小鼠骨髓基质细胞

大神们，帮忙推荐台主要针对小鼠骨髓细胞数检测的仪器，再一个就是能对小鼠血细胞的种类分类，计数。要求不高。。但是这种针对性的仪器还这难找。。

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名 称：骨髓细胞的提取目的：分离并培养骨髓间充质干细胞原理：先分离出单核细胞然后再通过培养分离出骨髓间充质干细胞内容：步骤一：小鼠骨髓细胞的获取1． 断颈处死小鼠（7-12周，雌雄均可），投入盛有250ml左右的0.1%新洁尔灭或75%酒精中浸泡3-5分钟，拎出后将小鼠仰面翻铺于超净台上一个消毒托盘上。2． 用眼科镊小心捏起小鼠两髋关节之间的腹部皮肤，用眼科剪小心剪开皮肤，并分离两下肢的皮肤，往下在脚踝处剪断，往上在髋关节处剪断，这样可以游离出小鼠的两条下肢。将它们放入另外一个消毒托盘中，并换一套新的剪子和镊子。手术器械事先均必须消毒。3． 小心剥离肌肉，分别剪下Femurs and Tibias, 剪去两端软骨，露出红色的骨髓腔。注意尽可能少的剪走骨髓腔。4． 拿两支5ml无菌注射器，每支吸取5ml IMDM(10%FBS, 50/50u/ml Pen/Strep)，换装一个4号针头（又称皮针）或1ml注射器的针头，并用无菌的针头套管将之轻轻拧弯。轻轻插入骨髓腔，对准一个无菌15ml离心管，将细胞冲出。每根骨用2.5ml IMDM培养液左右即可基本冲下骨髓腔内的细胞。5． 300C下离心，1200转/10分钟，去上清，但留1ml，以便用于在振荡器上悬浮细胞。6． 加进氯化铵溶液（NH4Cl: 8.99g/L, KHCO3: 1g/L, Na4-EDTA: 0.037g/L ，过滤灭菌, 40C储存）裂解红细胞，按1: 9比例，即1ml 细胞悬液，加进9ml氯化铵溶液，混匀，冰上10分钟。 7． 300C离心，1200转/10分钟，去上清。步骤二：淋巴细胞分离液分离小鼠骨髓细胞1． 按步骤二方法采集小鼠骨髓细胞，并破红细胞2． 细胞用4ml培养液悬浮，缓慢留置于8ml淋巴细胞分离液液面上，2000rpm for 20min.3． 小心吸取云雾状底层的基质细胞约1.5ml的体积，置于1个盛有1ml无菌细胞培养用PBS的15ml离心管中，颠倒混匀，1200rpm for 10min, 去上清4． 如果是注射用细胞，则用5ml PBS洗涤细胞2次；5． 离心沉淀下来的细胞用50-200ul PBS，计数细胞，并计算所需细胞体积数铺板培养

骨髓间充质干细胞总结 2003年8月，为给大家提供一个网上交流干细胞研究经验的平台，我们干细胞版设立了骨髓间充质干细胞培养讨论区，经过近三个月的讨论学习，我们既学习丰富了自己的知识体系，也对间充质干细胞尤其是分离培养方面有了更为详实的认识，为了大家阅读的方便，我们决定把本版中的相关内容，同时参考部分书目和文献，做一总结。一、骨髓间充质干细胞的分离 目前常用的分离MSC的方法有全骨髓法和密度梯度离心法，全骨髓法即根据干细胞贴壁特性，定期换液除去不贴壁细胞，从而达到纯化MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中细胞成分比重的不同，提取单核细胞进行贴壁培养。随着对MSC表面抗原认识的深入，有人利用免疫方法如流式细胞仪法、免疫磁珠法等对其进行分离纯化，但经过流式或磁珠分选后的细胞出现了增殖缓慢等一些问题，加之耗费较大和技术的难度，在某种程度上限制了这些方法的广泛应用。1. 直接培养法（全骨髓培养法） 1987年，Friedenstein等发现在塑料培养皿中培养的贴壁的骨髓单个核细胞在一定条件下可分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞，而且这些细胞扩增20－30代后仍能保持其多向分化潜能，这类细胞即为骨髓间充质干细胞（BMSC），其工作对今后MSC的研究具有重要意义，不仅证实了骨髓MSC的存在，而且创建了一种体外分离和培养MSC的简便可行的方法，得到了广泛的应用。culture-spirit采用直接贴壁法，24-36小时首次换液，换液时用PBS洗两次，7-10天传第一代，以后2-3天传代。培养基采用Hyclone的DMEM/F-12（1：1），血清是天津TBD的FBS（顶级），得到了较好的培养结果。布兰卡根据自己培养大鼠MSC的经验，详细介绍了实验步骤：（1）接种后60-80分钟,换液去除悬浮细胞（2）原代培养24 h,48 h各换液一次（3）观察细胞情况，在原代培养7天左右时，如观察到成片的典型形态的细胞，在瓶底用Marker笔标记，0.25%胰酶消化，镜下观察控制，约5-10分钟（室温太低时应放置到孵箱中），加入全培养基终止消化，瓶体朝上，吸管轻轻吹打4-8分钟，尤其是标记部位。不要用力吹打，以免把贴壁较牢的成纤维细胞，上皮样细胞吹打下来。（4）传代到新瓶中，加入少量培养基，孵箱静置20-30分钟后，MSC大多牢固贴壁。瓶底朝上，轻轻吹打，丢弃悬浮以及贴壁不牢的细胞（大多是上皮样细胞），加入全培养基开始传代培养，如观察仍有较多杂细胞，可重复上述步骤。（5）经上述处理后，原代的那瓶细胞仍有一些MSC生长，可继续按原代培养，如观察到MSC的克隆，仍可按上述步骤纯化处理。（6）原代或传代的细胞如观察的少量成片的杂细胞，可直接镜下瓶底标记后，超净台里用长吸管尖端机械刮除，吸出去掉。菊花与刀用的是全骨髓培养法，直接用含10%的FBS培养基冲洗大鼠的股骨和胫骨，为了避免冲起许多气泡应缓慢冲，冲的次数不应太多。冲洗后不用离心直接接种在培养瓶里，48 h~72 h后首次换液，一般7~10天可传代。天之饺子介绍的小鼠MSC的分离方法：取6 w小鼠的股骨和胫骨，直接用含培养基冲出骨髓，一定要尽量把干垢端的骨髓冲干净。冲洗后不离心直接接种在培养瓶里，24－48 h后去悬浮，再接下来的每3－4天换液一次，直到需要传代。2. 密度梯度离心法 裴雪涛等用比重为1.073 g/ml的percoll分离（400 g×20 min）人骨髓MSCs，取界面处细胞层，离心后洗涤以2×105/cm2的密度接种，72 h后更换培养液，弃掉未贴壁细胞，以后每3 d换液一次。细胞长到80％汇合时1：1传代。菊花与刀利用PERCOLL密度1.073分离大鼠MSC 时，用2400 rpm×20 mins后可见中间有一层约1～2 mm厚的白色层，仔细用吸管吸取这一层再用PBS离心2遍即可加培养基和胎牛血清培养即rMSCs。周进明等利用密度为1.082的percoll分离小鼠MSCs，500g×30min离心后，取中间的单个核细胞层，PBS洗两次，接种于IMDM培养基，1 d后换液，去掉非贴壁细胞，以后每3-4天换液。jetter用过FICOLL,FERCOLL,上海二分厂的淋巴细胞分离液分离MSC细胞效果都不错，当然所获细胞群的纯度不一，Percoll最纯，而上海二分厂的淋巴细胞分离液所获细胞群的传代能力优秀（35 PASSAGE）。本版的部分园友认为MSC贴壁培养得到的细胞不均一，但是多能分化能力和增殖力好，percoll分离得到的细胞较为均一，多能分化性和增殖力不如贴壁培养的，尤其是增殖力相差很远，有人添加bFGF或/和表皮生长因子发现可以增强增殖能力。二、骨髓间充质干细胞的培养 天之饺子认为，间质干细胞的培养一定要用塑料培养瓶，不能用玻璃的。因为象间质干这类的基质细胞不易贴玻璃，而且现在买的进口好品牌的培养瓶都涂有一层促细胞贴壁的物质，多数园友培养时都添加10－15％胎牛血清。分离培养结果的差异可能是由于各个研究小组标本来源、采用的分离方法不同从而所获得的细胞不同，或者用来检测的细胞代数不同，或者培养过程中用的胎牛血清不同，导致MSCs获得或失去这些表面标记物的表达。三、骨髓间充质干细胞的特性 体外培养的MSC体积小，成梭形，核浆比大。不表达分化相关的细胞标志，如I、II、III型胶原、碱性磷酸酶或Osteopontin；也不表达SH2、SH3、CD29、CD44、CD71、CD90、CD106、CD120a、CD124、CD166和多种表面蛋白，这群细胞特性稳定，扩增一代和两代后的细胞同质性分别达到95％和98％。MSC联系传代培养和冷冻保存后仍能具有多向分化潜能，而且保持正常的核型核端粒酶活性，但不易自发分化，在体外特定的诱导条件下，MSC可以分化为骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉、神经等多种细胞。四、其他相关内容 Jiang将从成人以及成年大鼠和小鼠骨髓分离的间充质干细胞（CD45－TER119－）命名为多潜能成年祖细胞，他们证明，MAPC高表达端粒酶，而且随着细胞的扩增，端粒的长度不变，单个MAPC来源的细胞群不仅能在体外向3个胚层的细胞分化，而且能在体内能够向各种组织细胞分化，相比较而言，形态与MSC相似的体外培养的皮肤成纤维细胞则不具有类似的分化潜能。参考文献 生理学报2003.55（2）：153－159 人骨髓间充质干细胞在成年大鼠脑内的迁移及分化中华放射医学与防护杂志.2002,22(3).-167-169 培养小鼠骨髓间充质干细胞及其移植后在体内的定位分布Exp Biol Med Vol. 226:507 520, 2001 Mesenchymal Stem CellsNATURE |VOL 418 | 4 JULY 2002 Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adult marrow干细胞生物学 裴雪涛 主编

近日，来自加利福尼亚大学的研究者发现了在人类骨髓干细胞和所有的免疫细胞之间存在一类“环节缺失”（missing link）的细胞。这或许为我们深入理解免疫系统以及免疫系统疾病发生的分子机制提供帮助。相关研究刊登在了9月2日的国际杂志Nature Immunology上。这项研究是在人类骨髓中进行的，因为其包含了产生人类自出生后所需血液的所有的干细胞。理解成人正常血液的形成是揭开白血病发病机制关键的一步。之前的研究中，研究者重点研究了骨髓中的血液干细胞，这种干细胞生存时间比较久，可以再生，而且可以产生所有的血液细胞。在这过程中，干细胞可以分裂产生其发育的中间状态体，称为前体干细胞，前体干细胞可以产生血液的不同谱系，比如产生红细胞或者血小板等。和干细胞一样，祖细胞也非常稀少，因此研究就好比海里捞针一样，研究者Lisa这样说，此前的研究工作中，他们发现了一种具有部分分化能力、相当成熟的淋巴祖细胞。在这项最新的研究中，研究者描述了一种更为原始的可以分化为整个免疫系统所需细胞的祖细胞。

【序号】：1【作者】：杨涛【题名】：不同层软骨细胞与骨髓间充质干细胞在体内外三维共培养时细胞外基质特点的实验研究【期刊】：大连医科大学【年、卷、期、起止页码】：2017【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C447WN1SO36whLpCgh0R0Z-ifBI1L3ks338rpyhinzvy7Kt4RMGSMaxxH2WkQVeTlx_sUqdJWIk0PB_cP8FsBxdg&uniplatform=NZKPT

【序号】：2【作者】：黄可欣1于军2石搏【题名】：大鼠骨髓间充质干细胞培养方法改良与鉴定【期刊】：中国老年学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2019,39(14)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iLik5jEcCI09uHa3oBxtWoNXIvaiQB80L3Jul38AtFf3UeTB_BlOzKJibUJyew7WW&uniplatform=NZKPT

【序号】：3【作者】：周年1,2,3刘波1,4徐彭【题名】：大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和分化能力鉴定【期刊】：江西中医药. 【年、卷、期、起止页码】：2018,49(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i0-kJR0HYBJ80QN9L51zrP3ylMAV4CgQ9wpp7ZMmE5O8NBqbZq4aly75LaltU8u1l&uniplatform=NZKPT

【序号】：4【作者】：李倩晓1那荣妹2刘百亭【题名】：SD大鼠骨髓间充质干细胞原代培养条件的选择【期刊】：中国老年学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2017,37(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RqLtq4qv82HhSJrd4mMlLD1sEVOCJ2Utcht-M6YZ-Ko0&uniplatform=NZKPT

【序号】：1【作者】：柏秀娟李一凡时霄冰【题名】：SD大鼠骨髓间充质干细胞的原代培养及鉴定【期刊】：中国煤炭工业医学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2022,25(02)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iJTKGjg9uTdeTsOI_ra5_XQ1nc-PzVE0xyf-gP3YJd2uBAacMkWEJ5FZ3Wo5eFSGS&uniplatform=NZKPT

【序号】：5【作者】：王博荣1鲁曦1张敏龙【题名】：一种改良大鼠骨髓间充质干细胞培养方法【期刊】：中华肺部疾病杂志(电子版). 【年、卷、期、起止页码】：2017,10(01)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0RrntXS8bbQWa2nxXxa6LsSXxNfFO7FPG8wvrj5FsSgFx&uniplatform=NZKPT

原文是Purton, L.E., and Scadden, D.T. (2007). Limiting Factors in Murine Hematopoietic Stem Cell Assays. Cell Stem Cell 1, 263-270.发表在2007年cell stem cell 杂志上，最近由于要进行相应的课题研究，拿来精读了一番，做了一个笔记，发上来和大家分享，由于初涉小鼠造血干细胞这个领域，肯定有很多地方理解不全和错误，请大家指正。下面是我的精读笔记：小鼠造血干细胞研究方法综述一．关于HSC 免疫表型1. Thy1.1lo,Lin-Sca-1+Cells:其缺点是Thy1.1只表达于C57BL/Ka-Thy1.1小鼠，不表达于常用的C57BL/6小鼠；2. Lin- c-Kit+ Sca-1+ Cells（LSK）：异质性，含有祖细胞，HSC含量不超过10%；结合CD34和Flt3可以分为long-term repopulating HSCs (LKS+ CD34- Flt3-) ，short-term repopulating HSCs (LKS+ CD34+ Flt3-) ，以及multipotent progenitors(LKS+ CD34+ Flt3+)；3.荧光染料标记HSC: Rhodamine 123, Hoescht 33342, 以及Side Population，Rhodamine 123为线粒体染料，Hoescht 33342为DNA染料，HSC能够更多地将这两种染料泵出细胞外，所以染色较浅；4. SLAM Family Members：SLAM antigens (CD150+ CD244-CD48- cells)，其优点是不像Thy1.1和Sca-1其表达受到品系和发育阶段等的影响，在更多的种系的小鼠中适用二．克隆形成实验：主要反映的是祖细胞的造血能力，不反映HSC，检测T系和B系需要另外特定的培养条件；三．Cobblestone Area-Forming Cells/Long-Term Culture-Initiating Cells，鹅卵石样区域形成细胞实验/长期培养-启动细胞实验：体外检测更早期造血干/祖细胞的方法，但由于feeder layers和培养条件不同，实验结果在不同实验室间稳定性较差，对于其是否真正能检测造血干细胞也比较有争议，不过在一些情况下，比如归巢（homing）或植入（engraftment）有缺陷导致体内造血重建实验无法进行时，这两个方法是较好的替代方法；四．Colony-forming unit-spleen (CFU-S)脾集落单位形成实验：属于短期（1-3周）体内重建实验，检测的干祖细胞比体外CFC早，但比HSC晚；五．long-term repopulating assays，长期重建实验，包括：1. competitive repopulation assay：竞争重建实验：属于定性或者半定量研究HSC重建能力的方法，不能区别是HSC的数量还是质量造成的结果差异，得到的结果为RU即重建单位；2. limiting dilution assay：统计的指标是造血重建失败的小鼠数目，采用泊松分布来计算HSC的频率，得到的结果为CRU即竞争重建单位；Stem Cell公司的免费软件L-Calc,可用于分析实验结果。limiting dilution assay有两种方法：1CRU assay，采用最小数的HSC作为竞争细胞，可以在单细胞水平检测HSC；2也称为CRU assay，采用标准的，足量的HSC作为竞争细胞，不能在单细胞水平检测HSC；3serial transplant assay，多代移植，最为严格的检测造血干细胞的方法；六：Limiting Dilution Assays需要考虑的几个重要因素：1.竞争细胞：1compromised bone marrow，即连续两代重建成功的骨髓细胞，比较耗时2W41/W41受体小鼠：c-kit基因发生突变，具有更加敏感的宿主微环境，能够检测更少的植入的HSC，不需要另外的HSC作为支持细胞（竞争细胞）；3全骨髓细胞（whole bone marrow cells）：经验表明2 X105 competing bone marrow cells比较适合2.受测细胞（Test Cells, Unknown HSC Potential）：有人用LKS+ CD34- cells，但作者认为全骨髓细胞最好，原因是这种方法是在功能上评价HSC，避免了HSC在基因修饰的小鼠中免疫表型发生变化导致的结果的不可靠，在作者实验室通常采用的受测全骨髓细胞数为8 X 103到2 X106；3.重建失败的标准：现在一般认为受测细胞的重建比例小于1%为重建失败；在重建比例中，红细胞是不计算在内的，因为其不表达CD45,但一般认为只要其他系重建成功，红系应该也会重建成功；4.分析重建的时间点：看长期造血重建，最少要16周，最佳是六个月；5.其他考虑因素：归巢，HSC各系分化阻滞或减弱，祖细胞增殖动力学特性的改变，造血微环境对HSC的影响等等七．区分供体，受体的遗传学标志：最常用的是CD45.1,CD45.2系统，还有可以通过性别（Y染色体）来区分。

随着医学知识的普及，“骨髓移植”早已不是什么新鲜词了，很多人都知道，如果人的骨髓出现问题，失去造血功能，就可能不得不接受骨髓移植手术。但是成功接受骨髓移植后，患者的身体方面会发生什么变化，一般人恐怕都不了解。 　　像还是不像？　　前些时候，有人提出：进行骨髓移植后，两个非亲非故的陌生人的相貌越长越像。还有一种比较流行的说法认为患者的性格会发生变化。　　这些问题，大都源于一些媒体的报道。　　说相貌越来越像的报道举了实例。第一个例子是１９９６年中华（上海）骨髓库第一个配型成 功，并捐献造血干细胞的志愿者孙伟，据报道，当年２６岁的他与１１岁的小患者术后一直保持联系，通信、寄照片。上海红十字会的工作人员表示：“所有见过照片的人，都觉得像极了。”而另一位捐髓者周海燕也是同样的情况。文章还提到，越长越像的是两位移植时间比较长的患者，因为孙伟和周海燕的捐髓手术分别是全国的第一例和第三例。　　还有报道说：“一名皮肤白皙的女士成功地将骨髓捐给一名皮肤黝黑的女大学生，奇怪的是这名大学生的皮肤奇迹般地日渐白皙；脾气暴躁的一名患者在接受了骨髓移植后，渐渐地脾气如同骨髓捐献者一般温和了。在中国仅有的十几例骨髓成功移植案例中，这种奇迹不能仅仅用巧合来解释。”　　这种说法有科学性吗？有的读者看到报道后告诉记者，生活中两个非亲缘关系的人越长越像是有可能的，“夫妻脸”就是一个例子，甚至还有说法认为孩子会长得像保姆或是奶妈，而血液，似乎比共同生活、奶水哺育等因素更“可靠”。　　骨髓移植，移植的是造血干细胞，干细胞在揭示生命奥秘方面的巨大潜力叫人对这些问题产生疑惑。　　骨髓移植到底改变了什么？　　中国医学科学院血液学研究所造血干细胞移植中心主任韩明哲博士接受了本报记者的采访，他从事血液病临床和基础研究工作已经近２０年。　　谈到骨髓移植，韩明哲博士更倾向使用的词是“造血干细胞移植”。他说，造血干细胞移植是经大剂量放化疗或其他免疫抑制预处理，清除受体体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞，阻断发病机制，然后把自体或异体造血干细胞移植给受体，使受体重建正常造血和免疫，从而达到治疗目的的一种治疗手段。　　据介绍，造血干细胞移植目前广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤治疗，并获得了较好的疗效。１９９０年后这种治疗手段迅速发展，全世界１９９７年移植例数达到４．７万例以上，自１９９５年开始，自体造血干细胞移植例数超过异基因造血干细胞移植，占总数的６０％以上。同时移植种类逐渐增多，提高了临床疗效。　　造血干细胞移植后，患者身体的确会发生一些变化。韩明哲博士告诉记者，根据现有的已经被普遍接受的研究资料，接受骨髓移植者，最常见的改变是血型，移植后患者的红细胞血型变为供者红细胞血型。比如供者是Ａ型，移植后不论移植前患者血型为何型，均变为Ａ型。内分泌系统也会改变：由于移植前预处理为大剂量照射和化疗，这种治疗对身体器官有很大的损伤。移植后很多器官组织短期内得到恢复，但是性激素分泌变化显著。男性患者出现精子数量减少，但其性功能（性生活）不受影响。女性患者常常出现闭经。另外，由于移植后的免疫反应，部分患者会出现口腔溃疡、皮肤色素沉着。　　典型的伪科学思维？　　对于骨髓移植“移植”走了相貌、性格，某科技网站发表评论说：“这是典型的伪科学思维。即使所说的事例不是编造的，要在两个人之间找到某种无法定量测定的相似性有什么难的？为什么这一对是相貌相似，那一对是肤色相似，另一对又是性格相似？骨髓的影响会因人而异不成？怎么知道这种相似性就是骨髓引起的？如果统计表明大部分骨髓移植的结果是肤色都变相似了，还可以怀疑是否不是巧合。像这样因人而异的不同方面的相似性，连巧合都算不上。”　　也有专家认为，报道中所谓的“像”与“不像”是缺乏科学定义的，因为相貌受遗传背景控制，涉及到皮肤、骨骼、毛发等上百种细胞类型及其空间结构，是个相当复杂的多基因性状。而骨髓移植，主要为了将造血干细胞输给患者，以重建造血功能，这些都只能在血液中表达，怎么可能改变相貌呢？　　韩明哲博士告诉记者，近几年，研究结果表明造血干细胞具有可塑性，可以转变为血管、肝脏、脂肪、神经、肌肉等组织细胞。因此很多研究单位、医院研究用造血干细胞治疗冠心病、神经损伤、血管闭塞性疾病。但是他认为，因为成人患者骨骼生长已经停止，所以移植患者长相不会有大的改变。另外，同胞之间本身有一定的相似。他很肯定地说，据他所知，国内的研究和治疗中还没有出现这种情况，国外的科学文献也没有报道过这样的先例。　　韩明哲博士认为，接受捐赠者在性格方面的确可能会有改变，但是他强调这并非是造血干细胞移植的结果，而主要是因为患者通过一系列治疗后，对人生有另一种认识。并且移植后一段时间免疫力低下，在饮食、社交活动中需要注意避免感染，故很多患者会变得小心谨慎。　　至于其他方面，如异性之间的骨髓移植是否会改变患者的性别，韩明哲博士很明确表示绝对不会。他说，骨髓移植只是替换造血系统，尽管有的器官当中存在少量的供者细胞，但其他器官没有很大的改变，尤其是性器官。人的一生很多关键的生长发育是在胎儿期间完成的，一个器官的形成需要非常复杂的发育过程。因此，单纯通过骨髓移植改变人的性别是不可能的。　　不过也不是所有的专家都对此持怀疑态度，上海市血液中心专门从事白血病研究的仇志根博士在接受媒体采访时表示，也许有“越来越像”的可能，他说：传统观念认为，不同组织种类的干细胞是“世袭终身制”，不可逆转，然而在１９９９年，美国科学家首先证明人体干细胞具有“横向分化”的功能，比如造血干细胞可能转化为肌肉细胞、神经细胞、成骨细胞等等，反之亦然。这一里程碑式的发现立即轰动世界，两年后，《科学》杂志评出“２１世纪最重要的科学领域”，干细胞列十项之首。美国科学家曾将黑鼠的骨髓移植给白鼠，白鼠长出了黑毛发；英国科学家将骨髓植入心脏病人的心脏，结果骨髓干细胞分化构建成小的毛细血管，改善了心脏功能。在他看来，相貌的“移植”恐怕不仅仅是猜测或者空想。　　讨论还将继续。也有专家表示，关于国内的骨髓移植，可能这些话题都还不应该是“主角”，尽快解决国内骨髓库捐献者资料稀缺的问题才是目前最迫切的事情。

【序号】：1【作者】：刘璐璐【题名】：三维培养条件下骨髓间充质干细胞的形态学观察【期刊】：山西医科大学【年、卷、期、起止页码】：2022【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C475KOm_zrgu4lQARvep2SAkueNJRSNVX-zc5TVHKmDNkhj_JpBBTDZS90To-XUT-zkJYyY14qZp-BPIDn6w4bDJ&uniplatform=NZKPT

【序号】：2【作者】：李振江1徐晨阳1丁炳谦【题名】：羧甲基壳聚糖温敏凝胶诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化【期刊】：中国组织工程研究. 【年、卷、期、起止页码】：2017,21(18)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iAEhECQAQ9aTiC5BjCgn0Rg-Tv-L7sw-Jm0dHsN_sl7lEo4tBe2CTlHaZE6W7FGns&uniplatform=NZKPT

【序号】：1【作者】：张宁李小佩肖倩茹【题名】：梯度交联水凝胶用于骨髓间充质干细胞的三维培养与分化【期刊】：东南大学学报(医学版). 【年、卷、期、起止页码】：2018,37(04)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i0-kJR0HYBJ80QN9L51zrPykMtHqC9zZyLumdUzSnd49uxratj2CePE0w9L8JUMwY&uniplatform=NZKPT

【序号】：3【作者】：张宁李小佩肖倩茹【题名】：梯度交联水凝胶用于骨髓间充质干细胞的三维培养与分化【期刊】：东南大学学报(医学版). 【年、卷、期、起止页码】：2018,37(04)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7i0-kJR0HYBJ80QN9L51zrPykMtHqC9zZyLumdUzSnd4-Vv49Lrf5qmxCA42hyYsyg&uniplatform=NZKPT

【序号】：2【作者】：朱晓宇【题名】：人骨髓间充质干细胞成脂分化的体外优化培养体系研究【期刊】：上海交通大学【年、卷、期、起止页码】：2016【全文链接】：https://kns.cnki.net/kns8/DefaultResult/Index?dbcode=SCDB&crossDbcodes=CJFQ%2CCDMD%2CCIPD%2CCCND%2CCISD%2CSNAD%2CBDZK%2CCCJD%2CCCVD%2CCJFN&korder=SU&kw=%E4%B8%89%E7%BB%B4%E5%9F%B9%E5%85%BB%20%E7%BB%86%E8%83%9E%20%E5%87%9D%E8%83%B6

[size=15px][color=#595959]骨质疏松[/color][/size][size=15px][color=#595959]症(OP)是一种以骨量减少和骨微结构损伤为特征的全身性骨代谢性疾病，它增加了骨脆性和骨折风险，与人口老龄化密切相关，患病率一直很高，正在成为全球关注的问题。此外，由于绝经后性激素水平急剧下降，女性的患病率远高于男性。目前临床治疗骨质疏松的药物包括特立帕肽、雌激素、降钙素、双膦酸盐等，主要目的是促进骨合成和防止骨吸收。这些药物在长期使用中经常会引起不良反应。因此，寻找一种安全有效的治疗方法尤为必要。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]紫花前胡苷（Nodakenin，NK）是从中药独活（RAB）中分离得到的一种呋喃香豆素类化合物。NK已被证明具有抗炎、抗菌、抗氧化和抗血小板聚集作用，并能改善认知功能。最近，研究发现NK通过调节线粒体改善软骨退变和炎症反应，提高软骨下骨体积，从而缓解骨[/color][/size][size=15px][color=#595959]关节炎[/color][/size][size=15px][color=#595959]。然而，NK对OP影响的相关研究尚未见报道。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]评价NK对OVX小鼠的抗骨质疏松作用，探讨NK对体外成骨细胞和破骨细胞形成的调控机制。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]采用网络药理学、分子对接和分子动力学模拟技术来确定NK在[/color][/size][size=15px][color=#595959]骨质疏松症[/color][/size][size=15px][color=#595959]中的潜在靶点和通路。6-8周龄雌性C57BL/6J小鼠行卵巢切除术，术后8周给予不同剂量NK (5 mg/kg或20 mg/kg)灌胃治疗，连续6周。从4周龄C57BL/6J小鼠骨髓腔中分离并获得BMSCs和BMMs，进行药效观察及机制验证。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]通过测定碱性磷酸酶活性和各种成骨标志物的表达，发现NK处理显著促进骨髓间充质[/color][/size][size=15px][color=#595959]干细胞[/color][/size][size=15px][color=#595959]成骨分化，同时激活PI3K/AKT/mTOR信号通路。相比之下，PI3K[/color][/size][size=15px][color=#595959]抑制剂[/color][/size][size=15px][color=#595959]LY294002逆转了这些变化，抑制了NK的成骨分化作用。同时，通过下调c-Src和TRAF6抑制Akt和NFκB信号通路，从而有效抑制RANKL诱导的破骨细胞生成。此外，口服NK可显著提高小鼠骨量，改善卵巢切除(OVX)介导的骨微结构紊乱。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]这些数据表明NK通过促进骨生成和抑制破骨细胞生成来减轻OVX诱导的骨丢失。该研究可能为骨质疏松症提供潜在的治疗策略。[/color][/size]

【序号】：2【作者】：李军张鹏卢雪玲【题名】：壳聚糖负载原代培养自体骨髓间充质干细胞修复全层关节软骨缺损实验研究【期刊】：潍坊医学院学报. 【年、卷、期、起止页码】：2019,41(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7iLik5jEcCI09uHa3oBxtWoFvEHGTUVWmEdg45V5dosGvy6fb7mrvKACrbEH0OKOFk&uniplatform=NZKPT

2012年8月28日 英国医学研究理事会（MRC）分子生物学实验室的科学家们已经发现，人体内骨髓中的造血干细胞对酒精的主要分解产物是极为敏感的，这可能导致造血干细胞不可逆的DNA损害。相关研究在老鼠身上开展的，其结果发表于国际权威杂志Nature上，新的研究表明这种造血干细胞的DNA损害通常存在两个重要的控制机制：一种可以清除有毒分解产物（乙醛）的酶，一组能够识别和修复受损DNA的蛋白。缺乏这两种保护机制的小鼠由于血液干细胞闭塞导致骨髓造血功能衰竭。调查结果提供了一个解释，为什么有的人患有一种称为范可尼贫血（FA）的罕见遗传性疾病。患有这种疾病的人继承一个或多个FA基因突变，从而导致乙醛引起的DNA损伤得不到修复。因此，FA患者患发育缺陷、骨髓造血功能衰竭、血液和其他癌症的风险极高。这些人缺乏酶ALDH2来消除有毒的乙醛，因此可能对DNA的损伤异常敏感。作者认为，酒精消费量可能会导致造血干细胞永久性损坏，骨髓造血功能衰竭和加速老化，血癌风险增加。MRC分子生物学实验室KJ Patel博士说：造血干细胞是给我们的整个生命周期提供了源源不断的健康的血液细胞，随着年龄的增长，这些重要的干细胞变得不那么有效，因为其DNA受到损伤。我们的研究确定这种DNA损伤的一个重要来源，定义了干细胞用于对付这种威胁的两种保护机制。

【序号】：5【作者】：张洋【题名】：仿生杂化水凝胶的制备及用于骨髓间充质干细胞体外3D培养的研究【期刊】：北京协和医学院【年、卷、期、起止页码】：2018【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C475KOm_zrgu4lQARvep2SAk-6BvX81hrs37AaEFpExs0Jr05fYy6UvubZSZnKcMjNnWslIQkwvtg3XpY8vwW0K9&uniplatform=NZKPT

【序号】：1【作者】：范谊【题名】：搭载骨髓间充质干细胞的可注射水凝胶促进临界性骨缺损修复的研究【期刊】：吉林大学【年、卷、期、起止页码】：2023【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=GARc9QQj0GUGt7oTxWCcNiNLWNEqhogDOrAClcQUs6s-PgpOuE8G_usmhF5mRGRgawugNtgN0jeGmVA7mchcs4Eleqh2D0Ky2LWUuGSo1MnHIOWgme-guhT4HAbd1jBHbOgmHme8nJ37V0Z8aHvDqg==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

【序号】：3【作者】：平措卓嘎1,2王剑利1徐燕【题名】：自体造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的疗效评价及影响因素：单中心真实世界研究【期刊】：西安交通大学学报(医学版). 【年、卷、期、起止页码】：2023,44(03)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C44YLTlOAiTRKibYlV5Vjs7ioT0BO4yQ4m_mOgeS2ml3UD1jEw1SpgmMwojC3DSx7U3rDsqM34rgpF1W6HZ22weu&uniplatform=NZKPT

[size=14px] [/size] [size=14px]造血干细胞（HSC）是维持血液和免疫系统健康的重要基础。在机体衰老过程中，HSC功能随之退化，表现出重建造血能力下降以及谱系分化异常，是衰老的十二大特征之一。寻找能有效改善HSC衰老的药物，对于延缓衰老助力健康老龄化具有极其重要的意义。何首乌是传统补益精血、延缓衰老的著名中药，王伽伯团队前期研究表明其所含主要成分反式二苯乙烯苷（TSG）安全性良好，不会引起肝损伤，且根据文献可知TSG可通过清除自由基、调节脂质代谢紊乱及保护神经等方式发挥良好的抗衰老作用，但其在改善HSC衰老及增强衰老机体造血免疫功能方面的活性及机制尚未有报道。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]著名抗衰老中药何首乌的主要成分反式二苯乙烯苷（TSG）具有最显著的改善造血干/祖细胞衰老的作用。机制上，TSG通过直接结合并激活能量感受器AMPK增强衰老造血干/祖细胞再生功能，并通过AMPK介导的Tet2表观遗传调控促进HSC向淋系细胞分化，部分改善HSC的髓系分化偏移。这项研究开辟了一条通过激活AMPK来减缓 HSC 衰老的途径，并肯定TSG是一种非常有前途的候选者，可以作为天然AMPK激活剂，用于开发抗衰老药物。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]Highlights[/size] [size=14px]1）首先测试了9种选定的药物对全身辐射（TBI）小鼠造血系统过早衰老的影响；[/size] [size=14px]2）何首乌主要活性成分TSG被成功鉴定为衰老HSC的有效再生剂；[/size] [size=14px]3）TSG治疗增加2种衰老小鼠中共同淋巴祖细胞CLP及其B淋巴细胞的数量；[/size] [size=14px]4）TSG 治疗增强衰老小鼠的HSC/CLP增殖潜力，且无明显副作用；[/size] [size=14px]5）TSG可通过AMPK-Tet2轴恢复再生能力的丧失和淋巴细胞生成的下降。[/size] [size=14px]研究结果[/size] [size=14px]1、筛选能够使衰老的HSC恢复活力的化合物[/size] [size=14px]作者首先基于文献及临床试验调研，确定9种源自抗衰老中药的天然产物，这9种天然产物是经过精心挑选的来自9个不同中药配方的化合物，已知对人类造血具有高度有益的作用。随后利用辐射诱导（TBI）的早衰小鼠模型筛选，结果发现何首乌TSG不仅展现出最显著的改善HSC衰老作用，并诱导骨髓淋系祖细胞（CLP）以及下游的各发育阶段B细胞和不同类型T细胞数目显著增加，恢复到接近正常对照组的水平。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、TSG 恢复自然衰老的 HSC活力且无任何明显副作用[/size] [size=14px]进一步作者评估TSG是否也可以使自然衰老小鼠中老化的HSC恢复活力。结果证实TSG能够显著提高骨髓中CLP和B细胞、胸腺T细胞各发育阶段绝对数目及外周血中淋系细胞比例，将老龄小鼠恢复到接近年轻小鼠的水平，TSG 治疗并没有以任何显著的方式改变体重、外周血细胞、血液化学和肝脏的组织学特征。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、TSG可以增强衰老HSC的再生潜力[/size] [size=14px]老化的HSC 会显著降低再生潜力，作者随后检查了TSG是否可以增强衰老小鼠中HSC的增殖能力，通过HSC和CLP移植实验结果的两组实验数据表明，显示用TSG治疗衰老小鼠可显著增强造血干/祖细胞造血的增殖能力。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、TSG诱导显著的转录变化并促进静止特征[/size] [size=14px]作者接着研究了TSG治疗对衰老HSC影响的潜在机制，发现TSG 治疗对CLP增殖和凋亡以及ROS无显著影响，进一步对年轻小鼠、衰老小鼠和TSG治疗的小鼠的HSC进行转录组分析，发现与未治疗的衰老小鼠相比，经TSG治疗的衰老小鼠的HSC转录组表现出与“年轻”HSC类似的转录组特征，转录组分析的结果还表明，TSG处理导致氧化磷酸化（OXPHOS）基因的表达显著减少，但静止相关基因的表达水平增加，这些结果表明TSG 治疗可以通过将衰老的转录组逆转到与年轻 HSC 相似的状态来促进衰老 HSC 的年轻化。此外，TSG可以抑制衰老 HSC的代谢，促进AMPK通路的激活以及向静止状态的转变。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、TSG使衰老 HSC恢复活力的作用依赖于AMPK通路[/size][size=14px]为了进一步验证TSG中AMPK对HSC衰老的再生作用，作者利用特异性AMPK抑制剂（Com C）和AMPK 激活剂（AICAR）来抑制或激活AMPK，探讨TSG对小鼠HSC衰老的影响，发现Com C显著阻断了 TSG 对骨髓中CLP和下游B细胞数量以及衰老小鼠外周血中 B 细胞比例的保护作用，AICAR治疗可以增加骨髓中CLP的数量和/或B细胞和前B细胞的总数，并通过增加 B细胞百分比来纠正外周血的不平衡。这些结果表明TSG主要通过激活AMPK来有效增强HSC功能和淋巴分化。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、TSG可以在体外与 AMPK 发生直接互作[/size] [size=14px]为了进一步研究TSG通过激活AMPK导致HSC衰老的分子机制，作者采用分子对接发现TSG 可以与 AMPKα1β1γ1 和 AMPKα2β1γ1 蛋白的激酶结构域结合，通过SPR实验发现TSG能够以比AMPKα2β1γ1更高的亲和力与AMPKα1β1γ1结合。ADPGlo? 激酶测定发现TSG可激活AMPKα1β1γ1和AMPKα2β1γ1活性。结果表明TSG可以通过与AMPK直接互作来促进AMPK激活。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、TSG可以通过AMPK-Tet2轴逆转衰老 HSC的甲基化谱[/size] [size=14px]表观遗传改变与HSC的表型和功能变化密切相关，Tet2被认为是重要的表观遗传调节因子，在HSC的稳态和分化中发挥着重要作用，而AMPK激活对于维持Tet2稳定性至关重要。因此，作者分析了TSG对AMPK激活和Tet2表达的影响，亚硫酸氢盐测序评估全基因组 DNA 甲基化状态发现衰老小鼠的 LT 整体 DNA 甲基化水平显著增加，TSG治疗衰老小鼠的DNA甲基化水平显著下降，降至与年轻小鼠非常相似的水平。此外，这种效果随着Com C的共同处理而减弱。TSG治疗并没有导致Tet2突变小鼠中CLP和B细胞绝对数量的显著增加，TSG治疗导致8周龄小鼠骨髓LSK的淋巴细胞生成潜力显著增加，并且这种效应被Tet2抑制剂Bobcat339减弱。这些结果表明Tet2作为AMPK激活的下游效应子，促进HSC的淋巴细胞生成潜力，而TSG可以通过影响该AMPK-Tet2轴来促进淋巴细胞生成。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]该研究筛选了一组源自几种著名中药配方的假定天然抗衰老化合物，并鉴定出TSG作为老化HSC的强效再生剂。TSG是中药何首乌中多酚的天然衍生物，具有多种功效，包括抗氧化、抗炎、抗高脂血症和神经保护以及抗衰老。作者发现TSG治疗不仅大大提高了CLP及其下游B淋巴细胞的绝对数量，而且还通过衰老供体嵌合的快速扩张增强了HSC/CLP的再增殖能力。此外，TSG可以恢复衰老HSC的静止状态，促进表观遗传重编程，通过激活AMPK及其底物Tet2，改变 DNA 甲基化谱，从而控制HSC的命运决定。这项研究开辟了一条通过激活AMPK来减缓 HSC 衰老的途径，并确定TSG是一种非常有前途的候选者，可以作为天然AMPK激活剂用于开发抗衰老药物。[/size]

麻烦各位英文好的大侠搜索一下国外关于骨髓干细胞移植的评价。我有个朋友初步配对成功，现在想知道如果捐献骨髓干细胞，有没有什么副作用。在国内的媒体上好像没有副作用、后遗症的报道，但对国内的媒体有点怀疑。不知道国外有没有权威报道。谢谢各位大侠了。毕竟是救人性命的大事

95%。目前细胞分选主要用于研究，临床应用较少。血液学应用最多的是造血干细胞的研究，最近随着造血理论的深入研究关于造血干细胞究竟是否都是CD34+细胞出现一些争论,实验研究证明, CD34-造血干细胞较CD34+造血干细胞更具造血潜能,这些实验研究所用的CD34- 和CD34+细胞就是通过细胞分选获得的。小鼠造血干细胞分选一般按lin-c-Kit+CD34+/ lin-c-Kit+CD34-分选,人造血干细胞分选一般按lin-CD34+/ lin-CD34-分选。 为避免某些遗传性血液病如海洋性贫血、异常血红蛋白病的纯合子出生，产前诊断非常重要，这些疾病的主要靶细胞是红细胞，而孕妇血循环中存在着胎儿有核红细胞，只是数量非常少，利用流式细胞仪可从孕妇血液中分选出胎儿有核红细胞（分选条件：CD45-GPA+）进行基因分析，作出产前诊断。利用流式细胞仪分选免疫担当细胞进行细胞免疫学研究也是目前的热门课题。总之，流式细胞仪能够分选出你想得到的任何一亚群细胞，只要你想得到的某一亚群细胞有合适的单克隆抗体标记，流式细胞仪的分选功能将得到越来越多的科学研究和临床应用。二十二. 流式细胞术在血液学中的应用 其他流式细胞仪可能在两方面对骨髓增生异常综合症（MDS）有用，一是测定CD34阳性细胞数，以监测病情，二是测定核蛋白增殖因子（PCNA）,有报告PCNA再在生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、白血病三种疾病中表达有明显差异，可辅助鉴别诊断。 此外流式细胞仪也可检耐药蛋白,如肺耐药相关蛋白（LRP）、多药耐药蛋白（MRP）、 P170等。 流式细胞仪也可检测细胞因子，细胞内细胞因子如白介素系列（IL-1—IL-14）,肿瘤坏死因子(TNF),干扰素(IFN)等,[/color

德国研究人员在新一期美国《血液》月刊上发表报告称，他们通过骨髓移植疗法“治愈”了一名艾滋病患者。但这一疗法能否推广引发争议。德国柏林沙里泰医院的研究人员介绍说，2007年，一名40多岁的美国男性艾滋病病毒携带者因患白血病在柏林接受骨髓移植治疗，当时捐献者的骨髓配型不仅非常吻合，而且还有一种能天然抵御艾滋病病毒的变异基因。以往研究发现，在很少一部分欧洲人体内存在这种变异基因。3年后，这名美国病人已不再有白血病和艾滋病病毒感染的迹象。研究人员在报告中说：“他们的结果非常明确地显示这名患者的艾滋病得到治愈。”但是，美国艾滋病病毒医学协会前会长迈克尔·扎格认为，如果将这种方法变成标准疗法，存在着较大风险。他说，目前，干细胞或骨髓移植常用于癌症治疗，但对健康人来说其风险尚属未知，因为它涉及利用强力药物和放射物摧毁人体原有的免疫系统，然后输入捐献者的骨髓，以重造一个新的免疫系统，这种疗法及其引发的并发症会提高死亡率。美国国家过敏和传染病研究所主任安东尼·福西也认为，目前这种治疗艾滋病的方法还不能应用，因为费用和风险都太高。不过，它为研究人员利用基因疗法或其他方法治疗艾滋病提供了更多线索。

第四种淋巴细胞—NKT细胞 通常认为，构成机体免疫系统的淋巴细胞有三种细胞系组成，一是由胸腺产生的T细胞，二是由骨髓分化而来的产生抗体的B细胞，三是自然杀伤（NK）细胞。而新近发现存在第四种淋巴细胞—NKT细胞。1. NKT细胞的发现1986年，克隆成功了NKT细胞的特征性抗原受体基因。将其命名为Va14基因，与其他T细胞抗原受体的（TCR）基因不同，有其独特的结构特征。1987年美国国立卫生研究所的Fawlkes与瑞士的Budd分别领导的两个研究小组报告指出，胸腺细胞中的T细胞通常不能表达受体，仅有部分未成熟T细胞选择表达V-β8.2受体。随后的研究证明这种细胞不是T细胞，考虑是NK细胞的受体，这种细胞集团的数量极少，生理意义不明。1994年，这两个研究小组的研究人员发现，他们报道的细胞为同一细胞，从此NKT细胞的研究引起人们的广泛关注。T细胞识别的抗原是蛋白质，而NKT细胞是别的抗原是α-Gal-Cer即所谓的糖脂质，这是该免疫系统与通常的免疫系统重要的不同点。NKT细胞的分化与T细胞不同的是在胸腺形成前的胎生初期6.5日在胸腺外组织分化。NKT细胞与T细胞比较，机能处于不发达状态。T细胞分化为功能不同的Th1和Th2细胞群，Th1细胞产生INFγ及IL-2，引起迟发行过敏症等细胞性炎症。Th2细胞能产生IL-4和IL-10，参与变态反应及抗体产生等体液免疫反应。而NKT细胞不但能分泌Th1和Th2细胞因子，同时还具有与CD8+伤害性T细胞（cytotox-ic Tlymphocyte,CTL）相同的杀伤靶细胞作用。毫无疑问，NKT细胞在免疫调节系统中占有重要位置。NKT细胞与疾病可能有诸多关系，可能与自身免疫性疾病的发病机制、变态反应的调节、抗肿瘤作用、及抑制寄生虫感染等有关。2. NKT细胞的多样性分化NKT细胞具有T细胞和NK细胞细胞两重性质，既能表达Va14/Ja281特定的T细胞受体又能由CD1介导识别脂质抗原。NKT细胞的分化是否依赖胸腺尚有争议。根据其表达TCR等多种表面抗原的不同，提示NKT细胞存在两个以上细胞群。从CD4/8的表达看，可将其分为（1）CD4-NKT细胞，（2）CD8-NKT细胞，（3）CD4和CD8均不能表达的DN-NKT细胞。第一类的全部和第二类的半数是Va14/Ja281-T细胞。3.人类NKT细胞人末梢血中的DN-NKT细胞V区域，可高度表达Va24/JaQ（这与鼠的Va14/Ja281高度相似）及Vβ11(与鼠Vβ18高度相似)。这种TCR的组合表达可见于DN-NKT细胞和CD4+细胞。而未见于CD8+细胞。小鼠的CD1相当于人的CD1d的Va24/JaQ。此外，人末梢血中1～2%的T细胞能表达抑制性受体，即抑制型NK细胞受体（KIR），而Va24/JaQ+细胞则不能表达。它的NK相关分子是CD16、CD56或CD57，Va24/JaQ+细胞异不能表达这些分子。在小鼠中还可以看到Va24/Ja281+T细胞以外的NKT细胞。人类Va24/JaQ+细胞与KIR+T细胞能形成不同的亚群。且具有不同的功能。4. NKT细胞分化的胸腺依赖性这是目前存在争议的问题，可以肯定地说NKT细胞分化过程中胸腺是有作用的。NKT细胞多见于胸腺及脾脏以外的肝脏和骨髓种，胸腺缺损的小鼠与正常小鼠比较，NKT的分化并不少。将出生三日小鼠的胸腺摘除，虽然NKT细胞的分化显著受到抑制，但此时CD8+NKT细胞的分化未受到影响。由此认为CD8+NKT细胞在胸腺外分化的可能。5. NKT细胞产生细胞因子的意义 NKT细胞是指能够表达NKT细胞标志NKT1.1的T细胞,其机能具有T细胞和NKT细胞双重特征。NKT细胞在TCR和NKR介导下，产生大量的IL-4及INFγ,对肿瘤细胞有细胞伤害作用。 NKT细胞能表达T细胞的TCR与NK细胞的NKR-P1两种受体，特别是NKT细胞多数表达Va14TCR，识别CD1抗原，而NKR-P1识别各种糖链。 NKT细胞，特别是CD4-NKT细胞，对TCR刺激可产生大量IL-4及IFNγ,同时具有ThO型细胞因子产生能力。NKT细胞不但产生IL-4的主要细胞，而且强力产生IFNγ。IFNγ参与自身Th1诱导，具有极强的Th1诱导能力，从而是IL-2产生亢进。它同时还具有Th2细胞分化抑制功能。IL-12能诱导NKT细胞产生IFNγ。IL-12对TCR的刺激是IFNγ的产生显著亢进。综上所述，NKT细胞不但是IL-4和IFNγ的强力产生细胞，同时参与Th1/Th2分化的抑制，而这些作用都不是单纯的。 虽然NKT细胞能大量产生细胞因子，但仅在机体内保持这种功能。当初一度认为，NKT细胞只是IL-4的产生细胞，而不是Th2分化的必需细胞。并不认为在CD1缺损的小鼠中NKT细胞的分化和对TCR刺激使IL-4产生减少，且对Th2分化必需的IL-4及IgE的产生没有多大影响。但给小鼠投于α-GalCer可使NKT细胞活化，IL-4的产生诱导Th2的应答。有报告指出，同样投于α-GalCer，可使NKT细胞产生IFNγ而致IgE产生低下。由此可见，NKT细胞能产生IL-4与IFNγ两种功能相反的细胞因子。这种微妙的协调作用可能是NKT机能表达的重要特征。NKT细胞的活化通常伴有T细胞、B细胞及NK细胞的活化，这对NKT细胞活化后的免疫应答有较大影响。