人胚肺成纤维细胞

[ 产品简介 ]蔡司全自动活细胞成像平台Celldiscoverer 7 ，是一个高度集成的研究及成像系统，将操作简便的自动化箱式显微镜与研究级倒置显微镜的成像质量和灵活性相结合，在调节光学元件的同时可进行自动校正、检测和聚焦样品。无论是对细胞培养、组织切片，或是小的模式生物体进行 2D 或 3D分析，都能通过这个可靠的自动化活细胞成像平台在更短的时间内采集更多的数据。自动校准程序确保可重复的结果。[ 产品特点 ]&bull 灵活的全自动显微镜&bull 自动校准、自动聚焦样品，提供可重复实验结果&bull 适配不同厚度、材质培养皿&bull 独特的暗室和箱式结构，自动加水装置，长时间稳定培养活细胞&bull 可扩展性强[ 应用领域 ]&bull 细胞生物学，细胞器运动&bull 药理学，药物筛选&bull 模式生物，机体精细结构动态观察&bull 发育生物学，胚胎发育长时间观察&bull 基因/遗传学，荧光蛋白动态过程等生命科学领域研究HeLa Kyoto 细胞表达 H2B-mCherry Tubulin eGFP（Neumann et al., Nature 2010 Apr.1. 464(7289):721-7），每 15 分钟拍摄一次，连续拍摄 72 小时，使用自动加水 （Autoimmersion）功能；绿色（eGFP）单通道、红色（mCherry）荧光，phase-gradient-contrast（PGC，梯度相衬成像），以及三通道的叠加图像。样本由德国海德堡 EMBL 化学生物中心实验室的 I. Charapitsa 提供使用 Celldiscoverer 7 对 348 孔板培养的细胞进行高通量扫描。SH-SY5Y 细胞，Plan-Apo 5x/0.25 物镜搭配 0.5x 变倍体（相当于 2.5x/0.12 物镜）进 行大视野高分辨扫描。高效率成像，每孔一次性成像，无需拼图。成像分辨率高，放大图像可清晰分辨单个细胞。样品由德国波恩神经退行性疾 病中心核心研究实验室 P.Denner 提供。小鼠脑膨胀显微成像，上图：全脑，左下图：轴突束，右下图：锥体细胞。样品置于底部厚度为 1.2 mm 聚苯乙烯上， 使用 2.5× 物镜拍摄 Z 轴序列的景深扩展图 像。染色：YFP 表达神经元。样品由美国麻省理工学院 Boyden 实验室的 S. Asano 提供。用 mitotracker 红色（线粒体）和 DNA 标记（细胞核）的原代肺成纤维细胞，利用共聚焦荧光通道和相机梯度衬度通道混合成像。样品由德国柏林夏里特医院的 A.C. Hocke 提供。

细胞机械刺激培养系统（细胞拉伸仪）细胞牵张是细胞动态培养方法之一，旨在人体内部的动态环境并对体外培养的细胞施加应力刺激。通过自定义程序的机械应力刺激后，可以观察到在常规静态细胞培养中无法获得的细胞变化及反馈。 celltank03细胞应力加载系统CellTank是杭州表面力科技有限公司生产的应用于该领域的科研仪器，公司在产品生产和研发方面拥有完全自主知识产权。celltank细胞牵张培养系统celltank03细胞应力加载系统产品简介celltank03细胞应力加载系统研究表明，不同种类的外界应力刺激对不同种类的细胞以及细胞内表达均产生显著影响。CellTank可在培养细胞的同时，模拟细胞在身体内所受的张应力，给细胞带来外界刺激。模拟中的拉伸应力，几乎可以应用于所有学科中研究的细胞，特别是体内受到周期性拉伸刺激的细胞。了解细胞力学刺激后发生的改变。用于细胞组织再生，疾病原理的解析等研究领域。产品参数说明1. 机器规格 1.1 重量：3kg 1.2 尺寸：350*330*110mm 1.2 供电：输入 AC 100-220V/50-60Hz；输出 DC 15V 3A(max) 2. 拉伸加载 2.1 伸长范围：0~30% 2.2 加载速度：≤30mm/s 2.3 拉伸频率：≤2Hz 3. 运行控制 3.1 波形：正弦波、方波、三角波及其组合celltank细胞牵张培养系统产品配件柔性拉伸培养腔轴向受力均匀，可在长时间连续机械牵拉中表现出良好的再现性。材质：PDMS，高生物相容性； 耐热：180℃； 耐湿：完全； 耐用：20%拉伸比例下约900000次循环； 高透明度，便于进行细胞固定、荧光成像等操作。可选择的多规格固定托架，同时满足对多个细胞培养腔进行加载：4组，底面积32*32mm；8组，底面积20*20mm。产品应用范围例如膀胱细胞、骨细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、小球细胞、韧带细胞、肝细胞、肺泡细胞、神经元细胞、星形胶质细胞、骨骼肌细胞、平滑肌细胞、干/祖细胞、肌腱细胞等研究。国产flexcell产品CellTank在提品质道路上永无止境，使广大客户收获的使用体验。一体式设计，操作不连接电脑； 触控屏幕，可直接对幅值、频率、间隔时间等参数进行修改； 优化设计，培养箱环境中（37°C，相对湿度≥90%）也能防潮散热，长时间工作。产品使用流程用细胞外基质对拉伸腔进行预处理，接种细胞； 待细胞粘附在基底上，开始培养过程； 细胞增殖后，选择牵张模式并开始刺激； 进行细胞观察； 根据实验目标收获/处理细胞，分析凋亡率、表达情况等。

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干细胞克隆挑选目前对干细胞研究需要在基因水平了解更多的相关功能，如负责细胞本身更新的能力或细胞分化成所有组织。干细胞克隆由其他类型细胞组成的混合细胞群，既有转录异质性又有时间标记分化的条件性。分析基因表达后干细胞形态可以在单细胞水平研究细胞转录后的表征，从而提可以更好地了解干细胞的分化。 干细胞体外扩增操作经常是费力又费时，在显微镜下完成大规模的遗传分析并分离单个细胞需要数个小时的时间，而且需要在极少量的缓冲液或 培养基中完成。CellCelector可以长时间地自动收集细胞或细胞集落，从而节省用户的时间，抽吸量根据特定的细胞粘附性单独设置。案例分析：从滋养层细胞分选出hESC克隆细胞通常需要将非分化的干细胞与滋养细胞一起培养，多数情况使用成纤维细胞提供生长环境保证干细胞稳定且可视化。然而，干细胞与滋养细胞的分离需要非常精细的技术手段，这只能通过CellCelector来精确地完成。

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流式、多参数细胞/组织/类器官代谢分析仪 德国cellasys提供的灌流式、多参数细胞/组织/类器官代谢分析仪-IMOLA，是一种基于生物芯片的微生理参数测量系统，对活细胞/组织/类器官的代谢和形态进行无标记实时监测，搭配自动化灌流系统进行换液或者加药，可以实现几天或几周的连续测量，研究药物对活细胞/组织/类器官的影响以及移除药物后的恢复和再生效应。 我们的细胞/组织/类器官代谢分析仪通过生物芯片技术，可以在体外直接研究活细胞或组织、器官在培养过程种的多个参数的变化，包括细胞外酸化（pH）、细胞呼吸（pO2、pCO2）和形态学（电阻）。整个测量过程无需标记、多通道平行进行、连续检测、实时记录。 细胞/组织/类器官代谢主要是指细胞从环境中摄取营养物质，消化吸收后排放出降解物或杂质。大多数碳水化合物，例如葡萄糖，都是细胞的营养物质。在有氧条件下，葡萄糖被细胞摄取后在胞浆内转变成丙酮酸，然后进入三羧酸循环代谢，最终变成二氧化碳并产生能量；在缺氧条件下，葡萄糖在细胞内代谢为乳酸以提供能量。总体而言，细胞代谢增强时，葡萄糖的消耗增加，酸性的代谢产物也相应增加，反之亦然。此外，外界环境因素对贴壁细胞的作用经常影响到细胞的粘附和融合度，而细胞的粘附状态是与细胞骨架的组织性和膜的完整性相关的，如果受到环境因素干扰，细胞则会改变其粘附方式，可能变圆或完全脱离基底。因此，监测这些参数就能很好的了解细胞/组织/类器官内的生理状态和代谢行为。 德国cellasys的细胞/组织/类器官代谢监测仪IMOLA -IVD非常适合与于监测细胞/组织/类器官代谢过程的各种生理学指标，包括产酸，产氧，贴壁电阻，温度。可以单独控制每一个样品的溶液，分别有6个独立的灌流泵来控制每个通道的灌流系统，保证每个通道的独立性，可以连续长时间监测6种细胞/组织/类器官的代谢情况。 德国cellasys的细胞/组织/类器官代谢监测仪，采用的是芯片技术，而不是市场上通用的光学检测技术，其检测灵敏度更高，检测时间更长，而且这两个产品都有密闭的灌流系统，可以适时更换溶液，适合长时间检测细胞/组织/类器官变化，以及观察外界条件（加药等）处理后的细胞再生等效应。? 多个传感器芯片并联平行工作? 非侵入式、实时无标记监测? pH值、O2消耗率、细胞外酸度、贴壁电阻四参数同时测量? 独特的灌流系统可实现随时换液 cellasys的6通道细胞/组织/类器官代谢分析仪相对优点主要在6通道每个孔都有独立灌流和换液的功能，比较适合做长时间的观测和再生医学，以及干细胞、组织、类器官等等。应用案例1. 毒理动力学： 监测培养的活细胞的活力是阐明化学物质的毒理动力学效应的关键。汞的毒性作用是通过纤维母细胞胞外酸化率来检测的，毒素被去除后，细胞恢复了。细胞类型：3T3成纤维细胞，贴壁细胞 10%十二烷基硫酸钠溶液(7次稀释)对成纤维细胞的毒性作用可以通过细胞阻抗(Z)来解释。细胞类型：L929成纤维细胞，贴壁细胞。 有了自动灌流系统，在活体类似的情况下，可以映射到体外实验。细胞外酸化率用于评估1%十二烷基硫酸钠溶液对HepG2肝球蛋白的毒性。细胞类型：Hep-G2肝癌球体细胞 表皮(RhE)是在保持临界气液界面的形成的，实时测量跨表皮细胞层电阻（TEER）.细胞类型：人类表皮细胞（RhE）， transwell细胞小室2. 药物开发 可以研究新药对细胞代谢和细胞形态的影响。测定了抗肿瘤药物牛蒡根素对PANC-1细胞系的影响，记录了实时生物电阻的变化。细胞类型：PANC-1人胰腺癌，贴壁细胞3. 环境监测 以藻类的代谢活性为指标来进行水质监测。本例显示了克氏小球藻在被苯嗪草酮污染后光合活性的降低，去除毒素后光合活性的恢复。细胞类型：chlorella kesslerialgae小球藻，悬浮细胞.4. 科学研究 胰岛，特别是产生胰岛素的beta细胞，可以在不同的营养供应条件下表现出不同的代谢活性。在再生医学研究中，beta细胞或胰岛的代谢测量可以反映其活力和功能能力。在该实验中，当暴露于相当于生理上低血糖和高血糖水平的葡萄糖浓度时，可检测到beta细胞系INS-1E的代谢活动出现明显区别变化，反应了不同条件下的胰岛素分泌。细胞类型:INS-1E，beta细胞系，贴壁细胞。 为了研究藻类生产生物燃料的潜力，可以在不同的环境条件下监测藻类的代谢活性。藻类在光照环境下，进行光合作用，产生氧气；当在黑暗的条件下，消耗更多的氧气。细胞类型：本地藻类，悬浮细胞.5. 个体医疗 为了在治疗前评估药物的有效性，可以测试药物对病人细胞的代谢学影响。6.食品安全 为了研究食品及添加剂的作用，可以监测细胞与添加剂之间的相互作用。工作原理 微生理测量法监测活细胞/组织/类器官的能量代谢活动。除了监测细胞/组织/类器官呼吸和细胞外酸化，细胞粘附和形态参数同样提供了很多关于生命活动的有价值的信息。我们的生物芯片集成了微型传感器来评估这些参数，确保了高灵敏度和稳定性，并且该方法是无需标记，并实时连续提供多个参数的数据。使用DALiA客户端3.1应用程序，可以对测量过程进行编程并记录数据。 IMOLA-IVD技术可以分析由自动化灌流系统之中的生物芯片所获取的代谢数据，数据来源于用新鲜的细胞/组织/类器官培养基或培养基的成分。细胞类型: 针对所有类型的细胞/组织/类器官培养物提供不同的合适的配件。对于特殊需要，还可以通过对生物芯片的涂层来提高培养效果。 悬浮细胞/贴壁细胞/球体/Transwell细胞培养小室

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灌流式、多参数细胞/组织/类器官代谢分析仪—IMOLA 德国cellasys提供的灌流式、多参数细胞/组织/类器官代谢分析仪-IMOLA，是一种基于生物芯片的微生理参数测量系统，对活细胞/组织/类器官的代谢和形态进行无标记实时监测，搭配自动化灌流系统进行换液或者加药，可以实现几天或几周的连续测量，研究药物对活细胞/组织/类器官的影响以及移除药物后的恢复和再生效应。 我们的细胞/组织/类器官代谢分析仪通过生物芯片技术，可以在体外直接研究活细胞或组织、器官在培养过程种的多个参数的变化，包括细胞外酸化（pH）、细胞呼吸（pO2、pCO2）和形态学（电阻）。整个测量过程无需标记、多通道平行进行、连续检测、实时记录。 细胞/组织/类器官代谢主要是指细胞从环境中摄取营养物质，消化吸收后排放出降解物或杂质。大多数碳水化合物，例如葡萄糖，都是细胞的营养物质。在有氧条件下，葡萄糖被细胞摄取后在胞浆内转变成丙酮酸，然后进入三羧酸循环代谢，最终变成二氧化碳并产生能量；在缺氧条件下，葡萄糖在细胞内代谢为乳酸以提供能量。总体而言，细胞代谢增强时，葡萄糖的消耗增加，酸性的代谢产物也相应增加，反之亦然。此外，外界环境因素对贴壁细胞的作用经常影响到细胞的粘附和融合度，而细胞的粘附状态是与细胞骨架的组织性和膜的完整性相关的，如果受到环境因素干扰，细胞则会改变其粘附方式，可能变圆或完全脱离基底。因此，监测这些参数就能很好的了解细胞/组织/类器官内的生理状态和代谢行为。 德国cellasys的细胞/组织/类器官代谢监测仪IMOLA -IVD非常适合与于监测细胞/组织/类器官代谢过程的各种生理学指标，包括产酸，产氧，贴壁电阻，温度。可以单独控制每一个样品的溶液，分别有6个独立的灌流泵来控制每个通道的灌流系统，保证每个通道的独立性，可以连续长时间监测6种细胞/组织/类器官的代谢情况。 德国cellasys公司生产的灌流式、多参数、实时代谢监测的细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD，是一种基于生物芯片的微生理参数测量系统，对活细胞/组织/类器官的代谢和形态进行无标记实时监测，搭配自动化灌流系统进行换液或者加药，可以实现几周的连续测量，研究药物对活细胞/组织/类器官的影响以及移除药物后的恢复和再生效应。通过生物芯片技术，可以培养大尺寸的组织器官（1cm大小）或者transwell小室培养的组织，以及商业化的组织和器官培养物。实时监测培养过程中活细胞/组织/类器官的多个参数的变化，包括细胞外酸化度（pH）、细胞O2消耗率（pO2、pCO2）、贴壁电阻（impedance）和培养基的温度。6个独立的模块可以单独控制每一个样品的溶液,分别有6个独立的灌流泵来控制每个通道的灌流系统，保证每个通道的独立性，可以连续长时间监测6种细胞、组织、类器官的生理活动和代谢情况。 细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD，采用的是芯片技术，而不是通用的光学检测技术，其检测灵敏度更高，检测时间更长，而且这两个产品都有密闭的灌流系统，可以适时更换溶液，适合长时间检测细胞/组织/类器官的生理行为变化，以及观察外界条件（加药等）处理后的细胞/组织/类器官的再生等效应。 多个传感器芯片并联平行工作 非侵入式、实时无标记监测 细胞外酸化度（pH）、细胞O2消耗率（pO2、pCO2）、贴壁电阻和培养基的温度 独特的灌流系统可实现随时换液，可以实现几周的连续测量 可以培养大尺寸的组织器官（1cm大小）或者transwell小室培养的组织，以及商业化的组织和器官培养物 cellasys的6通道细胞/组织/类器官代谢分析仪相对优点主要在6通道每个孔都有独立灌流和换液的功能，比较适合做长时间的观测和再生医学，以及干细胞、组织、类器官等等。 工作原理 微生理测量法监测活细胞、组织、类器官的代谢活动。除了监测细胞呼吸和细胞外酸化，细胞粘附和形态参数同样提供了很多关于生命活动的有价值的信息。我们的生物芯片集成了微型传感器来评估这些参数，确保了高灵敏度和稳定性，并且该方法是无需标记，并实时连续提供多个参数的数据。使用DALiA客户端3.1应用程序，可以对测量过程进行编程并记录数据。 IMOLA-IVD技术可以分析由自动化灌流系统之中的生物芯片所获取的代谢数据，数据来源于用新鲜的细胞培养基或培养基的成分。 细胞类型: 针对所有类型的培养物提供不同的合适的配件； 对于特殊实验还可以通过对生物芯片的涂层来优化培养效果； 悬浮细胞、贴壁细胞、球体、Transwell细胞培养小室； 大尺寸的组织器官（1cm大小）或者transwell小室培养的组织、以及商业化的组织和器官培养物；应用案例1. 毒理动力学： 监测培养的活细胞的活力是阐明化学物质的毒理动力学效应的关键。汞的毒性作用是通过纤维母细胞胞外酸化率来检测的，毒素被去除后，细胞恢复了。细胞类型：3T3成纤维细胞，贴壁细胞 10%十二烷基硫酸钠溶液(7次稀释)对成纤维细胞的毒性作用可以通过细胞阻抗(Z)来解释。细胞类型：L929成纤维细胞，贴壁细胞。 有了自动灌流系统，在活体类似的情况下，可以映射到体外实验。细胞外酸化率用于评估1%十二烷基硫酸钠溶液对HepG2肝球蛋白的毒性。细胞类型：Hep-G2肝癌球体细胞 表皮(RhE)是在保持临界气液界面的形成的，实时测量跨表皮细胞层电阻（TEER）.细胞类型：人类表皮细胞（RhE）， transwell细胞小室2. 药物开发 可以研究新药对细胞代谢和细胞形态的影响。测定了抗肿瘤药物牛蒡根素对PANC-1细胞系的影响，记录了实时生物电阻的变化。细胞类型：PANC-1人胰腺癌，贴壁细胞3. 环境监测（细胞/组织/类器官） 以藻类的代谢活性为指标来进行水质监测。本例显示了克氏小球藻在被苯嗪草酮污染后光合活性的降低，去除毒素后光合活性的恢复。细胞类型：chlorella kesslerialgae小球藻，悬浮细胞。 4. 医学研究（细胞/组织/类器官） 为了在治疗前评估药物的有效性，可以测试药物对病人的细胞/组织/类器官的代谢学影响。胰岛，特别是产生胰岛素的beta细胞，可以在不同的营养供应条件下表现出不同的代谢活性。在该实验中，当暴露于相当于生理上低血糖和高血糖水平的葡萄糖浓度时，可检测到beta细胞系的代谢活动呈现出明显区别，反应了不同条件下的胰岛素分泌的不同。（Gln 谷氨酰胺；Glc葡萄糖）细胞类型：INS-1E，beta细胞系，贴壁细胞 Cisplatin（顺铂）是一种有效的抗癌药物，用于治疗多种实体瘤，如卵巢癌和肺癌等，并用于辅助治疗神经胶质瘤。Cisplatin与DNA的嘌呤碱基交联，干扰DNA的修复机制，引起DNA损伤，激活多条信号转导通路，包括ERK、p53、p73和MAPK，其中对激活凋亡影响最大，诱导细胞凋亡。细胞类型：MCF-7人乳腺癌细胞 5. 类器官监测 芯片上的类器官：通过自动气液界面监测皮肤类器官的细胞产酸率和跨膜电阻值Skin-on-a-Chip，Genes, 2018, 9, 114作为人体最大的器官，皮肤代表着人体内部和外部环境之间的结构学屏障，将体内器官与毒素、病原体隔离开来，并保护内部器官免受紫外线辐射。除了屏障功能，人体皮肤还执行人体的几个基本功能，如热调节、感觉和排泄。皮肤是人体抵御外部环境的影响的第一防护罩，新的化学物质的研究，如药物和毒素，分析和评估其对皮肤完整性的影响就是必不可少的。因此，人们开发了3D皮肤类器官模型来再现体内结构，培养出三维重建人表皮模型（reconstructed human epidermis，RhE），用于在制药、化妆品和环境研究中评估皮肤暴露于外源性物质后的毒性反应。通过IMOLA分析仪监测皮肤类器官模型的细胞产酸率（EAR，pH）和 细胞层的跨膜电阻值（impedance，TEER，[Z]）。通过连续监测RhE细胞模型超过48小时的TEER和EAR数据表明， IMOLA分析仪可以长时间稳定培养芯片上的皮肤类器官，并监测整个代谢过程。 6. 类器官监测 芯片上的类器官：在Transwell上监测人体小肠类器官的跨膜电阻值Tissue-on-a-Chip, Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, August 2020药物毒性的研究之中，重要的一点就是要肠道的吸收。临床前体内评估通常依靠小鼠或大鼠模型。然而动物模型不能完全准确地预测药物对于人体各个方面的效应。从结肠（大肠）癌中提取的Caco-2细胞广泛应用于体外药物吸收和毒性评估的。但是，细胞系和小肠组织的相关性有限，目前只能预测跨细胞（细胞内途径）渗透过程。此外，贴壁单层Caco-2缺乏细胞-细胞和细胞-细胞外基质的相互作用，不能模拟人小肠的多层复杂结构。为了克服这种生理相关性的不足，科学家开发了新的三维重建人体组织模型，在整合的气液界面（ALI）上培养三维小肠类器官—EpiIntestinal-FT。这个基于人体细胞的3D类器官整合了肠上皮细胞、Paneth细胞、M细胞、簇细胞和肠道干细胞以及人肠道成纤维细胞，可以用来表征肠道功能，包括屏障、代谢、炎症和毒性反应。通过三通道IMOLA分析仪，监测EpiIntestinal-FT的细胞层的跨膜电阻值（impedance，TEER，[Z]）。整个测量过程是非侵入性的、实时的，并且周期性自动更新培养基。在电阻值测量中，培养小室的顶部分别注入培养基，PBS和2.0% SDS。该系统在三个通道中都有一个自动的ALI，可以一次在三个芯片上进行平行实验。 7. 类器官串联培养的监测 生物芯片上的多器官串联—多类器官代谢分析Label-free monitoring of whole cell vitality, 35th Annual International Conference of the IEEE EMBS, Osaka, Japan, 3 – 7 July, 2013, 1607-1610IMOLA-IVD是一种用于在线分析活细胞组织类器官的系统解决方案。它利用生物芯片BioChip-C直接监测活细胞组织类器官的代谢学参数和活细胞形态变化（生物阻抗）。样本无需标记，可以并行或串联，连续且实时进行数周监测。使用活细胞/组织/类器官作为样本在体外研究药物的毒性，以评估药物对活细胞/组织/类器官的作用和效应。该系统优势包括：多参数（代谢学和形态学测定）、长期连续、无需标记、高灵敏度以及优化的灌流系统（可进行实时连续换液，加药，去药等过程）。该系统的模块化结构设计，可通过灌流系统实现多器的官串联培养监测（图2）。模块1培养的是具有代谢活性的细胞类器官（如HepG2三维细胞球）。这些细胞将前体药物转化为活性药物后，被灌流系统传送到敏感反应的效应细胞类器官（模块2）中，实时监测其效果。为了得到更准确的结果，必须抑制各个传感器单元之间的电流干扰，减少试验的干扰，将外界的影响降到最低。为确保独立测量所有细胞电信号，我们对细胞呼吸进行了长期监测，并在23小时后向储液瓶中加入了SDS。结果显示模块2中的细胞受到影响的时间比模块1中的细胞晚了20分钟（见图3）。这是由于泵速以及模块1与模块2之间的连接导致的延迟。该系统的优势在于两种不同细胞或类器官可以完全独立监测，这是混合共培养无法实现的。若模块1中细胞代谢活性非常低，则可能无法在介质通过时积累足够的活性物质。对于这种特殊情况，可以使用由蠕动泵来控制和调节液体流动的速度和体积。发表的文献：ASSAYING PROLIFERATION CHARACTERISTICS OF CELLS CULTURED UNDER STATIC VERSUS PERIODIC CONDITIONSGilbert, D.F., Friedrich, O., Wiest, J. Methods in Molecular Biology, vol 2644. Humana, New York, NY, 2023. Systems engineering of microphysiometryJoachim Wiest, Organs-on-a-Chip, Volume 4, December 2022. CASE STUDIES EXEMPLIFYING THE TRANSITION TO ANIMAL COMPONENT-FREE CELL CULTUREWeber, T., Wiest, J., Oredsson, S. Alternatives to Laboratory Animals, 2022. PRACTICAL WORKSHOP ON REPLACING FETAL BOVINE SERUM (FBS) IN LIFE SCIENCE RESEARCH: FROM THEORY INTO PRACTICEEggert, S., Wiest, J., Rosolowski, J. and Weber, T. ALTEX – Alternatives to animal experimentation, 2022. SENSITIVITY AND PHOTOPERIODISM RESPONSE OF ALGAE-BASED BIOSENSOR USING RED AND BLUE LED SPECTRUMSUmar, L., Aswandi, F., Linda, TM., Wati, A., Setiadi, RN. AIP Conf. Proc. 2320, 050016, 2021. Tissue-on-a-Chip: Microphysiometry With Human 3D Models on Transwell InsertsChristian Schmidt, Jan Markus, Helena Kandarova and Joachim Wiest. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, August 2020. FOURIER ANALYSIS IN MICROPHYSIOMETRYWiest, J. In Advances in Medicine and Biology 136, Nova Science Publisher, Inc., 2019. Proliferation characteristics of cells cultured under periodic versus static conditionsGilbert, D.F., Mofrad, S.A., Friedrich, O., Wiest, J. Cytotechnology, 4. December 2018. Skin-on-a-Chip: Transepithelial Electrical Resistance and Extracellular Acidification Measurements through an Automated Air-Liquid InterfaceAlexander F.A., Eggert S., Wiest J. Genes, 9(2), 2018. MicrophysiometryBrischwein M., Wiest J. (2018). In: Bioanalytical Reviews. Springer, Berlin, Heidelberg, 6. February 2018. FETAL BOVINE SERUM (FBS): PAST – PRESENT – FUTUREvan der Valk, J. et al. ALTEX – Alternatives to animal experimentation. 35, 1, 99-118, 2018. A novel lab-on-a-chip platform for spheroid metabolism monitoring,Alexander F.A., Eggert S., Wiest J. Cytotechnology, 70/1, 375-386, 2018. 北京佰司特科技有限责任公司类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；细胞/组织/类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；蛋白稳定性分析仪-PSA-16；单分子质量光度计-TwoMP；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪—BST-100；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000DPN5000；

细胞机械刺激培养系统（细胞拉伸仪）细胞牵张是细胞动态培养方法之一，旨在人体内部的动态环境并对体外培养的细胞施加应力刺激。通过自定义程序的机械应力刺激后，可以观察到在常规静态细胞培养中无法获得的细胞变化及反馈。 celltank03细胞应力加载系统CellTank是杭州表面力科技有限公司生产的应用于该领域的科研仪器，公司在产品生产和研发方面拥有完全自主知识产权。celltank细胞牵张培养系统celltank03细胞应力加载系统产品简介celltank03细胞应力加载系统研究表明，不同种类的外界应力刺激对不同种类的细胞以及细胞内表达均产生显著影响。CellTank可在培养细胞的同时，模拟细胞在身体内所受的张应力，给细胞带来外界刺激。模拟中的拉伸应力，几乎可以应用于所有学科中研究的细胞，特别是体内受到周期性拉伸刺激的细胞。了解细胞力学刺激后发生的改变。用于细胞组织再生，疾病原理的解析等研究领域。产品参数说明1. 机器规格 1.1 重量：3kg 1.2 尺寸：350*330*110mm 1.2 供电：输入 AC 100-220V/50-60Hz；输出 DC 15V 3A(max) 2. 拉伸加载 2.1 伸长范围：0~30% 2.2 加载速度：≤30mm/s 2.3 拉伸频率：≤2Hz 3. 运行控制 3.1 波形：正弦波、方波、三角波及其组合celltank细胞牵张培养系统产品配件柔性拉伸培养腔轴向受力均匀，可在长时间连续机械牵拉中表现出良好的再现性。材质：PDMS，高生物相容性； 耐热：180℃； 耐湿：完全； 耐用：20%拉伸比例下约900000次循环； 高透明度，便于进行细胞固定、荧光成像等操作。可选择的多规格固定托架，同时满足对多个细胞培养腔进行加载：4组，底面积32*32mm；8组，底面积20*20mm。产品应用范围例如膀胱细胞、骨细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、小球细胞、韧带细胞、肝细胞、肺泡细胞、神经元细胞、星形胶质细胞、骨骼肌细胞、平滑肌细胞、干/祖细胞、肌腱细胞等研究。产品CellTank在提品质道路上永无止境，使广大客户收获的使用体验。一体式设计，操作不连接电脑； 触控屏幕，可直接对幅值、频率、间隔时间等参数进行修改； 优化设计，培养箱环境中（37°C，相对湿度≥90%）也能防潮散热，长时间工作。产品使用流程用细胞外基质对拉伸腔进行预处理，接种细胞； 待细胞粘附在基底上，开始培养过程； 细胞增殖后，选择牵张模式并开始刺激； 进行细胞观察； 根据实验目标收获/处理细胞，分析凋亡率、表达情况等。如果您感兴趣的话，我们可以为您提供试样服务，请联系

细胞机械刺激培养系统（细胞拉伸仪）细胞牵张是细胞动态培养方法之一，旨在人体内部的动态环境并对体外培养的细胞施加应力刺激。通过自定义程序的机械应力刺激后，可以观察到在常规静态细胞培养中无法获得的细胞变化及反馈。 celltank03细胞应力加载系统CellTank是杭州表面力科技有限公司生产的应用于该领域的科研仪器，公司在产品生产和研发方面拥有完全自主知识产权。celltank细胞牵张培养系统celltank03细胞应力加载系统产品简介celltank03细胞应力加载系统研究表明，不同种类的外界应力刺激对不同种类的细胞以及细胞内表达均产生显著影响。CellTank可在培养细胞的同时，模拟细胞在身体内所受的张应力，给细胞带来外界刺激。模拟中的拉伸应力，几乎可以应用于所有学科中研究的细胞，特别是体内受到周期性拉伸刺激的细胞。了解细胞力学刺激后发生的改变。用于细胞组织再生，疾病原理的解析等研究领域。产品参数说明1. 机器规格 1.1 重量：3kg 1.2 尺寸：350*330*110mm 1.2 供电：输入 AC 100-220V/50-60Hz；输出 DC 15V 3A(max) 2. 拉伸加载 2.1 伸长范围：0~30% 2.2 加载速度：≤30mm/s 2.3 拉伸频率：≤2Hz 3. 运行控制 3.1 波形：正弦波、方波、三角波及其组合celltank细胞牵张培养系统产品配件柔性拉伸培养腔轴向受力均匀，可在长时间连续机械牵拉中表现出良好的再现性。材质：PDMS，高生物相容性； 耐热：180℃； 耐湿：完全； 耐用：20%拉伸比例下约900000次循环； 高透明度，便于进行细胞固定、荧光成像等操作。可选择的多规格固定托架，同时满足对多个细胞培养腔进行加载：4组，底面积32*32mm；8组，底面积20*20mm。产品应用范围例如膀胱细胞、骨细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、小球细胞、韧带细胞、肝细胞、肺泡细胞、神经元细胞、星形胶质细胞、骨骼肌细胞、平滑肌细胞、干/祖细胞、肌腱细胞等研究。产品CellTank在提品质道路上永无止境，使广大客户收获的使用体验。一体式设计，操作不连接电脑； 触控屏幕，可直接对幅值、频率、间隔时间等参数进行修改； 优化设计，培养箱环境中（37°C，相对湿度≥90%）也能防潮散热，长时间工作。产品使用流程用细胞外基质对拉伸腔进行预处理，接种细胞； 待细胞粘附在基底上，开始培养过程； 细胞增殖后，选择牵张模式并开始刺激； 进行细胞观察； 根据实验目标收获/处理细胞，分析凋亡率、表达情况等。 相关研究 1.中医 仿生针灸 揉眼 视网膜眼部修复  2.机械信号转导，通道表达，piezo1通道3.骨细胞牵张成骨 软骨在生、 骨密度 骨质疏松 4.牵张之后胶原的分泌量 5.肺部仿生，仿呼吸机，体外肺部模型 6.心肌仿生，心肌肥大  7.肌肉收缩 细胞调节分化 脑损伤 8.在自己基底水凝胶，组织膜，纤维，组织工程 微流控芯片 9.组织修复 机械感受 10.药物在机械应变的抗炎和促炎作用  11.3D培养 不同基地牵张  12.肿瘤微环境 蛋白表达标签： 牵张力细胞实验培养仪细胞拉力装置细胞拉伸细胞牵张拉伸细胞拉伸实验细胞牵张细胞牵张实验牵张拉伸培养牵张力细胞拉伸仪如果您感兴趣的话，我们可以为您提供试样服务，请联系：

Quasi Vivo 系统有 3 个不同的腔室可用，每个腔室都旨在满足特定应用的需求。允许浸没式细胞培养，而模块化特性允许互连细胞共培养。与市售的 transwells 和插入物兼容，使用户能够在气液界面培养细胞并创建液/液屏障模型。由标准多孔板占地面积上的 6 个腔室组成，由几乎没有或没有非特异性结合的材料制成。查看 QV500 颠覆传统细胞培养方式，灌流培养系统呼吸道上皮细胞的气液界面培养是研究经空气传播的病原体，如SARS等的常用的模型。传统的培养方式是用TransWell在普通培养箱中静置培养。但是此种培养方式无法模拟培养过程中营养物质和代谢废物在组织内的运输，培养得到的模型通常有各种各样的缺陷，并且所需实验周期较长。呼吸道上皮细胞的常规transwell静止培养方式Quais Vivo（QV600）灌流培养系统（腔室+储液瓶+底座+管道+泵等）而灌流培养系统可为细胞培养提供持久恒定的流动培养环境，最大限度模拟体内环境。研究发现，使用系统进行灌流培养与静态培养相比，气液界面培养的呼吸道上皮细胞（正常人气管上皮细胞 Normal Human BronchialEpithelial Cells，简称NHBE；小气道上皮细胞 Small Airway EpithelialCells，简称SAE），发育分化速度更快，表现为纤毛分化度更高，纤毛运动更强、粘液产生和屏障功能更强。在灌注下加速分化后，将上皮细胞转移到静态条件下，并添加抗原呈递细胞（APC）以研究其在病原体感染后的功能。（ChandorkarP, et al., Fast-track development of an in vitro3D lung/immune cell model to studyAspergillus infections. Sci Rep. 2017 7(1):11644. doi:10.1038/s4-4.）01、人体内所有的细胞都需要营养物质和代谢废物的流动 02、肺部气管/支气管和小气道上皮结构精细，进行体外培养模拟体内环境，对呼吸道病原体的研究至关重要 03、采用全新的灌流培养方式培养呼吸道上皮细胞（采用QV600）相比使用transwell静止培养（StaticConditions),此灌流培养系统（PerfusedConditions）中，呼吸道上皮细胞的生长和分化呈现更好状态04、电镜照片显示，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，分化程度更高 05、使用MUC5B染色可以发现，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，在培养的第7天即可分泌大量粘液。染色可以发现，细胞间的紧密连接发育更完善06、使用WGA染色发现，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，纤毛分化度更高 07、测量TEER（经细胞电阻），采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞TEER值更大，代表得到的上皮细胞膜状结构更完整Quasi Vivo全球应用全球使用Kirkstall公司灌流培养系统的学术及研究机构已达70+个，遍布美国、英国、法国、瑞典、奥地利、意大利、荷兰、瑞士、日本等。目前灌流培养系统已成功用于以下器官模型的培养：1.呼吸系统（培养热点）2. 肝脏3. 肾脏4.心血管5.成纤维细胞6.糖尿病模型7.血脑屏障8.脑组织类器官一、不同细胞，型号怎么选？01、单一细胞QV500：所有腔室培养相同的细胞。02、细胞共培养QV600：每个腔室培养2种或以上细胞。QV900：使管路上游的细胞培养基成为下游细胞的条件培养基。流动培养形成含血管的3D心脏组织 | 再生医学在再生医学领域，怎样培养出含血管的组织，是未来应用能否成功的关键之一。早期的临床试验采用生长因子或细胞注射的方法来修补损伤的心脏，但由于注射细胞造成的炎症反应和局部缺血会在体内造成低氧环境，使得注射的细胞定植率低而死亡率高，不能有效地修复损伤的心脏功能。Quasi VivoQV500流动培养系统为接种在明胶支架上的人间充质干细胞（hMSCs）和人心肌祖细胞（hCMPC）提供充足的氧气，促进细胞和营养物质向支架核心内扩散，并能快速有效地排除组织内的代谢废物，促进血管生成，从而形成由血管样和心脏样细胞组成的组织结构密集的适于体内移植的原组织。（PagliariS, et al. A multistep procedure to prepare pre-vascularized cardiactissue constructs using adult stem cells, dynamic cell cultures,and porous scaffolds. Frontiers in Physiology. 2014 5:210）流动培养系统(QV500型)的蠕动泵将培养基从储液瓶泵到两个串联的培养腔室内，并能保持恒定流速（200μl/min），保证多孔明胶支架内层的培养基流动。构建含血管的3D心脏的实验方案示意图。明胶多孔支架被浸入稀释的Matrigel中，然后转移至内皮分化培养基中。之后将人间充质干细胞接种在支架上，使人间充质干细胞定植在支架培养上并向内皮进行分化，96小时后，将在聚苯乙烯细胞培养板用心脏分化培养基预先定型2周的心脏TNT-GFP人心肌祖细胞接种于血管化的支架上，用QV500流动培养系统在心脏分化培养基中培养7天。采用上述实验方案，对用QV500培养一周后的共培养结构进行检测，发现在支架上有大量细胞定殖。 QV500流动培养条件下支架内部浸润了大量的血管样细胞（红色）和人心肌前体细胞（hCMPC）衍生的心肌细胞（绿色），而静态培养条件下，细胞大部分分布在支架表面。免疫组化结果显示通过QV500动态培养可以促进心肌样细胞（GFP，绿色）和内皮样细胞（VCAM-1阳性细胞，红色）向支架内部浸润。 (A)切片显示QV500流动培养的内皮样细胞（VCAM-1阳性细胞，红色）排列成孔状，形成管状结构，并与心肌样细胞（GFP，绿色）接触。 （B）QV500流动培养条件下，支架内广泛的细胞分布导致形成密集组装的多细胞组织，该组织衍生自所用的人间充质干细胞（hMSCs）和人心肌前体细胞（hCMPC）。总结：在本文中使用的QV500流动培养系统，能增强氧气与营养物质的运输，进而增强工程化心血管组织的活性和功能。与众不同的流动培养系统，让日、美、英、法、瑞士、瑞典等全球70多个研究机构获得了更强大的细胞培养工具，在包括呼吸系统、心血管系统、肝脏、肾脏、肠道、脑组织类器官，以及糖尿病的研究上更进一步。流动培养实现血脑屏障三种细胞共培养 | 阿尔茨海默病新模型血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)在中枢神经系统（CNS）的生理和病理中都起着重要的作用。血脑屏障功能异常会引起包括阿尔茨海默症(AD)等许多神经退行性疾病。组成血脑屏障的毛细血管内皮细胞（capillaryendothelialcells）、周细胞（pericytes）以及星形胶质细胞（astrocytes）间的复杂的相互作用使得很难在体内确定这三种细胞对神经毒性各自的贡献。而流动培养系统可为体外培养这三种细胞提供在不形成屏障的情况下维持细胞间通讯的最佳培养环境。流动培养系统为未来研究不同类型的血脑屏障细胞在中枢神经系统疾病和细胞毒性试验中的特殊作用提供一个有价值的工具。（Miranda-AzpiazuP, et al. A novel dynamic multicellular co-culture system forstudying individual blood-brain barrier cell types in braindiseases and cytotoxicity testing. Sci Rep. 2018 8(1):1-10.）图 1.单独培养的人星形胶质细胞（A，GFAP阳性）、周细胞（B，α-actin阳性）、血管内皮细胞（C，CD31阳性）以及血管内皮细胞形成的紧密连接（D，ZO1阳性）。图 2用QV500培养共享相同的培养基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的示意图（A），R为储液瓶，P为蠕动泵。连接培养基存储瓶的一个QV500流动培养系统的细胞培养腔室（B）。图 3 QV500流动培养系统建立的能同时培养三种不同细胞的多细胞共培养体系。图4几种流动培养方式示意图：A图为单独星形角质细胞流动培养，B图为单独周细胞流动培养，C图为单独血管内皮细胞流动培养，D图为三种细胞组合后一起流动培养。图5用MTT法测细胞活力，与静态培养相比，采用QV500流动培养系统对单独培养血管内皮细胞（HBECs）、周细胞（HBVPs）、星形角质细胞（HAs）（A）或三种细胞共培养（B）的血管内皮细胞的细胞活力有明显升高。图6用MTT法测细胞活力，与静态培养（Static）相比，流动培养（Dynamic）的周细胞（HBVPs）会更早受到Aβ25-35（淀粉样蛋白β肽的Aβ25-35片段，用于阿尔茨海默病的造模）的毒害。总结：本文中研究者利用QV500流动培养系统建立了三种细胞的共培养。这些细胞不接触，通过共享培养基实现细胞间的通信，不形成屏障能更好的研究这些细胞类型单独对不同化合物的响应情况。并且研究者还发现共享相同培养基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的最适流速为50µ l/min。作为创新的细胞培养方法，Quasi Vivo流动培养已经全球70余家zhuanye机构使用验证，获得了令人侧目的培养效果，在美、英、法、日等多国开展了颇具新意的细胞研究，涉及呼吸系统、肝脏、肾脏、心血管、成纤维细胞、糖尿病模型、脑组织类器官等。

仪器简介：ECM2001是一台万能的细胞操作仪器，它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点，　ECM2001在细胞融合时，分三个阶段，预融合、融合、后融合阶段技术参数：ECM2001是一台万能的细胞操作仪器，它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点，　ECM2001在细胞融合时，分三个阶段，预融合、融合、后融合阶段ECM2001在预融合时可产生一种独特的高频交流波，交流波将细胞排列成双体或株琏，以便融合的进行，提高了融合的效率。融合阶段：交流波和直流波的转换之间设有微秒开关，能在极短时间内从交流电转成直流电。在方波长电波的作用下，使细胞高效融合，融合完成后，ECM2001立即产生了低电压的交流波可使已初步融合的细胞更完美的聚集在一起，完成细胞圆体程序。当转基因向导流需要较高的电压和较长的脉冲时，直流方波长脉冲可单独使用，完成转基因。主要特点：应用举例&bull 胚胎操作/核移植/动物克隆 （系统：ECM2001/830）核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体安全出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆&mdash &mdash 多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPL Therapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。

Quasi Vivo 系统有 3 个不同的腔室可用，每个腔室都旨在满足特定应用的需求。允许浸没式细胞培养，而模块化特性允许互连细胞共培养。与市售的 transwells 和插入物兼容，使用户能够在气液界面培养细胞并创建液/液屏障模型。由标准多孔板占地面积上的 6 个腔室组成，由几乎没有或没有非特异性结合的材料制成。查看 QV500‍‍‍‍‍颠覆传统细胞培养方式，灌流培养系统呼吸道上皮细胞的气液界面培养是研究经空气传播的病原体，如SARS等的常用的模型。传统的培养方式是用TransWell在普通培养箱中静置培养。但是此种培养方式无法模拟培养过程中营养物质和代谢废物在组织内的运输，培养得到的模型通常有各种各样的缺陷，并且所需实验周期较长。呼吸道上皮细胞的常规transwell静止培养方式Quais Vivo（QV600）灌流培养系统（腔室+储液瓶+底座+管道+泵等）而灌流培养系统可为细胞培养提供持久恒定的流动培养环境，最大限度模拟体内环境。研究发现，使用系统进行灌流培养与静态培养相比，气液界面培养的呼吸道上皮细胞（正常人气管上皮细胞 Normal Human BronchialEpithelial Cells，简称NHBE；小气道上皮细胞 Small Airway EpithelialCells，简称SAE），发育分化速度更快，表现为纤毛分化度更高，纤毛运动更强、粘液产生和屏障功能更强。在灌注下加速分化后，将上皮细胞转移到静态条件下，并添加抗原呈递细胞（APC）以研究其在病原体感染后的功能。（ChandorkarP, et al., Fast-track development of an in vitro3D lung/immune cell model to studyAspergillus infections. Sci Rep. 2017 7(1):11644. doi:10.1038/s4-4.）01、人体内所有的细胞都需要营养物质和代谢废物的流动 02、肺部气管/支气管和小气道上皮结构精细，进行体外培养模拟体内环境，对呼吸道病原体的研究至关重要 03、采用全新的灌流培养方式培养呼吸道上皮细胞（采用QV600）相比使用transwell静止培养（StaticConditions),此灌流培养系统（PerfusedConditions）中，呼吸道上皮细胞的生长和分化呈现更好状态04、电镜照片显示，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，分化程度更高 05、使用MUC5B染色可以发现，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，在培养的第7天即可分泌大量粘液。染色可以发现，细胞间的紧密连接发育更完善06、使用WGA染色发现，采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞，纤毛分化度更高 07、测量TEER（经细胞电阻），采用灌流培养方式（Perfusedconditions）的呼吸道上皮细胞TEER值更大，代表得到的上皮细胞膜状结构更完整Quasi Vivo全球应用全球使用Kirkstall公司灌流培养系统的学术及研究机构已达70+个，遍布美国、英国、法国、瑞典、奥地利、意大利、荷兰、瑞士、日本等。目前灌流培养系统已成功用于以下器官模型的培养：1.呼吸系统（培养热点）2. 肝脏3. 肾脏4.心血管5.成纤维细胞6.糖尿病模型7.血脑屏障8.脑组织类器官一、不同细胞，型号怎么选？01、单一细胞QV500：所有腔室培养相同的细胞。02、细胞共培养QV600：每个腔室培养2种或以上细胞。QV900：使管路上游的细胞培养基成为下游细胞的条件培养基。流动培养形成含血管的3D心脏组织 | 再生医学在再生医学领域，怎样培养出含血管的组织，是未来应用能否成功的关键之一。早期的临床试验采用生长因子或细胞注射的方法来修补损伤的心脏，但由于注射细胞造成的炎症反应和局部缺血会在体内造成低氧环境，使得注射的细胞定植率低而死亡率高，不能有效地修复损伤的心脏功能。Quasi VivoQV500流动培养系统为接种在明胶支架上的人间充质干细胞（hMSCs）和人心肌祖细胞（hCMPC）提供充足的氧气，促进细胞和营养物质向支架核心内扩散，并能快速有效地排除组织内的代谢废物，促进血管生成，从而形成由血管样和心脏样细胞组成的组织结构密集的适于体内移植的原组织。（PagliariS, et al. A multistep procedure to prepare pre-vascularized cardiactissue constructs using adult stem cells, dynamic cell cultures,and porous scaffolds. Frontiers in Physiology. 2014 5:210）流动培养系统(QV500型)的蠕动泵将培养基从储液瓶泵到两个串联的培养腔室内，并能保持恒定流速（200μl/min），保证多孔明胶支架内层的培养基流动。构建含血管的3D心脏的实验方案示意图。明胶多孔支架被浸入稀释的Matrigel中，然后转移至内皮分化培养基中。之后将人间充质干细胞接种在支架上，使人间充质干细胞定植在支架培养上并向内皮进行分化，96小时后，将在聚苯乙烯细胞培养板用心脏分化培养基预先定型2周的心脏TNT-GFP人心肌祖细胞接种于血管化的支架上，用QV500流动培养系统在心脏分化培养基中培养7天。采用上述实验方案，对用QV500培养一周后的共培养结构进行检测，发现在支架上有大量细胞定殖。 QV500流动培养条件下支架内部浸润了大量的血管样细胞（红色）和人心肌前体细胞（hCMPC）衍生的心肌细胞（绿色），而静态培养条件下，细胞大部分分布在支架表面。免疫组化结果显示通过QV500动态培养可以促进心肌样细胞（GFP，绿色）和内皮样细胞（VCAM-1阳性细胞，红色）向支架内部浸润。 (A)切片显示QV500流动培养的内皮样细胞（VCAM-1阳性细胞，红色）排列成孔状，形成管状结构，并与心肌样细胞（GFP，绿色）接触。 （B）QV500流动培养条件下，支架内广泛的细胞分布导致形成密集组装的多细胞组织，该组织衍生自所用的人间充质干细胞（hMSCs）和人心肌前体细胞（hCMPC）。总结：在本文中使用的QV500流动培养系统，能增强氧气与营养物质的运输，进而增强工程化心血管组织的活性和功能。与众不同的流动培养系统，让日、美、英、法、瑞士、瑞典等全球70多个研究机构获得了更强大的细胞培养工具，在包括呼吸系统、心血管系统、肝脏、肾脏、肠道、脑组织类器官，以及糖尿病的研究上更进一步。流动培养实现血脑屏障三种细胞共培养 | 阿尔茨海默病新模型血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)在中枢神经系统（CNS）的生理和病理中都起着重要的作用。血脑屏障功能异常会引起包括阿尔茨海默症(AD)等许多神经退行性疾病。组成血脑屏障的毛细血管内皮细胞（capillaryendothelialcells）、周细胞（pericytes）以及星形胶质细胞（astrocytes）间的复杂的相互作用使得很难在体内确定这三种细胞对神经毒性各自的贡献。而流动培养系统可为体外培养这三种细胞提供在不形成屏障的情况下维持细胞间通讯的最佳培养环境。流动培养系统为未来研究不同类型的血脑屏障细胞在中枢神经系统疾病和细胞毒性试验中的特殊作用提供一个有价值的工具。（Miranda-AzpiazuP, et al. A novel dynamic multicellular co-culture system forstudying individual blood-brain barrier cell types in braindiseases and cytotoxicity testing. Sci Rep. 2018 8(1):1-10.）图 1.单独培养的人星形胶质细胞（A，GFAP阳性）、周细胞（B，α-actin阳性）、血管内皮细胞（C，CD31阳性）以及血管内皮细胞形成的紧密连接（D，ZO1阳性）。图 2用QV500培养共享相同的培养基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的示意图（A），R为储液瓶，P为蠕动泵。连接培养基存储瓶的一个QV500流动培养系统的细胞培养腔室（B）。图 3 QV500流动培养系统建立的能同时培养三种不同细胞的多细胞共培养体系。图4几种流动培养方式示意图：A图为单独星形角质细胞流动培养，B图为单独周细胞流动培养，C图为单独血管内皮细胞流动培养，D图为三种细胞组合后一起流动培养。图5用MTT法测细胞活力，与静态培养相比，采用QV500流动培养系统对单独培养血管内皮细胞（HBECs）、周细胞（HBVPs）、星形角质细胞（HAs）（A）或三种细胞共培养（B）的血管内皮细胞的细胞活力有明显升高。图6用MTT法测细胞活力，与静态培养（Static）相比，流动培养（Dynamic）的周细胞（HBVPs）会更早受到Aβ25-35（淀粉样蛋白β肽的Aβ25-35片段，用于阿尔茨海默病的造模）的毒害。总结：本文中研究者利用QV500流动培养系统建立了三种细胞的共培养。这些细胞不接触，通过共享培养基实现细胞间的通信，不形成屏障能更好的研究这些细胞类型单独对不同化合物的响应情况。并且研究者还发现共享相同培养基的星形胶质细胞、周细胞和血管内皮细胞的最适流速为50µl/min。作为创新的细胞培养方法，Quasi Vivo流动培养已经全球70余家zhuanye机构使用验证，获得了令人侧目的培养效果，在美、英、法、日等多国开展了颇具新意的细胞研究，涉及呼吸系统、肝脏、肾脏、心血管、成纤维细胞、糖尿病模型、脑组织类器官等。

Naturethink细胞流体剪切力系统_北京_上海别名：剪切应力装置、流体切应力装置、流体力学细胞培养系统产品型号：NK110-STD 产品介绍：血流环境下形成的对于细胞的流体剪切力作用在人体内几乎无处不在，这种作用力影响着细胞的生长，粘附，分化，衰老及死亡的各个环节，进而改变细胞内基因的表达，同时改变着细胞周边的微环境，形成了作用与反作用的效果，在没有力学作用环境下的细胞却难以表达出来这样的效果。细胞流体剪切力系统用以实现模拟生理状态及非生理状态下血流流体剪切力对于细胞、组织的刺激作用，可实现细胞流体环境下的细胞粘附实验、内皮细胞培养实验（内皮细胞培养实验、内皮细胞和平滑肌细胞混合培养、干细胞内皮化实验）、骨细胞生成实验（剪切力刺激骨髓间充质干细胞诱导分化实验）、剪切力刺激骨髓间充质干细胞诱导分化实验、基因诱导实验、药物作用实验（血流状态下药物药效作用实验)、胶质细胞血流力学刺激实验、间质流刺激肿瘤细胞实验、血流刺激循环肿瘤细胞侵袭实验等。在不同值的流体剪切力下可以进行不同的实验。此外足够的细胞培养量，也满足了提取蛋白的需求。细胞流体剪切力系统在科研前期的使用过程中尽量降低了摸索和测试的成本，并以极低的耗材成本来实现相关的流体剪切力实验，同时系统可拆卸，可灭菌，经久耐用。用户也可以通过想象力和创新赋予实验更多可能，如： 牙周膜成纤维细胞流体剪切应力刺激培养、动脉静脉流体剪切力刺激培养、内皮细胞流体剪切力刺激培养、动脉粥样硬化流体剪切力细胞培养、骨肉瘤细胞流体力学细胞培养 、主动脉血流刺激细胞培养等。适用于心脑血管、肿瘤、骨科、口腔、内科、眼科、药物代谢、组织工程、类器官培养、干细胞培养、组织器官培养、器官移植等多个领域。 参数说明：培养面积：满足提取蛋白—64cm² ；流体剪切力刺激范围：0-50dyne/cm² ；流体剪切力模式：稳定流、脉冲流、振荡流；预置不同流体剪切力刺激在同次实验中顺序进行。 产品优势：应用范围广，适合细胞的长时间细胞培养；多种剪切力刺激模式；培养面积与培养液比小；四通道培养：每个通道可进行不同的细胞培养 用户自定义时间、流体剪切力和方向等 加载生理性/非生理性血流剪切应力；长时间使用，更接近生理状态。Naturethink是国内较早从事仿生细胞培养仪器研发与销售的企业，多年的技术沉淀，使得我们在人体仿生环境培养领域拥有独立自主的研发能力，并拥有核心技术；我们为用户提供仪器设备的改进、设计及研发服务。同时我司还提供多种规格平行平板流动腔小室、细胞流体剪切应力系统、细胞共培养流体剪切应力实验系统、牵张力细胞实验系统装置、、人体血液循环模拟系统、细胞张应力（应变）刺激实验系统、细胞压力刺激实验室系统、细胞综合应力实验系统、血液循环模拟培养系统、细胞组织构建培养系统等。

仪器简介：ECM2001是一台万能的细胞操作仪器，它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点，　ECM2001在细胞融合时，分三个阶段，预融合、融合、后融合阶段 ECM2001在预融合时可产生ECM2001是一台万能的细胞操作仪器，它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点，　ECM2001在细胞融合时，分三个阶段，预融合、融合、后融合阶段 ECM2001在预融合时可产生技术参数：ECM2001是一台万能的细胞操作仪器，它综合了电穿孔仪和电融合仪的特点，　 ECM2001在细胞融合时，分三个阶段，预融合、融合、后融合阶段 ECM2001在预融合时可产生一种独特的高频交流波，交流波将细胞排列成双体或株琏，以便融合的进行，提高了融合的效率。 融合阶段：交流波和直流波的转换之间设有微秒开关，能在极短时间内从交流电转成直流电。在方波长电波的作用下，使细胞高效融合， 融合完成后，ECM2001立即产生了低电压的交流波可使已初步融合的细胞更完美的聚集在一起，完成细胞圆体程序。 当转基因向导流需要较高的电压和较长的脉冲时，直流方波长脉冲可单独使用，完成转基因。主要特点：应用举例 &bull 胚胎操作/核移植/动物克隆 （系统：ECM2001/830） 核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体安全出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。Ian Wilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆&mdash &mdash 多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPL Therapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。

我们zui新的单细胞分选系统-cellenONE(单细胞分选+单细胞测序建库利器+单细胞微阵列）-分选后得到的单细胞精度高以及活性高! 一：单细胞分选（单细胞精zhun率高达98%）cellenONE X1是一款基于压电声学技术的自动化单细胞分选系统，可以在多种微孔板(96孔、384孔、1536孔、 5184孔、自制微孔板)上精确沉积细胞。有限稀释法和大多数微流控技术都遵循泊松分布，导致每个位置有多个细胞，这样会使效率低下，且数据有偏差。 cellenONE X1使用视觉反馈，以确保在每个位置只有单个细胞！ a：喷头区域没有单个细胞 b：喷头区域有单个细胞 c: 喷头区域有多个细胞cellenONE X1仅仅选取含有单个细胞的液滴（b)直接分选到指定的孔板或微孔中。所有不符合设定条件的细胞都会被放回样本管中，确保没有细胞被浪费，也可以重新吸取回收细胞进行二次分选！设备对每一滴样品进行实时图像分析并拍照留底记录整个实验过程。到目前为止成功分离出的部分细胞和颗粒：细胞系：如CHO，杂交瘤，HEK293T，Hela，A549，PC3，H1975，HepaRG，Jurkat等原代细胞：如PBMC(包括B细胞和T细胞部分），成纤维细胞，角质形成细胞，黑素细胞，心肌细胞，HUVEC,神经干细胞等细胞核：来自细胞系，新鲜冷冻(FF)和福尔马林固定石蜡包埋（FFPE)组织切片等样本的细胞核微球：直径为2-30um的微球（带细胞标签的微球用于细胞标记）二：开放的文库构建实验——极小反应体系、极低试剂成本cellenONE X1是一个开放式平台，可提供单细胞分选和纳升级试剂加样操作。这种多功能性，使得现在越来越多的单细胞文库制备工作得以自动化执行。 而且，纳升级别的操作精度将极大地降低试剂耗材的成本。 三：cellenONE 技术:• 基于温和而高精度的压电声学分配技术.• 对分配器喷嘴内的细胞进行自动光学监.• 根据每个样品，机器对分配步骤测绘.• 细胞的位置决定是否满足单细胞条件，从而决定是否在下一滴中被分选. cellenONE是法国cellenion公司全新推出应用与单细胞测序及单细胞克隆领域前期获取单细胞的全自动分选系统，与目前市场上常见的流式细胞仪（FACS）相比有以下优点：1.没有最小样本容量或细胞数与传统流式细胞分析仪,CellenONE可以处理任何小样本数量从1μl回收率高的细胞悬液，FACS通常需要至少2万个细胞来进行单细胞分离，而CellenONE可以将细胞从50个细胞中分离出来!!!2.非常温和的分配(对克隆应用很重要)脆弱细胞的剪切应力更低(更好的生存能力),分选过后细胞活性高于FACS分选的细胞3.单细胞率和单细胞活性分选后得到的单细胞率可以高达95%，单细胞活性可以高达85%，远高于其他单细胞分选仪器4.多样性不仅可以分选单细胞，还可以分选微珠和nl级别试剂，可以大大减少试剂消耗成本，可以兼容96、384、1536孔板或客户自定义微孔板

类器官串联培养系统（细胞反应器）--- HUMIMIC 类器官技术平台是一种微流控微生理系统平台，能够维持和培养微缩的等效器官，模拟其各自的全尺寸对应器官的生物学功能和生物的主要特征，如生物流体流动，机械和电耦合，生理组织与流体、组织与组织的比率。 类器官串联芯片培养系统包括控制单元和芯片，控制单元能够模拟人体内生理环境，包括温度、压力、真空度、微流道循环频率、时间等参数，芯片有不通的微流道设计，针对不同的器官可以单独设置提供相应的培养条件，提供精准的培养和分化环境。类器官串联芯片培养系统可提供不同类器官的串联共培养方案，避免单一类器官无法模拟人体复杂生理学条件下器官相互通讯交流的不足。通过类器官模拟人类器官组织的生理发育过程，应用于疾病模型、肿瘤发生、以及药物安全性、有效性、毒性、ADME等方面的评估，旨在减少和取代实验室动物测试，简化人体临床试验。 类器官是指在结构和功能上都类似来源器官或组织的模拟物，通过取特定器官的干细胞（iPS/ES），或者利用人的多能干细胞定向诱导分化，能获得微型的器官样的三维培养物，在体外模拟人体器官发育过程。 类器官，具有某一器官多种功能性细胞和组织形态结构的三维（3D）培养物，主要来源于人具有多项分化潜能的多能干细胞（包括人胚胎干细胞和人诱导多能干细胞iPSCs）或成体干细胞。人多能干细胞能分化为个体所有类型的细胞，在体外，经过诱导分化，模拟人体器官发育过程，能使人多能干细胞直接分化形成各种类器官；不同组织器官都存在内源组织干细胞，在维持各器官的功能形态发挥着重要作用。这些干细胞在体外一定的诱导条件下，可以自组织形成一个直径仅为几毫米的具有组织结构和多种功能细胞的三维培养物。器官芯片是获取两个或两个以上不同的类器官，并且放置在特定的培养芯片上进行共培养，能模拟人体的多个器官参与的生理学过程。 基于这一定义，可以发现类器官具备这样几个特征： 必须包含一种以上与来源器官相同的细胞类型； 应该表现出来源器官所特有的一些功能； 细胞的组织方式应当与来源器官相似。 类器官作为一个新兴的技术，在科学研究领域潜力巨大，包括发育生物学、疾病病理学、细胞生物学、再生机制、精准医疗以及药物毒性和药效试验。与传统2D细胞培养模式相比，3D培养的类器官包含多种细胞类型，能够形成具有功能的“微器官”，能更好地用于模拟器官组织的发生过程及生理病理状态，因而在基础研究以及临床诊疗方面具有广阔的应用前景。 类器官培养使研究人体发育提供了不受伦理限制的平台，为药物筛选提供了新的平台，也是对现有2D培养方法和动物模型系统的高信息量的互补 。 此外，类器官为获取更接近自然人体发育细胞用于细胞治疗成为可能。通过类器官繁殖的干细胞群取代受损或者患病的组织，类器官提供自体和同种异体细胞疗法的可行性，未来这一技术在再生医学领域也拥有巨大的潜力 。使用这项技术，采用CRISPR/Cas9能够纠正体外遗传异常并能够将健康的转基因细胞再次回输入患者体内，并在后期整合入组织内。在精准医学应用中，患者衍生的类器官也被证明为有价值的诊断工具。在进行治疗之前，采用从患者样本来源的类器官筛查患者体外药物反应，旨在为癌症和囊胞性纤维症患者的护理提供指导并预测治疗结果。随着类器官培养系统以及其实验开发技术的不断发展，类器官应用到了各大研究领域。 类器官可以模拟人体的内外环境和人体器官，帮助研究人员观测用药会对人体器官功能产生什么样的影响。在提倡精准医学和个体化治疗的时代，类器官研究比传统的二维细胞培养更具有针对性，并且可以区别不同癌症对于相同药物的反应。不仅如此，研究者还希望通过诱导多功能干细胞强大的再生潜能，体外生成新的器官或组织，然后移植入体内以替代损坏的组织器官。 类器官培养系统--- HUMIMIC的应用案例 类器官的应用举例---疾病模型 类器官的研究还可用于于疾病模型，如发育相关问题，遗传疾病，肿瘤癌症等。通过使用患者的iPSCs可建立有价值的疾病模型，并能在体外模拟重现病人疾病模型；同时，类器官的建立可以实现对药物药效和毒性进行更有效、更真实的检测。由于类器官可以直接由人类iPSCs直接培养生成，相比于动物模型很大程度上避免了因动物和人类细胞间的差异而导致的检测结果不一致。 类器官的应用举例---药效和毒理测试 可以从患者来源的健康和肿瘤组织样品中建立类器官。与此同时类器官培养物可用于药物筛选，这可将肿瘤的遗传背景与药物反应相关联。来自同一患者健康组织的类器官的建立提供了通过筛选选择性杀死肿瘤细胞而又不损害健康细胞的化合物来开发毒性较小的药物的机会。自我更新的肝细胞类器官培养物可用于测试潜在新药的肝毒性（临床试验中药物失败的原因之一）。在该实施例中，药物B似乎最适合于治疗患者，因为它特异性杀死肿瘤类器官并且不引起肝毒性。 类器官的应用举例---类器官“生物Bank”根据目前的研究进展，建立了活体类器官“生物bank”。其中，肿瘤来源的类器官在表型和基因上都与肿瘤相似。另外，肿瘤类类器官生物库使生理学相关的药物筛选成为可能。活体类器官生物库可用于确定类器官是否对个体患者的药物反应，具有预测价值。从结直肠癌患者的健康组织和肿瘤组织中提取的三维有机组织培养物被用于高通量药物筛选，以确定可能促进个性化治疗的基因药物相关性 类器官的应用举例---重演肿瘤形成 类器官的培养和建立，可用于研究肿瘤生成过程中的突变过程，比如说，通过从同一肿瘤的不同区域培养无性繁殖的类细胞器，可以用来研究肿瘤内部的异质性。来自不同健康器官的类器官的生长，然后对培养物进行全基因组测序，可以分析器官特异性突变谱。通过生长来自同一肿瘤不同区域的类器官，可以用于研究肿瘤内异质性。区域特异性突变谱可以通过类器官的全基因组测序来揭示。使用与上述相似的方法，可以利用类器官来研究特定化合物对健康细胞和肿瘤细胞突变谱的影响。 类器官培养系统--- HUMIMIC的成功培养的器官举例 肠类器官： HansClever 课题组证实单一的Lgr5 +干细胞能够在体外持续增殖并自组装形成隐窝－绒毛样的小肠上皮结构。进一步的研究结果显示，单个成人Lgr5 + 干细胞也能在体外成功扩增成结肠类器官，将这种功能性的结肠上皮移植到硫酸葡聚糖诱导的急性结肠炎小鼠模型中可以修复其受损的结肠上皮。这提示利用单一成人结肠干细胞体外扩增进行结肠干细胞治疗是可行的。有学者还应用人诱导型多能干细胞( induced pluripotent stem cells，iPSCs) 直接定向分化为小肠组织的方法明确了Wnt3a 蛋白和成纤维细胞生长因子4 是后肠特定分化所必需的物质，而且，这种iPSCs体外构建的人体肠道组织中存在的小肠干细胞，也具有小肠特有的吸收和分泌功能。这有助于未来人肠道疾病药物的设计研究，可大大提高了药物利用率。目前，已有学者构建了小鼠小肠3D 类器官来进行P-糖蛋白抑制剂的筛选，为P-糖蛋白介导的药物转运研究提供了强有力的工具。 肝类器官： 2013 年，Takebe 等将人多能干细胞来源的肝细胞、人间充质干细胞和人内皮细胞混合后在基质胶中培养，发现3 种细胞自组装成3D 化肝芽，将该肝芽移植到丙氧鸟苷诱导肝脏衰亡的TKNOG 小鼠体内后发现这种肝芽可以连接小鼠肠系膜血管，小鼠也出现了人类特有的药物代谢过程。这为肝脏器官发生的研究提供了有益尝试。大型哺乳动物的类器官再造工程也许能加速人类器官移植治疗和疾病致病机制研究的进展。2015 年，Nantasanti 等利用狗的肝脏干细胞构建了可分化为功能性肝细胞的肝类器官模型，能用于铜潴留症的治疗。猫被认为是非常适用于研究人类代谢性疾病的模型，所以利用猫的胆道组织构建肝类器官，可能是原发性肝胆疾病研究及药物筛选的有益工具，但至今也未见利用猫建立长期保持基因稳定的肝脏干/祖细胞培养体系的报道。 胰腺类器官： 有学者发现，当控制骨形态发生蛋白碱性成纤维细胞生长因子、激活素A 和Wnt3a 的表达水平或使用一些小分子化合物进行干预时，可以控制内胚层细胞向特定的方向分化，最终形成胰腺。目前，构建胰岛类器官的主要方法包括利用各种干祖细胞产生胰岛样细胞群和利用各种来源的胰腺细胞悬液或胰腺组织块自组装成拟胰岛体。2011 年，Saito 等将人iPSCs 和胚胎小鼠胰岛细胞体外共培养，最后形成能够产生胰岛素的不成熟细胞群，该细胞群由胰岛α 细胞包绕中央的β 细胞构成，这种结构和成年鼠胰岛相似，将其移植到链脲菌素诱导的高血糖小鼠模型中后发现小鼠血糖水平得到极大改善。而进一步的体内实验研究还需要关注如何规避免疫反应、促进再血管化、促进类器官分化发育等问题，在这方面，Sabek 等提出制备纳米腺体来促进胰岛发挥作用，这种纳米腺体是运用3D 打印技术制作可吸收聚合物胶囊包裹胰岛样细胞团形成的，这可能是未来胰岛类器官应用的一种思路。 脑类器官： 近来，谱系重编程技术为获取特异性种子细胞提供了新的途径。Lancaster 等通过加入不同生长因子的方法将人类胚胎干细胞( embryonic stem cell，ESC) 和iPSC 在神经培养基3D 培养出了与9 ～ 10周胚胎大脑类似的“类大脑”，此类迷你大脑具备人类大脑发育初期的一些主要区域，也出现了背侧皮层、腹侧前脑等可辨认的特征，但由于缺乏一些特定的特征，如小脑、海马状突起等，这些区域无法应用于干细胞模型。之后，该研究者利用小颅畸形患者的皮肤成纤维细胞诱导形成了患者特异性iPSC 细胞系，并应用后者构建了小颅畸形脑类器官模型，通过对照实验发现，正常ESC和该iPSCs 在类器官形成上并没有明显差异，但是后者形成的类器官中有大量未成熟的神经元分化，这为大脑发育紊乱类疾病的研究提供了一定的思路。2015年Kirwan 等应用人iPSC 体外构建了人大脑皮层神经网络，能够模拟人体内皮层网络的发育和功能，这表明可以在体外通过构建大脑类器官来进行人类前脑神经网络生理学机制的研究。 前列腺类器官： 2014 年，研究人员首次在实验室利用来自转移性前列腺癌患者的活检标本和去势抵抗性前列腺癌( castration-resistant prostate cancer，CＲPC) 患者的循环肿瘤细胞成功培育出7 个前列腺癌类器官，这些前列腺癌类器官以及从中获得的肿瘤移植物的组织结构及基因突变谱与患者转移灶样本高度相似。Nicholson 等［21］也应用类器官培养技术成功在体外构建患者来源的异种移植物模型，相比于人源性肿瘤组织异种移植及基因工程鼠模型，这种新型的患者来源的类器官能更好地代表CＲPC 等高级别前列腺癌，还能代表前列腺癌的庞大临床疾病谱，而这种疾病谱是目前仅有的前列腺癌细胞系无法代表的，因而在前列腺癌药物筛选和个体化治疗中展现出巨大的应用前景。 类器官串联培养系统--- HUMIMIC的技术方案：多器官串联培养，在没有病人的情况下测试病人类器官串联芯片培养系统包括控制单元和芯片，控制单元能够模拟人体内生理环境，包括温度、压力、真空度、微流道循环频率、时间等参数，芯片有不同的微流道设计，针对不同的器官可以单独设置提供相应的培养条件，提供精准的培养和分化环境。类器官串联芯片培养系统可提供不同类器官的串联共培养方案，避免单一类器官无法模拟人体复杂生理学条件下器官相互通讯交流的不足。通过类器官模拟人类器官组织的生理发育过程，应用于疾病模型、肿瘤发生、以及药物安全性、有效性、毒性、ADME等方面的评估，旨在减少和取代实验室动物测试，简化人体临床试验。 为获取更高相关与准确的测试结果，我们开发了人体器官模型的自动芯片测试：配备具有指示相关性的器官模型的芯片，以能够在接触生物体之前检测其安全性和有效性；最终为芯片配备患者自身相关病变器官的亚基，以评估整个个性化治疗的效果； 人体生理反应往往涉及更多介质循环和不同组织间相互作用，多器官芯片才能全面反映出机体器官功能的复杂性、完整性以及功能变化，一个相互作用的系统才能更好的模拟整个系统中器官和组织的不同功能。可提供不同类器官的串联培养解决方案，避免单一类器官无法模拟人体复杂生理学条件下器官相互通讯交流的不足。把多种不同器官和组织培养在芯片上，然后通过微通道连接起来，集成一个相互作用的系统，从而模拟人体中的不同功能器官的交流通讯和互相作用。TissUse专有的商用MOC技术支持的器官培养物的数量范围从单个器官培养到支持复杂器官相互作用研究的器官数量，包括单器官、二器官、三器官和四器官培养的商业化的平台。成功的案例包括：肝脏、肠、皮肤、血管系统、神经组织、心脏组织、软骨、胰腺、肾脏、毛囊、肺组织、脂肪组织、肿瘤模型和骨髓以及各自的多器官串联组合方案。德国TissUse公司专注于类器官培养系统研究22年，推出的HUMIMIC类器官串联芯片培养系统，得到FDA的推荐，可提供不同类器官的串联培养解决方案，避免单一类器官培养无法模拟人体器官相互通讯关联的缺陷，同时也提供相关的技术方案和后续方法试剂支持，属于国际上少有的“Multi-Organ-Chip” 和“Human-on-a-chip”的方案提供者。相关方案已被广泛应用于药物开发、化妆品、食品与营养和消费产品等多个领域. 类器官串联培养系统---HUMIMIC系统 一、专业化的硬件（控制单元） 主机（控制单元）是一个紧凑的台式设备，能够模拟人体内生理环境，包括温度、压力、真空度、微流道循环频率、时间等参数。7寸触摸显示器，控制面板可以在整个过程中对每个多器官芯片分别进行调节，无需外接电脑，软件操控友好；可以自主设置每个器官芯片的培养条件，包括温度、压力、真空度、微流道循环频率、时间等参数；可串联培养2个不同（或相同）、3个不同的、4个不同的类器官；3个连接拓展口，用于连接其他设备；同时操控高达8个Chip3 / Chip3 plus，4个Chip2 /Chip4或这些的组合； 二、类器官芯片芯片有不同的微流道设计，针对不同的器官可以单独设置提供相应的培养条件，提供精准的培养和分化环境；芯片的泵腔内的柔性膜通过连接的管道，受到压力或真空的作用，在微流道之中产生脉动体流；二联类器官芯片可以在一个芯片上串联培养2个不同（或相同）的类器官；三联类器官芯片可以在一个芯片上串联培养3个不同的类器官；四联类器官芯片可以在一个芯片上串联培养4个不同的类器官； 三、服务方案（细胞、试剂，诱导方案） 四、器官模型和串联培养技术 类器官串联培养系统---HUMIMIC的应用案例1、神经球和肝脏的串联共培养（柏林工业大学）-二联器官共培养的药物敏感性2015, Journal of Biotechnology, A multi-organ chip co-culture of neurospheres and liver equivalents for long-term substance testing目前用于药物开发的体外实验平台无法模拟人体器官的复杂性，而人类和实验室动物的系统差异巨大，因此现有的方案都不能准确预测药物的安全性和有效性。德国、葡萄牙和俄罗斯的研究团队通过TissUse GmbH公司的微流控多器官芯片（MOC）平台，测试毒物对多器官的作用，揭示了基于微流控的多器官串联共培养能够更好的模拟人体的生理学环境。在体外培养条件下，由于氧气和营养供应有限，类器官培养往往会随着时间的推移而去分化。然而微流控系统中通过持续灌注培养基，更好地控制环境条件，如清除分泌物和刺激因子，并且培养基以可控流速通过，以模拟血流产生的生物剪切应力，因此类器官培养物可以保持良好的生长状态。 双器官串联芯片（2-OC）能够串联共培养人的神经球（NT2细胞系）和肝脏类器官（肝HepaRG细胞和肝HHSteC细胞）。在持续两周的实验中，反复加入神经毒剂2,5-己二酮，引起神经球和肝脏的细胞凋亡。跟单器官培养相比，串联共培养对毒剂更敏感。因此，多器官串联共培养在临床研究中可以更准确地预测药物的安全性和有效性。推测这是因为一个类器官的凋亡信号导致了第二个类器官对药物反应的增强，这一推测得到了实验结果的支持，即串联共培养的敏感性增加主要发生在较低浓度药物中。 2、心脏肝脏骨骼皮肤的串联共培养（哥伦比亚大学）-四联器官共培养的复杂通讯模型哥伦比亚大学的科学家也开发了一种多器官串联芯片，建立了串联共培养心脏、肝脏、骨骼、皮肤的技术，发表于2022年的Nature Biomedical Engineering，中通过血液循环串联培养4个类器官，保持了各个类器官的表型，还研究了常见的抗癌药阿霉素对串联芯片中的类器官以及血管的影响。结果显示药物对串联共培养类器官的影响与临床研究结果非常相似，证明了多器官串联共培养能够成功的模拟人体中的药代动力学和药效学特征。“最值得注意的是，多器官串联芯片能够准确的预测出阿霉素的心脏毒性和心肌病，这意味着，临床医生可以减少阿霉素的治疗剂量，甚至让患者停止该治疗方案。“Gordana Vunjak-Novakovic, Department of Biomedical Engineering, Columbia University 3、胰岛和肝脏在芯片上的串联共培养（阿斯利康）-二联器官共培养的反馈通讯2017, Nature Scientific Reports, Functional coupling of human pancreatic islets and liver spheroids on-a-chip: Towards a novel human ex vivo type 2 diabetes model人类系统性疾病的发生过程都是通过破坏两个或多个器官的自我平衡和相互交流。研究疾病和药疗就需要复杂的多器官平台作为体外生理模型的工具，以确定新的药物靶点和治疗方法。2型糖尿病（T2DM）的发病率正在不断上升，并与多器官并发症相关联。由于胰岛素抵抗，胰岛通过增加分泌和增大胰岛体积来满足胰岛素不断增加的需求量。当胰岛无法适应机体要求时，血糖水平就会升高，并出现明显的2型糖尿病。由于胰岛素是肝脏代谢的关键调节因子，可以将生产葡萄糖的平衡转变为有利于葡萄糖的储存，因此胰岛素抵抗会导致糖稳态受损，从而导致2型糖尿病。过去已经报道了多种表征T2DM特征的动物模型，但是，从动物实验进行的研究往临床上转化的效果不佳。更重要的是，目前使用的药物，虽然能缓解糖尿病症状，但对疾病进一步发展的治疗效果有限。胰腺和肝脏是参与维持葡萄糖稳态的两个关键器官，为了模拟T2DM，阿斯利康（AstraZeneca）的科学家利用TissUse GmbH公司的微流控多器官芯片（MOC）平台，通过微流控通道相互连接，建立一个双器官串联芯片（2-OC）模型，实现芯片上胰腺和肝脏类器官的串联共培养，在体外模拟了胰腺和肝脏之间的交流通讯。 建立串联共培养类器官（胰岛+肝脏）和单独培养类器官（仅胰岛或肝脏），在培养基中连续培养15天，串联共培养显示出稳定、重复、循环的胰岛素水平。而胰岛单独培养的胰岛素水平不稳定，从第3天到第15天，降低了49%。胰岛与肝球体串联共培养中，胰岛可长期维持葡萄糖水平，刺激胰岛素分泌，而单独培养的胰岛，胰岛素分泌显著减少。胰岛分泌的胰岛素促进了肝球体对葡萄糖的利用，显示了串联共培养中类器官之间的功能性交流。在单独培养中的肝球体中，15天内循环葡萄糖浓度稳定维持在~11 mM。而与胰岛共培养时，肝球体的循环葡萄糖在48小时内降低到相当于人正常餐后的水平度，表明胰岛类器官分泌的胰岛素刺激了肝球体摄取葡萄糖。 4、肺肿瘤和皮肤在芯片上的串联共培养（拜耳）-抗体药物对肿瘤和正常器官的影响 针对EGFR抗体的药物在癌症治疗中被广泛应用。然而，抗癌药物的使用量与皮肤不良反应成正比相关，皮肤毒性是上皮生长因子受体(EGFR) 靶向治疗中最常见的副作用。但是对于后者的预测目前的方法均无法实现。双器官串联芯片（2-OC）模型，实现芯片上皮肤和肿瘤的共培养，用于模拟重复给药的剂量实验，同时还生成安全性和有效性的数据，可以在非常早的阶段检测到西妥昔单抗cetuximab对皮肤的几个关键副作用。这种体外分析能够在临床表现之前预评估毒性副作用，可以替代动物试验，有望成为评价EGFR抗体和其他肿瘤药物治疗指数的理想工具。 5、皮肤-肝脏在芯片上的串联共培养（拜尔斯道夫公司）—评估化妆品不同的给药途径d Science, Metal‐Specific Biomaterial Accumulation in Human Peri‐Implant Bone and Bone MarrowSchoon J, Hesse B, Rakow A, Ort MJ, Lagrange A, Jacobi D, Winter A, Huesker K, Reinke S, Cotte M,Tucoulou R, Marx U, Perka C, Duda GN, Geissler S

产品描述 塔望细胞三气培养箱Ox-101COx-101C细胞间歇低氧实验系统，控制器和实验箱相分离，可通过控制器触摸屏面板分别对箱体内气体浓度和温湿度进行实时监测和控制，减少样品间污染，减少气体消耗，精度高。适合干细胞、癌细胞、肿瘤细胞、神经细胞、心肌细胞、成纤维细胞等在低氧条件下的体外无菌培养研究。塔望科技成功开发出细胞低氧培养舱，为细胞生长和研究提供符合生理环境的低氧条件，用户可自由设置低氧细胞培养舱内的氧气浓度。将培养中的细胞直接暴露于Ox-101C细胞间歇低氧实验系统的低氧条件下，实现研究所需的细胞连续性缺氧和间歇性缺氧模型。细胞缺氧模型是缺血缺氧性疾病发病机制中的关键环节，是从细胞、分子水平研究此类疾病的重要方法。另可提供溶氧探头、多种不同的气体控制器，进行O2、CO2、NO、CO、O3及汽车尾气等研究。 参数特点 塔望细胞三气培养箱Ox-101C控制器参数1.为细胞培养提供给模拟生物体内的生理性低氧环境；2.气体流速可调，按照设定气体浓度自动配比气体，维持恒定的氧气浓度环境；3.7英寸大屏触摸屏控制，人性化界面，操作简单，直观了解氧气浓度变化的过程； 4.监测参数：温度、湿度、氧气浓度，二氧化碳浓度监测；5.进口电化学氧气浓度检测器，测量范围：0.1-25.0%vol，控制范围：0.1%-21.0%,精度：0.1%，线性度好，检测准确；6.温度湿度检测：进口高精度数字传感器；7.配置可编程氧气控制器时，可进行间歇性缺氧实验；8.氧气浓度自动校准：通过上位机程序对传感器快速校准； 9.高性能电磁阀，性能稳定，超长寿命＞1000万次；细胞培养舱参数1.采用透明聚丙烯酸甲酯板材质，坚固耐用；2.细胞培养舱为两层设计，提供水托盘，维持恒定的湿度；3.气体自动混合及循环设定，保证箱体内气体浓度的均一；恒温箱参数1.微电脑智能控温仪，具有设定、测定温度双数字显示和PID自整定功能，控温精确、可靠。可带定时功能，时间最大设定值为9999分钟；2.内外双重门结构，温度波动小。内门采用全钢化玻璃门，打开外门，观察箱内情况时不影响箱内温度；3.带有超温报警系统，保证设备安全运行不发生意外；4.控温范围：室温+5～65℃，温度分辨率：0.1℃，温度波动度：±0.5℃。*我公司可以根据客户的特殊应用、特殊需求提供功能定制服务，也可以提供相关的实验服务，详情请来电咨询。

BLS产品中国总代理,任何其他公司在中国销售该品牌的任何产品都须经过香港友诚生物科技有限公司许可并授权欧盟生物实验室设备与维护集团（BiologicalLaboratoryEquipment,MaintenanceandServiceLtd.简称：BLS）,BLS公司是欧洲一家专业生产电融合设备的厂家，尤其在胚胎干细胞的电融合上面更具有全球独一无二的技术。BLS产品的用户遍布全球，用我们的设备发表的文章每年多达数百篇。在CELL，NATURE以及NUCLEARACID等专业杂志上经常可以见到BLS矫健的身影。其提供的大量文献与PROTOCOL给用户的科研工作带来极大的方便。核移植是将细胞核从供体转入受体的过程。细胞核指导胚胎的发育，导致新生体安全出生。在这个过程中，电融合用于将供体细胞与受体卵细胞融合，并进一步激活细胞分裂，形成胚胎。Meng等人（1997）将核移植技术扩展至灵长类动物模型，克隆出恒河猴。技术的进步使研究人员能够从分裂球进展至更高分化的胚胎细胞以及静止的胚儿细胞，作为核的供应来源。胚胎产生的细胞在体外培养6-13代，然后在转入前使用血清饥饿的方法使细胞静止。如前文所述，Roble、Cibelli以及Stice是第一次在1998年报告使用非老化胚成纤维细胞作为核的供体进行核移植而产生绵羊克隆转基因牛的人。IanWilmut在1996年震惊了整个世界，他从成年乳腺的细胞产生出第一个动物克隆——多利。使用分化的成年细胞进行克隆的能力打开了核移植广泛运用的大门即基因治疗的令人激动的模式。最近的成功事例PPLTherapeutics公司从成年体细胞克隆出猪。对于这些用途可以使用多种细胞融合样品池及微型载玻片。细胞融合仪CF-150B胚胎细胞融合仪和相关电极槽(GSS-250)专为哺乳动物胚胎分裂球电融合而设计，可在电解液或非电解液中运用。一个适当导向的短电脉冲施加在早期胚胎可以溶解细胞膜，从而完成细胞质和细胞核融合。此仪器的主要应用是产生小鼠四倍体胚胎产生和体细胞核转移克隆。标准的双细胞分裂期胚胎能够迅速地融入单个细胞（单细胞分裂期四倍体胚胎）。这种四倍体胚胎可用于与遗传控制小鼠胚胎干细胞（ES）聚合，从而产生完全的ES衍生细胞胎儿(Nagyetal.,1990 NagyandRossant 1993).随着ES细胞遗传控制技术的发展，ES衍生细胞胚胎有了更广阔的应用空间：1 　应用于测试新衍生的或遗传控制的胚胎干细胞的发育潜能(Nagy et al., 1993).2　 完全ES衍生细胞胎儿为不同功能或遗传研究提供丰富的组织和器官前身资源(Forrester et al. 1991).3　最近，gene-trap战略用于完全衍生ES胚胎聚合，此胚胎由ES四倍体细胞胚胎产生，从而获取基因表达模式的直接信息CF-150B细胞融合仪和专业设计的高精度电极槽一起使用。槽有三种不同的缝间隙，250μm,500μm和1000μm，型号名分别为GSS-250,GSS-500和GSS-1000。在做双细胞期分裂球融合时，任何一种槽均可使用。如果用于克隆目的，我们推荐GSS-250。电极材料是高品质不锈钢的，并将其安置在一种厚玻璃中。所有这些材料具有生物安全性，无毒。CF-150B细胞融合仪和专业设计的电极夹GSH-1一起使用．此“快速夹”设计使得电极牢固夹在组织培养板（或其盖上）。在融合过程中绝对不会有偶然的滑动，并且给电极线提供了永久的良好接触。电极夹可用于三种里任何一种电极GSS-250,GSS-500orGSS-1000。CF-150B细胞融合仪和新型设计的聚合针DN-10一起使用．在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、ES细胞块以及移植早期的鼠胚胎。和附件球一起使用，这些针头更符合人体动力学，在使用中减少手指和手的压力。CF-150B细胞融合仪和聚合针头DN-09一起使用．聚合针DN-09是最初设计的聚合针头，在组织培养板底部形成一个小凹陷以便小胚胎的聚集，例如胚胎、干细胞以及移植早期的鼠胚胎。如果所有参数都选择最佳(完全按照BLS的protocol)，融合率将高于90%，胚胎在融合过程中死亡率低于10%，并且24小时内至少80%成功融合的胚胎将成长为健康的四细胞期胚胎。

我们zui新的单细胞分选系统-cellenONE(单细胞分选+单细胞测序建库利器+单细胞微阵列）-分选后得到的单细胞精度高以及活性高! 一：单细胞分选（单细胞精zhun率高达98%）cellenONE X1是一款基于压电声学技术的自动化单细胞分选系统，可以在多种微孔板(96孔、384孔、1536孔、 5184孔、自制微孔板)上精确沉积细胞。有限稀释法和大多数微流控技术都遵循泊松分布，导致每个位置有多个细胞，这样会使效率低下，且数据有偏差。 cellenONE X1使用视觉反馈，以确保在每个位置只有单个细胞！ a：喷头区域没有单个细胞 b：喷头区域有单个细胞 c: 喷头区域有多个细胞cellenONE X1仅仅选取含有单个细胞的液滴（b)直接分选到指定的孔板或微孔中。所有不符合设定条件的细胞都会被放回样本管中，确保没有细胞被浪费，也可以重新吸取回收细胞进行二次分选！设备对每一滴样品进行实时图像分析并拍照留底记录整个实验过程。到目前为止成功分离出的部分细胞和颗粒：细胞系：如CHO，杂交瘤，HEK293T，Hela，A549，PC3，H1975，HepaRG，Jurkat等原代细胞：如PBMC(包括B细胞和T细胞部分），成纤维细胞，角质形成细胞，黑素细胞，心肌细胞，HUVEC,神经干细胞等细胞核：来自细胞系，新鲜冷冻(FF)和福尔马林固定石蜡包埋（FFPE)组织切片等样本的细胞核微球：直径为2-30um的微球（带细胞标签的微球用于细胞标记）二：开放的文库构建实验——极小反应体系、极低试剂成本cellenONE X1是一个开放式平台，可提供单细胞分选和纳升级试剂加样操作。这种多功能性，使得现在越来越多的单细胞文库制备工作得以自动化执行。 而且，纳升级别的操作精度将极大地降低试剂耗材的成本。 三：cellenONE 技术:• 基于温和而高精度的压电声学分配技术.• 对分配器喷嘴内的细胞进行自动光学监.• 根据每个样品，机器对分配步骤测绘.• 细胞的位置决定是否满足单细胞条件，从而决定是否在下一滴中被分选. cellenONE是法国cellenion公司全新推出应用与单细胞测序及单细胞克隆领域前期获取单细胞的全自动分选系统，与目前市场上常见的流式细胞仪（FACS）相比有以下优点：1.没有最小样本容量或细胞数与传统流式细胞分析仪,CellenONE可以处理任何小样本数量从1μl回收率高的细胞悬液，FACS通常需要至少2万个细胞来进行单细胞分离，而CellenONE可以将细胞从50个细胞中分离出来!!!2.非常温和的分配(对克隆应用很重要)脆弱细胞的剪切应力更低(更好的生存能力),分选过后细胞活性高于FACS分选的细胞3.单细胞率和单细胞活性分选后得到的单细胞率可以高达95%，单细胞活性可以高达85%，远高于其他单细胞分选仪器4.多样性不仅可以分选单细胞，还可以分选微珠和nl级别试剂，可以大大减少试剂消耗成本，可以兼容96、384、1536孔板或客户自定义微孔板