诺丽鞘氨醇单胞菌

几年前，我刚刚进入分子生物学领域，接手的实验室鉴定植物鞘氨醇的组分及含量。那个时候，实验室没有相关设备，我的实验是举步维艰。现在闲来无聊，用指尖文字回忆下那段日子。提取植物鞘氨醇的第一步自然是取样，这没什么问题，取完样之后的研磨也没有任何问题。而这之后，我采用的方法伴随一个110的加热16小时，这个16小时的加热着实成为我实验中的一个问题。首先，我不知道应该用什么样的仪器实现这个110度，在我们实验室，只有干燥箱可以达到并控制住这个温度。而我的样品只有3-4 mL，并且还含有2 ml易挥发的溶剂，用普通的离心管盛放我的样品放入干燥箱后，用不了16小时样品就蒸发的没有了，这显然不行。 我听实验室的前辈说，以前做这个实验的师姐是利用沸水浴进行的实验。沸水浴？显然达不到110度呀！他们说其实110度也没那么严格，用沸水浴也可以。好吧，那我也就用沸水浴吧。我从实验室找了一个废弃的但还可以加入的小灭菌锅，加满了水，把我的样品放进去，盖子使劲的拧紧呀，拧紧（盖子经常因为离心管内部的高温而破裂，所以一次实验下来还要换好几次盖子，那实验那叫一个粗糙啊！嘿嘿），然后就像炖肉一样的煮啊煮啊。我记得那时候放小锅的实验室里那叫一个热啊！hoho！而且16个小时下来，要添很多次水呢，我从来都不敢开着锅过夜的，吃饭什么的都得求人帮我看着锅。那段日子呀……后来，大家嫌热，也嫌锅的热气太大，就把我的小锅请出了实验室，放到了走廊里。我就经常在走廊里“开伙”煮我的样品。但是即使如此，这样的日子也没有持续多久，在一个月黑风高的夜晚，我的小破锅被盗了，第二天要用的时候，我发现它不见了，着实难过了很久，因为我找不到另外一个可以替代它的小破锅了。我的实验下一步该怎么办？我只好又一次陷入了沉思和搜索……

加热蛋白溶菌酶能杀灭诺如病毒日本东京海洋大学的一个研究小组日前宣布，在实验中发现，加热处理鸡蛋蛋白含有的溶菌酶，能灭活诺如病毒。这是由于溶菌酶能破坏包裹诺如病毒基因的外壳。诺如病毒会引发急性肠胃炎和食物中毒。这种病毒具有强大的感染力，只要有10至100个病毒体进入人体，就会导致感染，目前还没有有效的抗病毒剂。研究小组利用实验鼠的诺如病毒替代人类诺如病毒进行了实验。他们将蛋白中含有的溶菌酶在100摄氏度下加热40分钟，使其变性。接下来，将含有1％加热处理过的溶菌酶的溶液与实验鼠诺如病毒混合在一起，并观察了1分钟之后的变化。溶菌酶是蛋白等含有的一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。研究人员发现，诺如病毒基因量大幅减少，以致无法检出，并观察到病毒体出现膨胀。他们认为这是由于包裹病毒基因的外壳被破坏导致的。研究人员指出，实验鼠诺如病毒和人类诺如病毒从遗传学上来看非常类似，所以这种加热变性处理的蛋白溶菌酶对人类诺如病毒应该也有效果。他们希望将其制成消毒喷雾剂，在下一年度达到实用化。

请问有人测过植物鞘氨醇的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]吗？

[size=4] 喹诺酮为一类具有4一喹诺酮环结构的药物。第一代药物萘啶酸(1962)，第二代药物吡哌酸和氟甲喹(1974)，抗菌作用较弱，国内较少使用。第j代为氟喹诺酮类(具有6一氟一 7一哌嗪一4一诺酮环结构)。喹诺酮类药物结构相似，取代位点较多，抗菌谱较广，活性高，从其结构一活性关系上探索开发新品种己成为喹诺酮类药物的研究热点，因而发展迅速， [/size][size=4] 尤以人药领域的喹诺酮类药物发展为最陕。最近几年又推出了数十种之多的新品种，其中有些还未命名，只给出了试验编号。 [/size][size=4] 喹诺酮类药物广泛地用于畜禽的细菌、霉形体病防治，已投人使用或即将进人兽医领域的药物有10多种，主要有两类，一类从人医用移植转化而来，如诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星等。另一类是动物专用品种，己批准上市的兽医专用喹诺酮类药物有恩诺沙星(德国拜耳公司)、沙拉沙星(美国雅培公司)、单诺沙星(美国辉瑞公司)、二氟沙星(美国雅培公司)、倍诺沙星(日本武田制药)，奥比沙星(日本大日本制药)和麻保沙星(瑞士罗氏公司)，其中，后三种在我国还未见上市。 [/size][size=4] 诺酮类药物与细菌DNA复制所需的DNA一~rase的亚基A(Subunit)结合而抑制DNA复制化，此外由于细菌细胞具有强烈的穿透力，故具有强大的杀菌作用。这些药物的抗菌作用与疗效可与第j代头孢菌素媲美，已成为兽用抗菌药物中最活跃的研究领域之一，随之而来的这类药物的分析分析显得十分重要，相关文章也比较多，但大多数文章，例如彭六保等从四代喹诺酮类药物分类综述了该类药物的分析进展，其针对性不强；还有一些文章，如王玉忠、张加玲等从各种分析方法进行综述，与上面存在同样的问题。所以本文仅对兽医常用的九种喹诺酮类药物分析进展综述，以期对兽药临床及生产具有一定的帮助。现将常用的分析方法方法介绍如下。 [/size]

据日本新华侨报网12月17日报道，12月13日到12月16日期间，日本各地接连发生多起因诺如病毒而引发的集体食品中毒事件，山梨县集体中毒人数达300多人。虽然日本国立传染病研究所早在12月初便发布消息称，日本将爆发大范围的诺如病毒传染，公开呼吁民众做好防范。据预测，因病毒感染而出现食物中毒症状的人还会陆续增多。 据日本NHK电视台消息，日前，日本山梨县甲斐市发生一起由诺如病毒引发的300多人集体食物中毒事件。12月13日，日本山梨县保健所接到求助电话，称"有几个人吃了便当后出现腹泻、呕吐症状".保健所调查后发现，在12月13日这一天，出现腹泻、呕吐症状的人都食用过甲斐市玉川便当店制作的便当。其中，有32人体内检查出诺如病毒。 据山梨县政府透露，截止12月15日，山梨县内共发现319人因食用了甲斐市玉川便当店的便当而出现食物中毒的症状。该便当店平均每天送出便当3800个。因此山梨县政府预测，今后因病毒感染而出现食物中毒症状的人还会陆续增多。 据悉，诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻，具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点，是引起非细菌性腹泻暴发的主要病因。诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。

成功解决了加热的问题，我是信心倍增，后面就是萃取和浓缩，重悬了，这就简单了，很容易的，样品制备好了。终于可以检测了。可是对于我却也并不是像我想的那么顺利，因为鞘氨醇是男挥发的长链脂肪醇，需要用高效液相色谱（HPLC）检测，我们实验室没有这样的仪器。以前实验室做这个的前辈并不是用的这个方法，用其他的方法也没有获得成功，所以我那时是摸着石头过河，自己一个人一路跌跌撞撞啊。还好，所里有一台HPLC，我和管仪器的老师说好去试一下，那个老师很热情，帮了我这个忙，用了一天的时间才把四个样品检测完，不过结果还不错，这让我信心更足了。开始重复我的实验，谁知道，重复的实验却不理想。我又开始惆怅了，因为管HPLC的老师很忙，她的仪器也很忙，她还替我检测不收钱，再加上我怕给她的仪器弄坏了，让我实在不好意思再去打扰她。我想找到一个收费检测的地方，或者我想我学化学的同学那里如果可以检测也好。我给他打电话问他，他说他们那里倒是有仪器，也不忙，可是却没有荧光检测器，只有紫外检测器。没有办法，我们找到另一个可以承接对外业务的实验室，他们是按小时收费的，这没关系，只要检测成功就好了，但是事与愿违，没成功啊。继续找地方测，终于，功夫不负有心人啊，我找到了一个可以检测的地方，他们利用我提供的检测条件顺利的成功检测了我的样品，并且重复的实验结果也很稳定，他们是一个权威的检测机构，实验结果可靠，我后面的检测就放心的交给了他们。实验成功了，开心……

请问巧克力糖中胆固醇的限量是多少？多少就算超标？

单核细胞增生李斯特氏菌及检验单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人畜李氏菌的疾病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。一、生物学特性1、形态与染色该菌为革兰氏阳性短杆菌，大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯，两端钝圆，常呈V字型排列，偶有球状、双球状，兼性厌氧、无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中可形成荚膜，在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性，该菌有4根周毛和1根端毛，但周毛易脱落。2、培养特性该菌营养要求不高，在20--25℃培养有动力，穿刺培养2--5天可见倒立伞状生长，肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。该菌的生长范围为2--42℃（也有报道在0℃能缓慢生长），最适培养温度为35--37℃，在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好，在pH3.8--4.4能缓慢生长，在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。在固体培养基上，菌落初始很小，透明，边缘整齐，呈露滴状，但随着菌落的增大，变得不透明。在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)琼脂上，用45°角入射光照射菌落，通过解剖镜垂直观察，菌落呈兰色、灰色或兰灰色。3、生化反应该菌触酶阳性，氧化酶阴性，能发酵多种糖类，产酸不产气，如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖，不发酵木糖、甘露醇、肌醇、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖，不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解，吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性，VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。4、血清型根据菌体（O）抗原和鞭毛(H)抗原，将单增李氏菌分成13个血清型，分别是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”13 个血清型。致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后两型尤多。5、抵抗力该菌对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活，对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。二、流行病学单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。据报道，健康人粪便中单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70%的人可短期带菌，4-8%的水产品、5-10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅饼、冻猪舌等而感染，约占85-90%的病例是由被污染的食品引起的。该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染，孕妇感染后通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于子宫颈的该菌也引起感染，性接触也是本病传播的可能途径，且有上升趋势。三、致病性单增李氏菌进入人体后是否发病，与菌的毒力和宿主的年龄、免疫状态有关，因为该菌是一种细胞内寄生菌，宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能。因此，易感者为新生儿、孕妇及40岁以上的成人，此外，酗酒者、免疫系统损伤或缺陷者、接受免疫抑制剂和皮质激素治疗的患者及器官移植者也易被该菌感染。该病的临床表现，健康成人个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡。单增李氏菌的抗原结构与毒力无关，它的致病性与毒力机理如下：1、寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进入肠细胞与巨噬细胞；2、抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性过氧化物歧化酶，使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物（为杀菌的毒性游离基团）分解；3、溶血素，即李氏杆菌素O，可以从培养物上清液中获得，为活化的细胞溶素，有α和β两种，为毒力因子。四、检验1、增菌培养取回的样品应在4℃下处理、存放和运送，如果是冷冻样品，则在检验前要保持冷冻状态。取25mL液体或25g半固体或固体样品放入含有225mL无选择性试剂增菌肉汤（EB）的均质杯中进行均质，然后转入三角瓶中，30℃培养4h，加入选择性试剂吖啶黄素、萘啶酮酸，继续培养20h和44h.。2、分离共培养24h和48h后，取EB培养物分别在OXA和LPM或加七叶苷/Fe3+LPM琼脂平板上划线。PALCAM琼脂可替代LPM琼脂。将OXA和PALCAM平板置于35℃培养24-48h，LPM平板在30℃培养24-48h。然后，把LPM平板放于解剖镜载物台上，以45°角入射光从平板下面照射平板，通过目镜垂直向下观察寻找可疑菌落。李斯特氏菌在LPM平板上呈有光泽的兰色或灰色。用已知阳性菌和阴性菌划线的平板作对照。加入七叶苷和Fe3+的LPM平板不用斜射光系统，选择可疑菌落的方法与在OXA上选择可疑菌落的方法相同。在OXA平板上李斯特氏菌菌落周围有一个黑色环，其它菌也可形成黑色环，但形成时间要在两天以上。李斯特氏菌在PALCAM和OXA平板上的菌落特征相似。在PALCAM和OXA或LPM平板上挑取5个或更多的典型菌落，分别划线于TSAYE平板上以得到更纯、更典型的单个菌落。食品检验中在TSAYE平板上纯化是必须的，因为在PALCAM和OXA或LPM平板上分离菌落时可能沾有不可见的受抑微生物。挑取5个典型菌落的原因是一个样品中可能分离到一种以上的李斯特氏菌。30℃TSAYE平板培养24-48h，如果不用于动力观察，也可在35℃培养。3、鉴定步骤（1）观察TSAYE平板通过斜射光观察，寻找呈兰灰至兰色菌落。在TSAYE上用已知菌作对照。（2）、从30℃或更低温度下培养的TSAYE平板上挑取典型菌落做成湿玻片在油镜下观察。湿玻片用0.85%生理盐水菌悬液制成。如果菌量太少，菌体黏附于载玻片上而呈现非运动性。李斯特氏菌是细短杆菌，可见轻微的旋转及翻滚。与已知的李斯特氏菌的对照相比，球形、大的杆状且快速泳动的都不是李斯特氏菌。（3）挑取典型菌落进行过氧化氢酶实验，李斯特氏菌呈过氧化氢酶阳性反应。（4）取16-24h的培养物进行革兰氏染色，李斯特氏菌呈革兰氏阳性杆菌。但是陈旧培养物革兰氏染色会发生变化，而且菌体可成球形。在染色过重的玻片上菌体有呈栅状排列的趋势，易误认为白喉菌而错判。（5）挑取典型菌落接种于TSBYE肉汤管中，35℃培养24h用做糖类发酵和其它生化项目实验。TSBYE肉汤管在4℃下可存放几天，也可反复接种。（6）在TSAYE平板上挑取典型菌落刺种到5%的绵羊血或马血琼脂平板上，刺种时避免触到平板底部和使琼脂破裂，同时设阳性对照（单核细胞增生李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌）和阴性对照（英诺克李斯特氏菌），35℃培养48h。单核细胞增生李斯特氏菌呈窄小的β-溶血环。（7）在明亮的光照下，观察经穿刺的血琼脂平板，单核细胞增生李斯特氏菌和西尔李斯特氏菌围绕穿刺点产生较清晰的β-溶血环，英诺克李斯特氏菌不产生溶血现象，而绵羊李斯特氏菌产生界限明显的较大溶血环，在此不要试图进行种间的区分，但要记录下溶血反应的特征，CAMP试验可区分它们间的溶血反应。（8）硝酸盐还原试验（选做）。用TSBYE肉汤培养物接种于硝酸盐肉汤中，35℃培养5天后，加入0.2mL试剂A，再加入0.2mL试剂B，混合，出现紫红色为阳性反应，表明硝酸盐已被还原，如无颜色出现，在试管内再加入少量锌粉，放置1h，如出现紫红色，表明硝酸盐仍存在，未被细菌还原。只有默氏李斯特氏菌还原硝酸盐，因此，从格氏李斯特氏菌中区分出默氏李斯特氏菌就必须进行这唯一的试验。本试验还有一等效试验，即加入0.2mL试剂A后，再加入0.2mL试剂C，出现橙色表明硝酸盐已被还原。如未出现颜色反应，也加入少量锌粉，若出现橙色表明硝酸盐未被还原。（9）将TSBYE培养物穿刺到SIM和MTM试管中，室温培养7天，每日观察，李斯特氏菌呈典型伞状生长。在MTM中伞状生长更典型。同时，30℃的TSBYE培养物在油镜下可见细菌作翻转运动。（10 ）将TSAYE肉汤培养物分别接种于0.5%（W/V）葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、甘露醇、鼠李糖、木糖发酵管内（可选用倒立发酵管），35℃培养7天，呈阳性反应的李斯特氏菌产酸不产气，李斯特氏菌发酵鼠李糖和木糖的情况见下表。所有李斯特氏菌对葡萄糖、七叶苷、麦芽糖均能发酵，除格氏李斯特氏菌均不能发酵甘露醇。如果在OXA、PALCAM或加七叶苷/Fe3+的LPM分离平板上菌落色素很明显，则七叶苷试验可免做。

向水饱和正丁醇提取液中加两倍量的氨试液向水饱和正丁醇提取液中加两倍量氨试液的作用是什么？分层后哪层是正丁醇溶液层？氨试液的量必须是两倍量么，加一倍量的氨试液会有什么不良后果？量的多少有什么影响?谢谢……

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包**头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～**5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

细胞培养箱中的水盘里出现霉菌，虽然没有污染到细胞，而且也在水盘里加入新洁尔灭，但还是不放心，并且培养箱中现有很多细胞，请问有没有一种方法可以在不移除细胞的情况下能够消灭培养箱中的霉菌?已经长出霉菌，建议把所有细胞移出到其他培养箱。将这个培养箱全面消毒，喷酒精，紫外灭菌至少1个小时。因为我们组细胞染过菌，一旦培养箱不洁净，会导致所有培养细胞都要染菌的，爆发以后很可怕。培养箱出现霉菌很可能是水槽的水不够洁净，一定要用超净水超纯水来填充水槽，避免霉菌生长。要定期更换水槽中的纯水。一个月左右换一次。一个季度到半年要培养箱彻底灭菌一次。

诺奖得主抵制《科学》《自然》《细胞》2013-12-11http://www.bio360.net/attachments/2013/12/13867284863724be7346c1c1ed.jpg2013 年度诺贝尔生理学或医学奖得主 Randy Schekman 宣布，他的实验室将不会再向三大顶级科学期刊《科学》、《自然》和《细胞》递交论文。Schekman 称，这些世界最著名的期刊扭曲了科学进程，鼓励研究人员走捷径，在华而不实而不是真正重要的领域进行研究。他说，问题正在恶化，期刊的编辑不是活跃的科学家，而是那些追求轰动效果的所谓专业人士。Schekman 指出，如果能成功在这些著名期刊上发表论文，中科院将奖励作者大约3万美元，某些研究人员的半数收入就来自此类“贿赂”。Schekman 在《卫报》（The Guardian）上发表文章，呼吁科学界集体采取行动。

美国科学家彼得阿格雷博士因找到了允许水分子出入的细胞膜蛋白“水通道”，而荣获2003年度诺贝尔化学奖，但该通道的具体工作机制却一直是未解之谜。记者近日从中科院上海应用物理研究所获悉，我国科学家在此基础上续写下文，发现这种纳米级水通道上具有两把“锁”，分别通过力学和电学开关机制控制着水分子进出。该研究成果已发表在国际权威学刊《美国科学院院刊》（PNAS）在线版上。　　在生物体内，蛋白水通道和周围的水溶液中都存在电荷。在纳米和分子尺度上，这些通道因为热噪音效应引起力学形变和电荷移位，这会否影响水通道的开或关？上海应用物理所方海平课题组与浙大、浙江师大、IBM公司研究所和哥伦比亚大学科研人员合作，采用纳米级“碳管”作为生物膜蛋白水通道的简化模型开展研究，结果发现，水分子在通过水通道时，不仅对作用在水通道管壁上的力学响应具有开关特性，对管壁上的电荷响应也有极好的开关特性。研究表明：有效力学信号会导致管壁产生足够大的形变，由此带来开或关的状态变化；而只有在水分子与外界电荷的作用距离非常接近时，通道才会响应，迅速开或关。　　专家认为，这一新发现的机制不仅对生物化学有意义，对设计人工分子机器也具有一定启示性。来源:解放网-解放日报

窍门一：看原料 优质纯毛地毯的原料一般是精细羊毛纺织而成，其毛长而均匀，手感柔软，富有弹性，无硬根；劣质地毯的原料往往混有发霉变质的劣质毛以及腈纶丙纶纤维等，其毛短且根粗细不均，手摸索时无弹性，有硬根。 窍门二：看外观 优质纯毛地毯图案清晰美观，绒面富有光泽，色彩均匀，花纹层次分明，下面毛绒柔软，倒顺一致；而劣质地毯则色泽黯淡，图案模糊，毛绒稀疏，容易起球粘灰不耐脏。 窍门三：看脚感 优质纯毛地毯脚感舒适，不粘不滑，回弹性很好，踩后很快便能恢复原状；劣质地毯的弹力往往很小，踩后复原极慢，脚感粗糙，且常常伴有硬物感觉。 窍门四：看工艺 优质纯毛地毯的工艺精湛，毯面平直，纹路有规则；劣质地毯则做工粗糙，漏线和露底处较多，其重量也因密度小而明显低于优质品。

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～4．5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

某井水 氨氮和硝酸盐氮分别为1.0 4.8 mg/L 亚硝酸盐氮和总大肠菌群未检出～～合理吗？就此请教大家两个问题：1.这组数据合理吗？2.井水氨氮 硝酸盐氮高，有啥可能的原因？

猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光？昨天下午，北京市工商局对外揭晓“谜底”：通过抽检发现，这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”，与猪肉安全无关。　　专家介绍称，该细菌并不可怕，对正常人群不具有致病性。　　抽检未发现荧光增白物　　近期，有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉，夜晚会发出荧光，担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发，且肉身上有检验检疫章（本报12月12日曾报道）。　　近日，北京工商部门组织了抽检，由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测，结果显示，送检样本均未检出荧光增白物质，不过都检出了荧光假单胞菌。　　猪肉煮熟可杀灭该细菌　　“荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”，中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍，这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中，易生长繁殖。　　王贺祥说，荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌，广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中，也是存在于人类肠道的正常细菌，对正常人群不具有致病性，不必对其恐慌。　　如何杀灭猪肉上的细菌呢？王贺祥介绍，该菌在42℃就会停止生长，超过70℃，只需数秒即可杀死。　　市工商局也表示，消费者购买到的“发光猪肉”，可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌，只要猪肉本身没有腐败变质，可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用，不会对人体健康产生影响。

【内容介绍】 本书在总结50年来诺贝尔生命科学奖项(生理学或医学奖及有关生命科学的化学奖)的基础上，系统介绍了各奖项内容及奖项之间的联系，并就其方法论、与科学哲学的关系、获奖的科学环境和历史人文背景、奖项的定量研究、有关学科的交叉，以及在我国自己国土上取得的科研成果尚未得奖的原因等进行了探讨，提出有必要将诺贝尔奖作为一门学问来，研究，使其成为一门学科。本书适合高等院校的理工农医科师生阅读。 【本书目录】 第1篇 诺贝尔生理学或医学奖简介诺贝尔生理学或医学奖遴选标准诺贝尔生理学或医学奖的颁发机构??卡罗琳斯卡学院诺贝尔生理学或医学奖的提名和遴选过程与生命科学有关的诺贝尔化学奖对于诺贝尔生理学或医学奖的舆论批评常被提到的诺贝尔生理学或医学奖的错误颁发第2篇 诺贝尔生理学或医学奖50年奖项评介第1章 DNA、分子生物学和分子遗传学§1.1 DNA双螺旋三维结构模型的建立§1.2 与DNA双螺旋模型有关的诺贝尔奖项§1.3 DNA、基因调控与遗传密码§1.4 遗传信息流中心法则的修订和断裂基因§1.5 真核细胞的转录§1.6 基因工程的端倪??限制性内切酶、DNA测序和DNA重组§1.7 RNA病毒、致癌基因§1.8 有关RNA的研究第2章 免疫学及分子机理§2.1 现代免疫学的开端§2.2 抗体的化学结构§2.3 放射免疫分析??极灵敏的生命物质的测定方法§2.4 主要组织相容性复合体§2.5 免疫网络学说、单克隆抗体与杂交瘤技术§2.6 抗体多样性的分子基础§2.7 免疫移植§2.8 组织相容抗原与丁细胞作用机制第3章 细胞生物学、细胞信号转导§3.1 第二信使??激素作用机制§3.2 亚细胞结构及功能的研究§3.3 前列腺素的发现及其生物学作用§3.4 胆固醇的代谢调控§3.5 神经与上皮生长因子的发现§3.6 可逆性的蛋白质磷酸化过程§3.7 G蛋白及其在细胞信号转导中的作用§3.8 动物基因控制早期胚胎发育的模式§3.9 一氧化氮生理功能的发现§3.10 蛋白质信号序列决定其在细胞内的位置和转运§3.11 细胞内蛋白质的降解§3.12 细胞分裂周期的调控机制§3.13 程序性细胞死亡(细胞凋亡)第4章 神经生物学与听觉、视觉、嗅觉得基础研究§4.1 神经的兴奋抑制与膜的离子通透性§4.2 神经递质和突触理论§4.3 细胞质膜上单离子通道的发现§4.4 大脑半球的分工§4.5 神经系统内的信号转导§4.6 耳蜗刺激(听力)的物理机制§4.7 视觉的生理和化学与视觉信息处理§4.8 嗅觉基因编码和信号大脑皮层定位第5章 新方法、新疗法和新发病机制的研究§5.1 个体和社会行为模式的建立§5.2 X射线-CT扫描仪、核磁共振成像技术§5.3 手性催化剂合成具有新特性的分子§5.4 药物治疗的重要原理§5.5 乙型肝炎和库鲁病病因的发现§5.6 朊蛋白，一种新的传染机制§5.7 溃疡病与幽门螺杆菌§5.8 修改小鼠基因，创建人类疾病模型第3篇 生命科学诺贝尔奖的方法论研究第6章 生命科学诺贝尔奖的研究层次§6.1 科学、技术与科学方法§6.2 诺贝尔奖的研究层次§6.3 生命科学诺贝尔奖中的重要发现和发明第7章 自然科学诺贝尔奖的定量研究§7.1 数据的选取§7.2 诺贝尔物理学奖§7.3 诺贝尔化学奖§7.4 诺贝尔生理学或医学奖第8章 生命科学的研究方法§8.1 把复杂的生命现象简单化§8.2 对线虫研究取得的成果§8.3 DNA双螺旋模型及复制假说的验证第9章 关于交叉学科§9.1 科学发展的一般趋势§9.2 学科交叉与生命科学诺贝尔奖中的奖项第10章 科学哲学与生命科学§10.1 科学与哲学§10.2 科学结论的证实与证伪§10.3 “科学革命”与“范式”§10.4 “新工具主义”??科学革命产生的另一个源泉第11章 处理生物复杂性问题的现实与未来§11.1 生命系统的三大特性??非线性、自组织性和系统性§11.2 生物复杂性问题§11.3 处理生物复杂性问题的一些方法§11.4 世界观的转变第12章 生命科学诺奖产生的科学环境和人文环境§12.1 生命科学诺奖产生的历史背景和科学环境§12.2 生命科学诺奖产生的人文环境第13章 国人的诺贝尔奖情结第14章 诺奖学 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=137307]诺贝尔奖和诺贝尔奖学：生命科学诺贝尔奖五十年评介与思考01[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=137308]诺贝尔奖和诺贝尔奖学：生命科学诺贝尔奖五十年评介与思考02[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=137310]诺贝尔奖和诺贝尔奖学：生命科学诺贝尔奖五十年评介与思考03[/url]太大了。。。就分割了一下。。。

[b]职位名称：[/b]细胞技术员[b]职位描述/要求：[/b]岗位职责：1.完成细胞培养、增殖、迁移、侵袭等常规细胞功能实验；2.完成慢病毒、腺病毒包装实验；3.完成Crispr cas9细胞敲除技术；4.协助销售、项目部同事解决客户项目相关售前售后疑问；5.完成上级安排的其它任务。岗位要求：1.生物医药专业本科及以上；2.有慢病毒包装或Crispr cas9细胞敲除技术经验优先；3.能针对技术出现的问题主动查询资料并解决问题；4.良好的沟通表达抗压能力。[b]公司介绍：[/b] 公司简介 广州永诺生物科技有限公司成立于2010年，总部位于广州国际生物岛，旗下有广州永诺医学检验所、广东顺德永诺生物科技有限公司等子公司，是一家专注于医学科学技术开发与服务、分子诊断产品研发与生产的高新技术企业。公司目前占地面积3000m2，硕、博士以上学历员工占比近40%，团队骨干曾参与多项国家973、863肿瘤研究项目，具备丰富的科研和产品开发经验。目前与华南地区包括中山大学附属各...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/49351]查看全部[/url]

请求做过氨氮的朋友们，用纳氏试剂光度法分析氨氮的显色剂（第一种）配制时有什么诀窍，或者应该注意什么？

维权声明：本文为yhc2004原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。为了贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》，保护环境，保障人民身体健康。作为医药生产企业必须做好水污染的防治，做到污水排放达到国家标准，因此，污水中氨氮含量应时时监测，减少对环境的污染和破坏，从而达到可持续发展的目的。本方法采用紫外-可见分光光度法测定污水中氨氮含量，以期对污水中氨氮总量的控制提供参考和依据。1.仪器和试剂HANGPING FA1004型电子天平，UV-1800型紫外分光光度仪。硫酸（分析纯），盐酸（分析纯），氢氧化钾（分析纯），碘化钾（分析纯），二氯化汞（分析纯），酒石酸钾钠（分析纯），硫代硫酸钠（分析纯），硫酸锌（分析纯），氢氧化钠（分析纯），淀粉-碘化钾试纸，氯化铵（优级纯）。2.方法原理以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡棕红色的络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm波长处测量吸光度。3. 试验步骤3.1 对照品的制备3.1.1 氨氮标准溶液的配制3.1.1.1 氨氮标准贮备溶液的配制精密称取3.8190g氯化铵（优级纯，在100℃～105℃干燥2小时），溶于水中，移入1000ml量瓶中，加水稀释至标线,以氮计浓度为1000µg/ml。可在2℃～5℃下保存1个月。3.1.1.2 氨氮标准工作溶液的配制精密量取5.00ml氨氮标准贮备液于500ml量瓶中，加水稀释至刻度，浓度为10µg/ml。临用前现配。3.2 测定波长的选择精密量取氨氮标准工作溶液8ml，按照测定法项下制备对照品溶液和参比溶液，在400～700 nm范围进行波长扫描,结果氨氮标准工作溶液在420 nm处有最大吸收。因此选择420nm为测定波长。3.3 标准曲线的绘制精密量取0.00ml、1.00ml、2.00ml、4.00ml、8.00ml、12.00ml、16.00ml、20.00ml氨氮标准工作溶液于50ml纳氏比色管中，其对应的氨氮含量分别为0.0µg、10.0µg、20.0µg、40.0µg、80.0µg、120.0µg、160.0µg、200.0µg，加水至标线。加入2.0ml酒石酸钾钠溶液（称取50.0g酒石酸钾钠溶于100ml水中，加热煮沸以驱除氨，充分冷却后稀释至100ml），摇匀，再加入3.0ml纳氏试剂（称取15.0g氢氧化钾，溶于50ml水中，冷至室温。称取5.0g碘化钾，溶于10ml水中，在搅拌下，将2.50g二氯化汞粉末分多次加入碘化钾溶液中，直到溶液呈深黄色或出现淡红色沉淀溶解缓慢时充分搅拌混和，并改为滴加二氯化汞饱和溶液，当出现少量朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加。在搅拌下，将冷却的氢氧化钾溶液缓慢的加入到上述二氯化汞和碘化钾的混合液中，并稀释至100ml，于暗处静置24h，倾出上清液，贮于聚乙烯瓶内，用橡皮塞或者聚乙烯盖子盖紧，存放暗处，可稳定一个月），摇匀，放置10min后，在波长420nm处，用10mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。以吸光度为横坐标、浓度（µg/ml）为纵坐标，绘制标准曲线。其回归方程为Y=4.6502X-0.0025，r2=0.9996(n=7)。结果表明氨氮浓度在0.18mg/L～3.64 mg/L范围内与吸收度呈现良好的线性关系。试验结果见表1，标准曲线见图1。 表1 线性关系试验结果校正吸光度0.0440.0440.0850.0850.1480.148[a

高压灭菌锅使用技巧很多实验室的研究生都要自己清洗试验用品并进行高压灭菌，这里有一份高压锅注意事项，希望对大家有用。　　WARNING　　一．不能使用此高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致爆炸或腐蚀内胆和内部管道，以及破坏垫圈。　　危险物品清单：　　1.爆炸物质　　乙二醇二硝酸酯（硝化甘醇），硝酸甘油，硝化纤维素（硝化纤维素滤器）和所有含硝酸根的酯类。　　三硝基苯，黄色炸药，苦味酸和所有易燃易爆的硝基衔铩?br/过乙酸，甲烷基，乙基，甲醇，过氧化氢，过氧化物，苯甲酰，苯甲酰基及有机过氧化物。　　2.可燃性物质　　金属锂、钾、钠、黄磷、磷、硫化物、红磷。　　明胶、碳化钙（电石）、氧化钙（石灰），镁粉，连二亚硫酸钠（保险粉）。　　3.氧化剂　　氯化钾，氯化钠，氯化铵和其他氯化物。（粉剂）　　高氯酸钾，高氯酸钠，高氯酸铵和其他高氯化物。　　硝酸钾，硝酸钠，硝酸铵和其他硝酸物。　　过氧化钾，过氧化钠，过氧化钡和其他无机过氧化物。　　亚氯酸钠和其他亚氯化物，次氯酸钙和其他次氯酸物。　　4.易燃物质　　二乙醚，醚，汽油，乙醛（醋醛），氧化丙稀，环氧丙烷，二硫化碳和其他燃点在-30οC～0οC间的物质。　　甲醇，乙醇，二甲苯，苄基，乙酸苄酯，和其他燃点在0οC～30οC之间的物质（醇类）。　　灯油，火油，汽油，异戊醇，乙酸（醋酸），和其他燃点在30οC～65οC之间的类似物质。　　5.易燃的气体（氢气，乙炔，次乙基，甲烷）　　乙烷，丙烷，丁烷和其他在15οC及一个大气压下的气体。　　二．含有盐分的液体漏出或溢出时，一定要及时擦干净，沿着盖子的密封圈要彻底擦干，否则会腐蚀容器和管道。　　三．在打开盖子前，确认压力已归于“0/npa”以下。　　四．绝对不许擅自改造这个产品。　　五．不要在爆炸性气体附近使用该仪器。　　CAUTION　　1.外来的物质或液体进入到排放孔中，在运行仪器时会导致着火或断电。　　2.不要随意去动电源线，不要把重物压在电源线上，损坏的电线或金属丝暴露会导致断电或着火。　　3.除蒸馏水外，不要倒任何液体于容器内。　　4.不要使用此高压蒸汽灭菌器用于其他目的的消毒和高压未溶解的琼脂。（粉剂）　　5.检查盖子的垫圈有无异物粘连，如有异物要及时清除，否则会导致蒸汽泄漏。　　6.请使用配套的工具，不要使用其他篮筐于灭菌器内。　　7.高压时，高压后取物品时注意烫伤。　　8.如有异常发生（有声音发出，闻到气味，冒烟），请立即切断电源。联系工程师，排除异常后再继续使用。　　9.移动此仪器请将盖子锁上。移动盖子时，不要拉盖子的手柄，否则盖子会变形，难以盖严。

做印染废水的氨氮，使用普通蒸馏瓶，蒸馏时会有大量气泡，容易顺着管道进入接收容器内。是不是一定要用专门的氨氮蒸馏装置才能避免？单加个氮球行吗？还是得连凯氏烧瓶一块儿购置？或者有其他窍门，求传授。

[b][font=宋体]前言[/font][/b][font=宋体]在蛋白质研究领域，稳定细胞系的应用已成为生产高质量结构生物学蛋白质的关键手段。随着技术的不断进步，稳定细胞系的生成与筛选方法得到了显著改进，从而推动了蛋白质生产的高效化与精准化。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]细胞系的建立和应用[/font][font=宋体][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系[/font][/font][/b][font=宋体]因其稳定的蛋白表达和适当的翻译后修饰而被广泛用于结构生物学研究。这些细胞系能有效地生产具有复杂糖基化模式的蛋白质，这对于确保蛋白质的功能和稳定性至关重要。糖基化缺陷细胞系通过特定的基因改造，能够分泌脱糖基化糖蛋白，为蛋白质生产提供了更加纯净的原料。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系的生成[/font][/b][font=宋体][font=宋体]传统的稳定细胞系生成技术如瞬时转染，虽然方法简便，但存在整合频率低、转基因沉默等问题。为了克服这些困难，研究者们开发出了一系列新技术，如细胞分选技术、位点特异性重组（如[/font][font=Calibri]FLP/FRT[/font][font=宋体]系统）、转座子系统（如[/font][font=Calibri]piggyBac[/font][font=宋体]）、慢病毒系统以及噬菌体整合酶等，提高了稳定细胞系的生成效率和稳定性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]序列特异性基因组工程也为稳定细胞系的生成提供了新的思路。通过敲除或修饰特定的基因，研究者们能够实现对细胞功能的精准调控，从而优化蛋白质生产的效率和纯度。例如，一种同时缺乏[/font][font=Calibri]GnTI[/font][font=宋体]和谷氨酰胺合成酶（[/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体]）活性的[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞系被成功开发出来，为高效筛选具有[/font][font=Calibri]GS[/font][font=宋体]标记的稳定细胞系提供了有力工具。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]稳定细胞系与瞬时转染的比较[/font][/b][font=宋体]稳定细胞系相较于瞬时转染具有多个优点，包括能够进行大规模生产和保持高水平的蛋白表达稳定性。尽管瞬时转染在某些情况下能快速产生大量蛋白，但其表达水平和重复性通常不如稳定细胞系。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]展望[/font][/b][font=宋体]近年来，利用稳定细胞系高效生产结构生物学蛋白质已成为研究的热点和趋势。通过引入新技术、优化筛选方法和改进整合系统，不仅能够提高蛋白质生产的效率和纯度，还能够为结构生物学研究提供更加精准、可靠的实验工具。随着基因编辑和细胞工程技术的进步，预计在未来，通过精确的基因操作能够更有效地创建和利用稳定细胞系。这些技术的进步将促进结构生物学和药物开发中蛋白质的高效和可持续生产。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本文由义翘神州进行整理，同时提供[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][u][font=宋体][color=#0000ff]稳定细胞系构建服务[/color][/font][/u][/url][font=宋体]，详情可点击了解！[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]参考文献：[/font][font=Calibri]Büssow K. Stable mammalian producer cell lines for structural biology. [/font][i][font=Calibri]Curr Opin Struct Biol[/font][/i][font=Calibri]. 2015 32:81-90. doi:10.1016/j.sbi.2015.03.002[/font]

做cell biology实验，细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领，铺得不是均匀： 要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。以下是我的一些技巧，希望可以帮助到大家。1. 一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。 6孔板12孔板或24孔板，我均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。2.细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。然后从底部敲击，使之分散。3. 如果实验室有平板振荡器的话，我建议用这个仪器稍振荡一下，效果不错，就是振幅小，频率高的那种。4. 细胞要尽量打散，大部分呈单个状态。离心后，要充分悬浮！还有转移到六孔板后，是要晃得！晃的时候最好不要让那个细胞液转圈，不然细胞就全被带到中间去了，就会不均匀！5. 一瓶细胞长满后，正常处理，在培养瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放到培养箱里，轻微的左三圈右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。6.计算好所需要的全部液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字型晃，显微镜下观察，如果不均匀，按上述方法再晃。如果细胞未计数直接种的话，在种六孔板的过程中，随时晃一下混匀用的瓶子，瓶子我通常是顺时针或逆时针转圈。7.放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向５到６次，但关键的是摇完后最好直接放入培养箱中，不要再做过多的运动，例如放到镜下去看，否则很容易就又聚到中间去了。

黑巧克力一般有抗衰老、降低食欲、保护心脏和减肥等功效与作用。1、抗衰老：黑巧克力中的可可脂富含丰富的多酚含量，具有一定的抗氧化能力，适量食用有助于清除体内多余的自由基，起到延缓衰老的作用。2、降低食欲：黑巧克力当中的咖啡因有抑制食欲的作用，并且能够促进人体的新陈代谢，所以食用黑巧克力有降低食欲的作用。3、保护心脏：黑巧克力中的抗氧化剂可通过防止氧化，降低不良胆固醇水平和提高良好胆固醇水平来降低患心脏病的风险，经常吃黑巧克力也可以降低冠心病的风险。黑巧克力还可以促进一氧化氮的产生，从而使血管松弛并增加血流量，这对于心脏健康是非常有益的。4、减肥：黑巧克力富含单不饱和脂肪酸，有助于加速新陈代谢，使身体更快地燃烧卡路里。巧克力会影响人体合成脂肪酸的方式，并减少脂肪和碳水化合物的吸收。

巧克力与健康的N个真相 巴黎巧克力博物馆举办的一场关于巧克力功效的展览，试图通过对其成分的剖析，还巧克力以“清白”。　　很多人把巧克力看做是高热量的代名词，认为会导致肥胖。其实，巧克力的脂肪含量虽高，但其主要成分可可脂含有丰富的不饱和脂肪酸，适量食用对健康有益。此外，大量实验也表明，可可脂不会增加血液中胆固醇的含量。　　有不少人认为，经常食用巧克力会造成蛀牙。而事实是，可可中含有丹宁酸、氟质和磷酸钙，这三种物质都参与了保护牙齿的工作。 其实，适量食用巧克力益处多多。譬如能增加血液中影响血小板凝结的类黄酮，对心脏有益。巧克力中丰富的黄酮醇和多酚属于抗氧化成分，不仅能够延缓衰老，还能预防癌症、动脉硬化、关节炎等病症。另外，巧克力中的苯乙胺和可可碱，能够使人感到愉悦，消除压抑感。　　尽管巧克力有如此多的健康功效，人们也不能因此放纵食用巧克力，走入误区。专家建议，一天吃两小块为宜。　　值得注意的是，切忌给宠物吃巧克力，因为其中的可可碱和咖啡因会使宠物中毒，导致呕吐、排尿增多、过度兴奋、颤抖、呼吸急促、虚弱与癫痫，甚至造成死亡。来源：千龙网健康