解葡聚糖类芽胞杆菌

的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数通过β-1,3结合，这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫系统。那么，机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子（IL-1）的能力迅速恢复正常，有效调节机体免疫机能。大量实验表明，β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生，以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制，故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质，可添加在一般食品，许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖，可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。 酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物，如香菇、灵芝、燕麦中，是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强，并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数通过β-1,3结合，这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等，因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量，全面刺激机体的免疫系统。那么，机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子（IL-1）的能力迅速恢复正常，有效调节机体免疫机能。大量实验表明，β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生，以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制，故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质，可添加在一般食品，许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖，可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物，如香菇、灵芝、燕麦中，是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强，并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

自1993年燕麦葡聚糖被美国FDA鉴定为降低血糖、抗氧化和减小心脏病发病的特效保健品和药物以来，燕麦葡聚糖在精细化工和高级保健品方面得到广泛的应用。其中1%的燕麦葡聚糖水溶液更是作为高端化妆品的一种重要成分得到广泛的应用。燕麦葡聚糖用于化妆品能赋予皮肤光滑和丝绸般的触感，可以高效保持皮肤水分，同时其抗氧化功能可以防止黑色素和细纹的形成，从而减缓皮肤的衰老。此外，燕麦葡聚糖对高温、紫外线非常稳定，所以适用于需要高温处理和高温搅拌的工艺。对于高端化妆品来说，对这种天然添加剂的要求很高，要求燕麦葡聚糖必须完全溶于水，不得含有不溶性杂质，并且不含脂质，蛋白质和其它纤维，这些杂质的存在不仅影响产品的稳定性，更重要的是会阻碍有效成分的吸收。目前国内生产的燕麦葡聚糖达不到这样的要求，所以用在高端化妆品添加剂的燕麦葡聚糖主要来自欧美和日本，我们应用的工艺中，采用先进的化学与酶结和法不仅除去来源于燕麦葡聚糖的蛋白和脂质，还可以彻底除去传统工艺中难以除去的微量淀粉和阿拉伯木聚糖（这两种多糖也是造成燕麦葡聚糖水溶性不佳的重要原因）。燕麦葡聚糖用于食品和医药方面的科学研究一直是被热烈讨论和深入研究的课题。食品方面，燕麦葡聚糖具有显著的降血脂，降血糖及维持肠道微生物生态环境的功能；在医药方面，燕麦葡聚糖用作免疫调节剂，免疫促进剂,抗癌抗肿瘤辅助药物备受关注。但是，燕麦葡聚糖产生这些生物活性的机理目前没有得到很好的阐述，所以世界范围内很多大型食品公司和医药公司的研发机构，综合类大专院校、医学院和研究所的实验室正致力于研究燕麦葡聚糖的活性机理，从而制备商业化的更有效的功能性食品和医用试剂。这些机构目前使用最具权威的生产商，瑞典Megazyme公司的燕麦葡聚糖作为研究用的样品材料。Megazyme生产高和中分子量的两种燕麦葡聚糖，经鉴定我们使用的方法生产的燕麦葡聚糖纯度相当于Megazyme产品的级别，分子量分布范围更窄仅为1.0－1.005。百特纯大分子科技公司生产高、中、低三种分子量的燕麦葡聚糖，比Megazyme公司增加了低分子量的燕麦葡聚糖，这将更具竞争实力。因为目前最权威的研究显示低分子量的葡聚糖显示更高的活性。1%燕麦葡聚糖的水溶液特性及优势阐述. 1%燕麦葡聚糖的水溶液对纯度要求较高，但是对分子量要求很低，也就是说，无论分子量高低，只要水溶性好的燕麦葡聚糖均可制备成1%水溶液用于高级化妆品的添加剂。我们制备的高纯度未经分级处理的燕麦葡聚糖很好的满足了这一要求，其1%水溶液为无色无味透明黏稠的液体。

请问啤酒麦芽中的β-葡聚糖的检测方法？及主要用什么牌子仪器检测（进口）分析啤酒麦芽中的β-葡聚糖？急！！！

用液谱能不能做淀粉辐解后的产物葡聚糖的分离及定量测定呢？还请帮帮忙呀！多谢多谢[em06] [em06]

糖酶的新近发展摘要：简要介绍了糖酶中淀粉酶、乳糖酶、纤维素酶作用机理和应用前景；详细介绍了α-葡萄糖苷酶的理化性质、作用机理、研究现状以及展望了其应用前景。关键词：糖酶；α-葡萄糖苷酶；研究现状；应用前景酶制剂作为一类绿色食品添加剂，用于改善食品品质和食品制造工艺，其应用已越来越普遍，品种也不断增多。其中，糖酶（carbohydrases）是一种应用相当广泛的酶类。它通过裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成较小的分子；也能催化糖单位结构重排，形成新的糖类化合物，这类反应被称为转糖苷作用；此外，一些酯酶能作用于酯化的糖类，这类反应在改变果胶物质的功能性质上是很重要的。 本文大致介绍了糖酶中淀粉酶（amylase）、乳糖酶(lactase)、纤维素酶(cellulose)。主要介绍了α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)，一种新型的糖苷酶。1.淀粉酶淀粉是由葡萄糖通过α-1 ,4糖苷键和α-1,6糖苷键连接而成的高分子化合物，而糖酶广泛分布于自然界，能裂解多糖中将单糖结合在一起的化学键，使多糖降解成为较小的分子，两者具体作用方式如下图所示。 淀粉工业中常用的糖酶有以下四类:（1）α-淀粉酶(液化酶，α-Amylase，α-1,4-葡聚糖葡萄糖水解酶，EC3.2.1.1)，主要来自芽胞杆菌和曲霉，它是一种内切型淀粉酶，作用于淀粉是从淀粉分子的内部任意切开α-1,4-糖苷键，使淀粉分子迅速降解，失去粘性和碘的呈色反应，同时使降解物的还原力增强。(2)β-淀粉酶(β-Amylase，α-1,4-葡聚糖麦芽糖水解酶，EC3.2.1.2)，在工业上应用的酶制剂主要来自植物(如大麦)和微生物(芽孢杆菌)。作为外切型淀粉酶，它作用于淀粉时从还原端以麦芽糖为单位切断α-1,4-糖苷键，但产物不是α型的麦芽糖，而是[font

大家有做GB15108原糖中葡聚糖的测定的吗？标曲的数值是不是有问题

各位大侠们，请问葡聚糖（Dextran）与葡聚糖（Sephadex G序列）之间有关系吗？

新人报道，想问一下有没有关于β-葡聚糖这一方面的检测方法，最近在尝试用啤酒酵母做β-葡聚糖

2010版药典规定了头孢类药品的聚合物检测使用葡聚糖凝胶柱和、液相色谱仪，那么旧方法中的高分子杂质仪中使用自己填装的柱子就不适用了，于是葡聚糖凝胶柱就应需而生！那么，这个柱子你对其了解有多少呢？你认为工业填装和自己的手动填装会有什么区别吗？

[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39931.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物，又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。糖类在生命活动过程中起着重要的作用，是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。植物中最重要的糖是淀粉和纤维素，动物细胞中最重要的多糖是糖原。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]总糖含量检测可溶性总糖含量检测还原糖含量检测糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖)单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖)多糖含量检测可溶性固形物含量检测β-葡聚糖含量检测多糖检测植物样本：植物干样、鲜样[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]植物[/td][td]总糖含量检测 可溶性总糖含量检测 还原糖含量检测 糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖) 单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖) 多糖含量检测 可溶性固形物含量检测 β-葡聚糖含量检测[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测：环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务：高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享：HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询：实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

在凝胶色谱中，交联葡聚糖G-200溶胀后它内部的孔径范围是多少？有前辈知道吗？

用试剂盒方法(酶法)测定食品中葡聚糖含量摘要:描述了用试剂盒(酶法)测定食品中葡聚糖含量的方法前言: β-葡聚糖是禾谷类植物籽粒细胞壁中的多糖，是籽粒细胞壁的主要成分，化学名称为(1，3)(1，4) -β-D-葡聚糖，其含量以大麦和燕麦中较高其主要功能有：降低胆固醇，降血脂，调节血糖，提高免疫力，抗肿瘤和预防心血管疾病等。还有研究发现，它可以缓解和减轻肥胖症状。 β-葡聚糖测定方法包括酶测定法、荧光法、高效液相色谱法等，其中酶测定法因其反应专一性，测定准确可靠，而被采用为国际测定方法。酶法的方法过程如下：样品经水合和糊化，用地衣酶(β一葡聚糖酶)将样品中的β一葡聚糖酶解成β-葡基-寡聚糖。经调整体积和过滤分离后，用β一葡萄糖苷酶将这些可溶的B-葡基-寡聚糖水解成葡萄糖。葡萄糖用葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和过氧化氢，后者用过氧化酶分解，以便在苯酚存在下，生色基4一氨基非那宗存在下形成适于比色分析的光吸收络合物，在紫外分光光度计下测定。 本文采用爱尔兰的Megazyme公司提供的测定(1，3)(1，4) -β-D-葡聚糖试剂盒，借鉴了EBC法3.11.1、AOAC法995.16，AACC法32-23方法，建立了测定相关制品中β-葡聚糖的测定方法。

各位大侠好！目前我在用Shodex KS801糖柱分离葡聚糖发酵产物，产物里面除了有葡聚糖外还有一些单糖，KS801的排阻限是1000，那么很明显，葡聚糖的分子量会超过1000，但是用这个柱子葡聚糖还是会出峰，包括蓝色葡聚糖，且和单糖分开。现在疑惑是：既然排阻限是1000，那么是不是说分子量大于1000的葡聚糖就都一起被洗脱出来，然后出一个峰？如果是这样，那我做的结果就有点奇怪了，我的样品图中大分子部分竟然还可以出好几个峰，只不过就只有一个主峰。单糖是可以分开的。出现这种情况，我很是不解，所以请论坛里面的高手、大侠能予以帮忙解释，谢谢！

分离纯化谷物β-葡聚糖一般用什么阴离子交换色谱柱和凝胶过滤色谱柱哇

哪里有葡聚糖标品卖，重均1W-10W北京拜耳迪只有1W 4W 7W 11W做线性感觉少了点还有，哪里有标定了重均和数均的？有用过的帮忙看下，谢谢谢谢

仪器：高效液相色谱三重四极杆质谱柱子：carbopac PA1待测物：左旋葡聚糖，levoglucosan在HPAEC-PAD用氢氧化钠做流动相能顺利测出，现在想用LC-MS/MS，因氢氧化钠影响离子化效率，且在ms部分容易结晶，可以用氨水替代做流动相吗？非常感谢！

使用的是大连依力特的sephadex-G10葡聚糖凝胶柱（新色谱柱），用流动相B纯化水进样蓝色葡聚糖1mg/ml，200ul，峰形总是很差，柱效达不到500，但是用流动相A磷酸盐缓冲液pH7.0,蓝色葡聚糖的峰形就很好，柱效也能有1000多。想请问一下：是纯水的问题还是色谱柱的问题呢？纯化水是经过milli-Q仪器过滤的。在流动相B纯化水条件下，进样阿莫西林对照品，色谱峰严重拖尾，峰形基本呈三角形。第一次做青霉素类的高分子聚合物试验，没有经验，还请各位高手多多提点，谢谢！

我想自己装葡聚糖凝胶G-15的柱子来提纯分子量1300左右的多肽，主要是除去里面的盐，多肽大概1克左右，我不知道该买什么样的柱子合适或者定制多少尺寸的柱子比较好？葡聚糖凝胶该怎么处理？装柱过程中有什么需要注意？实验室里没有HPLC之类的东西所有过程都需要手动进样，分离纯化。

请问葡聚糖凝胶柱在50多度会报废吗？葡聚糖(sephadex)要注意哪些？

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包**头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～**5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

您好！请问一下，葡聚糖凝胶色谱柱不锈钢的和玻璃的有什么区别？

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～4．5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

实验七 葡聚糖凝胶层析脱盐一. 目的学习凝胶层析的工作原理和操作方法掌握利用葡聚糖凝胶层析进行蛋白质脱盐的技术二. 原理凝胶层析又称凝胶过滤或排阻层析。凝胶过滤的主要装置是填充有层析介质的层析柱。1. 层析介质的特点（1）遇水为不溶解的固相；（2）是化学惰性物质；（3）离子基团含量少；（4）颗粒大小和网眼均匀；（5）机械强度较强；（6）具有可选择的多种孔径。目前使用较多的是葡聚糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶及其衍生物。尤其葡聚糖凝胶（商品名称Sephadex）是最常用的层析介质。它是由一定平均分子量的葡聚糖和交联剂1-氯-2,3-环氧丙烷（ ）交联成的具有三维结构不溶于水的高分子化合物。调节葡聚糖和交联剂配比，可以获得网眼大小不同，型号各异的凝胶。当葡聚糖分子量越小，交联剂用量越大，则交联度越大，凝胶网眼越小，吸水量越小，G值也越小。G值表示每克干胶吸水量（mL）的十倍。例如Sephadex G-25其吸水量应为2.5mL/g干胶。常用的葡聚糖凝胶有多种规格，如G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100等。实验中选用何种型号应根据被分离的混合物分子的大小及工作目的来确定（参见附录五）。2. 分离原理当混合样液加到凝胶柱上，随着洗脱剂而通过凝胶柱时，分子大小不同的物质受到不同的阻滞作用。颗粒接近或大于网眼的分子，不能进入凝胶的网眼中，在重力作用下它们随着溶剂在凝胶颗粒之间沿较短流程向下流动，受到的阻滞作用小，移动速度快，先出层析柱（此现象叫作被排阻。被排阻的最小分子量称为该规格凝胶的排阻极限）；而颗粒小于网眼的分子可渗入凝胶网眼之中，它们被洗脱时不断地从一个网眼穿到另一个网眼，逐层扩散，阻滞作用大，流程长，移动速度慢，因而后出层析柱。在层析柱的出口处，我们用多个试管分步收集洗脱液，就可将混合物中各组分彼此分离。当我们从生物组织中用盐析法提取蛋白质后，常需要进行蛋白质的脱盐工作，我们可采用层析介质为葡聚糖凝胶G-25（或G-15、G-50），用适当的洗脱剂进行洗脱，经凝胶层析，就可以将大分子蛋白质与小分子盐类分离。三. 实验材料及设备1. 材料含硫酸铵盐的蛋白质溶液（参见附注３）2. 器材层 析 柱：内径×柱高=1.0cm×25cm滴定台架、螺丝夹：各1刻度试管：10mL×14移 液 管：1mL×1烧 杯：250mL×1 50mL×1滴 管：2洗 耳 球：2洗瓶、试管架、移液管架、玻棒：各1四. 试剂的配制1. 葡聚糖凝胶Ｇ-25(或G-15、G-50)溶胀凝胶方法：按每个层析柱约4g的量称取葡聚糖凝胶G-25于烧杯中，加过量蒸馏水于沸水浴中溶胀2小时或在室温下溶胀6小时以上。用倾泻法除去上层漂浮的细碎凝胶，重复3～4次。操作中避免剧烈搅拌，防止破坏其交联结构。2. BaCl2溶液（1%）3. 考马斯亮蓝G-250称取0.1g考马斯亮蓝G-250，先溶于50mL95%乙醇中，再加入85%的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1000mL。暗处存放。4. 脲（6mol/L）5. 洗脱剂应依据被纯化的蛋白质的不同特性而选用不同的缓冲液。五. 操作步骤1. 层析柱的准备(1) 清洗：每组取一支层析柱，用清水冲洗干净。（若玻璃柱较脏，应卸去塑料装置，先入洗液中浸泡2小时。）(2) 安装与检查：检查出口装置中尼龙绸或烧结滤板是否完好干净。安装层析柱，让其垂直固定于滴定台架上。对准出口处，放一只250mL烧杯。向层析柱内灌洗脱剂，打开出口螺旋夹，检查有无渗漏、出口乳胶管是否通畅等情况。(3) 排气泡：保持柱内一定的水位，用手指弹击柱壁，部分气泡会从溶液中上浮排出。出口处的小气泡易停留在螺旋夹附近的乳胶管内，要想法排尽，否则会影响分离结果，排气完毕，保留柱内1～2cm高水位，关紧螺旋夹。(4) 标记高度：在距顶端8～10cm处做一标记，作为衡量灌装层析介质床体高度（15～17cm）的依据。2. 装柱每组用50mL烧杯取溶胀的凝胶悬浆25～30mL，静置片刻，观察凝胶沉淀与水的体积之比，约为1:1即可，否则应作调整。轻轻搅匀杯中凝胶，用玻璃棒引流入柱，打开出水口，并不断地向柱内补充凝胶，直到凝胶沉淀高度位于标记上方约2cm为止，凝胶柱内若有气泡和断层或柱床表面干水和歪斜，都将影响分离效果。必要时，需倒出凝胶，重新装柱。3. 平衡取15mL洗脱剂，用滴管沿柱内壁旋转着缓缓流下，不可冲动胶平面，打开出水口，经洗脱液的流动，一方面清洗内壁，另一方面使胶床收紧。洗脱平衡完毕，胶床上方保留约4cm高水位，关闭出水口。此时，胶床高度≥15cm为宜。4. 准备收集取6只干净的刻度试管（除净试管内残留的水），1～6编号，并在试管2mL处作一标记，插入试管架上，为收集洗脱样品作好准备。5. 上样与收集打开出口排水，当胶床与上方水层的弯月面相切时，关闭出口，用滴管将0.2mL混合样液沿柱内壁缓缓加入，勿冲动胶面。上样完毕，打开出水口，开始收集一号管。每管收集洗脱液2mL。当样液进入胶床，其弯月面与胶平面相切时，暂停排液，用滴管将洗脱剂沿柱内壁旋转着加入1cm高水位，然后排液，至其弯月面与胶平面相切，再缓缓注入3～5cm高的洗脱剂。6. 洗脱不断向柱内加洗脱剂，保持胶床上水位3～5cm。出口流速控制在每6秒1滴，直至收集到6号管达2mL时，关闭出口。7. 鉴定另取6只干净试管，按收集顺序将洗脱液一分为二，即每管1mL，依次在试管架上排成二排。第一排每管加2滴BaCl2，根据白色沉淀多少，判断SO42-在各管中的浓度。第二排每管加1mL考马斯亮蓝G-250试剂，根据蓝色情况，判断蛋白质在各管中的浓度。将结果记录于下表中。若鉴定的第6号管中，仍有样品，表明洗脱和收集不够，需增加7号、8号……试管继续洗脱与收集，同上法鉴定其蛋白质和盐浓度情况。管 号项 目1234567891011白色沉淀量蓝色深浅8. 再生鉴定完毕，打开出水口，继续用２～３倍床体积洗脱剂洗脱，洗脱后关闭出口，以备下次使用。六. 结果处理1. 根据实验结果，在同一坐标系中，以收集的管号为横坐标，颜色深浅程度为纵坐标，绘制二条（蛋白质及(NH4)2SO4）洗脱曲线。2. 分析混合样品分离效果。七. 思考题1. 利用凝胶层析分离混合物时，怎样才能得到较好的分离效果？2. 还有哪些方法可进行蛋白质脱盐？附注1. 凝胶的再生通常层析柱经洗脱剂再生、平衡后，就可反复使用。但使用过多次后凝胶床体积变小，流速降低，凝胶污染杂质过多，甚至变色，需经再生后才可使用。再生方法有多种：如（1）用水进行逆向冲洗，再用洗脱剂平衡，便可重新使用。又如（2）把凝胶倒出，用6mol/L脲浸泡凝胶半小时，抽滤，再用水漂洗数次，除净脲，必要时重复上述操作即可重新使用。2. 凝胶的保存(1) 湿法保存，可保存几个月至一年，有多种方法： 加入防腐剂硫柳汞，使其浓度为0.005%，下次使用前，水洗除去硫柳汞。 加入几滴氯仿，摇匀存放。下次使用前用热水浴除去氯仿。（沸点60℃）。 凝胶保存在60～70%乙醇溶液中，即凝胶以部分收缩状态保存。(2) 干法保存此法操作不及湿法简便，但处理得好，凝胶存放时间长。先抽取过量水分，再向凝胶逐步加入百分浓度递增的乙醇溶液，每次停留一段时间，使凝胶逐步脱水，最后加入95%乙醇，凝胶脱手收缩。抽干，铺与搪瓷盆中，60～80℃经常翻动烘烤。若有结块，在下次膨胀时会散开的，不可用力敲碎，否则会破坏颗粒结构。3. 用盐析法分离提取麦清蛋白取10g小麦种子，粉碎。转入250mL具塞磨口锥形瓶中。加100mL蒸馏水，在康氏震荡器上震荡1小时。静置半小时，上清液以3000转/分钟离心15分钟。将上清液在布氏漏斗上（铺3～4层滤纸）抽滤。滤液应透明。用醋酸酸化滤液至pH4.7。加等体积的饱和硫酸铵溶液，边加边搅动，即有白色絮状沉淀生成。置冰箱过夜，使麦清蛋白全部盐析沉淀出来，以3000转/分钟离心20分钟，弃去上清夜，加10mL无离子水使沉淀溶解，即得麦清蛋白和硫酸铵的混合液。

我想分析中药中低聚糖类成分，请问用液质可以分析么？一般什么条件比较好 ？另外用什么型号的柱子会较好？谢谢！

在看到Q B/T4572-2013中的酵母葡聚糖的含量检测中，用到的杜氏瓶是什么样子的，有图片的能发一张图吗？

[color=#444444]现在需要用液相色谱分析生物油水相中各种糖类，请大神们支招。[/color][color=#444444] 1、现有色谱柱：Agilent ZORBAX Carbohydrate Analysis Column. 说明书上说：“This packing is produced by reacting 3-aminopropylsilane with ZORBAX SIL (silica) particles” 请问这到底是氨基柱还是糖柱？[/color][color=#444444] 2、生物油水相中 含有一定量的乙酸，请问乙酸在这个柱子上会不会出峰（水和乙腈25:75）。[/color][color=#444444] 3、主要检测物质为 左旋葡聚糖（levoglucosan）、木糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖。请问这些糖在这跟柱子上能分开吗？[/color][color=#444444] 4、关于具体的操作问题，跪求建议！比如需不需要梯度洗脱，流动相用什么更好一点，越详细越好！[/color]

各位亲们好，问一下装葡聚糖凝胶柱的时候有纹路会对分离有什么影响，需要重新装吗？还有你们的柱子在没有开启恒流泵的时候，柱子里的平衡液会往下流吗，若流的话大概有多快？恳请您的回复，谢谢!