顺二十碳三烯酸甲酯

[size=2][color=#dc143c] [/color][color=#d40a00]维权声明：本文为mingzhi0302原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/color][/size] 我从事食品检测行业已经6年了，真正接触脂肪酸测还是在08年初。所以在这方面我并不是做得很好，但是由于这个方法，我从研发到初步的成型整整用了一年的时间。在这一年的研发过程中，我走了很多的歪路，但也从中学到很多，现在我把我的经验写出来让大家分享一下，同时也希望各位能给我指出我的不足之处，谢谢!　　当时公司提出要开发食品营养标签的测试，这个营养标签中就有二个是用到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定的，脂肪酸就其中的一个。　　虽然在大学里就有听说过饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、反式脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸这个东西，但是我还真没做过。　　开始拿到方法当时还是GB/T17376-1998和17377-1998 我当时拿着这两个方法是看了又看看了又看就是看不明白他是怎么计算的。当我搞明白计算方法后，又来了一个难题了，那就是为什么这个计算又分面积归一化法和内标法呢?　　由于我主要说的是关于脂肪酸的测定，那么对于以上问题我是怎么去做的，在后面可能会讲到，如果没有讲到的大家也可以给我留言大家相互交流。　　以下我来说说关于GCMS测定脂肪酸的方法。　　我们所有标品是已经甲脂化好的标液。34种混合标液。　　这37种混合标准品要一针全部走出来且要全部分开那可不是一件容易的事，所以当时在做这个方法时，当时标液都用去了一半。　　由于之前在想60m的柱子(ZB-624)应该就可以把这34种物质全部份开，但是没想怎么不管我用多度的流速多小的升温程序都是无法把C18里的几个正反式分开，分得最好时也是有几个三个峰连在一齐，是后实在不行，只能重新购买CP-Sil 88 VARIAN 100m的柱子。　　100m的柱子购买回来后就是一个不段的调试，以更能最好的把34种脂肪酸全部分开，这程就不多说了，现在就说说我们最终方法。进样口温度220度，柱温箱初温150度保持15分钟后以3度每分钟的到220度保持3分钟。柱流速我采用的是恒流模试1ml/min。　　MS从第8分钟后才打开。　　也许在些会有很多人在想我为什么要以这个程序，我在些说明一下，每个方法的建立跟操作者是一定的关系，由于本人的一贯的做法都是以节俭时间为主，因脂肪酸在150度才会出峰，所以我会把最低温度设成150度，而脂肪酸基本上在220度就完全出完了，所以最我的温度也只设到220度。哈哈，人懒就是那样的，还有一定会有人在想为什么要用3度每分钟做为升温速率而不用2度或4度每分钟呢?先说一下用4度每分钟时C18：2中顺反异构体基本上有一半重合在一齐了。如果用2度每分钟时C18里的好几个峰基本上也是重合在一齐了，因为升温速率高了各组分的出峰时间都快了，所以会导致沸点相近的物质就会一齐出来了，而升温速率低的会由于溶易出现拖尾从而导致峰从叠。有点一须要注意的是我们做样品时跟我们进标液并不一样，标液浓度的比例基本一致，所以我们选择进样时就不会因为某一样品浓度大而把其它的浓度小的物质峰所掩盖了，而样品却并不是34种脂肪酸都会出现，也有可能会出现34种以外的物质的峰，有些物质的其C18：1油酸的峰非常大经常在色谱图上看其保留时间与C18：1反油酸的时间最接近，而自然界中反式脂肪酸是不可能存在的，但由于些峰的保留时间与C18：1反油酸是最接近的你怎么去判断其是油酸还是反油酸呢?在此之前我用过质谱图来判断但是由于油酸与反油酸均是C18：1那他的质谱图可以说是完全一样的，那么这样用色谱和质谱均无法判断其是顺的还是反的呢?最后想到了把样品稀释到与标准溶液相接进的浓度时发现该物质的保留时间往回靠了一点，正好与油酸的保留时间相重叠，这样就可以判断其是顺式还是反式，到这里就会有很多人说竟然这样就可以判断了为什么还要用质谱做，而不用色谱做呢?大家想过没有脂肪酸总共有多少种呢?无计其数，如果我们用色谱图做的话那么就有可能把一些不是脂肪酸的物质当做脂肪酸计算进去了，而是脂肪酸的却没有计算进去，那么我们的测试就会有很大的结果差异，虽然说质谱是一个半定量的一种检测器，但我个人觉得只要不出现很大的干扰质谱的定量还是非常的准确的。　　以下的色谱图大家可以看看这个是我所用的条件分出来的34种物质的峰，分得还可以吧，我所用的GCMS是Agilent 6890N-5975, CP-Sil 88 VARIAN 100m的柱子,但是大家使用时也不一定要按我这个条件选择啊，这个图只是跟我的仪器还用我使用的色谱柱有关，如果色谱柱已经用了很久的话可能用这条件走出来的峰就会很差的哦。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291156_233039_2961690_3.jpg[/img]　　各组份为　　丁酸甲酯(C4:0) Methyl Butyrate [623-42-7]　　己酸甲酯(C6:0) Methyl Caproate [106-70-7]　　辛酸甲酯(C8:0) Methyl Caprylate [111-11-5]　　癸酸甲酯(C10:0) Methyl Pelargonate [110-42-9]　　十一烷酸甲酯(C11:0) Methyl Hendecanoate [1731-86-8]　　十二烷酸甲酯(C12:0)/月桂酸甲酯 Methyl Laurate [111-82-0]　　十三烷酸甲酯(C13:0) Methyl Tridecanoate [1731-88-0]　　十四烷酸甲酯(C14:0)/豆蔻酸甲酯 Methyl Myristate [124-10-7]　　十五烷酸甲酯(C15:0) Methyl Pentadecanoate [7132-64-1]　　十六烷酸甲酯(C16:0)/棕榈酸甲酯 Methyl Palmitate [112-39-0]　　十七烷酸甲酯(C15:0) Methyl Margarate　　十八烷酸甲酯(C18:0)/硬脂酸甲酯 Methyl Stearate [112-61-8]　　二十烷酸甲酯(C20:0)/花生酸甲酯 Methyl Arachidate [1120-28-1]　　二十二烷酸甲酯(C22:0)/山嵛酸甲酯 Methyl Behenate [929-77-1]　　十四碳烯酸甲酯(C14:1,顺-9) Methyl Myristoleate [56219-06-8]　　十五碳烯酸甲酯(C15:1,顺-10) Methyl Cis-10-Pentadecenoate　　十六碳烯酸甲酯(C16:1,顺-9)/棕榈油酸甲酯 Methyl Palmitoleate [1120-25-8]　　十七碳烯酸甲酯(C17:1,顺-10) Methyl Cis-10-Heptadecenoate　　十八碳烯酸甲酯(C18:1,顺-9)/油酸甲酯 Methyl Oleate [112-62-9]　　十八碳烯酸甲酯(C18:1T,反-9)/反油酸甲酯 Methyl Elaidate [2462-84-2]　　十八碳二烯酸甲酯(C18:2,顺-9,12)/亚油酸甲酯 Methyl Linoleate [112-63-0]　　十八碳三烯酸甲酯(C18:3,顺-9,12,15)/α-亚麻酸甲酯 Methyl Alpha-Linolenate　　十八碳三烯酸甲酯(C18:3,顺-6,9,12)/γ-亚麻酸甲酯 Methyl Gamma-Linolenate　　二十碳烯酸甲酯(C20:1T,反-11) Methyl Trans-11-Eicosenoate　　二十碳烯酸甲酯(C20:1,顺-11)/花生一烯酸甲酯 Methyl Cis-11-Eicosenoate　　二十碳二烯酸甲酯(C20:2,顺-11,14) Methyl Cis-11,14-Eicosadienoate　　二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-8,11,14) Methyl Homo-Gamma-Linolenate　　二十碳三烯酸甲酯(C20:3,顺-11,14,17) Methyl Cis-11,14,17-Eicosatrienoate　　二十碳四烯酸甲酯(C20:4,顺-5,8,11,14)/花生四烯酸甲酯(ARA-M) Methyl Cis-5,8,11,14-Eicosatetraenoate　　二十二碳烯酸甲酯(C22:1,顺-13)/顺芥子酸甲酯 Methyl Erucate [1120-34-9]　　二十二碳烯酸甲酯(C22:1T,反-13) Methyl Brassidate　　二十二碳二烯酸甲酯(C22:2,顺-13,16) Methyl Cis-13,16-Docosadienoate　　二十二碳六烯酸甲酯(顺-4,7,10,13,16,19)(DHA-M) Methyl Cis-4,7,10,13,16,19-Docosahexaenoate(Dha-M)　　二十四碳烯酸甲酯(C24:1,顺-15)/神经酸甲酯 Methyl Nervonate [2733-88-2]　　[b]结果的计算[/b]　　现在行业当中有两种计算方法其一是面积归一化法，那就是用百分比来计算的。　　别一种是内标法计算，个人觉得内标法更准确一点所以在些把内标法的计数公式列出来大家看看：　　脂肪酸甲酯响应因子Ri[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291200_233040_2961690_3.jpg[/img]　样品中总脂肪的含量　[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007291200_233042_2961690_3.jpg[/img]　　式中：　　monounsaturated Wi—单不饱和脂肪重量　　polyunsaturated Wi—多不饱和脂肪重量　　如果大家在计算当明有什么问题可以随时给我发站短，我会一一给你们解答，也欢迎大家来探讨一下。谢谢

10，抽取5个版友）；中奖名单：dyd3183621（注册ID：dyd3183621）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）莫名其妙(注册ID：moyueqiu)吕梁山（注册ID：shih20j07）翠湖园（注册ID：hhx050）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701041507_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701041507_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================脂肪酸甲酯( 顺/ 反异构体)方法：GC基质：标准溶液应用编号：101870化合物：1. 硬脂酸甲酯 C18:0 2. 反-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 3. 反-9- 油酸甲酯 C18:1 4. 反-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 5. 顺-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 6. 顺-9- 油酸甲酯 C18:1 7. 顺-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 8. 顺- 9,12- 甲基亚油酸 C18:2固定相：DM-2560样品前处理：10 mg/m 顺反脂肪酸甲酯混标, 溶于二氯甲烷色谱条件：进样方式分流, 20:1, 1 μL, 225 ℃ 柱温100 ℃ ( 4 min ) - 240 ℃ ( 10 min ), 3 ℃/min 载气H2, 1.2 mL/min 检测器FID, 250 ℃谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/11(17).png图例：1. 硬脂酸甲酯 C18:0 2. 反-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 3. 反-9- 油酸甲酯 C18:1 4. 反-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 5. 顺-6- 十八烯酸甲酯 C18:1 6. 顺-9- 油酸甲酯 C18:1 7. 顺-11- 十八烯酸甲酯 C18:1 8. 顺- 9,12- 甲基亚油酸 C18:2

固相萃取-高效液相色谱测定淀粉及淀粉制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的含量顺丁烯二酸也叫马来酸，顺丁烯二酸酐通过水解可以直接转化为顺丁烯二酸。作为一种人工合成的有机酸，顺丁烯二酸是重要的有机化工原料，顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的用途非常广泛，主要用于制造混凝土高效减水剂、不饱和聚酯树脂、醇酸树脂漆、农药、润滑油添加剂等, 经深加工可生产1、4-丁二醇、酒石酸、富马、酸苹果酸等化工产品。作为淀粉处理剂，主要的作用是改善食品的弹性和黏性，以及改善食品外观光泽度,同时这种物质还可以增加淀粉的保质期。但是顺丁烯二酸这种物质并不在食品添加剂卫生标准（GB2760-2011）允许添加的食品添加剂目录中，也就是说马来酸这种物质并不是合法食品添加剂，如果用其来生产淀粉，这种行为也是违法。有研究发现顺丁烯二酸能损害眼部及肾脏。市场上，有部分企业为了提高淀粉的弹性、粘度和稳定性，在食用淀粉中加入大量顺丁烯二酸淀粉酯，但由于技术等条件的限制，作为原料的顺丁烯二酸酐存在着大量的残留，从而使食用淀粉存在着巨大的食品安全隐患，因此，建立一种检测食用淀粉中的顺丁烯二酸及顺丁烯二酸酐的方法是非常必要的。顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐的检测方法化学滴定法，气相色谱法，离子色谱法，毛细管电泳法和高效液相色谱法等。由于技术条件的限制化学滴定法无法对样品中较低含量的顺丁烯二酸准确定量；毛细管电泳法由于技术条件的限制仍无法大规模应用；而气相色谱法和离子色谱法在应用方法条件上对检测的样品的限制使其很难应用在淀粉和淀粉制品上。目前，检测顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐比较准确有效的方法是高效液相色谱法，样品中残留的顺丁烯二酸酐通过水解也转化为顺丁烯二酸进行检测。然而由于淀粉及淀粉产品种类较多，成分复杂，而顺丁烯二酸的检测波长较低，在检测过程中存在很多的干扰，对结果的判断和准确定量有较大的影响，本实验利用LC-SAX 强阴离子交换固相萃取柱对样品进行净化，以去除复杂样品中的基质干扰，提高样品纯度和检测灵敏度。方法操作简单，可靠，适用于对淀粉及淀粉制品中顺丁烯二酸和顺丁烯二酸酐进行准确的定性及定量。1材料与方法1.1材料与试剂顺丁烯二酸标准品(99% ，Sigma 公司) 。实验样品: 小麦粉，马铃薯淀粉，玉米淀粉，地瓜粉，变性淀粉，珍珠粉圆，复合淀粉均购于市场。甲醇( 色谱级) ，三氟乙酸( 色谱纯) ，无水乙醇( 分析纯) ，氨水（分析纯），硫酸（分析纯），氢氧化钠（分析纯）；强阴离子交换固相萃取柱 CNWBOND SAX 固相萃取小柱 500mg，6ml（购于上海安谱公司）。1.2仪器与设备Agilent1200 高效液相色谱仪-配二极管阵列DAD检测器( 美国Agilent 公司) ，; KQ5200超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司；3k-3000 型高速离心机(最高转速15000r/min) 德国 Sigma 公司；Mili-Q 纯水系统美国Milipore 公司。1.3方法1.3.1标准溶液的制备标准储备溶液(1.0mg/mL)的配制：称取顺丁烯二酸0.1000g于100mL 容量瓶中，用水溶解并定容至刻度线，充分摇匀备用。此溶液于4 ℃冰箱中可储存3 个月。将标准储备溶液用水配制成 0.5、5.0、50.0、100.0、200.0μg/mL 混合系列标准溶液，使用前配制。1.3.2试样处理准确称取2.5g样品于50mL 塑料离心管中，加乙醇水（1：1）定容至刻度，充分摇匀，超声波提取10min，以3000r/min离心3min；取5.0mL 上清液加入一滴酚酞指示剂，取液用体积分数5% 氨水调至溶液变为浅红色，将液转移至已经过活化平衡的SAX 固相萃取柱中以自然流速过柱，待样品全部吸附后用3 mL水淋洗，流速约3 mL/min，抽至近干后，用2ml 0.1%硫酸以不超过1 mL/min 流速洗脱。洗脱液过滤后，供HPLC 分析。1.3.3液相色谱操作条件色谱柱：CNW®Athena C18-WP色谱柱(4.6mm × 250mm，5μm)；流动相：0.1mol/LCF3COOH；流速1.0mL/min；检测波长：215nm；进样体积：20μL；柱温：25℃。1.3.4测定步骤将标准工作溶液按照质量浓度由低到高的顺序进样测定，在215nm 波长处，以色谱图中的峰面积对其质量浓度绘制标准曲线。试样溶液进样后，以色谱图中的保留时间及相应的光谱图定性，峰面

[align=center][b][img=,600,293]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520373979_4565_932_3.gif!w495x242.jpg[/img][/b][/align][b]鱼丸中的顺丁烯二酸[/b]鱼丸！一种在我们的餐桌上会经常见到的鱼肉衍生品。它没有刺，可以让你吃的更过瘾，而且呢也更利于保存，不管是拿来做汤或者涮火锅都是非常棒的选择，他的同胞兄弟还有虾滑鱼滑等等。我们今天就给大家带来我们日常的生活中很常见的一种添加剂，顺丁烯二酸也叫马来酸。它在我们的日常生活中很常见，在果汁，茶饮，运动饮料中经常会见到他的身影，用来增强特殊果香味，来增强口感。这种添加剂在其他的食品中也会出现，我们今天就一起来看一下，在如此鲜美的鱼丸中顺丁烯二酸的检测情况。[b]一-适用范围[/b]适用于鱼丸中顺丁烯二酸的检测。[b]二-提取步骤[/b]称取1g鱼丸1、用10mL 50%乙醇提取，超声10min，离心8000rpm 5min，移取上清液；2、重复（1）过程，合并上清液，用5%氨水PH调至8左右，待净化。[b]三-SPE净化步骤[/b]SPE柱：月旭WelchromSAX规格：150mg/6mL。活化：5mL 甲醇、5mL 水，弃去；上样：待净化液取4mL上样，控制流速，不宜过快，弃去；淋洗：3mL水，弃去，抽干；洗脱：5mL的0.1%硫酸，抽干，收集于离心管中，过0.22μm有机滤膜，供液相色谱仪测定。[b]四-色谱条件[/b]色谱柱：月旭Xtimate C18 4.6×250mm,5μm；流动相：A-0.1%磷酸水，B-甲醇（A:B=98：2混匀走单泵）；流速：1.000mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；检测波长：214nm。[align=left][b]五-谱图和加标回收率结果[/b][/align][align=center][b][img=,600,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520424464_8327_932_3.jpg!w690x386.jpg[/img][/b][/align][align=center]图1.顺丁烯二酸0.5mg/L标准图谱[/align][align=center][b][img=,600,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520468869_1163_932_3.jpg!w690x386.jpg[/img][/b][/align][align=center]图2.鱼丸样过柱图谱[/align][align=center][b][img=,600,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520502202_1067_932_3.jpg!w690x386.jpg[/img][/b][/align][align=center]图3.顺丁烯二酸鱼丸样加标12.5mg/kg过柱图谱[/align][align=center][b][img=,600,335]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520540286_1398_932_3.jpg!w690x386.jpg[/img][/b][/align][align=center]图4.顺丁烯二酸鱼丸样加标50mg/kg过柱图谱[/align][align=center][b][img=,600,147]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520567559_7391_932_3.png!w650x160.jpg[/img][/b][/align][align=center]表1.顺丁烯二酸过SAX小柱加标回收表[/align][b]六-相关产品信息[/b][align=center][b][b][img=,600,317]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909251520598272_2284_932_3.jpg!w690x365.jpg[/img][/b][/b][/align]

[color=#444444]请质谱大神标出二十碳五烯酸ms/ms的断裂方式。[/color][color=#444444][img=,494,131]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907301521312800_5170_1849104_3.jpg!w494x131.jpg[/img][img=,538,533]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907301521315459_6459_1849104_3.jpg!w538x533.jpg[/img][/color]

继邻苯二甲酸酯事件之后，台湾再掀“毒淀粉”风波。被滥用的顺丁烯二酸，即马来酸一种是工业原料，价格与合格淀粉相差4 到6 倍，加入淀粉后可增加食物的弹性、黏性及外观光亮度，其危害目前说法不一，怀疑会严重损害肾功能。本实验室新鲜出炉顺丁烯二酸检测方法和图谱，拿来分享，后续还会增加新的样品检测结果。10ppm 顺丁烯二酸对照品图谱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/05/201305311328_442458_2456076_3.png