酿造成熟与未成熟油菜蜂蜜成分组成及生物学活性比较研究
屡见不鲜的蜂蜜掺假现象对养蜂行业产生了巨大的冲击,制约了蜂蜜市场的健康发展。近年来越来越多的养蜂者为加快蜂蜜生产进度,不等自然封盖即进行频繁摇蜜,产出的未成熟蜂蜜经后续浓缩、脱水等步骤,使蜂蜜的水分、糖含量达到标准规定。尽管此类浓缩蜂蜜的各项基础理化指标与天然成熟蜂蜜无异,但蜂蜜中的微量物质及其具有的生物学活性却可能受到很大影响。为探究未成熟蜂蜜与自然成熟蜂蜜间的差异,本研究以我国最具代表性的油菜(Brassica napus L.)意蜂(Apis Mellifera L.)蜂蜜为研究对象,对比研究了封盖成熟油菜蜂蜜与未封盖不成熟油菜蜂蜜的化学组成以及生物学活性。主要研究结果如下:1、采用国标中规定的方法检测了两种油菜蜂蜜中的水分、糖、酸度、糠醛值、淀粉酶值等基础理化指标。结果表明,封盖成熟油菜蜂蜜的各项理化参数均符合标准规定,而未封盖油菜蜂蜜除羟甲基糠醛值符合标准规定外,其余各项指标均不达标。2、通过超高效液相色谱-四极杆串联质谱技术对蜂蜜提取物中的小分子物质进行采集分析,并结合代谢组学数据分析技术进行非靶向分析。经主成分判别分析两类蜂蜜可以实现有效区分。差异性分析结果表明,未成熟油菜蜂蜜中有机酸、糖苷、植物碱等物质含量较多,而成熟蜂蜜中酚类物质含量较高。3、对油菜蜂蜜中常见的多酚类物质进行靶向代谢组学分析,两种蜂蜜中共检出20 种多酚类物质,其中山奈酚、芹菜素、松属素、3, 4-二甲氧基肉桂酸、白杨素、咖啡酸苯乙酯在未成熟油菜蜂蜜中的含量低于检测限,除香草酸、丁香酸外,其余12 种酚类物质含量均低于成熟油菜蜂蜜。4、DPPH、ABTS+· 自由基清除能力、铁还原能力测定结果表明,成熟油菜蜂蜜相较未成熟油菜蜂蜜体外抗氧化能力更强;抑菌实验结果表明,两种蜂蜜对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)均有抑制效果,且成熟油菜蜂蜜的抑菌效果更为明显,但两种蜂蜜对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均无抑制作用。5、建立过氧化氢诱导小鼠L929 成纤维细胞氧化应激模型,探索两种蜂蜜对H2O2 诱导的细胞氧化应激损伤的保护作用。成熟油菜蜂蜜提取物在浓度为300 μ g/mL 时即可显著提升H2O2 诱导的受损细胞的生长活力,而未成熟油菜蜂蜜提取物在浓度为600 μ g/mL 时才表现出上述效果;两种蜂蜜提取物均可在一定程度上上调细胞相关抗氧化基因的表达,但成熟油菜蜂蜜提取物对氧化应激受损细胞中抗氧化基因调节作用更为明显。本研究结果表明,成熟油菜蜜具有更丰富的多酚类化合物和更好的生物学活性,这也为成熟蜂蜜的质量标准和评判依据奠定了理论基础。