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非洲绿猴肾细胞

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  • 非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4

    非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4

    [b][color=#cc0000]非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4[/color][color=#cc0000][img=,600,799]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110261419211252_8026_1841897_3.jpg!w600x799.jpg[/img][/color][/b]

  • 网爆安捷伦利用”非洲牛郎”色诱中石化女处长 低价中标!

    中石化一女处长身陷非洲牛郎门 称正核实2013年01月03日07:51央视网段红彪我要评论(3)转播到腾讯微博http://img1.gtimg.com/hb/pics/hv1/249/202/1234/80292609.jpg微博截图  中新网1月3日电 (记者 段红彪)针对近日网曝中石化一位女处长在中石化武汉乙烯项目中存在“暗箱操作”一事,中新网记者通过有关方面,辗转联系到了该位女处长,她对此回应称,有关网贴内容系故意捏造,已向北京市公安机关报案。  据其称,个别人利用互联网恶意捏造和炒作涉及个人相关情况,其本人已主动向组织说明情况,并请求组织进行调查。同时就相关网贴内容故意捏造荒唐故事,恶意诽谤个人名誉,已向北京市公安机关报案。  对于武汉乙烯项目的招投标过程,她表示,网上贴文所涉及的内容,与实际情况严重不符,这个项目完全按照法律规定程序进行的,是在社会公开进行招标和公示中标结果(包括中标价格),公示后没有接到任何质疑。  她说:“这次网络传言已对我个人身心造成了极大的伤害,也给我的家庭带来了严重影响。我将一定对这种恶意诽谤行为进行法律追究。我坚信,法律一定会维护一个社会公民的合法权益,维护一个社会公民的人格尊严!”  新闻背景  知情人爆料的“非洲牛郎门”事件,是指安捷伦公司在中石化武汉乙烯项目中,利用非洲“牛郎”色诱招标公司中石化国际事业公司的一位女处长,在投资 180亿元的中石化武汉乙烯项目中进行暗箱操作,在评标过程中让安捷伦非法降价30万美元低价中标,又相互配合威逼利诱武汉乙烯的用户,迫使他们同意将中 标方案中一套价值80万美元的软件换成成本不足10万美元的软件,最终,安捷伦不仅非法中标,还多赚了40万美元。  中石化办公厅外宣办有关负责人1月2日下午表示,因事发假期期间,自己对此事并不知情,会在具体核实实情后向外界披露,但这需要一个时间过程,希望公众冷静以待。

  • 非洲国家不比中国我们应该在旅行前准备些什么

    非洲国家不比中国我们应该在旅行前准备些什么  在去非洲旅游之前,有些要准备的东西也要留意一下,因为去非洲旅游,不比在家。所以一些个人生活中比较习惯的事情,未必大家都能想到,我们这里作为抛砖引玉,为大家提个醒,希望大家能因此想到更多,为大家的非洲旅游画上一个完美的句号。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R613150TN.jpg  非洲机场  行李重量  在去非洲旅游之前,大家肯定会带一些必要的换洗衣服,或者是洗漱用具等常用的物品,我们这里不是提醒您要带这些,而是提醒您,机场的行李托运是有重要要求的,每个人不得超过多少,所以,您在去非洲旅游之前,最好把您所乘坐的飞机的行李托运的重量问清楚,最好要留有富裕的,以便您回来的时候,买些旅游纪念品什么的。  带些小零食  非洲旅游国家不像是国内,随处可以买到你喜爱的零食,所以,爱吃些小零食的朋友们,最好提前准备一些,像是薯片啊,榨菜啊什么的,您喜欢的都可以带一些。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R6131G1J0.jpg  非洲的商店  生活用品要带足  年轻的女士们和男士们可以准备一些必要的生活用品,因为这些生活用品在中国可能很便宜,但是,在非洲就不见得了,因为,非洲的生活用品的价格往往是中国的3-4倍,如果您在旅行时这些用品用完了,那么在非洲买就不值得了。  在非洲旅游时千万不要理发  虽说大多数的游客不会选择在非洲旅游的过程中去理发,但是我们这里还是提醒大家一下吧,避免发生一些悲剧。因为非洲的许多国家都是不允许外国人经营美容美发生意的,所以,大街上的理发店都是当地人开的,再加上当地人的手艺不敢恭维,非洲又是个疾病高发的地方,万一划破了皮肤,造成不可估量的损失,谁负责呢。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R61320101O.jpg  小国旗  自备中国的小国旗  为什么要自备小国旗呢,主要是为了防患于未然,因为非洲这里政权更迭很容易引起动乱,危及外国人的生命安全。如果在非洲旅游期间发生了动乱,因为,中国在非洲人的眼中还是比较友善的,所以一旦发生动乱,多数情况下,中国国旗还是起作用的。  遭到抢劫时要怎么做  非洲国家的治安真是不敢恭维,如果您在旅游过程中遇到了这样的情况,请不要做任何动作,因为那样的话,很可能会为您带来不必要的伤亡。多数情况下,这些歹徒都是图财不害命的。所以正确的做法是,不要叫喊,迅速的将歹徒要的东西给他们,毕竟钱财乃身外物,保命是第一位的。之后记住他们的相貌特征,事后即使报警。  以上是我们为您总结的一些在纳米比亚旅游自由行的时候,应该注意的一些细节,希望能给您提个醒,祝您有一个安全舒适的非洲自由行。

  • 293T/17(人胚肾细胞)

    293T/17(人胚肾细胞)

    293T/17(人胚肾细胞)293T/17(人胚肾细胞)培养条件:DMEM(PM150210)+10% FBS (164210-500)+1% P/S (PB180120)由衷地感谢您对我们公司的信任与支持! [img=,557,423]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707311556_01_3250905_3.png[/img]注意事项:1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。 [img=,557,425]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707311556_02_3250905_3.png[/img]温馨提醒:1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞首次传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。 更多咨询中国微生物菌种查询网 网址:www.biobw.org

  • 【分享】人类首次拍摄寄生虫感染细胞图像 有利研发疫苗

    [center]人类首次拍摄寄生虫感染细胞图像 有利研发疫苗[/center]美国新出版的《公共科学图书馆• 病原体》杂志报告说,澳大利亚悉尼世纪研究所的科学家利用独创的技术,首次成功地拍摄记录下了细胞被寄生虫感染以及寄生虫随后开始向全身传播的图像。 悉尼世纪研究所免疫成像项目主任沃夫冈• 温宁格教授介绍说,他们的研究借助了能够实时观察活细胞的大功率多光子显微镜。他表示,皮肤中的树状细胞是他们研究的对象。他们发现,在正常条件下,表皮内的细胞处于静止状态,而真皮内的细胞却极其活跃,不停地移动,似乎是在搜寻病原体。在人为地将利什曼虫(Leishmania)引入细胞中后,他们观察到了寄生虫被细胞“拾起”以及开始向整个身体蔓延的过程。 利什曼病是一种经由沙蝇叮咬所传播的原虫疾病。据估计,在非洲、中东和南美某些地区,利什曼病的感染患者近1200万人,每年新增病例大概200万宗。利什曼病导致患者皮肤溃疡,并能影响病人的内脏,如脾、肝和骨髓。如果不采取治疗措施,那么病人或许会有生命危险。 直观跟踪病原体在细胞中的活动状况,为人们设计和研发防病疫苗提供了重要条件。温宁格表示,通过研究,他和同事对病原体如何被免疫系统识别以及参与的细胞有了基本了解。这意味着人们能分析那些可以识别帮助利什曼虫病原体感染患者的分子,并将这些分子作为疫苗针对的目标。此外,他们还能了解其他感染的免疫反应,以便开发出更好的疫苗。 世纪研究所执行理事马修• 瓦达斯教授认为,帮助研究人员拍摄免疫过程的多光子显微镜如同医学研究中的哈勃望远镜。哈勃让人们清晰地观察宇宙万物,而多光子显微镜则提供了独特的细胞观察方法,帮助人们全新地了解免疫系统是如何工作的。信息来源:科技日报

  • 细胞周期的测定原理与操作步骤

    一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞 计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期,则染色体中约一半为两条单体均浅染,另一半为一深一浅。细胞 如果仅经历了一个周期,则两条单体均深染。计分裂相中各期比例,就可算出细胞周期的值。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/08/27/A1377590583.jpg二、仪器、用品与试剂1. 仪器、用品:同常规细胞培养2. 试剂:BrdU(1.0 mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液三、操作步骤1. 细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10 μg/ml。2. 44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1 μg。3. 48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。4. 常规染色体制片。5. 染色体玻片置56 ℃水浴锅盖上,铺上2×SSC 液,距紫外灯管6 cm处紫外照射30分钟。6. 弃去2×SSC液,流水冲洗。7. Giemsa液染色10分钟,流水冲洗,晾干。8. 镜检100个分裂相,计第一、二、三、四细胞期分裂指数。9. 计算:细胞 周期(Tc)=48/(小时)附:(1)BrdU配制: BrdU 10 mg十双蒸水10ml 4 ℃下避光保存。(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,柠檬酸三钠,2H2O 0.88克,加水至100 ml,4 ℃保存。

  • 应对新变种,美国宣布对非洲八国实施旅行限制

    应对新变种,美国宣布对非洲八国实施旅行限制11月26日,美国总统拜登宣布,由于对在南非发现的新冠病毒新变种的关注,美国将从11月29日开始对来自八个南部非洲国家的旅客实施旅行限制。世界卫生组织已把这一变种定为“值得关注”的变异毒株。“作为我们有更多信息之前的预防措施,我下令对来自南非和其他七个国家的航空旅行实施额外限制,”拜登在声明中说,“这些新限制措施将在11月29日生效。在我们向前迈进之际,我们将继续接受科学和我的医学团队建议的指导。”这些国家包括南非、博茨瓦纳、津巴布韦、纳米比亚、莱索托、斯威士兰、莫桑比克和马拉维。白宫高级官员表示,拜登政府是在总统首席医学顾问福奇和疾控中心的建议下,出于“格外谨慎”而实施的这项旅行限制措施,这项政策并不禁止航班,也不适用于美国公民或永久居民,但是他们与所有国际旅客一样,必须在旅行前接受检测并且结果呈阴性。

  • 中石化一女处长身陷非洲牛郎门(已经上了湖北财经频道)

    中石化一女处长身陷非洲牛郎门 称正核实核心提示:针对近日网曝中石化一位女处长在中石化武汉乙烯项目中存在“暗箱操作”一事,中新网记者通过有关方面,辗转联系到了该位女处长,她对此回应称,有关网贴内容系故意捏造,已向北京市公安机关报案。http://stimgcn1.s-msn.com/msnportal/money/2013/01/03/51cc9559-574a-46d3-b702-2838d40b073e.jpg微博截图  中新网1月3日电 (记者 段红彪) 针对近日网曝中石化一位女处长在中石化武汉乙烯项目中存在“暗箱操作”一事,中新网记者通过有关方面,辗转联系到了该位女处长,她对此回应称,有关网贴内容系故意捏造,已向北京市公安机关报案。  据其称,个别人利用互联网恶意捏造和炒作涉及个人相关情况,其本人已主动向组织说明情况,并请求组织进行调查。同时就相关网贴内容故意捏造荒唐故事,恶意诽谤个人名誉,已向北京市公安机关报案。  对于武汉乙烯项目的招投标过程,她表示,网上贴文所涉及的内容,与实际情况严重不符,这个项目完全按照法律规定程序进行的,是在社会公开进行招标和公示中标结果(包括中标价格),公示后没有接到任何质疑。  她说:“这次网络传言已对我个人身心造成了极大的伤害,也给我的家庭带来了严重影响。我将一定对这种恶意诽谤行为进行法律追究。我坚信,法律一定会维护一个社会公民的合法权益,维护一个社会公民的人格尊严!”  新闻背景  知情人爆料的“非洲牛郎门”事件,是指安捷伦公司在中石化武汉乙烯项目中,利用非洲“牛郎”色诱招标公司中石化国际事业公司的一位女处长,在投资 180亿元的中石化武汉乙烯项目中进行暗箱操作,在评标过程中让安捷伦非法降价30万美元低价中标,又相互配合威逼利诱武汉乙烯的用户,迫使他们同意将中 标方案中一套价值80万美元的软件换成成本不足10万美元的软件,最终,安捷伦不仅非法中标,还多赚了40万美元。  中石化办公厅外宣办有关负责人1月2日下午表示,因事发假期期间,自己对此事并不知情,会在具体核实实情后向外界披露,但这需要一个时间过程,希望公众冷静以待。  据悉,安捷伦科技有限公司是一家多元化的高科技跨国公司,是全球电子测量、生命科学与化学分析的领导者,其产品正在化学、环保、食品、医药和生命科学领域中广泛使用。

  • 宇航员太空拍非洲上空雷暴云团

    宇航员太空拍非洲上空雷暴云团

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/01/201201291040_346807_1641557_3.jpg非洲上空的雷暴和灿烂的银河星空背景http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/01/201201291040_346808_1641557_3.jpg太阳即将升起,拍摄就此结束

  • 刚出“俄罗斯艳女门”又陷“非洲牛郎门”

    转自@新浪财经:中国青年网北京1月2日电(记者 周小璐)近日,一位网友爆料中石化一位女处长身陷“非洲牛郎门”事件,将中石化致于舆论漩涡之中。  这位知情人爆料的“非洲牛郎门”事件,是指安捷伦公司在中石化武汉乙烯项目中,利用非洲“牛郎”色诱招标公司中石化国际事业公司的一位女处长,在投资180亿元的中石化武汉乙烯项目中进行暗箱操作,在评标过程中让安捷伦非法降价30万美元低价中标,又相互配合威逼利诱武汉乙烯的用户,迫使他们同意将中标方案中一套价值80万美元的软件换成成本不足10万美元的软件,最终,安捷伦不仅非法中标,还多赚了40万美元。  消息一出,舆论哗然。截至中国青年网记者发稿时,此贴在某社区论坛点击量已高达9000多次。  为进一步求证爆料信息的真实性,中国青年网记者今天下午致电中石化办公厅外宣办有关负责人,他表示,因事发假期期间,自己对此事并不知情,会在具体核实实情后向外界披露,但这需要一个时间过程,希望公众冷静以待。事件原委究竟如何,当事人何时出面做出正面回应,中国青年网将继续跟踪此事进展。  中国青年网记者查阅了《中华人民共和国招标投标法》,其中第三十二条规定:投标人不得与招标人串通投标,损害国家利益、社会公共利益或者他人的合法权益。第四十三条:在确定中标人前,招标人不得与投标人就投标价格、投标方案等实质性内容进行谈判。第四十六条:招标人和中标人应当自中标通知书发出之日起三十日内,按照招标文件和中标人的投标文件订立书面合同。招标人和中标人不得再行订立背离合同实质性内容的其他协议。  据悉,安捷伦科技有限公司是一家多元化的高科技跨国公司,是全球电子测量、生命科学与化学分析的领导者,其产品正在化学、环保、食品、医药和生命科学领域中广泛使用。(原标题:中石化称正核实非洲牛郎门事件 将披露实情)

  • 非洲猪瘟

    18日早间,三全食品公告称,已第一时间将相关疑似批次产品从各销售渠道全部封存。2月15日,三全食品已将北京市场上的猪肉灌汤水饺全部下架。近百年全球未发生过人感染非洲猪瘟的情况“非洲猪瘟疫情不会影响猪肉及其制品的食用安全,可以放心食用猪肉及其制品。非洲猪瘟发现近100年来,全球范围内没有发生过人感染非洲猪瘟的情况。”王守伟说。中国动物卫生与流行病学中心副主任黄保续也表示,非洲猪瘟不是人畜共患病,不会感染人,同时它也不会感染除了猪之外的其他动物,不影响食品安全。世界卫生组织、联合国粮农组织、世界动物卫生组织等国际组织既没有把非洲猪瘟列入人畜共患病,也没有列入多种动物共患病。有关国家科研人员曾经将非洲猪瘟的病毒接种到犬、鼠、兔等10余种动物做感染实验,均未发生感染。“目前市场上销售的高温肉制品和低温肉制品,其加工条件均可使该病毒失活。而家庭烹饪鲜(冻)猪肉时,其温度往往在90—100℃,病毒更加容易失去活性,只要保证足够烹制时间就行。不必因为某个地方发生非洲猪瘟疫情就不吃猪肉,食堂暂停供应猪肉制品也是没有必要的。”王守伟介绍。中国有能力控制非洲猪瘟疫情2018年之前,我国一直没有非洲猪瘟。“非洲猪瘟于1921年在肯尼亚首次发现,截至2018年11月,已有60个国家先后发生非洲猪瘟疫情。但是,只有13个国家根除了疫情,根除时间为5至36年。”农业农村部畜牧兽医局副局长冯忠武说。“我国发生非洲猪瘟疫情以来,所有已发疫情均已得到及时有效处置,目前疫情呈点状发生,总体可控。但非洲猪瘟病毒在我国已形成了一定污染面,传统的生产、流通、消费方式短期内难以根本改变,疫情传播途径错综复杂,风险难以完全阻断,且目前尚无有效疫苗,以上因素共同决定了防控工作的复杂性和长期性。”农业农村部畜牧兽医局有关负责人表示。近日,农业农村部系统总结了非洲猪瘟疫病流行规律和近半年的应急处置经验,在原《非洲猪瘟疫情应急预案》和《非洲猪瘟防治技术规范(试行)》基础上,制定印发了《非洲猪瘟疫情应急实施方案(2019版)》,指导各地严格规范地做好疫情应急处置。

  • 【转帖】法国科学家揭示基孔肯雅病毒侵入细胞机制

    法国科学家揭示基孔肯雅病毒侵入细胞机制 来源:新华社法国国家科研中心日前发表公报说,该机构与巴斯德研究所合作,通过揭示基孔肯雅病毒表面蛋白质的3D结构,掌握了这种病毒侵入细胞的机制,这一发现将有助于开发新的抗病毒药物。公报称,研究人员借助电子显微镜清楚观测到这种病毒表面蛋白质的3D结构,他们发现,蛋白质E1、E2、p62等在病毒入侵机制中发挥着关键作用。首先,基孔肯雅病毒会在E2的帮助下附着在细胞膜上,然后被运送到核内体,后者的酸性环境会激发E1的活性,在它的作用下,病毒与核内体融为一体,并趁机在细胞中释放核糖核酸,从而复制更多的病毒。在完成对一个细胞的感染后,病毒表面的蛋白质会重新组合,在p62的帮助下冲破酸性环境,寻找新的传播目标。基孔肯雅病毒是导致基孔肯雅热的元凶,是以发热、皮疹及关节痛为主要特征的急性传染病,主要在南亚、非洲中部和东部等地区传播,目前尚无防治的特效药或疫苗。研究人员说,掌握基孔肯雅病毒的传播机制将有助于提高基孔肯雅热的防治水平。

  • 非洲猪瘟实验室检测资格开放时间表

    一、非洲猪瘟概述非洲猪瘟(African Swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)感染家猪和各种野猪(非洲野猪、欧洲野猪等)引起一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,该病也是我国重点防范的一类动物疫情。其特征是发病过程短,最急性和急性感染死亡率高达100%,临床表现为发热(达40~42℃),心跳加快,呼吸困难,部分咳嗽,眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物,皮肤发绀,淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血,非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似,只能依靠实验室监测确诊。2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。目前,我国内地各省(市、自治区)均有非洲猪瘟疫情报告。二、实验室检测资格开放时间表1、2018年8月3日前,各实验室在我国确诊首例非洲猪瘟疫情前,有关部门对非洲猪瘟的检测并未明确进行限制。但对于含有活病毒的感染性材料,相关法律法规和文件规定必须在BSL-3实验室进行。2、2018年8月5日,指定实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟防治工作的紧急通知》,规定“除我部指定的实验室外,任何单位和个人不得擅自保存病料,不得从事疑似含有非洲猪瘟病毒样品的实验活动。”指定的实验室包括:中国动物卫生与流行病学中心(国家外来动物疫病研究中心,简称动卫中心)、中国动物疫病预防控制中心、中国兽医药品监察所、中国农科院哈尔滨兽医研究所、中国农科院兰州兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所。3、2018年9月5日,省级实验室农业农村部下发《关于开展非洲猪瘟专项监测的通知》,决定各省、自治区、直辖市和新疆生产建设兵团省级畜牧兽医主管部门各推荐一个承担非洲猪瘟专项监测工作的实验室,并于2018年9月6-11日参加中国动物疫病预防控制中心组织的实验室检测能力比对。此后,通过能力比对的省级实验室,可开展非洲猪瘟实验室检测工作。4、2018年10月25日,其他实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟实验室检测工作的通知》,规定“现承担实验室检测任务的各省级动物疫病预防控制机构根据工作需要,并经省级畜牧兽医部门批准,可选择辖区内具有相应设施设备和专业技术人员,管理体系健全,近三年内未发生任何生物安全事故,具有生物安全二级或以上的实验室分担样品检测任务。受委托实验室可为高等院校、各级动物疫病预防控制机构、第三方检测机构等符合条件的实验室。”至此,各省(市、自治区)将非洲猪瘟检测权限逐渐下放至有相应管理和检测能力的实验室。实际操作中,一般是先下放至各地级市兽医实验室,然后逐步下放至县(市、区)实验室、第三方检测机构等。5、2019年1月2日,屠宰场自检农业农村部公告第119号规定:“生猪屠宰厂(场)应当在驻场官方兽医组织监督下,按照生猪不同来源实施分批屠宰,每批生猪屠宰后,对暂储血液进行抽样并检测非洲猪瘟病毒。经PCR检测试剂盒或免疫学检测试纸条检测为阴性的,同批生猪产品方可上市销售。其中,经PCR检测为阴性的,有关生猪产品可按照规定在本省或跨省销售;经免疫学检测试纸条检测为阴性的,有关生猪产品仅可在本省范围内销售。”并规定上述措施自2019年2月1日起执行。2019年3月13日农牧发7号《加强屠宰环节非洲猪瘟检测工作的通知》中指出屠宰企业开展自检,自建PCR实验室或委托实验室检测,要求生猪进场前以车为单位采集全部生猪血液样品,均匀混合后检测。跨省销售生猪产品和年屠宰10万头以上的屠宰企业以及生猪屠宰、加工一体化企业最迟于4月1日前开展非洲猪瘟自检;年屠宰5万头以上的屠宰企业最迟于5月1日前开展自检;其他屠宰企业最迟于7月1日前开展自检。6、2019年4月3日,猪肉制品加工企业自检市场监管总局、农业农村部和工业和信息化部发布《关于在加工流通环节开展非洲猪瘟病毒检测的公告》,要求猪肉制品加工企业、生猪产品经营者采购生猪产品应当批批查验其非洲猪瘟病毒检测结果(报告),不得采购没有非洲猪瘟病毒检测结果(报告)的生猪产品。猪肉制品加工企业应当参照《农业农村部办公厅关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知》(农办牧〔2019〕3号)和农业农村部第119号公告的要求,从2019年5月1日对生猪产品原料开展非洲猪瘟病毒核酸检测。7、2019年4月12日,规模猪场、种猪场自检农业农村部办公厅发布《关于加强养殖环节非洲猪瘟疫情排查工作的通知》,鼓励规模猪场、种猪场配置检测仪器设备,规范使用经农业农村部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法,自行开展非洲猪瘟检测,提高排查工作的针对性和有效性。

  • 【转帖】日本利用诱导多功能干细胞让瘫痪绒猴重新蹦跳

    TAG: ips 冈野荣之 干细胞 绒猴 http://img.antpedia.com/attachments/2010/12/27501_201012101146281.jpg  据物理学家组织网12月8日报道,日本研究人员称,他们利用诱导多功能干细胞(iPS)使一只瘫痪小猴的运动能力恢复到接近正常水平,这只小猴因为脖子以下脊椎受伤而不能正常运动。  日本东京庆应义塾大学冈野荣之教授称,这是世界上第一个在小型灵长类动物身上用干细胞修复脊椎损伤的例子。此前,他和研究小组曾用相似方法,帮一只小鼠恢复了运动能力。  研究人员移植了四种基因到人体皮肤细胞,生成诱导多功能干细胞,然后再把诱导多功能干细胞注射到一只瘫痪的绒猴(美洲产小型长尾猴)体内。冈野荣之说,考虑到治疗最佳时机,研究人员在绒猴受伤后第九天进行了注射,这是最有效的时机。在随后的两到三周内,绒猴开始活动它的四肢。“6周以后,它恢复到了又能到处蹦跳的水平,这已经非常接近于正常水平。它用前肢抓住物体的力量也恢复到了80%。”  但冈野荣之说,虽然用人类胚胎干细胞作为治疗癌症和其他疾病具有很大潜力,但要取得能发育成几乎所有组织的细胞,就要破坏人类胚胎,因此胚胎干细胞研究面临诸多争议,并受到宗教保守人士的反对。而日本研究人员的新研究为在人类身上使用类似医疗技术开拓了道路。

  • 细胞过滤筛

    [b][url=http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/cell-stainer.html]细胞过滤筛Cell stainer[/url][/b]是[b]细胞过滤网,细胞筛网[/b],需要把细胞标记到芯片上。细胞过滤筛还具有夹持工具用于吸附细胞筛网,方便用户操作。[img=细胞过滤筛]http://www.f-lab.cn/Upload/cell-stainer.JPG[/img][img=细胞过滤筛]http://www.f-lab.cn/Upload/cell-label.JPG[/img]细胞过滤筛Cell stainer 细胞过滤筛Cell stainer 应用:cell labelling细胞过滤筛:[url]http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/cell-stainer.html[/url]

  • 流式细胞仪检测细胞周期及正常范围

    [b][font=宋体][font=宋体]细胞周期[/font][font=Calibri]cell cycle [/font][/font][/b][font=宋体]是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,它反映了细胞增殖的速度。在临床上,有很多研究证明,细胞周期分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一个完整的细胞周期包含间期和分裂期([/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期)两个阶段,间期又分为[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期([/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期)、[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期([/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期)和[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期([/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期),处于不同时期的细胞的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量存在差异。一般认为,[/font][font=Calibri]G 1 [/font][font=宋体]期细胞具有增殖活性,参与细胞周期循环,是二倍体细胞;[/font][font=Calibri]S [/font][font=宋体]期细胞,[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入 [/font][font=Calibri]G 2 [/font][font=宋体]期,最终进入 [/font][font=Calibri]M [/font][font=宋体]期。检测细胞周期常用的方法是检测[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量,可以选择能与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]结合的荧光染料(如[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]等),再根据细胞各个时期[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法检测细胞周期的原理[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于细胞周期各时相的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]不同[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通常正常细胞的[/font][font=Calibri]G1/G0[/font][font=宋体]期具有二倍体细胞的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](2N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]G2/M[/font][font=宋体]期具有四倍体细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](4N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量介于二倍体和四倍体之间。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]PI[/font][font=宋体](碘化丙啶)为插入性核酸荧光染料,能选择性嵌入核酸[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]双螺旋的碱基之间与之结合,结合量与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的含量成正比关系,其荧光强度直接能反映细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]因此[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通过流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法对细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量进行检测时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可以将细胞周期各时相区分为[/font][font=Calibri]G1/G0 [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],S [/font][font=宋体]期和[/font][font=Calibri]G2/M [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过定量测定[/font] [font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量来分析细胞周期是流式细胞术最早的应用之一。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]流式细胞周期([/font][font=Calibri]cell cycle[/font][font=宋体])检测结果分析常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量(横坐标)来分析的:[/font][font=Calibri]G0[/font][font=宋体]期:静止期,有丝分裂完成后,脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期,从有丝分裂到[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]复制前的一段时期,此期主要合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]和核糖体,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期,在此期,合成[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及组蛋白,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量介于[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期与[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期之间;[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期,是有丝分裂的准备期,合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]及蛋白质,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成终止,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期:细胞分裂期,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]流式细胞检测正常范围[/font][/b][font=宋体]流式细胞检测的正常范围通常依赖于被检测细胞或生物粒子的类型以及所测参数的性质。一般而言,正常的细胞数量、细胞大小、细胞形态、细胞内物质的浓度和分布等参数都在一定的范围内。这些正常范围通常是通过对比大量健康个体或样本的流式细胞检测结果而得出的。例如,正常血细胞的计数和比例,各种免疫细胞的分布,以及细胞内的荧光强度等,都有相应的正常范围。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b]流式细胞检测技术服务[/b][/url],同时还提供完善的[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]流式单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],详情关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期

    荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期

    荧光显微镜及流式表征西达本胺诱导细胞凋亡并阻滞细胞周期流式细胞术检测到明显的细胞凋亡,随着加药浓度的升高,细胞凋亡数量增多,早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞 的 数 量 都 随 之 上 升 (图 a).测 得 实 验 组 凋 亡 率 分 别 为 12.32% ±0.84% (P 0.05),15.63%±0.91%(P0.001),与对照组相比,有统计学意义(图b).与此同时通过 EdU 实验检测(图c)其细胞周期的变化,随着加药浓度的增高,Hoechst蓝色荧光染色细胞数目减少,即活细胞数减少,药物对细胞杀伤作用显著 EdU 绿色荧光染色细胞数减少,即进入 DNA 复制期的细胞数量减少.表明西达本胺可以明显促进 HCT-15细胞凋亡、抑制其增殖且阻滞细胞周期.[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/06/202306302205203559_379_5389809_3.png[/img]

  • 宇宙神秘频率X射线能治疗癌症 不伤健康细胞

    据国外媒体报道,近日,俄亥俄州立大学的天文学家们在研究恒星以及黑洞周围如何进行化学元素射线的放射和吸收时,发现诸如铁这样的重元素在受到特定能量X射线照射下,会发射出低能电子。依据这个情况,其联合了医学专家和放射肿瘤专家,研究这种特定能量的X射线对人体产生何种程度的影响,并发现其具有某种特异性,计划发展一种新型的放射治疗的方法,旨在针对人体内顽固的肿瘤细胞,但是对人体的健康细胞和组织不产生巨大的危害。这个发现却为医学上的肿瘤治疗提供了一种可能性:利用确定的重元素制成一种植入物进入人体内,医生可以通过这种植入物放射出的低能电子消灭肿瘤细胞,这种方法比目前医学上使用全身放射性治疗更有目的性和针对性,对人体健康的组织危害较小,同时,这种植入物也可以进行医疗诊断成像,为医生提供药物效果的评估。6月24日,国际分子光谱研讨会上,美国俄亥俄州立大学该项目的主要研究员Sultana Nahar对这个发现做了相关的叙述,主要使用电脑对金和铂元素放射情况进行模拟,并确定用来照射的X射线的频率  这个电脑模拟结果显示:单个金和铂原子在所给定的X射线频率的照射下,放射出低能电子,而如何确定并控制X射线的照射频率是极大的挑战。实验证实:这个X射线辐射频率的范围及其狭窄,大约相当于X射线频率谱宽度的十分之一,产生出超过20个的低能电子。而作为天文学家,运用基本的天体物理和化学知识探寻恒星内部的射线情况,但是作为一个医生,却也能采用相同的方法对癌症进行治疗,这是一个非常有意义的发现。  此外,俄亥俄州立大学的天文学家Nahar和Anil Pradhan发现:特定频率的X射线在照射重元素的时候,激发原子核周围的电子,导致电子振动并离开他们的运行轨道而产生低能电子,而剩下的物质基本为电离态的气体、等离子云以及纳米尺度的原子。  然而,当1890年伦琴发现X射线之后,X射线的作用以及研发发展都有很大的进步,从基础物理学的角度看,物理学上的辐射在医生上的使用是非常的乱,这个现象几乎在国有的国家都是这样的。但是,直到目前为止,所有关于X射线的应用进展都还不能称为根本意义上的进步。而托马斯杰弗逊大学医学院医学物理学家Yan Yu,作为该项目的长期研究合作方,也希望这种X射线成像和放射治疗技术能有更进一步的发展。并在会议上也叙述了金和铂为何会显示出此类的行为以及医院在今后如何利用这些物质进行放射治疗。  物理学家们知道,电子的轨道处于离核不同的距离上,当外围电子出现丢失时,轨道上的电子就会取代这个丢失的位置并释放出能量,这就是俄歇效应。由法国物理学家俄歇所发现。通常情况下,当能量强大到足以踢出原子核模型中的第二个电子,就称其为俄歇电子。而这个过程中也可能导致光粒子或者光子在特定的频率下发射出能量,这个频率科学家目前认为是K-阿尔法X射线。  俄亥俄州立大学该项目首席研究员认为在诸如重金属铂的原子核模型中,K-阿尔法X射线将近距离的电子给踢了出去,而其中就有俄歇电子,这些电子处于低能量的状态且数量庞大,从这点出发,足以扼杀肿瘤细胞并粉碎他们的DNA。而医院可将使用K -阿尔法X射线,这将大大地减少了病人的辐射照射剂量。相关研究人员也相信在人体中嵌入纳米级的重元素粒子,可以有效地吸收特定的频率的X射线并产生相对应的的低能电子放射,杀死肿瘤细胞。

  • 光片照明显微镜——细胞级分辨率3D成像

    虽然经过几个世纪的研究,人类的生长于发育过程中仍遗留有很多的未解之谜。人类胚胎发育的研究始于20世纪,一般以观察胚胎的组织图像的方式来研究如器官发生的机制等,传统的方式如切片一直使用至今。现今,对于胚胎3D图像的数字化构建也已经开始,使用核磁共振、X光摄影等方法均可获得胚胎的3D图像,但分辨率仍无法达到细胞水平。本研究使用了妊娠期6-14周的胚胎和胎儿共36个,结合免疫染色、3DISCO组织透明技术和光片照明技术,获得了人类胚胎细胞级分辨率的3D图像,清晰地显示了胚胎的外周神经、肌肉、血管、心、肺和泌尿系统。通过这种方法,我们可以建立人类生长发育的图库,研究人类胚胎发育的分子机制。[b]3D图像示例:1) 周围神经系统3D成像(使用中间纤维外周蛋白(Prph)的抗体标记Prph): [/b][align=center][img=,450,317]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/2.jpg[/img] [/align][align=center](A)7周龄胚胎的表面造影图像(左);对Prph进行标记所得图像。[/align][align=center](B)8周龄胚胎的表面造影图像(灰色)和标记Prph所得图像(绿色)的叠加图像。[/align][align=center](C)8周龄胚胎的面部神经分布。表面造影图像和标记Prph所得图像的叠加(中)(右)。 [/align][align=center]感觉神经轴突和运动神经轴突在手脚的分布:分别使用胆碱乙酰转移酶(ChAT)和瞬态粘附糖蛋白-1(Tag-1)的抗体来标记。[/align][align=center](D)在外周神经,染色产生重叠现象,但在末端Tag-1(绿色)更为明显。(D-F)ChAT染色与Prph和Tag-1均无重叠。 [/align][align=center][img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/3.jpg[/img] [/align][align=center](D)9.5周龄的拇指,标记Prph和Tag-1。染色发生重叠,但在末端区域Tag-1更显著。[/align][align=center](E)9.5周龄的左手,ChAT与Prph表达区域不同。[/align][align=center](F)9周龄的右脚,ChAT与Tag-1表达区域不同。 [/align][align=center] [img=,550,177]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/4.jpg[/img][/align][align=center](G)7周龄的头部,标记Prph显示颅神经。(右)对颅神经分布使用Imaris软件进行3D虚拟解剖、区分并着色。 [/align][b]2) 手足的神经分布的3D成像:对Prph和Tag-1进行免疫染色以建立胚胎和胎儿手部的感觉神经及其分支的3D图像,并可观察感觉神经随时间推移的发育情况。 [/b] [align=center] [img=,450,362]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-1.jpg[/img][/align][align=center](A)8周龄标记Prph的右手,感觉神经分为尺骨神经、正中神经和桡神经。[/align][align=center](B)右手从7周龄到11周龄的神经分布随时间的变化。肌皮神经(指针处)很快便延长深入手部。 [/align][align=center] 之后分别对ChAT和Tag-1标记,建立了运动和感觉神经的分布的图像,以确定两种神经在何处以何种方式分离。 [/align][align=center][img=,550,286]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/5-2.jpg[/img] [/align][align=center](C)(D)9周龄的右脚和8周龄的左手的感觉神经和运动神经的3D图像。 [/align][b]3) 对肌肉生长进行3D成像分析:[/b]转录因子Pax7是有颌下门动物的肌肉干细胞标记物,是肌肉生成的关键启动因子。在肌肉的生长中,表达Pax7的细胞均匀分布于生长中的肌肉,表达肌细胞生成素(Myog)的细胞成簇分布于运动神经末端。生长中的肌肉表达了双皮质素(Dcx),可能影响神经肌肉接点的发育。 [align=center][img=,550,259]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-1.jpg[/img] [/align][align=center](A)9.5周龄标记Pax7的右脚和右手。[/align][align=center](B)10.5周龄标记Pax7与ChAT的右脚。[/align][align=center](C)9周龄标记Myog、ChAT和Tag-1的右脚。[/align][align=center]表达Myog的细胞成簇分布于运动神经分支末端。[/align][align=center](D)9.5周龄的左脚标记Dcx与ChAT。[/align][align=center]Dcx在肌肉(*号)和感觉神经中检测到,但在运动神经轴突中未检测到。 [/align][align=center] [img=,450,334]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/7-2.jpg[/img][/align][align=center](E)8周龄标记MHC与Tag-1的胚胎。[/align][align=center](中上)动眼肌肉的图像。[/align][align=center]点状线标示出了肌肉的分界线,此处照明被色素上皮所减弱。[/align][align=center](中下)肌肉与感觉神经。(右)左臂的肌肉与感觉神经。[/align][align=center](F)9.5周龄标记MHC与ChAT的左手,显示了肌肉与运动神经。[/align][align=center]使用不同颜色对肌肉进行了区分,同时能够观察到正在发育的骨骼。 [/align][b]4) 人类胚胎脉管系统的3D成像分析:[/b]质膜膜泡关联蛋白(Plvap)是一种由网状微血管内皮细胞表达的跨膜糖蛋白。对整个胚胎标记Plvap并成像,可以观察到致密的血管网络。对平滑肌表达的α肌动蛋白(SMA)进行免疫染色可以观察到生长中的动脉的3D结构。 [align=center][img=,450,414]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/9.jpg[/img] [/align][align=center](A)(B)8周龄标记Plvap的胚胎。[/align][align=center]Plvap在整个胚胎中形成了致密的网络。[/align][align=center](A中、右)右臂与右手。(B左)左腿的Z轴投射图像。[/align][align=center](*号)血管网络穿过了除了骨骼的所有组织。[/align][align=center](B右)面部图像。(箭头)角膜处没有血管。[/align][align=center](C)11周龄胎儿,标记胶原IV的肋骨表面。[/align][align=center](D左)11.5周龄胎儿的右腿和右膝,标记MyoSM的动脉。[/align][align=center](D右)11.5周龄胎儿的右脚,标记SMA的动脉。[/align][align=center] 对胃肠道的淋巴细胞表达的Podoplanin进行标记以研究淋巴管形成,表达Podoplanin的细胞覆盖了肠胃,[/align][align=center]而含Podoplanin的微管数量较少,说明人类淋巴系统成熟可能晚于血管系统。[img=,550,181]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/10.jpg[/img][/align][align=center](E)14周龄标记Podoplanin的消化道。表达Podoplanin的细胞位于肠胃上方。 [/align][align=center](右)表达Podoplanin的细胞尚未发育形成淋巴管。[/align][b]5) 肺的生长发育的3D分析:[/b]标记鼠的性别决定基因Sox9转录因子和Dcx,观察到Sox9在人的末端支气管芽处表达,Dcx在每个气道的近端上皮部分表达。用Plvap标记肺部的血管,发现肺间质内微血管和大血管形成了连续的网络。肺部气道的分支方式是高度保守的,包括域分支、水平分支和垂直分支,使用Sox9/Dcx标记小支气管,可以观察到3种分支方式,并发现了不对称分支现象。 [align=center][img=,550,329]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/11.jpg[/img] [/align][align=center](A)9.5周龄标记Sox9、Dcx和Plvap的胎儿的肺部。Sox9在上皮小管的末端表达,Dcx在近端表达。Plvap在整个肺的血管中表达。[/align][align=center](B)肺上皮小管Z轴光学切面。[/align][align=center](C)末端的微血管网络。[/align][align=center](D)气道分支的3D图像。肺叶(蓝绿),支气管(红)。[/align][align=center](E)支气管的3D图像。(右)三种分支方式。[/align][align=center] 标记SMA和平滑肌肌凝蛋白(MyoSM),两者均于围绕支气管和气道上皮小管的平滑肌处表达。标记Sox9显示出末端没有平滑肌。[/align][align=center]对平滑肌进行染色同时可以显示动脉和微动脉。可以使用SMA和酪氨酸羟化酶(TH)标记心脏来观察血管和神经分布。 [/align][align=center][img=,550,289]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/12.jpg[/img] [/align][align=center](F)9.5周龄的标记MyoSM的肌凝蛋白平滑肌的染色。(箭头)支气管及分支。[/align][align=center](G)11.5周龄的左肺标记SMA显示出气道平滑肌的分支方式。(箭头)动脉周围肌肉和(指针)近端气道周围肌肉。[/align][align=center](H)10周龄的肺的分支图像。末端芽部用Sox9标记。表达SMA的平滑肌分布于不表达Sox9的近端区域。[/align][align=center](I-K)心脏的光片显微图像。 [/align][b]6) 泌尿生殖系统发育的3D分析:[/b]人类生殖道分为两种结构:由中肾分化而来的中肾管(WD)和由中肾管诱导分化而来的副中肾管(MD)。性别决定伴随着生殖道的重构。Pax2转录因子可用于标记中肾和WD。8周龄的雄性胚胎中,MD尖端与WD紧密接触但并未完全生长。肾处于腹侧位置邻接生殖嵴。9.5周龄时MD继续沿WD延伸但并未连接。10周龄时两条MD连接,从两侧WD的中间延伸至泌尿生殖窦,同时开始降解,融合的剩余MD分化为前列腺囊。14周龄时,WD的中肾肾小管退化,附睾与输精管出现。Sox9是睾丸分化的必需因子,在睾丸索中表达,对Sox9使用免疫染色可以观察到睾丸索。[align=center][img=,350,415]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/13.jpg[/img][/align][align=center](A)8周龄标记Pax2的胚胎。[/align][align=center](B)(箭头)MD/WD连接。[/align][align=center](C)(D)9.5周龄的泌尿生殖系统。(箭头)MD尾端沿WD延长但仍未融合。[/align][align=center](E)10周龄的泌尿生殖系统。MD在底端融合(指针)并开始降解(箭头)。[/align][align=center](F)降解的继续。[/align][align=center](G)14周龄的泌尿生殖系统。输精管进一步发育(指针)。[/align][align=center](H)10周龄标记Pax2和Sox9的睾丸。[/align][align=center](I)10周龄标记Pax2的睾丸。[/align][align=center](J)14周龄的睾丸。[/align][align=center][img=,350,452]http://www.qd-china.com/uploads/Mandy/LaVision%20Application/14.jpg[/img][/align][align=center](A)10.5周龄标记Pax2的泌尿生殖系统。WD连续,MD已融合。(B)11.5周龄标记Pax2的生殖系统。(箭头)WD开始降解。(C)13周龄,标记Pax2的生殖系统。(箭头)子宫大小增加,WD显著降解。(右)MD顶端发育中的输卵管纤毛。(D)8周龄标记Pax2和Plvap的睾丸。(指针)微血管覆盖了睾丸和WD。而MD却没有血管形成。(E)10周龄的雄性胎儿中,MD没有微血管形成。(F)(G)10.5和13周龄标记Pax2和Plvap的卵巢。WD和MD均有致密的血管覆盖。 [/align][align=center][/align][b]总结:[/b]将免疫标记与3D成像技术结合,能够完好地保存器官的3D结构并使分辨率达到细胞水平,简单、快速、稳定、可重复,以上这些优势适合其应用于胚胎学,可用于研究遗传疾病或畸胎。此方法的限制条件主要在材料的获得,同时使用得抗体最大数量,抗体与实验方法的兼容性和大容量数据的存储。然而其应用的广泛程度依然不可限量。以后甚至可用于建立人类生长发育的3D图库。

  • 【原创大赛】原创-非洲猪瘟自检实验室试剂选择参考

    [align=center]原创-非洲猪瘟自检实验室试剂选择参考[/align]非洲猪瘟自检实验室,指的是屠宰场、食品加工企业、种猪场、规模猪场,在国家有关部门要求下,建立的以非洲猪瘟病毒核酸检测为主的微型实验室。这些实验室以前大多没有分子生物学检测基础和经验,对于如何选择试剂心中无数。下面提供一些选择试剂的看法,供参考:一、抗凝剂非洲猪瘟病毒核酸检测,对于屠宰场和种猪场、规模猪场来说,样品一般选择EDTA抗凝血。对于种猪场和规模猪场来说,采样量不大,推荐采购EDTA抗凝管。对于屠宰场来说,采购抗凝管确实方便,但也确实不便宜。农业农村部要求屠宰场采血做到全覆盖,试想一下:每支EDTA抗凝管成本约1元,屠宰场每天屠宰1000头,一年的抗凝管成本就是36万元。因此,在屠宰场看来,抗凝管是“想说爱你不容易”。在控制成本的策略下,自行配制抗凝剂成为不二之选。一般认为,1.5mg EDTA钠盐可以阻止1mL血液凝固。因此,每1mL血液需要用15 mg/mL EDTA钠盐溶液0.1mL。配制方法:(1)首先配制生理盐水溶液:取8.5g氯化钠,溶于1000mL纯水中;(2)配制EDTA溶液:取EDTA钠盐15g,溶于1000mL生理盐水溶液中,此时EDTA浓度为15mg/mL;(3)用法:取EDTA溶液0.1mL,置于塑料离心管或其它容器中,倾斜放置于37℃至45℃烘箱中烘干备用,可抗凝1mL以内的血液。使用方法:采血后立即将血液注入该离心管中,颠倒数次后混匀待用。如需抗凝更多血液,可按比例增加EDTA溶液用量。二、提取及扩增试剂1、提取试剂目前自检实验室普遍采用所谓的免提试剂盒,但站在专业的角度看,所谓的免提实际上是粗提,只不过省略了洗涤的过程。在此情况下,稀释核酸的试剂难免会对后续的扩增起到抑制作用。据报道,在不考虑试剂盒其他因素影响的情况下,提取核酸(也就是经过洗涤步骤)比免提取核酸(也就是未经洗涤步骤)灵敏度高10-100倍,反映到Ct值上,提取核酸比免提约低3-7左右。众所周知,屠宰场的待宰生猪,绝大多数是健康的。即便少数带毒,病毒量也极少。加上屠宰场采取混样检测,每个来源的生猪往往混成一份样品,有时混样比例甚至达到1:50。在此情况下,待检样品即使有病毒,其病毒核酸含量也被稀释得极低。如果再采用免提试剂盒,检测效果可想而知。综上,个人认为对于屠宰场,包括种猪场和规模猪场假定健康情况下,推荐采用核酸提取试剂盒,对于免提试剂盒应该慎用。2、扩增试剂目前荧光定量PCR扩增试剂已经非常成熟,一般的扩增试剂盒或者预混液,直接用于检测都能取得理想效果。因此,对于扩增试剂不需要过于纠结,选用推荐产品即可。3、引物探针及阳性对照在初步开放检测权限时,采用了“引物探针+提取试剂+扩增试剂”的模式,取得了不错的效果。在公布第二批试剂推荐名单前,多数实验室也是采用这种模式开展检测,包括参加各种比对试验。但遗憾的是,公布第二批名单后,引物探针及阳性对照不再供应,多数实验室也只能采购推荐名单产品。需要指出的是:目前市场上独立的DNA提取试剂盒,每个检测的成本约15元;通用的荧光定量预混液,每个检测的成本约10元;引物探针及阳性对照假设每个检测的成本为5元;合计每个样品提取及扩增的成本仅30元。而目前市场上非洲猪瘟检测试剂盒,供应价基本上每个检测在50-70元之间,无形之中增加了屠宰场及相关主体的经营成本。要知道,一个再小的屠宰场每天的检测量也有20份左右,每年增加的成本20份/天*360天*(20-40)元/份=(14.4-28.8)万元。基于此,强烈建议农业农村部考虑经济主体的经济承担能力,公布引物探针序列,并安排有关单位无偿或有偿供应阳性对照。三、消毒剂对于非洲猪瘟检测环境来说,极细小的污染都会造成实验结果的失败,甚至可能引起病毒扩散,因此做好消毒工作非常重要。对于非洲猪瘟来说,比较有效的消毒剂是0.8%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。配制方法比较简单,取8g氢氧化钠或氢氧化钾溶于水即可。需要注意的是,一次不能配制太多,最好几天内用完。而且配制好的溶液,应贮存于密封的塑料喷壶或塑料瓶内,随用随取。四、灭菌指示剂按照规定,非洲猪瘟检测剩余样品、检测产物及废弃物等,均需经高压灭菌后进行无害化处理。灭菌效果是否达到要求,是一个不容忽视的问题。灭菌效果监测包括物理监测、化学监测和生物监测。物理监测:每次灭菌时观察温度、压力和时间等灭菌参数是否符合要求。温度波动范围在+3℃以内,时间满足最低灭菌时间的要求。化学监测:每次灭菌时,取一片灭菌指示卡或灭菌指示胶带,随同灭菌物品一同放入灭菌器,待灭菌结束后观察是否按规定变色。生物监测:每隔一段时间,应进行高压灭菌器生物监测,取嗜热脂肪肝菌芽胞菌片按规定程序灭菌,结束后在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片,投入溴甲粉紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,经56℃±1℃培养7d,观察培养结果。生化监测要求较高,涉及微生物实验操作,自检实验室可委托相关单位开展检测。

  • 安捷伦陷女处长“非洲牛郎门”

    http://news.ifeng.com/mainland/detail_2013_01/02/20734760_0.shtmlhttp://y2.ifengimg.com/180a60b5a8a73c6f/2013/0102/rdn_50e44abc6074b.png网传“牛郎门”图片中国青年网北京1月2日电(记者周小璐)近日,一位网友爆料中石化一位女处长身陷“非洲牛郎门”事件,将中石化致于舆论漩涡之中。这位知情人爆料的“非洲牛郎门”事件,是指安捷伦公司在中石化武汉乙烯项目中,利用非洲“牛郎”色诱招标公司中石化国际事业公司的一位女处长,在投资180亿元的中石化武汉乙烯项目中进行暗箱操作,在评标过程中让安捷伦非法降价30万美元低价中标,又相互配合威逼利诱武汉乙烯的用户,迫使他们同意将中标方案中一套价值80万美元的软件换成成本不足10万美元的软件,最终,安捷伦不仅非法中标,还多赚了40万美元。消息一出,舆论哗然。截至记者发稿时,此贴在某社区论坛点击量已高达9000多次。为进一步求证爆料信息的真实性,记者今天下午致电中石化办公厅外宣办有关负责人,他表示,因事发假期期间,自己对此事并不知情,会在具体核实实情后向外界披露,但这需要一个时间过程,希望公众冷静以待。事件原委究竟如何,当事人何时出面做出正面回应,将继续跟踪此事进展。记者查阅了《中华人民共和国招标投标法》,其中第三十二条规定:投标人不得与招标人串通投标,损害国家利益、社会公共利益或者他人的合法权益。第四十三条:在确定中标人前,招标人不得与投标人就投标价格、投标方案等实质性内容进行谈判。第四十六条:招标人和中标人应当自中标通知书发出之日起三十日内,按照招标文件和中标人的投标文件订立书面合同。招标人和中标人不得再行订立背离合同实质性内容的其他协议。据悉,安捷伦科技有限公司是一家多元化的高科技跨国公司,是全球电子测量、生命科学与化学分析的领导者,其产品正在化学、环保、食品、医药和生命科学领域中广泛使用。 http://img.ifeng.com/page/Logo.gif

  • TEM测试细胞

    大家好,我初次接触TEM准备看细胞的精细结构,完全没有经验,想做一个关于在细胞膜上看到5nm量子点,我看文献主要涉及到为了制备TEM样品,将裸露的的细胞固定在戊二醛(2.5%)溶液中。 然后将细胞样品用1%四氧化锇后固定。 用二甲胂酸盐缓冲液(0.1M)洗涤后,用一系列乙醇溶液(30,50,70,90和100%)使细胞脱水。 所有这些处理均在4℃下进行。 之后,将细胞用环氧丙烷处理,渗透并包埋在液体树脂中。 使用超薄切片机切割树脂块,并在网格上收集切片。 使用TEM和STEM模式在FEI Talos F200X高分辨率透射电子显微镜下进行成像。我目前能做到的就是用戊二醛溶液把细胞固定,其他试剂或者仪器暂时都没有,所以想联系老师是否可以帮忙测试。价格可以协商,手机号:15122625693

  • 基因芯片细胞标本采集操作建议规程

    细胞标本采集操作建议规程 1. 所有样品均应有样品标签(注明样品编号),同时有一张样品登记表,写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等。2. 一张芯片实验一般要求细胞数在1E+08,建议设计实验和收获细胞时可考虑多收集一些。 3. 贴壁与悬浮细胞培养诱导结束后,去除培养液,保留的细胞用PBS缓冲液洗一下,除去缓冲液,加溶液D*充分溶解细胞,放入液氮运输。样品量以实际得到的total RNA为准。 4. 血液:将白细胞分离出来,加溶液D充分溶解细胞,放入液氮运输。样品量以实际得到的total RNA为准。5. 如果是细胞未经溶液D处理,直接冻入液氮罐(不推荐)。工作人员会对细胞作相关处理,以便为细胞记数。6. 以上提到的均是新鲜细胞,对一些已老化或质量不明的细胞,工作人员有权提出疑义,并要求退回或重新取样 。组织标本采集操作建议规程 取标本所需关键器材和处理要求 铝箔 经DEPC水浸泡过夜,78℃烘干,高压灭菌后烘干 。1.5 ml 微离心管  15 ml 聚丙烯离心管 市场有售RNAase-Free的相应规格离心管   标签纸   记号笔   样品登记表 由客户指定专人填写   液氮罐 应常备液氮罐,并保证液氮的来源   取材部位的病理切片 由客户提供1-2张 注:· 以下步骤1 - 5应在冰上进行且不超过15分钟,超过时间会导致样品的RNA降解。 · 对肿瘤组织的取材,要求尽可能准确地判定肿瘤和正常组织,例如对于手术切除的整个或部分前列腺,可能要根据冰冻切片报告的结果来判定要进行研究的取材部位。 1. 离体新鲜组织,切成多个1cm3小块,剔除结缔组织和脂肪组织。胃、肠组织应剪除外膜;肝、肾、脾应剪除门部血管神经,肿瘤组织应将周围的正常组织切除干净(正常组织也应将周围的肿瘤组织切除干净)。 2. 在RNase-Free 0.9%生理盐水中漂洗样品,以去除血渍和污物。3. 用铝箔包裹组织,或用5ml冻存管装载组织(但最好统一采用铝箔)。用记号笔在铝箔或冻存管外表写明样品编号,并贴上标签,迅速投入液氮冷却。4. 填写样品登记表,写明样品名称、种类、编号、取样日期、样品处理情况等 。5. 将液氮冷却的组织放入样品袋(每个样品袋只保存同样的组织),袋口留一根编号绳,绳上粘一张标签纸(标签上注明:样品名称、编号、日期),迅速转入便携式液氮罐。6. 保留1-2张取材部位的病理切片。

  • 平板细胞克隆形成试验

    概念:细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤:1、取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞,并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2~3周。3、经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。弃去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液,加适量GIMSA应用染色液染10~30分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥。4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片,用肉眼直接计数克隆,或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)×100%平板克隆形成试验方法简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。

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