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苯并芘分析标准品

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苯并芘分析标准品相关的论坛

  • 求助关于食品中苯并芘检测方法的操作性。。。

    求助关于食品中苯并芘检测方法的操作性。。。最近 卫生部出台了苯并芘的测定征求意见稿。。。荧光光度法作为第一法 检出限达到了0.1ppb和5009.27-2003版 对比了下 无任何本质区别 ,纸层析走薄层 ,通过肉眼看荧光定量。。。。。。。。经过实践操作 这个标准问题较多,加标回收 以及标准中说的点样0.1ng的点 根本无法看到不知道,大家有人做过这个方法的嘛???是真的有问题 还是操作上有什么具体的讲究????大家帮帮忙了。。。。谢谢~!!!

  • 关于苯并芘的检测方法

    固相萃取柱:HiCaptBenzo苯并芘专用柱液相色谱柱:HiSep C18-T 150 mm×4.6 mmi.d., 5 μm· 专利创新的苯并芘专用萃取填料,有效去除食用油中的中性脂肪和维生素等基质干扰 · 回收率稳定、重现,克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷 · 方法简单、快速、节省溶剂,只需要15mL溶剂、45min即可完成(传统分析大约需要800mL溶剂,耗时8小时)。 · 是用于苯并芘分析的一种好方法 1. 样品处理1.1 样品提取:(参考国标GB/T GB/T 22509-2008)称取0.4g植物油,取2mL正己烷溶解,涡混1min,,待净化。1.2 固相萃取柱净化:HiCapt Benzo苯并芘专用柱(500mg/3mL)(1)活化:在HiCapt Benzo柱中依次加入5mL丙酮,2 mL正己烷活化。(2)萃取:将待净化液加入HiCapt Benzo柱中(在柱中正己烷液面为2mm时上样,此过程不要使柱干涸),再用200μL正己烷淋洗样品管,一并加入SPE柱中。流出液弃去。(3)清洗:待上样液完全流出后,用3mL的乙酸乙酯:正己烷(v/v=1:4)溶液淋洗,淋洗液弃去,将小柱抽干。(4)解吸:3mL丙酮解吸,收集解吸液。(5)吹干及定容:解吸液50℃氮气吹干,加入异丙醇200μL溶解并定容,待分析。2.色谱条件:色谱柱:HiSep C18-T (150 mm×4.6 mm i.d.,5 μm);流动相:乙腈/水溶液(88:12,v/ v);流速:1 mL/min;荧光检测器:激发波长:384nm 发射波长:406nm;柱温:40℃;进样量:10 μL。3. 苯并芘标准溶液液的配制储备溶液的配制:标准储备液1:称取苯并芘5mg,用乙腈定容至10mL, 配制成500mg/L的标准储备液供HPLC分析标准储备液2:称取苯并芘5mg,用正己烷定容至10mL,配制成500mg/L的标准储备液供SPE试验;将上述储备液密封后放置于4℃冰箱中避光保存,至少6个月内稳定。工作溶液的配制:取苯并芘标准储备液1用乙腈稀释, 供HPLC分析;取苯并芘标准储备液2用正己烷稀释供SPE试验。标准曲线:将500mg/L的苯并芘标准储备液1用乙腈稀释,配制0.5、1.0、20、40μg/L的溶液,绘制标准曲线。4 结果 4.1 标准曲线与检出限取0.5,1.0,20.0,40.0μg/L 4个浓度的系列标准溶液进样分析,以样品浓度为Y轴、峰面积为X轴进行线性回归,所得标准曲线。线性范围为0.5~40μg/L,相关系数为0.99999。检出限:以3倍信噪比计算本方法苯并芘的检出限为0.03ug/kg。4.2 回收率和精密度分别加入低、中、高3种质量浓度的苯并芘标准溶液于食用油样品中,然后按照本实验方法进行测定,回收率为92.8~98.5%。图2为添加苯并芘的食用油样品的色谱图。从该图可以看出,没有杂质干扰,且该方法具有较好的日内及日间精密度,其标准偏差分别小于5.55%和4.71%。

  • 【原创大赛】食品污染物苯并芘的检测

    【原创大赛】食品污染物苯并芘的检测

    苯并芘又称苯并(α)芘,英文缩写BaP,C20H12,是一种五环多环芳香烃类。苯并芘为一种突变原和致癌物质,从18世纪以来,便发现与许多癌症有关。其在体内的代谢物二羟环氧苯并芘,产生致癌性的物质;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091555_554649_1610895_3.jpg 苯并芘广泛存在于烟熏、油炸、烧烤、烘焙等食品中。欧盟、世卫组织都针对烟熏食物分别定有苯并芘不得超过5ppb和10ppb的上限标准。 我国《GB2762-2005 食品中污染物限量》明确规定,食用油标准不超过10ppb,熏烤肉不超过5ppb,粮食不超过5ppb。这和欧盟、世卫组织制定的标准其实一致的。GB/T 22509-2008 动植物油脂苯并(α)芘的测定反相高效液相色谱法http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091600_554651_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507100923_554758_1610895_3.jpg 由于国标需要使用中性氧化铝自己填装层析柱,并且需要对氧化铝的活度进行控制,因此在实际检测工作中,往往需要消耗很多的时间进行氧化铝柱的准备,而且又不能达到非常理想的回收率结果。 基于上述原因,迪马科技开发了商品化固相萃取柱ProElut BaP22 g/60 mL代替手工氧化铝层析柱的填装,简化前处理步骤,操作更简便;优化的氧化铝填料,活度已调整为Brockmann活度IV级;净化效果优异,回收率结果稳定;基质种类丰富(粮食、植物油、方便面、肉制品、水产品、 土壤等),满足多行业用户检测需求。下面以粮食、植物油、方便面、肉制品为例来说明商品化的苯并芘专用柱的检测效果样品提取粮食(1) 称取1 g样品于50 mL离心管中,加入20 mL正己烷。(2) 涡旋混合1 min,超声提取5 min,6000 rpm下离心3 min,收集上清液;(3) 残渣再用20 mL正己烷提取,每次涡旋混合1 min,超声提取5 min ,6000 rpm下离心3 min;合并两次提取液;(4) 在30 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干,然后用5mL正己烷溶解,待净化。植物油用玻璃烧杯称取试样,精确到,用正己烷溶解稀释,作为上样液待净化。方便面(1)称取1 g样品于50 mL离心管中,加入15 mL正己烷;(2)涡旋混合2 min,超声提取5 min,6000 rpm下离心3 min,收集上清液;(3)残渣再用15 mL正己烷按照步骤(2)重复提取一次,合并两次提取液;(4)在30 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干,然后用5 mL正己烷溶解,待净化。肉制品(1) 称取1 g样品于50 mL离心管中,加入15 mL正己烷。(2) 涡旋混合2 min,超声提取5 min,5000 rpm下离心2 min,收集上清液;(3) 残渣再用15 mL正己烷提取,每次涡旋混合2 min,超声提取5 min ,5000 rpm下离心2 min;合并两次提取液;(4) 在40 ℃下用减压蒸馏将提取液蒸干*,然后用5mL正己烷分2次溶解转移,待净化。备注:蒸干后残留物的质量小于0.4 g,可以进行净化;如果残留物的质量大于0.4g,适当降低取样量,再重新试验。SPE柱净化——ProElut BaP22 g/60 mL(Cat.#:65351)(1)活 化:30 mL正己烷,流出液弃去;(2)上 样:将待净化液加入小柱,收集流出液;(3)淋 洗:70 mL正己烷淋洗,收集流出液,合并步骤(2)、(3)流出液;(4)重新溶解:在40 ℃下用减压蒸馏*将收集的流出液蒸干,然后用乙腈-四氢呋喃( 9 : 1 )溶液定容至1 mL后供HPLC分析。色谱分析条件色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm,5 μm(Cat.#:99603)流 速:1.0 mL/min 检测器:*激发波长:370 nm 发射波长:406 nm柱 温:30 ℃进样量:20 μL 流动相:乙腈:水 = 97:3粮食添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091635_554664_1610895_3.jpg植物油添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091636_554665_1610895_3.jpg方便面添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091633_554661_1610895_3.jpg肉制品添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507091633_554663_1610895_3.jpg前处理注意事项A:旋蒸过程注意以下几个参数设定:1.真空度:156mbar 冷凝水:10℃ 水浴锅:40℃2.旋蒸过程不能暴沸;3.首次样品旋蒸前,先旋蒸50mL正己烷冲洗系统。B:进行过柱时,要限制小柱流速1mL/min,我司产品不锈钢点胶针头(迪马货号:1095)小结1. 使用商品化的ProElut BaP22 g/60 mL固相萃取柱代替传统的手工填装的中性氧化铝层析柱,大大简化了样品前处理步骤,提升了工作效率2. 多种基质的苯并芘检测,ProElut BaP22 g/60 mL净化后均能实现优异的回收率结果3. 优化的氧化铝填料,活度已调整为Brockmann活度IV级,避免手动调整活动的繁琐及重现性不理想的问

  • 方便面中苯并芘的检测解决方案

    近日,知名方便面品牌农心在韩国生产的6款方便面被卷入致癌物苯并芘风波,消息引起各界高度关注。苯并芘是碳水化合物、蛋白质和脂肪在不完全燃烧时产生的高活性间接性致癌物质,研究表明,苯并芘可致肺癌、肝癌、肠胃道癌症等,属于一级致癌物。苯并芘广泛存在于烟熏、油炸、烧烤、烘焙等食品中。欧盟、世卫组织都针对烟熏食物分别定有苯并芘不得超过5ppb和10ppb的上限标准。 我国《GB 17400-2003 方便面卫生标准》中,并无对苯并芘的含量标准,但我国《GB 2762-2005 食品中污染物限量》明确规定,食用油标准不超过10ppb,熏烤肉不超过5ppb,粮食不超过5ppb。这和欧盟、世卫组织制定的标准其实一致的。迪马科技此前曾开发过植物油及水产品中苯并芘检测专用固相萃取柱-ProElut BaP,用户使用后均反映效果良好。在此基础上,迪马科技开发出方便面中苯并芘的检测解决方案,使用ProElut BaP成功实现方便面中苯并芘的检测,具有净化效果良好,回收率结果稳定,操作步骤简便等特点。 以下为详细解决方案,供您参考!

  • 快速、准确测定水产品中苯并芘

    苯并(a) 芘是一种致癌性很强的物质。虽然生物合成、火山活动会产生B(a) P , 但人类活动才是造成B (a) P 污染的主要原因。煤碳、石油、天然气等不完全燃烧产生的B(a) P 进入大气, 随降雨污染水源。水上行驶的船舶漏油、工业废水排放等也是水体B (a) P的污染源。B(a) P 通过食物链在鱼类、植物和软体动物中发生生物蓄积, 造成水产品的B (a) P 污染。对于水产品中苯并(a)芘的测定荧光法因其灵敏度高, 重现性好,是目前较常用的方法。行业标准SC/T 3041-2008 水产品中苯并(a)芘的测定 高效液相色谱法也采用试样经皂化后用正己烷提取,固相萃取柱净化后反相液相色谱柱分离,荧光检测器检测,但该法存在样品进行皂化前处理步骤繁琐,净化效果不理想,氮吹速度慢,上机分析时间长,成本高等不足之处。 迪马科技参照上述行业标准方法,对样品前处理和液相色谱条件进行改进和优化,前处理省去皂化步骤,净化效果更理想,无需氮吹浓缩,操作步骤更简便,对液相色谱条件的优化进一步缩短了样品分析时间。所以该方法可以快速、准确地测定水产品中B(a) P 的含量。 以下为迪马科技关于水产品中苯并芘检测的详细解决方案,敬请参考! http://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319131.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319144.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319155.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319239.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319252.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/2012331933.jpghttp://www.instrument.com.cn/Show/NewsImags/images/20123319313.jpg水产品中苯并芘检测相关产品信息(现货)(参考SCT 3041-2008 水产品中苯并(a)芘的测定 高效液相色谱法)货号名称规格样品前处理65351ProElut Al-N 中性氧化铝固相萃取柱22 g/60 mL, 10/pk65584ProElut Na2SO4 无水硫酸钠500g24435812管防交叉污染真空SPE萃取装置12位4806考克(控制流量)15/pk99011真空/正压两用泵,无油1/pk99013抽滤瓶套装(包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞)1/pk37177针头式过滤器 Nylon13 mm,0.22 μm 100/pk37180针头式过滤器 Nylon13 mm,0.45 μm 100/pk标准品12-F73苯并(a)芘10 mg色谱柱及保护柱99603反相高效液相色谱柱Diamonsil C18(2)250 × 4.6 mm, 5μm6201EasyGuard C18 保护柱10 × 4.0 mm 1/pk2个柱芯+1个柱套HPLC溶剂Ÿ缓冲盐Ÿ离子对试剂50101 乙腈 HPLC 级4 L50115正己烷 HPLC级4 L50113四氢呋喃 HPLC级4 L通用色谱产品52401B瓶架/蓝色(现货)50孔52401A瓶架/白色(现货)50孔5323样品瓶(棕色/螺纹)2 mL, 100/pk5325样品瓶盖/含垫(已经组装)100/pkH80465HPLC 进样针25 μL点击下载水产品中苯并芘的测定

  • 水质 苯并芘的检测方法

    各位大神,小弟初来论坛想向大家请教一下水质苯并芘的检测方法。最近我们实验室在申请水质 苯并芘的检测方法。查了一下标准方法有个GB11895-89 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法,还有个[color=black]HJ 478-2009 [/color][color=black]水质 多环芳烃的测定[/color]里面包含了苯并芘这个物质。我看了下89年的标准,看着很复杂的样子啊,要先制备乙酰化滤纸,然后再层析分离,到后面就直接看不懂了。各位实验室里做水质 苯并芘这个参数是用的什么方法啊?是不是只要申请了HJ478这个标准,就可以测苯并芘了?万分谢谢大家!

  • 【分享】食用油中苯并芘的分析方法

    最近,金浩茶油中查出苯并芘超标,使得食品安全问题又一次备受关注。我在网上找了个新方法,供大家参考。测试条件仪器:UltiMate 3000 HPLC系统, 包括DPG 3600A泵(带脱气机),TCC-3200柱温箱(带两个六通阀),WPS 3000TSL 自动进样器,RF2000荧光剂监测器,使用变色龙软件控制仪器运行。 固相萃取柱: ChromSpher Pi, (3.0 × 80 mm)分析柱: Supelco PAH(4.6 × 250 mm)柱温: 30 °C自动进样器温度: 40 °C进样体积: 80 μL进样环: 100 μL在线固相萃取流路上的流动相,流速及梯度:时间/min流速ADI 水/%B乙腈/%C异丙醇/%0.000.35001001200100[si

  • 食用油苯并芘检测仪功能特点

    食用油苯并芘检测仪的功能特点可以归纳如下:  一、核心检测功能  苯并芘含量检测:  高效准确:采用先进的胶体金技术或免疫竞争法分析原理,能够快速、准确地检测食用油中的苯并芘含量。  高灵敏度:能够在极低浓度下检测苯并芘类物质,确保对食用油中微量污染的准确检测。  多样化样品处理:  支持不同类型的食用油样品,包括各种油脂来源和处理方法的食用油。  可同时检测多种食用油,提高检测效率。  二、操作与自动化  自动化操作:  具备自动样品处理、数据分析和报告生成等功能,降低人为误差,提高检测结果的可靠性。  轨道式自动传输扫描方式,实时显示金标卡实时图像,系统自动分析并呈现出CT曲线图,无需手动调整。  操作界面友好:  采用10.1英寸液晶触摸屏显示,搭载安卓智能操作系统,操作简便。  主控芯片采用ARM Cortex-A7,RK3288/4核处理器,主频达到1.88Ghz,运转速度更快速,性能更强。  三、数据管理与记录  数据记录和存储:  可以记录检测过程中的数据,并将数据存储于仪器或外部存储设备中,方便后续分析和追踪。  支持数据存储和上传功能,可连接上位机软件对检测信息进行处理。  数据查询与统计:  具有完善的查询和统计功能,方便用户查看和管理检测数据。  四、适用性与重要性  广泛适用性:  适用于食用油生产、流通和消费的各个环节,包括原料油检测、物流监控和餐饮机构实时监控等。  食品安全保障:  对于保护消费者的健康发挥着重要的作用,确保食用油的安全和质量。  综上所述,食用油苯并芘检测仪具备高效准确的检测能力、友好的操作界面、强大的数据管理和自动化功能等特点,是保障食用油安全的重要工具。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/06/202406051547211520_8126_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 致癌物“苯并芘”到底潜伏在哪里?

    致癌物“苯并芘”到底潜伏在哪里?

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/11/201211131152_403715_2518341_3.jpg苯并芘是生活中常见的致癌物之一,近日有爆料某品牌方便面被检测出含有苯并芘,已被全面下架,方便面是我们生活中最常见的食品,而还有常见的烧烤、油条等食品,重点在于市场监管,但是消费者自我防范意识也应该加强。征集苯并芘相关资料检测标准,物性特征,检测方法

  • 关于液相做苯并芘的问题

    请问大神,用岛津液相做苯并芘,流动相用纯甲醇,可不可以?有哪些要注意的?现有100mg/L的甲醇中苯并芘标液,稀释成那种浓度做标准曲线比较好?

  • 谁做过液相测植物油中苯并芘?

    各位大侠,谁用液相测过植物油中苯并芘的,请问有哪些注意事项?1 苯并芘标准品用固体还是液体,液体的话溶剂怎么选?一般是不是用进口的多?大家都用什么牌子的、规格的?2 植物油预处理大家都有什么好的方法推荐的?氧化铝柱子还是凝胶的?3 苯并芘是强致癌剂,请问操作时有啥保护措施?4 其他注意点请前辈指教,不胜感激!!!

  • 食品苯并芘

    食品苯并芘1.我们用的是SPE Florisil (1mg,6cc)小柱,用10 mL Dichloromethane、20 mL Hexane(正己烷)活化SPE Florisil (1mg,6cc)小柱;2.样品旋蒸至2mL过柱,再分别加入5mL Hexane(正己烷)、15mL Hexane: Dichloromethane(3:1) 涡旋后过柱。我想问下SPE Florisil吸附原理是什么?吸附的是目标物还是杂质?从旋蒸后样品过柱就开始收集溶液吗?

  • 【求助】苯并芘检测

    室内空气苯并芘可以用hplc+uv检测吗?GB15439是老的标准,最近在网上查到很多是用荧光检测,但是找不到相关方面的标准,哪位有最新标准以及检测方法?

  • 【求助】苯并芘检测求助

    最近我们准备开展油脂中苯并芘检测,我们依据GB/T22509-2008标准检测,但前处理过程极差,0.5克20PPB样品,处理完定容0.5毫升,回收率约为25%,即是空白试剂标准品过中性氧化铝柱,回收率也没什么改观,我们分别用甲醇、乙腈、丙酮、正己烷、石油醚,甚至是水也都洗脱不下来,可以肯定苯并芘留在了柱子上;但有一点值得肯定,每次做的结果差不多,方法很稳定,重现性和重复性都不错;不知哪位有好的处理方法能够提高回收率,以我们目前的做法达到检出限1PPB很困难。

  • 使用高效液相色谱仪测定食品中苯并芘含量

    [b][color=#444444] [/color][color=#444444]哈喽大家好!我又来啦!虽然上个问题没有人回答按照GB5009.27-2016配制苯并芘标准工作液进行测定,使用荧光检测器检测,发现低浓度(0.5ng/ml,1.0ng/ml)不出峰,或者说基线不稳,可能掩盖了目标峰,那么基线不稳有哪些原因?测样品液时5min中左右有较多峰出来,那么怎么确定哪个峰是我需要的呢?(标品的目标峰都是在13min多出来,但样品只有5min左右时有峰)或者说样品中根本没有这个物质。。。但这个可能性不大,样品液应该是含有痕量苯并芘的。[/color][/b]

  • 高液相色谱法测定食用油中苯并芘含量

    求各位大师指导:依据GB/T22509-2008中色谱条件荧光检测器,发射波长406nm,激发波长384nm,流动相乙腈:水=88:12,流速1.0ml/min,色谱柱为多环芳烃分析柱,进样量10ul。本人定制的标准品为甲醇溶的苯并芘,标准储备液的配置是将定制的标准品氮吹吹干,正己烷溶解定容。进标准则是直接用正己烷稀释进针。直接进标准品不出峰且基线也特别不稳(进标准前平衡柱子时基线平稳),后来意识到正己烷与流动相乙腈不互溶,则又将其吹干,乙腈定容进针,但没什么效果。请问各位前辈,本人是在哪出了错误,或前辈有什么经验,望不吝赐教!

  • 水中苯并芘检测问题

    高位高手,请教一下:最近做水样中苯并芘检测,老有苯并芘检出,虽然低于限量标准,但是检出了,以往几乎都没峰出来,现在总有,不知怎么回事?采用的方法是HJ478,固相萃取,液相荧光检测。有机溶剂都是色谱纯, 排除了有机溶剂的干扰,还望高手能指点一二!

  • 【原创大赛】高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物

    【原创大赛】高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物

    高效液相色谱法分析苯并芘大鼠肝脏线粒体的代谢产物 本实验建立了一种用高效液相色谱法分析苯并芘及其在大鼠肝脏线粒体中的六种代谢产物的分析方法。使用乙腈、水梯度洗脱作为流动相,紫外探测器分析得到苯并芘的羟基化代谢产物以及苯并芘酮,包括3-羟基苯并芘、9-羟基苯并芘、苯并芘4,5-二氢二醇、苯并芘-7,8-二氢二醇、9,10-二羟基-9,10-二氢苯并芘、苯并芘二酮。其中苯并芘二酮含量最低。该实验结果对于推断细胞CYP1A1酶在体内体外模型中对于苯并芘增毒和解毒作用奠定了重要的基础。 前言:苯并芘是苯与芘稠合而成的一类多环芳烃,苯并芘和其他多环芳烃主要是有机物的不完全燃烧或热解生成,并且在环境中普遍存在。除了污染空气的吸入,摄入的主要途径有吸烟和饮食以及一些职业的摄入如煤、焦炭、沥青的燃烧以及煤焦油的使用。苯并芘能够导致细胞毒性、致畸致突变的毒性以及致癌的毒性。动物实验长期暴露于苯并芘中可导致动物的皮肤、胃、肺组织的癌变。苯并芘在作用于DNA之前需要代谢活化,这也是苯并芘发挥毒性很重要的代谢步骤。细胞色素P450(CYP)酶和环氧化物酶是主要的苯并芘的活化酶,首先CYP酶将苯并芘氧化为环氧化物然后在环氧化物水解酶的作用下生成二氢二醇,CYP同工酶将其进一步的活化为活性成分苯并芘-7,8 - 二氢二醇-9,10 - 环氧化物(BPDE),其可作用于DNA,其优先在鸟嘌呤残基上形成加合物,该加合物是BPDE在体内体外试验中于DNA主要的加合物。在CYP酶中,CYP1A1和B1认为是BaP代谢活化中重要的酶,但是CYP1A1在体内排毒的作用较大于其活化BaP的作用。为了解释这些发现,BaP的体内体外代谢与解毒作用应该进一步进行评价,定性和定量分析BaP在CYP同工酶和环氧化物酶下的所有代谢产物,以及这些致癌物与DNA加成物的评价也很有必要。本实验优选色谱条件使得BaP在大鼠肝脏线粒体内的代谢产物能够很好的分离以及通过紫外检测器灵敏的检测。苯并芘在生物体内的代谢步骤:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409291248_516273_2360169_3.jpg材料和方法试剂甲醇(色谱级)乙腈(色谱级),苯并芘 ,NADP+,葡萄糖-6-磷酸,二喹啉甲酸,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶微粒体的制备微粒体来自于10只SD大鼠的肝脏,预先用苏丹I处理。微粒体蛋白质浓度通过二辛可宁酸蛋白质测定法测定,牛血清蛋白作对照。CYP同工酶的含量通过示差光谱测定。孵化体系:用于研究BaP代谢的孵化体系包含有100mM磷酸钠缓冲液(pH7.4),NADPH生成体系(1毫NADP+,10mL D-葡萄糖-6 - 磷酸,1U/mL的D-葡萄糖-6-磷酸脱氢酶),0.5mg的微粒体蛋白质,50μM的BaP(溶于5μl甲醇),总体积为500微升。通过加入50μl的NADPH生成体系来启动反应的发生。孵育体系通过未加入酶体系或无NADPH生成体系或无的BaP来控制。孵化在敞开的试管中进行(37℃),20分钟后,取5μl 1mM的非那西丁乙醇溶液加入作为内标物。BaP的代谢物用乙酸乙酯(2×1毫升)萃取两次,并蒸发至干。将样品溶解在25μl的甲醇,通过HPLC分离。BaP代谢物的HPLC分析:安捷伦液相1200高效液相色谱仪配紫外可见检测器,色谱柱为diamonsil 4.6﹡150﹡5u色谱条件:所用的色谱条件如下表: 时间流动相A(乙腈)流动相B(水)流速00%100%0.6ml/min3530%70%4060%40%4580%20%50100%0%我们还对代谢产物进行了质谱

  • 苯并芘方法验证

    GB 5009.27-2016标准 苯并芘荧光检测器 激光波长384 发射波长406色谱柱:C18 2.1×50流动相:乙腈:甲醇水95:5跑不出峰,要怎么处理

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