二氢血根碱对照品

项目概况宜春市检验检测中心试剂及耗材和标准品及对照品采购项目（第二次）（第二包：标准物质、对照品） 招标项目的潜在投标人应在 江西省公共资源交易网 获取招标文件，并于 2023年02月09日 09点00分 （北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况：项目编号：明月-YC2022-042-2-1项目名称：宜春市检验检测中心试剂及耗材和标准品及对照品采购项目（第二次）（第二包：标准物质、对照品）采购方式：公开招标预算金额：400000.00 元最高限价：400000.00采购需求：[table=100%][tr][td]采购条目编号[/td][td]采购条目名称[/td][td]数量[/td][td]单位[/td][td]采购预算（人民币）[/td][td]技术需求或服务要求[/td][/tr][tr][td][font=inherit]宜购2022F000814837[/font][/td][td][font=inherit]2022年食品药品监管中央及省级补助资金（标准品、对照品）[/font][/td][td][font=inherit]1[/font][/td][td][font=inherit]批[/font][/td][td][font=inherit]400000.00元[/font][/td][td][font=inherit]详见公告附件[/font][/td][/tr][/table]合同履行期限：详见招标文件本项目不接受联合体投标。

项目概况宜春市检验检测中心试剂及耗材和标准品及对照品采购项目（第二次）（第二包：标准物质、对照品） 招标项目的潜在投标人应在 江西省公共资源交易网 获取招标文件，并于 2023年02月09日 09点00分 （北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况：项目编号：明月-YC2022-042-2-1项目名称：宜春市检验检测中心试剂及耗材和标准品及对照品采购项目（第二次）（第二包：标准物质、对照品）采购方式：公开招标预算金额：400000.00 元最高限价：400000.00采购需求：[table=100%][tr][td]采购条目编号[/td][td]采购条目名称[/td][td]数量[/td][td]单位[/td][td]采购预算（人民币）[/td][td]技术需求或服务要求[/td][/tr][tr][td][font=inherit]宜购2022F000814837[/font][/td][td][font=inherit]2022年食品药品监管中央及省级补助资金（标准品、对照品）[/font][/td][td][font=inherit]1[/font][/td][td][font=inherit]批[/font][/td][td][font=inherit]400000.00元[/font][/td][td][font=inherit]详见公告附件[/font][/td][/tr][/table]合同履行期限：详见招标文件本项目不接受联合体投标。

[b]问题：[b][b][b][/b][/b]葛根素的检测，对照品的理论塔板数是？[/b]答案：=======================================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：HPLC基质：标准溶液应用编号：103695化合物：葛根素色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-219.html]Diamonsil C18(2) 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理：对照品：精密称取葛根素对照品适量，用30%的乙醇溶解稀释至30μg/mL。色谱条件：色谱柱： Diamonsil C18（2） 250*4.6 mm，5 μm(Cat#：99603)流动相： 甲醇：0.1%磷酸=25.4：74.6流速： 0.9 mL/min柱温： 30 ℃检测器： 250 nm进样量： 10.0 uL文章出处：天津应用实验室关键字：葛根素、Diamonsil C18（2）、HPLC摘要：Diamonsil C18（2）检测葛根素。图谱：[img=`22.PNG]http://www.dikma.com.cn/u/image/2015/10/14/1444801757132111.png[/img]

[b][font=宋体][color=#7030a0]血热出血的克星——白茅根[/color][/font][/b][font=宋体]中药白茅根为白茅草的根茎，味甘性寒，归肺、胃、膀胱经，有凉血止血，清热利尿的功效。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]凉血止血[/color][/font][/b][font=宋体]白茅根味甘性寒入血分，能清血分之热而凉血止血，可用于治疗多种血热出血之证，可单用或配伍其它凉血止血药。多生用。[/font][font=宋体]《千金方》治鼻子出血，或口中吐血，血热妄行，用单味新鲜白茅根煎或捣汁服用或干品煎服，止血效果显著。[/font][font=宋体]张锡纯《医学衷中参西录》中的二鲜饮，用新鲜的白茅根和莲藕煮汁治疗咳血，效果也是立竿见影。[/font][font=宋体]白茅根其性寒降，入膀胱经，能清热利尿，导热下行，可以治疗血热导致的尿血、血淋之证，如治小便出血，可以单用白茅根煎服；也可以配伍赤芍、黄芩、血余炭等药，如白茅根汤（《太平圣惠方》）。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]清热利尿[/color][/font][/b][font=宋体]白茅根清热利尿，有利水消肿、利尿通淋、利湿退黄的功效。张锡纯《医学衷中参西录》中医案记载治疗水肿、小便不利，单用白茅根煎服，数日病遂全愈。当然也可与其它清热利尿药同用；治疗湿热黄疸，常与茵陈、山栀等同用，如茅根汤（《圣济总录》）。[/font][b][font=宋体][color=#ffc000]清肺胃热[/color][/font][/b][font=宋体]白茅根甘寒，善于清肺胃之热，降泄火逆。清胃热止呕吐，常与麦冬、半夏同用，如茅根汤（《伤寒总病论》）；清肺热定咳喘，常与桑白皮同用，如如神汤（《太平圣惠方》）。[/font][font=宋体]白茅根，干品、鲜者均可使用，鲜者药量加倍，用于清肺胃之热，鲜者效果更好，也可捣汁服用。[/font]

问题: 各位老师，有人做过北豆根的含量测定吗？对照品蝙蝠葛苏林碱用甲醇很难溶，试了用流动相也几乎不溶，请问有什么好建议吗

今天做了一个感冒灵颗粒的鉴别，样品点能与对照品扑尔敏点对上，但是就是与对照品对己酰氨基酚难对上，药典要求是15ul，我把对照品的量减少了，样品的量加大了一倍，也不是很容易找到，请问这是什么原因？

中检所对照品常见问题与答复1、标准物质的用途和应用范围药品标准物质不能作为药物或医疗器械而施用于人或动物。药品标准物质主要用于法定药品质量标准中的相关项目的检测用，详细内容请见使用说明书。2、有效期除了说明书上注明有效期的品种外，药品标准物质一般没有像药品一样设置有效期。在规定的储存和使用条件下，定期进行特性量值的稳定性核查，若发现影响使用将及时处理。3、储存标准物质一般应密闭、避光保存，对有特殊储存要求（如低温、避光等）的标准物质，说明书上均有说明，今后标签上也将注明。建议不要一次购买大量的标准物质，以免储存不当出现问题。需要冷藏或冷冻保存的品种，短时间短距离的冰盒运输对特性不会造成影响。4、纯度目前含量测定用的化学对照品的标签及说明书均赋有量值，以前的部分中药化学含量测定用未赋值的品种，按 100.0%计。5、是否能用于说明书用途范围外的检验、科研需要用户进行分析与验证。6、使用前是否需要干燥标准物质说明书上对使用前是否需要干燥等情况，均有相关说明。除另有规定外，对照药材不需要特殊处理。7、标准物质证书或测试报告暂时还不能提供证书或者测试报告。8、新批号标准品出来后旧批号能否继续使用 新旧批号更换过程中，部分品种将设置3-6个月以上的缓冲期。9、用五氧化二磷干燥的标准物质是否要在相同条件下保存不需要。按说明书的条件保存即可。10、从哪里可以查到标准物质的结构、物理化学特性等中药化学对照品的说明书大多附有结构，化学药品的可以通过中国药典二部查阅。另外，分发的标准物质都提供了英文名，可以通过文献查阅有关详情。11、内毒素标准品是否有10EU一支的 标准品均为100EU/支，10EU的工作品是鲎试剂生产企业生产的，低效价的内毒素稳定性差，我们不建议使用这种工作品进行检验工作。12、为什么对照品在色谱上不出峰？ 请按国家标准中提供的条件考察自己的色谱条件因素。色谱不出峰一般来讲有如下原因：一是色谱条件不合适；二是信号采集时衰减过高，建议减小衰减；三是采集时间过短，建议增加采集时间。13、为什么对照品出2个或多个峰 标准物质除多组分的以外，均只有一个主峰，杂质峰不会超过赋值的范围。如果杂质峰超过赋值的范围，可能属于以下原因：① 配置对照品溶液的容器或溶剂被污染；② 盛放流动相的容器或配置溶剂被污染；③ 进样器被污染；④ 高效液相进样阀被污染；⑤ 色谱柱填充物出现断裂等。

我做的注射用胞磷胆碱钠成品含量和有关物质时候，由于对照品干燥后放置时间过长有3个小时左右做出来结果不合，第二次对照品干燥后马上实验，发现对照品峰值有明显不同，放置时间长的有明显下降，对照品（140675-200803）储存条件是遮光阴凉干燥处，用前要105℃干燥4小时，是否降解，请高人帮忙看看

最近在写sop，特别留意了这个方面的内容。我查到的答案跟大家不一样。请高手说明解释一下：[b]标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准物质，以效价单位(U)表示。对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质。[/b]就我看到的说法，标准品与对照品并无级别上的差异，而是用途的不同。这个说法跟本版面以前的这个帖子差异很大，不明真相的群众求解答。[url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20081021/1541297/[/url]

做一个甾体皂苷的含量测定，已经做第4次了，问题始终没解决，遂请教。具体要求如下：色谱条件要求：C8的柱子；流动相是乙腈-水（30:70）；检测波长210nm。样品处理：取一定量，加75%乙醇超声10分钟，放冷，补足减失重量，滤过，即可。 对照品也是用75%乙醇溶解。测试经过如下：有同一厂家同一品种不同批号两批样品，用C8的柱子做，计算了下，含量合格，但峰实在太难看。怕峰形太差影响结果的准确性，但只有一根这C8的柱子，只好换根C18的柱子，调整流动相试试；峰形很好，进了一针其中一批的样品，计算了也合格，就编个序列继续做下去了。第四天才发现另一批不合格，只好第五天返工。第二次，问题出现了。返工时，同样的仪器，色谱柱，色谱条件，用原来配的对照品溶液，重新处理样品，不合格的那一批还是不合格，结果比上次测的还低一点，合格的那批也不合格了。又另配了对照品溶液，与之前配的浓度相差不大，但峰面积小多了。但是之前配的对照品峰面积反而变大了，估计是因为流动相微调，把之前没分开的小峰分开了，不至于斜着积分的原因吧。怀疑过对照品峰面积小，是不是冷冻（对照品要求冷冻保存哈）后没放至室温，直接称，导致称不准。样品怀疑过的原因 A:是不是不合格那一批取样量大了，浓度高了，导致过饱和，未全溶 B：样品是不是未混匀，取样代表性不够 C：超声时间，功率是不是有问题，是不是超声发热导致样品降解（对照品要冷冻保存嘛）E：是不是第二次配的溶样溶剂有问题第三次做，更蹊跷了。之前怀疑的样品的原因都排除了。减少，增加取样量；混匀样品；超声不同时间，用不同超声设备（不同功率）；超声中换水，防止温度升高，水浴上回流处理样品；重配75%乙醇几次，用无水乙醇配也试了，还换用甲醇，样品溶液居然都没有目标峰。但之前两次配的对照品溶液峰高变化不大，高的还是高，低的还是低。第四次，就是今天。又重配了对照品溶液，换甲醇（色谱纯）溶解，居然对照品也没峰了，用75%乙醇溶解也是。之前配的对照品峰高还是老样子。将第一次配的对照品溶液跟这次提取的测不到目标峰的样品溶液混合，也能出目标峰。这根柱子换走另一个对照品测试，峰好得很。再换另一根柱，走样品和对照品，还是老样子，之前能出的还出，出不了的还是还是出不了。总结：一共配了三次对照品，浓度差异不大，但峰面积在变小，第三次就没了。样品也是，第一次合格的，第二次提取也不合格了，以后干脆目标峰也不出了。 分析：应该不是目标物不稳定的原因，因为第一次配的对照品，隔了一周，峰高依然变化不大，更何况新配的对照品溶液。 几次都是我操作，对照品溶液都超声助溶过，应该也是溶了的。而且用紫外扫过，稀释后吸收值会降低，虽然最大吸收波长在约205nm。其实用甲醇比用75%乙醇溶解要好些，几乎振摇就能溶，用75%乙醇必须稍超声一下。[/fo

三黄片的实验条件：乙腈：水（1：1）（每1000ml中加磷酸二氢钾3.4g，十二烷基硫酸钠1.7g）流动相，波长265nm，对照品的峰面积不稳定，每五针的RSD值大于2%。且样品的峰面积稳定是什么原因？对盐酸小檗碱发生变化。对照品的溶剂是甲醇。

我在用高效液相色谱法分析一个类酰胺类化合物，用的流动相是5mmol/L的磷酸氢二钠（用磷酸调节pH=7.0）-乙腈（80：20），但是连续用过两根色谱柱（分别为C8 C18),两三天后柱效就下降很明显（具体表现是峰变宽），我分别测过供试品和对照品溶液的pH值，分别为4.5及7.2，均在液相色谱所要求的条件之内，请帮我分析一下原因，谢谢！！

在抗生素类的标准物质使用时，经常会遇到标准品和对照品的概念。关于这二者的区别，现在比较流行的说法是在做HPLC时使用的标准物质应为对照品。摘录典型观点如下：[B]“标准品都是按效价单位(或μg)计，以国际标准品进行标定。标准品的标示量是按生物活性来计算的，不是按纯度来标示，此种标示法对单组分或多组分物质均适用，尤适用于多组分物质，如乙酰螺旋霉素标准品，是由4种有效成分组成，若欲于一个纯度来标示其含量是不可能的，但用效价(即生物活性)来标示是可行的；对照品的标示量则必定是某单一组分的纯度指标。所以日常工作中，标准品和对照品在定量时是不可相互替代的。以罗红霉素为例，现今是国家标准品与对照品并存，以抗生素微生物检定法测其含量时，必须使用罗红霉素标准品；但以HPLC法测定其含量时，又必须使用罗红霉素对照品，不可混淆。”[/B]但是我见过一些行业标准，比方说HPLC测土霉素残留中，在说到标准液的配制时，写得就是“土霉素标准品”。难道这里面的“标准品”是“对照品”的错误用法？[em0716] 请大家发表一下看法

[color=#333333]完全不出峰是啥情况，对照品跟样品都不出峰[/color][color=#333333]一直没东西出来[/color][color=#333333] [/color]

求教:中药对照品的减压干燥如何做?我的做法是在减压干燥器内另放一装有少量五氧化二磷的蒸发皿,这样做对吗?但这样做在上高液时对照品峰都出现问题,要不是拖尾,要不是峰面积不稳定.请教!!!!!!!!!!![em53]

http://www.greenherbs.com.cn/bbs/dispbbs.asp?boardid=2&Id=7681612594 七氟醚杂质C Sevoflurane Related Compound C 对照品/标准品1612572 七氟醚杂质 B　Sevoflurane Related Compound B 对照品/标准品1612550 七氟醚杂质 A　Sevoflurane Related Compound A 对照品/标准品1612540 七氟醚　Sevoflurane 对照品/标准品1612539 盐酸舍曲林 Sertraline Hydrochloride 对照品/标准品1612528 盐酸舍曲林杂质A Sertraline Hydrochloride Related Compound A 对照品/标准品1612517 盐酸舍曲林消旋体混合物 Sertraline Hydrochloride Racemic Mixture 对照品/标准品1612506 L－丝氨酸　L-Serine 对照品/标准品1612426 芝麻油杂质B　 Sesame Oil Related Compound B 对照品/标准品1612415 芝麻油杂质A Sesame Oil Related Compound A 对照品/标准品1612404 芝麻油 Sesame Oil 对照品/标准品1612029 番泻苷 B Sennoside B 对照品/标准品1612018 番泻苷 A Sennoside A 对照品/标准品1612007 番泻苷　Sennosides 对照品/标准品1611955 硒 蛋氨酸 Selenomethionine 对照品/标准品1611900 盐酸司来吉兰　Selegiline Hydrochloride 对照品/标准品1611004 司可巴比妥 CII Secobarbital CII 对照品/标准品1610090 东莨菪亭　Scopoletin 对照品/标准品1610001 氢溴酸东莨菪碱　Scopolamine Hydrobromide 对照品/标准品1609831 沙奎那韦杂质A　Saquinavir Related Compound A 对照品/标准品1609829 甲磺酸沙奎那韦　Saquinavir Mesylate 对照品/标准品1609807 双水杨酯　 Salsalate 对照品/标准品1609625 沙美特罗杂质B Salmeterol Related Compound B 对照品/标准品1609614 沙美特罗杂质A Salmeterol Related Compound A 对照品/标准品1609603 昔美酸沙美特罗 Salmeterol Xinafoate 对照品/标准品1609501 水杨酸片 Salicylic Acid Tablets 对照品/标准品1609024 水杨酸杂质B Salicylic Acid Related Compound B 对照品/标准品1609013 水杨酸杂质A Salicylic Acid Related Compound A 对照品/标准品1609002 水杨酸　Salicylic Acid 对照品/标准品1608000 水杨酰胺　Salicylamide 对照品/标准品1607506 连翘粉状贯叶提取物 Powdered St. John's Wort Extract 对照品/标准品1607040 糖精钠 Saccharin Sodium 对照品/标准品1607029 糖精钙 Saccharin Calcium 对照品/标准品1607007 糖精　 Saccharin 对照品/标准品1606503 芦丁　 Rutin 对照品/标准品1606208 硝酚胂酸　Roxarsone 对照品/标准品1605523 罗哌卡因杂质B Ropivacaine Related Compound B 对照品/标准品1605512 罗哌卡因杂质A Ropivacaine Related Compound A 对照品/标准品1605500 盐酸罗哌卡因 Ropivacaine Hydrochloride 对照品/标准品1604916 罗库溴铵合剂峰的识别 Rocuronium Peak Identification Mixture 对照品/标准品1604905 罗库溴铵 Rocuronium Bromide 对照品/标准品1604870 利凡斯的明杂质B Rivastigmine Related Compound B 对照品/标准品1604869 利凡斯的明杂质A Rivastigmine Related Compound A 对照品/标准品1604814 利托那韦杂质混合物 Ritonavir Related Compounds Mixture 对照品/标准品1604803 利托那韦 Ritonavir 对照品/标准品1604701 盐酸利托君　Ritodrine Hydrochloride 对照品/标准品1604665 利培酮系统适用性试验用混合物 Risperidone System Suitability Mixture 对照品/标准品1604654 利培酮 Risperidone 对照品/标准品1604643 利塞膦酸杂质C Risedronate Related Compound C 对照品/标准品1604632 利塞膦酸杂质B Risedronate Related Compound B 对照品/标准品1604621 利塞膦酸杂质A Risedronate Related Compound A 对照品/标准品1604610 利塞膦酸钠 Risedronate Sodium 对照品/标准品1604600 利美索龙　Rimexolone 对照品/标准品1604508 盐酸金刚乙胺　Rimantadine Hydrochloride 对照品/标准品1604348 利鲁唑杂质A Riluzole Related Compound A 对照品/标准品1604337 利鲁唑 Riluzole 对照品/标准品1604202 醌式利福平　Rifampin Quinone 对照品/标准品1604009 利福平　Rifampin 对照品/标准品1603800 利福布丁　Rifabutin 对照品/标准品1603108 核糖 Ribose 对照品/标准品1603006 维生素B2 　Riboflavin (Vitamin B2) 对照品/标准品1602706 利巴韦林　Ribavirin 对照品/标准品1602003 间苯二酚　Resorcinol 对照品/标准品1601849 二类残留溶剂－二甲苯　Residual Solvent Class 2 - Xylenes 对照品/标准品1601827 二类残留溶剂－三氯乙烯　Residual Solvent Class 2 - Trichloroethylene 对照品/标准品1601805 二类残留溶剂－甲苯　Residual Solvent Class 2 - Toluene 对照品/标准品1601780 二类残留溶剂－四氢萘　Residual Solvent Class 2 - Tetralin 对照品/标准品1601770 二类残留溶剂－四氢呋喃　Residual Solvent Class 2 - Tetrahydrofuran 对照品/标准品1601769 二类残留溶剂－二氧噻吩烷 Residual Solvent Class 2 - Sulfolane 对照品/标准品1601747 二类残留溶剂－吡啶　Residual Solvent Class 2 - Pyridine 对照品/标准品1601725 二类残留溶剂－硝基甲烷 Residual Solvent Class 2 - Nitromethane 对照品/标准品1601703 二类残留溶剂－N-甲基吡咯烷酮 Residual Solvent Class 2 - N-Methylpyrrolidone 对照品/标准品1601689 二类残留溶剂－甲基环己烷 Residual Solvent Class 2 - Methylcyclohexane 对照品/标准品1601667 二类残留溶剂－甲基丁基酮 Residual Solvent Class 2 - Methylbutylketone 对照品/标准品1601645 二类残留溶剂－ 2-甲氧基乙醇 Residual Solvent Class 2 - 2-Methoxyethanol 对照品/标准品1601623 二类残留溶剂－甲醇 Residual Solvent Class 2 - Methanol 对照品/标准品1601601 二类残留溶剂－己烷 Residual Solvent Class 2 - Hexane 对照品/标准品1601587 二类残留溶剂－甲酰胺 Residual Solvent Class 2 - Formam

[b][color=#444444]用高效液相色谱检测二肽的含量，对照品可以选择该二肽的硝酸盐吗？[/color][/b]

在检测注射用甲磺酸左氧氟沙星含量时：中间体检测时用紫外检测，成品用的是高效液相检测，之前中间体用原料做工作对照，对照品A值一般在所配浓度下一般为0.39左右，F值在1.26左右，成品没什么问题，可是现在用中检所的对照品，中间体测定时对照品在相同浓度下A值才有0.35左右，这样的话F值就接近1.3了，结果含量就会高很多甚至不合格，但是成品上液相时又是合格的，也就是说对照品应该没问题，是不是中检所的对照品不适合用紫外分光光度法来检测呢？请各位帮忙分析分析，谢谢！！！补充：在这之前，该产品中间体检测都是用中检所的对照品上高效液相测定的，为了节省时间改用了紫外分光光度法检测工艺没改，液相测出来接过肯定会更精确些，但是奇怪的是，同样的对照品中间体检测超标，成品检测合格，不过之前用原料做工作对照检中间体时，成品标示量一般在100%以下，用中检所对照品检测中间体，成品标示量一般在105%,规定上限是110%没我是在想我们的中间体检测方法是不是不太合理制药工艺中没有纯化过程的，但是原料工作对照77.54%，中检所对照品97.3%，都是根据所需浓度换算好了再配制检测的，我是想应该里面所含杂质吸收影响就不明显了吧？您觉得呢？

人参Ginseng Radix et Rhizoma是一种传统的名贵中药材，具有多种药理活性，如抗氧化、抗炎、抗癌、抗糖尿病、抗衰老和免疫调节作用，对于治疗心血管疾病也十分重要[1-2]。种植人参是一个缓慢的过程，5～7年才能收获成熟的人参根。此外，人参皂苷的含量还受到气候、土壤、环境污染和虫害的影响[3]。作为田间种植人参的替代方法，利用生物反应器技术培育的人参不定根培养物已被应用于人参的生产[4]。安全性研究表明，人参不定根没有明显的急性口服毒性、致突变毒性、致畸毒性和亚慢性口服毒性[5]。市售人参不定根产品作为健康食品、功能性食品和膳食补充剂越来越受欢迎[6]。以往的研究表明，人参对心肌缺血引起的损伤有保护作用[7-8]。然而，人参不定根对心肌缺血诱发损伤的保护作用及其潜在的分子机制尚不清楚。 心肌缺血是由冠状动脉闭塞引起的一种疾病，其特征是心肌缺血和缺氧，是导致全球死亡的主要原因之一[9]。再灌注即恢复缺血心肌的血流量，是临床上经常使用的一种治疗方法。然而，再灌注治疗可能会引发心肌缺血再灌注损伤[10]。因此，有必要找到有效的方法来改善心肌缺血引起的损伤。心肌细胞凋亡和心肌纤维化以及过度炎症是心肌缺血后心肌损伤的主要原因[11]。炎症是心肌缺血引起损伤的主要病理因素之一[12]。白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-18和核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）等炎症因子会引发心肌凋亡、细胞外基质沉积和心肌纤维紊乱[13-14]。因此，探索抗炎药物是预防和治疗心肌缺血的重要策略。 多项研究表明，炎症因子风暴会通过激活先天性炎症信号通路之一的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor pyrin domain containing 3，NLRP3）炎性小体通路引发不良的心肌重塑[15-16]。NLRP3炎症小体是一种细胞内多蛋白复合物，由NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein，ASC，包括一个Caspase激活和招募结构域）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1前体（pro-cysteine-requiring aspartate protease-1，pro-Caspase-1）组成[17]。心肌损伤会促进炎症转录因子NF-κB的激活，从而增加NLRP3、pro-IL-1β和pro-IL-18的水平[18]。NLRP3炎性小体促进pro-Caspase-1转化为Caspase-1 cut，然后pro-IL-1β和pro-IL-18分别转化为成熟的IL-1β和IL-18[19]。IL-1β和IL-18通过调节免疫细胞募集、焦亡、细胞凋亡、细胞外基质积累和激活转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）通路，诱发炎症和心肌损伤[20-21]。本研究拟考察人参不定根对心肌缺血诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及作用机制。 1 材料 1.1 动物 40只SPF级雄性C57BL/6小鼠，8周龄，体质量20～22 g，购自杭州医学院实验动物中心，生产许可证号SCXK（浙）2019-0002，合格证编号20220429Abzz0100018945。动物饲养于温度（22±1）℃、相对湿度（55±5）%的环境下，动物实验经杭州医学院伦理委员会批准（批准号2018-045）。 1.2 药材 人参不定根由大连普瑞康生物技术有限公司提供，经杭州医学院王茵教授鉴定为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Mey.的不定根。这些不定根以长白山区的野生人参为种源，诱导产生人参愈伤组织细胞，筛选培养后进一步形成人参不定根，实验取材部位为整个不定根的全部组织，其外表形态为不规则根丝状，整体呈黄色，外表形态符合人参不定根的形态要求。 1.3 药品与试剂 肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、IL-6、IL-1β、IL-18 ELISA试剂盒（批号分别为EMC102a.96、EMC004.96、EMC001b.96、EMC011.96）购自上海欣博盛公司；BCA蛋白浓度测定试剂盒（批号E162-01）购自江苏凯基生物技术股份有限公司；异丙肾上腺素（isoproterenol，ISO，批号I5627）、二抗（羊抗鼠）Alexa Fluor 700（批号A-21036）、二抗（羊抗兔）Alexa Fluor 800（批号A32735）购自美国Sigma公司；TRIzol试剂（批号DP424）购自北京天根生物技术有限公司；反转录试剂盒（批号K1691）购自美国赛默飞公司；SYBR Green Mix（批号RR820A）购自日本Takara公司；B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）抗体（批号3498）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）抗体（批号2772）、Caspase-3抗体（批号9665）、硫氧还蛋白互作蛋白（thioredoxin interacting protein，TXNIP）抗体（批号14715）、Caspase-1抗体（批号24232）、IL-1β抗体（批号12242）、Caspase-1 cut抗体（批号89332）、IL-18抗体（批号57058）、NF-κB抗体（批号8242）、p-NF-κB抗体（批号3033）、核因子-κB抑制因子（inhibitor of NF-κB，IκB）抗体（批号9242）、p-IκB抗体（批号9246）购自美国CST公司；NLRP3抗体（批号BA3677）购自武汉博士德生物工程有限公司；I型胶原（collogen-Ⅰ，Col-Ⅰ）抗体（批号14695-1-AP）购自武汉三鹰生物技术有限公司；III型胶原（collogen-III，Col-III）抗体（批号ab184993）、TGF-β1抗体（批号ab215715）购自英国Abcam公司；甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗体（批号BK7021）购自杭州宝科生物科技有限公司。 1.4 仪器 1260型高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分析仪（美国安捷伦科技公司）；iCAP-Q系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱仪[/color][/url]、5119670DP型多功能酶标仪、NanoDrop 2000型超微量核酸蛋白测定仪、A37834型Mini Amp [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪、QuantStudio3型实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]系统（美国赛默飞公司）；BX3型显微镜（日本奥林巴斯公司）；ETH-256型心电图仪（美国iWorx公司）；NU-C200R-E型低温离心机（美国NUAIRE公司）；Licor Odyssey CLX-0657型双色红外激光成像系统（美国LI-COR公司）；Power Pac TM HC 043BR71015型蛋白电泳转印系统（美国Bio-Rad公司）。 2 方法 2.1 人参不定根提取物的制备 将人参不定根进行粉碎，过80目筛，取人参不定根粉末100 g，用70%乙醇2 L回流提取2 h，滤过，收集滤液。残渣加入70%乙醇2 L，回流提取2 h。合并2次滤液，真空旋蒸后得到人参不定根提取物。 2.2 人参不定根中人参皂苷含量的测定[22] 采用HPLC检测人参不定根中的主要人参皂苷含量。Sepax Bio-C18色谱柱（300 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇（A）-超纯水（B），梯度洗脱：0～12 min，52% A；12～14 min，52%～57% A；14～17 min，57%～65% A；17～62 min，65% A；62～65 min，65%～100% A；65～83 min，100% A；83～85 min，100%～52% A。体积流量0.5 mL/min；柱温35 ℃；进样量5 μL。 2.3 iCAP-Q系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱仪[/color][/url]测定人参不定根的元素含量[23] 人参不定根提取物经王水处理后，使用iCAP-Q系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱仪[/color][/url]检测人参不定根中的元素含量。 2.4 动物模型的制备、分组和给药 40只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和人参不定根低、高剂量（500、1 000 mg/kg）组。各给药组ig相应药物，对照组和模型组ig双蒸水，1次/d，连续28 d。给药第27、28天，除对照组外，其余各组小鼠连续2 d每隔24 h sc 1次ISO（100 mg/kg），以诱导心肌缺血；对照组小鼠sc生理盐水。小鼠在首次注射ISO 48 h后，麻醉进行后续实验。 2.5 心电图检测 首次注射ISO 48 h后，用2%三溴乙醇麻醉小鼠。将心电图仪的针电极穿过小鼠皮肤插入导联III位置，使用心电图仪记录心电图。 2.6 心脏组织病理学变化观察 麻醉小鼠后，眼眶取血并分离血清，在冰上剖取小鼠心脏和肾脏，心脏组织、肾脏称定质量并记录，计算脏器指数。心脏组织在4%多聚甲醛中固定24 h，然后用石蜡包埋，切成4 μm的切片，分别进行Masson和苏木素-伊红（HE）染色，以观察心脏纤维化和心肌损伤。使用光学显微镜观察病理变化，使用Image-Pro Plus成像软件分析纤维化区域。 2.7 ELISA测定血清中IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α水平 使用ELISA试剂盒测定各组小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α水平。 2.8 Western blotting测定心脏组织相关蛋白表达 用PBS溶液洗涤各组小鼠左心室，并在含1%蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液中进行裂解，4 ℃、13 500 r/min离心30 min，使用BCA蛋白浓度测定试剂盒对总蛋白进行定量。蛋白样品经8%～15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳，转至PVDF膜，室温下用5%牛血清白蛋白阻断非特异性结合2 h后，分别加入Bcl-2抗体、Bax抗体、Caspase-3抗体、TXNIP抗体、Caspase-1抗体、IL-1β抗体、Caspase-1 cut抗体、IL-18抗体、Col-Ⅲ抗体、NF-κB抗体、p-NF-κB抗体、IκB抗体、p-IκB抗体、NLRP3抗体、Col-Ⅰ抗体、TGF-β1抗体和GAPDH抗体，4 ℃孵育过夜；用相应的荧光二抗在膜上孵育1 h，然后用Odyssey成像系统观察条带灰度值。 2.9 qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]测定心脏组织相关基因表达 按照试剂盒说明书提取各组小鼠心脏组织中总RNA并合成cDNA，进行qRT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]分析。Col-Ⅰ、Col-III、TGF-β1、基质金属蛋白酶2（matrix metallopeptidase，MMP2）、MMP9、纤连蛋白（fibronectin，Fn）引物序列见表1。 2.10 统计学分析 使用SPSS 22.0软件进行统计分析，结果以表示，多组间的分析采用单因素方差分析法。 3 结果 3.1 人参不定根中的人参皂苷含量 如表2所示，人参不定根中主要成分为人参皂苷Rg1、Rg2、Re、Rb1、Rc、Rb2和Rd。人参不定根中Rg1、Re、Rb1和Rb2的含量较高，其中Rg1＋Re的质量分数大于0.3%，Rb1的质量分数大于0.2%。根据《中国药典》2020年版的规定，人参中Rg1＋Re的质量分数不低于0.3%，Rb1的质量分数不低于0.2%，表明人参不定根中人参皂苷含量符合《中国药典》2020年版规定。 3.2 人参不定根中的主要元素含量 采用iCAP-Q系列[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/yp][color=#3333ff]电感耦合等离子体质谱仪[/color][/url]测定人参不定根中74种元素的含量，表3列出了主要元素的含量，其中Na、Mg、P、K、Ca、Mn、Fe、Ni和Zn的含量较高。As和Hg的含量明显低于《中国药典》2020年版的限定含量。 3.3 人参不定根对心肌缺血小鼠心脏和肾脏指数的影响 如表4所示，与对照组比较，模型组小鼠心脏质量、肾脏质量、心脏指数和肾脏指数均显著升高（P＜0.01、0.001）；与模型组比较，人参不定根高剂量组小鼠心脏质量、心脏指数和肾脏指数均显著降低（P＜0.05、0.01）。各组小鼠体质量均无明显差异。 3.4 人参不定根对心肌缺血小鼠心电图的影响 如图1所示，对照组小鼠的心电图显示正常，模型组小鼠ST段明显增加，表明小鼠心肌缺血。与模型组比较，人参不定根高剂量组小鼠ST段显著下降。 3.5 人参不定根对心肌缺血小鼠心脏损伤的影响 如图2-A所示，HE染色显示对照组小鼠的心脏结构正常，模型组小鼠则出现心肌纤维排列不规则、断裂和溶解以及炎性细胞浸润，人参不定根高剂量组心脏组织病理学变化显著改善。如图2-B～D所示，与对照组比较，模型组心脏组织抗凋亡信号蛋白Bcl-2的水平显著降低（P＜0.05），而促凋亡信号蛋白Bax和Caspase-3 cut水平显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，人参不定根高剂量组Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05），Caspase-3 cut蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），人参不定根各剂量组Bax蛋白表达水平显著降低（P＜0.05、0.01）。 3.6 人参不定根对心肌缺血小鼠炎症反应的影响 心肌缺血引起的心肌损伤与血清和心肌中炎症因子水平的升高有关。如图3所示，与对照组比较，模型组小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α水平明显升高（P＜0.01）；与模型组比较，人参不定根各剂量组IL-1β、IL-18和TNF-α水平明显降低（P＜0.05、0.01），人参不定根高剂量组IL-6水平显著降低（P＜0.001）。表明人参不定根能明显减轻心肌缺血小鼠的炎症反应。 3.7 人参不定根对心肌缺血小鼠心脏纤维化的影响 如图4-A所示，Masson染色结果表明，与对照组比较，模型组小鼠的心脏纤维化面积显著增加，而人参不定根可降低心肌缺血小鼠的心脏纤维化程度。如图4-B～G所示，各剂量的人参不定根显著降低心肌缺血小鼠心脏组织中促纤维化因子Col-I、Col-III、TGF-β1、Fn的mRNA表达水平（P＜0.05、0.01、0.001），高剂量的人参不定根显著降低心肌缺血小鼠心脏组织中MMP2、MMP9的mRNA表达水平（P＜0.05、0.01）。如图4-H、I所示，各剂量的人参不定根显著降低心肌缺血小鼠心脏组织中Col-I、Col-III蛋白表达水平（P＜0.05、0.01）。 3.8 人参不定根对心肌缺血小鼠心脏组织TGF-β1和NF-κB通路相关蛋白表达的影响 TGF-β1和NF-κB通路在心肌缺血诱发的心脏纤维化中发挥着重要作用。为了确定人参不定根是否通过下调TGF-β1和NF-κB通路来减轻心肌缺血诱导的损伤，采用Western blotting测定了心脏组织中TGF-β1、p-NF-κB和p-IκB的蛋白水平。如图5所示，与对照组比较，模型组小鼠心脏组织TGF-β1、p-NF-κB和p-IκB蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05、0.01）；与模型组比较，人参不定根各剂量组p-NF-κB蛋白表达水平显著降低（P＜0.01），人参不定根高剂量组TGF-β1、p-IκB蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。表明人参不定根通过下调TGF-β1和NF-κB通路来减轻心肌缺血小鼠的心脏纤维化。 3.9 人参不定根对心肌缺血小鼠心脏组织NLRP3炎症小体通路相关蛋白表达的影响 如图6所示，与对照组比较，模型组小鼠心脏组织NLRP3、TXNIP、Caspase-1、Caspase-1 cut、IL-1β和IL-18的蛋白表达水平显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）；与模型组比较，人参不定根各剂量组NLRP3、TXNIP、IL-1β和IL-18的蛋白表达水平显著降低（P＜0.05、0.01、0.001），人参不定根高剂量组Caspase-1、Caspase-1 cut的蛋白表达水平显著降低（P＜0.05、0.01）。表明人参不定根可通过降低NLRP3炎性小体的活性，从而保护心肌缺血诱导的损伤。 4 讨论 人参不定根是利用生物反应器技术精心培育的组织培养物。目前，研究已经证实，与天然人参相比，人参不定根具有同等的安全性[24]，并且含有相似的皂苷成分[25]，如人参皂苷Rg1、Rg2、Re、Rb1、Rc、Rb2。值得注意的是，在检测中发现，人参不定根中的Rb1、Rb2、Rd、Rg1＋Re含量均超过了正常人参，这充分表明人参不定根在质量与品质上相较于普通人参具有更显著的优势。这一发现为人参不定根的进一步应用与开发提供了有力支持。 人参作为一种传统的名贵药材，现代医学已经证实其具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化和抗衰老等多种功能[26-28]。目前不同的研究团队也对人参不定根的药理作用进行了研究，许多结果显示人参不定根具有与正常人参相似的化学成分和药用价值，人参不定根同样能够发挥降血糖[29]、抗纤维化活性[30]、抗氧化活性和抗疲劳[31]等多种作用。与人参相似，有研究表明人参不定根能明显增加迟发性过敏反应的发生率，并能轻微增加脾淋巴细胞的增殖[32]。An等[33]发现野山参的不定根能显著缩短小鼠逃离平台的潜伏期，减少小鼠游向平台的距离，并改善记忆力。Murthy等[25]发现，人参不定根提取物能显著降低糖尿病大鼠的血糖浓度。然而，人参不定根对心肌缺血所致损伤的影响及其内在机制尚未见报道。 本研究发现人参不定根能有效抑制ISO处理小鼠的心肌凋亡、心脏纤维化和炎症细胞因子水平。人参不定根可通过减少TGF-β1、NF-κB和NLRP3炎症小体通路的活化来提供心肌保护。这些结果表明，对于心肌缺血引起的损伤患者来说，人参不定根是一种很有前景的人参替代品。 在心肌缺血的发病过程中，炎症因子在心肌细胞凋亡和坏死中起着至关重要的作用。心肌缺血会导致线粒体功能障碍，并伴随着活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平的显著增加[34]。过量产生的ROS会导致炎症细胞因子释放和炎症细胞浸润，促进心肌凋亡和细胞外基质沉积[35]。在本研究中，人参不定根能明显抑制炎症反应，降低IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α水平；人参不定根还具有抗凋亡作用，可降低Bax和Caspase-3蛋白水平。此外，使用人参不定根治疗的心肌缺血小鼠的细胞外基质成分如Col-I、Col-III、MMP2、MMP9、TGF-β1和Fn的表达明显下降。 人参皂苷是人参的主要功能成分，多项研究表明人参皂苷具有保护心脏的作用。研究结果表明，人参不定根中的人参皂苷主要有人参皂苷Rg1、Rg2、Re、Rb1、Rc、Rb2和Rd。人参皂苷Rb2在人参不定根中的含量相对较高。Xue等[36]发现人参皂苷Rb2通过上调Sirtuin 1的表达、抑制炎症反应和减轻氧化应激减轻心肌梗死/再灌注损伤。人参皂苷Rg2可下调心肌缺血小鼠心肌纤维化相关基因的表达水平，并改善其心脏功能[37]。研究表明，人参不定根能减轻ISO诱导的心肌缺血损伤，而人参不定根中的人参皂苷可能在这些保护作用中发挥了重要作用。 人参不定根含有丰富的元素，包括K、Mg、P、Ca、Zn和Mn。许多研究表明，这些元素对心脏病有益。对心肌梗塞患者补充K可预防或改善心肌梗塞引起的损伤[38]。Zn和Mn是超氧化物歧化酶的核心成分[39]，超氧化物歧化酶是一种重要的抗氧化酶，可降低心肌缺血损伤诱导的ROS水平[40]。低镁患者补充镁有利于减轻糖尿病心肌病损伤[41]。 越来越多的证据表明，TGF-β1信号通路的异常激活是心脏纤维化的主要原因[42]。在心肌缺血的小鼠中，TGF-β1可使TGF-β II型受体（TGF-β type II receptor，TβRII）和I型受体（TGF-β type I receptor，TβRI）磷酸化。TβRI和TβRII的异四聚体复合物可促进Smad2/3磷酸化，从而可能导致纤维化相关基因的转录[43]。本研究结果表明，人参不定根干预的心肌缺血小鼠TGF-β1蛋白水平明显下降，表明人参不定根能够抑制TGF-β1信号通路。NF-κB信号通路对炎症反应有重要影响[44]。本研究结果显示，人参不定根能显著降低缺血心脏中IκB和NF-κB的磷酸化。 心肌缺血的早期阶段会引发由损伤相关分子模式（damage-associated molecular patterns，DAMPs）介导的急性炎症反应[45]。DAMPs可提高促炎趋化因子和细胞因子的水平，导致炎症细胞聚集和一系列炎症反应。DAMPs还可能触发NLRP3炎性体的激活。NLRP3炎性小体是一个多蛋白复合物，包括NLRP3、TXNIP、ASC和Caspase-1，能够触发活性IL-1β和IL-18的产生[46]。此外，活化的IL-1β和IL-18会导致心肌炎症，从而促进心肌凋亡和心脏纤维化[47]。因此，抑制心肌缺血后的心肌炎症对于缓解心肌凋亡和心脏纤维化至关重要。本研究结果表明，人参不定根能有效降低心肌缺血小鼠血清中的炎症因子水平。蛋白免疫印迹分析表明，人参不定根抑制了NLRP3、TXNIP、Caspase-1、Caspase-1 cut、IL-1β和IL-18的上调。这些发现表明，人参不定根通过抑制NLRP3炎性体诱导的炎症反应，对心肌缺血诱导的损伤具有保护作用。 综上，本研究发现人参不定根可通过抑制TGF-β1、NF-κB信号通路和NLRP3炎性小体的活性来减轻心肌缺血引起的损伤。

正在做一个6类化药，对照品中检院有提供；为了省钱，在中检院购买了一支对照品（100mg ）,用来标定购买的原料药（GMP厂家提供）作为工作对照品；标定方法：按原料药质量标准全检，HPLC外标法标定含量（没做结构鉴定）； 已经使用工作对照品做完了含量和溶出度的方法验证；问题来了： 1.在中检院可以提供对照品的情况下，可以使用自己标定的工作对照品么？（CDE审评三部张哲峰的文章：“不应使用其他来源者”，这话的意思是必须在中检院购买？）； 2.如果可以使用工作对照品，那么，这样简单标定就可以使用了么？ 3.如果不能使用工作对照品，那现在的情况下怎么补救？ 请各位指教，谢谢！

【求助】中检所胆固醇对照品要检测胆固醇的含量，但是中检所的胆固醇对照品是用作鉴别的，应该怎么解决这个问题？这样的对照品还能用于含量测定吗？请高手指点，谢谢！

请问用外标法测定浓度时，对照品的浓度应该和被测物有怎样的关系？是不是要跟被测溶液差不多啊？还是有其他什么规定？请问各位高手应该怎样选择对照品的浓度呢？还有一个问题，用的是紫外检测器，我自己做的紫外扫描谱的最大吸收波长和文献不一致，我是按照文献中的波长还是自己扫描的波长来检测呢？

各位前辈，小妹有个问题请教，我用的是安捷伦的高效液相色谱仪，最近做黄柏中盐酸小檗碱的含量测定，347nm，对照品不出峰，样品也就前四分钟内有点杂质峰。很奇怪，以前做的都很正常，这次流动相，对照品以及样品的处理方法都没有变。怀疑是流动相得原因，所以让同事帮忙复检，结果也一样。怀疑是柱子的原因，换了三根柱子，一根做的都有峰，但是个很奇怪的肩峰，另外两根都无峰。又怀疑是检测器的原因，但用它做其他的品种都很好。很是纳闷。想问一下各位前辈在工作中有没有遇到过这种类似的问题，最后是怎么解决的。感激不尽！[em09508]

请问水中磷酸根、磷酸氢根、磷酸二氢根用AS11柱能分开么，什么条件？

[size=4]1.所用对照品（标准品）中检所已经发放提供（可参阅中国药典2005年版二部附录ⅩⅤG），且使用方法相同时，应使用中检所提供的现行批号对照品（标准品），并提供其标签和使用说明书，说明其批号，不应使用其他来源者；如使用方法与说明书使用方法不同（如定性对照品用作定量用、效价测定用标准品用作理化测定法定量、UV法或容量法对照品用作色谱法定量等），应采用适当方法重新标定，并提供标定方法和数据；若色谱法含量测定用对照品用作UV法或容量法，定量用对照品用作定性等，则可直接应用，不必重新标定。 2.申报临床研究时，如中检所尚无供应，为不影响注册进度，可先期与中检所接洽制备和标定，申报时提供标定报告、标签（应标明效价或含量、批号、使用效期）和使用说明书；也可与省所合作标定，申报时提供标准品或对照品研究资料，“说明其来源、理化常数、纯度、含量及其测定方法和数据”；标定有困难时，可使用国外药品管理当局或药典委员会发放的对照品（标准品）或国外制药企业的工作对照品（标准品），进行标准制订和其他基础性研究，但应提供其标签（应标明其含量）和使用说明书，能保证其量值溯源性；也可使用国外试剂公司（如sigma公司等）提供的对照品（标准品），但应提供试剂公司该批对照品（标准品）的检测报告（用作含量测定时，应有确定的含量数据），如为高纯度试剂，提供了国外试剂公司检测报告（用作含量测定时，应有确定的含量数据）时，也可使用，并应能保证其量值溯源性，但申请人应及时与中检所接洽对照品（标准品）的标定事宜，临床研究期间完成此工作。 3.直接申报生产品种，如中检所尚无供应，可参照2中要求进行，并提供相应研究资料，但申请人在标准试行期间应与中检所接洽并完成的标定事宜。 4.对照品（标准品）标定的技术要求： 4.1.创新药物 应说明对照品（标准品）原料的制备路线、精制方法、质检报告，提供理化常数和纯度的测定数据及分析结果（包括相关图谱），提供标定方法的研究和验证资料（如与原料药质量研究项下相同，可不再提供）、含量测定数据及经统计分析得到的对照品（标准品）含量结果，并说明进行临床前药学研究、药理毒理学研究所用样品的含量是否用该批对照品（标准品）确定或可用该批对照品（标准品）进行量值溯源。 ●纯度测定方法应选用色谱法，并采用两种以上不同分离机理或不同色谱条件并经验证的色谱方法相互验证比较，同时采用二极管阵列检测器或其它适宜方法检测HPLC法的色谱峰纯度，而后根据测定结果经统计分析确定对照品（标准品）原料的纯度。 ●对于组份单一、纯度较高的药物，对照品（标准品）标定方法宜首选可进行等当量换算、精密度高、操作简便快速的容量法。可根据药物分子中所具有的官能团及其化学性质，选用不同的容量分析方法，但应符合如下条件：（1）反应按一个方向进行完全；（2）反应迅速，必要时可通过加热或加入催化剂等方法提高反应速度；（3）共存物不得干扰主药反应，或能用适当方法消除；（4）确定等当点的方法要简单、灵敏；（5）标化滴定液所用基准物质易得，并符合纯度高、组成恒定且与化学式符合、性质稳定（标定时不发生副反应）等要求。 标定方法的选择要关注如下事项：（1）供试品的取用量应满足滴定精度的要求（消耗滴定液约20ml）；（2）滴定终点的判断要明确，提供滴定曲线。如选用指示剂法，应考虑其变色敏锐，并用电位法校准其终点颜色。（3）为排除因加入其它试剂而混入杂质对测定结果的影响，或便于剩余滴定法的计算，可采用“将滴定的结果用空白试验校正”的办法；（4）要给出滴定度（采用四位有效数字）的推导过程。 标定结果要根据3个以上实验室各不少于15组测定结果经统计分析，去除离群值和可疑值后的结果，并报告可信限。 ●如该药物没有可进行等当量换算并符合要求的容量法时，可采用反复纯化的原料，色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和挥发溶剂等后的理论含量确定为标准品含量，以此为基准进行对照品（标准品）的换代和量值传递。 ●用于抗生素微生物检定法的第一代基准标准品可参照上述方法标定，如为多组份抗生素，其组份比例应与拟上市产品组份比例一致或接近，或以其中某一组份纯品为基准标准品，但要注意标准品换代时量值传递的恒定。 ●仅用于鉴别定性的化学对照品，注重其结构确证的研究资料，纯度和含量的要求一般可适当降低。 ●杂质对照品，用作限度要求时，应提供其来源（合成路线）、结构确证的研究资料，应具备较高的纯度和含量，并提供纯度和含量的的测定结果，提供质量控制标准。 4.2其他类别药物，可参照4.1要求进行。 ●用于抗生素微生物检定法的标准品须用上市国的国家标准品或原发厂的工作标准品为基准标准品进行标定。标定时采用的原料药应符合相应要求，并提供原料的制备路线、精制方法、质检报告，提供理化常数和纯度的测定数据及分析结果（包括相关图谱）。标定须用现行版中国药典附录收载的“抗生素微生物检定法”－三剂量法，并提供详细的方法学研究，包括检定菌和培养基的选择、剂量和剂距选择、缓冲液选择（如与质量研究项下相同，可不再提供）。每次标定结果均应照“生物检定统计法－量反应平行线测定法（3.3）”法进行可靠性测验及效价计算。按照《药品注册管理办法》，上市药品质量标准所用标准物质均须由中检所负责标定和管理，药品研发过程中，研制单位应注意及时与中检所联系标定事宜，以保证研发工作的连续性。[/size]

[size=3]我是学中药分析的，对化学药的分析不怎么在行。今下午，一同事问我，在西药的含量测定中的K值是什么？我愣了，从来没听说过啊！问我同学，才知道，是为了防止在称取对照品时称量的误差而造成含量测定的误差加大，在称取对照品时，通常是称取两次对照品，配制两个浓度的对照品溶液。然后，计算出一个平均浓度。K值=对照品溶液的浓度/其峰面积以上说的对否？我在做中药分析过程中，从没遇到这种问题，但我觉得，为什么中药分析为什么不采用这种方法？同时，两个平行溶液间配制时，有无要求？如Rd值。[/size]

现在我们公司增加辅料乙醇和醋酸钠的红外检测，需要购买红外乙醇对照品和醋酸钠对照品。请各位大侠提供除了中检所外，能够在一个星期内买到的厂家。谢谢大家了！！！！

请教：注射用水溶性维生素中关于烟酰胺、等5项的液相检测方法其标准为烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素Ｃ钠和核黄素磷酸钠　照高效液相色谱法（中国药典1995年版二部附录Ⅴ　Ｄ）测定。　　色谱条件与系统适用性试验　用氨基键合多孔硅胶为填料，以（0.02mol/L）磷酸二氢钾溶液-乙腈（27:73），用10％盐酸溶液调节pH为5.3的溶液为流动相，流速为1.5ml/min，检测波长：烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm；核黄素磷酸钠用萤光检测λEX＝445nm、λEM＝520nm。各组分的分离度应符合要求。　　对照品溶液的制备　（1）取烟酰胺对照品约150mg、硝酸硫胺对照品约12mg、盐酸吡哆辛对照品约18mg、泛酸钠对照品约62mg，分别精密称量置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，精密量取2ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液（Ⅰ），此溶液置暗处充氮气于零下20℃可保存1个月。（2）取维生素C钠对照品约425mg、核黄素磷酸钠对照品约19mg，精密称定，置50ml量瓶中加水溶解并稀释至刻度摇匀，精密量取2ml置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀即为对照品溶液（Ⅱ），此溶液必须临用新鲜配制，并于零下20℃保存，用前放置至室温。　　等容混合对照品溶液（Ⅰ）和对照品溶液（Ⅱ）即为对照品溶液。　　供试品溶液的制备　取装量差异项下的内容物约2瓶重量，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取15ml置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度。　　测定法　取对照品溶液和供试品溶液各10μl，交替注入液相色谱仪，测定，用外标法计算各组分含量，即得。目前存在问题用紫外检测的分不开5种组分，大家有什么好办法，谢谢