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小鼠畸胎瘤细胞
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小鼠畸胎瘤细胞相关的方案
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养实验
目的:小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养可应用于:(1)细胞保种;(2)分子生物学研究;(3)基因治疗相关研究。实验原理:将小鼠的胚胎成纤维细胞(MEF)从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置MEF生长培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。
单细胞悬液制备仪|小鼠肝组织单细胞悬液制备实验
样品介绍:小鼠肺组织是实验研究中经常出现的实验组织。通过制备小鼠肺组织的单细胞悬液,可以将肺组织中的细胞分散为单个细胞,并保持其完整的细胞膜和细胞器结构。通过单细胞悬液的制备,研究人员可以对每个单个细胞进行分析,了解其基因表达、蛋白质水平、代谢状态等信息。
迅数MIC显微系统用于小鼠大脑皮层细胞研究
目的:探讨丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤的预防作用及其机制。方法:取小鼠随机分为假手术组、模型组和丙戊酸镁高、低剂量(0.04、0.02 mgg-1)组,每组10 只,灌胃给予相应药物,每日2 次,连续14 d,末次给药1 h 后对后3 组小鼠建立急性脑缺血再灌注损伤模型,建模成功后检测各组小鼠脑指数和脑组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并观察大脑皮层和海马CA1 区细胞形态的变化。结果:与模型组比较,丙戊酸镁高、低剂量组小鼠神经元损伤减轻,脑指数和MDA含量明显降低,GSH-Px活性明显升高(P<0.01 或P<0.05),且丙戊酸镁高剂量组SOD活性明显升高(P<0.01)。结论:丙戊酸镁对小鼠急性脑缺血再灌注损伤具有预防作用,其机制可能与抗氧化作用有关。
从小鼠胚胎中分离胚胎干细胞的方法
设备和试剂--6厘米细菌培养皿--M2培养基+1毫克/毫升牛血清白蛋白(sigma) --M16培养基+ 1毫克/毫升牛血清白蛋白(sigma) --BLS胚胎聚集针(DN-10 或DN-09)--ES细胞单细胞悬液--窄口移液管(处理细胞和胚胎)来自Pasteur移液管或其他合适的玻璃毛细管(移液管内径的应? 100μm )--来自雌性促排卵的八细胞胚胎-- Tyrode’s液,酸性( sigma) --CO2孵化器
糖尿病小鼠胰岛β细胞透射电镜观察
观察2型糖尿病模型db/db小鼠胰岛β细胞的超微结构、胰岛素表达及数量变化,探讨β细胞的病理改变与2型糖尿病病因的关系。 分别选取3、5、8月龄尾静脉空腹血糖高于10.1mmol/L,且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠,每组8只,作为糖尿病组;选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L,体重正常的db/+m表型正常小鼠,每组8只,作为对照组。于相应年龄段取胰尾,用于透射电镜观察、免疫组织化学观察和图像分析。
利用四倍体胚胎补偿法制备 ES 小鼠的技术方法
目的介绍四倍体胚胎补偿法制备ES小鼠技术的操作环节,加快该技术的推广应用。方法综合分析近几年来国内外在小鼠四倍体胚胎与ES细胞嵌合的研究成果,
细胞培养系统:杂交瘤细胞
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。而这两种细胞分贝是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是他的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才是具有持续增殖能力,形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞。
细胞培养系统:杂交瘤细胞
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。而这两种细胞分贝是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是他的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才是具有持续增殖能力,形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞。
小鼠各器官在扫描电镜下的微观形貌
因小鼠的基因和人类基因达到了极高的相似度,最高可以达到98%,在小鼠身上做实验获得的结果,和人类身上的很是相似,很多人类难以治愈的疾病,可以在小鼠身上找到相似性状,从而加以实验发现治病基因。使用扫描电镜对小鼠各器官细胞微观形貌的观察在临床病理上的研究有重要意义。本篇文章我们分享的是关于小鼠各器官在扫描电镜下的微观形貌。
使用人角质形成细胞、成纤维细胞、周细胞和内皮细胞进行血管化和可灌注的皮肤移植的三维生物打印
由异体细胞组成的多层皮肤替代品已被测试用于治疗不愈合的皮肤溃疡。然而,这种非天然皮肤移植不能永久移植,因为它们缺乏对与宿主组织整合重要的皮肤血管网络。在这项研究中,我们描述了使用三维生物打印技术制造一种可植入的多层血管化生物工程皮肤移植物。移植物是使用一个生物墨水包含人类包皮皮肤成纤维细胞(FBs),人类内皮细胞(ECs)来自脐带血人类内皮细胞群体形成细胞(HECFCs),和人类胎盘周细胞(PCs)悬浮在老鼠尾巴I型胶原蛋白形成真皮然后打印第二个生物墨水包含人类包皮角质形成细胞(KCs)形成一个表皮。在体外, KCs复制和成熟形成多层屏障,而ECs和pc自组装成相互连接的微血管网络。真皮生物墨水中的pc与ec内衬的血管结构相关,似乎能促进KC的成熟。当这些3D打印的移植物被植入免疫缺陷小鼠的背侧时,人ec内衬结构与从伤口床上产生的小鼠微血管一起接种,并在植入后4周内灌注。打印真皮中pc的存在增强了宿主微血管对移植物的侵袭和表皮网的形成。关键词:皮肤,组织工程,生物打印,再生医学,微血管系统影响声明三维打印可用于生成多层带血管化的人体皮肤移植,这可能会克服目前在无血管皮肤替代品中观察到 的移植物存活的限制。在皮肤生物墨水中包含人周细胞似乎可以促进皮肤和表皮的成熟。
阻断星形细胞激活可延缓严重缺氧引起的小鼠癫痫发作和呼吸停止
严重缺氧可以诱发癫痫发作。另一方面,癫痫伴随发作后通气抑制,可导致严重缺氧并进一步恶化癫痫状态。这种恶性循环对可能伴有缺氧发作,例如支气管哮喘和睡眠呼吸暂停的患有癫痫症和呼吸系统疾病的患者构成严重威胁。然而,低氧性癫痫和发作后通气抑制的确切病理生理机制仍不清楚。最近的研究表明,星形胶质细胞在大脑的各种功能中发挥着积极的作用,并认为星形胶质细胞还与各种神经系统疾病如癫痫的异常网式兴奋性的进化密切相关。
低场核磁共振技术如何检测STZ诱导糖尿病小鼠体脂比?
STZ诱导糖尿病小鼠模型是一种常用的研究工具,可以帮助科学家们更好地理解糖尿病的发病机制和病程进展。STZ诱导糖尿病小鼠模型具有与人类糖尿病相似的病理生理特征,如高血糖、胰岛素抵抗和β细胞功能受损等。通过研究STZ诱导糖尿病小鼠模型,科学家们可以深入探讨糖尿病的治疗方法和潜在机制,而STZ诱导糖尿病小鼠体脂比对于糖尿病治疗的药物评价起到重要作用。
组织研磨仪研磨小鼠肝脏实验方法和步骤
本文将详细介绍使用多样品组织研磨仪研磨小鼠肝脏实验的方法和步骤,并对实验结果进行深入分析和讨论。在生物学和医学领域中,组织研磨实验是一种常见的细胞破碎方法,主要用于获取细胞和组织中的蛋白质、DNA和RNA等生物分子。而多样品组织研磨仪是一种能够同时处理多个样品的自动化研磨仪器,能够提高实验效率,减少人为因素对实验结果的影响。
转基因小鼠制备实验
转基因小鼠制备实验可应用于:(1)动物发育研究;(2)研究细胞功能调控机制。实验方法原理:遗传的基本物质是DNA,基因是位于染色体上有遗传效应的DNA片段,对于储存在生物全套染色体中的全部遗传信息,可称其为基因组。不同种类、不同个体的生物基因组成是不同的,对动物个体来说,非自身的基因成分属于外源基因,如果把外源基因整合或导入动物染色体基因中,这个外源基因就被称为转基因(transgene)(即转移来的基因),这种动物就是转基因动物。
LCMS-8060测定食源性低聚肽中的肌肽及鹅肌肽
本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪Nexera X2和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用测定食源性低聚肽中的肌肽及鹅肌肽的方法。低聚肽原料经水复溶,采用 Inertsil Amide HP(2.1 mm I.D.×100 mm L., 3 μm)色谱柱实现分离,外标法定量。肌肽及鹅肌肽的线性相关系数均高于0.998,线性范围为0.98 ng/mL ~ 250 ng/mL。以低浓度低聚肽原料为基质,添加1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL三个浓度的质控,回收率在92.5~105.6%之间。该方法简便、快速,适用于食源性低聚肽成品准确定值。
单细胞悬液制备仪对大鼠肿瘤组织单细胞悬液制备实验分享
在肿瘤免疫学领域,单细胞技术可以帮助科学家们更好地了解肿瘤细胞的生长和扩散机制,以及免疫系统如何识别和攻击肿瘤细胞。然而,组织样本单细胞悬液制备是单细胞测序实验中至关重要的工作,其质量好坏直接影响了后续建库的成败以及测序数据产出质量。因此,单细胞悬液制备除了需要有经验丰富的人员来进行指导/操作,还得依靠靠谱的单细胞悬液制备仪来助力。
低氧/厌氧产品案例——骨髓间充质干细胞研究
本研究旨在评价骨髓间充质干细胞在低氧光感受器和实验性视网膜脱离中的保护作用和机制。对缺氧的小鼠感光细胞661w 细胞和与骨髓间充质干细胞共培养的细胞的形态、活力、凋亡和自噬进行了分析。在视网膜脱离模型中,植入骨髓间充质干细胞,观察视网膜形态、外核层(ONL)厚度、视紫红质表达以及视网膜细胞凋亡和自噬。缺氧诱导661w 细胞凋亡明显增加,自噬水平升高,并在缺氧后8 小时达到峰值。与骨髓间充质干细胞共培养后,缺氧状态下的661w 细胞形态较好,凋亡较少。自噬被抑制后,在缺氧条件下凋亡的661w 细胞增加,细胞活力降低。骨髓间充质干细胞处理的视网膜移植后,细胞凋亡显著减少,视网膜自噬被激活。早期自噬增加可促进661w 细胞在低氧胁迫下的存活。与骨髓间充质干细胞共培养可以保护661w 细胞免受缺氧损伤,这可能是由于自噬激活。在视网膜脱离模型中,骨髓间充质干细胞移植可以显著降低光感受器细胞的死亡并保持视网膜结构。骨髓间充质干细胞减少视网膜细胞凋亡和在移植后不久启动自噬的能力可能有助于视网膜脱离后视网膜细胞在低氧和营养限制环境下的生存。
小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用
目的 改良树脂包埋复数小鼠不脱钙胫骨的方法,提高树脂包埋法的效率及稳定性,探索减少树脂切片脱片的方法。方法 取15只B6小鼠共30胫骨,标记、固定、脱水、渗透后将其包埋于直径4 mm的圆柱型树脂块中,胫骨近端1/4处切断后再对剩余的3/4胫骨包埋。在包埋时将5个胫骨切面贴于平整树脂板并包埋于同一树脂块中。分别在包埋液制备、切片、染色3个阶段随机将样本分为对照组及实验组,分别在3个改良组中采用以下方案处理,包括:向包埋液冲入CO2;在切面上涂抹包埋液;在脱塑水化前以95 ℃加热切片15 min。分析树脂凝固时间、切片脱片率及骨形成、成骨细胞定量指标。结果成功包埋6个树脂块,每个树脂块内有5个胫骨,胫骨横截面于同一平面上,树脂块凝固完全,适于切片。向包埋液冲入CO2可以缩短树脂块凝固时间,提高凝固成功率。在切面上涂抹包埋液可以显著降低切片时的脱片率(P0.05)。在脱塑前加热切片可以显著降低脱塑水化后的脱片率(P0.05)。结论 复数小鼠不脱钙胫骨的树脂包埋改良法有效可行,这可能是一种理想的不脱钙骨组织研究方法。关键词:树脂包埋;不脱钙;复数胫骨包埋;预防脱片
小鼠皮下肿瘤磁共振造影成像实验
1、实验目的:小鼠皮下肿瘤MRI造影成像效果与造影剂代谢过程研究。
选用冷冻研磨仪对小鼠肿瘤研磨实验组织研磨效果如何?上海净信
小鼠是生物医学研究中使用数量最多的哺乳类实验动物,人类利用小鼠模型进行癌症研究已有 100多年的历史,小鼠大量的遗传变异可作为研究人类痛症的借鉴.特别是近年来,培育成功的转基因、基因敲除等遗传工程小鼠模型,使我们对人类癌症发生有了深刻的认识,为评估癌症的诊断方法,革新预防和治疗方案提供了一个很有价值的平台
基于质谱成像技术进行不同营养状态下小鼠肾脏脂质组学分析
本文展示了应用成像质谱显微镜iMScope QT对不同营养状态下小鼠肾脏中脂质化合物的代谢变化进行研究的应用案例。使用iMScope QT结合数据分析软件IMAGEREVEAL MS对正常饮食小鼠和高糖高脂饮食小鼠肾脏组织切片中的脂质化合物进行检测和数据分析,计算每组的平均值、比值、P值等信息,最终筛选出17个上调脂质化合物、10个下调脂质化合物,为研究膳食模式、脂质代谢变化与肥胖三者之间的关系提供理论依据。
低氧/厌氧产品案例——低氧与大鼠心肌细胞OGD 研究
丹参素对急性心肌梗死(AMI)诱发的心功能下降和心肌重塑有保护作用,但其剂量-效应关系及其作用途径尚不清楚。本研究采用丹参素不同剂量(7.5、15 和30 mg/kg/d)给AMI 模型大鼠灌胃21 d,在体内评估生存率、超声心动图和组织学分析;采用MTT 法、流式细胞术、Western blotting 等方法研究丹参素对H9C2 细胞的细胞毒性和抗凋亡作用。机制上,研究了MAPK 效应因子和p38 在体内的激活。结果表明,中、高剂量丹参素能明显改善心功能,减少梗死面积和心肌纤维化。中剂量对心功能的保护效果最好,而高剂量对细胞凋亡和组织学改变的保护效果最好。在体内,丹参素显著抑制JNK 的激活,这可能有助于解释自噬对AMI 诱导的凋亡的以及剂量效应关系的差异。综上,本研究提示JNK 抑制在丹参素诱导的心肌梗死抗凋亡作用中起重要作用,且中剂量丹参素在体内的抗凋亡作用最强。
人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒
人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)检测试剂盒人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)抗原、生物素化的人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)CCL11)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
聚乙烯亚胺转染人神经母细胞瘤细胞效果的影响因素
探讨聚乙 烯亚胺( P E I ) 转染人神经母细 胞瘤细 胞 ( S H— S Y S Y ) 效果的影响因素。方法 利用 电泳 阻滞 实验测定 P E I 与 D N A形成 复合 物时所需的 比例 , 通 过 M r r 法测定 P E I 对 s H— S Y 5 Y细胞 的毒 性 , 采用流式细胞术检测细胞 转染效率 , 探 索转基 因次数 对 P E I 转基 因效率的影 响。 结论: P E I 是 有效的体外真核细胞转 染剂 , 可作为 S H— S Y 5 Y的基 因载体。
胚胎显微操作-胚胎分割
胚胎显微操作-胚胎分割 (一)概况 胚胎分割是通过对胚胎进行显微操作,人工制造同卵双生或同卵多生的技术,它是扩大胚胎来源的一条重要途径,其理论依据是早期胚胎的每一个卵裂球都具有独立发育成个体的全能性。 本世纪三十年代,Pinrus等首次证明兔2细胞胚的单个卵裂球在体内可发育成体积较小的胚泡。之后,Tarkowski等人的实验胚胎学研究成果进一步证明了哺乳动物2细胞胚的每一个卵裂球都具有发育成正常胎儿的全能性。七十年代以来,随着胚胎培养和移植技术的发展和完善,哺乳动物胚胎分割取得了突破性进展。Mullen等于1970年二分2细胞期鼠胚,通过体外培养及移植等程序,获得了小鼠同卵双生后代。Willadsen于1979年通过分离早期胚胎的卵裂球,成功地获得了绵羊的同卵双生后代。国内张涌等通过分割小鼠、山羊早期胚胎,均获得了同卵双生后代。进一步研究表明,四分胚,八分胚也可以发育成新个体。窦忠英等将7日龄的牛胚胎一分为四,实现了同卵三生。值得说明的是,随着胚胎分割次数的增多,分割胚的发育能力明显降低,这可能与胞质的不断减少有关。 (二)分割方法 胚胎分割方法主要有显微操作仪分割和徒手分割两种。
基因克隆:高效感受态细胞制作
实验方法原理:主要原理是通过电击法或CaCl2、RbCl(KCl)等化学试剂处理,使细胞膜的通透性发生暂时性的改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。因RbCl法制备的感受态细胞转化效率较高,本实验操作以此为例说明。
如何运用BLS细胞融合仪及胚胎聚集针创建胚胎
如何运用BLS细胞融合仪及胚胎聚集针创建胚胎 注射器内吸入培养基,在35mm组织培养板上微滴(大致直径3mm)点样成若干行(列)。向培养板内小心注入石蜡油使其覆盖整板,注意不要使石蜡油直接倾倒在微滴上。石蜡油很容易越过这些微滴。石蜡油的量要完全覆盖这些微滴。使用配件按照说明操作,制作凹陷。37度,5%CO2条件下孵育培养板几小时,目的是让培养基在液滴内达到平衡。这一步可以在形成凹陷的步骤之前进行。实验前准备好待聚集的细胞,组织或胚胎,不要将它们长时间暴露在室温下或脱离最适培养条件时间过长。通过在组织培养板盖上加入几滴M2培养基和Tyrode’s酸溶液来去除卵透明带。将组织培养板的培养区域表面如此处理后,胚胎将本能的黏附在表面—因此我们需要使用盖。确认所有培养基溶液和酸液都接近室温。将胚胎放置在一滴M2培养基上。取尽可能少的内含10-20个胚胎的培养基,并移到一滴酸液上。重复这个步骤并将胚胎移到新的一滴酸液上。让胚胎在吸头内保持上下移动,观察卵透明带是如何溶解的。迅速将胚胎移入M2培养基。用几滴培养基溶液洗涤并移入刚才制成的凹陷中。胚胎培养条件是聚集产量的一个重要因素,因为胚胎要培养过夜,如果是四倍体胚胎在移入母体前需要培养48小时。在培养的每个细节都必须小心操作控制。这包括温度,大气,培养基,室温操作时间及矿物油质量。
单细胞悬液制备仪高效助力乳鼠心脏组织的单细胞制备
实验目的:新生大鼠1-3的心脏组织,需要提取样品组织的心肌细胞和成纤维细胞,以便后续用于加药研究。
使用细胞培养基平台C2MAPTM进行人iPS细胞未分化性评价
通过使用C2MAP对培养上清液的多种成分进行同时分析,分别鉴定出了Kynurenine、2-Aminoadipic acid,作为在未分化iPS细胞、外胚层分化细胞中表示特征性波动的标志物成分。结果表明,所鉴定出的标志物成分是与细胞的未分化/外胚层分化状态密切相关的因子。因此,通过使用本系统,可以对细胞状态进行非侵袭性的评价。
3D细胞培养模型 – 概述
体外细胞培养是研究细胞功能、了解疾病和发现新药的重要工具,介绍了不同的 3D 细胞培养模型来研究类似体内状态的细胞。
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