宿主细胞残留检测试

本处理方案是基于磁珠法原理，用于生物制品中rDNA前处理系统，可实现高效、简单且自动化前处理系统。新芝全自动核酸提取仪配套知名品牌的宿主细胞残留 DNA 样本前处理试剂盒（磁珠法），各类样本回收率稳定高达到80%以上，可稳定有效对各生物制品中宿主细胞DNA残留含量的进行监测。

鲲鹏基因提供针对宿主残留DNA检测的整体解决方案，包括样本前处理设备及试剂盒、残留DNA检测试剂盒、荧光定量PCR仪及符合21 CFR Part 11要求的操作分析软件。目前共有CHO、E.coli、Vero及毕赤酵母等4款试剂盒，可用于抗体、重组蛋白及疫苗等生物制品的残留DNA检测。

白皮书《采用先进的细胞分析方案加速病毒生物学和宿主免疫的发现》重点介绍了如何使用Incucyte® 活细胞分析系统和iQue® 3先进的高通量流式细胞术解决这些挑战，从而更加深入地了解病毒感染过程中宿主病原体的相互作用。

生物药物（如单克隆抗体 (mAb)）的使用正在快速增加。生物药物为生物来源，因此即使经过多个纯化步骤，最终产品中仍然可能残留一些低浓度宿主细胞蛋白质 (HCP)。由于它们可能影响产品安全性和功效，因此根据法规要求必须对药品中的 HCP 浓度进行监测和控制。传统上，酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 是定量分析蛋白质治疗药物中 HCP 的标准方法。然而，ELISA 的特异性和覆盖率不足以鉴定并定量分析各种 HCP。因此，LC/MS 技术成为 HCP 分析的选择之一。在 HCP 的 LC/MS 分析过程中，主要挑战在于低丰度 HCP 肽段与高丰度药品肽段的共洗脱。这要求 LC/MS 系统具有更出色的肽段分离度以及宽动态范围。

本应用简报介绍了 mAb 产品中亚 ppm 宿主细胞蛋白质杂质的定量分析方法。本工作流程采用 Agilent AssayMAP Bravo 平台、Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统和Agilent 6495C 三重四极杆 LC/MS 系统。

基因治疗药物的基因组拷贝数、宿主细胞基因组DNA残留、其他生产相关DNA残留（质粒DNA或杆状病毒基因组DNA）、复制性病毒残留、支原体等质控指标必须通过严格测试，以保证相关产品的安全和有效性。数字PCR作为当下各类核酸检测技术平台中最为灵敏、精准的直接定量工具，是完成该类检测任务的最佳选择。

前言宿主细胞蛋白 (HCP) 杂质是生物药物中低浓度的产物相关及工艺相关蛋白质杂质，来源于生产过程中的宿主生物。由于它们可能影响产品安全性和功效，因此根据法规要求必须对药品中的 HCP 进行监测和控制1。传统上，酶联免疫吸附测定法(ELISA) 是定量分析蛋白质治疗药物中 HCP 的标准方法。然而，ELISA 的特异性和覆盖率不足以鉴定并定量分析各种 HCP。因此，LC/MS 技术成为 HCP 分析的另一选择。在 HCP 的 LC/MS 定量分析过程中，主要挑战在于低丰度 HCP 肽段与高丰度药品肽段的共洗脱。因此需要在药品基质的高背景下对低丰度肽进行灵敏而可重现的定量分析。

本应用介绍了用于宿主细胞蛋白质高灵敏度定量分析的工作流程，包括用于样品自动前处理的 AssayMAP Bravo 平台、用于样品分离的 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统、用于数据采集的 Agilent 6495B 三重四极杆系统、用于 MRM 方法开发的 Skyline 软件中的安捷伦自动化工具、用于数据分析的 Skyline 和 Agilent MassHunter 定量分析软件的结合。使用基于多反应监测 (MRM) 的同位素稀释方法，结果显示可准确定量低至亚 ppm(ng/mg) 浓度的 HCP。

本文建立了一种使用岛津三重四极杆液质联用仪检测脂肪细胞培养上清液中肾上腺素和利多卡因残留量的方法。样品经乙腈沉淀蛋白，高速离心、稀释后上机分析。采用外标法定量，在0.1~100 ng/mL范围内，相关系数大于0.999。三个浓度下保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）分别在0.12~0.21 %和0.74~4.44 %之间。该方法灵敏可靠，定量限为0.1 ng/mL；三个浓度样品加标回收率在88.0~110.5 %之间；可为脂肪细胞培养上清液中肾上腺素和利多卡因残留量测定和评估提供参考。

在生物医药领域，磁珠分离技术由于其强大的功能性被广泛应用，可用于细胞分离、核酸提取、细胞活化与扩增等方面。其中细胞分离磁珠的使用可以通过其阳性、阴性的特质，温和地分离出高产量的、纯的、具有活性和功能性的细胞，避免让细胞穿过致密的分离柱，使得分离的细胞保留其天然特征。然而引入磁珠进行分离时常常面临一些尴尬的问题，例如磁珠残留。如何对细胞分离过程中残留的磁珠进行筛选与识别，胤煌科技(YinHuang Technology )从实际应用角度出发，推出YH-MIP系列显微计数图像法粒度分析仪，助力细胞分离磁珠残留精准识别。

采用基于静电场轨道阱高分辨质谱 Q Exactive 平台的非靶标和靶标代谢组学方式研究了麻痹病毒（Cricket paralysis virus, CrPV）感染昆虫 Bm5 细胞后宿主代谢的动态变化情况。研究发现，CrPV 感染导致 Bm5 细胞的代谢具有显着和特定阶段的变化。比如，CrPV 持续感染过程中葡萄糖和谷氨酰胺水平均显着升高，随后在致病期急剧下降。不同代谢产物的丰度和途径分析进一步确定了病毒生命周期不同阶段的特定代谢特征，为病毒感染宿主后的致病过程、疾病分期、以及药物治疗效果提供理论依据。

由异体细胞组成的多层皮肤替代品已被测试用于治疗不愈合的皮肤溃疡。然而，这种非天然皮肤移植不能永久移植，因为它们缺乏对与宿主组织整合重要的皮肤血管网络。在这项研究中，我们描述了使用三维生物打印技术制造一种可植入的多层血管化生物工程皮肤移植物。移植物是使用一个生物墨水包含人类包皮皮肤成纤维细胞(FBs)，人类内皮细胞(ECs)来自脐带血人类内皮细胞群体形成细胞(HECFCs)，和人类胎盘周细胞(PCs)悬浮在老鼠尾巴I型胶原蛋白形成真皮然后打印第二个生物墨水包含人类包皮角质形成细胞(KCs)形成一个表皮。在体外， KCs复制和成熟形成多层屏障，而ECs和pc自组装成相互连接的微血管网络。真皮生物墨水中的pc与ec内衬的血管结构相关，似乎能促进KC的成熟。当这些3D打印的移植物被植入免疫缺陷小鼠的背侧时，人ec内衬结构与从伤口床上产生的小鼠微血管一起接种，并在植入后4周内灌注。打印真皮中pc的存在增强了宿主微血管对移植物的侵袭和表皮网的形成。关键词：皮肤，组织工程，生物打印，再生医学，微血管系统影响声明三维打印可用于生成多层带血管化的人体皮肤移植，这可能会克服目前在无血管皮肤替代品中观察到 的移植物存活的限制。在皮肤生物墨水中包含人周细胞似乎可以促进皮肤和表皮的成熟。

2019年底在武汉爆发的新冠肺炎(2019 novel coronavirus disease, COVID-19)造成国内外乃至全球的大冲击，无论是医药、经济、贸易及各产业体系均受到巨大考验。藉由全球科学家们日以继夜的努力研究，发现新冠肺炎可能的致病基理；其中较为关键的是新冠病毒感染主要是藉由新冠病毒上的S蛋白(spike protein)，专一性的识别攻击人类细胞受体ACE2 (angiotensin converting enzyme 2)进而引起后续的反应。相较于同是冠状病毒的SARS，COVID-19识别人类细胞受体的专一性更强高出20倍1-3。鉴于新冠肺炎启发，本文将回顾利用等温滴定量热法(isothermal titration calorimetry, ITC)及差式扫描量热法(differential scanning calorimetry, DSC)研究病毒相关的技术文献。期望能对抗病毒药物开发、疫苗、检验试剂及基础研究等领域，提供有用的信息。

人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)检测试剂盒人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)抗原、生物素化的人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人黑色素细胞抗体(MC Ab)检测试剂盒人黑色素细胞抗体(MC Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人黑色素细胞抗体(MC Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人黑色素细胞抗体(MC Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人黑色素细胞抗体(MC Ab)抗原、生物素化的人黑色素细胞抗体(MC Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人黑色素细胞抗体(MC Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人细胞毒素相关蛋白A(CagA)检测试剂盒人细胞毒素相关蛋白A(CagA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人细胞毒素相关蛋白A(CagA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人细胞毒素相关蛋白A(CagA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗原、生物素化的人细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞毒素相关蛋白A(CagA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人红细胞生成素(EPO)检测试剂盒人红细胞生成素(EPO)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人红细胞生成素(EPO)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人红细胞生成素(EPO)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人红细胞生成素(EPO)抗原、生物素化的人红细胞生成素(EPO)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人红细胞生成素(EPO)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)检测试剂盒人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)抗原、生物素化的人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)检测试剂盒人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)抗原、生物素化的人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人黑色素细胞刺激素(MSH)检测试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人黑色素细胞刺激素(MSH)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人黑色素细胞刺激素(MSH)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人黑色素细胞刺激素(MSH)抗原、生物素化的人黑色素细胞刺激素(MSH)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人黑色素细胞刺激素(MSH)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人细胞色素C(Cyt-C)检测试剂盒人细胞色素C(Cyt-C)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人细胞色素C(Cyt-C)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人细胞色素C(Cyt-C)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人细胞色素C(Cyt-C)抗原、生物素化的人细胞色素C(Cyt-C)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞色素C(Cyt-C)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人胃泌素细胞抗体(GCA)检测试剂盒人胃泌素细胞抗体(GCA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人胃泌素细胞抗体(GCA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人胃泌素细胞抗体(GCA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人胃泌素细胞抗体(GCA)抗原、生物素化的人胃泌素细胞抗体(GCA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胃泌素细胞抗体(GCA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人细胞色素b561(cytb561)检测试剂盒人细胞色素b561(cytb561)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人细胞色素b561(cytb561)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人细胞色素b561(cytb561)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人细胞色素b561(cytb561)抗原、生物素化的人细胞色素b561(cytb561)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞色素b561(cytb561)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人红细胞生成素受体(EPOR)检测试剂盒人红细胞生成素受体(EPOR)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人红细胞生成素受体(EPOR)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人红细胞生成素受体(EPOR)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人红细胞生成素受体(EPOR)抗原、生物素化的人红细胞生成素受体(EPOR)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人红细胞生成素受体(EPOR)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)检测试剂盒人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)抗原、生物素化的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)检测试剂盒人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)抗原、生物素化的人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

实验原理:带有外源DNA 的重组质粒，在体外构建后，导入宿主细胞，随着细胞的大量复制、繁殖，才能够有机会获得纯的重组质粒DNA，该过程称之为转化过程。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，能容许外源DNA 的载体分子通过。

人红细胞刺激因子(ESF)检测试剂盒人红细胞刺激因子(ESF)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人红细胞刺激因子(ESF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人红细胞刺激因子(ESF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人红细胞刺激因子(ESF)抗原、生物素化的人红细胞刺激因子(ESF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人红细胞刺激因子(ESF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)抗原、生物素化的人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)抗原、生物素化的人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。