问题1:内毒素日常检查中：在加入鲎试剂前的供试品对照溶液（0.1ml）药典规定是含内毒素浓度2λ的。假如MVD=2，C=10mg/ml,λ=0.25EU/ml。那么应该用1EU/ml（也就是4λ）的内毒素溶液对半稀释浓度为10mg/ml的供试品溶液，终浓度才是含量为0.5EU/ml(2λ)内毒素、供试品为MVD浓度的供试液的供试品对照液！！！ 问题2:还有如果供试品为注射用水，假如L=0.25，那么鲎试剂的灵敏度最少要用λ=0.125的；如果用λ=0.25的，因为供试品液(0.1ml)加入鲎试剂（0.1ml）后，稀释了1倍，假如结果为+，那么说明供试品的内毒素限制大于0.5EU？而不是大于0.25EU吧？
我们做的原料药的细菌内毒素的供试品阳性对照怎么老是阴性？该如何去除干扰呢？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif
国内目前水质环境污染问题及水的富营养化，藻毒污染更加趋向严重的现状，各类各级环境研究机构与应用单位对水藻毒素标准对照物都有了更高更迫切的要求.水藻毒素标准对照品。产品编号产品名称（英文）产品名称（中文）产品规格优惠零售价格E-LR-C050Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR50ug180.00E-LR-C100Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR100ug345.00E-LR-C250Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR250ug595.00E-LR-C500Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR500ug1,260.00E-LR-M001Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR1mg2,380.00E-LR-M005Microcystin LR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素LR5mg单询E-RR-C050Microcystin RR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素RR50ug510.00E-RR-C100Microcystin RR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素RR100ug950.00E-RR-C250Microcystin RR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素RR250ug1,430.00E-RR-C500Microcystin RR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素RR500ug2,670.00E-RR-M001Microcystin RR ≥ 95% by HPLC微囊藻毒素RR1mg4,970.00E-OA-C025Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸25ug440.00E-OA-C050Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸50ug820.00E-OA-C100Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸100ug1,350.00E-OA-C500Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸500ug4,860.00E-OA-M001Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸1mg7,130.00E-OA-M005Okadaic acid(OA) ≥ 95% by HPLC黑海绵酸,软海绵酸5mg单询E-DT-C100Dinophysistoxins(DTX-1) ≥ 95% by HPLC鳍藻毒素100ug4,055.00E-DT-C500Dinophysistoxins(DTX-1) ≥ 95% by HPLC鳍藻毒素500ug16,220.00E-DT-M001Dinophysistoxins(DTX-1) ≥ 95% by HPLC鳍藻毒素1mg29,950.00E-B-C100Brevetoxin B (PbTx-2) ≥ 98% by HPLC裸藻毒100ug2,982.00E-B-C500Brevetoxin B (PbTx-2) ≥ 98% by HPLC裸藻毒500ug12,550.00E-B-M001Brevetoxin B (PbTx-2) ≥ 98% by HPLC裸藻毒1mg22,650.00E-B-M005Brevetoxin B (PbTx-2) ≥ 98% by HPLC裸藻毒5mg单询E-SA-C100Saxitoxin acetate石房蛤毒素100ug5,150.00
细菌内毒素1 设备：电冰箱、恒温水浴箱、超净工作台、旋涡混合器、计时器2 用具：剪刀、镊子、无热原空安瓿5mg/支、浮板、封口膜、精密[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url](50ml-250ml、250ml-1000ml)、吸头(50ml-250ml、250ml-1000ml)、PH试纸3 试剂3.1 细菌内毒素工作标准品：用于仲裁鲎试剂的灵敏度和各种阳性对照。3.2 鲎试剂：为冻干品制剂，灵敏度为0.25EU/ ml，规格为：0.1ml/支3.3 细菌内毒素检查用水：内毒素含量不超过0.03EU/ml注射用水。(BET水)3.4 0.1mol/L HCl溶液、0.1mol/L NaOH溶液（临用时用细菌内毒素检查用水配制）。3.5 清洁液：75％酒精4 操作步骤4.1 鲎试剂灵敏度复核试验：鲎试剂灵敏度定义为在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。4.2 根据鲎试剂灵敏度的标示值(λ)，将细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟，然后制成2.0λ、1.0λ、0.5λ或0.25λ四个浓度为内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟，按检查法项下试验，每一浓度平行做4支，同时用细菌内毒素检查用水做2支阴性对照，如最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管均为阳性，按下式计算，反应终点浓度的几何平均值，即为鲎试剂灵敏度的测定值（λc）。λc=lg-1(∑x/4)当λc在0.5λ-2.0λ（包括0.5λ-2.0λ）时，方可用于细菌内毒素检查，并以λ为该批鲎试剂的灵敏度。5 干扰试验5.1 用细菌内毒素检查用水和未检出内毒素的供试品溶液或其不超过最大有效稀释倍数的稀释液分别将同一支细菌内毒素工作标准品制成含细菌内毒素工作标准品2.0λ、1.0λ、0.5λ、0.25λ四种浓度的内毒素溶液。用细菌内毒素检查用水和供试品溶液制成每一浓度平行做4支，另取细菌内毒素养检查用水和供试品溶液各做2支阴性对照管。如果最大浓度2.0λ管均为阳性，最低浓度0.25λ管均为阴性，阴性对照管均为阴性时，按下式计算，用细菌内毒素检查用水制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值（Es）和用供试品溶液或其稀释液制成的内毒素溶液的反应终点浓度的几何平均值(Et)。Es=lg-1(∑xs/4)Et=lg-1(∑xt/4)当Es在0.5 λ-2.0λ，且当Et在0.5Es和2.0Es时，则认为供试品在该浓度下I 干扰试验。6 检查法6.1 精密称取土霉素检品适量，加0.1mol/L HCl溶液适量溶解，加0.1mol/L NaOH溶液适量，调节PH在6.5-7.5之间，加BET水稀释至一定浓度，备用。6.2 取装量为0.1mol/L的鲎试剂5支，备用。6.3 NC管的制备：取0.2ml BET水加入一支鲎试剂中，摇匀。6.4 PC管的制备：取0.1ml BET水溶解一支鲎试剂，加0.1ml用BET水稀释的含2λ的内毒素工作标准品的溶液，摇匀。6.5 PPC管的制备：取0.1ml BET水溶解鲎试剂，加0.1ml的用供试品的稀释液稀释的含2λ内毒素工作标准品，摇匀。6.6 供试品管的制备：取0.1ml BET水溶解鲎试剂，加0.1ml的供试品稀释液，摇匀。6.7 以上各管按顺序排列，置浮板上，放置37±1℃的恒温水浴箱中，保温1小时±2分钟。7 结果判断：将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（+）。凝胶从管壁滑脱者并不能保持完整者为阴性（-），供试品管2支均为阴性（-）。应认为符合规定；如2支为阳性（+），应认为不符合规定。如2支中1支为正（+），1支为负（-），按上述方法另取4支供试品管复试。4支中1支为（+），即认为不符合规定。阳性对照品为（-）或供试品阳性对照品管为(-)，或供试品阴性对照品为（+），试验无效。[em62]
粮食坚果黄曲霉毒素测定仪的适用范围非常广泛，主要涵盖了食品、农产品及其加工品中黄曲霉毒素的检测。具体来说，其适用范围包括但不限于以下几个方面： 粮食及其制品：包括各种谷物(如小麦、玉米、稻谷、大麦、高粱等)、杂粮(如小米、燕麦、荞麦等)以及它们的加工产品(如面粉、米粉、谷物制品等)。这些粮食是日常生活中重要的能量来源，但由于储存和加工过程中的不当处理，容易受到黄曲霉毒素的污染。 坚果与干果：坚果如花生、核桃、杏仁、开心果等，以及干果如葡萄干、无花果干等，都是人们常吃的零食或食材。由于它们富含油脂和蛋白质，更容易受到黄曲霉菌的侵染，从而产生黄曲霉毒素。 食用油：包括花生油、玉米油、大豆油等。这些油类在压榨或浸出过程中，如果原料含有黄曲霉毒素，那么油中也可能含有微量的毒素。 饲料：动物饲料也是黄曲霉毒素污染的重要领域。饲料中的黄曲霉毒素不仅会影响动物的健康和生产性能，还可能通过食物链传递到人类。 中药材：中药材在储存和加工过程中，也可能受到黄曲霉毒素的污染。特别是一些富含淀粉或油脂的中药材，更容易成为黄曲霉菌的滋生地。 其他食品：除上述列举的食品外，还有一些其他食品也可能受到黄曲霉毒素的污染，如调味品(辣椒粉、花椒粉等)、乳制品(如果酱、酸奶等含有坚果或谷物成分的制品)等。 粮食坚果黄曲霉毒素测定仪的适用范围广泛，能够快速、准确地检测食品中的黄曲霉毒素含量，为食品安全监管和质量控制提供重要技术支持。同时，随着技术的不断发展和应用领域的不断拓展，其适用范围还将进一步扩大。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408191630126849_8171_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]
1 食品中天然存在的毒素①动物类食品中的天然毒素（1）动物肝脏中的毒素动物肝脏富含蛋白质、VA、叶酸，但同时也含有胆固醇及胆酸，肝脏是动物重要的电写废物和外源毒素的处理工厂，其中肝脏中主要的毒素物质为胆酸、内胆酸、脱氧胆酸和牛磺胆酸构成的混合物，毒性依次为牛磺胆酸脱氧胆酸胆酸，摄入量小不会中毒，脱氧胆酸对人肠道上皮细胞癌如结肠癌、直肠癌有促进作用。（2）海洋鱼类毒素:金枪鱼、蓝鱼，贮藏在不适宜的条件下容易产生组胺导致中毒；（3）河豚毒素：河豚味美而剧毒，多存在于河豚的卵巢、皮肤、肝脏甚至肌肉中，其LD50 为8.7μg/kg体重，人经口服的最大致死量为408.7μg/kg体重。（4）贝类毒素：主要为麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素。②植物类食物中的天然毒素（1）致甲状腺肿大物质：甲状腺肿大的主要发病原因是机体缺碘，食用某些十字花科甘蓝属的蔬菜如油菜、包心菜、花菜、芥菜等一会致病，其主要物质是以黑芥子硫苷为前体的物质和硫氰酸酯。（2）生氰糖苷：广泛存在于豆科、蔷薇科和稻科中的糖苷水解形成氢氰酸，如木薯、杏仁、枇杷、豆类等。（3）消化酶抑制剂：胰蛋白酶抑制剂、胰凝乳蛋白酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂；（4）生物碱糖苷：含氮有机化合物，马铃薯变绿的地方有龙葵碱。2 生物污染主要是一些真菌毒素。如黄曲霉毒素、杂色曲霉毒素、金黄色葡萄球菌毒素，大肠杆菌毒素等。3 化学污染化学污染的食品毒素主要有：重金属、多环芳烃、多氯联苯、残留农药、食品添加剂等。4 食品加工中形成的毒素有一些加工过程如烟熏、煎炸、烘烤、高温杀菌等中形成的毒素，常见的有：苯并[a]芘、Maillard 反应产物和一些杂环胺，腌肉中形成的亚硝基胺等。
本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。 本试验操作过程应防止微生物和内毒素的污染。 细菌内毒素的量用内毒素单位（EU ）表示，1EU 与1 个内毒素国际单位（IU ）相当。 细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。 细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中的赏试剂灵敏度复核、干扰试验及各种阳性对照。 细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.O15EU／ml（用于凝胶法）或0.005EU / ml （用于光度侧定法）且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水。 试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃ 、30 分钟以上 ) 去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法。若使用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。
本文是USP24细菌内毒素检查法（BACTERLAL ENDOTOXINS TEST）的译文，但目前执行的标准是USP24版第二增补本（USP—NF19 Second Supplement）的细菌内毒素检查法，读者可对照学习，从中可看出USP24细菌内毒素检查的不足之处。本文将介绍用鲎试剂检测样品内或样品上存在的细菌内毒素浓度的方法。鲎试剂（Limulus Amebocyte,LAL）来自鲎的循环细胞，经水提取而行，制备和检验后，用于凝固法。反应的终点是将供检样品稀释后，与平行稀释的参考内毒素标准进行直接比较得到的。测得的内毒素含量用规定的内毒素单位表示。鲎试剂也是用浊度法或显色法来读取数据的，这些试齐只要能满足这些选择方法的要求，就可以使用。在做试验时，需要先做出一条标准曲线，并用该曲线计算供检样品的内毒素含量，包括样品和对照液加鲎试剂后的培育时间和在分光光度计上读取光密度时使用的波长等操作，都应该事先规定好。如果是终点浊度法，则到达培育期后，应立刻读取读数。而动力学检测（凶手浊度法和显色法），光密度的测定是贯穿于整个反应期间，而用于计算结果的百分数就是从这些读数中计算出来的。在用终点法的显色法检测时，在到达事先规定的反应时间后，添加停止酶反应的试剂使反应停止后，再读取数据。1、参考内毒素标准与对照内毒素标准参考内毒素标准（Reference standard endotoxin,RSE）是美国药典（USP）的内毒素参考标准，其效价为每瓶10 000个USP内毒素单位（EU）。每瓶参考内毒素标准加5ml鲎试剂用水（LAL Reagent Watet），用旋转搅拌器间歇搅拌30min使其溶解，制成原液，用这一原液制作合适的系列稀释。原液应保存于冰箱中，用于以后的稀释，但保存时间不得超过14d。用前，用旋转搅拌器强力搅拌至少3min，每一步稀释，至少搅拌30s，然后才能用它稀释下一步。经稀释的参考内毒素不得贮存待以后使用，因为吸附作用会使其失去活性。对照内毒素标准（Contuol standard endotoxin,CSE）是以参考内毒素标准为标准另行制备的。一批新的对照内毒素标准在使用前应进行检定。检定时使用的鲎试剂应为试验中使用的同批鲎试剂。参考内毒素标准对照内毒素标准进行检定时，可使用鲎试剂的凝固法，按“试验操作”进行。每批对照内毒素标准，至少取1瓶与1瓶参考内毒素标准进行对比。参考内毒素标准的每个稀释度作4管。每瓶或每个样品的对照内毒素标准的每个稀释度也都要4管。参考内毒素标准终点的对数Log10的平均值和对照内毒素标准终点的对数Log10平均值之间的差值的反对数等于对照内毒素标准效价的标定值。可根据情况，将其变换成每ng干燥制剂的单位数或每瓶所含的单位数。适宜的对照内毒素标准的效价应不小于2EU/ng也不大于50EU/ng。2、试验的准备鲎试剂的灵敏度应经过确证。试验中使用的所有容器和用具，都必须在≥250℃的烤箱中，用足够的时间进行加热处理、破坏这些用具表面上可能存在的外源性内毒素。内毒素试验的结果是否可靠，还必须从试验使用的各种用具、溶液、洗涤用品中取样或提取样品，并用适当的方法证明它们对反应没有抑制或拉强或其它干扰作用。可按下述方法进行抑制试验或增强试验。试验中应设置阴性对照。如果鲎试剂的原材料、生产方法或处方发生改变时都要重新进行试验。3、鲎试剂灵敏度的确认试验为了确认鲎试剂标签上的灵敏度，每批至少取1瓶样品进行检定。参考内毒素标准（或对照内毒素标准）作2倍系列稀释，稀释成2.0λ,1.0λ,0.5λ和0.25λ。其中λ是鲎试剂标签上的灵敏度EU/ml。上述4个稀释度和阴性对照都要重复做4管。所得结果的几何平均值的对数应大于或等于0.5λ，小于或等于2.0λ。每一批新的鲎试剂，使用前都必须作标签灵敏度的确认试验。4、抑制试验和增强试验用不超过地大有效稀释而检测不出内毒素的样品，不加或内毒素，使最后浓度等于2.0λ,1.0λ,0.5λ和0.25λ。按照试验操作（Test Procedure）项的规定用标准内毒素进行检定。不加和加内毒素的样品管至少做4管。同时，用水稀释上述相同浓度的内毒素和阴性对照各两管，做平行两管试验。按照计算和判定项的方法，计算样品终点内毒素浓度的几何平均值。如果所得结果大于或等于0.5λ，小于或等于2.0λ,则该样品适合作细菌内毒素检查。用中和、灭活或除去干扰物质方法或用不超过最大有效稀释度稀释检品后，可重做抑制试验和增强试验。如果用不超过最大有效稀释法，对已知加量的内毒素可以克服抑制和增强作用。则样品可以经过稀释后，再作内毒素检查。如果在试验条件下，对未处理的样品检查出有内源性内毒素。则该样品不适合用于作抑制或拉强试验。不过，这种样品可用超过滤法将存在的内毒素去掉或做适当稀释、使之适合于作抑制或增强试验。稀释未处理样品（像开瓶溶解或在使用前注射前稀释那样），稀释到检验不到内毒素但不超过最大有效稀释倍数。再用这些已稀释的样品重作抑制试验或增强试验。5、最大有效稀释度（MVD） 最大有效稀释度是指在使用时将药物溶解或稀释成恰好用于注射或其它非经口途径使用的浓度。有时为了避免给药量的体积（EU/ml）计算。用试剂标签上的灵敏度（EU/ml）λ除限定浓度，就可以得到MVD因子。如果某一试剂的限量浓度是按重量或按药品的活性单位
【内容摘要】赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素。赭曲霉毒素A是一种与人类健康密切相关的霉菌毒素，是人类可能的致癌剂。除了潜在的遗传毒性和致癌性外，赭曲霉毒素A也是一种具有免疫抑制、神经毒性以及致畸性的物质。赭曲霉毒素最初是从南非的赭曲霉毒株中分离出来的，由赭曲霉(Asper—gillus ochracets)、洋葱曲霉(Aspergillus alliaceus)、鲜绿青霉(PencillilJⅡlviridicatum)、徘徊青霉等代谢产生，包括7种结构类似的化合物，赭曲霉毒素A是其中毒性最强的物质，是自然界中的主要天然污染物。在一些国家的食品中，赭曲霉毒素A的污染率可达2％～30％。该化合物主要表现为肾脏毒性。在巴尔干地方性肾病流行区，6%～18%人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。(1)结构与性质赭曲霉毒素是分子结构类似的一组化合物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D和a等，其中赭曲霉毒素A是主要的污染物。赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。在紫外光下赭曲霉毒素A呈绿色荧光。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素，赭曲霉毒素的化学结构如图4—2所示。(2)食品中赭曲霉霉素的来源与分布赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的二次代谢产物，产毒菌种见表4—2。[color=#075
1 食品中天然存在的毒素①动物类食品中的天然毒素（1）动物肝脏中的毒素动物肝脏富含蛋白质、VA、叶酸，但同时也含有胆固醇及胆酸，肝脏是动物重要的电写废物和外源毒素的处理工厂，其中肝脏中主要的毒素物质为胆酸、内胆酸、脱氧胆酸和牛磺胆酸构成的混合物，毒性依次为牛磺胆酸脱氧胆酸胆酸，摄入量小不会中毒，脱氧胆酸对人肠道上皮细胞癌如结肠癌、直肠癌有促进作用。（2）海洋鱼类毒素:金枪鱼、蓝鱼，贮藏在不适宜的条件下容易产生组胺导致中毒；（3）河豚毒素：河豚味美而剧毒，多存在于河豚的卵巢、皮肤、肝脏甚至肌肉中，其LD50 为8.7μg/kg体重，人经口服的最大致死量为408.7μg/kg体重。（4）贝类毒素：主要为麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素。②植物类食物中的天然毒素（1）致甲状腺肿大物质：甲状腺肿大的主要发病原因是机体缺碘，食用某些十字花科甘蓝属的蔬菜如油菜、包心菜、花菜、芥菜等一会致病，其主要物质是以黑芥子硫苷为前体的物质和硫氰酸酯。（2）生氰糖苷：广泛存在于豆科、蔷薇科和稻科中的糖苷水解形成氢氰酸，如木薯、杏仁、枇杷、豆类等。（3）消化酶抑制剂：胰蛋白酶抑制剂、胰凝乳蛋白酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂；（4）生物碱糖苷：含氮有机化合物，马铃薯变绿的地方有龙葵碱。
产品的细菌内毒素不大于20EU/件，灵敏度：0.25EU/ml,细菌内毒素供试品浓度怎么计算？
国家标准：GB 13078.2-2006 饲料卫生标准 饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量GB/T 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法GB/T 19539-2004 饲料中赭曲霉毒素A的测定GB 21693-2008 配合饲料中T-2毒素的允许量GB/T 23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定 液相色谱-荧光检测法GB/T 23215-2008 贝类中多种麻痹性贝类毒素含量的测定 液相色谱-荧光检测法GB/T 23217-2008 水产品中河豚毒素的测定 液相色谱-荧光检测法GB/T 23501-2009 食品中T-2毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法GB/T 23502-2009 食品中赭曲霉毒素A的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法GB 2761-2005 食品中真菌毒素限量GB/T 4789.12-2003 食品卫生微生物学检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验GB/T 5009.118-2008 谷物中T-2毒素的测定GB/T 5009.198-2003 贝类 记忆丧失性贝类毒素软骨藻酸的测定GB/T 5009.206-2007 鲜河豚鱼中河豚毒素的测定GB/T 5009.212-2008 贝类中腹泻性贝类毒素的测定GB/T 5009.213-2008 贝类中麻痹性贝类毒素的测定GB/T 5009.22-2003 食品中黄曲霉毒素B1的测定GB/T 5009.23-2006 食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定GB 5009.24-2010 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定GB/T 5009.96-2003 谷物和大豆中赭曲霉毒素A的测定GB 5413.37-2010 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定GB/T 8381-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 半定量薄层色谱法GB/T 8381.4-2005 配合饲料中T-2毒素的测定 薄层色谱法
最近做黄曲霉毒素B1，按照GB/Y 5009.23-2006做的，结果是样品加标的都没有峰，而对照品单独近就有峰，很是郁闷，不知道有哪位做过，是怎么做的，大家一起讨论学习一下。
各位老师，我这几天在实验室按照2010版药典标准做了黄曲霉毒素的检测。对照品是进口的黄曲霉毒素混标，没有明确各个成分的含量和先后出顺序。下图是对照品色谱图和包装盒色谱条件： 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水(10：18：42)为流动相，流速每分钟0.8ml；采用柱后衍生法检测。衍生溶液为0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加人甲醇100ml使溶解，用谁稀释至1000ml制成），衍生化泵流速每挣钟0.3ml衍生化温度70℃；以荧光检测器检测，激发波长λex=360nm(或365nm），发射波长λem=450nm。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410111454_517797_2856959_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410111454_517798_2856959_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410111454_517799_2856959_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410111454_517801_2856959_3.jpg
[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/01/202401041020543911_9315_5604214_3.png!w690x690.jpg[/img] 食品细菌毒素检测仪是一种用于检测食品中细菌毒素的仪器。随着人们对食品安全问题的日益关注，食品细菌毒素检测仪的应用也越来越广泛。 首先，食品细菌毒素检测仪可以用于检测食品中的细菌毒素，如沙门氏菌、志贺氏菌、大肠杆菌等产生的毒素。这些毒素可能对人类健康造成严重影响，如食物中毒、腹泻、呕吐等。通过使用食品细菌毒素检测仪，可以快速、准确地检测出食品中是否存在这些毒素，及时发现食品安全问题，保障消费者的健康。 其次，食品细菌毒素检测仪还可以用于检测食品中农药残留、兽药残留等有害物质。这些有害物质可能对人类健康造成潜在威胁，如致癌、致畸、致突变等。通过使用食品细菌毒素检测仪，可以快速检测出食品中是否存在这些有害物质，避免因食品问题导致的健康风险。 此外，食品细菌毒素检测仪还可以用于检测食品中重金属含量。重金属可能对人类健康造成严重危害，如铅、汞、镉等。通过使用食品细菌毒素检测仪，可以快速、准确地检测出食品中重金属含量，避免因食品问题导致的健康风险。 综上所述，食品细菌毒素检测仪的应用十分广泛，可以用于检测食品中的细菌毒素、农药残留、兽药残留和重金属含量等。随着人们对食品安全问题的日益关注，食品细菌毒素检测仪的应用将会更加广泛，为保障食品安全和人类健康发挥重要作用。
黄曲霉毒素各组分在中国药典要求的色谱条件下分析检测常会遇到分离度不好的问题。因此，月旭科技针对中国药典色谱条件进行优化，在中国药典规定的调整范围内，使得被测黄曲霉毒素各组分之间有更好的分离度和更好的峰型。我们一起来看一下整个的检测流程。[b]难点：分离度达不到测试要求[/b]测定方法来源于：中国药典2015年版四部 2351黄曲霉毒素测定法 第一法[b]测试过程[/b]1、色谱条件：[align=center][img=,600,314]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910091413381088_1249_932_3.png!w536x281.jpg[/img][/align]2、样品配置：混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2，黄曲霉毒素G1，黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0ug/ml，0.3ug/ml，1.0ug/ml，0.3ug/ml）0.25ml，置5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为贮备溶液。精密量取贮备溶液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度 ；3、测试图谱：25ul进样体积图谱[align=center][img=,600,242]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910091413491235_9214_932_3.png!w605x245.jpg[/img][/align][align=center][color=#333333][img=,600,66]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910091413554305_7671_932_3.png!w690x77.jpg[/img][/color][/align][color=#333333]药典规定分别进样体积是：5ul、10ul、15ul、20ul、25ul叠加效果图[/color][align=center][img=,600,145]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910091414022452_7130_932_3.png!w690x167.jpg[/img][/align][color=#333333][b]结果[/b]黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2，黄曲霉毒素G1，黄曲霉毒素G2分离良好，线性可以达到测试要求（G2，R2=0.9984；G1，R2=0.9985；B2，R2=0.9993；B1，R2=0.9974）[/color]
[align=center][img=,690,460]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809141547242123_8351_932_3.jpg!w690x460.jpg[/img][/align]黄曲霉毒素各组分在中国药典要求的色谱条件下分析检测常会遇到分离度不好的问题。因此，月旭科技针对中国药典色谱条件进行优化，在中国药典规定的调整范围内，使得被测黄曲霉毒素各组分之间有更好的分离度和更好的峰型。我们一起来看一下整个的检测流程。[b]01 难点：分离度达不到测试要求[/b]测定方法来源于：中国药典2015年版四部 2351黄曲霉毒素测定法 第一法[b]02 测试过程[/b]1、色谱条件：[align=center][img=,600,312]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809141640523245_9962_932_3.jpg!w690x359.jpg[/img][/align]2、样品配置：混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2，黄曲霉毒素G1，黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0ug/ml，0.3ug/ml，1.0ug/ml，0.3ug/ml）0.25ml，置5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，作为贮备溶液。精密量取贮备溶液1ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度 ；3、测试图谱：[align=center]25ul进样体积图谱[/align][align=center][img=,690,349]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809141641253342_6715_932_3.jpg!w690x349.jpg[/img][/align][color=#333333][/color][align=center][color=#333333]药典规定分别进样体积是：5ul、10ul、15ul、20ul、25ul叠加效果图[/color][/align][align=center][img=,690,193]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809141641586206_8976_932_3.jpg!w690x193.jpg[/img][/align][b]03 结果[/b]黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2，黄曲霉毒素G1，黄曲霉毒素G2分离良好，线性可以达到测试要求（G2，R2=0.9984；G1，R2=0.9985；B2，R2=0.9993；B1，R2=0.9974）
弱弱的问下生物法测麻痹性或腹泻性贝类毒素需要贝类毒素标准品吗？
谷类、乳制品、水果等多种和百姓饮食息息相关的食物，在生长或生产的过程中极有可能存在真菌毒素污染，而现行的GB2761-2005《食品中真菌毒素限量》提出的相关食品真菌毒素限量的执行标准，则存在交叉、重复、矛盾或缺失等问题。卫生部为此组织成立食品真菌毒素限量标准整合完善工作组，于8月3日向社会公开发布《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》(征求意见稿)，主要修改了食品中黄曲霉毒素M1、黄曲霉毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、展青霉素等4种限量指标，增补了赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮等2种指标。 [b] 真菌毒素因何而生[/b] 何谓真菌毒素？《征求意见稿》对此下的定义——产毒真菌在生长繁殖过程中产生的次生有毒代谢产物。据了解，此次修改中涉及的黄曲霉毒素是一类真菌的有毒代谢产物，具有致癌性。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的代谢产物。经摄入含有黄曲霉毒素B1饲料的奶牛产出的牛奶中，便含有黄曲霉毒素M1。 另据了解，在大麦、玉米中含有较高浓度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，是最常见的一种污染粮食、饲料和食品的霉菌毒素之一，大多在低温、潮湿和收割季节，在谷物庄稼中慢慢生长；主要生长在水果上的展青霉素，主要污染水果及其制品；赭曲霉毒素A是由多种生长在粮食(小麦、玉米、大麦、燕麦、黑麦等)、花生、蔬菜(豆类)等农作物上的曲霉和青霉产生的；玉米赤霉烯酮主要是由生长在小麦和玉米等农作物上的真菌产生。 [b]为何原限量标准多数保留[/b] 在此次《征求意见稿》中，多数真菌毒素保留原先的限量标准，但在编制过程中，充分考虑了不同标准的安全性。例如，《征求意见稿》编制说明中指出，目前世界各国对黄曲霉毒素M1有两种不同意见，以欧盟一些国家为代表提出乳中黄曲霉毒素M1的限量为0.05μg/kg；另一种意见是以美国、日本等国提出0.5μg/kg的指标。编制说明介绍，“食品添加剂联合专家委员会第56届会议报告指出，黄曲霉毒素M1为0.05μg/kg和0.5μg/kg这两个指标在致癌性方面之间并无显著差异。本次修订保留黄曲霉毒素M1为0.5μg/kg的限量指标。” 再如，编制说明认为：“根据国际组织、发达国家和主要贸易国关于食品中展青霉素限量标准以及我国苹果和山楂制品中展青霉素的污染监测结果、暴露评估结果，我国现行限量与国际标准一致并安全有效。因此，苹果和山楂制品中展青霉素限量仍保持为50μg/kg。” [b]新标准更符合国情[/b] 编制说明介绍，《征求意见稿》中涉及的真菌毒素指标6项，涉及的清理工作涉及食品卫生标准27项、食用农产品质量安全标准39项、食品质量标准18项、有关的行业标准16项等。 “新的真菌毒素基础标准分析了我国现行有效的食用农产品质量安全标准、食品卫生标准、食品质量标准以及有关食品的行业标准中强制执行的标准中真菌毒素的限量指标，提出了相关标准的交叉、重复、矛盾或缺失等问题，提交详细的比较结果。”项目组专家认为。 编制说明指出，征求意见稿分析了欧盟、日本、美国及我国香港、台湾等地食品中的真菌毒素限量标准的制标情况及其规定，根据我国食品中真菌毒素的。监测结果，结合了我国居民膳食真菌毒素的暴露量及主要食物的贡献率，按大类(如蔬菜)、亚类(如叶菜)、品种(如菠菜)、加工方式(如罐头菠菜、干食用菌)为主线，尽量以大类和亚类为主整合限量，辅以品种和加工方式例外单列，提出了我国需要制定限量指标的真菌毒素项目和食品类别以及适合我国国情的食品真菌毒素国家安全标准建议值。
大家做毒素检测，添加的毒素标准品一般都用哪家的呢？
请问专家：哪里可以买到沙蚕毒素（沙参毒素草酸盐）标准品？谢谢。
细菌内毒素标准品溶液的制备，在美国药典中是“根据包装说明书上的标准和内毒素储备标准溶液的标签上关于制备和贮存的说明”进行储备液的制备，再由“充分混合内毒素储备标准溶液后，用细菌内毒素试验检查用水（BET检查用水）稀释，制成适当的系列稀释液，即得BET检查用内毒素标准溶液。”这具体是一个怎样的制备过程？而在中国药典中，标准品溶液的制备，按照说明书上步骤加内毒素检查用水后在漩涡混合器上进行15min的混合。但是，我公司所购买内毒素工作标准品说明书上提到的是进行5min的混合。这两个时间如何取舍。如果按中国药典上进行15min的混合，时间会不会过长，如此会不会对标准品有所影响？
中药材中黄曲霉毒素检测方案 黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于药材、谷物、坚果、花生、瓜子、棉籽以及动物饲料等相关的产品中。其毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药毒性，其中以B1毒性最大。人摄入含有该类毒素物品时，摄入量在身体内是要累积的，不管量大量小对身体都有较大伤害。 近年来，各级食品药品等监管部门不断加大生产流通监管力度，努力保持食药多环节总体质量。现在对乳制品、玉米等食品及食品原料都有相关检测标准，2015版药典也重点明确该项目的检测。 下面我们就一起分享一下高效液相色谱法柱后光化学衍生荧光检测器检测中药材中黄曲霉毒素方法等重要内容。实验原理 样品经甲醇-水溶解，搅拌、离心及免疫亲和柱层析净化提取，进入高效液相色谱系统，亲水性C18色谱柱分离，经光化学衍生器柱后衍生，紫外检测器检测，外标法计算，即得。仪器与试剂 仪器：高效液相色谱仪（荧光检测器+等度泵+亲水性C18色谱柱+光化学衍生器等），气控操作架（含气泵），固相萃取装置，黄曲霉毒素免疫亲和柱，高速搅拌仪（搅拌速度大于11000转／分钟），离心机（离心速度4000转／分钟），氮吹仪，超声波清洗器，溶剂过滤器，电子天平等。 试剂：黄曲霉毒素对照品（均为SIGMA标准品），甲醇（色谱纯），氯化钠（分析纯），超纯水等。样品制备 混合对照品溶液制备：精密量取黄曲霉毒素混合标准液（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2，标示浓度分别为1.0μg/ml、 0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml）0.5ml，置于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制备为标准品储备液。精密量取储备液1ml，置于25ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，备用。 供试品溶液制备：取适量被测某药材（或药品）充分粉碎，过二号筛（药典筛），精密称取过筛粉朱15g，加入氯化钠3g，置于具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速搅拌仪搅拌2分钟，离心机离心5分钟，精密量取上清液15ml，置50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，微膜（0.45μm）滤过，精密量取续滤液20.0ml，通过固相萃取装置萃取（免疫亲合柱），流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用5ml甲醇洗脱，收集洗脱液，氮吹仪吹至近干，用甲醇定容1ml，摇匀，微膜（0.45μm）滤过，待测。色谱
花生及其制品中真菌毒素污染情况调查真菌毒素（mycotoxin）是霉菌产生的对人体危害性很大具有生物毒性的次级代谢产物。黄曲霉毒素和镰刀菌毒素被FAO和世界卫生组织（WHO）列为自然发生的最危险的食品污染物之一[sup][1][/sup]。黄曲霉毒素是研究、监测最早也最广泛的一类毒素，由曲霉产生，较低剂量长期持续摄入或较大剂量的短期摄入，都可能诱发大多数动物的原发性肝癌，还可能造成人类的急性中毒。由于霉菌毒素是小分子有机化合物，不是复杂的蛋白质分子，所以在机体中无法产生抗体，也不能免疫。可引发各种不同的临床症状免疫系统失调，神经系统、消化系统紊乱、肿瘤[sup][2-6][/sup]。真菌毒素普遍存在于粮食中，花生在生长、收割、贮存、运输及加工中都会暴露或接触到产毒真菌，真菌及真菌毒素污染食品后，会使其食用价值降低，甚至完全不能食用，造成巨大的经济损失。真菌毒素污染问题已成为世界各国高度关注的食品安全热点问题，粮油真菌污染同样正逐渐成为我国食品安全的隐患[sup][7][/sup]，目前研究较多的是十几种对人类危害较大的真菌毒素[sup][6,8][/sup]，但针对花生及其制品的多组分真菌毒素的全方面检测研究，尚未见报道，相关研究多集中在DON、ZEN、AF，检测方法也是适用于一种 、一类或特定类型的毒素。因此为了解花生及其加工产品真菌毒素污染情况，对花生及其制品同时进行16种真菌毒素检测与分析，并对粮食中真菌毒素的重点研究方法进行了展望，以期望为真菌毒素研究提供参考。1 材料与方法1.1 主要仪器与试剂高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱仪（美国waters TQ-S）；电子天平（感量0.001g赛多利斯BT-223S）；高速粉碎机（大德 DFY-C）；多位试管涡旋振荡器（德国Heidolph Multi Reax）； 漩涡混匀器（SCILOGEX MX-S）； 乙腈（CH[sub]3[/sub]CN 美国默克公司 色谱纯）；Multitoxin 标准物质( QCM7C1) ，16 种真菌毒素标准品AFB[sub]1[/sub] ( L18204A) 、AFB[sub]2 [/sub]( L18204A) 、AFG[sub]1 [/sub]( L18204A) 、AFG[sub]2[/sub] ( L18204A) 、DON ( L17012M) 、 3-ADON ( L17012M ) 、15-ADON ( L17012M ) 、NIV ( L17012M) 、ZEN( L16165M) 、OTA( L18304B) 、FB[sub]1 [/sub]( L18025M) 、FB[sub]2[/sub] ( L18025M) 、FB[sub]3[/sub] ( L18415C) 、ST ( 18325S ) 、T-2 毒 素 ( L19302M ) 和 HT-2 毒 素( L19302M) ，以及相应的 16 种[sup]13[/sup]C 同位素内标标准溶 液 均 购 自 美 国 ROMER。1.2 方法1.2.1 检测方法：采用同位素稀释[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱测定方法，严格按照操作规程进行检测，并采取平行样品，加标回收，标准物质对照等措施做好内部质量控制，对超标样品及时进行复测。AFB[sub]1[/sub]、AFB[sub]2[/sub]、AFG[sub]1[/sub] 的检测限均为 0. 1 μg /kg，AFG[sub]2[/sub] 为 0. 5 μg /kg，OTA 和 T-2 毒 素 均 为 1. 0 μg /kg， DON、3-ADON、15-ADON、ZEN、FB[sub]1[/sub]、FB[sub]2[/sub]、ST 和 HT-2毒素均为5. 0μg /kg，FB[sub]3[/sub]为10. 0μg /kg，NIV为35. 0μg /kg。1.2.2 统计分析： 所测数据全部输入Excel数据库，数据比较采用PEMS3.1统计软件进行。2 结果与分析2.1 花生及其制品（花生酱、花生油）监测结果采用优化后方法对[color=black]花生及其制品包括熟花生、花生油、生花生和花生[/color][color=black]酱[/color][color=black]进行检测，检出真菌毒素3种，分别为AFB[/color][sub][color=black]1[/color][/sub][color=black]、AFB[/color][sub][color=black]2[/color][/sub][color=black]和AFG[/color][sub][color=black]1[/color][/sub][color=black]，5 .0%(3/60)，其他毒素均未检出。[/color]黄曲霉毒素类毒素是污染花生及其制品的主要真菌毒素，2018-2019年[color=black]AFB[/color][sub][color=black]1[/color][/sub][color=black]、AFB[/color][sub][color=black]2[/color][/sub]检出率范围为6.7%-60.0%。花生及其制品中AFB[sub]1[/sub]限量标准为20μg/kg，AFB[sub]2、[/sub]国标尚无限量标准[color=black]，由此得出花生及其制品中[/color]AFB[sub]1[/sub][color=black]总超标率为6.7%（4/60）[/color]，超标的花生油均为散装花生油，鉴于花生及其制品是黄曲霉毒素的主要来源食品之一，长期、高摄入者有风险，仍需要对花生及其制品的黄曲霉毒素污染情况及食用人群的健康风险进行监测和评估。2018年-2019年花生及其制品各年度、各食品类别和16种真菌毒素检测结果见表1、表2和图1。 表1 2018年-2019年花生及其制品中黄曲霉毒素检测结果(μg/kg)[table][tr][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]年份(年)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]检测[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]项目[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]样品[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]数(份)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]检出[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]数(份)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]检出[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]率(%)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]超标[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]率(%)[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]最大值[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]最小值[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]平均值[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]P[sub]50[/sub][/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2018[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2019[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2018[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2019[/size][/font][/align][/td][td=1,4][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]AFB[sub]1[/sub][/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]AFB[sub]2[/sub][/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]30[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]18[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]60.0[/size][/font][/align][/td][td=1,4][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]15.0[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]3.3[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]/[/size][/font][/align][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]/[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]57.5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]8.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.71[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]30[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]16.7[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]46.2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2.8[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]30[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]12[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]40.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]6.42[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]1.3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]30[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]6.7[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]18.4[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]1.0[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font=Microsoft YaHei, Arial, Helvetica][size=16px]0.05[/size][/font][/align][/td][/tr][/table][table][tr][td=8,1][align=center]表2 花生及其制品中各食品类别黄曲霉毒素检测结果（μg/kg）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]污染物[/align][/td][td][align=center]食品类别[/align][/td][td][align=center]样品数[/align][/td][td][align=center]平均值[/align][/td][td][align=center]P[sub]50[/sub][/align][/td][td][align=center]最大值[/align][/td][td][align=center]检出率(%)[/align][/td][td][align=center]超标率(%)[/align][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center]AFB[sub]1[/sub][/align][/td][td][align=center]花生油[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]7.89[/align][/td][td][align=center]0.11[/align][/td][td][align=center]57.5[/align][/td][td][align=center]56.2(9/16)[/align][/td][td][align=center]12.5(2/16)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生花生[/align][/td][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]3.62[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]46.2[/align][/td][td][align=center]35.7(5/14)[/align][/td][td][align=center]7.14(1/14)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]熟花生[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]0.53[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]3.30[/align][/td][td][align=center]33.3(4/12)[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]花生酱[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]3.38[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]20.1[/align][/td][td][align=center]30.0(3/10)[/align][/td][td][align=center]10.0(1/10)[/align][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center]AFB[sub]2[/sub][/align][/td][td][align=center]花生油[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]0.96[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]6.42[/align][/td][td][align=center]31.2(5/16)[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生花生[/align][/td][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]1.46[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]18.4[/align][/td][td][align=center]21.4(3/14)[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]熟花生[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]花生酱[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]1.01[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]5.49[/align][/td][td][align=center]30.0(3/10)[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center]AFG[sub]1[/sub][/align][/td][td][align=center]花生油[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]0.08[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.55[/align][/td][td][align=center]6.25(1/16)[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生花生[/align][/td][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]熟花生[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]花生酱[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]0.55[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]3.30[/align][/td][td][align=center]20.0(2/10)[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center]AFTG[sub]2[/sub][/align][/td][td][align=center]花生油[/align][/td][td][align=center]16[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]生花生[/align][/td][td][align=center]14[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]熟花生[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]花生酱[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]—[/align][/td][/tr][/table][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310241443401175_5759_4033901_3.png[/img][/align]3 讨论感官正常花生米粒大而饱满，而往往那些干瘪，没有正常长成熟，在生长期出现营养不良的籽粒易被真菌毒素污染[sup][10][/sup]。但有的感官正常，检出含量也很高，需要通过检测才可以判断其真菌毒素含量。由检测结果看出：小作坊或散装油超标多些，可能和日常检测条件有关，大厂家具备好的原材料和成品检验设施条件，能时刻监测产品质量。我们肉眼会发现霉变花生米，但制成花生油根本看不出，可能仅仅是一粒霉变花生米而导致一桶油的质量出现问题。从本次调查看出：2018和2019年度、各花生制品类别的真菌毒素污染水平不同，粮食受真菌毒素感染具有很多影响因素，如天气数据，农业措施等等。有多种真菌毒素的预测模型被研发并被应用：如加拿大安大略湖地区的小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇的预测DONcast、意大利伏马毒素的预测软件、英国 Home-Grown Cereal Authority ( HGCA)的镰刀菌真菌毒素风险评估模型[sup][11][/sup]。预测的实施需要气象部门、农业部门、环境部门、粮食部门及卫生部门等多部门联合，如农业部门的栽培育种，科学轮作、适时收获，收割时粮食清洁与干燥，颗粒完整等都会降低感染真菌毒素的概率[sup][10-11][/sup]。通过多部门精诚协作，建立一个综合预警模型，实施预防为主的食品安全策略。另外，污染真菌的判定依据是真菌毒素限量，经过物理加工，其真菌毒素会有一定的变化，国内缺乏初加工或加工产品的真菌限量标准，将造成原粮的浪费，因此我国目前真菌毒素限量标准分类和毒素种类，均有待补充和细化[sup][11-13][/sup]。总之，在美味营养的背后，如何从花生等粮食源头的种植，一直到收获、贮藏、加工产品的全产业链，保障花生等粮油原料的食品安全，是我们今后工作的重中之重，依托以上部门大数据，能做到精准公共卫生更是我们的理想目标。参考文献:王 峰,仓以鹏,蔡 晶,等. 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-三重四级杆质谱法测定面粉中17种真菌毒素[J].食品科 技,2014,39(11):332.许娇娇,黄百芬,周健,等. 直接稀释-超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱法快速测定谷物及其制品中16种真菌毒素[J]. 中国食品卫生杂志,2017 ,29（6）:709.李 娜,孙 辉,唐朝晖,等.小麦及其制品加工过程主要真菌毒素含量的变化[J].粮油食品科技,2014,22 (2):30 .孙 利,霍江莲,崔维刚,等. 粮食产品中真菌毒素的色谱及质谱检测技术研究进展[J].食品科学,2013,34(19):367.谭 杰,杜苑琪,肖小华,等. 食品中霉菌毒素样品前处理及分析方法研究进展[J].分析测试学报,2017,36(6):829.马惠蕊,王玉坤,刘淑艳,等. 食源性真菌毒素检测技术研究进展[J]. 福建分析测试,2011,20(1):40.张家宁, 丁 轲 ,郭思梦,等.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]法检测粮谷制品中 4 种单端孢霉烯类真菌毒素[J]. 中国粮油学报, 2016 ,31( 12 ):153.刘 丹,韩小敏,李凤琴,等. 花生油和玉米油中多组分真菌毒素高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-串联质谱检测方法的建立[J]. 食品科学, 2017, 38, (10): 297.中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会,国家食品药品监督管理总局. 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量:GB 2761-2017 [s].北京:中国标准出版社,2017.耿建强,赵丽,张旭,等. 我国婴幼儿营养米粉中真菌毒素污染情况调查[J].中国食品卫生杂志,2017,29 (1):67-69.李磊,姬建生,赵军锋. 河南省玉米真菌毒素污染调查[J].中国卫生检验杂志 ,2017,27 (8):1173.畅慧霞,王亚平.粮食及其制品真菌毒素监测与处理技术发展现状与趋势[J].河南工业大学学报(社会科学版),2014,10,(2):15-19.刘 青,邹志飞,余炀炀,等.食品中真菌毒素法规限量标准概述[J]. 中国酿造, 2017 , 第36 ( 1 ):12-17.[/s]
因化学加工、人为添加及环境污染所导入食品中的有毒化合物容易被认识和预防，而许多以食品的天然成分形式存在的天然毒素，由于毒性大，且与食品混为一体，不容易被认识和确定，从而对健康威胁更大。笔者将它们分为内因毒素和外因毒素，那些由食品原料自身产生并带进最终食品中的为天然内因毒素；由食品原料以外其它天然方式产生的且污染食品的或被食品蓄积的为天然外因毒素。天然内因毒素食用的少数动、植物在生长过程中，某个器官或部位会产生一些对人体有害的物质，它们可随着生长期而被破坏或逐渐蓄积。这些有害物质概括起来有以下几类：有毒蛋白类目前所发现的有毒蛋白质主要来自植物性食品，包括血凝素和酶抑制剂。血凝素是某些豆科、大戟科等蔬菜中的有毒蛋白质。这类毒素现在已发现10多种，包括蓖麻毒素、巴豆毒素、相思子毒素、大豆凝集素、菜豆毒素等。凝集素含量最高的农作物是红肾豆，生的红肾豆含有20000—70000凝集素单位，煮熟后仍有200—400单位。虽然菜豆等白肾豆中凝集素含量相对较低一般是红肾豆的1／3，但不良的饮食方式也能导致中毒。一般对食品进行有效的热处理能破坏凝集素，但加热到80℃时，显示毒性更大是生食物的5倍，许多爆发性凝集素食物中毒都是食物加工不当所引起的。酶抑制剂主要是胰蛋白酶抑制剂和淀粉酶抑制剂，能引起水化不良和过敏反应，有人称其为过敏原。人们食用的黄豆中已发现至少有16种蛋白质能引起过敏反应，其中主要的过敏原是胰蛋白酶抑制剂。尤其在一种转基因大豆中，这些过敏原含量高达26.7％；作为蛋白质，这类毒素受热后变性，可破坏一些毒素，所以食用豆制品前的彻底热处理是非常重要的。有毒氨基酸主要指有毒的非蛋白氨基酸。在发现的400多种非蛋：白氨基酸中，有20多种具有积蓄中毒作用，且大都存在于毒蕈和豆科植物中；它们作为一种“伪神经递质”取代正常的氨基酸，而产生神经毒性。另外，还有一些含硫、氰的非蛋白氨基酸可在体内分解为有毒的氰化物、硫化物而间接发生毒性作用；重要的毒性非蛋白氨基酸是刀豆氨酸、香碗豆氨酸等。值得注意的色氨酸是蛋白氨基酸，现已发现它的某些衍生物对中枢神经有毒害作用。生物碱类生物碱类是存在于毛茛科、芸香科、豆科等许多植物根、果中的有毒生物碱，成分极其复杂。依其化学结构可细分为非杂环氮类、吡咯烷类、砒啶哌啶类、异喹啉类，吲哚类和萜类等。根据生物源特点可分为原生物碱、真生物碱和伪生物碱；典型的生物碱是吡咯烷生物碱。它们能引起摄食者轻微的肝损伤，但中毒的第一反应是恶心、腹痛、腹泻甚至腹水，连续食用生物碱食品2周甚至2年才有可能出现死亡，一般中毒者都可康复。由于生物碱大都具有苦涩性，容易使动物产生拒食，所以引起人体生物碱中毒的主要食物源是：1农作物被含生物碱的杂草污染，进入面粉及相关食品中；2食用含生物碱植物的动物所产的奶和蜂蜜等食品；3特殊食疗食品、个别调味料和特殊提取物饲料等。
细菌内毒素标准品溶液的制备，在美国药典中是“根据包装说明书上的标准和内毒素储备标准溶液的标签上关于制备和贮存的说明”进行储备液的制备，再由“充分混合内毒素储备标准溶液后，用细菌内毒素试验检查用水（BET检查用水）稀释，制成适当的系列稀释液，即得BET检查用内毒素标准溶液。”这具体是一个怎样的制备过程？而在中国药典中，标准品溶液的制备，按照说明书上步骤加内毒素检查用水后在漩涡混合器上进行15min的混合。但是，我公司所购买内毒素工作标准品说明书上提到的是进行5min的混合。这两个时间如何取舍。如果按中国药典上进行15min的混合，时间会不会过长，如此会不会对标准品有所影响？
[align=center][b]食品中真菌毒素的测定方法小结[/b][/align][align=center][b] [/b][/align] 真菌霉素是指真菌在生长繁殖过程中产生的次生有毒代谢产物，食用了含有真菌霉素的食物会导致中毒。食用油中的真菌霉素主要来源于油料作物生长过程中感染病原真菌，还有就是油脂在加工、储存、运输过程中感染真菌霉素。食用油中常见的真菌霉素为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、呕吐毒素以及玉米赤霉烯酮等。常见的检测方法包括薄层色谱法、液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫法等。液相色谱法灵敏度较高、检测限低，是目前国内测定真菌毒素使用最多的方法。基于HPLC的方法大多采用免疫亲和柱的前处理方法，检测成本较高。也有采用SPE的预处理方法，重现性不高。[b]瓶颈和方向[/b]目前国际、国内的主流趋势是多毒素同时测定的技术，采用的设备为HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS，GB5009.22-2016 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定（第一法 同位素稀释液相色谱-串联质谱法），GB5009.96-2016 食品中赭曲霉毒素A的测定（第三法 免疫亲和层析净化液相色谱-串联质谱法），GB 5009.111-2016 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定（第一法 同位素稀释液相德普-串联质谱法），GB 5009.209-2016 食品中玉米赤霉烯酮的测定（第三法 液相色谱-质谱法），但是需要使用碳同位素内标，价格比较昂贵（Sigma 25mg/L, 1mL约1.2万人民币）。开发此种方法前期的投入比较大，但可以节约时间，预处理的时间至少可以节约50%，减少前处理过程中昂贵的免疫亲和柱的使用。[align=left]建立多毒素同时测定的方法（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS）。同时扩展检测项目（包含T-2, HT-2, Citrinin, Fumonisin, Ergot alkaloids 、sterigmatocystin、beauvericin、AOH、AME和TeA、enniatins等），另外增加Citrinin, Ergot alkaloids 、sterigmatocystin、beauvericin、AOH、AME和TeA、enniatins主要存在谷物及谷物制品中毒素的检测能力，降低毒素潜在的致畸、致癌风险。[/align][align=left][b][/b][/align][align=left][b]毒素中快检技术的应用[/b][/align] 国内市场真菌毒素快检产品主要是基于抗原、抗体（不排除使用受体和配体）特异性反应的免疫快检产品。主要包括胶体金检测卡、酶联免疫检测试剂盒和时间分辨荧光免疫检测卡等，相关的快检仪器设备有酶标仪、胶体金读卡仪和时间分辨荧光检测仪荧光共振能量仪、噬菌体PCR仪、新型电化学传感器等。此外，还包括一些前处理方法和设备，如净化柱、在线免疫亲和柱等。
食品中黄曲霉等毒素多少是下限啊，危害有多大啊？食品中还存在那些霉菌毒素啊？
食品中的微生物源毒素是指由微生物代谢产生的毒素,主要包括哪些呢？
伏马毒素的危害伏马毒素（Fumonisin，FB）是由镰刀菌属在一定的温度和湿度下产生的水溶性代谢产物，对食品污染的情况在世界范围内普遍存在，主要污染玉米及玉米制品。动物试验和流行病学资料已表明，伏马菌素主要损害肝肾功能，能引起马脑白质软化症和猪肺水肿等，并与我国和南非部分地区高发的食道癌有关，现已引起世界范围的广泛注意。伏马毒素的检测国内外已建立了多种方法。伏马毒素的分析方法通常包括提取、纯化、分离和检测几个步骤。目前，大多数方法均采用免疫亲和柱（Pribolab）纯化样品，应用HPLC或GC结合不同的检测器进行。伏马毒素伏马毒素（B1, B2,和B3)是由镰孢菌(霉)属念珠菌产生的真菌毒素。在世界范围内都发现了伏马毒素污染玉米的现象。研究表明伏马毒素可以诱发老鼠患肝癌，猪的肺水肿和马的脑脊髓白质病。在一些地区中玉米中伏马毒素含量很高，在这些地区（比如中国和非洲）人的食道癌具有高发性。适用PriboFast伏马毒素试剂盒原理是竞争酶联免疫反应，用于检测玉米中的伏马毒素。原理这个 Pribolab伏马素素检测试剂盒的原理是固相直接竞争酶联免疫反应。聚苯乙烯微孔板中包被伏马毒素的特异性抗体，这种抗体和伏马毒素的各个亚型都有很好的交叉反应。利用90%的甲醇从样品中提取伏马毒素，把提取的样品和HRP（辣根过氧化物酶）标记的伏马毒素混匀并加入对应的孔检测。酶标记毒素与标准品或样品中的伏马毒素竞争与包被在微孔底部的抗体结合。孵育一段时间后，倒出孔里的液体，清洗除去没有反应的物质后加入显色底物（TMB），在酶的作用下孔里将会出现蓝色。显色颜色的深浅与结合物的量成正比例的关系，与标准品或样品中伏马毒素的量成反比例关系。所以，标准品或样品中的伏马毒素浓度越高，显色的蓝色将会越浅。加入酸，终止反应，底物颜色由蓝色变为棕黄色。微孔板放进酶标仪里，在OD450nm读取吸光度值。样品的吸光度值与试剂盒中标准OD值相比较，相对应得出结果。提取步骤中需要的材料研磨器；烧杯：125ml；天平：量程为20g量筒：100ml甲醇：每个样品36ml 蒸馏水：每个样品4ml滤纸 ：用针孔过滤器代替；漏斗测定步骤：100μL或200μL 单道或多道移液器；计时器； 洗瓶；吸水纸；450nm 滤光片的酶标仪警告和注意事项1、使用前将所有的试剂拿到室温（19℃-27℃）。2、试剂贮存在2℃到8℃，不要使用过期的产品。不要冰冻试剂盒。3、没有用完的试剂不要回收到原试剂瓶中。操作过程中按照要求精确量取试剂体积。4、整个操作过程要严格按照要求的时间和温度。5、不要用口移取试剂或样品。6、终止液里含有酸，不要与皮肤和眼睛接触。如果有接触，一定要用清水清洗。7、所有的材料、试剂和仪器可能被样品或标准品中的伏马毒素污染，在操作过程中一定要戴手套。8、使用完毕，处理好所有的材料、试剂和仪器。样品提取步骤注意：样品必须按照有关规定收集1、配制90%的甲醇溶液（每个样品需要：4ml蒸馏水+36ml甲醇）2、研磨代表性样品（使50%的样品可以通过一个20目的滤网）。3、称量20g研磨过滤后的样品加入40ml 90%的甲醇溶液，样品稀释比为1:2(w/v)。
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