前列腺特异性抗原

[em14] 证明抗原与抗体特异性结合的常用方法是什么？

[font=宋体][font=宋体]双特异性抗体是含有两种抗原结合位点的抗体，可结合不同表位（通常在两个抗原上）。一般来说，一个抗原结合位点特异性结合靶细胞表面的抗原，而另一个则结合效应细胞表面上的触发分子，例如一种[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]γ[/font][font=Calibri]R[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]CD3/T[/font][font=宋体]细胞受体复合物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体可以改变效应细胞对其自然靶标的特异性，并使其重定向，杀死它原本会忽略的靶标。不同的细胞毒性细胞表达不同的触发分子（受体）。因此，通过改变靶标和效应结合域的特异性，可针对大多数类型的靶细胞产生多种效应应答。或者，通过特异性结合血清免疫球蛋白，可以实现全范围的效应功能（即[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]、吞噬作用、补体激活和延长血清半衰期）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]近日，市面上出现了用于治疗用途的两种双特异性抗体。由于其独特的作用机制，双特异性抗体受到了广泛的关注，越来越多的双特异性抗体不仅用于癌症研究，也用于其他疾病的临床试验。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]双特异性抗体的优缺点：[/b][/font][font=宋体]优势：[/font][font=宋体]①双特异性抗体将效应细胞直接靶向肿瘤细胞，增强其细胞毒性。[/font][font=宋体]②双特异性抗体可以同时识别两种分子，提高了抗体的选择性和功能性亲和力，改善了药物的安全性和有效性。[/font][font=宋体]③与两种单克隆抗体药物联合用药治疗相比，双特异性抗体药物减少了开发和临床试验成本。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]与单克隆抗体药物相比，双抗药物也存在不足之处，主要表现在：[/font][font=宋体]①存在重链、轻链错配现象，制备工艺难度高[/font][font=宋体]②双抗并非天然结构，存在使用过程中产生抗药物抗体的可能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]双特异性抗体的制备方法：[/b][/font][font=宋体][font=宋体]制备[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]，科学界同仁已开发了诸多解决方案。杂交[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]杂交瘤法（也称为四源杂交瘤）是最早用于制备双特异性抗体的技术。基于两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合，表达所需特异性的鼠[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]。然而，这种方法制备的功能性双特异性抗体占比低，为后续的抗体纯化和质控带来了巨大的挑战。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过使用分子克隆技术，双特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体由同一细胞系表达的两条不同重链和轻链组成。双特异性抗体的制备需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于公共轻链的质粒。如果使用两个不同的轻链，则需要两个轻链质粒。一般建议[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]个单独的质粒上表达[/font][font=Calibri]HC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]LC[/font][font=宋体]，因为调整质粒比率是一种简单有效的方法。随后，通常要经历复杂的过程从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系，以用于大规模抗体生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与稳定转染相比，瞬时转染无需将重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]整合至宿主基因组中，可以在数天内快速得到结果。人胚肾细胞（[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]）可用于双抗的瞬时表达，适合应用于双抗药物开发的早期阶段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]（[/font][font=Calibri]bispecificmonoclonalantibody,BsAb[/font][font=宋体]）是一种人工制作出来的可以同时结合两种不同抗原的特殊抗体。双特异性抗体在自然状态下不存在，只能通过人工制备。研究双特异性抗体，对于癌症的免疫治疗有着重大的意义。本文主要对双特异性抗体的结构、作用原理及制备方式做一综述。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]作用原理：[/font][/b][font=宋体]双特异性抗体的的作用机制主要有三种：[/font][font=宋体]介导免疫细胞杀伤[/font][font=宋体]双靶点信号阻断[/font][font=宋体]促进蛋白形成功能性复合体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①[/font][font=宋体]介导免疫细胞杀伤[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体的一个重要作用机制是介导免疫细胞杀伤，双特异性抗体有两条抗原结合臂，其中一条与靶抗原结合，另一条与效应细胞上的标志抗原结合，后者可以激活效应细胞，使其靶向杀灭肿瘤细胞。以[/font][font=Calibri]Catumaxomab[/font][font=宋体]（卡妥索单抗，[/font][font=Calibri]2009[/font][font=宋体]年批准上市的双特异性抗体药物）为例，两个抗原结合臂分别结合细胞毒性[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞的[/font][font=Calibri]CD3[/font][font=宋体]位点和肿瘤细胞的[/font][font=Calibri]EpCAM[/font][font=宋体]位点，从而引导[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞杀伤靶细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②[/font][font=宋体]双靶点信号阻断[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]同时结合双靶点，阻断双信号通路是双特异性抗体的另一个重要作用机制。受体酪氨酸激酶[/font][font=Calibri](receptortyrosinekinase[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]RTKs)[/font][font=宋体]是最大的一类酶联受体，在细胞增殖过程中发挥重要调节作用，如[/font][font=Calibri]Her[/font][font=宋体]家族等。[/font][font=Calibri]RTKs[/font][font=宋体]在肿瘤细胞表面异常高表达，导致肿瘤细胞恶性增生，因此也是肿瘤治疗的重要靶点。针对[/font][font=Calibri]RTKs[/font][font=宋体]的单靶点单克隆抗体已在肿瘤治疗中得到广泛应用。但是，肿瘤细胞可以通过转换信号通路或通过[/font][font=Calibri]HER[/font][font=宋体]家族成员自身或不同成员之间的同源或异源二聚体激活细胞内信号进行免疫逃逸。因此采用双特异性抗体药物同时灭活两个或多个[/font][font=Calibri]RTKs[/font][font=宋体]或其配体，可以减少肿瘤细胞逃逸，提高治疗效果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③[/font][font=宋体]促进蛋白形成功能性复合体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]利用双特异性抗体两个抗原结合臂可以结合不同抗原的特点，两个抗原结合臂分别结合两种特定蛋白分子，形成功能性复合体。利用该种复合体给药，可以减少机体内排斥反应，提高临床治疗效果。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]双特异性抗体种类[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体按结构区分主要有两大类：含[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]区的双特异性抗体（[/font][font=Calibri]IgG-like[/font][font=宋体]双特异性抗体）与不含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的双特异性抗体（[/font][font=Calibri]non-IgG-like[/font][font=宋体]双特异性抗体）。含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区双特异性抗体保持了传统的单克隆抗体的结构，具有两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]区和一个[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]区。但与传统单克隆抗体不同，这两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]是可以结合不同抗原。此类抗体主要有[/font][font=Calibri]Triomabs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]DVD-Ig[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]2in1-IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]kihIgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]等；不含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区双特异性抗体缺失了[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，由两个抗体的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]区及[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]区组成或者由[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段组成。此类双特异性抗体主要有[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]DA[/font][font=宋体]Ｒ[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]TandAbs[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]bi-Nanobody[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]双特异性抗体的制备方法[/font][/b][font=宋体][font=宋体]制备双特异性抗体，科学界同仁已开发了诸多解决方案。杂交[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]杂交瘤法（也称为四源杂交瘤）是最早用于制备双特异性抗体的技术。基于两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合，表达所需特异性的鼠[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]。然而，这种方法制备的功能性双特异性抗体占比低，为后续的抗体纯化和质控带来了巨大的挑战。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过使用分子克隆技术，双特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体由同一细胞系表达的两条不同重链和轻链组成。双特异性抗体的制备需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于公共轻链的质粒。如果使用两个不同的轻链，则需要两个轻链质粒。一般建议[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]个单独的质粒上表达[/font][font=Calibri]HC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]LC[/font][font=宋体]，因为调整质粒比率是一种简单有效的方法。随后，通常要经历复杂的过程从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系，以用于大规模抗体生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与稳定转染相比，瞬时转染无需将重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]整合至宿主基因组中，可以在数天内快速得到结果。人胚肾细胞（[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]）可用于双抗的瞬时表达，适合应用于双抗药物开发的早期阶段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-servicehttp://][b]双特异性抗体制备服务[/b][/url]，详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service[/font][/font][font=Calibri] [/font]

[font=宋体][font=宋体]双特异性抗体是含有[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]种特异性抗原结合位点的人工抗体，能在靶细胞和功能分子[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]细胞[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]之间架起桥梁应，激发具有导向性的免疫反应，是基因工程抗体的一种，现已成为抗体工程领域的热点，在肿瘤的免疫治疗中具有广阔的应用前景。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]双特异性抗体类型：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]由于抗体的模块化结构，目前已经产生了[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]多种不同的双特异性抗体形式。这些形式在许多方面均有不同，包括它们的分子量、抗原结合位点的数量、不同结合位点之间的空间关系和药代动力学半衰期等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]重组双特异性抗体可分为两种类型：具有[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的双特异性抗体和无[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]具有[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的双特异性抗体保留[/font][font=Calibri]Fc-[/font][font=宋体]介导的效应功能，例如[/font][font=Calibri]CDC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]。此类抗体包括[/font][font=Calibri]"knob into hole" IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]crossMab[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ortho-Fab IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]DVD IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]two in one IgG[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG-scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]scFv2-Fc[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]无[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区的双特异性抗体缺乏[/font][font=Calibri]Fc-[/font][font=宋体]介导的效应功能。然而，相较于类[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体，较小尺寸的抗体具有更好的肿瘤组织渗透性。在这种形式中，每个亲本单克隆抗体的可变区和多肽（[/font][font=Calibri]linker[/font][font=宋体]）均被克隆，并形成单链双特异性抗体。这些双特异性抗体有多种形式，包括[/font][font=Calibri]tandem scFvs[/font][font=宋体]、单链双抗体、[/font][font=Calibri]TandAbs[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]DART[/font][font=宋体]、 [/font][font=Calibri]dock-and-lock[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]DNL[/font][font=宋体]）以及纳米抗体等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]双特异性抗体（双抗）相对于单克隆抗体具有以下优势：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①特异性增强：双抗具有两个抗原结合位点，可以同时结合两种不同的特异性表位或目的蛋白，因此其特异性更强。[/font][font=宋体]②杀伤肿瘤细胞效率提高：双抗可以将免疫细胞募集至肿瘤细胞周围，通过重新定向免疫细胞，增强对肿瘤的杀伤力。同时，双抗可以阻断两种不同的信号通路，从而增强细胞杀伤毒性。[/font][font=宋体]③降低副作用：双抗与两种不同的细胞表面抗原结合后，潜在增加结合特异性，降低脱靶等引起的副作用。[/font][font=宋体][font=宋体]④提高药物经济学效益：双抗的治疗效果可以达到普通抗体的[/font][font=Calibri]100-1000[/font][font=宋体]倍，使用剂量最低可降为原来的[/font][font=Calibri]1/2000[/font][font=宋体]，显著降低药物治疗成本，提高了市场空间。[/font][/font][font=宋体]⑤适应症更广泛：双抗在组织渗透率、杀伤肿瘤细胞效率、脱靶率和临床适应症等指标方面也具有较强的竞争力，临床应用优势显著。[/font][font=宋体]综上所述，双特异性抗体具有更强的特异性、靶向性，可以提高杀伤肿瘤细胞效率并降低副作用，同时还能降低治疗成本，提高药物的市场空间。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service][b]双特异性抗体制备服务[/b][/url]，服务内容包含：基因合成及密码子优化[/font][font=宋体]→载体构建→表达与纯化→[/font][font=Calibri]QC[/font][font=宋体]分析→交付内容[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]文章来源：双特异性抗体[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]双特异性单克隆抗体[/font][font=Calibri]6ispecific Mcr'b[/font][font=宋体]即杂交的杂交瘤[/font][font=Calibri](hybrid hybridoma)[/font][font=宋体]是将杂交瘤与其他抗原免疫的脾细胞或另一种杂交瘤融合的结果。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]什么是双特异性抗体？[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体（[/font] [font=Calibri]bispecific antibody[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]BsAb[/font][font=宋体]，简称双抗）是指能同时特异性结合两个抗原或抗原表位的人工抗体。形象比喻，它就像一座连接[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]个抗原（表位）的桥梁。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体在自然条件下并不存在，而是通过细胞融合或重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术制备实现的。由于其特异性和双功能性，现已成为抗体工程领域的研究热点，在肿瘤治疗及自身免疫病等领域中具有广阔的应用前景。除此之外，双特异性抗体还被应用于治疗骨质疏松、血友病等其他领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]双特异性抗体的作用机制[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体在抗肿瘤治疗中的主要作用机制是：[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）招募[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞或自然杀伤细胞，并将它们重定向至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）同时阻断发病进程中两个不同的信号传导通路而发挥独特或重叠的功能，影响肿瘤细胞的生长增殖及存活；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）同时靶向细胞表面不同的抗原或表位，增强其与肿瘤细胞的特异性结合并直接杀伤肿瘤细胞。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双抗[/font][font=Calibri]VS[/font][font=宋体]单抗，有何优势[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]与普通单克隆抗体相比，双特异性抗体具有同时结合两种特异性表位或目的蛋白的功能，因此可以发挥特殊的功能起到单抗药物难以达到的生物学功能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]例如，将效应细胞直接靶向肿瘤细胞以增强其细胞毒性、提高抗体选择性和功能性、共刺激或抑制受体。相对单抗，双抗具备更强特异性、靶向性，可以降低脱靶毒性；相较单抗的组合疗法，也可有效降低治疗成本等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]但双抗药物开发复杂性和技术壁垒更高，对于技术平台和靶点选择的适配性要求也有所提高。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体的制备方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）化学偶联法：该方法于[/font][font=Calibri]1985[/font][font=宋体]年首次被使用，其原理是通过化学偶联剂将两个完全的单抗或[/font][font=Calibri]Fab2[/font][font=宋体]片段偶联成一种双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）双杂交瘤融合法：将两种杂交瘤细胞通过细胞融合的方法，合成双杂交瘤细胞株，筛选出具有两种抗体功能的稳定靶细胞株。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）基因工程法：利用基因工程技术对抗体进行改造，从而形成多种形式的双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州在重组抗体生产方面具有扎实的专业知识和经验，利用优化的成熟哺乳动物细胞表达平台，为您提供快速高效的[url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service][b]双特异性抗体表达服务[/b][/url]。从抗体序列开始，我们可以表达多种双特异性抗体形式，如[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CrossMab[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]DVD-IgG[/font][font=宋体]。更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service[/font][/font]

[font=宋体]什么是双特异性抗体？[/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体（[/font] [font=Calibri]bispecific antibody[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]BsAb[/font][font=宋体]，简称双抗）是指能同时特异性结合两个抗原或抗原表位的人工抗体。形象比喻，它就像一座连接[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]个抗原（表位）的桥梁。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体在自然条件下并不存在，而是通过细胞融合或重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]技术制备实现的。由于其特异性和双功能性，现已成为抗体工程领域的研究热点，在肿瘤治疗及自身免疫病等领域中具有广阔的应用前景。除此之外，双特异性抗体还被应用于治疗骨质疏松、血友病等其他领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体的作用机制：[/font][font=宋体]双特异性抗体在抗肿瘤治疗中的主要作用机制是：[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）招募[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞或自然杀伤细胞，并将它们重定向至肿瘤细胞，增强其对肿瘤细胞的杀伤力；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）同时阻断发病进程中两个不同的信号传导通路而发挥独特或重叠的功能，影响肿瘤细胞的生长增殖及存活；[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）同时靶向细胞表面不同的抗原或表位，增强其与肿瘤细胞的特异性结合并直接杀伤肿瘤细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双抗[/font][font=Calibri]VS[/font][font=宋体]单抗，有何优势？[/font][/font][font=宋体]与普通单克隆抗体相比，双特异性抗体具有同时结合两种特异性表位或目的蛋白的功能，因此可以发挥特殊的功能起到单抗药物难以达到的生物学功能。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]例如，将效应细胞直接靶向肿瘤细胞以增强其细胞毒性、提高抗体选择性和功能性、共刺激或抑制受体。相对单抗，双抗具备更强特异性、靶向性，可以降低脱靶毒性；相较单抗的组合疗法，也可有效降低治疗成本等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]但双抗药物开发复杂性和技术壁垒更高，对于技术平台和靶点选择的适配性要求也有所提高。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体的制备方法[/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]）化学偶联法：该方法于[/font][font=Calibri]1985[/font][font=宋体]年首次被使用，其原理是通过化学偶联剂将两个完全的单抗或[/font][font=Calibri]Fab2[/font][font=宋体]片段偶联成一种双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]）双杂交瘤融合法：将两种杂交瘤细胞通过细胞融合的方法，合成双杂交瘤细胞株，筛选出具有两种抗体功能的稳定靶细胞株。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]）基因工程法：利用基因工程技术对抗体进行改造，从而形成多种形式的双特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州在重组抗体生产方面具有扎实的专业知识和经验，利用优化的成熟哺乳动物细胞表达平台，为您提供快速高效的双特异性抗体表达服务。从抗体序列开始，我们可以表达多种双特异性抗体形式，如[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CrossMab[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]DVD-IgG[/font][font=宋体]。义翘神州服务优势：[/font][/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]20+[/font][font=宋体]种[/font][font=Calibri]BsAb[/font][font=宋体]生产经验[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②成功率[/font][font=Calibri]90%[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③自主优化的[/font][font=Calibri]HEK293/CHO[/font][font=宋体]平台[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④多种纯化技术[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤强大的质控分析能力[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑥最高产量[/font][font=Calibri]250 mg/L[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service][b]双特异性抗体生产服务[/b][/url]内容与抗体结构可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service[/font][/font]

中国科技网讯 前列腺癌是一种十分复杂的癌症，变化多端，有的患者可以活很长时间，而有的患者却很快地死去。因此，开发出有效的检测手段来评定不同类型的病症十分重要。英国癌症研究所最新发布的新闻公报称，该所科学家最近开发出一种新的血液检测手段，可利用基因活动的特点快速检测出前列腺癌症患者病情的严重程度。研究人员相信，这一血检手段可最终与现在的PSA（前列腺特异性抗原）测试并用，用来判定哪些患者需要立即进行治疗。 在最近一期的《柳叶刀·肿瘤学》杂志上，英国癌症研究所的研究人员阐释了他们的研究成果。他们对英国100名前列腺癌症患者血液样本中的基因进行了扫描，这些患者中有69人病情已进入晚期，另外的31人则属于早期癌症患者。利用统计模型，研究人员将病人分成四组，每一组人员的基因活动方式皆不相同。在对患者长达两年半的病情进行系统评估之后，研究人员发现，其中一组患者的存活几率明显低于其他患者。而进一步分析发现，在这组患者中，每名患者身上都有9个关键基因异常活跃。通过与美国的70名前列腺癌症患者的样本进行对比后，研究人员确认，通过这9个基因的活动模式可以准确确认哪些患者的生存几率更小。数据表明，具有这种基因活动模式的患者的平均存活时间为9.2个月，而其他患者的平均存活时间则为21.6个月。 研究人员表示，对于癌症治疗来说，个性化治疗是未来的方向。最新的研究表明，通过病人的基因活动模式可以判定病患肿瘤的恶性程度，这种基因活动模式就如条形码，可快速简便地加以识别。而这种通过读取前列腺患者基因变化情况来判定癌症病情的血检手段则是一个重要的进展，可以使得医生能够更好地对病患进行针对性治疗。（驻英国记者 刘海英） 《科技日报》（2012-10-10 二版）

[font=宋体][font=宋体]双特异性抗体是一种基因工程的产物，它有两种不同抗原的结合位点[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可以结合两种不同的抗原。双特异性抗体可以通过结合靶细胞同时利用另一位点招募功能细胞，使得靶细胞与功能细胞相互作用，进而增强功能细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体主要包括含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段和不含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段两大类。含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区双特异性抗体保持了传统的单克隆抗体定制结构，具有两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]区和一个[/font][font=Calibri]FC[/font][font=宋体]区。与传统单克隆抗体定制不同的是，这两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]可以结合不同抗原。不含[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区双特异性抗体缺失了[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区，由两个抗体的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]区和[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]区组成或者由[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段组成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]如何制备双特异性抗体[/b][/font][font=宋体][font=宋体]制备双特异性抗体，科学界同仁已开发了诸多解决方案。杂交[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]杂交瘤法（也称为四源杂交瘤）是最早用于制备双特异性抗体的技术。基于两种不同杂交瘤细胞系的体细胞融合，表达所需特异性的鼠[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]。然而，这种方法制备的功能性双特异性抗体占比低，为后续的抗体纯化和质控带来了巨大的挑战。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过使用分子克隆技术，双特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体由同一细胞系表达的两条不同重链和轻链组成。双特异性抗体的制备需要至少两个用于异二聚化重链的质粒和一个用于公共轻链的质粒。如果使用两个不同的轻链，则需要两个轻链质粒。一般建议[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]个单独的质粒上表达[/font][font=Calibri]HC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]LC[/font][font=宋体]，因为调整质粒比率是一种简单有效的方法。随后，通常要经历复杂的过程从异质稳定转染池中选择最理想的克隆细胞系，以用于大规模抗体生产。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与稳定转染相比，瞬时转染无需将重组[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]整合至宿主基因组中，可以在数天内快速得到结果。人胚肾细胞（[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]）可用于双抗的瞬时表达，适合应用于双抗药物开发的早期阶段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供：双特异性抗体生产服务[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]双特异性抗体功能与应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①募集免疫细胞[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞毒性[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]淋巴细胞（[/font][font=Calibri]CTL[/font][font=宋体]）也称[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，属于[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞的一种，可以特异性识别抗原肽[/font][font=Calibri]-MHCI[/font][font=宋体]类分子复合物，与之发生结合，释放细胞因子裂解细胞或直接进行靶细胞杀伤，但由于很多肿瘤细胞会通多种机制逃避机体免疫系统（包括[/font][font=Calibri]CTL[/font][font=宋体]）识别和攻击，从而形成免疫逃逸。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]科学家们将[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞上面加上了一个特殊的[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]结构，其中带有能够特异性识别靶细胞的相关抗体序列，相当于给[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞装上了一个[/font][font=Calibri]GPS[/font][font=宋体]，增强识别靶细胞能力和杀伤能力，使之成为一个超级卫士。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体[/font][font=Calibri](BsAb)[/font][font=宋体]如[/font][font=Calibri]CD19-CD3[/font][font=宋体]也具有相似的作用，[/font][font=Calibri]BsAb[/font][font=宋体]使[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞激活并定向接近肿瘤细胞，这个过程伴随着[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞和靶肿瘤细胞之间瞬时的溶细胞突触形成，随后[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞增殖和激活导致肿瘤细胞裂解。除了[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，其他免疫细胞如巨噬细胞、单核细胞、粒细胞和自然杀伤细胞（[/font][font=Calibri]NK[/font][font=宋体]）也会发挥杀死肿瘤细胞的效应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②阻断信号通路[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]信号通路是指将细胞外的分子信号经细胞膜传入细胞内发挥效应的一系列酶促反应通路。这些细胞外的分子信号[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]称为配体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]包括激素、生长因子、神经递质以及其它小分子化合物等。当配体特异性地结合到细胞膜或细胞内的受体后，在细胞内就会将信号传递下去，对细胞的生长、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程发挥着极其重要的生物学功能。某些肿瘤细胞异常高表达某种受体，从而导致肿瘤恶性增殖，利用双特异性抗体可以特异性的阻断两个或多个信号通路，减少其通过转换信号通路的方式形成的肿瘤细胞逃逸，提高治疗效果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③阻断细胞因子[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一些细胞因子被认为是引起炎症发生和自体免疫疾病的关键因子，因此阻断这些因子是有治疗潜力的。例如，抑制[/font][font=Calibri]IL17[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]TNF[/font][font=宋体]α对于牛皮癣、银屑病关节炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、少年关节炎和许多其他疾病有很好的治疗效果。[/font][font=Calibri]BsAb[/font][font=宋体]可以结合两个细胞因子受体，达到更好的治疗目的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④作为运载工具[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体具有蛋白识别的特异性。因此，通过一定的耦联技术将抗肿瘤药物或免疫调节药物等[/font][font=宋体]“绑定”在一起，而另一抗原结合位点靶向肿瘤部位，进而提高药物在肿瘤部位的浓度，加强药物疗效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多双特异性抗体详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font]

[font=宋体][font=宋体]抗体融合蛋白是一种将抗体片段与功能蛋白融合表达的重组蛋白，具有抗体的特性和功能蛋白的活性。它可广泛应用于免疫诊断、免疫治疗、抗体纯化、抗体和抗原的定量分析以及免疫导向药物的制备等领域。根据结合的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]片段的不同，可以将抗体融合蛋白分为[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]融合蛋白、[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]Fc[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/fc-fusion-proteins][b]融合蛋白[/b][/url]与[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]单链抗体（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]scFv[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/scfv-antibody-production][b]）[/b][/url]融合蛋白。制备抗体融合蛋白的方法主要有化学交联法和基因工程技术，其中基因工程技术是目前主要的方法。在制备过程中，需要注意两蛋白间的接头序列的长度，以确保蛋白质的折叠和稳定性。抗体融合蛋白在免疫学、生物制药和医学等领域具有广泛的应用前景，为疾病的诊断、治疗和药物研发提供了新的工具和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]双特异性抗体如何与蛋白融合[/font][font=Calibri]?[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]双特异性抗体是一种特殊的抗体，具有两个不同的抗原结合位点。通过技术手段，可以将双特异性抗体与另一种蛋白质融合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①使用基因工程技术，将双特异性抗体的基因与目标蛋白质的基因进行融合，然后通过表达载体在细胞内表达融合蛋白质。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②使用化学手段，将双特异性抗体与目标蛋白质进行化学偶联。这需要使用特定的化学偶联剂，将双特异性抗体的特定基团与目标蛋白质的特定基团连接起来。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]需要注意的是，融合蛋白质的功能和性质取决于其组成成分的特性和比例，因此在融合过程中需要谨慎选择和设计组成成分，以确保融合蛋白质具有所需的功能和性质。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体融合蛋白具有广泛的应用，包括但不限于以下方面：[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①免疫诊断：抗体融合蛋白可以用于检测抗原，如病毒、细菌、肿瘤标志物等。通过将抗体片段与荧光蛋白、酶等标记物结合，可以实现对抗原的高灵敏度检测。[/font][font=宋体]②免疫治疗：抗体融合蛋白可以用于治疗肿瘤、感染性疾病等。通过将抗体片段与细胞毒素、免疫调节因子等效应分子结合，可以实现对肿瘤细胞的靶向杀伤或调节免疫反应。[/font][font=宋体]③抗体纯化：抗体融合蛋白可以用于分离和纯化抗体。通过将抗体片段与亲和标签结合，可以利用亲和层析等技术实现对抗体的纯化和富集。[/font][font=宋体]抗体和抗原的定量分析：抗体融合蛋白可以用于定量分析抗体和抗原的浓度。通过将抗体片段与荧光染料等标记物结合，可以利用流式细胞术等技术实现对抗体和抗原的定量分析。[/font][font=宋体]④免疫导向药物的制备：抗体融合蛋白可以用于制备免疫导向药物，即将药物与抗体片段结合，利用抗体的特异性结合能力，将药物定向引导至病变部位，提高药物的疗效并降低副作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

[font=宋体][font=宋体]随着生物制药技术的快速发展，抗体疗法已成为治疗多种疾病的有力手段。特别是双特异性抗体（[/font][font=Calibri]bsAbs[/font][font=宋体]）和多特异性抗体（[/font][font=Calibri]msAbs[/font][font=宋体]），因其能够同时靶向多个生物学标志物，展现出了独特的治疗潜力。然而，这些抗体的开发面临着重重挑战，尤其是在确保正确的重链和轻链配对方面。本文将基于一篇关于[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术的综述文章，探讨该技术在构建双特异性及多特异性抗体中的应用及其潜力。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术[/font][/font][font=宋体]最初由[/font][font=宋体][font=Calibri]Roche[/font][/font][font=宋体]等公司开发，[/font][font=宋体]是一种[/font][font=宋体]新型[/font][font=宋体]的抗体工程技术，其核心在于[/font][font=宋体]利用[/font][font=宋体]免疫球蛋白[/font][font=宋体]结构[/font][font=宋体]域交叉来实现正确的轻链配对。[/font][font=宋体]此外，该技术还可与[/font][font=宋体][font=Calibri]knobs-into-holes[/font][/font][font=宋体]（[/font][font=宋体][font=Calibri]KiH[/font][/font][font=宋体]）[/font][font=宋体]技术或静电[/font][font=宋体]转向[/font][font=宋体]等[/font][font=宋体]正确的[/font][font=宋体]重链配对技术相结合，[/font][font=宋体]产生各种不同形式的双特异性抗体，[/font][font=宋体][font=宋体]极大地提高了双特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体的生成效率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]自[/font][font=Calibri]2011[/font][font=宋体]年[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术首次被[/font][/font][font=宋体]提出[/font][font=宋体]以来，它已被证明是一种多功能的抗体工程技术，能够[/font][font=宋体]开发出[/font][font=宋体]多种[/font][font=宋体]形式的[/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][b]双特异性抗体[/b][/url]，包括异源二聚体[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]非对称双价、三价、四价[/font][/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]双特异性抗体以[/font][font=宋体]和特异性性[/font][font=宋体][font=宋体]抗体。这些双特异性抗体可以从任何现有的抗体对中通过域交叉获得，无需识别共同的轻链、翻译后加工[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]体外化学组装或引入一组强制正确轻链配对的突变。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术的一个关键优势在于其能够[/font][/font][font=宋体]开发[/font][font=宋体][font=宋体]针对特定疾病的双特异性抗体。例如，针对肿瘤治疗的双特异性抗体[/font][font=Calibri]vanucizumab[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]RG7221[/font][font=宋体]），它能够同时靶向血管内皮生长因子[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][/font][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]VEGF-A[/font][font=宋体]）和血管生成素[/font][font=Calibri]-2[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Ang-2[/font][font=宋体]），在临床前研究中显示出强大的抗肿瘤效果。此外，该技术还被用于开发针对眼部疾病的[/font][font=Calibri]VEGF-Ang-2 CrossMAb RG7716[/font][font=宋体]，以及针对实体瘤的[/font][font=Calibri]CEA TCB[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]RG7802[/font][font=宋体]）等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了在双特异性抗体领域的应用，[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术还[/font][/font][font=宋体]可用于生成其他类型的抗体[/font][font=宋体][font=宋体]。例如，通过该技术可以生成功能性的单价抗体（[/font][font=Calibri]MoAb/MonoMAb[/font][font=宋体]）和二聚体[/font][font=Calibri]MoAb[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]MoAb-dimer, DuoMAb[/font][font=宋体]）。此外，还可以构建三特异性抗体，如针对[/font][font=Calibri]HER[/font][font=宋体]家族受体的[/font][font=Calibri]panHER[/font][font=宋体]家族[/font][font=Calibri]DAF-CrossMAb[/font][font=宋体]抗体，以及四特异性抗体，如针对[/font][font=Calibri]EGFR/HER1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HER2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HER3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VEGF[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]FL518[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CRTB6[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术的成功不仅在于其能够生成具有特定生物学功能的抗体，还在于其能够通过标准化的工作流程和典型的上下游处理产生高质量的[/font][/font][font=宋体]抗体[/font][font=宋体][font=宋体]产品。这些抗体在规模、产量、糖基化、稳定性和质量方面与传统的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]抗体相当。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]总之，[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术为双特异性及多特异性抗体的开发提供了一种强大且灵活的平台。随着该技术的不断发展和优化，将有更多基于[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术的抗体进入临床试验阶段，为患者带来[/font][/font][font=宋体]治疗福音[/font][font=宋体][font=宋体]。然而，尽管[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术已经取得了显著的进展，但在实际应用中仍可能遇到产量或纯度不足等问题，需要进一步的优化和改进。未来的研究将继续探索[/font][font=Calibri]CrossMAb[/font][font=宋体]技术的潜力，以满足临床治疗的需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本篇文章由[url=https://cn.sinobiological.com/][b]义翘神州[/b][/url]进行整理，同时提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service][b]双特异性抗体生产服务[/b][/url]，详情可点击了解！参考文献：[/font][font=宋体][font=Calibri]Klein C, Schaefer W, Regula JT. The use of CrossMAb technology for the generation of bi- and multispecific antibodies [published correction appears in MAbs. 2018 Nov 13 11(1):217]. MAbs. 2016 8(6):1010-1020. doi:10.1080/19420862.2016.1197457[/font][/font]

[center]治疗前列腺癌的新型药物degarelix将在美国上市[/center] 据悉，FDA已批准美国Ferring制药公司出品的前列腺癌治疗新药degarelix,，该药为注射剂，属促性腺激素释放激素受体拮抗剂，主要用于晚期前列腺癌患者。 这种新型药物的商品名目前还处在FDA的审批阶段，一旦它的商品名最后通过批准，Ferring公司将立即在美国市场推出该药。 此前，欧洲人用医疗产品委员会也已同意degarelix在欧洲上市。目前，该药也正在等待全球其他主要药品市场的销售批准。 Ferring相关负责人称，degarelix的最初研发地点位于圣地亚哥，后由Ferring在美国及欧洲的公司开发。该药在关键的III期临床实验中获得的数据显示，它起效快，并且在长期抑制睾丸激素和前列腺特异抗原方面的效果非常显著。 信息来源:中国医药123网

影响抗原[url=https://www.tw-reagent.com/category.php?id=34]抗体[/url]反应的因素有两方面，一是反应物自身的因素；二是反应环境条件。　　　　（一）反应物自身的因素　　　　1.抗体：不同来源的抗体，反应性各有差异，抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗体抗原反应，为提高试验的可靠性，应选择高特异性、高亲和力的抗体作诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成，单克隆抗体不适用于沉淀反应。　　　　2.抗原：抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。颗粒性抗原出现凝集反应，可溶性抗原出现沉淀反应，单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。　　　　（二）反应环境条件　　　　1.电解质：抗原与抗体发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。　　　　2.酸碱度：抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行。蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6～9进行，有补体参与的反应pH为7.2～7.4，pH过高或过低都将影响抗原与抗体反应。　　　　3.温度：在一定范围内，温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，使反应加速。一般为15℃～40℃，常用的抗原抗体反应温度为37℃，温度如高于56℃，可导致已结合的抗原抗体再解离，甚至变性或破坏。此外，适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触，加速反应。

[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/bispecific-antibody][u][font=宋体][color=#0000ff]双特异性抗体[/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]（[/font][font=Calibri]Bispecific Antibodies, BsAbs[/font][font=宋体]）是一种新型的生物治疗药物，它们能够同时结合两种不同的抗原，在多种疾病治疗，尤其是癌症[/font][/font][font=宋体]治疗[/font][font=宋体][font=宋体]方面展现出巨大的潜力。然而，由于[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的结构复杂性和作用机制的多样性，为它们的生物活性检测和表征带来了挑战。本文将探讨[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的生物活性检测策略，并结合案例研究，提供对这一领域的深入见解。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的结构多样性与作用机制[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的设计和开发受益于对传统单克隆抗体（[/font][font=Calibri]mAbs[/font][font=宋体]）的深入了解。它们具有与常规[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体]相似的表位特异性和可[/font][/font][font=宋体]改造[/font][font=宋体]性，[/font][font=宋体]可[/font][font=宋体]以结合两个不同的[/font][font=宋体]抗原位点[/font][font=宋体][font=宋体]。[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的结构非常多样化，取决于预期的作用机制（[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]）和所需的药代动力学[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]药效学（[/font][font=Calibri]PK/PD[/font][font=宋体]）特性。[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的作用机制大致可分为四类：细胞桥接型、受体[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]配体阻断或激活型、辅助因子模拟型和“归巢”型。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]生物活性检测的挑战与策略[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]开发[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的生物活性检测方法需要[/font][/font][font=宋体]深入理解[/font][font=宋体]其分子的作用机制，以及[/font][font=宋体]全面了解[/font][font=宋体]不同生物分析方法的原理和应用。生物活性检测对于生物制品的表征和控制至关重要，也是解释临床研究结果的关键。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][/font][font=宋体]分阶段检测[/font][font=宋体]方法[/font][font=宋体]对于生物治疗药物的生物活性检测，行业和监管机构普遍接受分阶段[/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体][font=宋体]的方法。在产品开发的早期阶段，通常首选结合方法进行检测。随着产品开发的推进，更复杂的、反映[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]的基于细胞的生物活性检测方法被开发出来，并在上市申请提交前进行验证。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]作用机制驱动的设计[/font][/font][font=宋体][font=宋体]生物活性检测策略是由药物预期的生理[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]驱动的。与其它分析技术不同，生物活性检测针对每[/font][/font][font=宋体]种[/font][font=宋体]治疗药物[/font][font=宋体]都是[/font][font=宋体]独一无二的。一个设计良好的生物活性检测[/font][font=宋体]方法[/font][font=宋体]能够准确捕捉药物候选物的生物活性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]整体[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]表征策略[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的效力和安全性评估依赖于成功开发一个药理学和临床相关生物分析策略，该策略能够反映双[/font][/font][font=宋体]特异性[/font][font=宋体]抗体的生物活性，并能够区分高[/font][font=宋体]级[/font][font=宋体]结构、效力和[/font][font=宋体]疗效[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]其中[/font][font=宋体][font=宋体]重要的是开发表征和生物分析方法来研究重要的质量属性，包括整体稳定性、片段化[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]聚集[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]免疫原性、抗原特异性、亲和力、结合和解离速率、双靶点结合的亲和力（对于在同一细胞上的两个靶点的分子）和[/font][font=Calibri]MoA/[/font][font=宋体]生物活性。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]生物活性检测案例研究[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]1. ELISA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]技术[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]技术常用于表征[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的体外抗原结合特性。[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]具有灵敏度高、开发速度快[/font][/font][font=宋体]和[/font][font=宋体][font=宋体]成本相对较低等优点，而[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]能够实时监测结合事件，提供动力学和热力学参数。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]细胞表面配体结合检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]通过流式细胞术和基于细胞的报告基因分析，可以评估[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]与其目标的结合特异性和选择性，这些信息在传统的[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]基础结合分析中无法捕获。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]效力检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]针对[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的效力检测策略具有挑战性，因为其复杂的[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]涉及两个[/font][/font][font=宋体]靶点[/font][font=宋体][font=宋体]结合。效力检测应该根据[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]进行定制，同时满足[/font][font=Calibri]QC[/font][font=宋体]和监管[/font][/font][font=宋体]部门的要求[/font][font=宋体]，成为稳[/font][font=宋体]定[/font][font=宋体]和灵敏的方法，以检测稳定性中的任何结构变化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]效应功能检测[/font][/font][font=宋体][font=宋体]一些[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][/font][font=宋体]通过[/font][font=宋体]靶向细胞表面蛋白或受体[/font][font=宋体]来[/font][font=宋体]增强[/font][font=宋体][font=Calibri]ADCC[/font][/font][font=宋体][font=宋体]效应功能。根据[/font][font=Calibri]MoA[/font][font=宋体]和其他分子特异性因素，效应功能可能与[/font][/font][font=宋体]一些[/font][font=宋体][font=宋体]安全事件相关，因此，优选效应功能减弱的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]区域。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]结论[/font][/b][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][/font][font=宋体]是[/font][font=宋体]一个[/font][font=宋体]极具前景的[/font][font=宋体][font=宋体]新兴治疗领域。由于[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]与单特异性抗体在结构和生物学上的差异，为[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]开发生物活性检测策略带来了独特的挑战和考虑。本文[/font][/font][font=宋体]总结[/font][font=宋体][font=宋体]了目前可用的生物分析技术平台、生物活性检测方法和相关的案例研究，以提供对设计[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]放行和表征策略的见解。[/font][/font][font=宋体]了[/font][font=宋体][font=宋体]解和开发良好的生物活性检测对于[/font][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]的整体控制策略至关重要，它们将[/font][/font][font=宋体]随着[/font][font=宋体][font=Calibri]BsAbs[/font][font=宋体]分子和[/font][/font][font=宋体]现有[/font][font=宋体]分析技术的发展[/font][font=宋体]而不断发展[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本文[/font][font=宋体]由[/font][font=宋体]义翘[/font][font=宋体]神州[/font][font=宋体]进行[/font][font=宋体]整理[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]同时[/font][font=宋体]提供快速高效的[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/bispecific-antibody-service][u][font=宋体][color=#0000ff]双特异性抗体表达服务[/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]。从抗体序列开始，我们可以表达多种双特异性抗体形式，如[/font][font=Calibri]BiTE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Diabody[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CrossMab[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]DVD-IgG[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]参考文献：[/font][font=宋体][font=Calibri]Register AC, Tarighat SS, Lee HY. Bioassay Development for Bispecific Antibodies-Challenges and Opportunities.[/font][/font][font=Calibri] Int J Mol Sci. 2021 22(10):5350. Published 2021 May 19. doi:10.3390/ijms22105350[/font]

PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、 或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数 过多 有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶 则不出 现，酶量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策有：①必要时重新设计引 物。②减低 酶量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次 数。④适当提 高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸)。

[font=宋体]在生物学和医学领域，抗原与抗体之间的结合反应是极为重要且复杂的过程。这种反应不仅关乎免疫系统的正常运作，而且在诊断、治疗等多个领域具有广泛的应用。本文将详细探讨抗原抗体结合反应的原理及其背后的生物学意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、抗原与抗体的基本概念[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原，通常是指能够刺激机体产生特异性免疫应答的物质。它们可能是外来的微生物、毒素，也可能是机体自身的异常成分。抗体，则是免疫系统在受到抗原刺激后产生的特异性免疫球蛋白，能够与抗原发生特异性结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、抗原抗体结合的结构基础[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体之间的结合，依赖于它们分子间的结构互补性和亲和性。这种互补性主要源于抗原的表位和抗体的结合部位之间的匹配。抗原的表位，即其表面能够与抗体结合的区域，通常是特定的化学基团或空间构象。而抗体的结合部位，即其能够与抗原结合的区域，由重链和轻链上的可变区组成，形成了特定的空间结构，能够与抗原表位进行精确的结合。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、抗原抗体结合的动力学过程[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应通常可以分为两个阶段。第一阶段是抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应速度极快，仅需几秒钟即可完成。这是因为抗原抗体之间的结合是高度特异性的，一旦找到合适的配对，它们会迅速结合形成抗原抗体复合物。第二阶段是可见反应阶段，此时抗原抗体复合物在环境因素的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应。这一阶段的反应速度较慢，往往需要数分钟至数小时。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]四、抗原抗体结合反应的意义[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应在生物学和医学领域具有广泛的应用。在免疫学中，它是机体免疫系统识别和清除外来抗原的基础。在医学诊断中，利用抗原抗体反应可以进行疾病的快速、准确诊断。例如，利用单克隆抗体技术可以检测乙型肝炎等病毒。此外，抗原抗体反应还被广泛应用于治疗领域，如利用载药单克隆抗体进行肿瘤的靶向治疗等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]五、总结[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗原抗体结合反应是生物学和医学领域的重要反应之一，其原理涉及到分子间的结构互补性和亲和性、反应动力学等多个方面。对这一反应的研究不仅有助于我们深入理解免疫系统的运作机制，也为疾病的诊断和治疗提供了新的方法和手段。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

实验室常用的ELISA方法可以用来测定抗体，也可以用来测定抗原。我们可以根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件，可设计出各种不同类型的检测方法。下面就让上海劲马ELISA试剂盒为您分享其中关于双抗体夹心法检测抗原的操作步骤。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：1) 将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2) 加受检标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3) 加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。4) 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。只要获得针对受检抗原的异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。劲马ELISA试剂盒小提示：双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原，但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原，因其不能形成两位点夹心。

[font=宋体]抗体和抗原是生物学中重要的概念，它们在免疫学、医学和生物学等领域都有广泛的应用。抗体和抗原具有一些显著的区别，这些区别主要体现在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面。本文将对这些差异进行详细的阐述。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先，让我们了解一下抗体的化学结构。抗体是一种免疫球蛋白，具有两条相同的抗原结合簇。抗原决定簇是抗体与抗原结合的关键部位，它们在空间结构上呈现出一定的形状和大小，能够与抗原的特定部位精确结合。然而，抗原通常具有多个抗原决定簇，这使得抗原能够与多种抗体结合，从而在免疫反应中发挥重要作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]接下来，让我们了解一下抗原的产生方式。抗原是能够诱发免疫应答的分子，通常是由病原微生物产生的一种外源物质。例如，细菌的细胞壁、病毒的包膜蛋白等都可以作为抗原。与此相反，抗体是由淋巴细胞产生的，特别是浆细胞。在接受抗原的刺激后，浆细胞会分化为能够产生抗体的浆细胞，从而在体内产生大量的抗体，以应对抗原的侵袭。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]此外，抗体和抗原在溶解性上也存在显著差异。抗原的溶解性通常受到[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]和电解质浓度的 影响，而抗体的溶解性则与抗原无关。这一差异在生物学和医学领域具有重要的意义。例如，在疫苗研发中，科学家需要了解抗原的溶解性，以确保疫苗的有效性。而在抗体治疗中，医生需要了解抗体的溶解性，以确保抗体能够有效地发挥作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]另外，抗体和抗原的特异性也存在明显的差异。抗原的特异性取决于抗原决定簇的立体构型和间距，这意味着不同的抗原决定簇可以激发不同的免疫应答。与此相反，抗体的特异性取决于抗体的独特型。独特型是指抗体的抗原结合部位的空间结构，它决定了抗体与抗原的特异性结合。因此，不同的抗体可以与不同的抗原结合，这使得抗体在免疫应答中具有多种不同的作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]最后，抗体和抗原在效应功能上也存在显著的差异。抗原主要是刺激免疫系统产生抗体，从而在体内产生免疫应答。然而，抗体在与抗原结合后，能够激活补体系统，促进吞噬细胞对病原微生物的吞噬，从而发挥效应功能。此外，抗体还可以通过调理作用促进吞噬细胞的吞噬，以及通过[/font][font=Calibri]ADCC[/font][font=宋体]作用（抗体依赖的细胞毒性作用）诱导细胞对靶细胞的杀伤作用。这些效应功能使得抗体在免疫防御和免疫治疗中具有广泛的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，抗体和抗原在化学结构、产生方式、溶解性、特异性和效应功能等方面存在显著的区别。这些区别决定了抗体和抗原在免疫应答中的不同作用和应用。在生物学、医学和免疫学等领域中，了解抗体和抗原的区别对于理解免疫应答的机制、疫苗研发、抗体治疗等方面都具有重要的意义。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]随着抗体制备技术的发展，现在已有多种方法可用于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production][b]抗体制备[/b][/url]。可使用体外杂交瘤细胞制备单克隆抗体。一般在兔体内[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production][b]制备多克隆抗体[/b][/url]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过多年的工艺开发，义翘神州已成为行业领先的抗体制备公司。我们可提供克级数量的定制抗体生产，交货迅速，价格优惠。从基因序列到纯化抗体（[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]克），只需几周时间，成品产品即可送到您家门口。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

如题。六十年代美国的Levine和Bang发现革兰氏阴性菌内毒素可以迅速地引起鲎血细胞裂解液形成凝固，从而开发了灵敏度和特异性都非常高的检测内毒素的鲎试验法，此法已广泛被各国所采用。但在使用鲎试剂过程中有时发现假阳性反应（或叫非内毒素引起的凝胶反应），给鲎试验法的应用带来问题。为解决上述假阳性问题，八十年代以后进行了很多研究和改进。1981年Kakinuma发现一种抗癌药（1-3）β-D-glucan（β-葡聚糖）能使鲎试剂凝固，该物质广泛存在于担子菌、真菌、地衣类、酵母和藻类的菌体成分中，在10ng/ml时，就可使鲎试剂凝固。另外，某些人造纤维制造的人工肾透析膜上也含有类似的物质，干扰鲎试验，但它不引起家兔升温。普通鲎试剂出现阳性，因为它的G因子旁路被β-葡聚糖激活，形成凝胶；特异性鲎试剂不受β-葡聚糖激活，只对内毒素起专一反应，不形成凝胶。

1 　两者的内涵不同抗原是指能刺激机体的免疫系统产生抗体或效应细胞,并且能够和相应的抗体或效应细胞发生特异性免疫反应的物质;而过敏原则是指引起机体产生过敏反应的物质。机体只要接触抗原就要发生免疫反应,而过敏反应只有当过敏原再次接触时才会发生。2 　两者的外延不同作为抗原具备两种性能:一是能刺激机体产生抗体或效应细胞,这叫免疫原性;二是能和相应的抗体或效应细胞发生特异性免疫反应,叫做反应原性。免疫学上把兼备两种性能的物质叫完全抗原,如病原体、异体动物血清等;只有反应原性而无免疫原性的物质,叫半抗原,如青霉素、磺胺等。过敏原是指引起机体过敏反应的物质,因此过敏原可能既有免疫原性,又有反应原性,如免疫血清等;也可能只有反应原性,即半抗原,但半抗原进入机体与组织蛋白结合后,即成为完全抗原,如青霉素进入机体后,它的降解产物中的青霉烯酸能与体内的组织蛋白结合成为完全抗原,刺激机体产生相应的抗体。3 　两者的性质不同3. 1 　抗原一般具有异物性，进入组织内的抗原物质必须与机体组织细胞的成分不同,表现在:一是异种间的物质,如马的血清对马而言是自体物质,不能引起马产生抗体,对兔而言则是异体物质,能引起兔产生抗体;二是同种异体间的不同成分,如不同人之间红细胞表面的凝集原等;第三是自体内的隔绝成分,如甲状腺球蛋白等,在正常情况下是固定在某一部位的,与产生抗体的细胞不接触,因此不会引起自体产生抗体,但是,当受到外伤或感染时,这些成分就会进入血液[font=Times New

第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法，各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在整个转录本的多个位点退火，产生短的，部分长度的cDNA。这种方法经常用于获取5‘末端序列及从带有二级结构区域或带有逆转录酶不能复制的终止位点的RNA模板获得cDNA。为了获得最长的cDNA，需要按经验确定每个RNA样品中引物与RNA的比例。随机引物的起始浓度范围为50到250ng每20μl反应体系。因为使用随机引物从总RNA合成的cDNA主要是核糖体RNA，所以模板一般选用poly（A）+RNA。Oligo（dT）起始比随机引物特异性高。它同大多数真核细胞mRNA 3’端所发现的poly（A）尾杂交。因为poly（A）+RNA大概占总RNA的1%到2%，所以与使用随机引物相比，cDNA的数量和复杂度要少得多。因为其较高的特异性，oligo（dT）一般不需要对RNA和引物的比例及poly（A）+选择进行优化。建议每20μl反应体系使用0.5μg oligo（dT）。oligo（dT）12-18适用于多数RT-PCR。ThermoScript RT-PCR System提供了oligo（dT）20，因为其热稳定性较好，适用于较高的保温温度。基因特异性引物（GSP）对于逆转录步骤是特异性最好的引物。GSP是反义寡聚核苷，可以特异性地同RNA目的序列杂交，而不象随机引物或oligo（dT）那样同所有RNA退火。用于设计PCR引物的规则同样适用于逆转录反应GSP的设计。GSP可以同与mRNA3‘最末端退火的扩增引物序列相同，或GSP可以设计为与反向扩增引物的下游退火。对于部分扩增对象，为了成功进行RT-PCR，需要设计多于一个反义引物，因为目的RNA的二级结构可能会阻止引物结合。建议在20μl的第一链合成反应体系中使用1pmol反义GSP。提高逆转录保温温度为了充分利用GSP特异性的全部优点，应该使用有较高热稳定性的逆转录酶。热稳定逆转录酶可以在较高温度保温以增加反应严谨性。比如，如果一个GSP退火温度为55℃，那么如果使用AMV或M-MLV在低严谨性的37℃进行逆转录，GSP所带有的特异性就没有完全利用。然而SuperScripⅡ和ThermoScript可以在50℃或更高进行反应，这就会消除较低温度时产生的非特异性产物。为获得最大的特异性，可以将RNA/引物混合物直接从65℃变性温度转移到逆转录保温温度，并加入预热的2×反应混合液（cDNA合成热启动）。这有助于防止低温时分子间碱基配对。使用PCR仪可以简化RT-PCR所需的多种温度转换。http://www.biomart.cn/upload/asset/2009/03/27/1237778966.gif图 逆转录温度对RT-PCR特异性的影响使用ThermoScriptTM和设计用来同人DNA聚合酶ε mRNA退火的GSP，由1μg Hela RNA合成cDNA。ThermoscriptTM加入到预热的反应混合液中，使用Platinum Taq DNA聚合酶对1/10的cDNA进行35个循环的PCR。减少基因组DNA污染RT-PCR所遇到的一个潜在的困难是RNA中沾染的基因组DNA。使用较好的RNA分离方法，如Trizol Reagent，会减少RNA制备物中沾染的基因组DNA。为了避免产生于基因组DNA的产物，可以在逆转录之前使用扩增级的DNaseⅠ对RNA进行处理以除去沾染的DNA。将样品在2.0mM EDTA中65℃保温10分钟以终止DNaseⅠ消化。EDTA可以螯合镁离子，防止高温时所发生的依赖于镁离子的RNA水解。为了将扩增的cDNA同沾染的基因组DNA扩增产物分开，可以设计分别同分开的外显子退火的引物。来源于cDNA的PCR产物会比来源于沾染的基因组DNA的产物短。另外对每个RNA模板进行一个无逆转录的对照实验，以确定一个给定片段是来自基因组DNA还是cDNA。在无逆转录时所得到的PCR产物来源于基因组。

1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点：1.典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长，保证序列独特性，并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错误配对序列杂交，降低了特异性，而且比短序列杂交慢，从而降低了产量。2.选择GC含量为40％到60％或GC含量映像模板GC含量的引物。3.设计5'端和中间区为G或C的引物。这会增加引物的稳定性和引物同目的序列杂交的稳定性。4.避免引物对3'末端存在互补序列，这会形成引物二聚体，抑制扩增。5.避免3'末端富含GC。设计引物时保证在最后5个核苷中含有3个A或T。6.避免3'末端的错误配对。3'端核苷需要同模板退火以供聚合酶催化延伸。7.避免存在可能会产生内部二级结构的序列，这会破坏引物退火稳定性。目的序列上并不存在的附加序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列，但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。有时候，对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计兼并引物。兼并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。为了增加特异性，可以参考密码子使用表，根据不同生物的碱基使用偏好，减少兼并性。次黄嘌呤可以同所有的碱基配对，降低引物的退火温度。不要在引物的3'端使用兼并碱基，因为3'端最后3个碱基的退火足以在错误位点起始PCR。使用较高的引物浓度（1μM到3μM），因为许多兼并混合物中的引物不是特异性针对目的模板。

各位大侠: 请问超滤法中的非特异性结合是什么意思?谢谢大家指导!!

我们的产品在做方法确认时要做1、特异性；2、线性相关；3、精密度；4、准确度 特异性：以待测物质的特点来确定，通常用光谱来鉴别分析有效成分，如GC/MS、LC/MS、和HPLC-DAD，这个具体是如何操作的呢？分析方法确认指南上准确度以特异性和精密度来进行评价，想知道如何通过特异性和精密度来评价，有没有具体的量化指标呢？[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif[/img]

【序号】：1【作者】：标准【题名】：标准编号: YY/T 1163-2009中文标准名称: 总前列腺特异性抗原（t-psa）定量测定试剂（盒）（化学发光免疫分析法）【年、卷、期、起止页码】：标准上传日期: 2010-3-28发布日期: 2009-12-30实施日期: 2011-06-01标准类别: 医药行业标准【全文链接】：http://www.freebz.net/soft1/487365.htm

【序号】：1【作者】：标准【题名】：标准编号: YY/T 1163-2009中文标准名称: 总前列腺特异性抗原（t-psa）定量测定试剂（盒）（化学发光免疫分析法）【年、卷、期、起止页码】：标准上传日期: 2010-3-28发布日期: 2009-12-30实施日期: 2011-06-01标准类别: 医药行业标准【全文链接】：http://www.freebz.net/soft1/487365.htm

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今日养生小知识—前列腺患者饮食方！[玫瑰]前列腺增生，俗称前列腺肥大，是中老年男性常见疾病之一。[玫瑰]随着男性年龄的增长，前列腺组织逐渐增大，压迫尿道，引起排尿困难、尿频、尿急等症状，严重影响老年男性生活质量。[玫瑰]主要表现为尿频、尿急、点滴不尽、尿潴留、尿失禁、血尿等，可并发尿路感染、膀胱结石、肾积水，严重时可并发肾功能衰竭而危及生命。[玫瑰]因此，了解并预防前列腺增生，对于维护中老年男性的健康很重要。[玫瑰]下面推荐三个前列腺患者饮食方！[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/07/202407051221413954_3958_1642069_3.png[/img]

如题，三氧化硫特异性吸附剂有哪些？特别是陶瓷材料？有哪位大侠知道，japan产的可去除SO3而不去除SO2的mist catcher （ZBBB3V03-0 / ZBBB4V03-0. For elimination of SO3 ）填充材料具体是什么啊 ，介绍里仅写了 Ceramic

为获得某蛋白（A）的特异性抗体，你用该蛋白免疫家兔，你将如何监控针对蛋白（A）抗原产生抗体的动态过程？（简述所选择方法的原理及步骤）期待您的解答，非常感谢。