妥布霉素鉴定标准品

[url=https://www.instrument.com.cn/download/shtml/820257.shtml][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][b]GB 5009.185-2016 [font=宋体]食品安全国家标准 食品中展青霉素的测定[/font][/b][/size][/font][/url][font=宋体][size=10.5000pt]标准解读[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]包含方法的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果表述等主要技术内容。适用于食品（果汁饮料、果酒、果酱、果干及薯类制品等）中展青霉素的测定和确证。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]（一）原理[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]澄清液体样品（果酒样品需[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]除[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]去乙醇）直接固相萃取净化；混浊液体样品和固体样品先用果胶酶水解，再以乙酸乙酯提取，吹干浓缩后固相萃取净化，液相色谱[/font]-[font=宋体]质谱[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]质谱法测定，外标法定量。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]（二）试剂及仪器[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]液相色谱仪[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]:[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]Agilent 1200-6410 LC/MS[font=宋体]，[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]色谱柱：[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]ACQUITY UPLC HSS T3 1.8[font=宋体]μ[/font][font=Times New Roman]m[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]；[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]柱[/font] [font=宋体]温：[/font]30 [font=宋体]℃；[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]进样量：[/font]10 μL[font=宋体]；流速：[/font][font=Times New Roman]0.[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]2[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]mL/min[font=宋体]；流动相：[/font][font=Times New Roman]A[/font][font=宋体]：纯水 [/font][font=Times New Roman]B[/font][font=宋体]：[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]甲醇[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt] [font=宋体]梯度洗脱；[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]Iron Source: ESI[/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]-[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]；[/font]Capillary: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]4 [/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]kV[font=宋体]；[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]Fragmentor[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]:[/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]135[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]；[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]Delta EMV[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]3[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]00[font=宋体]；[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]Gas[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt] Te[/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]m[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]p: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]350[/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]℃[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]；[/font] Gas Flow: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]11 [/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]L/hr[font=宋体]；[/font][/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]Nebulizer[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt]: [/size][/font][font=宋体][size=9.0000pt]35 psi[/size][/font][font='Times New Roman'][size=9.0000pt][font=宋体]。[/font][/size][/font][img=,490,74]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010546570107_6256_2166779_3.png!w490x74.jpg[/img][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]阴离子交换柱：[/font]Thermo HyperSep Retain-AX[font=宋体]固相萃取柱[/font][font=Times New Roman],3mL/60mg [/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]上机工作液（临用现配）[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]：[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]移取[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt].0 mL[font=宋体]，[/font][font=Times New Roman]1.0 [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μg/mL[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]展青霉素[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]标准溶液至[/font]10 mL[font=宋体]容量瓶中，用[/font][font=Times New Roman]pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]水定容，混匀，浓度为[/font]0.[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]5[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μg/mL[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]（三）[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]分析步骤[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]取混合均匀的样品[/font]4.0 g[font=宋体]，加[/font][font=Times New Roman]50 [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]μ[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]L[font=宋体]果胶酶，[/font][font=Times New Roman]4 mL[/font][font=宋体]水混匀，在[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃下酶解[/font][font=Times New Roman]2 h,[/font][font=宋体]放置室温后，[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt][font=宋体]加[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]入[/font]20 [/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mL[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]乙酸乙酯，涡旋提取[/font]1 min[font=宋体]，于[/font][font=Times New Roman]4000 r/min[/font][font=宋体]离心[/font][font=Times New Roman]5 min[/font][font=宋体]，取上清液至鸡心瓶中，[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃旋转蒸干[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]加[/font][font=Times New Roman]pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]水[/font]3 mL[font=宋体]洗脱（清汁样品不需要酶解、提取，直接过柱），过阴离子交换柱（使用前用[/font][font=Times New Roman]3 mL[/font][font=宋体]甲醇、[/font][font=Times New Roman]3 mL[/font][font=宋体]水活化），[/font][font=Times New Roman]2 mL [/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]5[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mmol/L[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]乙酸铵溶液、[/font]1 mL[font=宋体]水淋洗，抽干；弃去淋洗液；[/font][font=Times New Roman]2 mL[/font][font=宋体]甲醇洗脱，收集洗脱液于氮吹管中，加[/font][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体]滴冰乙酸，[/font][font=Times New Roman]40[/font][font=宋体]℃氮气吹干，[/font][font=Times New Roman]2 mL pH[/font][/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]4.0[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]水定容洗脱，过水系滤膜，上机测试。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]说明[/font][font=宋体]：[/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体] 展青霉素在碱性条件下不稳定[/font][font=宋体]；[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]GB 5009.185-2016果胶酶(液体):活性≥1500U/g。[/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]展青霉素在反相C18柱上保留较弱，检测时将色谱柱改为对极性化合物保留更强的HSS T3 1.8μm柱。[/font][font=宋体]4、[/font][font=宋体]对饮料清汁样品的前处理，[/font][font=宋体]采用[/font][font=宋体]直接固相萃取净化法，方法简单、安全、可操作性强、结果可靠。[/font][font=宋体]饮料混汁和果酱这样的试样，需要先将样品中的果胶累物质以果胶酶水解，以便于展青霉素能充分的被提取，经过实验发现，采用室温酶解果胶、乙酸乙酯萃取即可将展青霉素充分提取出，此前处理方法操作简单、安全、结果可靠。[/font][font=宋体]果干这类固体试样的试样，需要通过充分均质粉碎才能保证结果的可靠性，经过实验发现，果干类试样要粉碎粉状，用水充分浸泡后才能保证果胶酶能充分接触细胞壁这类的果胶物质，保证展青霉素完全释放出来，从而保证结果的准确性和重现性。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][img=,690,494]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010550585807_4499_2166779_3.png!w690x494.jpg[/img][img=,690,472]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551119814_8081_2166779_3.png!w690x472.jpg[/img][img=,690,509]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551270460_418_2166779_3.png!w690x509.jpg[/img][img=,690,361]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551433257_2654_2166779_3.png!w690x361.jpg[/img][img=,690,281]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010551566256_190_2166779_3.png!w690x281.jpg[/img][img=,690,318]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552115038_7049_2166779_3.png!w690x318.jpg[/img][img=,690,364]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552196545_9998_2166779_3.png!w690x364.jpg[/img][img=,690,426]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552301544_3508_2166779_3.png!w690x426.jpg[/img][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006010552394129_8202_2166779_3.png!w690x424.jpg[/img][/font][/size][/font][font=宋体]检测展青霉素时须注意以下几个方面：[/font][font=宋体][font=宋体][size=10.5000pt]1、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt] 展青霉素在碱性条件下不稳定[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]；[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]GB 5009.185-2016果胶酶(液体):活性≥1500U/g。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]3、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]展青霉素在反相C18柱上保留较弱，检测时将色谱柱改为对极性化合物保留更强的HSS T3 1.8μm柱。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]4、[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]对饮料清汁样品的前处理，[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]采用[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]直接固相萃取净化法，方法简单、安全、可操作性强、结果可靠。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]饮料混汁和果酱这样的试样，需要先将样品中的果胶累物质以果胶酶水解，以便于展青霉素能充分的被提取，经过实验发现，采用室温酶解果胶、乙酸乙酯萃取即可将展青霉素充分提取出，此前处理方法操作简单、安全、结果可靠。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]果干这类固体试样的试样，需要通过充分均质粉碎才能保证结果的可靠性，经过实验发现，果干类试样要粉碎粉状，用水充分浸泡后才能保证果胶酶能充分接触细胞壁这类的果胶物质，保证展青霉素完全释放出来，从而保证结果的准确性和重现性。[/size][/font][/font]

[align=center][b]【国家药品标准】林可霉素利多卡因凝胶的分析[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=right][b]——依据国家药品标准WS-10001-(HD-0140)-2002方法[/b][/align][b]林可霉素利多卡因凝胶[/b]为复方制剂，每克含林可霉素5毫克，利多卡因4毫克。适应症为用于轻度烧伤、创伤及蚊虫叮咬引起的各种皮肤感染。 [img=,193,127]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260834522166_2994_2222981_3.gif!w193x127.jpg[/img] [img=,140,64]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260834520028_3541_2222981_3.gif!w140x64.jpg[/img] 林可霉素 利多卡因 Lincomycin Lidocaine M.W.: 406.54 M.W.: 234.34客户提供林可霉素利多卡因凝胶样品，希望本实验室帮忙通过筛选色谱柱及调节分析条件，依据[color=#ff0000][b]国家药品标准WS-10001-(HD-0140)-2002[/b][/color]方法，实现林可霉素利多卡因凝胶样品的良好分析。首先，使用能在纯水条件下稳定使用的高极性色谱柱[color=#ff0000][b]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ S5 4.6 mm i.d. × 150 mm[/b][/color]，对林可霉素利多卡因凝胶样品进行分析，结果如图1所示，[color=#330099]利多卡因与其峰后杂质之间分离度为1.77[/color]。[align=center][img=,690,437]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260858200006_8607_2222981_3.png!w690x437.jpg[/img][/align][align=center]图1 CAPCELL PAK C[sub]18 [/sub]AQ分析所得色谱图[/align]注：峰上标数字为分离度。[img=,528,205]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260858202566_2695_2222981_3.png!w528x205.jpg[/img]为进一步提高利多卡因与其峰后杂质之间的分离度，在原条件基础上将柱温由30℃降低至25℃，并分别使用 CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ、CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MG及高含碳量ODS色谱柱SUPERIOREX ODS进行分析，结果如图2所示。[align=center][img=,690,490]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260859201516_7229_2222981_3.png!w690x490.jpg[/img][/align][align=center]图2 25℃条件下不同色谱柱分析结果对比[/align]注：峰上标数字为分离度。[img=,637,223]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807260859204236_7198_2222981_3.png!w637x223.jpg[/img]如图2所示，在柱温25℃条件下使用三款色谱柱进行分析，其中，[color=#ff0000][b]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ色谱柱分析结果最好，利多卡因与其峰后杂质分离得到最佳分离，分离度为4.23[/b][/color]；[color=#330099][b]使用CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MG色谱柱进行分析时，利多卡因与其峰后杂质分离度为3.27[/b][/color]；而使用SUPERIOREX ODS色谱柱分析时，利多卡因与其峰后杂质未得到有效分离。综上，在国家药品标准WS-10001-(HD-0140)-2002方法基础上，将色谱柱柱温由30℃降低至25℃，使用高极性色谱柱CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ及中等极性色谱柱CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MG进行分析，均可在25 min内完成林可霉素利多卡因凝胶样品的分析，并得到利多卡因与其峰后杂质之间的良好分离结果。[align=right][/align][align=right][/align][align=right] [/align][align=right]三耀精细化工品销售（中国）有限公司[/align][align=right]技术开发部[/align][align=right]地址：北京经济技术开发区宏达南路5号[/align][align=right]宏达利德工业园1栋418室[/align][align=right]邮编：100176[/align]

2012年9月3日，新加坡发布2012年食品法规。新的食品法规对食品中棒曲霉素和氯丙醇的限量做了规定：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210092141_395625_1641058_3.jpg我国有这方面的限量标准吗？

[b]问题：[b][b][/b]鱼肉中妥布霉素的测定使用的色谱柱货号是？[/b]答案：99506=======================================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；中奖名单：lijing320323(注册ID：lijing320323）荷花仙子（注册ID：v2975525）sixingxing（注册ID：v2889187）dahua1981（注册ID：dahua1981）yy_0324（注册ID：yy_0324）[img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311501507981_2026_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311501485160_4408_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：SPE-UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法基质：鱼肉应用编号：102404化合物：妥布霉素SPE柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-2279.html]ProElut PXC 60mg / 3mL 50/pk[/url]色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-850.html]Platisil CN 5μm 150 x 4.6mm[/url]样品前处理：[b]1.标准品配制[/b](1)单标储备液1000 ug/mL，准确称取妥布霉素，用水配制成1000 ug/mL的储备液。(2)中间液10.0 ug/mL，吸取适量单标储备液1000 ug/mL，用水配制成10 ug/mL的中间液。[b]2.提取[/b](1) 称取样品（鱼肉）5.0g（精确至0.05g），置于50mL离心管中。加入20 mL三氯乙酸水（25 g/L）和2 mL二氯甲烷，涡旋分散，振荡5 min，8000 r/min离心2min，收集上清液；(2) 在上清液中加入5mL乙腈混匀，8000 r/min离心2min，待净化（离心为了去除乙腈水溶解时产生的气泡）。[b]3.净化[/b]ProElut PXC 60mg/3mL（Cat.#68203）[table][tr][td](1)活 化：[/td][td]依次加入3mL甲醇，3 mL水，流出液弃去；[/td][/tr][tr][td](2)上 样：[/td][td]将上样液加入柱中，流出液弃去；[/td][/tr][tr][td](3)淋 洗：(4)洗 脱：[/td][td]依次用5mL水、3 mL甲醇淋洗，流出液弃去；3 mL20%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液；[/td][/tr][tr][td](5)定 容：[/td][td]将洗脱液在40℃水浴下通入氮气吹至0.2mL，然后用流动相重新定容至0.5 mL，上机分析。[/td][/tr][/table]同方法制备基质匹配标准溶液。色谱条件：[b]UPLC 条件：[/b]色谱柱：Platisil CN，150×4.6 mm，5 μm 流 速：0.5 mL/min 进样量：5 μL 柱 温：35 ℃流动相： A：3%甲酸水 B：3%甲酸乙腈 A：B=9:1[b]质谱条件：[/b]电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500 V雾化气压力：60 psi 辅助气压力：60 psi气帘气压力：25 psi 离子源温度：550 ℃[img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/3(10).png[/img]文章出处：天津应用实验室关键字：鱼肉、妥布霉素、SPE-UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法、ProElut PXC、Platisil CN摘要：目前有关妥布霉素检测的文献和标准较少，主要参考标准《GB/T 21323-2007 动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定 高效液相色谱-质谱质谱法》；高效液相色谱-串联质谱(HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS)具有高灵敏度和高特异性，适用于基质复杂、样品组分含量很低的兽药残留的确证分析。 迪马科技开发的《鱼肉中妥布霉素的检测》，采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC固相萃取柱净化和超高效液相色谱-质谱法检测。本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；定量限是20 μg /kg，与国标方法一致；用氰基柱进行分析，峰形和保留时间符合要求；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低；图谱：[img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/2(24).png[/img][img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/1(43).png[/img]