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办证涕灭威砜标准品

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办证涕灭威砜标准品相关的论坛

  • 涕灭威亚砜出两个峰

    为什么是两个峰呢?涕灭威和涕灭威砜都是一个峰啊!请问这是为什么啊,我用的标准品[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/06/201806291111539585_1728_3409641_3.jpeg[/img]

  • HPLC检测涕灭威出峰而LCMSMS不出峰

    最近我们用HPLC检测出一些白菜青菜中含有涕灭威和仲丁威,但是送到其他地方用LCMSMS做却未检出,当时我提供了该涕灭威的农药标准品。能帮我分析一下原因吗?注:他们用的检测方法是GB/T 20769-2008,但我查看标准的农药中发现只有“涕灭威砜”,而没有涕灭威。

  • 【求助】关于涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜

    最近在检测如题3种农药,其中后两种是第一种(涕灭威)的代谢物,很奇怪的是:单独检涕灭威时,加氢峰能够找到,但是3种混合后,涕灭威只能找到加钠峰,不知什么原因,希望大家有知道的能够帮以解答,非常感谢!

  • 甲拌磷、涕灭威、倍硫磷及其砜、亚砜、氟虫腈等如何计算

    限量标准上说的是合计以甲拌磷、涕灭威……计,那么最后数据处理计算时该怎么计算,峰面积加和还是分子量换算?不是很理解,请各位大佬指点。还有根据标准上保留时间及相对离子丰度该如何判定样品是否检出,是否在仪器离群值那里设定后,离群就可以判断其未检出还是需要自己根据实际情况再做判断?

  • 【原创大赛】生姜中涕灭威及其代谢物检测固相萃取方法

    【原创大赛】生姜中涕灭威及其代谢物检测固相萃取方法

    生姜中涕灭威及其代谢物检测固相萃取方法一、实验目的本研究利用固相萃取法作为生姜样品的前处理方法,LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。二、实验目标物三种涕灭威及其代谢物标准品:涕灭威(CSA:116-06-03),涕灭威砜(CSA:1646-88-4),涕灭威亚砜(CSA:1646-87-3)。三、应用范围本方法适用于生姜、大米、花生等样品中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜LC-MS/MS检测及确证。四、参考标准进出口行业标准《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》。五、实验材料Biocomma® NH2 固相萃取柱 3mL/500mg。六、实验方法1、样品提取称取5.0g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加入20mL乙腈,均质2min,振荡提取20min,上清液过无水硫酸钠收集到分液漏斗中,残渣再加入20mL乙腈,重复上述操作一次,合并2次滤液,加入20mL用乙腈饱和的正己烷,振荡10min,静置分层,弃去正己烷层,乙腈层于40℃下旋转蒸发浓缩至干,用2mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)溶解,待净化。2、SPE柱净化(1)活化:加入5mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)活化,弃去流出液。(2)上样:加入待净化液,流速控制在1 mL/min内,收集流出液。(3)洗脱:用5mL甲醇-二氯甲烷(1:99,体积比)洗脱,接收流出液,并重复一次,合并步骤(2)、(3)流出液。(4)浓缩定容:40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干(约0.5 mL)后挥干,用1.0mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,体积比)定容容至1 mL,过0.45μm微孔滤膜,上LC-MS/MS,待测定。3、LC-MS/MS条件色谱柱:Venusil ASB C18(2.1×150mm,5μm,100Å)质谱仪:API 4000A:乙腈溶液;B:0.05%甲酸的水溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160926_555754_3310_3.jpg进样量:5μL柱温:30℃流速:0.3 mL/min离子源:电喷雾(ESI),正离子模式检测方式:多反应监测(MRM)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160927_555755_3310_3.jpg七、实验结果1、生姜基质10μg/kg加标回收结果:三个平行测试样的平均回收率均大于80%,平行样间相对标准偏差均小于5%,符合标准要求。(见表4)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160928_555756_3310_3.jpg2、空白样品中添加涕灭威及其代谢物色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160929_555757_3310_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507160929_555759_3310_3.jpg本研究是逗点生物利用固相萃取法作为生姜样品的前处理方法,以进出口行业标准《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》制定,适用于生姜、大米、花生等样品中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜LC-MS/MS检测及确证。欢迎广大色谱分析者参考。

  • 农残检测中涕灭威亚砜和涕灭威砜分不开

    农残检测中涕灭威亚砜和涕灭威砜分不开

    机子是安捷伦1260,有柱后衍生,流动相使用pickering的OPA和NaOH,柱后衍生的温度条件是100℃,流速是0.3。方法是761.之前来问过梯度洗脱的设置,后来也咨询过工程师调试过梯度,都不行。无轮涕灭威亚砜或者涕灭威砜的单标还是两者的混标,都是同样的出峰时间。想请问一下这种情况是不是就是说明我手上的这两者标液其实是一样东西?这样分不开的峰型跟标液的配制有关系吗?我们是用买1000ug/ml的原液,稀释成10ug/ml的使用储备液,然后再稀释成0.1ug/ml的上机。下图是涕灭威亚砜和涕灭威砜混标:[img=涕灭威亚砜和涕灭威砜混标,767,288]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903201451355883_1543_3355806_3.png!w767x288.jpg[/img]下图红圈圈出来的是涕灭威亚砜:[img=红圈是涕灭威亚砜,699,356]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903201451444632_6002_3355806_3.png!w699x356.jpg[/img]下图红圈圈出来的是涕灭威砜:[img=红圈是涕灭威砜,784,373]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903201451517169_9932_3355806_3.png!w784x373.jpg[/img]

  • 【求助】请问涕灭威、涕灭威亚砜、克百威的特征离子是什么

    【求助】请问涕灭威、涕灭威亚砜、克百威的特征离子是什么

    我用安捷伦的5975[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]做氨基甲酸酯类农药,进的是10ppm的标样,遇到一些问题,请教一下各位大侠(1)我进涕灭威时,用sim扫描,结果出来了几个峰,我确定不了是哪一个~我选的离子是:41、58、86、39、85、87、76、42、55、144。(2)涕灭威亚砜我也选了10个离子,结果一个峰都没有,scan也没峰,选的离子是:86、143、85、41、58、68、55、42、43、87(3)克百威我就选了164 、 149、 122、 131、 123、 121、 91、 39、 58、 165这十个离子,结果有两个峰,不知道克百威是不是有两个峰的(4)以上做的几个药我设的仪器条件都是一样的,都是进的10ppm的浓度,进样量1ul,进样口250°C,柱温70(hold3mim)15度/min——260(hold12mim),不知道这个条件会不会使这些农药分解的。我们实验室条件和水平有限,现在只能用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]做这些药的定性和定量了~请问大侠们我的离子选择和条件设置对不?以下附谱图,第一张是涕灭威的,第二张和第三张分别是涕灭威亚砜的scan和sim的图,第四张是克百威的[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/06/201006021017_221808_1934505_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/06/201006021019_221812_1934505_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/06/201006021019_221813_1934505_3.jpg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/06/201006021019_221814_1934505_3.jpg[/img]还有那个sigal是什么东西来的,有什么意义吗?我看到每个做完都有这个信号出现的,但是不明白是什么东西~请教一下

  • 【转帖】生姜中涕灭威及其代谢产物的HPLC 快速检测法

    摘要:建立了涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜在生姜中残留量的高效液相色谱快速检测方法。样品用乙腈提取,加入PSA 粉去除脂类物质,加入C18 粉去除色素和维生素。采用甲醇、水和乙腈进行梯度洗脱。结果表明:该方法在在0.05~5.0mg/L 范围内,涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜峰面积与其浓度呈现良好的线性关系; 在0.01,0.025 和0.050mg/kg3 个添加水平下,3 种农药回收率为78.33~101.33%,相对标准偏差为4.08~11.46%.该方法灵敏度高,涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜的最低检出限分别为0.005、0.01和0.01 mg/kg。关键词:涕灭威;涕灭威亚砜;涕灭威砜;生姜;高效液相色谱;残留涕灭威是近年来使用较多的一种氨基甲酸酯类农药,主要用于生姜种植过程中螨虫、线虫的防治。纯品为白色结晶,略带硫磺气味,高毒。该药在植物体内先被氧化成涕灭威亚砜,而后被氧化成涕灭威砜,进而水解为无毒物质。涕灭威亚砜和涕灭威砜具有很高的毒性。日本肯定列表对两者在生姜中的限定值均为0.01mg/kg。从1977 年Moye 等第一次采用HPLC 柱后衍生测定氨基甲酸酯类农药以来,这种检测方法的使用越来越普遍。目前,关于生姜中涕灭威及其代谢产物的残留分析方法国内尚未见公开报道。本文采用高效液相色谱法,研究建立了生姜中涕灭威及其代谢产物残留检测方法。该方法用乙腈进行提取,加入C18 粉和PSA 粉去除生姜中的干扰物质。方法简便、快捷。对于掌握涕灭威及其代谢产物在生姜中的残留状况,具有一定的指导意义。1.实验部分1.1 仪器和试剂SHIMADZU LC-20A 高效液相色谱仪(配有荧光检测器和柱后衍生系统);IKA-T25 高速匀浆机;METTLER TOLEDO PL203 电子天平;EYELA(日本)半自动旋转蒸发仪;EYELA(日本)振荡器;高速离心机(上海安亭);超纯水器(密理博)。乙腈(色谱纯,TEDIA);甲醇(色谱纯,TEDIA);C18 粉(SUPELCO);PSA 粉(SUPELCO);NaCL(优级纯);无水硫酸钠(优级纯);NaOH(优级纯);四硼酸钠(基准物质);邻苯二甲醛(OPA);涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜标准品(农业部环境保护科研监测所监制)。1.2 衍生试剂的配置1.2.1 称取1gNaOH,加入500ml 超纯水定容,过0.2um 膜待用。1.2.2 称取0.015g 邻苯二甲醛,加入50ml 甲醇使其完全溶解后,加入0.18gNaOH 和3.34g硼酸,用500ml 超纯水定容后,过0.2um 膜,加入50ulβ-巯基丙1.3 色谱条件色谱柱:FC-ODS 柱(4.6mm×75mm);流动相:甲醇、水和乙腈,采用梯度洗脱(见表1) ;流速:0.5ml/min;柱温箱温度:50℃;荧光检测器:激发波长(340nm),发射波长(445nm);柱后衍生系统流速:0.5ml/min;进样量:2ul。31.4 样品前处理1.4.1 样品的提取准确称取生姜样品20.00g,置于80ml 离心管中,加入40ml 乙腈,匀浆1 分钟后,加入5gNaCL,再次匀浆1 分钟,离心5 分钟后吸取上清液10ml,40℃低温旋蒸近干,残留用4ml 乙腈溶解待用。1.4.2 样品的净化5ml 离心管中依次加入150mgC18 粉,150mgPSA 粉和200mg 无水硫酸钠。将1.4.1 所得溶液转移到上述离心管中,漩涡振荡2 分钟后离心。吸取上清液2ml 于250ml 鸡心瓶中,40℃旋蒸近干,氮气吹干后,用乙腈定容至2ml,过0.45um 膜上机待测。2.结果与讨论2.1 方法的线性关系及检出限配置涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜0.05、0.2、0.5、2.0、5.0mg/L 的5 个不同质量浓度的标准溶液,按照上述色谱条件,测定相应的响应值,并以质量浓度为横坐标,响应值为纵坐标作图,得出涕灭威、涕灭威砜和涕灭威亚砜的线性相关曲线(见表2)。表2 线性方程和相关系数Tab.2 Regression equations and correlation coefficients组分 回归方程 相关系数涕灭威 206.43x+4.291 0.9997涕灭威砜 197.76x+5.588 0.9998涕灭威亚砜 196.68x+1.9689 0.99992.2 方法的回收率和精密度为评价方法的有效性,选用阴性生姜样品为测试对象, 分别添加不同含量水平的的3种农药标准品,漩涡混匀5 分钟,静置60 分钟,使得添加浓度分别为0.01、0.025 和0.05mg/kg。每个添加水平按照上述液相条件平行测定6 次,计算回收率和相对标准偏差(RSD).结果见表3。涕灭威、涕灭威亚砜和涕灭威砜标准色谱图、生姜空白色谱图和添加色谱图分别见图1。表1 梯度洗脱程序Tab.1 The gradient elution programTime/(min) 流(ml/min) 水(%) 甲醇(%)4.00 0.5 86 1410.00 0.5 60 4017.00 0.5 55 4523.00 0.5 40 6024.00 0.5 40 6024.01 0.5 86 1436.00 0.5 86 144表3 回收率试验(n=6)Tab.3 Recoveries of Aldicarb ,Aldicarb Sulfone and Aldicarb Sulfoxide组分 添加量/(mg.kg-1) 平均回收率/% RSD/%0.01 97.33 5.140.025 89.00 8.26涕灭威0.05 79.67 6.230.01 101.33 4.080.025 97.00 11.42涕灭威砜0.05 98.67 9.480.01 97.67 8.130.025 95.83 10.51涕灭威亚砜0.05 78.33 11.46图1 液相色谱图a 标准样品(0.05mg/L);b 空白样品;(c)加标样品(加标量为0.01mg/kg)1-涕灭威砜;2-涕灭威亚砜;3-涕灭威Fig.1 Liquid chromatogram of standarda and samples0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min012345mVDetector A:Ex:340nm,Em:445nm1230.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min-2.0-1.5-1.0-0.50.00.51.01.52.0mVDetector A:Ex:340nm,Em:445nmab0.0 5.0 10.0 15.0 20.0 25.0 30.0 min-1.5-1.0-0.50.00.51.01.52.0mVDetector A:Ex:340nm,Em:445nmc12 353.结论本方法对生姜中的涕灭威、涕灭威砜以及涕灭威亚砜同时进行了定量分析,研究结果表明,前处理方法快速、简单、试剂用量少、净化效果好。该方法的回收率稳定、线性关系良好、检出限低完全满足我国进出口蔬菜中氨基甲酸酯类农药的检测要求。 唐纲岭,张威,朱永平,等.烟草中涕灭威残留量的测定.烟草科技/烟草化学,2005,1:21-23. 武中平,高巍,杨红.氨基甲酸酯类农药残留测定方法的研究进展.江苏化工,2004,32(5):24-27. 段文仲,郝东生.高效液相色谱法同时测定水果中多种农药残留量的方法研究.农药,1998,37(8):20-22. 陈燕清,颜流水.HPLC-MS/MS 法快速测定果蔬中的杀线威和涕灭威残留.南昌大学学报,2006,30(6):574-577. 涕灭威在土壤中残留与移动行为的动态模拟.环境污染与防治,1994,16(6):1-5. 蒋新明,蔡道基,华晓梅.高效液相色谱柱后衍生化法用于氨基甲酸酯类农药的测定.1994,12(1):32-34.

  • 【求助】HPLC 做涕灭威亚砜相关问题讨论

    今天用高效液相做涕灭威亚砜时遇到拖尾的现象。加大水的比率,拖尾处有个小峰,用标样做也有这样的小峰。考虑两种情况:第一:标样被污染第二:涕灭威亚砜被氧化为涕灭威亚砜……情况二排除 因为再用涕灭威砜标液来做 并不是后面出的小峰。所以在此请假各位做过涕灭威亚砜的同志们……你们做的时候是否出现过类似的拖尾现象。

  • 安捷伦液相,涕灭威亚砜和涕灭威风的峰型分不开有什么方法可以处理?

    机子是安捷伦1260,有柱后衍生,流动相使用pickering的OPA和NaOH,柱后衍生的温度条件是100℃,流速是0.3。上机检测混合标液的时候,涕灭威亚砜和涕灭威风的峰型分不开,重叠在一起,我试过单标是没有问题的。请教过别人怎么处理,她叫我通过梯度洗脱来处理,我不懂梯度洗脱是怎么操作的。麻烦各位老师帮帮忙,教教我

  • 涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜LCMSMS响应低

    各位大神,你们好!我操作Thermo TSQ三重四级杆分析标题中的三种物质只有涕灭威砜分析4ppb响应可以,其它两种20ppb都测不出来。我先后用两种流动相分析,灵敏度变化不大。先用A相水和B相甲醇都加入0.1%甲酸作为流动相,后用A相水和B相甲醇都加入0.1%甲酸和4mM甲酸铵作为流动相。我看到很多文献上说可以测到2ppb,不知道他们是怎么做到的。麻烦各位大神帮忙分析下,改变哪里可以提高两种物质的灵敏度?

  • 涕灭威砜定性定量离子发生变化

    涕灭威砜定性定量离子发生变化

    各位版友,请教大家一个问题,用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做氨基甲酸酯类的时候发现一个问题,流动相为水:乙腈时,涕灭威砜定量离子为240.1 86.0,定性离子240.1 233.0,涕灭威亚砜的定量离子229.0 109.1,定性离子229.0 166.1.峰形对称性好。在水相中加入0.05%的甲酸后,发现涕灭威砜定性离子240.1 233.0不出峰,然后就重新扫描优化,发现涕灭威砜母离子245.10,定量离子166.15,定性109.15.,问题1:为什么加入甲酸后涕灭威砜的2对离子与涕灭威亚砜是一样的?问题2 两个离子对 245.10/109.15 229.0/109.1为什么在后面有杂峰,涕灭威砜229.0/109.1在4.5min,7.5min,涕灭威亚砜砜在3.5min 5.5min 有杂峰,而涕灭威后就很平。[img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_5232_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_2796_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_5957_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_5232_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_2796_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712200935_5957_1929288_3.jpg!w690x517.jpg[/img]

  • 【求助】-哪里的农药标准品便宜,请指点

    本人因论文需要求购以下农药标准品: 3-羟基克百威, 涕灭威, 涕灭威砜, 涕灭威亚砜, 丙硫克百威, 丁硫克百威, 硫双灭多威,残杀威, 苯恶威, 灭多威, 杀线威(以上最好是便宜的标准溶液).越便宜越好。希望尽快了解产品的包装规格,含量,价格等详细资料。多谢[em06]

  • 高压蒸汽灭菌器校准基本参数

    高压蒸汽灭菌器是一种最高工作压力大于或等于0.1MPa(表压),且压力与容积的乘积大于或者等于2.5MPa?L的气体、液化气体和最高工作温度高于或等于标准沸点的液体的固定式容器及移动式容器。  高压蒸汽灭菌器使用操作不当,可能会发生危险,是一种特种设备。国家相关部门规定,特种设备的安全附件、安全保护装置、测量调控装置及有关附属仪器仪表需要获得有资质检测机构的合格证书,才能继续使用。那一般高压蒸汽灭菌器校准检测需要哪些参数?  高压蒸汽灭菌器校准基本参数:  ①额定工作压力不大于0.25MPa。  ②灭菌工作温度:115~138℃。  高压蒸汽灭菌器校准条件:  为确保现场校准结果的可靠性,应遵循下列基本原则:  1)环境条件:  温度:(20±5)℃;  相对湿度:不大于80%。  2)计量标准器:  选用的标准器其测量范围应大于或等于被校高压蒸汽灭菌器校准基本参数的测量范围,其示值最大允许误差绝对值应不大于被校高压蒸汽灭菌器校准基本参数最大允许误差绝对值的1/3(数字式)或1/4(模拟式)。

  • 关于农残(涕灭威及其代谢物)LC-MS/MS 的问题

    最近在做农残项目开发项目:涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜标准:sn/T 2441-2010设备:安捷伦1290-6460问题:1、涕灭威一切正常2、涕灭威砜 全扫没有母子峰3、涕灭威亚砜 出现+na峰、且不稳定,+H峰很小;涕灭威没有出现+na峰配置的三种物质的混标我该怎么办,谢谢大神?

  • 【讨论】如果你做能力验证,你会使用液体的标准品还是固体标准品

    如果是你参加能力验证Or计量审核,你的标液会优先考虑那种?是纯的少量的标准品,量大的纯标准品,还是液体的配置好的标准品?我先谈谈我的看法,不知是否会被接受Or正确:1.量大的纯标准品 优点:可以自己称量,然后按照自己的要求配置不同高的浓度,自己操作过程,自己了解标准品过程的影响,自己信心比较的足; 缺点:一般称量比较的少,对天平和环境的要求比较高,如果标准品本身就是液体的,取样不是很方便,而且还会有损失,害怕污染;一些标准品还不知道溶解度是多少,在配置母液的时候,不知道是否溶解完成;自己配置的标准品的时候玻璃器皿很少会经过去活化,玻璃器皿的影响也待确认。 2.液体的配置好的标准品 优点:可以直接用来使用,可以往下配置一系列的标液做标准曲线,使用方便 缺点:一般量比较的少,浓度比较低,只可以把曲线往低的点去配置,不能有高浓度的标准曲线3.纯的少量的标准品 优点:可以一定量的高浓度的点,成本比较的低 缺点:量少,配置的时候对称量的准确度要求比较高,不能配置量大,浓度高的标准液。使用建议: 1.少量的纯标准品和液体的配置好的标准品不能就使用标准品上写的质量和体积,使用称量的重量Or取出的体积,因为由溯源性考量,都只有对标准品的纯度Or浓度可以溯源(有不确定度),而体积和质量都会有一些的偏差; 2.做计量审核的话,尽量去参加的机构那边去采购标液,他的基质会和样品的基本一致,参加能力验证就如现在的6P,PBDE 的,尽量采用Accu的,因为现在大多数做这块的都是使用这个品牌的标液和大多是保持一致,那么结果就会更与大家结果保持接近!纯属个人所想!希望可以有人讨论!

  • 【讨论】灭菌柜验证的重要性

    灭菌柜验证的重要性一、国内制药企业对热力灭菌的现状随着我国制药工业的发展,国内一些药厂不断对企业进行技术改造,提高产品质量。新购买的热力灭菌设备都由生产厂家进行了验证,但是多数制药企业在做回顾性验证和再验证时,忽视了其重要性,一台设备经过验证并在使用一个阶段以后,旨在证实其“验证状态”没有发生漂移而进行的验证。在药品生产过程中,由于各种主观及客观的原因,需要对设备的管理或操作规程作出变更。有些情况下,变更可能对产品质量造成重要的影响,因此,必需要进行回顾性验证和再验证。二、灭菌的概念一个细胞本身或在其寄住内,其新陈代谢、生长以及繁殖等主要生命活动一旦停止,就意味着死亡。与消毒的概念不同,灭菌工艺是指以适当的物理或化学手段,将一定数量活的微生物完全杀灭,并使其生命活动产生不可逆转的灭活过程。在制药工业实践中,无菌是指灭菌工艺使一批产品中非无菌品的概率符合药典通则规定无菌要求的状态,它的内涵远远超出了无菌检查的范围。从理论上说,无菌产品应当是没有任何微生物污染的产品。然而,一旦将无菌定义为绝对无微生物污染,那么,这种绝对的标准就无法用试验来认定或用科学的方法来验证,从而使标准架空,以至无法在工业界建立起可以应用的技术标准,因为技术标准的确立必须具备3个必要条件:科学性、安全性和可操作性。三、验证的原理和目的灭菌程序的验证是无菌保证的重要内容。USP24(1211)药品的灭菌和无菌保证中非常明确地阐明了灭菌程序验证的原则要求。使用未经验证的灭菌程序,就谈不上产品的无菌保证。要想使一个灭菌设备在受控的验证状态下运行,必须充分了解微生物学和工程学方面的基本原理;设备的设计、安装和运行都必须合理、恰当;必须通过科学的试验,用数据来证明设备的运行不但稳定,而且可靠。从早期的工艺设计到验证的实施和监控的所有文件记录,均应归档保存。 只有对与灭菌设备运行相关的电气、机械以及物理操作等全面了解后,才能着手该设备的验证。对上述资料的充分了解,是撰写验证方案和标准操作规程的先决条件。这对拟定校验和维修计划、制定再验证方案,确保设备运行始终处于受控状态下是十分有益的。空载热分布试验是通过一组经过校正的标准热电偶测定灭菌器腔室内各不同部位温度变化值,并根据所测定的温度变化值得到温度分布图和其热力学特征。在此试验中应用的热电偶至少在10支以上,热电偶在安装时不应与腔室内金属(如内壁、架子等)接触,在试验过程中至少有一支热电偶应位于设备自身控制系统的温度传感器附近。试验过程应采用与生产过程要求相同的操作运行条件,并应记录整个温度变化过程,即包括升温与降温过程。正常的干热灭菌系统在空载状态下其热分布应该均匀,腔室内各点温度值与设定值之间的误差均应在验证方案规定的范围之内。 装载的热穿透试验 将热电偶均匀放置在产品容器及腔室内,以确定灭菌相应装载方式下的冷点。某一灭菌程序的热穿透试验应在最大和最小装载方式下分别进行,以确定装载方式对被灭菌物品的热力学影响。此验证试验获得的数据包括:最高和最低温度(温度范围)、保温阶段各点的平均温度、最小及最大F0值以及保温时间。 四、验证的重要性灭菌设备对无菌保证的作用是至关重要的,对灭菌设备基本原理缺乏了解会给灭菌程序的验证及此后设备的正确使用、维护、保养等造成不稳定因素。忽视灭菌后防止二次污染的措施,会给成无菌保证带来风险,例如,大容量注射剂灭菌采用饮用水冷却,或纯化水冷却,这两种介质均无微生物污染监控措施;又如,小容量注射剂检漏用水对微生物污染也无监控措施。对于干热灭菌柜来说,不安装高效过滤器,或安装后从不定期检查完好性,这些均是无菌保证的不利因素。 干热灭菌往往和去热原联系一起。去热原的工艺条件比孢子杀灭程序要苛刻得多,通常相当于标准干热灭菌时间FH的数十倍。因此,如果干热去热原工艺能使细菌内毒素下降了3个对数单位,那么就没必要再进行生物指示剂的挑战性实验了。

  • 验证灭菌器灭菌效果

    会验证高压灭菌器灭菌效果吗?微生物实验室最少不了的实验仪器之一就是灭菌器,一般实验室常用的是高压蒸汽灭菌器。GB 4789.1-2016中要求:实验设备应定期进行检查和/或检定(加贴标志)、维护和保养,以确保工作性能和操作安全。但你的灭菌器有没有类似的检查呢?如果要做类似的验证,又需要怎么做呢?今天就给大家汇总一下高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证的相关内容。高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证一般有化学指示剂法、留点温度计法、自制测温管法和生物指示剂法,每种方法的原理都是相似的,主要是通过验证灭菌时灭菌器里的温度能否达到要求。我们可以根据自己实验室的具体情况选择其中一种或多种方法进行验证。一、化学指示剂法原理:化学指示剂在一定温度与作用时间下,会受热变色或变形,根据这一特点来判断是否达到需要的灭菌参数。一般实验室常用的是3M压力灭菌指示胶带,这种指示胶带是利用灭菌前后胶带颜色变化来判断灭菌效果。它是由热敏化学物质与显色剂及漆辅料制成油墨,并将油墨以条纹状印制在特制的一面胶纸带制成。指示胶带可以直接粘贴于包裹外,长度不低于5cm,并轻压胶带以增加粘性和封包效果;在121℃持续20min或130℃持续4min后,胶带上印有的斜行的白色指示线条会完全变黑,成为黑色线条;如变色不均匀或不彻底,可认为该包裹不符合灭菌条件。二、留点温度计法原理:留点温度计法是利用水银温度计不回流的特性,其原理跟传统体温计相似,可以指示灭菌器在灭菌过程中达到的最高温度。验证时把水银温度计放在盛水的大三角瓶里,灭菌时把三角瓶放在灭菌器的上部和下部,灭菌结束后看水银温度计的温度和要求温度是否一致。此法只能验证温度,不能指示灭菌时间是否达到要求,因此是灭菌器验证的最低标准。三、自制测温管法原理:利用一些化学药品受热熔化后再冷却,晶体的外形不同的特性,把化学药品密封在小玻璃管内,灭菌时放在灭菌器里,灭菌完后观察晶体的形状,就可以判断温度是否达标。常用的试剂是苯甲酸,苯甲酸的熔点为121-123℃,跟我们要求的灭菌器的灭菌温度基本吻合,因此灭菌时把固体苯甲酸密封在小玻璃管内放进灭菌器,灭菌结束就可以观察苯甲酸的状态来验证灭菌器是否达到了要求温度。这种方法的局限跟留点温度计法相同,也只能指示灭菌时的温度,对灭菌时间是否达到要求无法判断。四、生物指示剂法原理:利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌,来测定热力灭菌的效果。嗜热脂肪杆菌的芽孢对热的抗性较强,其耐热能力与病原微生物肉毒梭菌芽孢相似,以此为指示菌,验证灭菌器能否达到灭菌要求。生物指示剂分为三种:芽孢悬液、芽胞菌片、菌片和培养基混合指示管。一般放在灭菌容器的5个点:下层的前、中、后和上层、中层的中央点。灭菌后取指示剂接种到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中,55-60℃培养2-7天,若培养基澄清、颜色没有变化即说明芽孢被杀死,灭菌器灭菌效果良好;如果培养基黄色浑浊,说明芽孢未被杀灭,灭菌器灭菌效果不合格。芽孢悬液和芽孢菌片的验证方法均是如此。目前实验室还常用商品化的生物指示管,其原理与芽孢悬液和芽胞菌片相同,指示管中有嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢和培养液玻璃小管,将指示管放在灭菌容器内的各个点上,高压灭菌后,将管中盛培养液的玻璃管挤碎,培养液从内部的小管中被放出,放入56℃培养箱中培养,同时做阳性对照。若是灭菌器灭菌效果不合格,指示管内的芽孢复活后生长会改变肉汤的颜色是肉汤变为黄色;若是灭菌器灭菌效果良好则管内芽孢被灭活不再生长,肉汤仍旧是原来的紫色。对于灭菌器的效果验证,目前并没有相关标准严格的要求验证的频次,但是实验室应当自行制定验证频次规定,并严格按照要求进行。从操作性和验证结论两个方面出发,小编推荐使用指示胶带和生物指示管,因为这两种方法操作简单,可以对灭菌效果进行全面的验证。希望以上内容对您有所帮助!

  • 【分享】《食品安全国家标准 蜂蜜》国家标准将征求意见

    根据《食品安全法》规定,卫生部组织制订了《食品安全国家标准蜂蜜》(征求意见稿),将于近期在卫生部官方网站公开征求意见。该标准包括了GB18796的一部分理化指标,并增加了噬酸酵母菌的限量要求。建议协会会员关注。届时,各位会员可以按照卫生部的要求直接反馈意见或建议,也可转给协会秘书处,由秘书处汇总反映。  另外,《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(征求意见稿),已经在卫生部网站公开征求意见。该标准规定了蜂蜜及其制品中沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌的限量和检验方法,与《食品安全国家标准 蜂蜜》对致病菌的要求有所不同。请于2011年2月16日前按以下方式反馈意见:  传真010-67711813  电子邮箱foodsafetystandards@gmail.com

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