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溶菌酶肉汤基础

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  • 【分享】常量肉汤稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)

    1.抗菌药物贮存液制备   抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。抗菌药物直接购自厂商或相关机构。所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。例如:需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液,所用抗生素为粉剂,其药物的有效力为750μg/mg。用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。根据公式计算所需稀释剂用量为:(182.6 mg×750μg/ml)/1280μg/ml=107.0ml,然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境,保存期不超过6个月。2.药敏试验用抗菌药物浓度范围   根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准,药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值,特殊情况例外。3. 培养基   NCCLS推荐使用Mueller-Hinton(MH)肉汤,pH7.2~7.4。需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时,应在肉汤中加入2%(W/V)氯化钠,按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。嗜血杆菌属菌使用HTM肉汤,肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。4.接种物的制备   有2种方法配制接种物,一是细菌生长方法,用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个,接种于4-5ml的水解酪蛋白(MH)肉汤中,35℃孵育2-6h。增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准,约含1~2×108CFU/ml。二是直接菌落悬液配制法,对某些苛养菌,如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株,推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。用MH肉汤将上述菌悬液进行1∶100稀释后备用。注意应在15分钟内接种完配制好的接种物,并取一份接种物在非选择性琼脂平板上传代培养,以检查接种物纯度。5.稀释抗菌药物的制备及菌液接种   取无菌试管(13×100mm)13支,排成一排,除第1管加入1.6mlMH肉汤外,其余每管加入MH肉汤1ml,在第1管加入抗菌药物原液(如1280μg/ml) 0.4ml混匀,然后吸取1ml至第2管,混匀后再吸取1ml至第3管,如此连续倍比稀释至第11管,并从第11管中吸取1ml弃去,第12管为不含药物的生长对照。此时各管药物浓度依次为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μg/ml。然后在每管内加入上述制备好的接种物各1ml,使每管最终菌液浓度约为5×105CFU/ml。第1管至第11管药物浓度分别为128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μg/ml。6.孵育   将接种好的稀释管塞好塞子,置35℃普通空气孵箱中孵育16~20h;嗜血杆菌和链球菌在普通空气孵箱中孵育20~24h;对可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌应持续孵育满24h。7.结果判断与解释   在读取和报告所测试菌株的MIC前,应检查生长对照管的细菌生长情况是否良好,同时还应检查接种物的传代培养情况以确定其是否污染,质控菌株的MIC值是否处于质控范围。以肉眼观察,药物最低浓度管无细菌生长者,即为受试菌的MIC。甲氧苄胺嘧啶或磺胺药物的肉汤稀释法终点判断,与阳性生长对照管比较抑制80%细菌生长管药物浓度为受试菌MIC。根据NCCLS推荐的分界点值标准,判断耐药(resistant, R)、敏感(susceptible, S)或中介(intermediate, I)。S表示被测菌株所引起的感染可以用该抗菌药物的常用剂量治疗有效,禁忌症除外。R指该菌不能被抗菌药物的常用剂量在组织液内或血液中所达到的浓度所抑制,或属于具有特定耐药机理(如β-内酰胺酶),所以临床治疗效果不佳。I是指MIC接近药物的血液或组织液浓度,疗效低于敏感菌。还表示被测菌株可以通过提高剂量(如β-内酰胺类药物)被抑制,或在药物生理性浓集的部位(如尿液)被抑制。另外,中介还作为“缓冲域”,以防止由微小的技术因素失控,所导致较大的错误解释。

  • CNS_17.035_溶菌酶

    CNS_17.035_溶菌酶

    [align=center][font='宋体'][size=29px]溶菌酶[/size][/font][/align][size=24px]赵浩博[/size][size=12px]溶菌酶又称细胞壁质酶或[/size][size=12px] N- 乙酰胞壁质聚糖水解酶。1922 年英国细菌学家 A. Fleming 发现人的唾液、 眼泪中存[/size][size=12px]在有溶解细菌细胞壁的酶,[/size][size=12px] 因其具有溶菌作用, 故命名为溶[/size][size=12px]菌酶。[/size][size=12px] 此后在人和动物的多种组织、 分泌液, 及某些植物、[/size][size=12px]微生物中也发现了溶菌酶的存在。[/size][size=12px] 随着研究的不断深入, 发[/size][size=12px]现不仅有溶解细菌细胞壁的溶菌酶,[/size][size=12px] 还有作用于真菌细胞壁[/size][size=12px]的种类,[/size][size=12px] 同时对其作用机制也有了更进一步的了解。 近几[/size][size=12px]年,[/size][size=12px] 人们根据溶菌酶的溶菌特性, 将其应用于医疗、 食品、[/size][size=12px]畜牧及生物工程中。[/size][size=12px]溶菌酶来源不同,其分子大小不一样,其氨基酸排列顺序也有所不同,如:[/size][size=12px] T4 噬菌体溶菌酶由 164 个[/size][size=12px]氨基酸组成,分子量为[/size][size=12px] 19 ku;鸡蛋溶菌酶只有 129 个[/size][size=12px]氨基酸,其分子量约为[/size][size=12px] 14.3 ku;人溶菌酶由 130 个氨[/size][size=12px]基酸残基组成,分子量为[/size][size=12px] 14.6 ku;植物中分离出的溶[/size][size=12px]菌酶,其分子量较大,约为[/size][size=12px] 24 ku~29 ku。各种溶菌酶[/size][size=12px]的等电点在[/size][size=12px] 10.7~11.5 之间,化学性质十分稳定, pH 在1.2~11.3 范围内剧烈变化时,其结构几乎不变,活性不[/size][size=12px]受影响,此外,溶菌酶对热也极为稳定,在[/size][size=12px] pH3.0 条件[/size][size=12px]下,沸水浴中加热[/size][size=12px] 60 min 其活力仍保持 90 %以上。[/size][size=12px]目前鸡蛋清溶菌酶是研究最清楚的一种溶菌酶并已投入商业化生产。它是由[/size][size=12px] 18 种 129 个氨基酸残基[/size][size=12px]构成的单一肽链,有[/size][size=12px] 4 个 S-S 键的氨基酸 Cys,等电点[/size][size=12px]约为[/size][size=12px] 11.1,最适溶菌温度为 45 ℃~50 ℃, pH 为 6.0~7.0。在酸性环境中,溶菌酶对热的稳定性很强, pH4~7[/size][size=12px]范围内,[/size][size=12px] 100 ℃处理 1 min 仍有近 100 的活力, 210 ℃加[/size][size=12px]热[/size][size=12px] 1.5 h 仍具有活性;在中性水溶液中,溶菌酶可维持[/size][size=12px]数天而不失去活性;在碱性条件下,其稳定性较差[/size][size=12px]。[/size][font='宋体'][size=14px]1. [/size][/font][font='宋体'][size=12px]溶菌酶的理化性质[/size][/font][size=12px]溶菌酶纯品呈白色、微黄或黄色的结晶体或无定形粉末,无异味,微甜,易溶于水,不溶于丙酮、乙醚。溶菌酶遇碱易被破坏,但在酸性环境下,溶菌酶对热的稳定性很强,在[/size][size=12px]pH值为4-7时,100℃处理1min,仍能较好地保持活力:pH值为3时,能耐100℃加热处理45min。 [/size][size=12px]溶菌酶化学性质非常稳定,当[/size][size=12px]pH值在一定范围内剧烈变化时,其结构几乎不变。溶菌酶不可逆变性的临界点是77℃,随溶剂的变化,不可逆变性临界点也发生变化,当溶菌酶所处溶液pH值小于1时,不可逆变性临界点降低到43℃。[/size][size=12px]溶菌酶最适[/size][size=12px]pH为5.3~6.4,可用于低酸性食品防腐;溶菌酶作为防腐剂安全性高,可被冷冻或干燥处理,且活力稳定。 [/size][size=12px]溶菌酶对几种变性剂的敏感程度为[/size][size=12px]:二恶烷二甲基乙酰胺二甲基甲酰胺丙酮,并且随溶剂用量的增加而直线下降。[/size][font='宋体'][size=14px]2. [/size][/font][font='宋体'][size=12px]溶菌酶的制备[/size][/font][size=12px]目前溶菌酶可以以鸡蛋清和蛋壳膜为材料提取制得,常用的方法有亲和层析法、离子交换树脂法、直接结晶法和聚丙烯酸沉淀法等。[/size][size=12px]亲和层析法是利用蛋白质和酶的生物学特异性,即蛋白质或酶与其配体之间所具有的专一性亲和力而设计的色谱技术。酶一底物复合物形成之后,在一定的条件下分离复合物便得到纯净的酶。常常使用的吸附剂为几丁质及其衍生物,如:几丁质粉、羧甲基几丁质、几丁质包埋纤维素、脱氨几丁质粉、[/size][size=12px]N-酰化壳聚糖、脱氨再生几丁质凝胶。[/size][size=12px]离子交换法是利用离子交换剂与溶液中的离子之间所生的交换反应来进行分离的,分离的效果较好,广泛用于微量组分的富集。一般流程为:鲜蛋一预处理一搅拌吸附一上柱洗脱一等电点沉淀一透析一喷雾干燥一成品。[/size][size=12px]溶菌酶在等电点以下较广泛的[/size][size=12px]pH值范围内,分子带正电荷,可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上,洗脱后盐析,可得溶菌酶沉淀,再进行精制可得成品。蛋清吸附724树脂,洗涤缓冲液洗脱,硫酸铵溶液盐析透析,用NaOH去碱性蛋白,冻干溶菌酶,冻干粉沉淀干燥得到溶菌酶。在5—10℃下,将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg 724树脂中,搅拌吸附6h,在0—5℃静置过夜。倾出上层蛋清,树脂离心甩干,用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白,然后将树脂装入柱内,用0.15mol/L、pH=6.5磷酸缓冲溶液约150L洗涤树脂,再用约600L的10%硫酸铵溶液洗脱,收集洗脱液。洗脱液中加硫酸铵,使最终含硫酸铵量为40%,有白色沉淀生成,冷处放置过夜。虹吸上层清液,沉淀吸滤抽干,再用1倍蒸馏水溶解沉淀呈稀糊状,然后装入透析袋,在约5℃的条件下,对蒸馏水透析24h左右,中间换水2—3次。离心去除沉淀,沉淀再用少量水洗一次,洗液与离心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氢氧化钠溶液,同时不断搅拌,使pH值上升到8.0—9.0,如有白色沉淀,即离心除去。然后用3mol/L盐酸调pH=5.0,冷冻干燥,即得白色片状溶菌酶。也可将离心液用3mol/L盐酸调pH=3.5,在搅拌下缓慢加入5%的固体氯化钠,在约5℃的温度下静置48h,离心,沉淀用0℃丙酮洗涤,干燥,即得溶菌酶。[/size][size=12px]在蛋清中加入一定量的碘化物或碳酸盐等盐类,并调[/size][size=12px]pH值至9.5—10.0,溶菌酶会以结晶形式慢慢析出,而大多数蛋白质仍然在溶液。在超滤浓缩脱盐后,为获得较纯产品,采用结晶纯化酶液经超滤处理后,用NaOH调整pH 9.5,离心去除。上清液在缓缓搅拌下,加NaCl至5%,静置一周,得粗结晶。结晶溶于pH 4.6醋酸水中,分去不溶物后,进行重结晶,结晶的最终得率为60%左右。即每公斤蛋清中可得重结晶品近1.3 g,活力测定为8000U/mg。 [/size][size=12px]聚丙烯酸沉淀法为将提取过滤后含酶洗脱液,首先经过吸附步骤,即将过滤后的澄清溶液用[/size][size=12px]20%的NaOH溶液调pH至6.0,在调pH值的过程中不停的搅拌。有少量的乳白色沉淀析出,然后加入15%聚丙烯酸,立即有白色沉淀析出,加至pH值为3.0为止,静置17个小时进行静析,得到粘附于底部的乳白色胶状物。第二步解离,将前步得到的溶菌酶聚丙烯酸凝聚物。加入少量蒸馏水并用0.5 mol/L的碳酸钠,将其溶解,转移后,将pH值调到9.5。加入5%CaCl2溶液将溶菌酶聚丙烯酸解离,至无沉淀析出,然后过滤,得到澄清溶液。第三步盐[/size][size=12px]析,将所得澄清溶液加入[/size][size=12px]5%的NaCI溶液搅拌均匀。放入冰箱调温度为0℃。待有晶体析出后,用无水乙醇洗涤数次,置恒温培养箱中40℃条件下干燥称重。[/size][font='宋体'][size=14px]3. [/size][/font][font='宋体'][size=12px]溶菌酶的应用[/size][/font][font='宋体'][size=12px]本文主要从溶菌酶在食品添加剂中的应用展开进行论述。[/size][/font][size=12px]3[/size][size=12px].1 用于水产、肉类的防腐[/size][size=12px]将溶菌酶应用于水产品、肉类的保鲜防腐,目前已做了大量的研究。如早在[/size][size=12px] 2001 年前陈舜胜等就研[/size][size=12px]究了溶菌酶复合保鲜剂在冷藏([/size][size=12px]5 ℃)与冰藏(0 ℃~1 ℃)[/size][size=12px]条件下对虾、带鱼段、扇贝柱和柔鱼的保鲜效果,结果表明,使用溶菌酶([/size][size=12px]0.05 %)复合保鲜液浸泡后冷藏或[/size][size=12px]用溶菌酶([/size][size=12px]0.05 %~0.08 %)复合保鲜液制备保鲜冰冰[/size][size=12px]藏,与常规保鲜方法相比,可将上述水产品的保鲜期延长约一倍的时间。[/size][size=12px]2012 年张观科又报道:采用溶[/size][size=12px]菌酶、[/size][size=12px]Nisin、甘氨酸、VC、山梨酸钾、NaCl 等不同的配比[/size][size=12px]的复合生物保鲜剂在不同温度对牡蛎进行保鲜贮藏研究。结果表明,采用[/size][size=12px] Nisin 和溶菌酶配合的生物保鲜[/size][size=12px]剂的保鲜效果最佳(在[/size][size=12px]-3 ℃微冻条件下,保藏 30 天后[/size][size=12px]感官性状仍然良好)[/size][size=12px] 。而钱曦利用海藻糖、蜂胶、茶多[/size][size=12px]酚、魔芋葡甘露聚糖、[/size][size=12px]Nisin、溶菌酶、壳聚糖和姜汁 8种[/size][size=12px]天然保鲜剂对鹿肉保鲜进行研究,结果表明:单独使用时,溶菌酶对鹿肉样品就有较明显的抑菌作用(最佳抑菌浓度为[/size][size=12px] 0.5 %);而采用复合天然保鲜剂(茶多[/size][size=12px]酚、溶菌酶、海藻糖、[/size][size=12px]Nisin 复合)效果更好,可以有效的[/size][size=12px]提高鹿肉的货架期至[/size][size=12px] 36 d。从以上研究结果来看,溶菌[/size][size=12px]酶尤其是它在与其他保鲜剂按一定比例复合使用时,对水产及肉类能起到较好的防腐保鲜效果。[/size][size=12px]3[/size][size=12px].2 在低度酒类、饮料中的应用[/size][size=12px]日本已成功的使用鸡蛋清溶菌酶代替水杨酸作防腐剂用于清酒的防腐[/size][size=12px]。在国内,倪瑛和钟立人研[/size][size=12px]究了溶菌酶在葡萄酒生产中的应用。因为在葡萄酒生产中乳酸菌会将苹果酸转变为乳酸,但如果在酒精发[/size][size=12px]酵的前期就完成了这种反应,会对葡萄酒的感官产生不良影响,而控制乳酸菌生长的传统方法是使用[/size][size=12px] SO2,[/size][size=12px]但[/size][size=12px] SO2 的使用不仅对人体产生毒性,同样影响葡萄酒[/size][size=12px]的品质。因此,倪瑛等尝试将溶菌酶替代或补充[/size][size=12px] SO2 调[/size][size=12px]控乳酸菌的生长,结果显示,在葡萄原汁中加入[/size][size=12px] 0.1 %~0.15 %的溶菌酶,乳酸菌生长被抑制;在白葡萄酒中溶[/size][size=12px]菌酶剂量加至[/size][size=12px] 0.5 %时,可完全抑制苹果酸向乳酸的转[/size][size=12px]变。此外,将溶菌酶用于饮料防腐也有报道,如常凯等将溶菌酶([/size][size=12px]0.05 %) 、甘氨酸和 NaCl 进行复配用于生[/size][size=12px]产脱脂山核桃乳,其抑菌效果较显著,降低了山核桃乳的杀菌强度,延长了产品货架期。从以上结果看,在葡萄酒的生产中溶菌酶可作为[/size][size=12px]SO2 天然的、安全的替代或补充品来抑制乳酸菌的生[/size][size=12px]长,在其他低度果酒中也可做类似的尝试;同样将溶菌酶用饮料的防腐也有较显著的效果。[/size][size=12px]3[/size][size=12px].3 在乳制品中的应用[/size][size=12px]由于溶菌酶对肠道中腐败性微生物有特殊的杀灭作用,同时可直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖[/size][size=12px]。因此,有大量有关溶菌酶应用于婴幼儿奶粉的[/size][size=12px]专题论述[/size][size=12px] 冯棋琴,等:溶菌酶在食品工业中的研究进展[/size][size=12px]35研究报道,如刘浩强等研究了鸡蛋溶菌酶对婴幼儿[/size][size=12px]配方奶粉的抑菌效果,结果表明,婴幼儿配方奶粉在喷雾干燥后添加[/size][size=12px] 10 mg/100 mL~50 mg/100 mL 的鸡蛋[/size][size=12px]溶菌酶效果最好。张明江[/size][size=12px]等关于婴幼儿配方奶粉中[/size][size=12px]溶菌酶的添加工艺的研究也得出了相似的结论,既奶粉喷雾干燥后添加[/size][size=12px] 500 mg/L 的溶菌酶抑菌效果最好。[/size][size=12px]3[/size][size=12px].4 在水果保鲜上的应用[/size][size=12px]水果经过溶菌酶处理,其表面的细菌被有效的抑制或杀灭,从而延长水果的保鲜期。胡晓亮等[/size][size=12px]采用溶[/size][size=12px]菌酶与溶菌酶复合保鲜剂对马陆葡萄进行涂膜保鲜,结果表明:溶菌酶单独使用有一定的保鲜效果,但将溶菌酶([/size][size=12px]0.1 %)和海藻酸钠(1 %)复合使用对抑制马陆[/size][size=12px]葡萄的感官品质下降效果更为显著,在([/size][size=12px]4±1) ℃条件下[/size][size=12px]贮藏[/size][size=12px] 25 d 后,仍保持果实的硬度和组织形态,质量损[/size][size=12px]失率仅为[/size][size=12px] 9.34 %。[/size][size=12px]溶菌酶本身作为一种天然蛋白质,能在胃肠内作为营养物质被消化和吸收,对机体无毒性,也不会在体内残留,安全性很高,加之有效的防腐特性,溶菌酶已受到了食品行业的青睐。但目前实际应用的且已商品化的是鸡蛋清溶菌酶,它的抗菌谱较窄,只对[/size][size=12px] G+细菌起作用,底物特异性[/size][size=12px]强,且投入[/size][size=12px]/效率低,这限制了它们的广泛使用。为了扩[/size][size=12px]大溶菌酶使用领域及防腐效果,可以将鸡蛋清溶菌酶与其他天然保鲜剂(如海藻糖、茶多酚、[/size][size=12px]Nisin、溶菌酶、[/size][size=12px]壳聚糖等)配合使用。[/size][size=12px]此外,随着科学技术的发展,人们还可以采用一些高科技手段(如采用微生物发酵法生产溶菌酶,采用酶修饰法合成溶菌酶复合物如溶菌酶[/size][size=12px]-环糊精、溶菌酶-半乳甘露聚糖等)生产并改良溶[/size][size=12px]菌酶。经过改良的溶菌酶不仅抗菌活性稳定,而且具有良好的乳化性能。当这些杀菌谱广、成本低、安全性高溶菌酶复合剂以及人工合成溶菌酶商品化时,溶菌酶的使用范围定会越来越广,将会在各行业发挥不可估量的作用。[/size][font='宋体'][size=14px]4. [/size][/font][font='宋体'][size=12px]溶菌酶的限量,检测与标准[/size][/font][size=12px]溶菌酶可水解细菌的细胞壁[/size][size=12px], 造成藤黄微球菌的溶解而引起溶液吸光度值的降低。[/size][size=12px]一个溶菌酶活力单位定义为[/size][size=12px]25 ℃ ,pH 6.2 条件下, 使用藤黄微球菌悬浊液在450 nm 处每分钟引[/size][size=12px]起吸光度变化为[/size][size=12px]0.001 所需溶菌酶的量。[/size][size=12px]试剂和材料[/size][size=12px]藤黄微球菌:ATCC4698 或 CICC10680。[/size][size=12px]0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液:pH 6.2。[/size][size=12px]称取[/size][size=12px]11.70 g 磷酸二氢钠(NaH[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px]PO[/size][font='宋体'][size=12px]4[/size][/font][size=12px] 2H[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px]O) 、7.86 g 磷酸氢二钠(Na[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px]HPO[/size][font='宋体'][size=12px]4[/size][/font][size=12px]12H[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px]O) 及0.372 g[/size][size=12px]乙二[/size][size=12px]胺四乙酸二钠 (EDTA-[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px]Na)于无菌水中并稀释定容至1000mL。调整缓溶液pH至6.2±0.1。[/size][size=12px]注[/size][size=12px]: 用小份缓冲溶液检查pH, 以避免缓冲溶液被污染。如果需要, 通过加入更多的磷酸二氢钠溶液或磷酸氢二钠[/size][size=12px]溶液调整[/size][size=12px]pH。[/size][size=12px]溶菌酶标准品: 蛋清溶菌酶。[/size][size=12px]底物溶液: 用磷酸盐缓冲液制备50 mL 藤黄微球菌悬浊液。 使用前, 底物于37 ℃ 培养30 min。[/size][size=12px]该底物溶液室温下可稳定[/size][size=12px]2 h。 以磷酸盐缓冲液调分光光度计零点, 然后测定底物溶液的吸光度,450 nm 下读数应为0.70±0.1。[/size][size=12px]仪器和设备[/size][size=12px]分光光度计: 精度±0.001。pH 计。[/size][size=12px]注[/size][size=12px]: 所用的器皿应保持无菌, 保证工作环境的清洁。[/size][size=12px]分析步骤[/size][size=12px]试样溶液的制备[/size][size=12px]准确称取[/size][size=12px]100 mg±0.1 mg 试样, 置于50 mL 容量瓶中, 用约25 mL 磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释[/size][size=12px]定容[/size][size=12px], 充分混匀。 再转移3 mL 上述试样制备溶液至100 mL 容量瓶中, 用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀[/size][size=12px]释定容。[/size][size=12px]标准溶液的制备[/size][size=12px]精确称取[/size][size=12px]50 mg 蛋清溶菌酶标准品于50 mL 容量瓶中, 用约25 mL 磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释[/size][size=12px]定容[/size][size=12px], 充分混匀(如果需要, 冷冻该溶液以备后续测定)。转移3 mL 上述标准制备溶液至100 mL容量[/size][size=12px]瓶中[/size][size=12px], 用磷酸盐缓冲液搅拌溶解并稀释定容。测定[/size][size=12px]取[/size][size=12px]3 份标准溶液和3 份试样溶液进行测定。[/size][size=12px]25 ℃ 室温下, 将1 cm 比色皿放入分光光度计, 用磷酸盐缓冲液调整吸光度零点。 吸2.9 mL 底物[/size][size=12px]溶液于比色皿[/size][size=12px], 最初450 nm 处吸光度应为0.70±0.10,3 min 之内初始吸光度值变化应小于或等于0.003 时, 方可开始测定。 吸取0.1 mL 标准溶液加入底物溶液, 充分混合。 记录3 min 吸光度值的变[/size][size=12px]化[/size][size=12px], 每15s 记录一次吸光度值。 每分钟吸光度值变化应在0.03~0.08, 若不在要求范围需调整试样溶液[/size][size=12px]的浓度。[/size][size=12px] 重复操作测定试样溶液。[/size][size=12px]反应[/size][size=12px]1 min 后稳定, 计算时忽略最初1 min 的读数。[/size][size=12px]结果计算[/size][size=12px]酶活力[/size][size=12px] X , 按式计算:[/size][align=center][size=12px]X =(A[/size][font='宋体'][size=12px]1[/size][/font][size=12px] -A[/size][font='宋体'][size=12px]2[/size][/font][size=12px])[/size][size=12px]/([/size][size=12px]2 × m ×0.001[/size][size=12px])[/size][/align][size=12px]式中[/size][size=12px]:[/size][size=12px]A1 ———[/size][size=12px]试样在[/size][size=12px]450 nm [/size][size=12px]处反应[/size][size=12px]1 min [/size][size=12px]时的吸光度[/size][size=12px] [/size][size=12px]A2 ———[/size][size=12px]试样在[/size][size=12px]450 nm [/size][size=12px]处反应[/size][size=12px]3 min [/size][size=12px]时的吸光度[/size][size=12px] [/size][size=12px]m ———用于分析的试样制备溶液中的溶菌酶质量, 单位为毫克(mg) [/size][size=12px]2 ———获得1 min 和3 min 吸光度读数所用的时间, 单位为分钟(min) [/size][size=12px]0.001———由单位溶菌酶每分钟引起的吸光度降低的值。[/size][size=12px]试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。[/size][size=12px] 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差[/size][size=12px]值不大于算术平均值的[/size][size=12px]10%。[/size][size=12px]最终对于溶菌酶的检测要求罗列如下:[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108081546089787_7027_1608728_3.png[/img][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108081546090379_7253_1608728_3.png[/img][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108081546091326_4621_1608728_3.png[/img][/align][size=12px]注:本标准适用于以鸡蛋清为原料[/size][size=12px], 经提取、精制等工艺制得的食品添加剂溶菌酶。[/size][size=12px]溶菌酶作为一种天然球状蛋白质,[/size][size=12px] 能促进营养物质被人[/size][size=12px]体消化吸收,[/size][size=12px] 对人体无毒性, 也不会在体内残留, 是一种安[/size][size=12px]全性很高的食品保鲜剂、[/size][size=12px] 营养保健品和药品。 由于每一类型[/size][size=12px]的溶菌酶都有其最适的作用条件,[/size][size=12px] 而且底物特异性强, 因[/size][size=12px]此,[/size][size=12px] 在应用溶菌酶时, 必需注意以下几个事项: ①充分掌握[/size][size=12px]溶菌酶的酶学特性,[/size][size=12px] 掌握食品中的营养成分、 pH 值、 食盐[/size][size=12px]浓度等影响溶菌酶效果的因素以及造成某种食品腐败的主要微生物群体,[/size][size=12px] 采用适当的添加量和添加方法才能收到应有的[/size][size=12px]防腐效果。[/size][size=12px] ②为了有效的发挥溶菌酶作用效力, 可以考虑与[/size][size=12px]其它物质配伍使用。[/size][size=12px] 如将溶菌酶与甘氨酸混合使用, 其防腐[/size][size=12px]效果则远远高于单独使用溶菌酶。[/size][size=12px] 因为甘氨酸含量达到一定[/size][size=12px]程度时,[/size][size=12px] 能抑制微生物细胞壁的合成, 这种作用对革兰氏阳[/size][size=12px]性菌和阴性菌均有效,[/size][size=12px] 从而增了溶菌酶效力的发挥。 也可[/size][size=12px]以考虑与植酸、[/size][size=12px] 聚合磷酸盐等配伍使用, 以增强溶菌酶革兰[/size][size=12px]氏阴性细菌的抑菌作用。[/size][size=12px] 不管与哪种物质配伍使用, 使用之[/size][size=12px]前都要进行小试。[/size][size=12px]参考文献:[/size][font='宋体'][size=14px][1] [/size][/font][font='宋体'][size=12px]GB 1886.257-2016,食品安全国家标准 食品添加剂 溶菌酶[s].[/s][/size][/font][font='宋体'][size=14px][2] [/size][/font][font='宋体'][size=12px]范林林[/size][/font][font='宋体'][size=12px], 林楠, 冯叙桥,等. 溶菌酶及其在食品工业中的应用[J]. 食品与发酵工业, 2015, 41(003):248-253.[/size][/font][font='宋体'][size=14px][3] [/size][/font][font='宋体'][size=12px]冯棋琴[/size][/font][font='宋体'][size=12px], 周立梅, 高文功,等. 溶菌酶在食品工业中的研究进展[J]. 食品研究与开发, 2015, 000(005):134-136[/size][/font][font='宋体'][size=14px][4] [/size][/font][font='宋体'][size=12px]张新宝[/size][/font][font='宋体'][size=12px], 陈红兵. 溶菌酶的性质及其在食品防腐中的应用[J]. 江西食品工业, 2008(4):42-45[/size][/font]

  • 加热蛋白溶菌酶能杀灭诺如病毒

    加热蛋白溶菌酶能杀灭诺如病毒日本东京海洋大学的一个研究小组日前宣布,在实验中发现,加热处理鸡蛋蛋白含有的溶菌酶,能灭活诺如病毒。这是由于溶菌酶能破坏包裹诺如病毒基因的外壳。诺如病毒会引发急性肠胃炎和食物中毒。这种病毒具有强大的感染力,只要有10至100个病毒体进入人体,就会导致感染,目前还没有有效的抗病毒剂。研究小组利用实验鼠的诺如病毒替代人类诺如病毒进行了实验。他们将蛋白中含有的溶菌酶在100摄氏度下加热40分钟,使其变性。接下来,将含有1%加热处理过的溶菌酶的溶液与实验鼠诺如病毒混合在一起,并观察了1分钟之后的变化。溶菌酶是蛋白等含有的一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。研究人员发现,诺如病毒基因量大幅减少,以致无法检出,并观察到病毒体出现膨胀。他们认为这是由于包裹病毒基因的外壳被破坏导致的。研究人员指出,实验鼠诺如病毒和人类诺如病毒从遗传学上来看非常类似,所以这种加热变性处理的蛋白溶菌酶对人类诺如病毒应该也有效果。他们希望将其制成消毒喷雾剂,在下一年度达到实用化。

  • 志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素的用途

    本品是一种最基本的非选择性培养基,含有氮源、碳源和微量无机盐适合一般细菌的生长繁殖。因含有动、植物两种蛋白质,苛养菌也可利用其中的营养进行增殖。 【用途】: 用于志贺氏菌的增菌培养 【贮藏条件】: 2~8℃,避光储存,拆封后及时放入冰箱冷藏; 【保质期】:6个月;【注意事项】 1、检查平板内是否干裂或染菌,如长菌请勿使用; 2、请在洁净的环境下操作,避免杂菌干扰; 3、经过预培养的培养基严禁使用; 4、在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水,请在洁净的环境下将水倒出,然后在培养箱放置10-30Min,待其表面干燥后再接种;或在使用前,提前一到两周放置室温即可; 5、弃物处理:使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理,也可按专业技术人员指示方法处理。 有需要志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素的请私聊我。

  • 羊肉汤的内幕

    羊肉汤中添加剂包括羊肉香精、增白剂、大骨高汤添加剂等,其中一种增白剂还含有二氧化钛。你们知道吗?

  • 马杰山牛肉汤~~~

    马杰山牛肉汤~~~

    今儿起的很早,要去白马寺看看,顺便去马杰山牛肉汤馆吃早饭,这马杰山牛肉汤是洛阳人无所不知无所不晓的,但始终都没去过,这次算是顺路去趟了。马家牛肉汤据说是清代咸丰初年(公元1851年)开的,沿袭至马杰山清真汤馆的主人马世贤先生已有六代。坐了近40分钟的车,终于到达了目的地,由于去时没带相机,在网上找了个图片给大家分享下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208021707_381296_1622447_3.jpg一进去,饭厅很大,大概有30来张桌子,刚7点多点,已经有一半的人了,排队的人还不算多,收钱和卖馍的是2名妇女,头戴着伊斯兰的头巾。汤有4个等级,5、10、12、15元,馍是锅盔和丝饼(单油饼切条)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208021718_381306_1622447_3.jpg这次我是买的10元汤和锅盔,汤喝起来鲜香。汤表面虽然油,但泡入馍后就油而不腻了。

  • 用高效液相色谱怎么分离牛血清白蛋白和溶菌酶

    [color=#444444]实验需要定量牛血清白蛋白(BSA)和溶菌酶(LYZ)混合溶液中各自的含量是多少,用的是安捷伦1260高效液相,色谱柱C-18,25cm,300A,流动相A 0.1%三氟乙酸水溶液。流动相B 0.1%三氟乙酸乙腈溶液,但是怎么走梯度都分不开啊,总是在间隔不到1分中出峰。求大神指点[/color]

  • 山药鸭肉汤

    山药鸭肉汤食材准备:鸭肉500g、山药1根、生姜1小块、料酒1勺、食盐适量1、鸭子洗净斩小块,冷水下锅,加1勺料酒,煮出浮沫后,撇去浮沫,将鸭肉捞出来洗净;山药削皮洗净,切成块状;生姜切薄片;2、热锅加油,放入姜片炒香,再倒入鸭肉,炒至鸭肉表面变干后,往锅中加入适量热水,大火煮10分钟,再转小火炖1个小时,然后放入山药,继续煮20分钟,出锅前加适量食盐调味即可。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309121337107093_2889_1642069_3.png[/img]

  • 羊肉汤馆老板自揭家丑:又浓又白实为加一堆添加剂

    一位老板网曝“家丑”:  加一堆添加剂啊,还含二氧化钛  良心上过不去了,打算转行  店里又浓又白的羊肉汤到底是怎么熬出来的呢?通过查询,扬子晚报记者惊讶地发现,一位网名为“线索人”的羊肉汤馆老板竟然自己在网上“自揭家丑”。  “线索人”自称今年20出头,来自以产羊肉出名的四川简阳,与朋友凑了9万元在成都开了一家羊肉汤馆。开业后无论怎么熬,始终熬不出诱人的乳白色。“骨头都浪费了几十斤,这样熬成本太高了。”  屡次失败的“线索人”请来了他的“长辈”。“昨天,长辈来了,还带来了他的一大罐白色浓浆,还有灰绿色的香精,非常香,带羊肉味。”在“长辈”的指点下,“线索人”在炒羊肚的时候加入羊肉香精,在熬汤的时候加入白汤浓浆。“结果,我们成功了。”  “线索人”仔细研究了“秘方”,发现包括羊肉香精、增白剂、大骨高汤添加剂等,其中一种增白剂还含有二氧化钛。于是他就上网查了一下二氧化钛:“度娘一查,二氧化钛是添加剂,还可以做化妆品用,食品也有,但是没有加肉、汤里面的,我悲剧了……即便不出人命,良心过不去啊……看网上说对肾、胃不好,万一出事,我大把青春咋办?”来源: 扬子晚报

  • 【“仪”起享奥运】伤寒名方——当归生姜羊肉汤

    [b][font=宋体][color=#7030a0]伤寒名方——当归生姜羊肉汤[/color][/font][/b][font=宋体]当归是药食同源的代表,是厨房药膳的常驻嘉宾,当归茶、当归酒、当归粥、当归蛋还有当归煲汤等等都是养生达人耳熟能详的经典药膳。当归可入菜肴,是再普遍不过的认识了,其中“当归生姜羊肉汤”、“四物汤”可谓是名冠古今。[/font][font=宋体]《金匮要略》:“寒疝腹中痛,及胁痛里急者,当归生姜羊肉汤主之。”[/font][font=宋体]此药膳对应寒症,可以治疗腹中寒凝[/font][font=宋体]不通的腹中痛,以及肝经不[/font][font=宋体]通,胁肋部疼痛且有便意者。当归、生姜温血散寒,羊肉补虚益血。[/font][font=宋体]食物剂量及具体煎煮法:“当归三两,生姜五两,羊肉一斤,右三味,以水八升,煮取三升,温服七合,日三服”。汉时一斤十六两,据考证,一两约等于15.5克,即当归46.5克,生姜77.5克,羊肉248克,以1600毫升水煮取600毫升,每次服用140毫升,一日服3次。[/font][font=宋体]如果用于日常虚寒调理养生,可适当调整用量,按原方化裁加减组成一道美味和功效皆佳的“冬令进补羊汤”。这里的当归起补血活血行瘀、散寒止痛的功效。除此之外,当归还可治疗跌打损伤,痈疽疮疡,风寒痹痛等证。[/font]

  • 请问粪大肠实验EC肉汤要多少ml

    做水质粪大肠。单倍乳糖蛋白胨和三倍乳糖蛋白胨都说了需要多少ml,就是没有说EC肉汤一根试管里面需要加多少ml,求各位老师解答

  • 请问羊肉汤使用增白剂属于滥用食品添加剂吗?

    请问羊肉汤使用增白剂属于滥用食品添加剂吗?新闻链接:成都将开展为期1个月的专项监督检查,依法查处滥用食品添加剂行为   日前,成都市食品药品监督管理局接到举报,反映个别餐饮服务单位销售的羊肉汤添加“羊肉香精”、“增白剂”等添加剂,可能对人体健康造成危害。11月23日,成都市食品药品稽查总队联合青羊区食药监局对市区小关庙的8家羊肉汤锅店进行了突击监督检查,现场尚未发现“羊肉香精”和“增白剂”等。   据介绍,市民举报的增白剂含有的二氧化钛属于食品添加剂,只能在果酱、凉果、可可制品等食品中使用,如果加在羊肉及汤中属于滥用食品添加剂。餐饮服务单位可以按标准使用复配食品添加剂,由于在当天现场检查中未发现“羊肉香精”,食药监部门暂无法认定其是否为复配食品添加剂,成都市食药监局将在全市排查过程中根据实物具体认定。   冬季来临,成都进入羊肉消费旺季。成都市食品药品监督管理局23日下发通知,要求各区(市)县局对经营羊肉汤、羊肉火锅的餐饮服务单位开展为期1个月的专项监督检查,重点检查各餐饮服务单位在羊肉汤锅中使用食品添加剂的情况,以及是否存在非法添加非食用物质的行为。自制火锅底料、自制调味料的餐饮服务单位要向监管部门备案所使用的食品添加剂名称,并在店堂醒目位置或菜单上予以公示。对滥用食品添加剂行为,将坚决依法查处

  • 【资料】冬季炮制滋补羊肉汤的温馨时光

    现代的年轻人追求“多快好省”的办事效率,生活节奏快,工作压力大,花费时间也变为非常奢侈的事情。 而时间对于老人来说却有另一番的意义,或者,他们期盼的只是家里人能有一两个小时的促膝长谈,那该是多么的温馨的时光。   天气寒冷,很多人,特别是老人,因活动得少,血液流动   不顺畅,容易四肢冰冷。这时候,食疗可是能够派上大用场的,查资料所得,羊肉具补中益气、温胃助阳的功效;《本草纲目》也说有:“补中益气,主治虚劳寒冷”的功用。于是花了几个小时,炮制成这款滋补羊肉汤,羊肉爽滑,羊汤清甜。   是夜,手脚温暖到天明,是羊肉的功效吧,或许因心意使然。   【材料】羊肉(选多肉爽滑的部位),杞子,去核红枣,姜,陈皮   【调味】盐   【制作】把羊肉洗净后切大块,烧热锅放入少许油和姜爆炒,加入羊肉块炒,炒至有香气飘出,羊肉表面干爽即可,加入热开水和其他材料用大火煮十分钟,除去浮沫,移入沙锅用小火煲两小时放盐即可食用。

  • 【转帖】食品安全小知识-肉品篇

    1. 哪些动物部位不能吃?  畜“三腺”:猪、牛、羊等动物体上的甲状腺、肾上腺、病变淋巴腺是三种“生理性有害器官”。 羊“悬筋”:又称“蹄白珠”,一般为圆珠形、串粒状,是羊蹄内发生病变的一种组织。禽“尖翅”:鸡、鸭、鹅等禽类屁股上端长尾羽的部位,学名“腔上囊”,是淋巴腺体集中的地方,因淋巴腺中的巨噬细胞可吞食病菌和病毒,即使是致癌物质也能吞食,但不能分解,故禽“尖翅”是个藏污纳垢的“仓库”。 鱼“黑衣”:鱼体腹腔两侧有一层黑色膜衣,是最腥臭、泥土味最浓的部位,含有大量的类脂质、溶菌酶等物质。  2. 怎样挑选猪内脏? 其一,如何挑选猪肝:  (1)先看外表。表面有光泽,颜色紫红均匀的是正常猪肝。  (2)用手触摸。感觉有弹性,无硬块、水肿、浓肿的是正常猪肝。另外,有的猪肝表面有菜籽大小的小白点,这是致病物质侵袭肌体后,肌体保护自己的一种肌化现象。把白点割掉仍可食用。如果白点太多就不要购买。  其二,如何挑选猪肚:  挑选猪肚应首先看色泽是否正常。其次(也是主要的)看胃壁和胃的底部有无出血块或坏死的发紫发黑组织,如果有较大的出血面就是病猪肚。最后闻有无臭味和异味,若有就是病猪肚或变质猪肚,这种猪肚不要购买。  其三,如何挑选猪腰:  挑选猪腰首先看表面有无出血点,有者便不正常。其次看形体是否比一般猪腰大和厚,如果是又大又厚,应仔细检查是否有肾红肿。检查方法是:用刀切开猪腰,看皮质和髓质(白色筋丝与红色组织之间)是否模糊不清,模糊不清的就不正常。 3. 吃炖羊肉有营养吗? 炖羊肉最大的优点是既能吃肉又能喝汤。煮过肉的汤,营养程度非常高,是滋补身体的佳品。而且,羊肉经过炖制以后,更加熟烂、鲜嫩,易于消化。如果在炖的时候再加上合适的中药或营养上能起到互补作用的食品,滋补作用会更大。如当归羊肉汤、枸杞羊肉汤、黄芪羊肉汤、羊肉萝卜汤、羊肉豆腐汤、猪蹄羊肉汤都属于此类。  4. 为什么涮羊肉的时间不宜太短?  涮羊肉能够较好地保存羊肉中的活性营养成分,但应注意选用的肉片越新鲜越好,要切得薄一些,在沸腾的锅内烫1分钟左右,肉的颜色由鲜红变成灰白才可以吃,时间不宜太短,否则不能完全杀死肉片中的细菌和寄生虫虫卵。火锅汤中温度要高,最好一直处于沸腾状态。  5. 排酸肉和冷冻肉哪种更有营养?  排酸肉又叫冷却肉。它指的是在冷却条件下,完成肉的排酸过程。我们平时所吃的鲜肉,很容易受到微生物的污染而腐败变质。但如果在牲畜被屠宰后及时进行冷却处理,使肉的温度在24小时内降到0℃~4℃,并在以后的一系列加工、流通和销售过程中始终保持这个温度,就能够抑制肉中酶的活性和大多数微生物的生长繁殖,使肉的纤维结构发生变化,容易咀嚼和消化,营养的吸收利用率也高,口感更好。这就叫肉的排酸过程。经过排酸的肉,增加了鲜味和营养。所以,排酸肉好熟易烂、口感细腻。  冷冻肉是指宰杀后的畜禽肉,经预冷后,在零下18℃

  • 【分享】关于批准溶菌酶等物质为食品添加剂及部分食品添加剂和营养强化剂扩大使用范围、用量的公告(2010年 第23号)

    关于批准溶菌酶等物质为食品添加剂及部分食品添加剂和营养强化剂扩大使用范围、用量的公告(2010年 第23号)中华人民共和国卫生部 www.moh.gov.cn 2011-01-05 17:17:58 根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品添加剂新品种管理办法》的规定,经审核,现批准溶菌酶等8种物质为食品添加剂,批准环己基氨基磺酸钠等22种食品添加剂和叶酸等3种营养强化剂扩大使用范围及用量。特此公告。附件: 1. 溶菌酶等8种食品添加剂.doc 2.环己基氨基磺酸钠等22种扩大使用范围、用量的食品添加剂.doc 3.叶酸等3种扩大使用范围、用量的食品营养强化剂.doc 二○一○年十二月三十一日

  • 食品微生物学检验 溶血性链球菌检验

    前 言本标准代替GB/T4789.11-2003《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》。本标准与GB/T4789.11-2003相比主要变化如下:—— 删除了以无菌生理盐水稀释样品的步骤;—— 增菌培养基以改良胰蛋白胨大豆肉汤代替了葡萄糖肉浸液肉汤和匹克氏肉汤;—— 分离培养基以哥伦比亚CNA血琼脂和哥伦比亚血琼脂代替了血琼脂平板;—— 完善了操作步骤;—— 在人血浆的基础上增加了兔血浆和绵羊血浆;—— 增加了规范性附录A。本标准的附录A为规范性附录。本标准所代替的历次版本发布情况为:—— GB4789.11-1984、GB/T4789.11-1994、GB/T4789.11-2003。食品安全国家标准食品微生物学检验 溶血性链球菌检验范围本标准规定了食品中溶血性链球菌(Streptococcushemolyticus)的检验方法。本标准适用于食品中β型溶血性链球菌的检验。2 术语与定义β型溶血:在菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全溶解。3 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:3.1 恒温培养箱: 36 ℃±1℃。3.2 冰箱:2 ℃~5℃。3.3 厌氧培养装置。3.4 天平:感量0.1 g。3.5 均质器。3.6 显微镜:10×~100×。3.7 无菌吸管:1 mL(具0.01mL刻度)、10 mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。3.8 无菌锥形瓶:容量100mL、200 mL、2000 mL。3.9 无菌培养皿:直径90mm。3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。3.11 水浴装置: 36 ℃±1 ℃。3.12 离心机:离心速度≥20000×g。

  • 【分享】F英国细菌学家 亚历山大弗莱明

    中文名称: 亚历山大弗莱明   外文名: Alexander Fleming   生卒年: 公元1881-1955年   洲: 欧洲   国别: 苏格兰   省: 亚尔郡   亚历山大弗莱明,英国细菌学家,1881年生于苏格兰亚尔郡。1908年毕业于英国圣玛丽学院获得医学学士和理学学士学位。翌年,他又通过考试,成为皇家外科学会的正式会员。早在1906年,他就开始跟随当时英国著名传染病学家赖特从事传染病的预防研究,并先后发表了很多医学论文。第一次世界大战爆发后,弗莱明服兵役并从事创伤病的研究。一战以后,他于1919年又回到了圣玛丽医学院,重新开始了他的细菌研究工作。弗莱明有两次在实验室里获得意外发现的故事已广为人知。第一次是1922年,患了感冒的弗莱明无意中对着培养细菌的器皿打喷嚏。后来他注意到,在这个培养皿中,凡沾有喷嚏黏液的地方没有一个细菌生成。随着进一步的研究,弗莱明发现了溶菌酶——在体液和身体组织中找到的一种可溶解细菌的物质,他以为这可能就是获得有效天然抗菌剂的关键。但很快他就丧失了兴趣:试验表明,这种溶菌酶只对无害的微生物起作用。1928年夏季的一天,弗莱明在准备用显微镜观察培养皿中的葡萄球菌时,发现培养皿中的葡萄球菌由于被污染而长了一大团霉,而且霉团周围的葡萄球菌被杀死了,只有在离霉团较远的地方才有葡萄球菌生长。他把这种霉团接种到无菌的琼脂培养基和肉汤培养基上,结果发现在肉汤里,这种霉菌生长很快,形成一个又一个白中透绿和暗绿色的霉团。通过鉴定,弗莱明推断这种霉菌一定产生了某种具有强大杀菌作用的物质。于是,他把经过过滤所得的含有这种霉菌分泌物的液体叫做“青霉素”。接着弗莱明又把这种霉菌接种到各种细菌的培养皿中,发现葡萄球菌、链球菌和白喉杆菌等都能被它抑制。这一结果极大地鼓舞了正急于找到一种治疗化脓性感染药物的弗莱明。经过一系列试验和研究,弗莱明认为青霉素可能成为一种可以全身应用的抗菌药物。于是,他又和助手们进行了更广泛的试验和实验性研究,获得了令人振奋的结果。   弗莱明把这一重大发明写成一篇论文发表在1929年的英国皇家《实验病理季刊》上,并把这种由青霉菌产生的物质命名为青霉素。由于当时艾利希的六O六药正名声大噪,多马克的磺胺也举世瞩目,加之弗莱明的实验还没有完结,青霉素还不能大量很快分离出来,所以他的发现被人们忽略了。  1939年,正在牛津工作的德国生化学家钱恩和澳大利亚病理学家弗洛里继续了弗莱明的研究,他们重新研究了青霉素的性质、分离和化学结构,终于解决了青霉素的浓缩问题。两年后制成首批青霉素。第一个采用此药的病人是个警察,他的头部,脸部,肺部受到严重的细菌感染,接受治疗仅仅5天,病情大为好转,康复之快令人惊异。不幸的是,由于没有足够的青霉素继续治疗,一个月后终于死亡。第二次世界大战促使青霉素大量生产,1943年,已有足够青霉素治疗伤兵,1950年,产量可满足全世界需求。  青霉素的发现与研制成功,成为医学史上一项奇迹。1945年,弗莱明与弗洛里和钱恩共同获得诺贝尔生理学和医学奖。 青霉素的发现是人类发展抗菌素历史上的一个里程碑。直到今天,它仍是流行最广、应用最多的抗菌素。青霉素能杀灭各种病菌,还可以治疗各种炎症。而且它对人体几乎没有毒性。因此除了极少数对青霉素过敏的人,大多数病人都能借助青霉素恢复健康。亚历山大弗莱明于1955年3月11日逝世,终年74岁。相关研究领域:细菌学医学

  • 溶血性链球菌

    溶血性链球菌在血清肉汤中生长时,管中的现象是()。 A、块状沉淀 B、絮状或颗粒状沉淀 C、均匀生长 D、混浊

  • 【分享】基础知识--培养基

    培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素。  按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基,大多为合成培养基。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6。C的冰箱内。  常见培养基有:   1、细菌培养基   配方一 牛肉膏琼脂培养基   牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂1.5克,   水 100毫升   在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。   配方二 马铃薯培养基   取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。   配方三 根瘤菌培养基   葡萄糖 10克 磷酸氢二钾 0.5克   碳酸钙 3克 硫酸镁 0.2克   酵母粉 0.4克 琼脂 20克   水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升   先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。   2、放线菌培养基   配方一 淀粉琼脂培养基(高氏培养基)   可溶性淀粉 2克 硝酸钾 0.1克   磷酸氢二钾 0.05克 氯化钠 0.05克   硫酸镁 0.05克 硫酸亚铁 0.001克   琼脂 2克 水 100毫升   先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2~7.4,分装后灭菌,备用。   配方二 面粉琼脂培养基   面粉 60克 琼脂 20克   水 1000毫升   把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。   3、真菌培养基   配方一 萨市(Sabouraud’s)培养基   蛋白胨 10克 琼脂 20克   麦芽糖 40克 水 1000毫升   先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。   本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。   配方二 马铃薯糖琼脂培养基   把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。   把这培养基的pH值调到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。   配方三 黄豆芽汁培养基   黄豆芽 100克 琼脂 15克   葡萄糖 20克 水 1000毫升   洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用。   把这培养基的pH值调到7.2~7.4,可用来培养细菌和放线菌。   配方四 豌豆琼脂培养基   豌豆 80粒 琼脂 5克   水 200毫升   取80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用。   4、食用菌菌种培养基   配方一 马铃薯—蔗糖--琼脂培养基   20%马铃薯煮汁 1000毫升   蔗糖 20克 琼脂 18克   把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对pH值要求不严格,可以不测定。   配方二 综合马铃薯培养基   20%马铃薯煮汁 1000 毫升   磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克   葡萄糖 20克 维生素 10毫克   琼脂 18克   先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。   5.烟草的培养基   在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽   CTK/IAA低时,分化根 CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化

  • 【原创大赛】点滴不要任意打,鱼肉不要随便吃——浅谈细菌耐药性检测

    【原创大赛】点滴不要任意打,鱼肉不要随便吃——浅谈细菌耐药性检测

    在刚刚闭幕的G20杭州峰会上,细菌对抗生素耐药性与英国脱欧、气候变化、难民、恐怖主义等5项被列举为影响世界经济的深远因素。那么,为什么细菌耐药性如此深受重视呢?1928年,弗莱明发现了青霉素,标志着人类进入了“抗生素时代”。然而,近些年来医院抗生素的过量使用,以及因畜牧业及水产养殖行业的抗生素滥用导致我们在日常食用鱼类、肉类等动物制品时无意中摄入了过量的抗生素,这使得越来越多的“超级细菌”(多重耐药菌)出现在公众的视线中。据《华盛顿邮报》报道,美国出现了第一例耐多粘菌素大肠杆菌感染病例。多粘菌素被称为“抗生素的最终防线”之一,而耐多粘菌素抗药菌在抗生素使用相对严格的美国出现,基本等于耐药末日已至。2016年英国政府发布抗生素耐药性噩耗,到2050年抗生素耐药性引发死亡可达每年千万!超过癌症!同样在今年,我国国家卫生计生委、发展改革委等14个部门联合印发了《遏制细菌耐药国家行动计划(2016-2020年)》。旨在为加强抗菌药物管理,遏制细菌耐药,维护人民群众健康,促进经济社会协调发展。目前面对细菌感染,人们依然要依赖抗生素,要想克服细菌耐药,就必须“综合治理”。就抗生素的应用与防止耐药而言,目前需要的是:优化抗生素治疗——即掌握治疗时给抗生素的剂量、疗程和给药方法。同时,畜牧业领域也必须控制抗生素的使用量,以减少食源性摄入的可能。另一方面,医院和疾控部门要加强耐药细菌监控。这是了解细菌耐药性趋势、正确制定治疗指南和恰当评定措施有效性的关键因素。不论是为测定出有效的给药量,还是要监控耐药细菌,都要进行的便是药敏实验。通过药敏实验得出的最低抑菌浓度(MIC),是控制抗生素给药剂量的重要参考依据。同时,这也是监控耐药细菌时需要参考的重要理论数据。如今,在实验室进行药敏实验主要通过以下几种方法:(1)纸片扩散法:含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后便不断地向纸片周围区域扩散,形成递减的浓度梯度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。其直径大小与药物浓度的对数呈线形关系。判断标准遵循CLSI折点标准。(2)稀释法:以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列不同倍数稀释(通常为双倍稀释),经培养后观察最低抑菌浓度。包括琼脂稀释法、常量肉汤稀释法和微量肉汤稀释法。(3)E-test法:将抗菌药物按双稀释倍放置于 5mm×50mm塑料载体上,操作步骤同琼脂扩散法。(4)自动化药敏测定仪:基本原理-----利用光学测量法测定抗菌药物对细菌的作用。此方法使用的仪器较为昂贵,同时需要使用大量的专用试剂盒,故只被规模较大的实验室或医院科室采用。其中,稀释法因其能够实现仪器操作、快速批量测定、费用成本低等的特点,在大规模的实验室药敏实验中得到较多应用。稀释法中又分为琼脂稀释法、常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法,其中琼脂稀释法与微量肉汤稀释法被科研和药剂检验领域广泛采用。针对实验中的接种需求,目前国内外多家厂家推出了自动多点接种仪器。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609081436_608849_3129005_3.png上面列出的三款仪器是目前市面上具有代表性的三个品牌的多点接种仪。有专家预计,距下一代抗感染治疗方法出现,还需要20-30年的时间。可以预见的是,这段时期内,人们面对细菌感染会变得越来越“脆弱”。有不少人,到医院里点滴不敢打,在家鱼、肉也都不敢随便吃,生怕遇到耐药细菌的时候无药可医,但是改进治疗手段以及防控养殖行业抗生素滥用都需要有可参考的剂量,否则的话只能是事倍功半。积极开展药敏实验,能够为这些手段提供最有效的理论依据。在药敏实验这方面,西方国家起步早。近年来我国有关部门也逐渐重视起来,督促各方积极开展药敏实验,已经取得了一些进展,并还在不断的努力研究。相信在各方努力之下,耐药细菌终会被抑制,我们依然可以安心看病用药,尽情的大快朵颐!

  • 【分享】【转帖】培养基中英文对照

    大肠杆菌显色培养基 E.Coli Chromogenic Medium 大肠菌群显色培养基 Coliform Chromogenic Medium 大肠杆菌/大肠菌群显色培养基 E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 细菌总数显色培养基 Total Genes Chromogenic Medium O157显色培养基 O157 Chromogenic Medium 沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 李氏菌显色培养基 Listera Chromogenic Medium 金黄色葡萄球显色培养基 Staphylococcus Chromogenic Medium 霉菌和酵母菌显色培养基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 弧菌显色培养基 Vibrio Chromogenic Medium 坂崎杆菌显色培养基 Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium 平板计数琼脂(PCA) Plate Count Agar 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth 4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷 (MUG) 煌绿乳糖胆盐肉汤 (BGLB) Brilliant Green Lactose Bile Brogh EC 肉汤 E.Coli Broth 新生霉素A 伊红美蓝琼脂 (EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 营养肉汤 (NB) Nutrient Broth 营养琼脂 (NA) Nutrient Agar 乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth 乳糖复发酵培养基 Lactose Broth 去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar MR-VP培养基 Methyl Red Voges Proskauer Broth 结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) Violet Red Bile Agar 西蒙氏枸橼酸盐琼脂 Simmons Citrate Agar 肠道菌计数琼脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 菌种保存培养基 Strain Store Medium 品红亚硫酸钠琼脂 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar 乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth Cary-Blair 氏运送培养基 Cary-Blair Transport Medium 山梨酸麦康凯琼脂基础 Sorbitol Maconkey Agar Base 噻孢霉素 A 1%亚碲酸钾溶液 亮绿乳糖培养基 Brilliant Green Lactose Medium 肠道菌增菌肉汤(EE) Enterobacteria Enrichment Broth TTC营养琼脂 TTC Nutrient Agar LB肉汤 LB Broth LB营养琼脂 LB Nutrient Agar 苯丙氨酸脱氨酶培养基 Phenylalanine Deaminase Agar Medium 哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 2216E琼脂 2216E Agar 肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠氮钠琼脂) Enterococcosel Agar(Bile Esculin Azide Agar) BDS培养基 BDS Medium 葡萄糖琼脂 Dextrose Agar Andrade氏糖类肉汤 Andrade's Carbohydrate Broth Koser氏枸椽酸盐肉汤 Koser Citrate Sodium Broth Endo 培养基 Endo Agar 缓冲MUG琼脂 Buffer MUG Agar 乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 茜素-β-半乳糖苷琼脂 Aliz-gal Agar Tergitol-7 琼脂 Tergitol-7 Agar TTC 溶液(0.125%) TTC Solution(0.125%) 胰蛋白胨大豆肉汤 Trypticase (Tryptic) Soy Broth Baird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base 亚碲酸盐卵黄增菌液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion 胰蛋白胨大豆肉汤 Trypticase (Tryptic) Soy Broth Baird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base 亚碲酸盐卵黄增菌液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion 兔血浆 Freeze-Dried Plasma DNA酶琼脂 DNase Agar 7.5%氯化钠肉汤 7.5% Sodium Chloride Broth 普通肉汤培养基 Broth Medium 亚碲酸钠肉汤培养基基础 Sodium Tellurite Broth Base 葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 葡萄球菌选择性琼脂 Staphylococcus Selective Agar EEM培养基

  • 【转帖】微生物培养基名称英汉对照

    大肠杆菌显色培养基E.Coli Chromogenic Medium大肠菌群显色培养基Coliform Chromogenic Medium大肠杆菌/大肠菌群显色培养基E.Coli/Coliform Chromogenic Medium细菌总数显色培养基Total Genes Chromogenic Medium O157显色培养基O157 Chromogenic Medium沙门氏菌显色培养基Salmonella Chromogenic Medium李氏菌显色培养基Listera Chromogenic Medium金黄色葡萄球显色培养基Staphylococcus Chromogenic Medium霉菌和酵母菌显色培养基Mould and Yeast Chromogenic Medium弧菌显色培养基Vibrio Chromogenic Medium坂崎杆菌显色培养基Enterobacter sakazakii Chromogenic Medium平板计数琼脂(PCA)Plate Count Agar月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)煌绿乳糖胆盐肉汤 (BGLB) Brilliant Green Lactose Bile BroghEC 肉汤 E.Coli Broth新生霉素A伊红美蓝琼脂 (EMB)Eosin-Methylene Blue Agar营养肉汤 (NB) Nutrient Broth营养琼脂 (NA) Nutrient Agar乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth乳糖复发酵培养基 Lactose Broth去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose AgarMR-VP培养基 Methyl Red Voges Proskauer Broth结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) Violet Red Bile Agar西蒙氏枸橼酸盐琼脂 Simmons Citrate Agar肠道菌计数琼脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 菌种保存培养基 Strain Store Medium品红亚硫酸钠琼脂 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone BrothCary-Blair 氏运送培养基 Cary-Blair Transport Medium山梨酸麦康凯琼脂基础 Sorbitol Maconkey Agar Base噻孢霉素 A1%亚碲酸钾溶液亮绿乳糖培养基 Brilliant Green Lactose Medium肠道菌增菌肉汤(EE) Enterobacteria Enrichment BrothTTC营养琼脂 TTC Nutrient AgarLB肉汤 LB BrothLB营养琼脂 LB Nutrient Agar苯丙氨酸脱氨酶培养基 Phenylalanine Deaminase Agar Medium哥伦比亚血琼脂基础Columbia Blood Agar Base2216E琼脂2216E Agar肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠氮钠琼脂)Enterococcosel Agar(Bile Esculin Azide Agar)BDS培养基BDS Medium葡萄糖琼脂Dextrose AgarAndrade氏糖类肉汤Andrade's Carbohydrate BrothKoser氏枸椽酸盐肉汤Koser Citrate Sodium BrothEndo 培养基Endo Agar缓冲MUG琼脂Buffer MUG Agar乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂LMG Agar茜素-β-半乳糖苷琼脂Aliz-gal AgarTergitol-7 琼脂Tergitol-7 AgarTTC 溶液(0.125%)TTC Solution(0.125%)胰蛋白胨大豆肉汤 Trypticase (Tryptic) Soy BrothBaird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base亚碲酸盐卵黄增菌液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion胰蛋白胨大豆肉汤 Trypticase (Tryptic) Soy BrothBaird-Parker琼脂基础 Baird-Parker Agar Base亚碲酸盐卵黄增菌液 Egg-Yolk Tellurite Emulsion兔血浆 Freeze-Dried PlasmaDNA酶琼脂 DNase Agar7.5%氯化钠肉汤 7.5% Sodium Chloride Broth普通肉汤培养基 Broth Medium亚碲酸钠肉汤培养基基础 Sodium Tellurite Broth Base葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth葡萄球菌选择性琼脂 Staphylococcus Selective AgarEEM培养基EEM medium甘露醇高盐琼脂 Manitol Salt Agar肠毒素产毒培养基TMP琼脂培养基缓冲蛋白胨水(BPW) Buffered Peptone Water亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) Selenite Cystine Broth四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)Tetrathionate Broth Base胆硫乳琼脂(DHL) Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Agar三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron AgarSS 琼脂 Salmonella Shigella Agar亚硫酸铋琼脂(BS) Bismuth Sulfite Agar亚利桑那菌琼脂(SA) Salmonella Arizona Agar氯化镁孔雀绿肉汤(MM,RV Medium) Rappaport-Vassiliadis MdeiumHE 琼脂(HE) Hekton Enteric Agar赖氨酸脱羧酶培养基 Lysine-decarboxylase Test Broth尿素酶琼脂基础 Urease Agar Base 40%尿素水 40%Urea WaterV-P 半固体琼脂 Voges-Proskauer Semisolid Agar吲哚培养基 Indole MediumKovacs氏靛基质试剂盒硝酸盐氰化钾培养基基础 Nitrate(KCN) Broth Base丙二酸钠培养基 Malonate Broth卫矛醇半固体琼脂 Dulcitol Semisolid AgarGN 增菌液 Gram Negative Enrichment BrothXLD 培养基 Xylose Lysine Desoxycholate MediumWS 琼脂 WS Salmonella Agar葡萄糖铵培养基 Ammonium Dextrose Medium葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium动力-吲哚-尿素培养基基础(MIU) Motility Indol Urea Medium Base亚硒酸盐增菌液(SF) Selenite Enrichment Medium醋酸铅培养基 Lead Acetate MediumSIM培养基 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium乳糖肉汤 Lactose Broth

  • 添加剂使猪肉熬出羊肉味

    添加剂使猪肉熬出羊肉味

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/01/201301040844_418271_2471340_3.jpg加入添加剂的羊肉汤颜色乳白 冬天喜欢喝羊肉汤的朋友小心了!尤其是羊肉汤的又浓又白的,据业内人士爆,里边使用了添加剂。  一位网名为"线索人"的羊肉汤馆老板竟然在网上"自揭家丑".  "线索人"自称今年20岁出头,来自以产羊肉出名的四川简阳,与朋友凑了9万元在成都开了家羊肉汤馆。开业后无论怎么熬,始终熬不出诱人的乳白色。"骨头都浪费了几十斤,这样熬成本太高了。""线索人"请来了他的"长辈"."昨天,长辈来了,还带来了他的'秘方':一大罐白色浓浆,还有灰绿色的香精,非常香,带羊肉味。"在"长辈"指点下,"线索人"在炒羊肚时加入羊肉香精,在熬汤时加入白汤浓浆。"结果,我们成功了。"  "线索人"仔细研究了"秘方",发现包括羊肉香精、增白剂、大骨高汤添加剂等,其中一种增白剂还含有二氧化钛。于是他就上网查了一下二氧化钛:"度娘一查,二氧化钛是添加剂,还可以做化妆品用,食品也有,但是没有加肉、汤里面的,我悲剧了……即便不出人命,良心过不去啊……看网上说对肾、胃不好,万一出事,我大把青春咋办?"

  • 检测粪大肠菌群

    检测粪大肠菌群时,如EC肉汤管产气者,将产气的EC肉汤管分别接种(),然后置培养箱内培养。 A、乳糖发酵管 B、伊红美兰琼脂平板 C、蛋白胨水 D、葡萄糖发酵管

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