十八碳烯酸反反油酸

[size=2][color=#dc143c] [/color][color=#d40a00]维权声明：本文为mingzhi0302原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/color][/size] 我从事食品检测行业已经6年了，真正接触脂肪酸测还是在08年初。所以在这方面我并不是做得很好，但是由于这个方法，我从研发到初步的成型整整用了一年的时间。在这一年的研发过程中，我走了很多的歪路，但也从中学到很多，现在我把我的经验写出来让大家分享一下，同时也希望各位能给我指出我的不足之处，谢谢!　　当时公司提出要开发食品营养标签的测试，这个营养标签中就有二个是用到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定的，脂肪酸就其中的一个。　　虽然在大学里就有听说过饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、反式脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸这个东西，但是我还真没做过。　　开始拿到方法当时还是GB/T17376-1998和17377-1998 我当时拿着这两个方法是看了又看看了又看就是看不明白他是怎么计算的。当我搞明白计算方法后，又来了一个难题了，那就是为什么这个计算又分面积归一化法和内标法呢?　　由于我主要说的是关于脂肪酸的测定，那么对于以上问题我是怎么去做的，在后面可能会讲到，如果没有讲到的大家也可以给我留言大家相互交流。　　以下我来说说关于GCMS测定脂肪酸的方法。　　我们所有标品是已经甲脂化好的标液。34种混合标液。　　这37种混合标准品要一针全部走出来且要全部分开那可不是一件容易的事，所以当时在做这个方法时，当时标液都用去了一半。　　由于之前在想60m的柱子(ZB-624)应该就可以把这34种物质全部份开，但是没想怎么不管我用多度的流速多小的升温程序都是无法把C18里的几个正反式分开，分得最好时也是有几个三个峰连在一齐，是后实在不行，只能重新购买CP-Sil 88 VARIAN 100m的柱子。　　100m的柱子购买回来后就是一个不段的调试，以更能最好的把34种脂肪酸全部分开，这程就不多说了，现在就说说我们最终方法。进样口温度220度，柱温箱初温150度保持15分钟后以3度每分钟的到220度保持3分钟。柱流速我采用的是恒流模试1ml/min。　　MS从第8分钟后才打开。　　也许在些会有很多人在想我为什么要以这个程序，我在些说明一下，每个方法的建立跟操作者是一定的关系，由于本人的一贯的做法都是以节俭时间为主，因脂肪酸在150度才会出峰，所以我会把最低温度设成150度，而脂肪酸基本上在220度就完全出完了，所以最我的温度也只设到220度。哈哈，人懒就是那样的，还有一定会有人在想为什么要用3度每分钟做为升温速率而不用2度或4度每分钟呢?先说一下用4度每分钟时C18：2中顺反异构体基本上有一半重合在一齐了。如果用2度每分钟时C18里的好几个峰基本上也是重合在一齐了，因为升温速率高了各组分的出峰时间都快了，所以会导致沸点相近的物质就会一齐出来了，而升温速率低的会由于溶易出现拖尾从而导致峰从叠。有点一须要注意的是我们做样品时跟我们进标液并不一样，标液浓度的比例基本一致，所以我们选择进样时就不会因为某一样品浓度大而把其它的浓度小的物质峰所掩盖了，而样品却并不是34种脂肪酸都会出现，也有可能会出现34种以外的物质的峰，有些物质的其C18：1油酸的峰非常大经常在色谱图上看其保留时间与C18：1反油酸的时间最接近，而自然界中反式脂肪酸是不可能存在的，但由于些峰的保留时间与C18：1反油酸是最接近的你怎么去判断其是油酸还是反油酸呢?在此之前我用过质谱图来判断但是由于油酸与反油酸均是C18：1那他的质谱图可以说是完全一样的，那么这样用色谱和质谱均无法判断其是顺的还是反的呢?最后想到了把样品稀释到与标准溶液相接进的浓度时发现该物质的保留时间往回靠了一点，正好与油酸的保留时间相重叠，这样就可以判断其是顺式还是反式，到这里就会有很多人说竟然这样就可以判断了为什么还要用质谱做，而不用色谱做呢?大家想过没有脂肪酸总共有多少种呢?无计其数，如果我们用色谱图做的话那么就有可能把一些不是脂肪酸的物质当做脂肪酸计算进去了，而是脂肪酸的却没有计算进去，那么我们的测试就会有很大的结果差异，虽然说质谱是一个半定量的一种检测器，但我个人觉得只要不出现很大的干扰质谱的定量还是非常的准确的。　　以下的色谱图大家可以看看这个是我所用的条件分出来的34种物质的峰，分得还可以吧，我所用的GCMS是Agilent 6890N-5975, CP-Sil 88 VARIAN 100m的柱子,但是大家使用时也不一定要按我这个条件选择啊，这个图只是跟我的仪器还用我使用的色谱柱有关，如果色谱柱已经用了很久的话可能用这条件走出来的峰就会很差的哦。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291156_233039_2961690_3.jpg[/img]　　各组份为　　丁酸甲酯(C4:0) Methyl Butyrate [623-42-7]　　己酸甲酯(C6:0) Methyl Caproate [106-70-7]　　辛酸甲酯(C8:0) Methyl Caprylate [111-11-5]　　癸酸甲酯(C10:0) Methyl Pelargonate [110-42-9]　　十一烷酸甲酯(C11:0) Methyl Hendecanoate [1731-86-8]　　十二烷酸甲酯(C12:0)/月桂酸甲酯 Methyl Laurate [111-82-0]　　十三烷酸甲酯(C13:0) Methyl Tridecanoate [1731-88-0]　　十四烷酸甲酯(C14:0)/豆蔻酸甲酯 Methyl Myristate [124-10-7]　　十五烷酸甲酯(C15:0) Methyl Pentadecanoate [7132-64-1]　　十六烷酸甲酯(C16:0)/棕榈酸甲酯 Methyl Palmitate [112-39-0]　　十七烷酸甲酯(C15:0) Methyl Margarate　　十八烷酸甲酯(C18:0)/硬脂酸甲酯 Methyl Stearate [112-61-8]　　二十烷酸甲酯(C20:0)/花生酸甲酯 Methyl Arachidate [1120-28-1]　　二十二烷酸甲酯(C22:0)/山嵛酸甲酯 Methyl Behenate [929-77-1]　　十四碳烯酸甲酯(C14:1,顺-9) Methyl Myristoleate [56219-06-8]　　十五碳烯酸甲酯(C15:1,顺-10) Methyl Cis-10-Pentadecenoate　　十六碳烯酸甲酯(C16:1,顺-9)/棕榈油酸甲酯 Methyl Palmitoleate [1120-25-8]　　十七碳烯酸甲酯(C17:1,顺-10) Methyl Cis-10-Heptadecenoate　　十八碳烯酸甲酯(C18:1,顺-9)/油酸甲酯 Methyl Oleate [112-62-9]　　十八碳烯酸甲酯(C18:1T,反-9)/反油酸甲酯 Methyl Elaidate [2462-84-2]　　十八碳二烯酸甲酯(C18:2,顺-9,12)/亚油酸甲酯 Methyl Linoleate [112-63-0]　　十八碳三烯酸甲酯(C18:3,顺-9,12,15)/α-亚麻酸甲酯 Methyl Alpha-Linolenate　　十八碳三烯酸甲酯(C18:3,顺-6,9,12)/γ-亚麻酸甲酯 Methyl Gamma-Linolenate　　二十碳烯酸甲酯(C20:1T,反-11) Methyl Trans-11-Eicosenoate　　二十碳烯酸甲酯(C20:1,顺-11)/花生一烯酸甲酯 Methyl Cis-11-Eicosenoate　　二十碳二烯酸甲酯(C20:2,顺-11,14) Methyl Cis-11,14-Eicosadienoate　　二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-8,11,14) Methyl Homo-Gamma-Linolenate　　二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-11,14,17) Methyl Cis-11,14,17-Eicosatrienoate　　二十碳四烯酸甲酯(C20:4,顺-5,8,11,14)/花生四烯酸甲酯(ARA-M) Methyl Cis-5,8,11,14-Eicosatetraenoate　　二十二碳烯酸甲酯(C22:1,顺-13)/顺芥子酸甲酯 Methyl Erucate [1120-34-9]　　二十二碳烯酸甲酯(C22:1T,反-13) Methyl Brassidate　　二十二碳二烯酸甲酯(C22:2,顺-13,16) Methyl Cis-13,16-Docosadienoate　　二十二碳六烯酸甲酯(顺-4,7,10,13,16,19)(DHA-M) Methyl Cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoate(Dha-M)　　二十四碳烯酸甲酯(C24:1,顺-15)/神经酸甲酯 Methyl Nervonate [2733-88-2]　　[b]结果的计算[/b]　　现在行业当中有两种计算方法其一是面积归一化法，那就是用百分比来计算的。　　别一种是内标法计算，个人觉得内标法更准确一点所以在些把内标法的计数公式列出来大家看看：　　脂肪酸甲酯响应因子Ri[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291200_233040_2961690_3.jpg[/img]　样品中总脂肪的含量　[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291200_233042_2961690_3.jpg[/img]　　式中：　　monounsaturated Wi—单不饱和脂肪重量　　polyunsaturated Wi—多不饱和脂肪重量　　如果大家在计算当明有什么问题可以随时给我发站短，我会一一给你们解答，也欢迎大家来探讨一下。谢谢

10，抽取5个版友）；中奖名单：dyd3183621（注册ID：dyd3183621）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）莫名其妙(注册ID：moyueqiu)吕梁山（注册ID：shih20j07）翠湖园（注册ID：hhx050）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701041507_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701041507_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================脂肪酸甲酯( 顺/ 反异构体)方法：GC基质：标准溶液应用编号：101870化合物：1. 硬脂酸甲酯 C18:0 2. 反-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 3. 反-9- 油酸甲酯 C18:1 4. 反-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 5. 顺-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 6. 顺-9- 油酸甲酯 C18:1 7. 顺-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 8. 顺- 9,12- 甲基亚油酸 C18:2固定相：DM-2560样品前处理：10 mg/m 顺反脂肪酸甲酯混标, 溶于二氯甲烷色谱条件：进样方式分流, 20:1, 1 μL, 225 ℃ 柱温100 ℃ ( 4 min ) - 240 ℃ ( 10 min ), 3 ℃/min 载气H2, 1.2 mL/min 检测器FID, 250 ℃谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/11(17).png图例：1. 硬脂酸甲酯 C18:0 2. 反-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 3. 反-9- 油酸甲酯 C18:1 4. 反-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 5. 顺-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 6. 顺-9- 油酸甲酯 C18:1 7. 顺-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 8. 顺- 9,12- 甲基亚油酸 C18:2

前面有个帖子说到高油酸葵花籽油脂肪酸组成的检验（详见http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20131228/5130721/一次高油酸葵花籽油的脂肪酸组成检验），今天再来说说高油酸红花籽油。红花籽油作为一种新开发的食用油，已经开始渐渐的进入到普通消费者的视线里。具体有什么好处，大家可以自己百度去。这里就不详细说了。说到红花籽油，想起以前闹过的一个笑话：当时满世界的寻找红花籽油的辅料供应厂家，错把有驱风药物红花油当成红花籽油了。因为红花籽油又简称红花油，以为这两者是一种东西。然后就打电话到人家生产红花油的厂家问他们的红花油是从哪里购买的。还问这种红花油是外用而严禁内服的，吃到肚子里会有什么结果，布拉布拉。。。。。。我感觉直接把人家问傻了，都不知道怎么回答我了。后来搞明白是自己把红花油和红花籽油弄混了之后，那叫一个羞愧。因为这件事单位里面的很多人都知道！真的是一字师啊！！查阅文献说，红花籽油中富含人体不能合成，而且必须的亚油酸。而所谓的高油酸红花籽油是油酸含量非常高的红花籽油。这个同葵花籽油与高油酸葵花籽油是一样的。具体到亚油酸多了好，还是油酸多了好，好像不同的资料说法不太一样。反正我现在是搞不清楚到底是哪个好。对于普通人来说，可能没有标准来进行判断。但是对于某特异性疾病的人群来说，其意义可能就有天壤之别了。但是，这个是我猜测的，还没有真正证实。说完背景，进入正题。选择三氟化硼法来进行甲酯化前处理。具体步骤如下：称取本品约0.1g，置于50ml锥形瓶中，加0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液2ml， 65℃水浴中加热回流30分钟，放冷，加15%三氟化硼甲醇溶液2ml， 65℃水浴中加热回流30分钟，放冷，加正庚烷4ml， 65℃水浴中加热回流5分钟，放冷，加饱和氯化钠溶液10ml洗涤，摇匀，静置使分层，取上层液，用水洗涤3次，每次2ml，上层液经无水硫酸钠干燥，即得。色谱条件：仪器：Trace2000型气相色谱仪；FID检测器；色谱柱，月旭WEL-PEG20M，30m*0.32mm*0.25μm（Cat. NO：01918-32001；Ser. NO：GC20131102）；升温程序，起始温度为120℃，保持10min，然后以5℃/min的速率升温至220℃，保持5min；进样口温度220℃；检测器温度，250℃；进样量，1μL；分流比20:1。【结果】对照色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/04/201404081054_495603_1609327_3.jpg样品色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312282344_485222_1609327_3.jpg参考厂家的标准，脂肪酸组成倒是合格。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312282350_485224_1609327_3.jpg其他理化指标，厂家的标准基本上全部照搬GB 22465-2008的规定，检验下来也都在合理范围内。

【生活中的仪器分析】食品安全——“菜”米油盐酱醋茶大检测首先普及一下知识。可能很多人不知道高油酸葵花籽油（至少以前我就是其中的一员）。高油酸葵花籽油就是油酸含量特别高的葵花籽油。而一般的葵花籽油里面是亚油酸的含量是最高的。为什么我会接触到这个呢？是因为公司上马的一个针对特异性疾病的一个全营养项目，里面因为某些方面的考虑，需要用到这个油酸含量比较高的辅料。油酸是一种单不饱和脂肪酸，血管和心脏有好处，可以提高血液里高密度脂蛋白的含量，减少罹患心血管疾病的危险。曾经看到过资料讲，单不饱和脂肪酸高的时候，可以降低起坏作用的胆固醇的同时增加好胆固醇的作用，而且油脂稳定，耐高温、不易氧化，有益心血管的健康。我估计，也可能是因为这个，制剂组的人才选定的是高油酸葵花籽油的吧。以上说的都是别人，现在说说我要做的。我要做的就是检验一下这个油品的质量，今天在这里，就来说说脂肪酸组成的事儿。参考药典中收录的大豆油的前处理方法，选择三氟化硼法来进行甲酯化前处理。具体步骤如下：称取本品约0.1g，置于50ml锥形瓶中，加0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液2ml， 65℃水浴中加热回流30分钟，放冷，加15%三氟化硼甲醇溶液2ml， 65℃水浴中加热回流30分钟，放冷，加正庚烷4ml， 65℃水浴中加热回流5分钟，放冷，加饱和氯化钠溶液10ml洗涤，摇匀，静置使分层，取上层液，用水洗涤3次，每次2ml，上层液经无水硫酸钠干燥，即得。色谱条件：仪器：Trace2000型气相色谱仪；FID检测器；色谱柱，月旭WEL-PEG20M，30m*0.32mm*0.25μm（Cat. NO：01918-32001；Ser. NO：GC20131102）；升温程序，起始温度为120℃，保持10min，然后以5℃/min的速率升温至220℃，保持5min；进样口温度[size=10.