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栖稻黄色单胞菌

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栖稻黄色单胞菌相关的论坛

  • 金黄色葡萄球菌及检验

    金黄色葡萄球菌及检验 一、生物学特性  典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8μm左右,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37°C,最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。二.流行病学  金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的机会很多。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占45%,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:  季节分布,多见于春夏季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。一般说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:  食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。  肠毒素形成条件:  存放温度,在37°C内,温度越高,产毒时间越短;  存放地点,通风不良氧分压低易形成肠毒素;  食物种类,含蛋白质丰富,水分多,同时含一定量淀粉的食物,肠毒素易生成。三.致病性  金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶:a.溶血毒素:外毒素,分α、β、γ、δ四种,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞;c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关;d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌;e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,分为A、B、C、D、E及F五种血清型。肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。

  • 【分享】细说金黄色葡萄球菌及其肠毒素

    一、金黄色葡萄球菌及其肠毒素  葡萄球菌属(Staphylococcus)至少包括有20个种。其中金黄色葡萄球菌是一种引起人类和动物化脓感染的重要致病菌,也是造成人类食物中毒的常见致病菌之一,可引起许多严重感染。本菌广泛分布于自然界,如空气、土壤、水及其它环境中。在人类和动物的皮肤及外界相通的腔道中也存在次菌。1.病原学特征  革兰氏阳性球菌,直径为0.8-1.0μm,成对或成短链状排列,或呈葡萄状聚集,无芽孢,无鞭毛(见图6-6)。  图6-6 金黄色葡萄球菌显微形态结构  file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps_clip_image-28057.png  file:///C:/DOCUME~1/ADMINI~1/LOCALS~1/Temp/ksohtml/wps_clip_image-27880.png  不能运动,一般不形成荚膜,但在少数菌株的外层可见有荚膜样的粘液物质。需氧或兼性厌氧菌,营养要求不高,于普通培养基上生长良好,37℃孵育24~48h形成直径1~2mm圆形、隆起、表面光滑、湿润、有光泽、不透明、边缘整齐的菌落。在室温下长时间培养产生脂溶性色素,使菌落呈金黄色。于血液琼脂平板上培养,金黄色葡萄菌菌落周围可形成完全透明溶血环(β溶血)。在液体培养基中呈混浊生长。生长温度在6.5-46℃之间,最适温度为30-37℃,能在冰冻环境下生存,能在质量分数为15%NaCl和40%胆汁中生长。在水分活度为0.87的条件下仍能存活。分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气。分解甘露醇产酸在鉴定致病性方面有一定意义。  在不形成芽胞的细菌中金黄色葡萄球菌抵抗力最强。于干燥的脓汁或痰液中可存活2~3个月;加热60℃1h或80℃30min才能将其杀死。在2%石炭酸中15min或在0.1%升汞中10-15min死亡。耐盐,在含有10%~15%NaCl的培养基中仍能繁殖。对某些染料较敏感。如1︰10-20万倍稀释的龙胆紫溶液能抑制其生长。对青霉素、金霉素、红霉素和庆大霉素高度敏感,对链霉素中度敏感,对万古霉素也敏感;但对磺胺、氯霉素敏感性差。近年来由于抗生素的选择作用,耐药菌株逐年增多,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)已成为医院内感染最常见的致病菌。  金黄色葡萄球菌可通过化脓性炎症的病人或带菌者在接触食品后,使食品污染。金黄色葡萄球菌在20~37℃及适宜的pH和合适的食品条件下能产生肠毒素,如被金黄色葡萄球菌污染的食物,通常在21~30℃下,放置3~5h,就能产生足以引起中毒的肠毒素。50%以上的金黄色葡萄球菌可产生肠毒素,并且一个菌株能产生两种以上的肠毒素,引起食物中毒的肠毒素是一组对热稳定的低分子量可溶性蛋白质,分子量为26000-30000。  常用噬菌体分型。目前国际上将金黄色葡萄球菌分为4个噬菌体群、23个噬菌体型。噬菌体分型可用于流行病学调查按抗原性可分为A、B、C1、C2、C3、D、E、F共8个血清型且均能引起食物中毒,尤以[font=Ti

  • 【讨论】银,淡黄色?

    超市里看到一个声称是纳米银的食品保存餐具,上面说纳米银具有出色的抗菌力,抑制细菌的繁殖同时杀灭细菌,能有效杀死99.9%的病菌,能承受-20度到120度的环境,并说产品呈淡黄色,但这个淡黄色是把银分解成10亿分之一之后引起的天然色,对于银,有这么一个颜色和功效吗?

  • 专家解密金黄色葡萄球菌

    "金黄色葡萄球菌(以下简称"金葡菌")是一种常见细菌,吃了污染少量金葡菌的食品会闹肚子,但对人体的影响比较轻,也不用听到金黄色葡萄球菌就害怕。"中国农业大学生物学院教授、博士生导师王贺祥日前表示。 近期,思念、三全等速冻水饺相继被检出含有金葡菌,不少地方的超市相继将其产品下架,一时间消费者谈之色变。 金葡菌不可怕 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员、国际食品微生物标准委员会(ICMSF)委员、中国食品科学技术学会副理事长刘秀梅介绍说,金葡菌广泛存在于自然环境中,如空气、土壤,是一种常见的微生物。人和动物是主要的病菌携带者,大约50%以上健康个体的鼻腔、咽喉、头发和表皮中都带有这种菌。中国科学院微生物研究所副所长、博士生导师东秀珠也表示,金葡菌哪里都有,人的脸上长疖子了也会有。 王贺祥说:"西餐中未煎熟的牛排和生鱼片中也含有金葡菌,在生产加工过程中,金葡菌分子会吸附在食品上,这个很难避免。而且如果生鱼片保存不当,金葡菌还会滋生。" 刘秀梅表示,金葡菌主要的致病因素是由金葡菌产生的葡萄球菌肠毒素,毒素的产生和菌量的多少有关,国际公认产生葡萄球菌肠毒素的菌量浓度在100000个/g以上。金葡菌肠毒素中毒可使人产生剧烈的恶心、呕吐,同时伴有上腹部绞痛、腹泻。严重者可导致虚脱、肠痉挛和严重失水。但病程较短,1-2天内可恢复,预后一般良好。 据王贺祥介绍,金葡菌的营养细胞壁非常薄,在80℃的开水中煮5到10分钟就死了。一般煮熟了的冷冻食品中,金葡菌肯定死了,根本不用担心。

  • "思念"三鲜水饺被检出 金黄色葡萄球菌

    2011年10月19日名牌水饺查出金黄色葡萄球菌可引发肺炎甚至败血病 带菌思念水饺被下架本报讯 (记者 孙宇) 在市食品办公布的新一期下架名单中,知名品牌思念三鲜水饺被检出可引起肺炎的金黄色葡萄球菌,现该批次水饺已经被全市停止销售。金黄色葡萄球菌在食品安全检查中为不得检出物质,该菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。记者了解到,北京市工商局在近期对本市食品流通领域抽检中共发现不合格食品18个,除思念水饺被检出金黄色葡萄球菌外,甜蜜素过度和二氧化硫仍是食品抽检不合格的主因。北京市工商局提醒,凡已购买上述不合格食品的消费者可凭购物小票和食品外包装向销售单位要求退货。全市下架食品名单样品名称 商标 生产批次 标注生产单位名称 不合格项目 当事人姓名或名称泡菜 南大堡 2011.2.15 永年南大堡顺发酱菜厂 山梨酸 北京采育晨圆超市特级杏肉 津辉 2011.2.25 天津市家发商贸有限公司 二氧化硫 北京采育益廉美超市素牛肉丸 鄉俚人 2011.2.18 浏阳市乡里人食品有限公司 甜蜜素 北京采育益廉美超市红薯沙拉(糕点) 猫耳王 2011.3.18 郏县尔康食品厂 糖精钠 北京晶泽世纪百货商店蓝梅条 华夏开创 2011.3.5 天津市福美商贸有限公司 甜蜜素 北京黄村兴瑞红顶屋食品商店特级杏肉 津辉 2011.5.2 天津市家发商贸有限公司 二氧化硫 北京黄村兴瑞红顶屋食品商店满口福(调味面制食品) 标杰 2011.3.1 郑州市二七区裕和食品厂 甜蜜素 北京康庄联民超市多福源辣子棒(调味面制食品)标杰 2011.2.23 郑州市二七区裕和食品厂 甜蜜素 北京康庄联民超市三鲜水饺 思念 20110628106A郑州思念食品有限公司 金黄色葡萄球菌 北京物美京西便利超市有限责任公司物美河滩店豆油皮 晓帆 2011.2.20 内黄县黄豆制品厂 甲醛次硫酸氢钠苏州雨润发综合超市有限公司北京分公司辣哈哈(调味面制品) / 2011.4.22 菏泽市牡丹区周林食品厂 甜蜜素 北京清水永盛自选商店话梅肉 千峰 2011.5.15 甘肃省镇原县新千年食品 二氧化硫 北京陈天雨商店山楂大华系列 大华 2011.3.20 兴隆县大华食品有限公司 苯甲酸 北京陈天雨商店久味王(铁板烧) 久味赢 2011.4.16 望城县黄金乡久味王食品厂 甜蜜素苯甲酸 北京清水永盛自选商店桂味柠檬 银创 2011.5.1 汕头市果情食品有限公司 甜蜜素 北京陈天雨商店多味豆笋 味之天 2011.3.11 长沙市雨花区光大食品厂 苯甲酸 北京陈天雨商店腐竹 金龙顺昌 2011.4.1 北京金龙顺昌商贸有限公司吊白块 北京三家店振萍超市第一分公司中国红高级红酒 威亚 2010.12.18 青州市长城葡萄酒有限公司 糖精钠 北京三家店振萍超市

  • 金黄色葡萄球菌

    金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特点是()。 A、金黄色,大而凸起的园形菌落 B、金黄色,表面光滑的园形菌落,周围有溶血环 C、金黄色,透明,大而凸起的园形菌落 D、白色透明圆形菌落

  • 【原创大赛】细菌的实验室检测方法进展——金黄色葡萄球菌的鉴定方法

    细菌的实验室检测方法进展——金黄色葡萄球菌的鉴定方法摘要:金黄色葡萄球菌广泛分布于自然界,多存在于人和动物的鼻腔、咽喉、皮肤及与外界相通的腔道。能引起人和动物机体局部、脏器的化脓性感染,重者可引起败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌也是国内外最常见的细菌性食物中毒病原菌之一,在我国由金黄色葡萄球肠毒素引起的食物中毒占细菌性食物中毒事件的前几位。典型的金黄色葡萄球菌为球型,显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌肠毒素被分为7 个血清型,A、B、C(C1、C2、C3)、D、E。目前实验室对金黄色葡萄球菌的检验有传统培养法,金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法,脉冲场凝胶电泳检测分型方法和聚合酶链式反应(PCR)技术对金黄色葡萄球菌的检测方法。

  • 【原创大赛】2014年食源性致病菌金黄色葡萄球菌风险监测分析

    【原创大赛】2014年食源性致病菌金黄色葡萄球菌风险监测分析

    2014年食源性致病菌金黄色葡萄球菌风险监测分析 葡萄球菌是革兰氏阳性球菌中的一种,广泛分布于自然界,如空气、水、土壤等,同时存在于人体、动物体的皮肤及其与外界相通的腔道中。绝大部分不致病,少数可引起人类或动物致病,属于人兽共患病原菌。其中金黄色葡萄球菌致病力最强,除了常引起皮肤、组织及器官的化脓性炎症外,其产生的肠毒素也可污染食物而导致食物中毒。近年来,由金黄色葡萄球菌肠毒素引起暴发的中毒事件当首推2000年日本“雪印奶粉”事件,14000多人受感染。金黄色葡萄球菌至今仍是国内外医院获得性感染最常见的细菌之一。能产生大量的侵袭性物质,如各种酶类,多种毒素和菌体的一些成分等。其引起的疾病主要分为两类,侵袭性疾病和毒素性疾病,在我国由金葡菌肠毒素引起的食物中毒占细菌性食物中毒事件的前几位。就这种情况笔者就本地2014年食品金葡菌检验结果做如下总结。 1 材料与方法1.1试剂和仪器 使用的培养基有10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤、7.5%氯化钠肉汤、血琼脂平板、Baird-Parker 琼脂购买于北京路桥公司,兔血浆购买于碧迪公司。主要仪器包括均质器,电子天平:感量0.1g,VITEK-2 Compact 全自动微生物鉴定系统。1.2依据和方法 根据国家食品安全风险评估中心制定的“食源性致病菌监测工作手册”要求进行增菌、分离、鉴定、菌种保存及送上级实验室复核。试验程序见图1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412051137_526003_2433088_3.jpg

  • 金黄色葡萄球菌 含量拟调整

    两大速冻食品知名品牌近期相继检出,令新的食品安全国家标准《速冻面米制品(征求意见稿)》备受关注。这个征求意见稿将金黄色葡萄球菌由原来的不得检出改为有限量。针对公众"要求降低了"的质疑和担忧,卫生部11日回应称,新标准征求意见稿更加符合国际食品微生物采样检测要求,是科学合理的。 我国现行《速冻预包装面米食品卫生标准》(GB19295-2003)规定金黄色葡萄球菌等致病菌不得检出。而卫生部今年9月公布的《速冻面米制品食品安全国家标准(征求意见稿)》,将金黄色葡萄球菌检测由定性转向定量,规定每批产品抽检5个样品中,至多只能有1个样品每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量在1000至10000个之间。 卫生部表示,老标准是微生物定性检测方法,采用一个样品检测来判定产品微生物污染情况,这种采样方案和限量规定不能全面、真实地反映产品微生物污染状况和可能产生的健康影响,与国际上食品中微生物控制和管理方式有明显差距。新标准征求意见稿正在卫生部网站公开征求意见。卫生部表示欢迎各方提出修改意见和建议。

  • 蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基

    蜡样芽孢杆菌显色培养基Bacillus cereus Chromogenic Medium用途:用于蜡样芽孢杆菌的显色培养,蜡样芽孢杆菌显蓝绿色蜡样芽孢杆菌显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基,用于食品、水、乳制品和肉制品中蜡样芽孢杆菌的快速检测。蜡样芽孢杆菌显蓝绿色且菌落比较大,苏云金芽孢杆菌显蓝绿色,李斯特氏菌显深蓝色,菌落比较小,其它菌显黄色或无色,革兰氏阴性菌被抑制。 成份 (g/L) 特殊营养物质41.9 显色剂 0.5 抑菌成份 0.6琼脂 15.0 pH 7.0 ± 0.2 25 ℃ 此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。 注意 此培养基仅供实验室使用。 用法 称取本品 11.6g 加入200ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过1分钟。冷却至45-50℃时,倾入无菌平皿,备用。 贮存 制备好的平板可保存 2-5 天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。 失效 干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。 操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 2、样品液在30±1℃增菌培养18-24小时; 3、取增菌液划线接种于蜡样芽孢杆菌显色培养基平板上,30±1℃培养18~24h。蜡样芽孢杆菌典型菌落为蓝绿色且菌落比较大。若24小时没有出现典型菌落,可延长培养至48小时。 4、对可疑蜡样芽孢杆菌可划线接种到营养琼脂平板上,30±1℃培养18-24小时,挑取单菌落做蜡样芽孢杆菌全套生化试验(本公司有生化鉴定管套装SHBG09 7种x2套/盒*5盒)

  • 关于金黄色葡萄球菌的种种~

    亲们,最近的金黄色葡萄球菌可是咱们微生物界的大明星啊!你们都曾经培养过它吗?在学校里做微生物实验室有不少童鞋都培养过吧?你们对金黄色葡萄球菌的培养有什么想法吗?最近速冻食品里的金黄色葡萄球菌你有没有检测一下呢?很希望论坛里有版友分享一下啊,我算是外行人了,很想知道知道。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111141615_330423_2356122_3.gif我常常买一些速冻的鸡柳和鸡块来吃,不知道这些里面会不会也有呢?

  • 致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌)的单位问题

    致病菌(沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌)的单位,有的标准有/25g;而有的标准又没有单位,这两者之间有区别吗?为什么有的要,有的不要呢,这次我们给企业写了一个水果制品(蜜饯制品)的标准,卫生部回复说这个致病菌有单位“/25g"不对,就是说要没有单位了。。。。。

  • 金黄色葡萄球菌?变形杆菌?

    按照化妆品卫生规范(国标)进行金黄色葡萄球菌的检验测定时,在BP培养基上发现了类似菌落,特点与国标描述相似!划血平板,也是很相似!但镜检,阴性杆状且能发酵甘露醇!我怀疑是普通变形杆菌,因为将BP菌落点到卵磷脂吐温80上呈波纹状扩散!活体镜检游动活泼!但BP培养基应该是选择培养基,且变形杆菌能发酵甘露醇么?求助!谢谢!

  • “湾仔码头”也有产品检出金黄色葡萄球菌超标

    昨日“湾仔码头”也有产品检出金黄色葡萄球菌超标,这是继思念、三全后又一家身陷“细菌门”的企业。昨日,微博上热传一份标称为南京工商局最近的检验报告,显示该品牌一个批次的“上汤小云吞(荠菜猪肉)”由于检出该菌不合格,并质疑结果仅通知厂商处理而未对外公布。为此昨日记者联系南京市相关主管部门查询,他们并没有给出明确的回复,而记者在广州的多家超市发现涉及的产品仍在销售。  记者了解到,微博上热传的这份检验报告由南京市工商局委托国家轻工业食品质量监督检测南京站检验,样品为标称湾仔码头的上汤小云吞(荠菜猪肉),规格为106克/袋(20只袋),生产单位是上海品食乐冷冻食品公司,生产日期是“20111008A”,在南京苏果超市马标连锁店购买。检验结果显示,上述样品金黄色葡萄球菌的检验结果是“检出”,由于技术要求是不得检出,所以该单项判定为“不合格”。该报告显示收样日期是10月22日,签发日期是11月6日。  昨日,致电南京市工商局办公室欲了解事件更多细节,该局一位工作人员表示,关于湾仔码头产品检测结果的查询统一由该市食安办发布。随后记者再致电南京食安办,食安办方面则表示,还在跟南京市工商局了解情况。另外,记者也向湾仔码头客服热线查询事件,对方表示并不知情,并称将把事件向上级反映有结果后向记者回复,但是至记者截稿时止仍未有回复。  而记者在广州多家超市均发现“问题”小云吞仍在销售,表示还没有收到有关部门下架通知。  新国标或容许”毒菌”存在  卫生部早前曾发布了“食品安全国家标准-速冻面米制品”征求意见稿,其中规定,金黄色葡萄球菌不再是严禁检出的项目,在每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量只要在1000~10000个之间,都为合格产品。而针对思念、三全等接多个大品牌速冻面米食品近期在各地检出金黄色葡萄球菌。卫生部指出,金黄色葡萄球菌广泛分布在大气、土壤中,对热敏感,加热80℃、30分钟可被杀灭,通常每克大于10的5次方菌落数时可产生致病性肠毒素,常规烹饪等处理方式不能破坏肠毒素,引起食物中毒。但市民普遍不可能将云吞煮30分钟。

  • 【原创】急!关于金黄色葡萄球菌!(已应助)

    金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的增菌液选用BP平板的菌落还是血平板的菌落啊?我们实验室做了一个样品,选BP平板的菌落的增菌液做血浆凝固酶试验,凝集;选血平板的菌落的增菌液做血浆凝固酶试验,不凝集。这是为什么?结果判定为金黄色葡萄球菌阳性还是阴性呢?

  • 关于金黄色葡萄球菌的检测

    近日来,思念水饺事件搅和的整个食品行业对金黄色葡萄球菌都畏惧,我们公司也不敢怠慢,按照国家的要求进行检测,但是国家标准特别的讨厌,金黄色葡萄球菌虽然有三个方法,但是不同的产品要求的不一样,比如说乳制品中的要求:未检出,必须采用第一法,其他的好像速冻食品要求的单位是:cfu/g,那就要用第二法,还有哪个产品来着?国家标准要求:MPN/g,那就必须用第三法,我们一个微生物实验室做一个金黄色葡萄球菌就要用三个方法,没办法啊,单位不同,不能统一,多讨厌啊。 国家标准制定有待改善啊,大家在使用国标的时候都遇到什么样的问题呢?

  • 【原创大赛】金黄色葡萄球菌的耐药性分析

    金黄色葡萄球菌的耐药性分析【摘要】目的了解我院共分离出152株金黄色葡萄球茵在临床住院者标本中的分布构成情况及其耐药趋势,为-临床感染的预防和治疗提供参考资料。方法回顾分析2005--2009年间我院患者标本中金黄色葡萄球菌在标本和病区的分布构成情况以及对16种抗茵药物的耐药率。结果金黄色葡萄球菌在呼吸道标本(痰液+咽拭子)的分离率最高(109/152),其次是分泌物(27/152),血液(16/152);金黄色葡萄球茵株中,耐甲氧西林金黄色葡萄球茵(MRSA)占68.4%;诺氟沙星92.3%耐药、复方新诺明91%耐药、四环素和利福平88.5%耐药、红霉素86.5%耐药、左旋氧氟沙星84.6%耐药、庆大霉素81.7%耐药;万古霉素、替考拉宁均对金黄色葡萄球茵100%敏感。结论在治疗金黄色葡萄球菌引起的感染时,临床医生应根据本地分离金黄色葡萄球菌的耐药情况,合理应用抗生素,减少细茵耐药,使金黄色葡萄球菌得到有效控制;MRSA药物敏感性较好的有万古霉素、替考拉宁、夫西地酸、呋喃妥因;甲氧西林敏感金黄色葡萄球茵除青霉素、庆大霉素、红霉素外,其它药物均具有较好的敏感性,可作为临床用药的参考。MRSA在对16种抗生素的平均耐药率中最高的前三位分别是青霉素100%、苯唑西林100%、诺氟沙星92.3%,最后三位是喹奴普汀·达福普汀23.1%、夫西地酸15.4%、呋喃妥因7.7%。而甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(Methieillin—sensitive staphylococcusaureus,MSSA)耐药率最高的前三位分别是青霉素89.6%、红霉素62.5%、庆大霉素54.1%,最后三位是左旋氧氟沙星10.4%、米诺霉素6.3%、四环素4.1%。

  • 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验(第一法定性检验) 方法验证

    目的: 通过对食品中金黄色葡萄球菌检验方法进行验证,证明我公司采用标准GB 4789.10-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》规定的方法对食品中金黄色葡萄球菌的定性和定量的测定满足检测要求。[b]1 实验室基本情况[/b][align=center]表1-1参加验证的人员情况表[/align] [table][tr][td] [align=center]姓名[/align] [/td][td] [align=center]性别[/align] [/td][td] [align=center]职务[/align] [/td][td] [align=center]所学专业[/align] [/td][td] [align=center]从事相关分析工作年限[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]A[/align] [/td][td] [align=center]女[/align] [/td][td] [align=center]微生物主管[/align] [/td][td] [align=center]食品科学与工程[/align] [/td][td] [align=center]8年[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]女[/align] [/td][td] [align=center]微生物组长[/align] [/td][td] [align=center]食品科学与工程[/align] [/td][td] [align=center]5年[/align] [/td][/tr][/table][align=center]表1-2使用仪器情况登记表[/align] [table][tr][td] [align=center]仪器名称[/align] [/td][td] [align=center]仪器型号[/align] [/td][td] [align=center]制造厂商[/align] [/td][td] [align=center]备注[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]生化培养箱[/align] [/td][td] [align=center]SPX-250B-Z[/align] [/td][td] [align=center]上海博迅实业有限公司医疗设备厂[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]立式压力蒸汽灭菌器[/align] [/td][td] [align=center]YXQ-LS-75SⅡ[/align] [/td][td] [align=center]上海博迅实业有限公司医疗设备厂[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]净化工作台[/align] [/td][td] [align=center]SW-CJ-2D[/align] [/td][td] [align=center]苏州博莱尔净化设备有限公司[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]生物安全柜[/align] [/td][td] [align=center]BHC-1300A2[/align] [/td][td] [align=center]苏州博莱尔净化设备有限公司[/align] [/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][align=center]表1-3使用试剂登记表[/align] [table][tr][td] [align=center]试剂名称[/align] [/td][td] [align=center]批号[/align] [/td][td] [align=center]生厂商[/align] [/td][td] [align=center]备注[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7.5%氯化钠肉汤[/align] [/td][td] [align=center]170321[/align] [/td][td]北京陆桥技术股份有限公司[/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]Baird-Parker平板[/align] [/td][td] [align=center]3105698[/align] [/td][td]北京陆桥技术股份有限公司[/td][td]添加亚碲酸钾卵黄增菌液[/td][/tr][tr][td] [align=center]血平板[/align] [/td][td] [align=center]180902[/align] [/td][td]北京陆桥技术股份有限公司[/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]脑心浸液(BHI)肉汤[/align] [/td][td] [align=center]160307[/align] [/td][td]北京陆桥技术股份有限公司[/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]冻干血浆[/align] [/td][td] [align=center]190423[/align] [/td][td]广东环凯微生物科技有限公司[/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]革兰氏染色液[/align] [/td][td] [align=center]180108[/align] [/td][td]北京陆桥技术股份有限公司[/td][td] [align=center] [/align] [/td][/tr][/table][b]2 方法验证过程[/b]2.1 菌液制备:分别挑取一粒金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)和表皮葡萄球菌CMCC(B)26069瓷珠,至BHI液体培养基中,24 h过夜培养。2.2 样品制备:2.2.1 试验组:取1 mL2.1中制备的菌液,加入到100 mL无菌盐水中,制成样品原液,作为试验组。2.2.2 供试品组:不添加任何菌的相同样品。2.3 培养基/试剂制备:2.3.1按GB4789.28-2013食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求配制。2.3.2根据供应商提供的配制说明进行配制。2.4 实验操作:如下图1(第一法 定性检验)[align=center][img=,383,371]https://bbs.instrument.com.cn/xheditor/xheditor_skin/blank.gif[/img][/align][align=center]图1—金黄色葡萄球菌定性检验程序[/align]2.5 实验结果判断依据:Baird-Parker平板上:金黄色葡萄球菌的菌落直径2 mm~3 mm,颜色呈灰色到黑色,有光泽,边缘为淡色,周围绕以不透明圈,在其外层有一清晰带。用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感;表皮葡萄球菌:黑色菌落无光泽,菌落周围无透明圈,其外层无清晰带。血平板上:金黄色葡萄球菌菌落较大,圆形、光滑凸起、湿润、金黄色(有时为白色),菌落周围可见完全透明溶血圈;表皮葡萄球菌:菌落周围没有透明溶血圈。镜检:金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,排列呈葡萄球状,无芽胞,无荚膜,直径约为0.5μm~1μm。血浆凝固酶试验:金黄色葡萄球菌血浆呈现完全凝固或凝固体积大于原体积的一半,视为血浆凝固酶试验阳性;表皮葡萄球菌血浆不凝固,视为血浆凝固酶试验阴性。2.6 测试数据:方法验证采用人员比对、阳性对照、阴性对照方式进行方法验证,试验结果如下表1,详细结果见原始记录。[align=center]表1-定性检验结果[/align] [table][tr][td] [align=center]人员[/align] [/td][td] [align=center]试验组别[/align] [/td][td] [align=center]结果/25m[color=#C0504D]l[/color][/align] [/td][/tr][tr][td=1,2] A[/td][td] [align=center]试验组[/align] [/td][td] [align=center]检出[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]供试品组[/align] [/td][td] [align=center]未检出[/align] [/td][/tr][tr][td=1,2] [align=center]B[/align] [/td][td] [align=center]试验组[/align] [/td][td] [align=center]检出[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]供试品组[/align] [/td][td] [align=center]未检出[/align] [/td][/tr][/table]实验结果符合标准要求。2.7是否对方法偏离? □是 ■否2.8 结论根据GB 4789.10-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》要求依法检测,结果符合规定。故我公司对食品中金黄色葡萄球菌的检测符合标准GB 4789.10-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》的要求。

  • 历史大骗局:广岛长崎原子弹爆炸

    一 困惑与疑问 第二次世界大战已经结束将近60年了,那场战争给世界各国人民带来了深重的灾难,特别是反法西斯国家人民所付出的巨大代价。 但是,作为当时主要的法西斯国家的日本每当提到那场战争的时候,主要都是提到他们在那场战争中所受到的伤害和很少提到对他国造成的巨大灾难,最重要的原因是他们有一个很好的理由---日本是第一个受到核武器,也是目前为止唯一一个受到核武器攻击的国家。美国在日本的广岛和长崎各投下的原子弹给日本带来了严重的伤害,最后导致约30万人的死亡。 日本就是借助这两颗原子弹的“威力”来装饰自己“受害者”的面目,每年的8月6日和9日,分别在广岛和长崎都有纪念活动,所谓揭开伤口,教育下一代。 但是,从1995年以来,世界各地,包括美国、俄罗斯、中国、英国、德国日本等国的历史学家和科学家,以及原来的政治家和军人,经过单独或是联合研究,发现美国在日本投放原子弹的历史记载存在许多的疑问,无论是在文字还是图象资料上都有诸多的困惑。主要问题是: 一,由于B-29飞机的航程有限,原子弹的投放飞机的起飞地点选在距离日本较近的提尼安岛的美国空军基地上,从美国本土运送两颗原子弹到提尼安岛上的步骤是先运送到夏威夷,然后在运送到提尼安岛,由于当时飞机的航程和安全性的限制,这两步过程使用的只能是军舰,这两段路却有很大的危险性,因为虽然日本海军在美军的打击下几乎已经没有了战斗力,但是,日本海军却仍然相当数量的潜艇,即使在战争末期这些潜艇仍然偷袭美军的军舰,即运送原子弹的军舰随时有可能被日本潜艇偷袭,美国怎么会冒那么大的风险用军舰运送原子弹? 二,当时美国制造出的第一批原子弹只有三颗,其中一颗已经在1945年7月16日的新墨西哥州的原子弹实验厂实验,美国怎么敢用仅剩的两颗原子弹去攻击实际上已经没有任何还手之力的日本,而且还是以平民为主的城市呢?而且,美国在未来几个月内不要可能马上在造出原子弹,美国难道没有想到会有可能出现的有、突然事件吗? 三,当时,主要的原子物理的科学家包括爱因斯坦、费米甚至是奥本海默本人都极力反对使用这种威力过大的武器。美国政府难道一点也不尊重这些为他们研制核武器以后还得依赖的科学家的意见吗? 四,电影和照片资料的问题。有很多人看过广岛和长崎原子弹爆炸、后的电影和照片资料,但是,你只要有少许的常识和一些思考,你就回发现这些电影和照片资料中有着诸多的问题。原子弹爆炸过后谁有能力在强烈的核辐射区进行摄影或摄像,日本当时没有任何一种防辐射的装备。即使是少得可怜的电影资料还是有问题,你会发现一些“幸存者”在爆炸后从废墟中出来后排成行走路,似乎是经过训练的。另外,能在核武器的爆炸中幸存这本身就是不可思议的事。 五, “幸存者”的迷惑。从战争结束到今天,从未发现过一个可以直接证明在广岛和长崎有过原子弹爆炸的人。有些“幸存者”只看到有大火产生,另一些“幸存者”以自己所谓“受到辐射烧伤的”伤痕,实际上只是火烧伤的痕迹。没有一个日本人能自身经历的的证据证明在广岛和长崎曾爆炸过原子弹。 六,数字的困惑。当时由于日本的个大城市都受到美国飞机的整天狂轰滥炸,大多数市民都跑到乡下躲避,广岛和长崎也是如此,实际上,据一个在广岛的日本老人介绍,1945年3月以后,在广岛市的市民已经不足五万人了。当他在四月离开广岛到乡下时,广岛的人已经寥寥无几了。当然长崎也是如此,而日本政府最后却称两颗原子弹最后造成近30万人死亡,着实在令人费解。 七,科学证据。美国和德国科学家在广岛和长崎两地进行了土样品的秘密采集,拿回国后经化验发现这些土的土质与普通土几乎没有区别,辐射计量并非超常。根本无法与在核实验基地所采集的土样品的辐射剂量相比。实际上,在受到严重辐射的土地上在几百年内不可能可以生长植物,人在该地区生活也相当危险,这与今天广岛的事实相悖。这更使人们困惑。 八,最有力的证据。美国、中国和澳大利亚的科学家运用巨型计算机的有限元分析法,对在新墨西哥州、广岛和长崎的原子弹爆炸的电影图象资料进行分析后,其结果令他们大吃一惊--三份图象是同一颗原子弹的,也就是三份电影资料是在同一颗原子弹爆炸的不同角度拍摄的,当然应该是在新墨西哥州爆炸的那颗原子弹。种种令人不解的疑问和新的发现令许多科学家(特别是核物理学家)和历史学家十分困惑,但是,由于这种关于核武器的事件的极其特殊性以及对事实的谨慎态度,另外很多科学家和历史学家都是独立研究,使这种疑问没有通过新闻媒体公布于众。 二 事实与真相 但是,仍然有许多的学术人士要求知道事实真相,从1995年开始,他们通过些秘密的方式与美国政府交涉,要求美国政府解密一些文件,然而却没有得到任何答复。有些美国政府官员说这是些”疯子的行为”。但是,1999年末,一位参加过“曼哈顿计划”的科学家和一位当年美军的上级军官却联合披露了一个令人吃惊的历史--美国从来没有在日本本土投放过原子弹,在广岛和长崎投放原子弹的事件是一场骗局,那只是美军进行的一场非同寻常的信息站和心理站,一次非常成功的“软战争”。 由于这个消息是在十分保密的情况下披露的,而且受到了美国政府的压制和否定,最后甚至对这两位科学家和军官进行了软禁,没有人知道他们的真实姓名,因此只有极少数科学家和历史学家知道了历史的真相。 纸终究包不住火的,这些消息终究会公布于众,只是时间的问题。 以下就是历史的事实与真相。 这个信息与心理战被称为“曼哈顿2”计划。 1945年7月16日,世界上第一颗原子弹在美国的新墨西哥州实验爆炸成功。这颗原子弹的威力之大甚至超出了科学家、工程师和军方人士的预料。大多数的科学家也预料到了这种武器的存在将直接威胁到人类,这其中包括爱因斯坦和“原子弹之父”奥本海默本人。 但是,第二次世界大战还没有完全结束。虽然在欧洲战场上,战争的火焰已经熄灭,但是在亚洲和太平洋战场,日本帝国还在利用四处环海的地理优势进行垂死挣扎。美军的飞机虽然对日本本土进行了大规模的轰炸,使日本的许多工业城市(包括东京、大阪)几乎已经成为了一片废墟,而且人员伤亡十分惨重,但是,日本却没有任何要投降的迹象,而且种种迹象表明日本准备在本土与盟军决一死站。盟军在1945年6月份已经着手计划在日本本土进行大规模的登陆战,参加的盟军士兵大约为40万,其中以美军为主。美军却非常担心这次登陆行动,日本已全民皆兵,这次行动必将会造成盟军严重的伤亡。 但是原子弹研制成功后,美军便似乎发现了有新的希望。因为对日本使用原子弹会对日本造成巨大的伤亡,并且还有巨大的心理作用,可以达到逼迫日本投降的目的。那样就不再需要冒险进行大规模的强行登陆行动以及有可能在日本进行大规模的战争。这大概能避免约10万盟军的死亡。 因此,美国军方极力要求对日本本土进行原子弹轰炸,以达到逼迫日本投降的目的,这当中为首的美国军方人士是麦克阿瑟将军。 但是,许多科学家以及一些军方人士却反对使用原子弹。因为他们清楚原子弹的威力给平民带来巨大的伤害以及在爆炸后的辐射给土地的影响。 当然,他们也承认在日本进行登陆战将带来巨大的代价。因此,许多科学家和军方人士建议对日本政府施加巨大政治压力使其投降。不过这种想法可以说是很幼稚的,因为当时日本已经受到了世界的孤立和进攻,没有什么所谓“更大的压力”。因此军方人士甚至是美国总统杜鲁门本人也赞成对日本本土使用原子弹。即使这有巨大的风险。

  • 高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证

    除少数培养基只需加热溶解,不需高压灭菌外,大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底,直接关系到试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。 1.试验材料(1) 嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus) ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-l05 CFU/片。(2) 121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。(3) 溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。(4) 0-150℃留点温度计。2.方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片(以下简称菌片)用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层,则需放10处。留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前,需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存1℃之间,则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时,观察颜色变化。如培养基变为黄色,说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活,细菌仍可在培养基中生长,分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色,则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照,不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块,在高压蒸气灭菌时,由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅,并与对照色相比,可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色,影响灭菌效果的观测。高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内,与灭菌物品接触,并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次,共做六次。5个点六次试验表明温度均在121℃,化学指示卡变黑;程度与对照色一致;培养基均未改变颜色,说明高压蒸气灭菌效果合格。高压灭菌器属于强检仪器,但强检只是对仪器物理参数的考核。所以做过强检的灭菌器还必须进行灭菌效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提灭菌器,往往仪器指针达到所需的温度,但灭菌物品的实际温度却未达到要求。导致灭菌物品不彻底,影响实验结果。培养基灭菌不彻底,影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气灭菌器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。

  • 【求助】关于蜡样芽孢杆菌

    国标上说该菌在MYP上呈粉红色菌落,周围有沉淀环,产生卵磷脂酶。我们按照SN标准做了试验,肉汤中培养48h有浑浊,但MYP上培养48h是黄色菌落培养基也成了黄色,没有典型的粉红色菌落,也没有沉淀环。可是室温放置一段时间后,(已超过了规定的培养时间)又出现了粉红色菌落,周围有沉淀环,我们又进一步做了生化试验,生化结果很可疑,也基本符合蜡样芽孢杆菌的特征,请问各位大侠,结果怎么报呀? 是阴性还是报阳性?

  • 天然产物雷公藤红素抑制耐药金黄色葡萄球菌的直接靶点

    [size=15px][font=宋体]金黄色葡萄球菌([/font][font=&]Staphylococcus aureus[/font][font=宋体])是医院感染最常见的病原体,已成为全球主要的公共卫生威胁之一。随着“超级细菌”耐甲氧西林金黄色葡萄球菌([/font][font=&]MRSA[i][/i][/font][font=宋体])的出现和迅速传播,治疗金黄色葡萄球菌感染变得愈发困难,临床上迫切需要发现新的超级抗生素来应对超级细菌的威胁。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=宋体][b]天然产物雷公藤红素[i][/i]在体外和体内均能有效对抗[/b][/font][b][font=&]MRSA[/font][font=宋体],且雷公藤红素靶向Δ[/font][font=&]1-[/font][font=宋体]吡咯啉[/font][font=&]-5-[/font][font=宋体]羧酸脱氢酶(Δ[/font][font=&]1-Pyrroline-5-Carboxylate Dehydrogenase[/font][font=宋体],[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体])发挥抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]作用。机制上,[/font][font=宋体]雷公藤红素通过与[/font][font=&] P5CDH [/font][font=宋体]结合诱导氧化应激[i][/i]并抑制[/font][font=&] DNA [/font][font=宋体]合成。[/font][/b][font=宋体]这项研究的结果表明雷公藤红素是一种有前途的先导化合物,并证实[/font][font=&] P5CDH [/font][font=宋体]是开发抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]新型药物的潜在靶点。[/font][/size] [size=15px][b][font=&]1[/font][font=宋体]、雷公藤红素在体外表现出对抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]的强效活性[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]作者首先通过[/font][b][font=宋体]体外实验[/font][/b][font=宋体]发现雷公藤红素对[/font][font=&]MRSA USA300[/font][font=宋体]表现出显著的抗菌活性,最低杀菌浓度([/font][font=&]MBC[/font][font=宋体])为[/font][font=&]8μg mL ?1[/font][font=宋体],在浓度为[/font][font=&]1[/font][font=宋体]和[/font][font=&]2 μg mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体]时,雷公藤红素完全抑制了菌株的生长,根据[/font][font=&]MBC[/font][font=宋体]和[/font][font=&]MIC[/font][font=宋体]值确认雷公藤红素是一种很有前途的抗[/font][font=&] MRSA[/font][font=宋体]药物[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=&]2[/font][font=宋体]、雷公藤红素在不同感染模型中表现出潜在的治疗能力[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]作者通过[/font][b][font=宋体]体内实验[/font][/b][font=宋体]评估雷公藤红素在[/font][font=&]3[/font][font=宋体]种不同感染模型(大蜡螟幼虫模型和两种小鼠感染模型)中的治疗能力,发现雷公藤红素提高了被[/font][font=&]MRSA USA300[/font][font=宋体]感染的大蜡螟幼虫的存活率,改善小鼠的[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]皮肤感染,提高[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]菌血症[i][/i]模型的存活率。这些结果表明雷公藤红素具有优异的体内抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性[/font][font=宋体]。[/font][font=&][/font][/size] [align=center][img=图片,1,]data:image/svg+xml,%3C%3Fxml version='1.0' encoding='UTF-8'%3F%3E%3Csvg width='1px' height='1px' viewBox='0 0 1 1' version='1.1' xmlns='http://www.w3.org/2000/svg' xmlns:xlink='http://www.w3.org/1999/xlink'%3E%3Ctitle%3E%3C/title%3E%3Cg stroke='none' stroke-width='1' fill='none' fill-rule='evenodd' fill-opacity='0'%3E%3Cg transform='translate(-249.000000, -126.000000)' fill='%23FFFFFF'%3E%3Crect x='249' y='126' width='1' height='1'%3E%3C/rect%3E%3C/g%3E%3C/g%3E%3C/svg%3E[/img][/align][align=center] [/align] [size=15px][b][font=&]3[/font][font=宋体]、多组学分析发现新型抗[/font][font=&] MRSA [/font][font=宋体]靶点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]接着研究人员[/font][b][font=宋体]通过转录组学、蛋白质组学和代谢组学分析了[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]治疗后的细胞变化[/font][/b][font=宋体],揭示了雷公藤红素抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性的可能靶点,多组学分析表明雷公藤红素上调应激反应[i][/i]和氧化磷酸化,而下调氨基酸和核苷酸、天冬氨酸、谷氨酸和嘧啶代谢的生物合成。这些代谢通路与[/font][font=&]Δ1-[/font][font=宋体]吡咯啉[/font][font=&]-5-[/font][font=宋体]羧酸脱氢酶([/font][font=&]P5CDH, [/font][font=宋体]由[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]基因编码)相关。因此,作者推测[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]是抗菌药物开发的潜在靶点 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]4[/font][font=宋体]、[/font][font=&]P5CDH [/font][font=宋体]是一个潜在的抗菌靶点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][b][font=宋体]为了进一步确定[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]作为潜在的抗菌靶点,作者构建了[/font][font=&]MRSA USA300 rocA[/font][font=宋体]敲除菌株和补充菌株(Δ[/font][font=&]:: rocA [/font][font=宋体])[/font][/b][font=宋体],发现[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]缺失显著损害细菌生长,而补充菌株在生长方面与[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]相同。此外,突变后雷公藤红素对[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]的[/font][font=&]MIC[/font][font=宋体]由[/font][font=&]1[/font][font=宋体]变为[/font][font=&]8[/font][font=宋体]μ[/font][font=&]g mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体],而补充[/font][font=&]rocA[/font][font=宋体]基因后又恢复到[/font][font=&]1[/font][font=宋体]μ[/font][font=&]g mL[/font][font=&]?[/font][font=&]1[/font][font=宋体],说明雷公藤红素的抗菌活性部分是通过抑制[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]来实现的[/font][/size] [size=15px][b][font=&]5[/font][font=宋体]、雷公藤红素与[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]直接结合[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][b][font=宋体]由于蛋白质组学分析中雷公藤红素并没有显著影响[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]的表达,因此研究推测雷公藤红素通过靶向[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]并影响其功能来发挥抗菌活性。[/font][/b][font=宋体]接着通过分子对接、[/font][font=&]BLI[/font][font=宋体]、[/font][font=&]CETSA[/font][font=宋体]、圆二色谱和酶活性测定,证实雷公藤红素能够直接结合影响[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体],影响其酶活 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]6[/font][font=宋体]、[/font][font=&]K205A[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208A[/font][font=宋体]是[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]与雷公藤红素的关键结合位点[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]接着,[/font][b][font=宋体]作者采用了分子对接和定点诱变技术揭示雷公藤红素结合位点[/font][/b][font=宋体]。分子对接成功预测出[/font][font=&]3[/font][font=宋体]个结合位点,分别为[/font][font=&]Lys205[/font][font=宋体]([/font][font=&]K205A[/font][font=宋体])、[/font][font=&]Glu208[/font][font=宋体]([/font][font=&]E208A[/font][font=宋体])和[/font][font=&]Asp209[/font][font=宋体]([/font][font=&]D209A[/font][font=宋体])。随后,作者构建了三个突变质粒并表达相关蛋白。[/font][b][font=&]BLI[/font][font=宋体]分析显示[/font][font=&]K205[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208[/font][font=宋体]突变后雷公藤红素结合能力显著降低,且不再抑制其酶活,表明[/font][font=&]K205[/font][font=宋体]和[/font][font=&]E208[/font][font=宋体]是结合的关键残基[/font][/b][/size] [size=15px][b][font=&]7[/font][font=宋体]、雷公藤红素促进氧化损伤[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]有文献报道[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]通过影响[/font][font=&]P5C-Pro[/font][font=宋体]循环的平衡进而对产生[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]至关重要,[/font][b][font=宋体]作者推测雷公藤红素可能通过氧化损伤发挥抗菌作用。通过对[/font][font=&]WT [/font][font=宋体]或[/font][font=&] Δ:: rocA [/font][font=宋体]组、[/font][font=&]Δ rocA[/font][font=宋体]组菌株采用雷公藤红素或乙醛酸([/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]抑制剂)[/font][/b][font=宋体],发现雷公藤红素扰乱[/font][font=&]P5C-Pro[/font][font=宋体]循环的平衡。此外,[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组的[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]水平升高。其中,雷公藤红素治疗组[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]升高最为显著,可能是因为雷公藤红素是一种多途径抗菌剂,可以通过多种方式刺激[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]生成。结果表明氧化损伤是雷公藤红素重要的抗菌机制[/font][/size] [size=15px][b][font=&]8[/font][font=宋体]、雷公藤红素诱导细菌死亡[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]为研究雷公藤红素处理后[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]死亡情况,作者用[/font][font=&]DAPI[/font][font=宋体]标记细胞中的[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体],在[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组均观察到染色体凝聚,提示有细菌死亡发生,特别是雷公藤红素处理的细菌出现了凋亡小体形成和萎缩等细菌死亡形态学特征。在[/font][font=&]TUNEL[/font][font=宋体]染色实验中,与未接受药物处理的[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]细胞相比,雷公藤红素处理的[/font][font=&]WT[/font][font=宋体]细菌荧光较强,提示有[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]双链断裂出现 [/font][/size] [size=15px][b][font=&]9[/font][font=宋体]、雷公藤红素抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]前面多组学结果发现雷公藤红素影响谷氨酸和嘧啶代谢的生物合成,该过程与[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成密切相关,[/font][b][font=宋体]作者推测雷公藤红素可能通过抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成发挥抗[/font][font=&]MRSA[/font][font=宋体]活性。[/font][/b][font=宋体]结果显示,用雷公藤红素或抑制剂和[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]组处理的细菌中[/font][font=&]NADP+/NADPH[/font][font=宋体]比率降低,表明[/font][font=&]5-[/font][font=宋体]磷酸核糖的合成受到抑制。[/font][font=&]Asp[/font][font=宋体]是嘌呤和嘧啶合成的重要前体,作者发现[/font][font=&]Glu[/font][font=宋体]和[/font][font=&]Asp[/font][font=宋体]的减少。此外,作者观察到[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]含量下降。考虑到[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]能够影响蛋白质的表达,作者也观察到[/font][font=&]ΔrocA[/font][font=宋体]、雷公藤红素或抑制剂处理组的蛋白质含量均显著降低,表明[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]能够影响蛋白质的合成。总之,雷公藤红素可以抑制[/font][font=&]DNA[/font][font=宋体]合成来对抗[/font][font=&]MRSA[/font][/size] [size=15px][b][font=宋体]总结[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]该研究表明,雷公藤红素对标准和临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株表现出强大的抗菌活性,并且耐药性发展水平较低。这种抗菌活性的机制被认为是基于与[/font][font=&]P5CDH[/font][font=宋体]的竞争性结合,从而激活多种途径。雷公藤红素是开发用于对抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌相关感染的新型抗生素药物的有希望的候选药物[/font][/size]

  • 关于金黄色葡萄球菌计数表示

    GB4789.10-2016金黄色葡萄球菌检验第二法中,如果都是未检出,该如何表示呢?国标上说“如T=0,则以小于1乘以最低稀释倍数表示”。如果我最低稀释10倍,未检出,最后的表示是不是<1x10?非微生物专业,临时顶替,望各位大神路过帮忙解答一下,谢谢

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