维氏鞘氨醇单胞菌

几年前，我刚刚进入分子生物学领域，接手的实验室鉴定植物鞘氨醇的组分及含量。那个时候，实验室没有相关设备，我的实验是举步维艰。现在闲来无聊，用指尖文字回忆下那段日子。提取植物鞘氨醇的第一步自然是取样，这没什么问题，取完样之后的研磨也没有任何问题。而这之后，我采用的方法伴随一个110的加热16小时，这个16小时的加热着实成为我实验中的一个问题。首先，我不知道应该用什么样的仪器实现这个110度，在我们实验室，只有干燥箱可以达到并控制住这个温度。而我的样品只有3-4 mL，并且还含有2 ml易挥发的溶剂，用普通的离心管盛放我的样品放入干燥箱后，用不了16小时样品就蒸发的没有了，这显然不行。 我听实验室的前辈说，以前做这个实验的师姐是利用沸水浴进行的实验。沸水浴？显然达不到110度呀！他们说其实110度也没那么严格，用沸水浴也可以。好吧，那我也就用沸水浴吧。我从实验室找了一个废弃的但还可以加入的小灭菌锅，加满了水，把我的样品放进去，盖子使劲的拧紧呀，拧紧（盖子经常因为离心管内部的高温而破裂，所以一次实验下来还要换好几次盖子，那实验那叫一个粗糙啊！嘿嘿），然后就像炖肉一样的煮啊煮啊。我记得那时候放小锅的实验室里那叫一个热啊！hoho！而且16个小时下来，要添很多次水呢，我从来都不敢开着锅过夜的，吃饭什么的都得求人帮我看着锅。那段日子呀……后来，大家嫌热，也嫌锅的热气太大，就把我的小锅请出了实验室，放到了走廊里。我就经常在走廊里“开伙”煮我的样品。但是即使如此，这样的日子也没有持续多久，在一个月黑风高的夜晚，我的小破锅被盗了，第二天要用的时候，我发现它不见了，着实难过了很久，因为我找不到另外一个可以替代它的小破锅了。我的实验下一步该怎么办？我只好又一次陷入了沉思和搜索……

请问有人测过植物鞘氨醇的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]吗？

从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”，防止其他微生物的混入。 　　1、用固体培养基分离和纯化 　　单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落。当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔。不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。所谓平板，即培养平板的简称，它是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。 　　1.1 稀释倒平板法 　　首先把微生物悬液作一系列的稀释(如1:10、1:100、1:1000、1:10000)，然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。 　　1.2 涂布平板法 　　因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。其做法是先将已熔化的培养基倒入无菌平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的微生物悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落。 　　1.3 平板划线法 　　最简单的分离微生物的方法是平板划线法，即用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行连续划线(图2)，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包**头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～**5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

成功解决了加热的问题，我是信心倍增，后面就是萃取和浓缩，重悬了，这就简单了，很容易的，样品制备好了。终于可以检测了。可是对于我却也并不是像我想的那么顺利，因为鞘氨醇是男挥发的长链脂肪醇，需要用高效液相色谱（HPLC）检测，我们实验室没有这样的仪器。以前实验室做这个的前辈并不是用的这个方法，用其他的方法也没有获得成功，所以我那时是摸着石头过河，自己一个人一路跌跌撞撞啊。还好，所里有一台HPLC，我和管仪器的老师说好去试一下，那个老师很热情，帮了我这个忙，用了一天的时间才把四个样品检测完，不过结果还不错，这让我信心更足了。开始重复我的实验，谁知道，重复的实验却不理想。我又开始惆怅了，因为管HPLC的老师很忙，她的仪器也很忙，她还替我检测不收钱，再加上我怕给她的仪器弄坏了，让我实在不好意思再去打扰她。我想找到一个收费检测的地方，或者我想我学化学的同学那里如果可以检测也好。我给他打电话问他，他说他们那里倒是有仪器，也不忙，可是却没有荧光检测器，只有紫外检测器。没有办法，我们找到另一个可以承接对外业务的实验室，他们是按小时收费的，这没关系，只要检测成功就好了，但是事与愿违，没成功啊。继续找地方测，终于，功夫不负有心人啊，我找到了一个可以检测的地方，他们利用我提供的检测条件顺利的成功检测了我的样品，并且重复的实验结果也很稳定，他们是一个权威的检测机构，实验结果可靠，我后面的检测就放心的交给了他们。实验成功了，开心……

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～4．5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

现代人由于快节奏的生活以及强大的工作压力，大部分人的胃都处于亚健康状态。不少人对此不屑一顾，认为胃病不是什么大病，挺一挺就过去了，往往疏于预防，延误治疗，造成严重问题。伤胃的“十大恶习”为什么白领阶级、职业记者、专业司机、空中小姐、影星歌星以及新兴的SOHO族们，容易患胃病，这与职业带来的不良生活习惯密切相关。归纳起来，伤胃的恶习有十种：一曰精神紧张长期精神紧张会通过大脑皮层影响植物神经系统，使胃粘膜血管收缩，胃功能紊乱，胃酸和胃蛋白酶分泌过多，导致胃炎和溃疡发生。二曰过度劳累无论从事体力劳动还是脑力劳动，都不能过度劳累，否则就会引起消化器官供血不足，胃粘膜分泌失调，从而导致种种胃病发生。三曰饥饱不均饥饱不均对胃有很大的伤害，饥饿时胃中空空，胃粘膜分泌的胃酸和胃蛋白酶很容易伤害胃壁，导致急、慢性胃炎或溃疡发生。暴饮暴食甚至会导致急性胃扩张、胃穿孔。四曰酗酒无度酒精会使胃粘膜发生充血水肿、甚至糜烂出血而形成溃疡。长期饮酒还损害肝脏，会引起酒精性肝硬化，胰腺炎的发生也与酗酒有关，这些损害反过来又会加重对胃的伤害。五曰嗜烟成癖吸烟会引起胃粘膜血管收缩，使胃粘膜中的前列腺素合成减少，使胃粘膜受到伤害。吸烟又会刺激胃酸和胃蛋白酶的分泌，所以嗜烟成癖是引起各种胃病的重要诱因。六曰浓茶咖啡浓茶和咖啡都是中枢兴奋剂，能通过神经反射以及直接的影响，使胃粘膜发生充血、分泌功能失调、粘膜屏障破坏，促成发生溃疡病。七曰狼吞虎咽进食时狼吞虎咽，食物未经充分咀嚼，势必增加胃的负担。细嚼慢咽时唾液分泌增多，在保护胃粘膜的作用，可避免不良刺激物对胃粘膜的损害。八曰睡前进食睡前进食不仅影响睡眠，而且会刺激胃酸分泌，容易诱发溃疡。九曰不讲卫生幽门螺杆菌感染是导致胃炎、溃疡和胃癌发病的元凶，它可以通过餐具、牙具、接吻等相互传染。因此，讲究卫生，可以预防幽门螺杆菌感染，从而可以预防各种胃病。十曰监用药物常用的能损伤胃粘膜的药物有三类：一类是解热镇痛药如阿司匹林、保泰松、消炎痛等；一类是激素类药如强的松、地塞米松；还有一类是抗菌药如红霉素等。注意应用这类药物时，要严格遵医嘱慎而用之，以避免对胃造成损伤。保胃的“十字诀窍”胃病三分治七分养，合理的膳食结构是健康的基础、“保胃”的前提，如何才是合理的膳食结构呢，《健康快车》有个很好的归纳，就是十个字：“红黄绿白黑”＋“一二三四五”：所谓“红黄绿白黑”，就是五种对健康大有裨益的食物：“红”是一天一个西红柿，熟吃西红柿，效果更好。“黄”是指老玉米、胡萝卜、老南瓜、红辣椒等，这些食物维生素A多。“绿”是指绿茶，绿茶含有多种抗氧自由基物质。 “白”是指燕麦片，它不但可降低胆固醇，还对糖尿病、减肥有特别好的功效。“黑”是指黑木耳，科学实践证明黑木耳能降低血黏度，每天吃5－15克就行了。 所谓“一二三四五”，是关于每个人每天健康膳食的五个要点：“一”是每天一袋牛奶。我们中国的膳食有很多优点，但是缺钙，几乎90％的人都缺钙。大多数中国人的伙食里只有500毫克钙，还有300毫克的缺口———正好一袋牛奶就有300毫克的钙，所以每天补充一袋牛奶，就齐了。“二”是250克主食。每天250克碳水化合物，即半斤大米或麦面粉，体力劳动多的可以多一些，一些稍胖体力劳动又较少的女性可以适量减少一点。但吃饭要按四条规矩进行：饭前喝汤，进食速度慢，多咀嚼，晚饭吃得少，这样体重就很容易维持正常。 “三”是三份高蛋白。可从“一两瘦肉、一个鸡蛋，2两豆腐、2两鱼虾、2两鸡鸭、半两黄豆”中任意选择，每天要有三份———比如早上吃了一个荷包蛋，中午吃一个肉片苦瓜，晚上吃2两豆腐或2两鱼。“四”是四句话：有粗有细、不甜不咸、三四五顿、七八分饱。有粗有细，就是要粗细粮搭配，营养有互补作用。不甜不咸，是说不要净吃甜的，或不要吃太多甜的；也不要吃得太咸，一天吃6克左右的盐就适中。三四五顿，是指变每天三餐为四五顿，少吃多餐。早餐与午餐中间加一顿点心餐，下午四五时吃一顿，晚饭吃得晚一些，这样总量不变而不是越吃越多。七八分饱，是指要低热量膳食，七八分饱即可，这点非常重要。“五”是500克蔬菜和水果。 这是预防癌症的最好办法，对食道癌、胃癌能减少一半以上。

某井水 氨氮和硝酸盐氮分别为1.0 4.8 mg/L 亚硝酸盐氮和总大肠菌群未检出～～合理吗？就此请教大家两个问题：1.这组数据合理吗？2.井水氨氮 硝酸盐氮高，有啥可能的原因？

一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使其成单个细胞存在，否则一个菌落就不只是代表一个细胞，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些产品检定，如根瘤菌剂等产品检定，生物制品检验，土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中，土壤是微生物生活的良好环境，其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的，因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关，肥沃的土壤中多，贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质，如通气、pH有关，例如在通气良好的菜园土中，好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌，并进行数量测定。分离微生物时，一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同，供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长，不利于其它菌种生长的环境，从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法，根据不同的材料，可以采用不同方法，其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落，必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时，还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌，主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难，但由于其菌落大，容易扩展，计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素，但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液，且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上，放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制，但大多数真菌能够生存，且其菌落受孟加拉红的抑制而较小，从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

窍门一：看原料 优质纯毛地毯的原料一般是精细羊毛纺织而成，其毛长而均匀，手感柔软，富有弹性，无硬根；劣质地毯的原料往往混有发霉变质的劣质毛以及腈纶丙纶纤维等，其毛短且根粗细不均，手摸索时无弹性，有硬根。 窍门二：看外观 优质纯毛地毯图案清晰美观，绒面富有光泽，色彩均匀，花纹层次分明，下面毛绒柔软，倒顺一致；而劣质地毯则色泽黯淡，图案模糊，毛绒稀疏，容易起球粘灰不耐脏。 窍门三：看脚感 优质纯毛地毯脚感舒适，不粘不滑，回弹性很好，踩后很快便能恢复原状；劣质地毯的弹力往往很小，踩后复原极慢，脚感粗糙，且常常伴有硬物感觉。 窍门四：看工艺 优质纯毛地毯的工艺精湛，毯面平直，纹路有规则；劣质地毯则做工粗糙，漏线和露底处较多，其重量也因密度小而明显低于优质品。

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单核细胞增生李斯特氏菌及检验单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌。它能引起人畜李氏菌的疾病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。一、生物学特性1、形态与染色该菌为革兰氏阳性短杆菌，大小约为0.5μmх1.0-2.0μm,直或稍弯，两端钝圆，常呈V字型排列，偶有球状、双球状，兼性厌氧、无芽胞，一般不形成荚膜，但在营养丰富的环境中可形成荚膜，在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性，该菌有4根周毛和1根端毛，但周毛易脱落。2、培养特性该菌营养要求不高，在20--25℃培养有动力，穿刺培养2--5天可见倒立伞状生长，肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。该菌的生长范围为2--42℃（也有报道在0℃能缓慢生长），最适培养温度为35--37℃，在pH中性至弱碱性（pH9.6）、氧分压略低、二氧化碳张力略高的条件下该菌生长良好，在pH3.8--4.4能缓慢生长，在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。在固体培养基上，菌落初始很小，透明，边缘整齐，呈露滴状，但随着菌落的增大，变得不透明。在5-7%的血平板上，菌落通常也不大，灰白色，刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)琼脂上，用45°角入射光照射菌落，通过解剖镜垂直观察，菌落呈兰色、灰色或兰灰色。3、生化反应该菌触酶阳性，氧化酶阴性，能发酵多种糖类，产酸不产气，如发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖（迟发酵）、山梨醇、海藻糖、果糖，不发酵木糖、甘露醇、肌醇、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖，不利用枸橼酸盐，40%胆汁不溶解，吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性，VP、甲基红试验和精氨酸水解阳性。4、血清型根据菌体（O）抗原和鞭毛(H)抗原，将单增李氏菌分成13个血清型，分别是1/2a、1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、4b、4ab、4c、4d、4e 和“7”13 个血清型。致病菌株的血清型一般为1/2b、1/2c、3a、3b、3c、4a、1/2a和4b,后两型尤多。5、抵抗力该菌对理化因素抵抗力较强，在土壤、粪便、青储饲料和干草内能长期存活，对碱和盐抵抗力强，60-70℃经5-20min可杀死，70%酒精5min、2.5%石炭酸、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林20min 可杀死此菌。该菌对青霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺均敏感。二、流行病学单增李斯特氏菌广泛存在于自然界中，不易被冻融，能耐受较高的渗透压，在土壤、地表水、污水、废水、植物、青储饲料、烂菜中均有该菌存在，所以动物很容易食入该菌，并通过口腔-粪便的途径进行传播。据报道，健康人粪便中单增李氏菌的携带率为0.6-16%,有70%的人可短期带菌，4-8%的水产品、5-10%的奶及其产品、30%以上的肉制品及15%以上的家禽均被该菌污染。人主要通过食入软奶酪、未充分加热的鸡肉、未再次加热的热狗、鲜牛奶、巴氏消毒奶、冰激凌、生牛排、羊排、卷心菜色拉、芹菜、西红柿、法式馅饼、冻猪舌等而感染，约占85-90%的病例是由被污染的食品引起的。该菌可通过眼及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染，孕妇感染后通过胎盘或产道感染胎儿或新生儿,栖居于子宫颈的该菌也引起感染，性接触也是本病传播的可能途径，且有上升趋势。三、致病性单增李氏菌进入人体后是否发病，与菌的毒力和宿主的年龄、免疫状态有关，因为该菌是一种细胞内寄生菌，宿主对它的清除主要靠细胞免疫功能。因此，易感者为新生儿、孕妇及40岁以上的成人，此外，酗酒者、免疫系统损伤或缺陷者、接受免疫抑制剂和皮质激素治疗的患者及器官移植者也易被该菌感染。该病的临床表现，健康成人个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡。单增李氏菌的抗原结构与毒力无关，它的致病性与毒力机理如下：1、寄生物介导的细胞内增生，使它附着及进入肠细胞与巨噬细胞；2、抗活化的巨噬细胞，单增李氏菌有细菌性过氧化物歧化酶，使它能抗活化巨噬细胞内的过氧物（为杀菌的毒性游离基团）分解；3、溶血素，即李氏杆菌素O，可以从培养物上清液中获得，为活化的细胞溶素，有α和β两种，为毒力因子。四、检验1、增菌培养取回的样品应在4℃下处理、存放和运送，如果是冷冻样品，则在检验前要保持冷冻状态。取25mL液体或25g半固体或固体样品放入含有225mL无选择性试剂增菌肉汤（EB）的均质杯中进行均质，然后转入三角瓶中，30℃培养4h，加入选择性试剂吖啶黄素、萘啶酮酸，继续培养20h和44h.。2、分离共培养24h和48h后，取EB培养物分别在OXA和LPM或加七叶苷/Fe3+LPM琼脂平板上划线。PALCAM琼脂可替代LPM琼脂。将OXA和PALCAM平板置于35℃培养24-48h，LPM平板在30℃培养24-48h。然后，把LPM平板放于解剖镜载物台上，以45°角入射光从平板下面照射平板，通过目镜垂直向下观察寻找可疑菌落。李斯特氏菌在LPM平板上呈有光泽的兰色或灰色。用已知阳性菌和阴性菌划线的平板作对照。加入七叶苷和Fe3+的LPM平板不用斜射光系统，选择可疑菌落的方法与在OXA上选择可疑菌落的方法相同。在OXA平板上李斯特氏菌菌落周围有一个黑色环，其它菌也可形成黑色环，但形成时间要在两天以上。李斯特氏菌在PALCAM和OXA平板上的菌落特征相似。在PALCAM和OXA或LPM平板上挑取5个或更多的典型菌落，分别划线于TSAYE平板上以得到更纯、更典型的单个菌落。食品检验中在TSAYE平板上纯化是必须的，因为在PALCAM和OXA或LPM平板上分离菌落时可能沾有不可见的受抑微生物。挑取5个典型菌落的原因是一个样品中可能分离到一种以上的李斯特氏菌。30℃TSAYE平板培养24-48h，如果不用于动力观察，也可在35℃培养。3、鉴定步骤（1）观察TSAYE平板通过斜射光观察，寻找呈兰灰至兰色菌落。在TSAYE上用已知菌作对照。（2）、从30℃或更低温度下培养的TSAYE平板上挑取典型菌落做成湿玻片在油镜下观察。湿玻片用0.85%生理盐水菌悬液制成。如果菌量太少，菌体黏附于载玻片上而呈现非运动性。李斯特氏菌是细短杆菌，可见轻微的旋转及翻滚。与已知的李斯特氏菌的对照相比，球形、大的杆状且快速泳动的都不是李斯特氏菌。（3）挑取典型菌落进行过氧化氢酶实验，李斯特氏菌呈过氧化氢酶阳性反应。（4）取16-24h的培养物进行革兰氏染色，李斯特氏菌呈革兰氏阳性杆菌。但是陈旧培养物革兰氏染色会发生变化，而且菌体可成球形。在染色过重的玻片上菌体有呈栅状排列的趋势，易误认为白喉菌而错判。（5）挑取典型菌落接种于TSBYE肉汤管中，35℃培养24h用做糖类发酵和其它生化项目实验。TSBYE肉汤管在4℃下可存放几天，也可反复接种。（6）在TSAYE平板上挑取典型菌落刺种到5%的绵羊血或马血琼脂平板上，刺种时避免触到平板底部和使琼脂破裂，同时设阳性对照（单核细胞增生李斯特氏菌和绵羊李斯特氏菌）和阴性对照（英诺克李斯特氏菌），35℃培养48h。单核细胞增生李斯特氏菌呈窄小的β-溶血环。（7）在明亮的光照下，观察经穿刺的血琼脂平板，单核细胞增生李斯特氏菌和西尔李斯特氏菌围绕穿刺点产生较清晰的β-溶血环，英诺克李斯特氏菌不产生溶血现象，而绵羊李斯特氏菌产生界限明显的较大溶血环，在此不要试图进行种间的区分，但要记录下溶血反应的特征，CAMP试验可区分它们间的溶血反应。（8）硝酸盐还原试验（选做）。用TSBYE肉汤培养物接种于硝酸盐肉汤中，35℃培养5天后，加入0.2mL试剂A，再加入0.2mL试剂B，混合，出现紫红色为阳性反应，表明硝酸盐已被还原，如无颜色出现，在试管内再加入少量锌粉，放置1h，如出现紫红色，表明硝酸盐仍存在，未被细菌还原。只有默氏李斯特氏菌还原硝酸盐，因此，从格氏李斯特氏菌中区分出默氏李斯特氏菌就必须进行这唯一的试验。本试验还有一等效试验，即加入0.2mL试剂A后，再加入0.2mL试剂C，出现橙色表明硝酸盐已被还原。如未出现颜色反应，也加入少量锌粉，若出现橙色表明硝酸盐未被还原。（9）将TSBYE培养物穿刺到SIM和MTM试管中，室温培养7天，每日观察，李斯特氏菌呈典型伞状生长。在MTM中伞状生长更典型。同时，30℃的TSBYE培养物在油镜下可见细菌作翻转运动。（10 ）将TSAYE肉汤培养物分别接种于0.5%（W/V）葡萄糖、麦芽糖、七叶苷、甘露醇、鼠李糖、木糖发酵管内（可选用倒立发酵管），35℃培养7天，呈阳性反应的李斯特氏菌产酸不产气，李斯特氏菌发酵鼠李糖和木糖的情况见下表。所有李斯特氏菌对葡萄糖、七叶苷、麦芽糖均能发酵，除格氏李斯特氏菌均不能发酵甘露醇。如果在OXA、PALCAM或加七叶苷/Fe3+的LPM分离平板上菌落色素很明显，则七叶苷试验可免做。

向水饱和正丁醇提取液中加两倍量的氨试液向水饱和正丁醇提取液中加两倍量氨试液的作用是什么？分层后哪层是正丁醇溶液层？氨试液的量必须是两倍量么，加一倍量的氨试液会有什么不良后果？量的多少有什么影响?谢谢……

猪肉为何会在黑夜里发出荧荧蓝光？昨天下午，北京市工商局对外揭晓“谜底”：通过抽检发现，这是一种叫荧光假单胞菌的细菌在“作祟”，与猪肉安全无关。　　专家介绍称，该细菌并不可怕，对正常人群不具有致病性。　　抽检未发现荧光增白物　　近期，有几位消费者反映在建欣苑菜市场、八里桥市场等处购买的猪肉，夜晚会发出荧光，担心吃了可能对身体有害。而这些肉都是从正规屠宰场批发，且肉身上有检验检疫章（本报12月12日曾报道）。　　近日，北京工商部门组织了抽检，由北京市食品安全监控中心对送检样本进行荧光增白物质和荧光假单胞菌检测，结果显示，送检样本均未检出荧光增白物质，不过都检出了荧光假单胞菌。　　猪肉煮熟可杀灭该细菌　　“荧光假单胞菌能产生黄绿色荧光色素而使猪肉发光”，中国农业大学微生物系教授王贺祥介绍，这种细菌在肉及肉制品、禽蛋类等蛋白质丰富的食品中，易生长繁殖。　　王贺祥说，荧光假单胞菌属于革兰氏阴性嗜冷菌，广泛存在于土壤、水、植物、动物活动环境中，也是存在于人类肠道的正常细菌，对正常人群不具有致病性，不必对其恐慌。　　如何杀灭猪肉上的细菌呢？王贺祥介绍，该菌在42℃就会停止生长，超过70℃，只需数秒即可杀死。　　市工商局也表示，消费者购买到的“发光猪肉”，可能在屠宰、储存、运输、销售等过程中污染了荧光假单胞菌，只要猪肉本身没有腐败变质，可以通过焯、炒、煮等方式将猪肉熟制后食用，不会对人体健康产生影响。

高压灭菌锅使用技巧很多实验室的研究生都要自己清洗试验用品并进行高压灭菌，这里有一份高压锅注意事项，希望对大家有用。　　WARNING　　一．不能使用此高压蒸汽灭菌器消毒任何有破坏性材料和含碱金属成份的物质。消毒这些物品将会导致爆炸或腐蚀内胆和内部管道，以及破坏垫圈。　　危险物品清单：　　1.爆炸物质　　乙二醇二硝酸酯（硝化甘醇），硝酸甘油，硝化纤维素（硝化纤维素滤器）和所有含硝酸根的酯类。　　三硝基苯，黄色炸药，苦味酸和所有易燃易爆的硝基衔铩?br/过乙酸，甲烷基，乙基，甲醇，过氧化氢，过氧化物，苯甲酰，苯甲酰基及有机过氧化物。　　2.可燃性物质　　金属锂、钾、钠、黄磷、磷、硫化物、红磷。　　明胶、碳化钙（电石）、氧化钙（石灰），镁粉，连二亚硫酸钠（保险粉）。　　3.氧化剂　　氯化钾，氯化钠，氯化铵和其他氯化物。（粉剂）　　高氯酸钾，高氯酸钠，高氯酸铵和其他高氯化物。　　硝酸钾，硝酸钠，硝酸铵和其他硝酸物。　　过氧化钾，过氧化钠，过氧化钡和其他无机过氧化物。　　亚氯酸钠和其他亚氯化物，次氯酸钙和其他次氯酸物。　　4.易燃物质　　二乙醚，醚，汽油，乙醛（醋醛），氧化丙稀，环氧丙烷，二硫化碳和其他燃点在-30οC～0οC间的物质。　　甲醇，乙醇，二甲苯，苄基，乙酸苄酯，和其他燃点在0οC～30οC之间的物质（醇类）。　　灯油，火油，汽油，异戊醇，乙酸（醋酸），和其他燃点在30οC～65οC之间的类似物质。　　5.易燃的气体（氢气，乙炔，次乙基，甲烷）　　乙烷，丙烷，丁烷和其他在15οC及一个大气压下的气体。　　二．含有盐分的液体漏出或溢出时，一定要及时擦干净，沿着盖子的密封圈要彻底擦干，否则会腐蚀容器和管道。　　三．在打开盖子前，确认压力已归于“0/npa”以下。　　四．绝对不许擅自改造这个产品。　　五．不要在爆炸性气体附近使用该仪器。　　CAUTION　　1.外来的物质或液体进入到排放孔中，在运行仪器时会导致着火或断电。　　2.不要随意去动电源线，不要把重物压在电源线上，损坏的电线或金属丝暴露会导致断电或着火。　　3.除蒸馏水外，不要倒任何液体于容器内。　　4.不要使用此高压蒸汽灭菌器用于其他目的的消毒和高压未溶解的琼脂。（粉剂）　　5.检查盖子的垫圈有无异物粘连，如有异物要及时清除，否则会导致蒸汽泄漏。　　6.请使用配套的工具，不要使用其他篮筐于灭菌器内。　　7.高压时，高压后取物品时注意烫伤。　　8.如有异常发生（有声音发出，闻到气味，冒烟），请立即切断电源。联系工程师，排除异常后再继续使用。　　9.移动此仪器请将盖子锁上。移动盖子时，不要拉盖子的手柄，否则盖子会变形，难以盖严。

一、原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通常可在波长410—425nm范围一、原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含量成正比，通常可在波长410—425nm范围内测其吸光度，计算其含量。本法最低检出浓度为0.025mg/L（光度法），测定上限为2mg/L。二、仪器1．500mL全玻璃蒸馏器 。2．50mL具塞比色管。3．分光光度计。4．pH计。三、试剂配制试剂用水均应为无氨水。1．无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后，重蒸馏得到。2．1mol/L氢氧化钠溶液。3．吸收液：①硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水中，稀释至1L。②0.01mol/L硫酸溶液。4．纳氏试剂：称取16g氢氧化钠，溶于50mL水中，充分冷却至室温。另称取7g碘化钾和碘化汞(HgI2)溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中。用水稀释至100mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。5．酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100mL水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL。6．铵标准贮备溶液：称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中，移入1000mL容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。7．铵标准使用溶液：移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。

氨氮和总氮超标是水处理中常见的问题，处理这类问题通常有以下几种方法：化学法处理：氨氮去除剂：可以直接向废水中投加氨氮去除剂，这类药剂能通过氧化作用快速分解氨氮，反应时间快，一般在5~6分钟内即可看到效果。氨氮去除剂的浓度可根据实际氨氮浓度调节，灵活性较高。折点加氯氧化法：使用次氯酸钠或漂白粉等氧化剂将氨氮氧化为氮气释放。此方法操作快速，但需注意控制加药量以避免余氯过高。生物法处理：硝化和反硝化：利用微生物的硝化和反硝化过程去除氨氮。硝化细菌将氨氮转化为亚硝酸盐和硝酸盐，随后反硝化菌将硝酸盐还原为氮气，实现脱氮。此方法适用于有足够停留时间的生化处理系统，需要维护良好的微生物环境。物理化学法：化学沉淀法：如磷酸铵镁沉淀法，通过添加化学药剂促使氨氮和其他离子形成沉淀物，再通过沉淀分离去除。吹脱法：通过调节pH值和增加空气吹脱，促进氨氮以气体形式逸出。蒸氨法：适用于高浓度氨氮废水，通过加热蒸发氨氮，然后冷凝回收氨气。电氧化分解法：利用电解过程将氨氮氧化，适合小规模或特殊场合。直接整体处理：通过构建新的或改进现有处理工艺，如MBR（膜生物反应器）、SBR（序批式活性污泥法）等高级处理工艺，虽然处理效果好，但建设和运行成本较高。

请求做过氨氮的朋友们，用纳氏试剂光度法分析氨氮的显色剂（第一种）配制时有什么诀窍，或者应该注意什么？

做印染废水的氨氮，使用普通蒸馏瓶，蒸馏时会有大量气泡，容易顺着管道进入接收容器内。是不是一定要用专门的氨氮蒸馏装置才能避免？单加个氮球行吗？还是得连凯氏烧瓶一块儿购置？或者有其他窍门，求传授。

[font=&]含量为棉98.6%，氨纶1.4%的面料在做耐水色牢度时，用什么组合的单纤维贴衬？按照纯棉可以吗？[/font]

我国水环境污染状况依然严峻，化学需氧量、五日生化需氧量和氨氮仍为主要污染控制指标。根据全国各地水环境污染物主要特征，“十二五”规划明确了主要水污染物的减排目标，提出2015年化学需氧量排放要在“十一五”基础上减少8％，氨氮排放减少10％。“十一五”期间，化学需氧量减排绩效明显。而氨氮作为新增加的约束性指标，已成为水体污染监测的重点关注指标之一。氨氮是水体中主要水体中的营养素，氨氮主要来源于人和动物的排泄物、雨水径流以及农用化肥的流失也是氮的重要来源。氨氮还来自化工、冶金、油漆颜料、炼焦、鞣革、化肥等工业废水中。氨氮的重要危害是可导致水体富营养化现象产生，是水体主要耗污染物，也是生活饮用水是否被污染的指标之一。“十二五”将氨氮参数列为水质检测的一项重要指标。传统氨氮测量方法纳氏试剂比色法和水杨酸分光光度法等由于水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及混浊等均干扰，需作相应的预处理，同时需要配置标准溶液，绘制和校准标准曲线，整个操作步骤较为繁琐.水体中的氨氮污染危害十分严重？？！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif

氮是蛋白质、核酸、酶、维生素等有机物中的重要组分。纯净天然水体中的含氮物质是很少的，水体中含氮物质的主要来源是生活污水和某些工业废水。当含氮有机物进入水体后，由于微生物和氧的作用，可以逐步分解或氧化为无机氨（NH）、铵（NH[sub]4[/sub]）、亚硝酸盐（NO[sub]2[/sub]）和最终产物（NO[sub]3[/sub]）。 氨和铵中的氮称为氨氮（Ammonianitrogen简称NHxN）。水中氨氮的含量在一定程度上反映了含氮有机物的污染情况。在污水综合排放标准（GB8978－1996）和地表水环境质量标准（GB3838－2002）中，氨氮都是重要的监测指标。 氨氮的测定方法，通常有纳氏试剂比色法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]分子吸收法、苯酚-次氯酸盐（或水杨酸-次氯酸盐）比色法和电极法等。目前我们所使用氨氮的分析方法主要是纳氏试剂比色法，纳氏试剂比色法具操作简便、灵敏等特点，水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及浑浊等均干扰测定都需作相应的预处理。 在纳氏试剂配制时需要用到碘化钾和碘化汞，碘化汞不易溶于水，但易溶于碘化钾，所以在配制过程中需要先将易溶于水的碘化钾溶于水中，再往碘化钾溶液中缓慢加入碘化汞，这样才能使碘化汞彻底溶于水中，且不会产生红色沉淀。 纳氏试剂比色法中所使用的酒石酸钾钠配制方法较为简单，但对于有些试剂，由于铵盐含量较大，只靠加热煮沸并不能完全除去，一般以下2种方法：（1）向定容后的酒石酸钾钠溶液中加入5mL纳氏试剂沉淀后取上层清液使用。（2）向酒石酸钾钠溶液中加少量碱，煮沸蒸发至50mL左右后，冷却并定容至100mL。我们认为，第二种方法优于第一种方法，即使铵盐含量很高的酒石酸钾钠，经处理后空白值也能满足实验要求。 氨氮属于水质日常分析频率较多的因子，以上为我们在日常分析中所总结的经验，仅供大家参考，有错误之处，敬请指出。

做cell biology实验，细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领，铺得不是均匀： 要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。以下是我的一些技巧，希望可以帮助到大家。1. 一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。 6孔板12孔板或24孔板，我均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。2.细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。然后从底部敲击，使之分散。3. 如果实验室有平板振荡器的话，我建议用这个仪器稍振荡一下，效果不错，就是振幅小，频率高的那种。4. 细胞要尽量打散，大部分呈单个状态。离心后，要充分悬浮！还有转移到六孔板后，是要晃得！晃的时候最好不要让那个细胞液转圈，不然细胞就全被带到中间去了，就会不均匀！5. 一瓶细胞长满后，正常处理，在培养瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放到培养箱里，轻微的左三圈右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。6.计算好所需要的全部液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字型晃，显微镜下观察，如果不均匀，按上述方法再晃。如果细胞未计数直接种的话，在种六孔板的过程中，随时晃一下混匀用的瓶子，瓶子我通常是顺时针或逆时针转圈。7.放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向５到６次，但关键的是摇完后最好直接放入培养箱中，不要再做过多的运动，例如放到镜下去看，否则很容易就又聚到中间去了。

氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮的来源（1） 、生活污水中含氮有机物受微生物作用的分解产物，以及农田排水城市生活污水中的食品残渣等含氮有机物在微生物的分解作用下产生氨氮， 还有农作物生长过程中以及氮肥的使用也会产生氨氮， 并随着污水排入城市的污水处理厂或直接排入水体中。（2）氨和亚硝酸盐可以互相转化水中的氨在氧的作用下可以生成亚硝酸盐，并进一步形成硝酸盐。同时水中的亚硝酸盐也可以在厌氧条件下受微生物作用转化为氨。（3）某些工业废水，如焦化废水和合成氨化肥厂废水等。化肥厂、发电厂、水泥厂等化工厂向环境中排放含氨的气体、粉尘和烟雾；随着人民生活水平的不断提高，私家车也越来越多，大量的自用轿车和各种型号的货车等交通工具也向环境空气排放一定量含氨的汽车尾气。这些气体中的氨溶于水中，形成氨氮，污染了水体。 对人体健康的影响 水中的氨氮可以在一定条件下转化成亚硝酸盐，如果长期饮用，水中的亚硝酸盐将和蛋白质结合形成亚硝胺，这是一种强致癌物质，对人体健康极为不利。对生态环境的影响 氨氮对水生物起危害作用的主要是游离氨，其毒性比铵盐大几十倍，并随碱性的增强而增大。氨氮毒性与池水的 pH 值及水温有密切关系，一般情况，pH 值及水温愈高，毒性愈强，对鱼的危害类似于亚硝酸盐。氨氮对水生物的危害有急性和慢性之分。慢性氨氮中毒危害为：摄食降低，生长减慢，组织损伤，降低氧在组织间的输送。鱼类对水中氨氮比较敏感，当氨氮含量高时会导致鱼类死亡。急性氨氮中毒危害为：水生物表现为亢奋、在水中丧失平衡、抽搐，严重者甚至死亡。 相关环保标准和环保工作的需要氨氮对水体造成了污染，使鱼类死亡，或形成亚硝酸盐危害人类的健康。测定水中的氨氮，有助于评价水体被污染和“自净”状况。所以本标准的修订也是为了适应和满足环境质量标准与污染物排放（控制）标准的污染物项目监测要求以及环境保护重点工作涉及的污染物项目监测要求。

1目的要求 （1）了解食品微生物菌种复壮技术的三种方法。 （2）熟悉微生物菌种复壮的一般方法。 2 基本原理 菌种在长期保存过程中会出现部分菌种退化现象。“退化”是一个群体概念，即菌种中有少数个体发生变异，不能算退化，只有相当一部分乃至大部分个体的性状都明显变劣，群体生长性能显著下降时，才能视为菌种退化。菌种退化往往是一个渐变的过程，菌种退化只有在发生有害变异的个体在群体中显著增多以至占据优势时才会显露出来。因此，尽管个体的变异可能是一个瞬时的过程，但菌种呈现“退化”却需要较长的时间。菌种退化的原因是有关基因的负突变。菌种退化的过程是一个从量变到质变的过程。最初，在群体中只有个别细胞发生负突变，这时如不及时发现并采取有效措施而一味的传代，就会造成群体中负突变个体的比例逐渐增高，最后占优势，从而使整个群体表现出严重的退化现象。菌种衰退最易察觉到的是菌落和细胞形态的改变，菌种衰退会出现生长速度慢，代谢产物 生产能力或其对宿主寄生能力明显下降。因此，在使用菌种前需对菌种进行复壮。 复壮就是通过分离纯化，把细胞群体中一部分仍保持原有典型性状的细胞分离出来，经过扩大培养，最终恢复菌株的典型性状，但这是一种消极的复壮措施；广义的复壮即在菌株的生产性能尚未退化前就经常有意识的进行纯种分离和生产性能的测定，保证生产性能的稳定或逐步提高。常用的分离纯化方法很多，大体上可分为三种：第一种分为两类，一类较粗放，一般只能达到菌落纯的水平，即从种的水平上来说是纯的。例如在琼脂平板上进行划线分离、表面涂布或与尚未凝固的琼脂培养基混匀后再倾注并铺成平板等方法获得单菌落；另一类较精细，是单细胞或单孢子水平上的分离方法，它可达到细胞纯的水平。第二种是通过宿主体内进行复壮，对于寄生性微生物退化菌株，可直接接种到相应的动植物体内，通过寄主体内的作用来提高菌株的活性或提高它的某一性状。第三种方法是淘汰已衰退的个体，通过物理、化学的方法处理菌体（孢子）使其死亡率达到80%以上或更高一些，存活的菌株，一般是比较健壮的，从中可以挑选出优良菌种，达到复壮的目的。食品微生物菌种的复壮主要是采用第一种方法。

1. 书名： 聚氨酯弹性体及其应用 作者：傅明源，孙酣经 编著 出版社：化学工业出版社 书号：7502578455 简介：本书主要阐述了聚氨酯混炼胶、聚氨酯浇注胶和聚氨酯热塑胶的合成配方和工艺、加工配方和工艺的具体数据和计算公式；聚氨酯革、聚氨酯胶黏剂、聚氨酯泡沫弹性体、聚氨酯涂料、聚氨酯水乳胶、聚氨酯灌浆材料和聚氨酯弹性纤维等的制作工艺、反应原理；简要介绍了新型聚氨酯弹性体；各种聚氨酯制品的加工方法及其应用。还介绍了合成聚氨酯的原材料的成品的分析，以及聚氨酯的工业卫生等。书中对TPUR半预聚法生产、聚氨酯革生产、反应注射成型(RIM)和增强的反应注射成型(RRIM)方法的生产作了较多介绍。 \r\n 本书除对第二版内容作适当补充修正外，还增加了聚氨弹性体助剂、聚氨酯预聚体以及田径场地塑胶跑道、篮球、排球、羽毛球和网球场地的聚氨酯塑胶铺面、聚氨酯地板和地板砖、聚氨酯防水材、聚氨酯嵌缝材和聚氨酯防腐材与新世纪展望等内容。 \r\n 本书实用性强，内容丰富，可供从事聚氨酯生产、科研、加工应用的工程技术人员和技术工人使用，也可供大专院校及中专高分子专业的师生参考。2. 书名: 聚氨酯树脂及其应用　　ISBN:7502537449　　著作者:李绍雄 刘益军　　出版社:化学工业　　出版日期:2002-05-01 　　　页数:743　　内容简介:第1章 绪论1．1 聚氨酯树脂的发展史1．2 我国聚氨酯工业的发展史1．3 国外聚氨酯树脂的生产与市场1．4 国内聚氨酯树脂的生产与市场1．5 聚氨酯树脂的技术发展动态第2章 聚氨酯化学2．1 异氰酸酯基本反应2．2 催化剂及温度对反应的影响2．3 聚氨酯分子结构与性能的关系第3章 基本原料3．1 概述3．2 异氰酸酯3．3 聚酯多元素3．4 聚醚多醇3．5 其它低聚物多元醇3．6 助剂第4章 聚氨酯泡沫塑料4．1 概述4．2 泡沫形成的化学机理4．3 软质聚氨酯泡沫塑料4．4 硬质聚氨酯泡沫塑料4．5 聚氨酯半硬泡4．6 聚氨酯泡沫的阻燃4．7 聚氨酯泡沫塑料的应用第5章 弹性体5．1 概述5．2 弹性体原料及原料对性能的影响5．3 浇注型聚氨酯弹性体5．4 热塑性聚氨酯5．5 混炼型聚氨酯弹性体5．6 聚氨酯弹性体的应用第6章 聚氨酯涂料6．1 概述6．2 聚氨酯涂料的分类与特性6．3 聚氨酯涂料的原料6．4 氨酯油6．5 双组分聚氨酯涂料6．6 封闭型聚氨酯涂料6．7 湿固化型聚氨酯涂料6．8 催化固化型双组分聚氨酯涂料6．9 聚氨酯沥青涂料6．10 聚氨酯弹性涂料6．11 水性聚氨酯涂料6．12 聚氨酯粉体涂料6．13 聚氨酯涂料的应用第7章 聚氨酯胶粘剂7．1 概述7．2 聚氨酯胶粘剂粘接机理7．3 多异氰酸酯胶粘剂7．4 双组分聚氨酯胶粘剂7．5 单组分聚氨酯胶粘剂7．6 聚氨酯胶粘剂7．7 聚氨酯密封胶第8章 聚氨酯人造革与合成革8．1 概述8．2 聚氨酯革的主要原料8．3 干法生产聚氨酯人造革8．4 湿法聚氨酯革第9章 聚氨酯弹性纤维9．1 概述9．2 聚氨酯弹性纤维的基本原理9．3 聚氨酯弹性的纤维的制造9．4 聚氨酯弹性纤维的性能与检验9．5 聚氨酯弹性纤维纱线及应用第10章 聚氨酯铺地材料10．1 概述10．2 主要原料10．3 胶面层浆料制备工艺10．4 聚氨酯跑道的铺设10．5 聚氨酯地板第11章 聚氨酯防水材料11．1 概述11．2 焦油聚氨酯防水材料11．3 沥青聚氨酯防水材料11．4 聚醚型聚氨酯防水材料11．5 聚氨酯防水材料标准和施工11．6 油溶性聚氨酯灌浆材料11．7 水溶性聚氨酯灌浆材料11．8 亲水性聚氨酯材料第12章 水性聚氨酯12．1 概述12．2 水性聚氨酯制备用原料12．3 水性聚氨酯的制备12．4 水性聚氨酯的性能12．5 水性聚氨酯的交联12．6 聚氨酯与其它聚合物共混或共聚分散液12．7 水性聚氨酯的应用第13章 反应注射成型聚氨酯13．1 概述13．2 原料体系13．3 RIM生产设备及工艺参

我们在饮用水中氨氮含量测定时使用的是按GB中配制的纳氏试剂+哈希DR5000紫外分光光度仪，但是结果跟其他部门鉴定结果出入很大，我们的结果明显过高。因为没有硼酸盐没对样品进行蒸馏，用硫酸锌沉淀后结果差别不大。请为这是什么原因，是不是哈希的设备一般都要哈希的配套药包才能做呢？