柄曲霉素对照品

黄曲霉素是一种由霉菌产生的有毒化合物，广泛存在于各种粮食中，如玉米、小麦、大米等。长期食用含有黄曲霉素的食物可能对健康造成严重影响，因此对于粮食中黄曲霉素的检测显得尤为重要。

黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。

黄曲霉素广泛存在于自然界中，主要是黄曲霉和寄生曲霉的次级代谢产物。黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，目前已发现20余种，主要有B1、G1、G2以及M1、M2，这些代谢产物在分子结构上十分接近。黄曲霉毒素具有致癌、制畸、制诱变作用，将抑制蛋白质的合成，干扰RNA和DNA的合成，导致动物全身性损害，因此近年来各级食品药品监管部门高度重视。一直以来，药材、食品以及饲料等的相关国家标准中都对黄曲霉毒素有严格限量要求。近期新发布的2020版药典也是新增了多个检测品种（如远志、胖大海、陈皮、桃仁等）要求检测黄曲霉毒素含量。

杂色曲霉素(Sterigmatocystin)为含有双呋喃环的氧杂蒽酮类化合物，主要由杂色曲霉和构巢曲霉等真菌产生，杂色曲霉素被国际癌症研究机构归类为“2B类致癌物”，具有肝毒性、肾脏毒性、免疫毒性和遗传毒性等，其主要污染谷物及谷物制品。

黄曲霉是一种常见霉菌，广泛存在于自然界，潮湿易发霉的植物和食品中都会存在。同时，一些发酵食品因为发酵过程本身就易产生黄曲霉毒素。但在一般状态下，黄曲霉本身毒性并不大，高温即可杀灭。但在黄曲霉达到一定浓度后，其产生的代谢物就会产生毒素，该毒素会破坏人体免疫系统， 引起肝脏病变甚至致癌。黄曲霉毒素是霉菌的二级代谢产物，1993年就被世界卫生组织的癌症研究机构划定为1类致癌物。其中黄曲霉毒素B1毒性和致癌性最强，而黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢物。我国乳及乳制品中规定黄曲霉毒素M1限量为0.5μg/kg， 粮食中黄曲霉毒素B1为10μg/kg。 在邻国日本，黄曲霉素因具有致癌性以及强急性毒性，规定不得在食品中检出。过去，日本国内的黄曲霉素相关法规主要针对黄曲霉素B1，但从2011年10月开始总黄曲霉素（黄曲霉素B1，B2，G1，G2的总和）成为限制目标。为应对相应法规，岛津公司的日本同事们利用岛津的先进技术开发了多种黄曲霉素的检测方法。现介绍使用岛津荧光检测器“Prominence RF-20AXS” 高灵敏度检测黄曲霉素的分析方法，供从事食品检测的用户参考使用。

【检查】有关物质 取本品适量，用含量测定项下的流动相A-B（68:32）定量稀释制成每1 ml中含氯霉素0.5 mg的溶液，作为供试品溶液；另取氯霉素二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、氯霉素对照品、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯对照品各适量，加甲醇适量（氯霉素每10 mg加甲醇1 ml）使溶解，用上述流动相定量稀释制成每1 ml中含氯霉素0.5 mg、氯霉素二醇物40 ug、对硝基苯甲醛3 ug、羟苯甲酯40 ug、羟苯乙酯50 ug、羟苯丙酯20 ug的混合溶液，作为对照品溶液。【含量测定】 精密量取本品适量，流动相定量稀释制成每1 ml中含0.1mg的溶液，摇匀，测定。

zinsser analytic 公司设计生产了 一个适用于多种场景的自动化固相萃取系统，可用于复杂食品中污染物分析的样品前处理，具体应用的污染物包括丙烯酰胺，三聚氰酸，黄曲霉毒素M1，三聚氰胺，黄曲霉毒素B/G，赫曲霉毒素。

由于大麻对癌症、多发性硬化症和肌萎缩侧索硬化症（ALS）等疾病具有治疗效果，美国超过半数的地区已经将医用大麻的使用合法化。与传统的农作物一样，农药有时也用于大麻种植中，以保护大麻免受虫害，并提高产量除农药外，大麻的生长条件也有利于霉菌和真菌的生长，这些霉菌和真菌会产生致癌的真菌毒素，包括赭曲霉素A 和黄曲霉毒素。因此，对大麻中农药和真菌毒素的检测对于确保消费者安全和质量控制来说至关重要。珀金埃尔默应用开发团队分析了添加在大麻花提取物中的所有66 种农药（包括典型的用GC-MS/MS 方法分析的极度疏水性农药和含氯农药）和五种真菌毒素，其分析结果远远低于加利福尼亚州规定的残留限值。LC-MS/MS 仪器使用电喷雾离子源（ESI）和大气压化学电离源（APCI）以及采用简单的溶剂提取方法，该方法对所有分析物的回收率都达到了70%-120%的可接受范围。

根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering 公司提供) 经过黄曲霉素免疫亲和柱净化，经过柱后后衍生荧光检测。分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯 激发波长：365nm 检测波长：430nm

一、背景介绍黄曲霉毒素M1 （Aflatoxin M1）属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。物理化学性质相当稳定，不被巴氏消毒法破坏。哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。黄曲霉毒素M1危害主要表现在致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。Pribolab(普瑞邦)作为专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商之一，整合了原北京泰乐祺检测应用实验室，更加专注于霉菌毒素检测产品和技术解决方案的服务,以期快速提出解决方案。针对几年来牛奶及其制品中不断出现的黄曲霉毒素M1超标问题，建立了一套完整的解决方案。

目前来讲，Aflatoxin?M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1?ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。

随着苹果生长期的延长以及苹果和苹果浓缩汁出口能力的提高，它们摄入污染产品的可能性也随之增加。棒曲霉素是一种真菌霉素，在苹果腐烂过程中产生，本文描述了一种采用安捷伦超高惰性色谱柱检测棒曲霉素的方法，该方法无需样品衍生化。该色谱分析方法可以分离5 - 羟甲级糠醛(HMF) —— 一种由苹果产品中的糖在过度加热时生成的产物。使用聚苯乙烯- 二乙烯苯SPE 柱执行固相萃取，然后在注入GC/MS 系统检测前用乙酸乙酯进行液/液萃取，完成样品制备。

ACQUITY QDa质谱检测器可与UPLC或HPLC系统结合，以提供稳定可靠的正交检测。确保能够检测出苹果汁中含量低于法规要求十分之一的棒曲霉素和婴儿食品中含量为相关法规要求的二分之一的棒曲霉素。新型ACQUITY QDa检测器可轻松添加到现有液相色谱工作流程中，从而显著提高使用LC检测器获得的选择性。

1 根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯 激发波长：365nm 检测波长：430nm

ACQUITY QDa质谱检测器可与UPLC或HPLC系统结合，以提供稳定可靠的正交检测。确保能够检测出苹果汁中含量低于法规要求十分之一的棒曲霉素和婴儿食品中含量为相关法规要求的二分之一的棒曲霉素。新型ACQUITY QDa检测器可轻松添加到现有液相色谱工作流程中，从而显著提高使用LC检测器获得的选择性。

根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定（摘自 Sigma-Alchrich 公司）色谱柱：Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm柱压：230bar流 速：0.3ml/min柱 温：35℃试液温度：20℃进样量：10ul流动相：A 液，0.1%甲酸溶液； B 液，乙腈-甲醇溶液（1+1）

本文描述了一种采用安捷伦超高惰性色谱柱检测棒曲霉素的方法，该方法无需样品衍生化。该色谱分析方法可以分离 5 - 羟甲级糠醛 （HMF） —— 一种由苹果产品中的糖在过度加热时生成的产物。使用聚苯乙烯 - 二乙烯苯 SPE 柱执行固相萃取，然后在注入 GC/MS 系统检测前用 乙酸乙酯进行液/液萃取，完成样品制备。将 Agilent 7890A GC 与配备有惰性 EI 350 ° C 无涂层离子源的 Agilent 5975C 质谱仪联用。Agilent J&W DB-35ms UI 色谱柱安 装在多模式进样口 （MMI） 上，采用冷-不分流模式以获取上佳样 品传输。棒

1 根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)分析条件：色谱柱：MYCOTOX 柱，1612124。温度：42℃流速：1.0mL/min流动相：MeOH,CH3CN,H2O 22:22:56,柱后衍生条件：柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL 反应器温度：95℃试剂：I2 100mg/L 水溶液检测：荧光检测，氙灯激发波长：365nm 检测波长：430nm

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业（眉山）和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明，反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量，在之前的相关食品卫生标准中有明确规定，其中：鲜乳及其乳制品（折算为鲜乳汁）不得超过0.5ug/kg 婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。（GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量！

中药样品基质不干扰黄曲霉毒素出峰，分别取黄曲霉毒素混合对照品溶液5、10、15、20、25 μ L进样，得到各黄曲霉毒素标准曲线，其线性相关系数均大于0.9999。以S/N=3为检测限，S/N=10为定量限，测定黄曲霉毒素四个组分的检测限和定量限，黄曲霉毒素各峰检测限和定量限均低于药典要求黄曲霉毒素的检测限。

目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商， 2010年泰乐祺科技投巨资成立了"检测应用实验室"，重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题，泰乐祺科技提供了两种检测方案，可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。

目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商， 2010年泰乐祺科技投巨资成立了"检测应用实验室"，重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题，泰乐祺科技提供了两种检测方案，可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。

黄曲霉毒素经常出现在花生，花生制品，面籽制品，谷物和干辣椒等中，然而霉菌的生长并不一定意味着毒素的出现，因为黄曲霉毒素的产生往往需要一定的生长环境，例如湿度﹑温度和通风等。黄曲霉毒素中的B类霉素要在蓝色荧光下进行检测，而G类霉素要在绿色荧光下进行检测。数字下标显示了相对的色谱流动性。除了毒素经常在蔬菜中被发现（B1,B2,G1和G2），黄曲霉毒素M（牛奶中）也经常在吃了有毒饲料的奶牛的牛奶中被发现。M的高毒性代谢物就是B的4羟化物。 这里所提供的柱后方法最重要的特征就在于可以一次性地在同一荧光发射波长下对所有四种黄曲霉毒素进行检测。在此方法中我们推荐您使用带有1.4mL反应器的Pickering PCX5200。

检测植物油中黄曲霉素的实验操作步骤通常涉及样品准备、反应检测等步骤。以下是一般性的实验操作步骤，具体仪器和试剂的使用方法可能会根据设备和厂家不同而有所不同。在进行任何化学实验之前，请确保您已经熟悉实验操作，并且穿戴适当的安全设备（如实验手套、护目镜等）。 实验操作步骤： 样品准备：

对照品系指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，包括杂质对照品，不包括色谱用的内标物质。在药品检验工作中我们常会用到一种用来检查药品质量的特殊参照物——药品标准物质(对照品)。它在药品检验中具有十分重要的地位。随着仪器分析的广泛使用，必将越来越多地使用药品标准物质。

本文使用Essentia黄曲霉毒素分析系统，参考国标GB 23200.112-2018《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》柱后碘衍生法，对辣椒中黄曲霉毒素进行方法建立和测定。以外标法定量，4种黄曲霉毒素在各自浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数r均大于0.999，准确度在93.1~109.9%之间。对标准溶液连续进样5次，重复性结果（RSD%表示）显示，4种黄曲霉毒素的保留时间RSD%在0.17~0.22%之间，峰面积的RSD%在3.31~4.64%之间，加标回收率在72.3 ~84.3%之间。上述结果表明，该方法准确度高，重复性好，可为辣椒中黄曲霉毒素的测定提供参考。

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业（眉山）和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明，反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量，在之前的相关食品卫生标准中有明确规定，其中：鲜乳及其乳制品（折算为鲜乳汁）不得超过0.5ug/kg 婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。（GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量！黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。作为国内专业从事霉菌毒素检测技术与产品服务的主要供应商， 2010年泰乐祺科技投巨资成立了"检测应用实验室"，重点关注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等检测技术问题，以期望快速提出解决方案。近期应针对奶中出现的黄曲霉毒素M1超标问题，泰乐祺科技提供了两种检测方案，可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。高效液相色谱法：符合国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定酶联免疫检测法：方法快，适合大批样品的筛选。检测限符合国家检测限量要求。 另外，我公司为应对饲料粮食中黄曲霉毒素检测，推出PriboFast® KRC 光化学柱后衍生池免费试用活动，详情请来电咨询！

本实验依据出入境检验检疫行业标准SN/T 2543-2010进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量测定，分别使用150mm和250mm的MG色谱柱对展青霉素和羟甲糠醛进行分析。通过对照品比对，第一个峰为羟甲糠醛、第二个峰为展青霉素。在标准方法下，两根色谱柱均对羟甲糠醛与展青霉素有所分离，两根不同长度色谱柱的分离度均达到了2.0以上。

采用睿科全自动固相萃取仪分析奶粉中的黄曲霉毒素M1，试样经热水溶解后用甲醇进行提取，提取液经离心、稀释后用含有黄曲霉素特异抗体的免疫亲和柱自动净化。

本实验以罗红霉素对照品为分析对象，按照罗红霉素标准提高征求意见稿有关物质项下方法进行了分析。实验中分别尝试了资生堂CAPCELL PAK C18 MGII和C18 SPOLAR两款色谱柱对系统适用性溶液进行分析，如上图1、图2所示，两款色谱柱均可使罗红霉素保留时间在22分钟左右，A峰与B峰分离度、B峰与C峰分离度均大于1，谱图与标准图谱基本一致，满足标准要求。