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羟基大黄素对照品

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  • 【应用数据库有奖问答12.06(已完结)】一捻金胶囊的检测,对照品中大黄素甲醚的理论塔板数是?

    【应用数据库有奖问答12.06(已完结)】一捻金胶囊的检测,对照品中大黄素甲醚的理论塔板数是?

    [b]Q:一捻金胶囊的检测,对照品中大黄素甲醚的理论塔板数是?A:13182.473===============================================================【活动内容】1、每个工作日上午10:00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题,版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15:10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖:抽奖软件,当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午15:00),每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color](抽奖人数≤10,抽取3个版友;抽奖人数>10,抽取5个版友);中奖名单:初心(注册ID:m3170710)千层峰(注册ID:jxyan)yy_0324(注册ID:yy_0324)捌道巴拉巴巴巴(注册ID:v3082413)m3071659(注册ID:m3071659)[img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812061509027023_7191_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/12/201812061509060797_992_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励:所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color](幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法:HPLC基质:药品应用编号:103503化合物:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚色谱柱:[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-229.html]Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理:对照品溶液:取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1 mL中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16 μg、含大黄素甲醚8 μg的混合溶液,摇匀,即得。供试品溶液:取装量差异项下的本品内容物0.8 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5 mL,置烧瓶中,挥去溶剂,加8%盐酸溶液10 mL,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)2分钟,再加三氯甲烷10 mL,加热回流1小时,放冷,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,洗涤并入分液漏斗中,分取三氯甲烷液,酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10 mL,合并三氯甲烷液,减压回收溶剂至干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。色谱条件:色谱柱: Diamonsil C18 250*4.6 mm,5 μm (Cat#:99903)流动相: 甲醇:0.1%磷酸溶液=85:15流速: 1 mL/min柱温: 25 ℃检测器: UV 254 nm进样量: 10 μL文章出处:天津应用实验室关键字:一捻金胶囊、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、Diamonsil C18、HPLC、2015药典摘要:Diamonsil C18检测一捻金胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚。图谱:[img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/30/1419931202872254.png[/img][img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/30/1419931205664927.png[/img]

  • 2015中国药典检测方案有奖问答01.19(已完结)-一捻金中大黄素的检测

    2015中国药典检测方案有奖问答01.19(已完结)-一捻金中大黄素的检测

    问题:一捻金中大黄素的检测:对照品中 大黄素 和大黄酚的分离度是多少?答案:6.642获奖名单:莫名其妙(ID:moyueqiu)dahua1981(ID:dahua1981)大川之子,纵横四海(ID:chuangu120)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191715_582449_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191715_582450_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191715_582451_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191715_582452_708_3.jpg【活动奖励】幸运奖(2钻石币):抽奖软件,当天随机抽取3个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午3:00),每人奖励2个钻石币积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。一捻金中大黄素的检测样品制备 制备方法1. 对照品:取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1 mL中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16 μg、含大黄素甲醚8 μg的混合溶液,摇匀,即得。2. 供试品:取本品0.8 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5 mL,置烧瓶中,挥去溶剂,加8%盐酸溶液10 mL,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)2分钟,再加三氯甲烷10 mL,加热回流1小时,放冷,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,洗液并入分液漏斗中,分取三氯甲烷液,酸液再用三氯甲烷振摇提取3次,每次10 mL,合并三氯甲烷液,减压回收溶剂至干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。分析条件 色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm,5 μm (Cat#:99503)流动相甲醇:0.1%磷酸溶液=80:20流速1 mL/min柱温25 ℃检测器UV 254 nm 进样量10 μL 色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191014_582361_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 7.830 671358 69217 13555.942 1.059 -- 2 11.203 501540 35740 14045.410 1.086 10.425 3 18.477 630159 28823 15947.543 1.019 15.101 4 22.627 1068032 42991 18558.145 1.009 6.642 5 33.462 297394 8061 18406.305 1.008 13.126 *药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于4000供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601191015_582362_708_3.png 峰号 保留时间[/alig

  • 2015中国药典检测方案有奖问答01.14(已完结)——利膈丸中大黄素、大黄酚的检测

    2015中国药典检测方案有奖问答01.14(已完结)——利膈丸中大黄素、大黄酚的检测

    问题:利膈丸中大黄素、大黄酚的检测药典要求理论板数按大黄素峰计算应?答案:药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于3000【活动奖励】幸运奖(2钻石币)dyd3183621(注册ID:dyd3183621)sixingxing(ID:v2889187)WUYUWUQIU(ID:wulin321)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601141514_581870_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601141514_581871_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================样品制备制备方法1. 对照品:取大黄素对照品和大黄酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含大黄素5 μg,大黄酚10 μg的混合溶液,即得。2. 供试品:取重量差异项下的本品,剪碎,取约1 g,精密称定,精密加入甲醇50 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液10 mL,水浴蒸干,残渣加10%盐酸溶液10 mL,超声处理(功率250W,频率50 kHz)5分钟,再加三氯甲烷30 mL,加热回流1小时,冷却,用三氯甲烷振摇提取3次,每次10 mL,合并三氯甲烷液,置水浴上蒸干,残渣加甲醇使溶解并转移至5 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。分析条件色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm,5 μm (Cat#:99503)流动相甲醇:0.1%磷酸溶液=80:20流速1 mL/min柱温30 ℃检测器UV 254 nm进样量5 μL 色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601140956_581824_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 16.443 23238 1297 18428.469 1.012 -- 2 20.553 70162 3293 20691.713 1.030 7.784 *药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于3000供试品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/01/201601140956_581825_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 16.451 46937 2711 19154.607 1.055 -- 2 20.562 148772 6876 20360.247 0.993 7.815 *药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于3000本品种同时使用了DiamonsilC18、DiamonsilC18(2)两款色谱柱,在药典规定条件下进行大黄素、大黄酚的检测,均满足药典要求。利膈丸中大黄素、大黄酚的检测

  • 【原创】2015中国药典检测方案有奖问答02.01(已完结)——九味肝泰胶囊中大黄素、大黄酚的检测

    【原创】2015中国药典检测方案有奖问答02.01(已完结)——九味肝泰胶囊中大黄素、大黄酚的检测

    问题:九味肝泰胶囊中大黄素、大黄酚的检测:对照品中大黄酚的拖尾因子是多少呢?答案:0.993获奖名单:莫名其妙(ID:moyueqiu)吕梁山(ID:shih20j07)mengzhaocheng(ID:mengzhaocheng)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602020924_584127_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602020924_584128_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602020925_584129_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602020925_584130_708_3.jpg【活动奖励】幸运奖(2钻石币):抽奖软件,当天随机抽取3个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午3:00),每人奖励2个钻石币积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。九味肝泰胶囊中大黄素、大黄酚的检测样品制备 制备方法1. 对照品:取大黄素对照品、大黄酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含大黄素、大黄酚各5 μg的混合溶液,即得。2. 供试品:取装量差异项下的本品内容物,研细,取约1 g,精密称定,精密加入甲醇50 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10 mL,回收溶剂至干,残渣加5 mol/L硫酸溶液20 mL,再加三氯甲烷20 mL,加热回流1小时,转移至分液漏斗中,分取三氯甲烷层,酸水液用三氯甲烷振摇提取3次,每次20 mL,合并三氯甲烷液,回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解并转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。分析条件 色谱柱Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm,5 μm (Cat#:99603) 流动相甲醇:水=76:24 流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器UV 254 nm进样量10 μL色谱图对照品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602011101_584041_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 21.419 59508 1835 10260.262 1.404 -- 2 32.209 176606 5315 21542.305 0.993 12.520 *药典要求理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000 供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602011102_584042_708_3.png 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 21.008 24001 807 10133.960 0.936 -- 2 31.851 115810 3360 19874.323 0.989 12.474 *药典要求理论板数按大黄酚峰计算应不低于3000本品种同时使用了SpursilC18-EP色谱柱,在药典规定条件下进行大黄素、大黄酚的检测

  • 17.4 HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

    17.4 HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

    HPLC法测定胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量张红霞,金艺,许海燕,赵怀清(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016)摘要:目的建立胃力片中大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱:Diamonsil c18(4.6 mm×200 mm,5弘m),以甲醇一体积分数为0.1%的磷酸水溶液(体积比为82:18)为流动相,流速:1.0 mL·min~,柱温:35℃,检测波长:254 nm。结果大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在1.42~12.79、2.02~18.14、1.28~11.52、0.76~8.36 mg·Lo内呈良好的线性关系,相关系数分别为O.999 1、O.999 4、O.999 0和0.999 6,平均回收率分别为102。7%(RSD=l。0%,魁=9)、10l。2%(RSD=2.7%,露=9)、99.4%(RSD=1。6%,n=9)和97.9%(RSD=2.8%,咒=9)。结论本方法可作为胃力片质量控制方法之一。关键词:胃力片;大黄酸;大黄素;大黄酚;大黄素甲醚;高效液相色谱法http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241901_379466_2355529_3.jpg

  • 2015中国药典检测方案有奖问答02.16(已完结)——麻仁润肠丸中的大黄素、大黄酚的检测

    2015中国药典检测方案有奖问答02.16(已完结)——麻仁润肠丸中的大黄素、大黄酚的检测

    问题:麻仁润肠丸中的大黄素、大黄酚的检测使用了哪几款液相色谱柱?答案:Diamonsil C18 Leapsil C18、Platisil ODS【活动奖励】幸运奖(2钻石币):抽奖软件,当天随机抽取3个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午3:00),每人奖励2个钻石币sixingxing(注册ID:v2889187)mengzhaocheng(ID:mengzhaocheng)梧桐(ID:mengzhou)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602161515_584472_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602161515_584473_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================麻仁润肠丸中的大黄素、大黄酚的检测样品制备制备方法1. 对照品:取大黄素对照品和大黄酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 mL含大黄素5 μg,大黄酚10 μg的混合溶液,即得。2. 供试品:取重量差异项下的本品,剪碎,混匀,取约1 g,精密称定,加硅藻土1.5 g,研匀,置索氏提取器中,加乙醇适量,加热回流提取至提取液无色,提取液移至50 mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,精密量取10 mL,置烧瓶中,回收溶剂至近干,加盐酸-30%乙醇(1:10)混合溶液15 mL,置水浴中加热水解1小时,立即冷却,用三氯甲烷强力振摇提取4次,每次15 mL,合并三氯甲烷液,回收三氯甲烷至干,残渣用甲醇溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。分析条件色谱柱Diamonsil C18 250 x 4.6 mm,5 μm (Cat#:99903)流动相甲醇:0.1%磷酸溶液=85:15 流速1.0 mL/min柱温30 ℃检测器UV 254 nm进样量10 μL色谱图对照品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602160944_584436_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 12.971 321587 17671 11209.209 1.004 -- 2 16.592 1078806 50426 13693.862 0.997 6.851 *药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于2000供试品http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/02/201602160945_584437_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 μV 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 13.032 318215 18577 12390.198 1.007 -- 2 16.637 964815 45090 13689.151 1.002

  • 2015中国药典检测方案有奖问答03.28(已完结)——一捻金胶囊中大黄素的检测

    2015中国药典检测方案有奖问答03.28(已完结)——一捻金胶囊中大黄素的检测

    问题:一捻金胶囊中大黄素的检测使用了哪几款迪马液相色谱柱?答案:Platisil ODS和Diamonsil C18、Diamonsil C18(2)、Leapsil C18四款色谱柱【活动奖励】获奖名单:翠湖园(注册ID:hhx050)梧桐(注册ID:mengzhou)sixingxing(注册ID:v2889187) 幸运奖(2钻石币):抽奖软件,当天随机抽取3个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午3:00),每人奖励2个钻石币http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603281557_588451_1610895_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603281557_588452_1610895_3.png积分奖励:所有回答正确的版友奖励10个积分(幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================一捻金胶囊中大黄素的检测 样品制备制备方法1. 对照品:取芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品、大黄素甲醚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每1 mL中含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚各16 μg、含大黄素甲醚8 μg的混合溶液,摇匀,即得。2. 供试品:取装量差异项下的本品内容物0.8 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液5 mL,置烧瓶中,挥去溶剂,加8%盐酸溶液10 mL,超声处理(功率250 W,频率40 kHz)2分钟,再加三氯甲烷10 mL,加热回流1小时,放冷,置分液漏斗中,用少量三氯甲烷洗涤容器,洗涤并入分液漏斗中,分取三氯甲烷液,酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10 mL,合并三氯甲烷液,减压回收溶剂至干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。分析条件 色谱柱Platisil ODS 250 x 4.6 mm,5 μm (Cat#:99503)流动相甲醇:0.1%磷酸溶液=85:15流速1 mL/min柱温25 ℃检测器UV 254 nm 进样量10 μL 色谱图对照品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667416_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min 峰面积 μV*s 峰高 Μv 理论塔板数* N USP拖尾因子 分离度 1 6.030 656973 89368 12962.121 1.092 -- 2 8.190 488224 48477 13891.077 1.113 8.822 3 11.942 621230 44386 15842.329 1.040 11.411 4 14.592 1048914 66386 18721.167 1.027 6.576 5 20.071 297200 13550 18720.451 1.024 10.813 *药典要求理论板数按大黄素峰计算应不低于4000 供试品 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016032810005120_01_1610895_3.jpg 峰号 保留时间 min [

  • 【极限体验&说出你的故事】Topsil C18柱检测保健食品中大黄素(5月)

    【极限体验&说出你的故事】Topsil C18柱检测保健食品中大黄素(5月)

    大黄素是从大黄的干燥根及根茎提取而得,味苦,具有泻热通肠,凉血解毒,逐瘀通经等功效。2010年药典中大黄中的大黄素就是用HPLC法检测,而大黄素在减肥、降脂、排毒、抗衰老等方面有很大的作用,保健食品也开始加入大黄素,下面我就简单说说说。1 仪器与试剂仪器:Waters2695型高效液相色谱仪,配2996型二极管检测器,,大黄素对照品(由中国药品生物制品检定所提供),乙腈(色谱纯),乙醚、甲醇、磷酸、硫酸、无水硫酸钠均为分析纯,二次蒸馏水。2 色谱条件 色谱柱:Topsil C18柱; 流动相:A泵乙腈,B泵0.1%磷酸水溶液(A:B=60:40); 流速:1.0mL/min; 柱温:室温; 检测波长:288nm; 进样量:20μL。3 标准 称取10mg对照品于50mL容量瓶中,用甲醇稀释溶解定容,再分取一定体积于50mL容量瓶中,用甲醇稀释溶解定容,分别配制成含大黄素4、20、40、80、100μg/mL的标准使用液,上机测定。4 样品预处理4.1 液体样品 量取一定体积样品,加入2.5mol·L-1硫酸20mL,置沸水浴上加热回流30分钟,放冷,用乙醚提取5次,每次5mL,合并乙醚液,用水洗至中性,过无水硫酸钠后旋转蒸发挥至近干,再用氮气吹干,残渣加甲醇适量溶解,移至50mL容量瓶中,加甲醇稀释于刻度。经0.45μm滤膜过滤,作为上机待测液。4.2 固体样品称取1g置索氏提取器中,加甲醇50mL,置于80℃水浴上加热回流至无色,提取液置水浴上蒸干,蒸干的残渣用2.5mol·L-1硫酸20ml溶解,按2.4.1处理。测试结果见下图,为了方便大家看拖尾因子和理论塔板数,特意把数字放大,供参考:图1 标准色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105171335_294598_1608710_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105171335_294599_1608710_3.jpg图2 样品色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105171336_294600_1608710_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105171336_294601_1608710_3.jpg

  • 【金秋计划】芦荟大黄素改善结肠炎的直接靶点及相关机制

    [size=14px] [/size] [size=14px]黏膜愈合是炎症性肠病(IBD)患者长期缓解和降低手术风险的重要预后指标,未愈合的黏膜会诱发持续性炎症。肠上皮细胞群的适当分化在损伤后黏膜再生中起着重要作用。表达SOX9的标记保留细胞(LRC)已被确定为通过补充LGR5肠道干细胞(ISC)促进上皮修复。另一方面,LRC也被认为是肠内分泌细胞(EEC)的前体细胞,可加剧IBD中的黏膜损伤。因此,干预 LRC-EEC分化轴理论上有利于IBD的黏膜愈合。[/size] [size=14px]大黄是多年生草本植物,自公元前三千年以来在中国一直被用作泻药。大黄的主要化学成分包括蒽醌、蒽酮、蒽烯等。前期作者使用硫酸葡聚糖钠盐(DSS)诱导的IBD模型筛选大黄中的主要成分,发现芦荟大黄素显著缓解结肠炎。芦荟大黄素(1,8-二羟基-3-羟甲基蒽醌)是天然蒽醌衍生物之一,据报道具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌和保肝药理作用,但其在缓解结肠炎上的具体作用机制与直接靶点尚不清楚。[/size] [size=14px]2024年5月31日,复旦大学药学院沈晓燕、陈道峰团队在ASPB(IF=14.4)发表题为“Aloe emodin promotes mucosal healing by modifying the differentiation fate of enteroendocrine cells via regulating cellular free fatty acid sensitivity”的文章,发现芦荟大黄素可直接拮抗游离脂肪酸受体1(FFAR1)的激活,并阻断AKT介导的FOXO1磷酸化和FOXO1的核输出。然后,FOXO1的核输入相对增加导致SOX9高表达,从而抑制LRC向EEC的过度分化,并保留了更多的SOX9 LRCs,促进结肠炎的黏膜愈合和上皮重建。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、筛选大黄中的活性化合物治疗小鼠结肠炎[/size] [size=14px]根据大黄中检测到的成分含量,作者选择五种游离蒽醌类(emodin、aloe emodin、chrysophanol、rhein和physcione)、四种二苯乙烯类化合物(piceatannol、rhapontigenin、desoxyrhapontigenin、rhaponticin),以及sennoside A(大黄中最有效的泻药),采用DSS诱导的结肠炎开展基于药效的筛选,发现芦荟大黄素等部分化合物可有效抑制结肠炎小鼠体重减轻,缓解结肠缩短,抑制促炎细胞因子表达,特别是在芦荟大黄素组中观察到炎症细胞因子最显著的减少。作者结合体重、结肠长度和炎性细胞因子表达,选择了芦荟大黄素进行进一步研究。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、芦荟大黄素改善小鼠结肠炎模型的炎症反应[/size] [size=14px]多剂量组口服芦荟大黄素的药效学实验表明,在小鼠模型中DSS诱导的结肠炎发作后,芦荟大黄素治疗促进体重恢复,缓解结肠缩短,改善肠道屏障完整性,缓解炎症细胞浸润和隐窝结构丧失。此外,芦荟大黄素改善血清和组织中促炎细胞因子水平的升高。这些结果表明芦荟大黄素对DSS模型具有剂量依赖性治疗效果,且芦荟大黄素优于5-氨基水杨酸(5-ASA)。此外,作者还评估了芦荟大黄素在TNBS诱导的结肠炎模型中的药效学,同样发现芦荟大黄素在TNSB模型中也表现剂量依赖性缓解。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、芦荟大黄素干扰前体细胞向早期EEC的分化[/size] [size=14px]作者取芦荟大黄素处理组和对照组的肠道组织开展RNA-seq检测,GSEA分析显示与芦荟大黄素组相比,对照组的胰腺分泌、内分泌和其他因子调节的钙重吸收和胰岛素分泌基因集富集,表明芦荟大黄素在体内下调肠道分泌细胞相关功能。对选定损伤区域的免疫荧光染色发现芦荟大黄素对EECs(CHGA)数量有显著抑制,而对吸收细胞(CAII)、杯状细胞(MUC2)和簇(COX1)细胞数量没有影响,支持GSEA分析的发现。通过检测EEC转录调节因子在不同阶段的表达,发现芦荟大黄素可能从早期就抑制EEC成熟。此外,CHGA染色和结肠类器官的5-HT水平表明芦荟大黄素抑制了上皮细胞谱系向肠内分泌细胞的分化。此外,芦荟大黄素在所有时期都抑制了EECs标记物的表达。这些数据表明,芦荟大黄素会干扰前体细胞向早期EEC的分化。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、SOX9介导的LRC分化阻滞是芦荟大黄素促进黏膜修复所必需的[/size] [size=14px]为了明确芦荟大黄素如何影响上皮细胞分化,作者通过免疫磁珠分选获得小鼠纯化的结肠上皮细胞,测定ISCs分化出的不同上皮细胞的标记基因表达,发现Sox9表达在结肠炎中显著降低,并通过芦荟大黄素治疗得以挽救,而且芦荟大黄素还上调了分选上皮细胞中的SOX9蛋白水平,下调了CHGA蛋白水平。免疫荧光染色显示芦荟大黄素上调损伤区域SOX9细胞的数量,且SOX9细胞数量与CHGA细胞数量均呈显著负相关。高SOX9表达是LRC的特征之一,隐窝纵切片的SOX9染色表明,芦荟大黄素增加了SOX9细胞群。使用激光捕获显微切割分离富含SOX9细胞的区域表明,与SOX9-区域相比,SOX9+区域的转录谱接近 LRC。这些数据表明由芦荟大黄素引起的增加的SOX9细胞是LRC。来自培养的小鼠结肠类器官的数据也表明,芦荟大黄素上调了SOX9 LRC的数量和Sox9的表达。作者还分析了活动性克罗恩病患者的转录组谱发现与非发炎区域相比,发炎区域活检样本中的SOX9 表达显著降低, NEUROG3表达显著增加,临床样本染色还显示,随着炎症的增加,克罗恩病患者结肠隐窝中的SOX9 LRCs显著减少,而NEUROG3 EECs显著增加。先前的单细胞测序数据结果显示,发炎区域的EEC数量高于健康对照组和非发炎区域,而发炎区域的LRC数量低于非发炎区域。此外,SOX9在非发炎区域的EEC中的表达显著高于发炎区域。这些数据表明炎症中SOX9表达水平下调可能会导致LRC向EEC过度分化的趋势。作者采用TNF-α处理类器官以模拟结肠炎症并观察类器官的凋亡,发现芦荟大黄素显著抑制TNF-α诱导的类器官凋亡。此外,芦荟大黄素部分逆转了TNF-α诱导的Sox9表达降低和Neurog3表达增加,而所有芦荟大黄素诱导的作用都被SOX9-CRISPR敲除和JQ-1(作为表观遗传抑制剂可下调SOX9转录)阻断。这些数据证实SOX9介导的LRC分化阻滞是芦荟大黄素促进黏膜修复所必需的。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、FOXO1 是芦荟大黄素上调 SOX9 表达的关键转录因子[/size] [size=14px]作者进一步检测了芦荟大黄素诱导的SOX9表达上调的可能信号通路。使用RcisTarget包鉴定了芦荟大黄素和载体处理的小鼠结肠之间DEGs中富集的转录因子(TF)结合基序,结合JASPAR TFBS和ReMap ChIP-seq数据库进一步鉴定了可能与 SOX9 基因启动子上游 2000 bp序列结合的TF,结合三种分析的预测,芦荟大黄素可能调节21个TF,最终上调 SOX9 表达,进一步发现,在CD环境中,有6个TFs与SOX9表达显著相关,结合备选的TF可能导致SOX9的上调和NEUROG3的下调,确定FOXO1 是最有可能通过芦荟大黄素调节导致SOX9上调的 TF。FOXO1抑制剂(AS1842856)阻断芦荟大黄素对SOX9和NEUROG3表达的调节证明了这一点。使用Jaspar数据库预测表明FOXO1可以与SOX9上游的多个序列结合,DNA pulldown和CHIP-q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]实验均表明FOXO1能够与FOXO1上游的预测序列结合,并可以通过芦荟大黄素增强。总的来说,FOXO1确定为芦荟大黄素上调 SOX9 表达的关键转录因子。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、芦荟大黄素抑制 FOXO1 磷酸化促进其核易位[/size] [size=14px]FOXO1活性与其表达丰度、翻译后修饰(主要包括磷酸化和乙酰化)、核细胞质穿梭和亚细胞定位有关。作者通过蛋白质印迹和免疫荧光染色显示芦荟大黄素上调了FOXO1的核易位,然而,芦荟大黄素不影响FOXO1的蛋白质和mRNA丰度。进一步的结果表明,蛋白磷酸酶抑制剂而不是组蛋白脱乙酰酶抑制剂或sirtuin抑制剂阻断了芦荟大黄素对SOX9表达的上调,这表明芦荟大黄素通过影响磷酸化修饰而不是乙酰化来上调SOX9表达。AKT、ERK1/2和CK1α诱导 FOXO1 的磷酸化和核输出。作者发现芦荟大黄素通过影响AKT活性上调SOX9表达。AKT 在三个不同的位点(Thr24、Ser256、Ser319)上直接磷酸化 FOXO1,导致其通过核输出进行转录失活,作者发现芦荟大黄素剂量依赖性地降低AKT诱导的FOXO1磷酸化(Ser256)。AKT 磷酸化的FOXO1与14-3-3伴侣蛋白结合,阻断FOXO1的核易位信号,免疫荧光图像和免疫共沉淀显示芦荟大黄素削弱了FOXO1和14-3-3σ的相互作用。此外,FOXO1-CRISPR ko Caco-2细胞上FOXO1标志的过表达挽救了芦荟大黄素诱导的SOX9高表达。总之,数据表明芦荟大黄素降低了AKT诱导的FOXO1磷酸化,并促进了FOXO1进入细胞核以上调SOX9转录。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、芦荟大黄素靶向FFAR1抑制Gβγ/AKT/p-FOXO1通路[/size] [size=14px]根据SuperPred网站结果,结合SYBYL-X软件对接评分(5.0),作者获得了5个高可能性的芦荟大黄素靶点。相关性分析表明只有游离脂肪酸受体1(FFAR1)与SOX9/NEUROG3平衡显著相关。分子对接显示芦荟大黄素被包埋在二聚体之间的残基VAL1094、ASP1092、ARG1095和THR1155周围的口袋中。DARTS和CETSA结果一致地表明芦荟大黄素与FFAR1的结合。亚油酸是FFAR的内源性配体,这可以解释为什么芦荟大黄素会导致KEGG富集的亚油酸途径改变。作者使用了亚油酸和TAK-875(FFAR1的选择性激动剂)确认芦荟大黄素对FFAR1的影响,RT-q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]和Western blot数据显示亚油酸和TAK-875对SOX9/NEUROG3表达水平和磷酸化(Ser256)以及FOXO1的核易位具有与芦荟大黄素相反的作用。体内实验同样表明,TAK-875消除了芦荟大黄素对结肠炎的缓解作用,并逆转了芦荟大黄素对上皮细胞进行分选时Sox9/Neurog3的调节。此外,TAK875阻断芦荟大黄素诱导的p-AKT(Thr308)下调,表明FFAR1通过p-AKT(Thr308)转导信号至FOXO1。据报道,Gα偶联受体激活后释放的Gβγ亚基直接与PI3K相互作用以激活 PI3Kγ/p-AKT(Thr308)信号通路,作者发现FFAR1驱动的SOX9/NEUROG3轴主要由Gβγ调控。总之,FFAR1是芦荟大黄素的靶标,并且激活的FFAR1通过Gβ2γ3/AKT/p-FOXO1信号通路下调SOX9表达,该通路可被芦荟大黄素阻断。[/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]该研究发现来自传统药用植物大黄的活性成分—芦荟大黄素可直接拮抗游离脂肪酸受体1(FFAR1)的激活,并阻断AKT介导的FOXO1磷酸化和FOXO1的核输出,导致SOX9高表达,从而抑制LRC向EEC的过度分化,并保留了更多的SOX9 LRCs,从而促进黏膜愈合,促进上皮重建。[/size]

  • 药物分析核黄素磷酸钠,用核黄素对照品可否?

    样品为复方维生素,其中一项是核黄素磷酸钠,没找到核黄素磷酸钠的对照品,故用的核黄素对照品样品制备:先用水溶,然后用流动相稀释,流动相弱酸性做出的结果比标示量低了很多啊用核黄素对照品代替核黄素磷酸钠对照品,请问结果可信吗?

  • 酚酞、大黄素过滤膜问题

    《SN/T 3866-2014 出口保健食品中酚酞和大黄素的测定 液相色谱-质谱/质谱法》这个标准中要求过0.22微米孔径的有机相滤膜,可是过完滤膜后损失很大,换成0.45微米滤膜后还是损失很大,100ppb的标准溶液过完滤膜后就剩4ppb了。这个问题要怎么解决?

  • 溶解大黄素

    亲们,有没有知道怎么不改变性状含量的情况下溶解大黄素?谢谢[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em31.gif[/img] 我们试了二甲基亚砜能溶解,但是加水就会析出

  • 六味安消胶囊中大黄素与大黄酚及杂质的分离——PFP、ADME、CORE PFP、CORE C18

    六味安消胶囊中大黄素与大黄酚及杂质的分离——PFP、ADME、CORE PFP、CORE C18

    [align=center][b]六味安消胶囊中大黄素与大黄酚及杂质的分离[/b][/align]按照客户提供方法,对客户提供的样品进行分析,要求对大黄素与其相邻杂质峰得到基线分离。实验室分别尝试使用键合五氟苯基的全多孔性色谱柱CAPCELL PAK PFP及键合金刚烷基的高极性色谱柱CAPCELL PAK ADME进行分析,结果如图1、图2。(*由于客户提供的对照溶液为大黄素与大黄酚的混合溶液,因此无法判断大黄素与大黄酚的出峰顺序,给出峰1与峰2的光谱图以辅助进行判断。)首先,CAPCELL PAK PFP色谱柱对总大黄素与总大黄酚的混合样品进行分析所得结果如图1及表1,杂质峰位于峰1之前,二者在18min内可得到良好分离,分离度为4.38。[img=,690,566]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121116_01_2222981_3.png[/img][img=,602,230]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121116_02_2222981_3.png[/img]其次,CAPCELL PAK ADME色谱柱所得结果如图2及表2,杂质出峰位置在峰1与峰2之间,与相邻的峰1分离度为1.66,在12min内可得到良好分离。[img=,648,598]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121116_03_2222981_3.png[/img][img=,584,227]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121116_04_2222981_3.png[/img][img=,482,172]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121133_01_2222981_3.png[/img]接下来,为缩短分析时间,继续尝试使用CAPCELL CORE PFP、CAPCELL CORE C18进行分析,结果如图3、4。如图3、表3所示,使用CAPCELL CORE PFP色谱柱对总大黄素与总大黄酚混合样品的进行分析,杂质出峰位置在峰1与峰2之间,杂质与峰1分离度为3.22,与峰2分离度为2.01,5min内杂质与峰1、峰2均可得到基线分离。[img=,567,352]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121123_03_2222981_3.png[/img][img=,580,229]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121123_04_2222981_3.png[/img][img=,478,174]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121124_01_2222981_3.png[/img]如图4、表4所示,使用CAPCELL CORE C18色谱柱进行分析时,杂质出峰位置在峰1与峰2之间,杂质与其相邻的峰1分离度为1.75,二者在10min内可得到良好分离。[img=,563,333]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121125_02_2222981_3.png[/img][img=,579,259]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121125_03_2222981_3.png[/img][img=,477,172]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707121130_01_2222981_3.png[/img]

  • 61.8 高效液相色谱法测定通经甘露丸中大黄酸、大黄素及大黄酚含量

    61.8 高效液相色谱法测定通经甘露丸中大黄酸、大黄素及大黄酚含量

    作者:吴袭;(湖南省怀化市第一人民医院;)摘要:目的建立测定通经甘露丸中大黄素、大黄酚及大黄酸含量的高效液相色谱法。方法采用DiamonsilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15),流速1.0mL/min,检测波长254nm。结果大黄酸进样量在0.0924~0.2464μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为98.45%,RSD为0.82%(n=6);大黄素进样量在0.0576~0.1536μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.76%,RSD为1.15%(n=6);大黄酚进样量在0.1397~0.3725μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为99.03%,RSD为0.91%(n=6)。结论高效液相色谱法操作简便,结果准确,重现性好,适用于通经甘露丸中大黄酸、大黄素及大黄酚的含量测定。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271018_386291_1606903_3.jpg

  • 36.5 高效液相色谱法测定上清丸中大黄素和大黄酚的含量

    36.5 高效液相色谱法测定上清丸中大黄素和大黄酚的含量

    【作者中文名】肖燕; 刘建锋;【作者英文名】XIAO Yan; LIU Jian-feng(1.Huaihua Institute for Drug Control; Huaihua Hunan 418000; 2.School of Pharmaceutical Sciences; Central South University; Changsha 410013);【作者单位】怀化市药品检验所; 中南大学药学院;【摘要】目的建立上清丸中大黄素和大黄酚的含量测定方法。方法色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),流速:1.0 mL.min-1,检测波长:254 nm。结果大黄素进样量在0.0576~0.153 6μg线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.49%,RSD为1.75%(n=6);大黄酚进样量在0.1397~0.3725μg线性关系良好,r=0.9998,平均加样回收率为98.86%,RSD为1.24%(n=6)。结论该方法操作简便,结果准确,重现性好,适用于上清丸中大黄素和大黄酚的含量测定。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208061211_381810_2379123_3.jpg

  • 【金秋计划】大黄素防治动脉粥样硬化作用机制的研究进展

    心脑血管疾病是全球发病率、死亡率最高的疾病,近年来以动脉粥样硬化为代表的心脑血管疾病的发病率持续升高,严重威胁人们的身体健康,给家庭和社会带来沉重的负担,已成为一个重要的公共卫生问题[1]。心血管疾病已成为威胁人类健康的最主要疾病,其中动脉粥样硬化是心血管疾病的主要原因和病理基础。动脉粥样硬化常累及大动脉、中动脉,临床主要特征为慢性管腔狭窄,是冠心病、脑梗死、外周血管疾病等心脑血管疾病的主要病理基础,可影响心脏、大脑、肾脏、眼睛、外周血管的动脉系统[2]。大黄素从大黄、虎杖的根和树皮中获得的蒽醌衍生物,是橙色长针状晶体,易溶于醇和碱性溶液,几乎不溶于水[3]。大黄素具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制、镇痛、器官保护等多种药理作用,临床可用于痢疾、肺炎、脑炎、中耳炎、小儿麻痹、肝炎、肿瘤、心脑血管疾病等多种疾病的治疗[4]。大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。本文综述了大黄素防治动脉粥样硬化的作用机制研究进展,为大黄素防治动脉粥样硬化的临床应用提供参考。 1 降低炎症反应 1.1 阻止核因子-κB(NF-κB)激活 NF-κB是动脉粥样硬化的重要信号通路,可介导主动脉平滑肌细胞中促炎细胞因子和生长/迁移因子表达,促进主动脉平滑肌细胞的增殖和迁移,促进动脉粥样硬化的形成[5]。Meng等[6]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞,结果0.1~10 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对主动脉平滑肌细胞的促增殖作用,阻止主动脉平滑肌细胞迁移和基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,降低白细胞介素(IL)-6、IL-1β、血管细胞黏附分子-1、细胞间黏附分子-1、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)等炎症因子的表达,抑制TNF-α引起的主动脉平滑肌细胞中NF-κB的活化,结果证实大黄素可通过阻止NF-κB激活以发挥抗炎作用,降低动脉粥样硬化的病情。赵剑锋等[7]使用高脂饲料饲养大鼠建立动脉粥样硬化模型,结果600、900、1 200 mg/kg大黄素能呈浓度相关性抑制大鼠体质量增加,继而降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)的水平,显著降低超敏C反应蛋白(hs-CRP)、纤维蛋白原(FIB)的水平,表明大黄素可通过抗炎发挥抗动脉粥样硬化的作用。吴迪等[8]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞,结果50 μmol/L大黄素能抑制血管平滑肌细胞重叠和变性,抑制CRP、一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α基因和蛋白的表达,表明大黄素能通过抑制多种炎症因子的表达发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.2 调节γ-干扰素(IFN-γ)、MCP-1的分泌 IFN-γ属于II型干扰素,能抑制LDL-C的表达,阻止泡沫细胞的形成,在动脉粥样硬化进程中发挥双向调节作用[9]。MCP-1能促使单核细胞聚集,促进泡沫细胞形成,加速动脉粥样硬化的形成,介导多种促炎因子的分泌和血管内皮的增殖[10]。夏丽等[11]使用大黄素干预高脂饲料诱导的载脂蛋白E缺陷动脉粥样硬化小鼠,结果显示,10、20、40 mg/kg大黄素能降低小鼠LDL-C、TC、三酰甘油(TG)的水平,提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平,上调IFN-γ基因的表达,下调MCP-1基因的表达,降低血清IFN-γ、MCP-1水平,表明大黄素可通过调节IFN-γ、MCP-1的分泌减轻炎症反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。 1.3 抑制同型半胱氨酸(Hcy)的表达 血浆Hcy水平升高是动脉粥样硬化的独立危险因素,能够通过活性氧(ROS)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路刺激血管平滑肌细胞中CRP的表达,加剧血管壁的炎症过程,从而促进动脉粥样硬化进程[12]。Pang等[13]使用大黄素干预大鼠血管平滑肌细胞,发现0.1、1、10、100 μmol/L大黄素能呈浓度相关性降低血管平滑肌细胞的活力,有效降低Hcy引起血管平滑肌细胞的CRP的表达,抑制细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和p38磷酸化进程,以浓度相关性方式拮抗Hcy对过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达的抑制作用,还有助于降低大鼠血清Hcy和CRP水平,表明大黄素通过抑制Hcy表达以阻止ERK1/2/p38信号通路激活和促进PPARγ表达,发挥抗动脉粥样硬化作用。 2 降低氧化应激反应 缺氧、氧化应激可通过磷脂酰肌醇3-激酶途径激活磷脂酶C,导致神经酰胺的形成,神经酰胺可调节细胞凋亡和炎症,有助于动脉粥样硬化或血栓性疾病的发展[14]。Hei等[15]使用1%胆固醇和5%脂肪的饮食喂食家兔建立动脉粥样硬化模型,结果10 mg/kg大黄素能显著降低兔血清丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(OX-LOL)的水平,提高血清超氧化物歧化酶(SOD)的水平,显著减轻家兔动脉粥样硬化程度,降低主动脉的神经酰胺浓度、鞘磷脂酶活性和凋亡泡沫细胞指数,结果证实大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[16]使用大黄素治疗高脂饲料喂养的动脉粥样硬化大鼠,结果发现20、40、80 mg/kg大黄素有助于提高大鼠的体质量,呈剂量相关性降低MDA的水平,升高SOD、总抗氧化能力(T-AOC)的水平,减轻平滑肌细胞增生和向内膜迁移,提示大黄素通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。张翔等[17]使用大黄素治疗高脂饲料建立的动脉粥样硬化大鼠,结果20、40、80 mg/kg大黄素能浓度相关性降低LDL、TG、TC的水平,提高HDL的水平,上调SOD、T-AOC的水平,降低MDA的水平,减轻平滑肌增生、内膜迁移、内膜水肿等动脉粥样硬化改变,提示大黄素可通过抗氧化应激反应发挥抗动脉粥样硬化的作用。 3 调节脂质代谢 3.1 消耗胆固醇以破坏脂筏 脂筏位于细胞膜和内膜中,是含有高浓度胆固醇和鞘糖脂的微结构域,参与多种信号通路的活化,可加剧炎症反应,促进动脉粥样硬化的发展,GM1-神经节苷脂是脂筏的标志物,脂质筏的破坏将导致GM1-神经节苷脂从脂筏重新分布到细胞膜非脂质筏结构域[18]。胆固醇是脂筏中主要成分,胆固醇富集使脂筏比细胞膜周围富含磷脂的非筏相更紧密,消耗脂筏中的胆固醇可破坏脂筏[19]。Meng等[20]使用大黄素干预原代人脐静脉内皮细胞,结果1~50 μmol/L大黄素能显著降低脂多糖引起的IL-1β、IL-6、IL-8、趋化因子配体2、MCP-1等多种炎症因子的分泌,阻断核因子κB抑制因子α(IκBα)的降解和NF-κB活化,大黄素将脂筏中的GM1-神经节苷脂分散到膜或内膜的非脂质筏结构域,证实大黄素通过消耗胆固醇来破坏脂筏,阻止脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞中NF-κB活化,发挥抗炎作用,以减轻动脉粥样硬化进程。 3.2 激活PPARγ信号通路 PPARγ在巨噬细胞中大量表达,尤其是动脉粥样硬化内的脂质泡沫细胞,PPARγ通过转录诱导ox-LDL参与动脉粥样硬化进程,还能促进ATP结合盒转运体(ABC)A1、ABCG1的表达,通过肝X受体α(LXRα)介导巨噬细胞中胆固醇的外排,在动脉粥样硬化的炎症反应、胆固醇稳态中发挥关键作用[21]。Fu等[22]使用大黄素干预THP-1单核巨噬细胞,结果1、5、10 μmol/L大黄素能促进细胞中PPAR-γ蛋白和基因的表达,以浓度相关性促进载脂蛋白A1诱导的巨噬细胞内胆固醇外排,还能促进THP-1细胞中LXR-α(PPARγ靶点)的蛋白和基因的表达,促进ABCA1、ABCG1的表达,证实大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促进胆固醇排除,发挥抗动脉粥样硬化的作用。Zhou等[23]使用脂肪喂养载脂蛋白E建立小鼠动脉粥样硬化斑块模型,结果发现10 mg/kg大黄素能显著减轻斑块中脂质核心面积和胶原蛋白数量,抑制斑块MMP-9、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-GSF)的表达,促进PPARγ的表达,提示大黄素可通过激活PPARγ信号通路以促使动脉粥样硬化斑块稳定有关。 4 阻止血管平滑肌增殖 动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖是动脉粥样硬化斑块形成的关键步骤,诱导动脉内膜血管平滑肌细胞凋亡或细胞周期停滞,还会损害血管内皮细胞生理机能,导致内膜增生[24]。Xu等[25]使用大黄素干预动脉内膜血管平滑肌细胞,发现0.05~5 μmol/L大黄素可呈浓度相关性抑制动脉内膜血管平滑肌细胞的增殖,显著降低了细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、Ki67、E2F-1基因表达,显著降低线粒体活性,还能显著减轻大鼠损伤动脉的内皮化进程,证实大黄素可通过阻止血管平滑肌增殖以抗动脉粥样硬化。 活化的半胱天冬酶(Caspase)能促使Bid断裂,诱导细胞色素C从线粒体释放,激活线粒体途径,继而激活下游Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,导致多种DNA链断裂,导致细胞凋亡,以阻止血管平滑肌增殖[26]。Heo等[27]使用大黄素干预大鼠主动脉平滑肌细胞,发现0.1、1、10 mmol/L大黄素能浓度相关性抑制血小板源生长因子诱导的主动脉平滑肌细胞增殖,抑制IκBα的磷酸化,促进主动脉平滑肌细胞凋亡,促进Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达,还能调节B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达,促使MMP紊乱,证实大黄素通过Caspase途径促进线粒体依赖性细胞凋亡,进而阻止血管平滑肌细胞增殖,降低动脉粥样硬化发生。 5 保护血管内皮功能 内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/一氧化氮(NO)系统与动脉粥样硬化密切相关,前者活性降低可促进内皮细胞增生,抑制NO的合成,后者能强效促使血管舒张,阻止血管平滑肌增殖和血栓形成[28]。吴健虹等[29]使用大黄素治疗膳食诱导的高脂血症大鼠,10 mg/kg大黄素能显著降低LDL-C、TG、TC的水平,降低肝脏脂肪变性程度,显著提高胸主动脉的总NO的水平和eNOS基因和蛋白的水平,证实大黄素能上调eNOS/NO系统以保护血管内皮细胞,减轻动脉粥样硬化的风险。 6 稳定动脉粥样硬化斑块 MMP能特异性降解细胞外基质中多种胶原蛋白的表达,破坏动脉粥样硬化斑块纤维帽结构,导致血栓形成和斑块破裂[30]。白文武等[31]使用大黄素治疗高脂饮食建立的载脂蛋白E缺陷小鼠模型,结果60 mg/kg大黄素能显著抑制血管内膜增厚和平滑肌增生,抑制粥样斑块的形成,下调MMP-2、MMP-9的表达,提高组织抑制剂1(TIMP-1)的表达,证实大黄素可通过调节MMP的分泌以稳定动脉粥样硬化斑块,发挥抗动脉粥样硬化的作用。 7 结语 大黄素可通过降低炎症反应、降低氧化应激反应、调节脂质代谢、阻止血管平滑肌增殖、保护血管内皮功能、稳定动脉粥样硬化斑块等多种途径对动脉粥样硬化发挥防治作用。由于大黄素用于人体的机制尚不明确,目前大黄素多用于动物研究,尚未用于临床试验,因此,需要进一步的研究和更多的试验来验证大黄素对人动脉粥样硬化的益处。大黄素的肝毒性、肾毒性和口服生物利用度差的问题应该在未来的研究中得到解决。总之,大黄素防治动脉粥样硬化具有良好的应用前景,可能在未来用于临床实践。

  • 42.2 不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究

    42.2 不同季节虎杖根茎与茎叶中大黄素含量变化研究

    作者:胡冠宇;夏醒醒;尹政;陈勤;(安徽大学生命科学学院;安徽省中药研究与开发重点实验室;)摘要:目的通过测定药用植物虎杖在不同季节时其不同生长部位中的有效成分大黄素含量及其变化规律,旨在为虎杖的最佳采收时间提供依据。方法采用高效液相色谱法,Diamonsil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(80∶20)为流动相;检测波长:254nm;流速:1.0mL/min;柱温:27℃;进样量:20μL。结果通过测定不同季节虎杖的茎叶与根中的大黄素含量,发现根中大黄素含量最高,且大黄素含量在8月最高。结论虎杖在生长发育过程中,大黄素含量变化是有规律的,可根据其根中的大黄素含量确定最佳的采收时间。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131105_383412_1606903_3.jpg

  • 4.5 HPLC法测定肾衰宁丸中大黄素和大黄酚的含量

    作者:http://d.g.wanfangdata.com.cn/Images/head_pic.gif李绍民 http://d.g.wanfangdata.com.cn/Images/head_pic.gif王艳秋 作者单位:沈阳市中医药学校,110300 摘要: 目的 建立肾衰宁丸大黄素和大黄酚的含量(以二者含量之和计)测定方法.方法 高效液相色谱法.色谱柱为Diamonisil(TM钻石)C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15);检测波长为254nm;柱温:25℃;流速:1ml/min.结果 大黄素进样量在 0.02652μg-0.1326μg范围内线性关系良好(r=0.9997),加样回收率为96.9%,RSD为1.80%;大黄酚进样量在 0.04004μg-0.2002μg范围内线性关系良好(r=0.9999),加样回收率为96.7%,RSD为1.76%.结论 本法操作简便,分离效果良好.

  • 液质联用测大黄素

    [color=#444444]用安捷伦[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]测大黄素,标曲0.3-300 ng/ml,发现残留严重,比较了洗针液,发现加碱,加酸,加乙酸铵缓冲液效果都不好,最后选择了水-甲醇-异丙醇(1:2:1),因为还要兼顾其他几个极性比较大的化合物,洗针时间提高到10秒,走样前冲洗了柱子,超声清洗了针座,连续冲洗进样针3次,每次一分钟。开始走样时在标曲之前先走了十针纯甲醇,结果还是有很高的响应,16000左右,到了标曲最低点,响应又降到1000以下,但响应完全没有线性,相同浓度质控的响应也差很多。请问这个可能是什么情况?按理说我在走样之前已经清洗了柱子,针和针座,为什么还是有这么高的残留?如何选择洗针液?希望有经验的老师同学指点迷津,非常感谢。[/color][color=#444444][img]http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2018/0621/bw256h2437383_1529557070_831.png[/img][/color]

  • 25.5 补阳还五胶囊中大黄的定性定量测定

    25.5 补阳还五胶囊中大黄的定性定量测定

    【作者】:卓菊【摘要】: 目的 :建立补阳还五胶囊的定性定量分析方法。方法 :采用薄层色谱法对补阳还五胶囊中大黄进行鉴别 ;HPLC法对大黄中有效成分大黄素进行含量测定 ,色谱柱 :DiamonsilODS柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm ) ;流动相 :甲醇— 0 .1%磷酸(90:10 ) ;流速 :1ml/min ;柱温 : 4 0℃ ;检测波长 :2 5 4nm。结果 :补阳还五胶囊与大黄酸对照药品在TLC色谱中相同的位置上显橙黄色荧光斑点 ;标准曲线的回归方程为 :Y =1.4 0 30 5× 10 -5- 0 .176 70 ,r =0 .999,样品在 0 .0 2 94~ 0 .14 7μg含量范围内线性关系良好。结论 :定性定量方法简便易行 ,专属性强 ,重现性好 ,可为补阳还五胶囊质量标准提供依据。【作者单位】: 广东化工制药职业技术学院【关键词】: 补阳还五胶囊; 薄层色谱; HP LChttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208011417_381039_1838299_3.jpg

  • 【应用数据库有奖问答11.22(已完结)】麻仁润肠丸中大黄的检测,柱温是?

    【应用数据库有奖问答11.22(已完结)】麻仁润肠丸中大黄的检测,柱温是?

    [b]Q:麻仁润肠丸中大黄的检测,柱温是?A:30 ℃===============================================================【活动内容】1、每个工作日上午10:00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题,版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15:10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖:抽奖软件,当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午15:00),每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color](抽奖人数≤10,抽取3个版友;抽奖人数>10,抽取5个版友);中奖名单:WUYUWUQIU(注册ID:wulin321)dadgoh(注册ID:dadgoh)活到九十 学到一百(注册ID:wangboxzzjs)sixingxing(注册ID:v2889187)莫名其妙(注册ID:moyueqiu)[img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811221504141393_4646_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811221504165503_6326_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励:所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color](幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法:HPLC基质:药品应用编号:103384化合物:大黄素 、大黄酚色谱柱:[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-229.html]Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理:对照品溶液:取大黄素对照品和大黄酚对照品适量,精密称定,加甲醇制成每l mL含大黄素5 μg,大黄酚10 μg的混合溶液,即得。供试品溶液:取重量差异项下的本品,剪碎,混匀,取约1 g,精密称定,加硅藻土1.5 g,研匀,置索氏提取器中,加乙醇适量,加热回流提取至提取液无色,提取液移至50 mL量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,精密量取10 mL,置烧瓶中,回收溶剂至近干,加盐酸-30%乙醇(1:10)混合溶液15 mL,置水浴中加热水解1小时,立即冷却,用三氯甲烷强力振摇提取4次,每次15 mL,合并三氯甲烷液,回收三氯甲烷至干,残渣用甲醇溶解,转移至10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。色谱条件:色谱柱: Diamonsil C18 250*4.6 mm,5 μm (Cat#:99903)流动相: 甲醇:0.1%磷酸溶液=85:15流速: 1.0 mL/min柱温: 30 ℃检测器: 254 nm进样量: 10 μL文章出处:天津应用实验室关键字:麻仁润肠丸、大黄、大黄素 、大黄酚、Diamonsil C18、HPLC、2015药典摘要:Diamonsil C18检测麻仁润肠丸中大黄。图谱:[img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/11/06/1415252793777326.png[/img][img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/11/06/1415252797435739.png[/img]

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    迪马产品应用有奖问答09.14(已完结)——大黄中的有效成分

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    【序号】:2【作者】:张春1王锦姝1王寿宇【题名】:大黄素调控TLR4/NF-κB信号通路对大鼠感染性创面愈合的研究【期刊】:中国临床药理学杂志 . 【年、卷、期、起止页码】: 2024 ,40 (10)【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=cp4X_-KT6XOZcEaaS9yUo92wFnFMc5Zfrhf-bk6fKTb2e-C8ZrSgl4-MuSFvtRWbssRPetLE-yTI-JaVcaj4163uWKuOzUZnnMhF-xEl4mF2PClYtnVdZsk_8MxiCE72mRmbR39gSdsXHnCCpR2BykQSlD6U3KxA1DHVAvNJN4YFTJ7mLQiEBsasxdetQLVa&uniplatform=NZKPT&language=CHS

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