均不能准确控制生长介质中的葡萄糖含量。目前，针对双歧杆菌等厌氧菌发酵过程中产酸，而且产酸与消耗的碳源成正比的特性[sup][back=yellow][20][/back][/sup]，通过将补料与碱泵偶联，可实现了补碱的同时补加碳源。然而，补料与碱泵偶联对于发酵罐技术要求高，该技术仍没有在实验室和工厂中得到广泛推广。1? 补料系统的设计为克服现有技术中的缺陷，这里提出了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法，技术方案如下：一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基，该补料培养基包括质量比为1:10的氢氧化钠与葡萄糖。其中氢氧化钠浓度小于等于50 g/L，葡萄糖浓度小于等于500g/L。可减少补料培养基中氢氧化钠、葡萄糖和溶氧氧化还原反应产生的副产物浓度。为了减少补料培养基中氢氧化钠、葡萄糖和溶氧的氧化还原反应，配制补料培养基的水应尽可能减少溶氧。可通过高温灭菌、煮沸、通氮气或通二氧化碳的方法减少溶氧。氢氧化钠和葡萄糖溶液应分别进行灭菌后进行混合。使用所述的补料培养基的补料方法，需将补料培养基通过碱泵与发酵培养基连接，根据所述的发酵培养基的pH值控制所述的补料培养基的补入量即成。碱泵的流速为5-10mL/min；碱泵的每次开启时间小于等于30s；发酵培养基的pH值的检测周期为20s。补料培养基补入后发酵培养基的pH值与补入前发酵培养基的pH值之差小于等于0.1。用于双歧杆菌高密度培养的发酵的方法包括如下步骤：（1）将双歧杆菌种子液接种至发酵培养基中进行发酵；（2）将补料培养基通过碱泵与发酵培养基连接，根据所述的发酵培养基的pH值控制所述的补料培养基的补入量；（3）在发酵过程中，间隔1小时对发酵培养基取样，检测580nm-620nm下的吸光度值，并检测葡萄糖浓度与活菌数目，当吸光度值大于0.5且相邻2次取样的吸光度值相等或降低即为发酵结束。2? 补料培养基的优化制备如下5种补料培养基，其中氢氧化钠浓度(g/L)和葡萄糖浓度(g/L)比值分别为1:2、1:5、1:10、1:20、1:40，以比较发酵性能。发酵培养基组成如下：1000mL蒸馏水、14.3g大豆蛋白胨、16.7g酵母粉，10g葡萄糖，0.5g可溶性淀粉，1g氯化钠，1g磷酸氢二钾，1g磷酸二氢钾，0.01g FeSO4?7H2O，0.005g MnSO4，0.2gMgSO4，0.5g L-半胱氨酸，使用50g/L的氢氧化钠溶液调节pH至6.8；其中L-半胱氨酸配制为50g/L浓度，膜过滤除菌，在发酵培养基灭菌结束后再按照1/100（v/v）加入L-半胱氨酸。发酵罐通气孔中接入氮气，使得溶氧降至1mg/L以下；设置发酵参数：发酵温度设为37.0℃范围内，搅拌转速200r/min，培养基温度达到37.0℃后，在火焰圈的无菌环境下按照5%（v/v）的接种量加入种子液，同时，加入3滴消泡剂；开启发酵罐搅拌器，设置种子液加入后的培养基的当前pH值6.6为发酵设定pH值。补料设置参数：将补料培养基中碱泵利用软管连接，设置碱泵最大流速为10mL/min，设置碱液根据pH自动控制加入，设置碱泵启动参数为pH值小于6.55，设置每隔10秒测定一次pH值，设置每次碱泵开启时间15秒；发酵中，每隔3小时测OD，每隔5小时取样监测培养液葡萄糖浓度，检测到15小时。如[back=yellow]图1[/back]所示，发现在发酵前5小时，各补料培养基都可以维持葡萄糖浓度处于适宜双歧杆菌快速生长的浓度（灰色范围），而从发酵10小时开始，氢氧化钠浓度(g/L)和葡萄糖浓度(g/L)比值为1:2的补料出现了葡萄糖浓度的下降，说明该碱碳比例在发酵后期不足以满足双歧杆菌开始生长对碳源的需求。同样的，从发酵10小时开始，氢氧化钠浓度(g/L)和葡萄糖浓度(g/L)比值为1:40的补料出现了葡萄糖浓度的过高，说明该碱碳比例在发酵后期不足可能产生高渗透压，不适合双歧杆菌的生长。而氢氧化钠浓度(g/L)和葡萄糖浓度(g/L)比值1:5至1:20补料可以维持发酵过程中葡萄糖浓度的稳定。综合下来，我们发现了补料培养基中氢氧化钠浓度(C碱，g/L)和葡萄糖浓度(C料，g/L)的合适比值为1:5至1:20。[align=center][back=yellow]图1[/back] 不同配比的补料培养对发酵体系葡萄糖浓度的影响的柱状图[/align]3? 补料系统的应用实践3.1? 两歧双歧杆菌高密度培养如[back=yellow]图2[/back]所示，使用本方法，发酵体系中pH值始终保持在6.6±0.1，葡萄糖浓度始终维持在9-13g/L，发酵结束时，发酵液总体积达到4.9L，吸光度达到OD620 12.8，活菌密度最高达到 8.5±0.2 ×10[sup]9[/sup] cfu/mL。[back=yellow]图2[/back] 两歧双歧杆菌的高密度培养的曲线图3.2? 长双歧杆菌高密度培养如[back=yellow]图3[/back]所示，使用本方法，发酵体系中pH值始终保持在6.9±0.1，葡萄糖浓度始终维持在8.5-13g/L，发酵结束时，发酵液总体积达到4.4L，吸光度达到OD[sub]620[/sub] 9.2，活菌密度最高达到 6.4±0.2 ×10[sup]9[/sup] cfu/mL。[back=yellow]图3[/back] 长双歧杆菌的高密度培养的曲线图3.3? 青春双歧杆菌高密度培养如[back=yellow]图4[/back]所示，使用本方法，发酵体系中pH值始终保持在6.7±0.1，葡萄糖浓度始终维持在7-11g/L，发酵结束时，发酵液总体积达到4.6L，吸光度达到OD[sub]620[/sub] 15.3，活菌密度最高达到 1.2±0.1 ×10[sup]10[/sup] cfu/mL。[back=yellow]图4[/back] 青春双歧杆菌的高密度培养的曲线图3.4? 动物双歧杆菌的高密度培养如[back=yellow]图5[/back]所示，使用本方法，发酵体系中pH值始终保持在6.5±0.1，葡萄糖浓度始终维持在7-12g/L，发酵结束时，发酵液总体积达到4.2L，吸光度达到OD[sub]620[/sub] 20.5，活菌密度最高达到 1.7±0.1 ×10[sup]10[/sup] cfu/mL。[back=yellow]图5[/back] 动物双歧杆菌的高密度培养的曲线图4? 结语该研究提供了一种用于双歧杆菌高密度培养的补料培养基及补料方法，补料方法包括如下步骤：将补料培养基通过碱泵与发酵培养基连接，根据发酵培养基的pH值控制补料培养基的补入量即成。通过优化补料培养基及补料方法，无需发酵罐补料偶联技术便实现了根据pH值变化，利用碱泵自动补充碳源和碱液，实现了保持pH值和碳源浓度的稳定；该补料方法对发酵罐的设备技术要求低，操作简单，降低了发酵成本。参考文献(References)：[1]杨硕,唐宗馨,段勃帆,陈禹含,郭欢新,孟祥晨.双歧杆菌及其制剂对炎症性肠病作用机制研究进展[J].食品科学,2023,44(05):275-281.[2]马岩,王中江,杨靖瑜,李哲,彭霞,单秀峰,李柏良,马微微.动物双歧杆菌乳亚种XLTG11对克林霉素诱导的抗生素相关性腹泻的改善作用[J].食品科学,2023,44(03):170-178.[3]李虔全,罗京,周江,刘亭,陈于彪,彭霞,杨建,胡闵山.孟鲁司特钠联合双歧杆菌四联活菌治疗儿童过敏性紫癜有效性Meta分析[J].海峡药学,2023,35(01):127-133.[4]石英,拉巴普尺,张丹瑛,翁书强,刘心怡,汪皓琪.双歧杆菌对高脂饮食诱导的C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝的影响[J].中国临床医学,2022,29(03):473-480.[5]陆敏,袁琳,胡娜,钟霄毓,姜逸,林敏,陆雄.双歧杆菌三联活菌对肥胖小鼠慢性低度炎症的影响[J].卫生研究,2022,51(05):797-802.DOI:10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2022.05.020.[6]李亦汉,王琳琳,赵建新,张灏,王刚,陈卫.两歧双歧杆菌CCFM1167通过提升肠道中乙酸水平以抑制炎症从而缓解便秘[J].食品与发酵工业,2023,49(06):35-41.DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.031238.[7]Umar Farooq. 小米膳食纤维作为主要碳源对益生菌生长和发酵过程中短链脂肪酸产量的影响研究[D].江南大学,2013.[8]杨玲,张栋,齐世华,马新颖,周帅康,艾连中,王世杰.两歧双歧杆菌TMC3115冻干菌粉生产工艺优化[J].乳业科学与技术,2021,44(05):12-17.DOI:10.15922/j.cnki.jdst.2021.05.003.[9]熊三玉. 两歧双歧杆菌驯化及培养条件优化的研究[D].中国海洋大学,2007.[10]冯诗诗. 长双歧杆菌F16的益生特性及其在酸浆豆腐制备中的应用[D].河南工业大学,2022.DOI:10.27791/d.cnki.ghegy.2022.000088.[11]武婷,郭帅,杨阳等. 动物双歧杆菌乳亚种Probio-M8在发酵山羊乳中的应用[C]//中国食品科学技术学会.第十七届益生菌与健康国际研讨会摘要集.[出版者不详],2022:149-150.DOI:10.26914/c.cnkihy.2022.018592.[12]赵春燕,张颖,王丹,刘臻.乳酸菌细胞固定化发酵的研究进展[J].中国酿造,2009(05):11-14.[13]李秀凉,雷虹,张龙丰,周东坡,平文祥.从L-乳酸菌酸菜发酵液中初步分离肽类抑菌物质[J].食品工业科技,2008(07):91-93.DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2008.07.022.[14]邓鹏超. 乳酸菌的高密度培养及酸奶冻干发酵剂的研究[D].华中农业大学,2008.[15]于修鑑. 乳酸菌高密度培养及浓缩型发酵剂研究[D].南京工业大学,2004.[16]黄晓英. 传统发酵食品中具有抑菌特性乳酸菌的筛选、抑菌机理及其在泡菜发酵中的应用[D].西南民族大学,2022.DOI:10.27417/d.cnki.gxnmc.2022.000050.[17]彭海芬. 阿维拉霉素高产菌株的选育及其发酵条件优化[D].河南工业大学,2022.DOI:10.27791/d.cnki.ghegy.2022.000511.[18]吴斌.罗非鱼无乳链球菌SIP-pET32a基因工程菌高密度发酵工艺及SIP蛋白提取方及SIP蛋白提取方法研究[J].中国水产,2022(11):73-78.[19]熊华仪,陈曦,刘月锋,陈雄,李沛,王志.补料策略优化促进乳球菌HB03发酵合成Nisin[J/OL].食品科学:1-11[2023-05-18].http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.2206.ts.20230428.1620.026.html[20]孙东霞,周子安,冯志合,胡修玉,祁光霞,董黎明.pH值调控柠檬酸污泥厌氧发酵产酸及碳源潜力研究[J].中国环境科学,2022,42(11):5198-5207.DOI:10.19674/j.cnki.issn1000-6923.20220620.001.收稿日期：2023-10-19 修改日期：第一作者简历：季学猛，硕士，实验师，研究方向为生物化工、机器学习；生物信息学。E-mail：jixuemeng@nankai.edu.cn。

拍摄时间： 上个月样品名称：双歧杆菌 双歧杆菌 Bifidobacterium是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌，末端常常分叉，故名双歧杆菌。双歧杆菌是人体中非常重要的有益菌（见附录）。大豆低聚糖是双歧杆菌的营养物质，还可抑止有害菌的生长，又被称为双歧杆菌增殖因子（双歧因子）。大豆低聚糖还有一个很好的性质，即它不易被胃吸收分解，大部分可进入肠道做为双歧杆菌的营养，因此糖尿病人也可食用。大豆低聚糖市场有卖。酸奶中含双歧杆菌，但绝大部分会被胃酸杀死。市场上还有双歧杆菌药品，也存在同样的问题。据说有些双歧杆菌药品采用特别技术，加上一层保护，使双歧杆菌可通过胃进入肠道。双歧杆菌具有能清除自由基及过氧化脂质的能力，因而能够延缓细胞的衰老，起到延年益寿的作用。除此，双歧杆菌能非特异性地提高机体的免疫力，提高抗感染的能力，也有利于健康和长寿由于细菌的细胞比较小，光镜下很多结构应该是看不太清楚的，鞭毛、芽孢、荚膜正常都看不见适当染色后芽孢和荚膜能看见，鞭毛不行。因为普通光镜的话四十倍之后就是一百倍的油镜了，看动物细胞一般用四十倍的，但是细菌大概是动物细胞的十分之一吧，想看清楚就得用电子显微镜了。、、人眼能分辨的最小长度大约是0.1毫米而细菌的一般直径约0.5微米，长度约0.5~5微米。（1微米=1000纳米） 当然有例外，有一种纳米比亚嗜硫珠菌直径达0.32~1.00毫米（1毫米=1000微米）；已知最小的细菌“纳米细菌”直径约50纳米。 0.5微米*200=0.1毫米。也就是说，你将细菌的直径放大200倍大概可以看清了，可是这并不是常见的光学显微镜一、细菌培养:双歧杆菌（实验室自己分离出来一株）将菌种接种在优化以后的GAM液体培养基中，置厌氧工作站（BUG BOXnerobic Workstation）培养。见菌液均勺混浊，涂片。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112012058_334696_2019107_3.jpgRuskinn厌氧工作站操作指南及使用注意事项(Bug Box)一、 常规操作1、检查仪器是否正常（温度、气体压力、水槽水位等）。2、若需照明可按下控制面板Chamber Light照明开关或踩下SPOT脚踏。3、温度调节：按FN键→按▲▼调节到所需温度→按FN键直到仪表显示为实际温度和设定温度。4、袖套使用：（1）进入工作腔：涂滑粉→检查气路旋钮（选择单手或双手操作）→将手伸入袖套→踩下VAC脚踏抽气至双手有轻微紧绷感→踩下GAS脚踏充气至适量→逆时针旋转密封盖旋钮至松动→抓住密封盖横杆旋转至水平位置→往里轻推打开密封盖→缓缓伸手将密封盖置于两侧支架上。（2）关闭密封盖：缓缓伸手取下密封盖→将横杆水平方向对准袖套操作口轻轻外拉，旋转至垂直位置，松开横杆→顺时针旋转密封盖旋钮（不可过紧）→确认工作腔已密封，取出双手。5、转移闸使用：（1）放入样品：确认内门已关闭→往里推按钮，打开外门→放入样品架及样品→关闭外门→按下面板Interlock Purge键或踩下LOCK脚踏，Interlock Active指示灯亮，（仪器自动进行转移闸清洁），10秒钟后指示灯熄灭→通过袖套操作口打开内门，放入样品。（2）取出样品：确认外门己关闭→确认转移闸己进行自动清洁（否则按下面板Interlock Purge键或踩下LOCK脚踏清洁转移闸）→打开内门，放入样品→关闭内门，打开外门，取出样品（重复取出样品时，切记每次操作均需进行转移闸清洁）。6、单皿转移系统操作：将密封口螺丝拧松→放下密封板→将平板迅速塞入系统。7、常规操作注意事项：（1）工作腔内操作动作必须轻缓。（2）每天均需确认水槽处于满水位。[siz

紫尿酸分析应用研究[align=center]十月[/align]紫尿酸（violuric acid，VA）中文别名[color=#333333]1,3-二甲基-4-亚氨基-5-异亚硝基脲嗪，5-羟亚氨基巴比土酸，[/color]是一种金属指示剂，[color=#333333]化学式为C[/color][sub][color=#333333]4[/color][/sub][color=#333333]H[/color][sub][color=#333333]3[/color][/sub][color=#333333]N[/color][sub][color=#333333]3[/color][/sub][color=#333333]O[/color][sub][color=#333333]4[/color][/sub][color=#333333]，[/color]其结构式见图1，曾用于金属铜(Ⅱ)的滴定分析，作为显色剂主要用于微量铁(Ⅱ)、钴(Ⅱ)及维生素C（VC）、盐酸羟胺和盐酸氯丙嗪等还原性物质的测定，本文对紫尿酸分析应用情况总结分析于下。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309011028099132_5141_3127170_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309011028100268_7361_3127170_3.[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309011028100879_9380_3127170_3.[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309011028101816_4505_3127170_3.[/img][/align][align=center]图1 紫尿酸的结构式[/align]紫尿酸应用于铁、钴等金属离子的测定1、紫尿酸光度法测定铁[sup][1][/sup]。在碱性条件下,VA与Fe(Ⅱ)发生灵敏的配合反应形成一种稳定的蓝色配阴离子,该配阴离子在620nm和350nm处各有一个正吸收峰,其ε620=1.93×10[sup]4[/sup],ε350=2.64×10[sup]4[/sup],且配阴离子在620nm和350nm的吸光度及其两者之和(A(620+350)均与Fe(Ⅱ)在0～50.0μg/29.0ml呈良好的线性关系,据此本文建立了以VA为显色剂,采用三种测量方式即分别在620nm(方式Ⅰ)、350nm(方式Ⅱ)或在两波长下(方式Ⅲ)测定微量铁的光度法，方法用于自来水中铁的测定，获得了令人满意的结果。2、紫尿酸双波长叠加光度法测定水中微量铁[sup][2][/sup]。在碱性介质中,铁(Ⅱ)与紫尿酸发生显色反应形成一种蓝色配阴离子,该配阴离子具有两个吸收峰,分别位于630 nm和350 nm,吸光度A630,A350之和△A与铁(Ⅱ)的含量在0～2 μg/ mL的范围内符合比尔定律，方法应用于水样中微量铁的测定，其结果[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法相吻合，加标回收率为98～102%，5次平行测定的相对标准偏差为1.2～2.9%。3、紫尿酸树脂相光度法[sup][3][/sup]和薄层树脂相光度法[sup][4[/sup]]测定微量铁。利用碱性条件下，铁(Ⅱ)与紫尿酸反应形成蓝色配阴离子且该配阴离子能被以苯乙烯型强碱性阴离子交换树脂完全吸附，在620nm测定树脂相的吸光度,建立了痕量铁的紫尿酸树脂相光度测定法,方法线性范围为Fe(Ⅱ)0～25.0μg/29ml，其灵敏度约为水相光度法的10倍，方法用于自来水中铁的测定,结果令人满意。提出了在碱性条件下 ，利用薄层树脂相分光光度法测定痕量铁的新方法。将Fe 与紫脲酸形成的络阴离子 ，吸附在717型阴离子交换树脂上 ，通过薄层树脂相光度法测定铁。方法灵敏度高 ，ε620=3.0×10[sup]5[/sup],比水相光度法灵敏度提高15倍。精密度理想，测定含 5.0 μg Fe(Ⅱ) 溶液 6次 ，RSD =1.8%。实测天然水中痕量铁 ，加标回收率为 97%～ 99%。4、紫尿酸光度法同时测定铁和钴[sup][5][/sup]。[color=#666666]利用铁钴配阴离子在365nm处的吸光度具有良好的加和性，建立了同时测定铁,钴的紫尿酸光度法。铁、钴量均在0[/color]～[color=#666666]50.0μg/29ml范围内符合比耳定律，方法用于自来水中铁和钴的同时测定，结果分别与邻菲罗啉光度法和亚硝基R盐光度法一致，回收率分别为96%[/color]～[color=#666666]102%和98%[/color]～[color=#666666]104%[/color]。二、紫尿酸应用于[color=#333333]维生素C等还原性物质[/color]的测定1、[color=#333333]紫尿酸光度法测定蔬菜、水果和药品中的维生素C[/color][sup][6][/sup]。利用[color=#333333]维生素C（[/color]VC[color=#333333]）的还原性及[/color]铁(Ⅱ)与紫尿酸发生灵敏显色反应形成一种蓝色配阴离子的原理，建立了铁(Ⅲ)-紫尿酸体系显色体系光度测定VC的新方法，改法VC含量在0～100.0μg/15ml范围内符合比尔定律，检出限为0.03mg/L，方法应用于[color=#333333]蔬菜、水果和药品中的维生素C的测定，[/color]其结果与对照法结果相吻合，加标回收率为92～103%，6次平行测定的相对标准偏差为2.0～3.5%。2、紫尿酸-Fe(Ⅲ)分光光度法测定盐酸羟胺[sup][7][/sup]。[color=#666666]在碱性介质及溴化十六烷基吡啶存在条件下，盐酸羟胺与Fe(Ⅲ)-紫尿酸体系发生显色反应形成离子缔合物，该离子缔合物在635nm波长处有一个吸收峰，其表观摩尔吸光系数ε=2.05×10[/color][sup][color=#666666]4[/color][/sup][color=#666666]L/(molcm)，建立了测定盐酸羟胺的间接分光光度法，盐酸羟胺的质量浓度在0～2.4mg/L范围内与吸光度与呈良好的线性,线性相关系数r=0.9998，方法的检出限为0.01mg/L，将该方法用于盐酸羟胺的测定，其测定结果与国标法测定结果相吻合，加标回收率为95.0%～104.0%，测定结果的相对标准偏差为0.51%～1.29%(n=5)，该方法灵敏度高，操作简便，可用于盐酸羟胺含量测定[/color]。3、[color=#333333]紫尿酸显色分光光度法测定盐酸氯丙嗪片剂含量[/color][sup][8][/sup]。[color=#666666]建立了以紫尿酸为显色剂测定盐酸氯丙嗪的光度法。在弱酸性条件下，Fe(Ⅲ)被盐酸氯丙嗪定量还原成Fe(Ⅱ)，Fe(Ⅱ)在碱性条件下与紫尿酸反应形成不稳定的蓝色配阴离子，该配阴离子与溴化十六烷基吡啶(CPB)形成稳定的蓝色离子缔合物，该离子缔合物的最大吸收波长位于635 nm，其表观摩尔吸光系数ε=2.62×10[/color][sup][color=#666666]4[/color][/sup][color=#666666] L/(molcm),盐酸氯丙嗪质量浓度在0.5～10.0 mg/L范围内与体系的吸光度呈良好的线性关系，相关系数为0.9992，测定结果的相对标准偏差为1.02%～2.65%(n=5)，加标回收率为 91.0%～95.0%.该法灵敏度较高，选择性及重现性良好，可用于片剂中盐酸氯丙嗪含量的测定[/color]。参考文献1）黄选忠.[url=https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=fb78ad774381d905c8a58f00431bb4bd%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]紫尿酸光度法测定微量铁[/color][/url][color=black][J].[/color][url=https://xueshu.baidu.com/s?wd=journaluri:(5145ec157c6c3d18) %E3%80%8A%E7%90%86%E5%8C%96%E6%A3%80%E9%AA%8C-%E5%8C%96%E5%AD%A6%E5%88%86%E5%86%8C%E3%80%8B&tn=SE_baiduxueshu_c1gjeupa&ie=utf-8&sc_f_para=sc_hilight=publish&sort=sc_cited%22 \o %22%E3%80%8A%E7%90%86%E5%8C%96%E6%A3%80%E9%AA%8C-%E5%8C%96%E5%AD%A6%E5%88%86%E5%86%8C%E3%80%8B%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]理化检验[/color]：[color=black]化学分册，[/color][/url][color=black]1994，30(4):228-229[/color]2）[url=https://xueshu.baidu.com/usercenter/data/author?cmd=authoruri&wd=authoruri:(be536d7becb2c686) author:(%E9%99%88%E5%AD%9D%E8%BF%9B) %E6%B9%96%E5%8C%97%E7%9C%81%E5%85%B4%E5%B1%B1%E5%8E%BF%E5%8C%BB%E7%96%97%E4%B8%AD%E5%BF%83%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]陈孝进[/color][/url][color=black]，[/color][url=https://xueshu.baidu.com/s?wd=authoruri:(a0695e2aef9c86bf) author:(%E7%8E%8B%E8%8F%8A%E7%BA%B2) %E5%AE%9C%E6%98%8C%E5%B8%82%E5%85%B4%E5%B1%B1%E5%8E%BF%E4%BA%BA%E6%B0%91%E5%8C%BB%E9%99%A2&tn=SE_baiduxueshu_c1gjeupa&ie=utf-8&sc_f_para=sc_hilight=person&sort=sc_cited%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]王菊纲[/color][/url][color=black]，[/color][url=https://xueshu.baidu.com/usercenter/data/author?cmd=authoruri&wd=authoruri:(6162ec3c414df85) author:(%E5%BD%AD%E5%85%B0) %E6%B9%96%E5%8C%97%E7%9C%81%E5%85%B4%E5%B1%B1%E5%8E%BF%E5%8C%BB%E7%96%97%E4%B8%AD%E5%BF%83%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]彭兰[/color][/url][color=black]，等.[/color][url=https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=40728203b688c4dd3ce6532c909071c8%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]紫尿酸双波长叠加光度法测定水中微量铁[/color][/url][J].化学分析计量， 2012，21(2):72-743）黄选忠.紫尿酸树脂相光度法测定痕量铁[J].[url=https://xueshu.baidu.com/s?wd=journaluri:(5145ec157c6c3d18) %E3%80%8A%E7%90%86%E5%8C%96%E6%A3%80%E9%AA%8C-%E5%8C%96%E5%AD%A6%E5%88%86%E5%86%8C%E3%80%8B&tn=SE_baiduxueshu_c1gjeupa&ie=utf-8&sc_f_para=sc_hilight=publish&sort=sc_cited%22 \o %22%E3%80%8A%E7%90%86%E5%8C%96%E6%A3%80%E9%AA%8C-%E5%8C%96%E5%AD%A6%E5%88%86%E5%86%8C%E3%80%8B%22 \t %22https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/_blank][color=black]理化检验[/color]：[color=black]化学分册，[/color][/url][color=black]1995,31(6):346-347[/color][color=black]4)[/color][url=https://search.cnki.com.cn/Search/Result?author=%E9%97%AB%E6%B0%B8%E8%83%9C%22 \t %22https://www.cnki.com.cn/Article/_blank][color=black]闫永胜[/color][/url][color=black]，[/color][url=https://search.cnki.com.cn/Search/Result?author=%E8%B5%B5%E5%B9%B2%E5%8D%BF%22 \t %22https://www.cnki.com.cn/Article/_blank][color=black]赵干卿[/color][/url][color=black]，[/color][url=https://search.cnki.com.cn/Search/Result?author=%E9%99%86%E6%99%93%E5%8D%8E%22 \t %22https://www.cnki.com.cn/Article/_blank][color=black]陆晓华[/color][/url][color=black].FeⅡ-紫脲酸体系薄层树脂相光度法测定痕量铁的研究[/color][J].冶金分析， 2003，23（4）：9-11，145）黄选忠.紫尿酸光度法同时测定铁和钴[J].理化检验：化学分册，1996，32(4):227-2286）黄选忠，肖国荣.[color=#333333]紫尿酸光度法测定蔬菜、水果和药品中的维生素C[/color][J].中华预防医学杂志， 1995， 29(2):116-1177）袁君君. 紫尿酸-Fe(Ⅲ)分光光度法测定盐酸羟胺[J].化学分析量计量，2014，23(6):49-518）万能勇，黄选忠.[color=#333333]紫尿酸显色分光光度法测定盐酸氯丙嗪片剂含量[/color][J].化学分析计量， 2015， 24(2):75-78

山东云唐智能科技有限公司水质氰尿酸检测仪是一种专门用于检测水体中氰尿酸浓度的仪器。其主要作用包括：　　水质监测：水质氰尿酸检测仪用于监测水体中氰尿酸的浓度。氰尿酸是一种有害物质，可能存在于工业废水、金属冶炼废水、某些化工过程中的废水等。监测氰尿酸浓度有助于及早发现水体污染问题。　　环境保护：通过检测水体中氰尿酸的浓度，可以迅速发现环境中的潜在污染源，有助于采取必要的措施来减少或阻止氰尿酸污染，以保护自然环境。　　工业过程控制：氰尿酸是一些工业过程的副产品或废水中的污染物。在工业生产中，监测氰尿酸浓度可以帮助确保废水排放符合法规要求，并有助于改进工业过程，以减少废水中的氰尿酸含量。　　饮用水安全：虽然氰尿酸在自然界中并不常见，但在某些情况下，它可能出现在地下水或水源中。检测氰尿酸浓度有助于确保饮用水的安全性，以满足卫生标准。　　科学研究：科研人员可以使用水质氰尿酸检测仪来进行水质研究，探讨氰尿酸在不同水体中的分布、来源和影响等方面的问题。　　紧急响应：在发生氰尿酸泄漏或污染事件时，水质氰尿酸检测仪可用于紧急响应，快速检测水体中的氰尿酸浓度，以评估风险，并采取必要的清除和修复措施。　　总之，水质氰尿酸检测仪对于维护水体质量、保护环境、确保饮用水安全以及支持工业和科学研究都具有重要作用。它们提供了关于水体中氰尿酸浓度的关键信息，有助于预防和解决与氰尿酸相关的环境和健康问题。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309261000465892_8561_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311300938115512_3345_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]　　随着环境污染的日益严重，水质检测成为了一项重要的工作。为了确保人们饮用水的安全，各种水质检测仪器应运而生。其中，氰尿酸检测仪是一种重要的仪器，被广泛应用于水质检测中。　　氰尿酸是一种有机化合物，是人体内正常代谢的产物之一。然而，当人体摄入过量的氰尿酸时，会对人体造成危害。因此，氰尿酸检测仪在水质检测中的应用非常重要。　　氰尿酸检测仪的工作原理是利用光电比色法进行测量。该仪器内部装有光电比色计和光电比色皿，可以测量出水中氰尿酸的含量。当水样中的氰尿酸与试剂反应后，会产生一种带有颜色的物质。通过测量该物质在光电比色计上的吸光度，就可以计算出水样中氰尿酸的含量。　　氰尿酸检测仪的使用方法非常简单。首先，将水样加入到比色皿中，然后加入试剂。等待一定时间后，将比色皿放入氰尿酸检测仪中进行测量。通过观察吸光度的变化，就可以计算出水样中氰尿酸的含量。　　氰尿酸检测仪在水质检测中具有很多优点。首先，该仪器操作简单，使用方便。其次，该仪器测量准确度高，重复性好。最后，该仪器能够快速地测量出水中氰尿酸的含量，为水质检测提供了便利。　　总之，氰尿酸检测仪在水质检测中具有重要的作用。通过使用该仪器，我们可以更好地了解水质中氰尿酸的含量，保障饮用水的安全。　　?

兽药之硫酸粘杆菌素高效液相色谱法检测 硫酸粘杆菌素由多粘杆菌产生，对革兰氏阴性菌有很强的抗菌作用，治疗革兰氏阴性菌（大肠埃希菌等）引起的肠道疾病效果明显，常用作饲料添加剂。对绿脓杆菌感染（败血症、尿路感染、烧伤或外伤创面感染）也有很好的效果。用于饲料添加剂还有明显促生长作用，和磺胺嘧啶合用效果更好。 本品也有很多副作用，内服很少吸收，本品吸收后，对肾脏和神经系统均有明显毒性。使用时剂量过大或疗程过长，以及注射给药和肾功能不全时均有中毒危险。 所以这种东西对于某些症状疗效较好，但也得谨慎使用。检测某些产品中硫酸粘杆菌素的含量就显得尤为重要。下面我们就重点看看高效液相色谱法检测某饲料中硫酸粘杆菌素吧。实验部分原理 取适量该粉末样品加10%甲醇溶解超声提取，经进样器进入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算（外标法）。仪器及试剂1．仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器）、分析天平、超声振荡器、溶剂过滤器2．试剂：甲醇、乙腈（均为色谱纯），纯净水，硼砂溶液样品处理 提取方法：取饲料样品适量，充分粉碎后过0.45mm孔径筛后，装入磨口瓶中备用。准确称取上一步处理过的饲料样品5g，加入150ml 10%的甲醇水溶液，超声波提取20min。将提取液全部转移到1000ml鸡心瓶中，70℃旋转蒸发器蒸至近干，用去离子水溶解并定容至1ml，0.45um有机微孔滤膜滤过，待测。色谱条件检测器：紫外检测器色谱柱：C18,4.6 X 250mm，5um检测波长：215nm流动相：乙腈：PH6.0的硼砂缓冲液=70:30（V：V）流速：1.0mL/min进样量：10ul柱温：室温目标物：硫酸粘杆菌素B，硫酸粘杆菌素A标准品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191339_518984_2498430_3.png标准品，三次平行进样交错叠加色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191339_518985_2498430_3.png样品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191340_518986_2498430_3.png样品，三次平行进样交错叠加色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410191340_518987_2498430_3.png以下是定性、定量数据：序号保留时间(min)峰面积(μAu*s)标样-1113.5331262989 228.7671306312 标样-21[td=1

蜡样芽孢杆菌显色培养基Bacillus cereus Chromogenic Medium用途：用于蜡样芽孢杆菌的显色培养，蜡样芽孢杆菌显蓝绿色蜡样芽孢杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落比较大，苏云金芽孢杆菌显蓝绿色，李斯特氏菌显深蓝色，菌落比较小，其它菌显黄色或无色，革兰氏阴性菌被抑制。 成份 (g/L) 特殊营养物质41.9 显色剂 0.5 抑菌成份 0.6琼脂 15.0 pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 11.6g 加入200ml蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过1分钟。冷却至45-50℃时，倾入无菌平皿，备用。 贮存 制备好的平板可保存 2-5 天，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8 ℃，注意避光保存。 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液； 2、样品液在30±1℃增菌培养18-24小时； 3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上，30±1℃培养18～24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落比较大。若24小时没有出现典型菌落，可延长培养至48小时。 4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上，30±1℃培养18-24小时，挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装SHBG09 7种x2套/盒*5盒)

话说为了应对市场需求，需要进行硫酸粘杆菌素的检测方法的开发，查找标准方法，大致浏览下用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]进行检测，基本资源有满足，开始工作。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1007.gif[/img]1.化合物性质及结构先介绍下硫酸粘杆菌素，分子结构图如下：[img=,200,197]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030927_01_3246897_3.gif[/img]分子式：2(C[sub]52[/sub]H[sub]98[/sub]N[sub]16[/sub]O[sub]13[/sub]).5(H[sub]2[/sub]SO[sub]4[/sub])，分子量：2801.27，纯度80.1%，PH3-7.5范围内稳定，为硫酸粘杆菌素A和硫酸粘杆菌素B的混合物。2. 配制标样。用十万分之一的天平，称取硫酸粘杆菌素10.20mg至10mL容量瓶中，用换算成硫酸粘杆菌素浓度C=2=1347.98mg/L,用体积比V[sub]1[/sub]+V[sub]2[/sub]=1+4的0.1甲酸乙腈溶液溶解，并配置成10mg/L工作液。3. 仪器方法建立。3.1质谱条件3.1.1寻找母离子硫酸粘杆菌素是由氨基酸缩合而成的碱性多肽类抗生素，在一级质谱中易与多个H +结合成多电荷正离子,初步选定流动相A1+B2=3+7，接双通，流速0.2mL/min,进浓度为5.0mg/L的标准品1μL，初始Fragment为100,用MS2 SCAN正模式扫描，得到ESI正离子模式全扫描质谱图如图所示，硫酸粘杆菌素的三电荷离子[sup]3 +[/sup]响应最高，，进而确定它们的母离子(m /z) 分别为390. 5、385. 8。[img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030929_01_3246897_3.png[/img]3.1.2优化Fragment电压将扫描模式该为MS2 SIM模式，将得到的Precursor Ion输入，驻留时间Dwell设为20，Fragment从1v-200V范围设置，在其他仪器条件不变的情况下进样，得到不同Fragment下的响应强度图，初步选定其Fragment在100V左右，进一步在100左右细化Fragment，最终选定硫酸粘杆菌素A和B的Fragment为110V。[img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030930_02_3246897_3.png[/img] [img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030931_01_3246897_3.png[/img]3.1.3 ProductIon和CE优化将扫描模式选为Product Ion模式，将390.5和385.8作为Precursor Ion，MS2 From 100，MS2 To 400（包含母离子），Fragment选定优化好的110V，碰撞能按照CE=左右寻找，得到子离子，选定包含国标的离子，并得到大致CE范围，将扫描模式选为MRM模式，在得到的初步CE左右，进一步优化得到最佳的CE值。[align=center][img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030932_01_3246897_3.png[/img][/align]综上，得到硫酸粘杆菌素的质谱条件，如下表： [b]表 1 目标化合物的质谱分析条件[/b][table=745][tr][td=1,2]No.[/td][td=1,2]中文名称[/td][td=1,2]英文名称[/td][td=1,2]CAS[/td][td]前体[/td][td]产物[/td][td]去簇电压[/td][td=1,2]碰撞能[/td][td]加速电压[/td][/tr][tr][td]离子[/td][td]离子[/td][td](V)[/td][td](V)[/td][/tr][tr][td=1,3]1[/td][td=1,3]硫酸粘杆菌素A[/td][td=1,3]Ceftriaxone Sodium[/td][td=1,3]1264-72-8[/td][td=1,3]390.5[/td][td] 384.7*[/td][td]110[/td][td]5[/td][td]4[/td][/tr][tr][td]378.8[/td][td]110[/td][td]8[/td][td]4[/td][/tr][tr][td]100.9[/td][td]110[/td][td]20[/td][td]4[/td][/tr][tr][td=1,3]2[/td][td=1,3]硫酸粘杆菌素B[/td][td=1,3]Ceftriaxone Sodium[/td][td=1,3]1264-72-8[/td][td=1,3]385.8[/td][td] 380.0*[/td][td]110[/td][td]5[/td][td]4[/td][/tr][tr][td]373.9[/td][td]110[/td][td]5[/td][td]4[/td][/tr][tr][td]100.9[/td][td]110[/td][td]20[/td][td]4[/td][/tr][/table][color=#231F20]注：[/color][color=#231F20]* [/color][color=#231F20]为定量离子。[/color][color=#231f20]3.2 流动相条件液相条件的寻找，首先确定流动相，在双通的用乙腈+0.1%甲酸水=7+3、乙腈+0.1%甲酸水=5+5、乙腈+0.1%甲酸水=3+7 3种比例条件下看峰型和响应的大小，选定乙腈+0.1%甲酸水=7+3时出峰最好，然后乙腈+0.1%甲酸水=7+3、乙腈+0.1%甲酸水5mmol/L乙酸铵=7+3、0.1%甲酸乙腈+0.1%甲酸水=7+3，出峰强度和峰型与乙腈+0.1%甲酸水=7+3基本一样，确定硫酸粘杆菌素在流动相比例乙腈+0.1%甲酸水=7+3时出峰最佳，先接色谱柱，笔者试验Agilent EclipsePlus C18 RRHD 1.8μm2.1*100mm，Waters HSS T3 1.8μm，Agilent XDB-C18 1.8μm，最终发现Agilent XDB-C18 1.8μm，对目标化合物分离效果及峰型最好。[/color][color=#231f20][img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030935_01_3246897_3.png[/img] [img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030935_03_3246897_3.png[/img][/color][color=#231f20]4.用建立好的仪器方法配置标曲硫酸粘杆菌素 St50μg/L, 100μg/L,200μg/L,400μg/L,600μg/L.[/color][color=#231f20][img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030937_01_3246897_3.png[/img] [img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030937_02_3246897_3.png[/img][/color][color=#231f20]4.前处理条件 4.1.化合物分析粘杆菌素为多肽类抗生素，含有多个氨基，极性很强，易溶于水，微溶于甲醇等有机溶液，PH3-7.5范围内稳定，可用HLB和阳离子交换柱进行净化。[/color][color=#231f20]4.2试验方法[/color][color=#231f20]4.2.1 前期试验[/color][color=#231f20] 通过国标方法及文献资料，选择4%三氯乙酸+4%乙酸铅， 10%三氯乙酸：乙腈=3:7溶液作为提取溶剂， 提取离心后 ，用正己烷净化 ，过500mgHLB ，3mL水淋洗，3mL5%甲醇/水淋洗，6mL甲醇洗脱 35℃旋转蒸干或者N[sub]2[/sub]吹干上机分析，加标小瓶中理论值100μg/L，全程试剂空白，猪肉未知样品，及加标回收，均一样大，sp100μg/L有明显的基质干扰，单纯的标准品35℃旋转蒸干或者N[sub]2[/sub]吹干上机分析，无回收。4.2.2前期试验分析与总结：a.最终进样不能吹干或旋干，选择N[sub]2[/sub]（35℃以下）吹至1mL以下；b.HLB洗脱接受后，溶液较浑浊，说明HLB净化效果不佳；c.提取液4%三氯乙酸+4%乙酸铅较其他两种浑浊；d.分析化合物有多个氨基可选择离子交换柱， WCX柱。[/color][color=#231f20]4.2.2 再次试验[/color][color=#231f20]称样5.0g--- 添加标准品1mg/L×100μL[/color][color=#231f20]---加入10%三氯乙酸：乙腈=3:7 15mL----充分混匀，超声20min，离心 [color=#231f20]----[/color]上清液倒入新离心管[/color][color=#231f20][color=#231f20]----[/color] 残渣继续用10%三氯乙酸：乙腈=3:7 10mL提取一遍[/color][color=#231f20][color=#231f20]----[/color]合并上清液，用氨水调PH=7[color=#231f20]----[/color] 加入10mL乙腈饱和的正己烷，充分混匀，离心 [color=#231f20]----[/color]弃去正己烷层，下层过WCX（200mg,6cc），甲醇水平衡[/color][color=#231f20] ----5mL水淋洗 ----5mL甲醇淋洗----6mL甲酸：甲醇=1:4洗脱，接收[color=#231f20]----[/color]用N2在40℃下吹至1mL左右，用水定容至2mL，过0.22μm滤膜。[/color][color=#231f20]线性范围：25μg/L，50μg/L,100μg/L,150μg/L,200μg/L基质标曲。得到如下谱图：[/color][color=#231f20][img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030947_02_3246897_3.png[/img] [img=,400,249]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707030947_03_3246897_3.png[/img][/color][color=#231f20]回收率在70%左右。[/color][color=#231f20]综上：对于硫酸粘杆菌素，提取试剂用酸性，选用离子交换柱比HLB柱净化干净，定容之前溶液勿吹干（多次失败得出）。以上，是本人做硫酸粘杆菌素仪器方法开发时的一些经验和体会，希望能给大家带来帮助，也希望大家能多提提意见，共同进步，谢谢大家。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img][/color][color=#231f20][/color][color=#231f20][/color][align=center][/align]