谷氨酸钠属于氨基酸类产品，俗称味精，是食品工业中用量最大的鲜味剂。它作为一种增加食品风味的食品添加剂，主要用于烹调、调味品、快餐方便食品、肉制品、水产制品和汤料等方面。谷氨酸钠曾一度让世界各国消费者对其食用的安全性产生怀疑，FAO／WHO对其进行了各种毒性试验，试验结果表明食用谷氨酸钠是安全的。这无疑对谷氨酸钠的消费起了极大的促销作用。近年来，我国的谷氨酸钠出口逐年增加，也是目前我国出口量最大的单品种氨基酸。如何对出口谷氨酸钠准确有效地实施检验检疫，是当前不容忽视的问题。El前，根据《出入境检验检疫机构实施检验检疫的进出境商品El录》的要求，出口谷氨酸钠主要实施检疫，未列明检验要求。笔者根据实际工作需要，结合该产品的特性，从以下几点谈谈出口谷氨酸钠无需检疫更需检验的问题。 一、复杂的加工工艺使谷氨酸钠失去了检疫的意义 谷氨酸钠即味精的生产加工工艺步骤为：玉米原料一淀粉一加水调浆一糖化一加火碱中和一用活性炭脱色一过滤一发酵一提取谷氨酸一加纯碱中和一脱色一过滤一蒸发、结晶一分离一湿谷氨酸钠一烘干一筛分一包装一成品谷氨酸钠(味精)。 上述工艺流程图中可以看出，玉米原料经过发酵、酸碱的中和以及高温结 晶、烘干等过程处理，形态性质已发生了质的变化，疫情风险已不复存在，不需检疫。 二、统一掌握检验检疫类别。确定检验方式 《出入境检验检疫机构实施检验检疫的进出境商品El录》(简称《检验检疫法检El录》)中所列谷氨酸钠的商品编码是2922422O00，实施的检验检疫类别是M。P／Q即进口商品检验、进境动植物、动植物产品检疫／出境动植物、动植物产品检疫。而味精报检出口时的检验检疫类别，在《检验检疫法检目录》中所列味精的商品编码是2l03901O00，实施的检验检疫类别是R 即进口食品卫生监督检验／出口食品卫生监督检验。实际上，谷氨酸钠和味精是同一种商品，仅名称不同而已，从上述味精即谷氨酸钠的加工工艺来看，实施检疫已没有多大意义，相反，对加工过程中添加的化学物质所形成的残留实施检测则更显得重要些。所以，谷氨酸钠作为食品，需进行食品卫生检验即R／S。
大规模动物细胞培养的问题及对策动物细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已成为医药生物高技术产业的重要部分。由于动物细胞体外培养的生物学特性、相关产品结构的复杂性和质量以及一致性要求，动 物细胞大规模培养技术仍难于满足具有重要医用价值生物制品的规模生产的需求，迫切需要进一步研究和发展细胞培养工艺。目前，世界众多研究领域集中在优化细胞培养环境、改变细胞特性、提高产品的产率并保证其质量和一致性上。1.细胞培养环境细 胞培养环境中抑制因素的积聚是提高细胞密度的主要限制因素。体外动物细胞培养中氨离子的积累是抑制细胞生长的主要因素之一。氨的积聚使细胞内UDP氨基己 糖(UDP-N-乙酰葡糖胺和UDP-N-乙酰半乳糖胺)增加，影响细胞的生长及蛋白的糖基化过程。氨抑制Gln代谢途径，使Asp和Glu消耗增加。细胞消耗Asp增加，可能是细胞线粒体膜上苹果酸－天冬氨酸泵转运NADH加快，使细胞维持糖酵解途径的需要。Asp消耗增加可能会从Gln代谢多经天冬氨 酸转氨酶途径而不是丙氨酸转氨酶或谷氨酸脱氢酶途径得以补偿。氨来源于两方面：一是直接来源于培养基，一是细胞代谢所产生。但两者都涉及谷氨酰胺，因此需要防止培养基中Gln自然分解，限制Gln用量，并尽量去除培养基中的氨。乳酸是细胞糖代谢的产物。高浓度乳酸会抑制乳酸脱氢酶(LDH），从而减少乳酸产生。LDH受抑制后阻止了NADH向NAD的再生及其偶联的丙酮酸/乳酸转 换，从而导致NADH[font=T
我们公司的主要产品是鸡汁调味料和烧肉汁调味料，鸡汁调味料其中一个测定的方面便是谷氨酸钠.有一种产品叫鸡汁豆腐~就是鸡汁里添加了酱油，糖盐等一些东西，对鸡汁豆腐进行谷氨酸钠的测定，使用的是GB上的方法，但是测定出来的结果是空白值比鸡汁豆腐要大，仪器和方法都没有问题的。但就是不知道是什么原因，求各位同仁帮我找找问题到底在什么地方了！谢谢了=.=
1培养基中丙酮酸钠的作用是什么？答：丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。2GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？答：GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。3二价离子抑制胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？答：二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。4细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？答：不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下pH8.0、温度37oC其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。通常使用的消化液浓度为：（1）0.05％胰蛋白酶＋0.02％EDTA；（2）0.25% 胰蛋白酶 多数细胞传代消化可使用0.25％胰蛋白酶＋0.02％EDTA这种消化液。
某标明为含谷氨酸钠99.0%的味精，挑选出其园粒状的结晶溶于水后，加入硝酸银溶液，有白色沉淀产生，证明该味精()。 A、纯度较高 B、掺有明矾 C、掺有白砂糖 D、掺有食盐
在检测中，我们做到个加盐味精谷氨酸钠含量80，盐含量39。一般加盐味精中主要就是谷氨酸钠和盐，其含量之和应该小于100。为什么加盐味精中谷氨酸钠和盐含量之和大于100？
[color=#444444]请教各位高手：调味品中的谷氨酸钠的含量检测一般都用甲醛法，现在我的样品是经过高温熬制的，里面的谷氨酸钠很可能变成了焦谷氨酸钠，这样用甲醛法检测的结果是否会受到影响？增高还是降低？[/color]
[font='calibri'][size=24px]谷氨酸钠及鲜味调味剂浅谈[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]苏志扬[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]2021.7[/size][/font][font='times new roman'][size=24px].[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]24[/size][/font][align=center][/align][align=center][font='黑体'][size=20px]谷氨酸钠及鲜味调味剂浅谈[/size][/font][/align][font='times new roman']摘要：[/font][font='times new roman']味精，或谷氨酸钠，是世界上使用最广泛的调味剂和增鲜剂之一，[/font][font='times new roman']在生活及生产中有广泛的应用，本文就此为起点，对以谷氨酸钠为代表鲜味调味剂进行了进一步了解，总结了其生产，呈味机理等各方面信息。[/font][font='times new roman']关键词：[/font][font='times new roman'][size=14px]谷氨酸钠，鲜味[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]剂[/size][/font][font='times new roman'][size=14px]，调味剂，生产标准[/size][/font][align=left][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]一、[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]谷氨酸钠基本信息与研究历史[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman']谷氨酸钠（[/font][font='times new roman']MSG[/font][font='times new roman']，分子式[/font][font='times new roman']C[/font][font='times new roman'][size=13px]5[/size][/font][font='times new roman']H[/font][font='times new roman'][size=13px]8[/size][/font][font='times new roman']NNaO[/font][font='times new roman'][size=13px]4[/size][/font][font='times new roman']），化学名α[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']氨基戊二酸一钠，是谷氨酸的钠盐。为白色晶体，易溶于水[/font][font='times new roman']，有强烈的肉类鲜味[/font][font='times new roman']。[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108042205353376_4340_1608728_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][color=#000000]图[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]1. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]谷氨酸钠分子结构[/color][/font][/align][font='times new roman'][color=#000000]关于“鲜味”[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]的概念事实上很早就已形成，代表的是一种能感到愉快病提高食欲的综合味感，我国在宋代时就有对鲜味的记载，清代时人们更是普遍接受了鲜味的说法。[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]而关于呈鲜物质成分的报告可以追溯至[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]1[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]908[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]年，日本学者池田菊苗教授从海带中分离出了谷氨酸。虽然在[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]1[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]866[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]年，德国人雷哈生就利用硫酸水解小麦面筋制得谷氨酸，但池田教授不仅分离出谷氨酸，并且提出鲜味的概念，命名为“[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]u[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]mami[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]”。他还试验了许多谷氨酸盐的味觉特性，在其中以谷氨酸钠可溶性最好，味道最佳，且易于结晶，他便为这一产物命名并为生产谷氨酸钠申请了专利。[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]就在第二年，[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]1[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]909[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]年铃木兄弟开始商业化生产，这是世界上首次制成谷氨酸钠，味精工业就此产生。[/color][/font][align=left][font='times new roman'][size=18px]二、[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]其他鲜味成分与呈味机理概述[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]1. [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]其他鲜味剂[/size][/font][/align][align=left][font='calibri']事实上，能够表现出鲜味的物质非常多，目前已知的鲜味成分主要为有机酸类，有机碱类，游离氨基酸及其盐类，核苷酸及其盐类，肽类等[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]）[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]有机酸[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']具有鲜味的有机酸主要是琥珀酸钠，[/font][font='calibri']多存在于贝类等海产品中，香菇中也有存在，我国批准使用的有机酸类鲜味剂仅有琥珀酸二钠，主要用于酒，饮料，糖果等。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]2[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]）[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]有机碱[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']典型代表有甜菜碱和氧化三甲胺，在动、植、微生物中分布广泛，不仅可提高鲜味，也可与其他呈味物质共同作用是海产品呈现特有的鲜味。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]3[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]）[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]游离氨基酸[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']谷氨酸与天冬氨酸是两种主要呈鲜味的氨基酸，食物中游离的谷氨酸与天冬氨酸是影响食物特征风味的主要因素。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]4[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]）[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]核苷酸[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']核苷酸类的鲜味剂在食品鲜味呈鲜方面也有重要贡献。目前发现的有鲜味特性的核苷酸及其衍生物有3[/font][font='calibri']0[/font][font='calibri']余种，以5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']肌苷酸（5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']IMP），5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']鸟苷酸（5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']GMP）和5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']腺苷酸（5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']AMP）为代表。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]（[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]5[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]）[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=14px][color=#000000]肽类[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']主要是一些从食物中提取的小分子肽[/font][font='calibri']，典型如1[/font][font='calibri']978[/font][font='calibri']年分离得的鲜味肽（氨基酸序列为[/font][font='calibri']Lys-Gly-Asp-Glu-Glu-Ser-Leu-Ala 的辛肽[/font][font='calibri']）,其来源极广，在蛋白质含量丰富且有良好滋味的食物中均存在，不仅可直接增强食物口感，也可与食盐，谷氨酸钠等相互作用，提升食品口感。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]2.[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]呈鲜机理简述[/size][/font][/align][align=left] [font='calibri']影响鲜味的因素主要有温度、盐、p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']、含水量及鲜味成分之间的协同效应。[/font][/align][align=left][font='calibri']谷氨酸钠的呈味强度可随p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']的改变产生咸、鲜、酸的风味变化。当p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']为5[/font][font='calibri'].5[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']8.0[/font][font='calibri']时鲜味最强，小于4[/font][font='calibri'].0[/font][font='calibri']时[/font][font='calibri']鲜味降低，并随着p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']下降转为酸味，而当p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']大于8[/font][font='calibri'].0[/font][font='calibri']时酸味消失。[/font][font='calibri']而L[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']谷氨酸钠在p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']小于5的环境下如果长时间受热会发生分子内脱水，形成焦性谷氨酸，使得鲜味消失。而其他的鲜味剂鲜味最强的p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']范围不尽相同，不[/font][font='calibri']再[/font][font='calibri']赘述。[/font][/align][align=left][font='calibri']鲜味成分之间的增效作用主要有两种：对比作用和相乘（协同）作用，鲜味成分之间的增效效应属于协同作用，这可是鲜味大大提高，最高可达到单独成分的八倍之多。有研究阐明谷氨酸与5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']核苷酸与受体蛋白相互结合，使其空间构象改变[/font][font='calibri']，暴露出原本隐藏的受体部位[/font][font='calibri']而产生协同作用[/font][font='calibri']。谷氨酸与肌苷酸间的作用在其比例为1:[/font][font='calibri']1[/font][font='calibri']时最为明显，可比单独使用谷氨酸的味觉鲜度提高七倍。[/font][/align][align=left][font='calibri']除此之外，不同的氨基酸类或核苷酸类鲜味成分之间也有相互作用。举例而言，核苷酸类的鲜味成分若配合使用克明显降低味觉阈值，提高增味效果。而氨基酸之间的协同作用，典型如[/font][font='calibri']甘氨酸和[/font][font='calibri']L[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']丙氨酸——[/font][font='calibri']两者[/font][font='calibri']本身[/font][font='calibri']都[/font][font='calibri']具有甜味，在与[/font][font='calibri']诸如谷氨酸钠这样的鲜味物质[/font][font='calibri']共存时，也有有效增鲜的作用。[/font][/align][align=left][font='calibri']无机离子对于鲜味的呈现也有重要作用。当去除钠离子与氯离子后，谷氨酸钠鲜味会消失，而去除鲜味物质后又只有无机金属离子的咸味，这表明无机离子并不会表现出鲜味，而其实质可能是由于其与鲜味物质相作用而体现出了鲜美的滋味。以谷氨酸钠为例，它所电离出的谷氨酸虽然具有鲜味，但必须要有大量的钠离子（或者其他碱金属离子）包围住这种负离子，这样才易被鲜味受所接受，而谷氨酸钠自身所电离出的钠离子又不足以完全包裹负离[/font][font='calibri']子，因此必须靠食盐来供给所缺失的钠离子。但是，当食盐过量时，由钠离子和氯离子所产生的咸味又会掩盖谷氨酸的鲜味。而谷氨酸二钠虽然能电离出更多的钠离子，但由于谷氨酸二钠本身是谷氨酸钠在碱性条件下形成的，其氨基被破坏，也就意味这谷氨酸表征鲜味的基团被破坏，使得谷氨酸二钠反倒不表现出鲜味。[/font][/align][align=left][font='calibri']而鲜味是由鲜味成分与G蛋白偶联受体作用产生的——鲜味物质激活受体，在细胞内启动一系列复杂的信号传递过程，最后经味觉神经传入大脑味觉中枢，产生鲜味。[/font][/align][align=left][font='calibri']鲜味成分入口后先与舌上皮的味蕾、味细胞及味觉受体作用，产生味感，再由与味觉相关的跨膜G蛋白偶联受体，产生级联放大作用和信号转导，从而诱导细胞电位变化，使得味蕾中特异的离子通道发生改变，将味觉信号经神经传导给大脑。[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108042205355036_6600_1608728_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][color=#000000]图[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]2[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]鲜味分子的识别与信号传导[/color][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]引自[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]刘源[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]王文利[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]张丹妮[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000].[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]食品鲜味研究进展[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000][J].[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]中国食品学报[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],2017,17(09):1-10.[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']G蛋白在接受信号后，其[/font][font='calibri']β[/font][font='calibri']及[/font][font='calibri']γ[/font][font='calibri']两亚基将分离，从而激活磷脂酸酶，水解磷脂酰肌醇二磷酸，进而产生两个第二信使——1,[/font][font='calibri']4[/font][font='calibri'],[/font][font='calibri']5[/font][font='calibri']-肌醇三磷酸和二酯酰甘油。肌醇三磷酸与肌醇三磷酸受体结合后，导致细胞内钙库[/font][font='calibri']中的钙离子释放，胞内钙离子浓度上升，使得瞬时受体电位通道打开，钠离子随之内流，这导致膜去极性化，由此而产生了动作电位并释放ATP。这些被释放的ATP将作为神经递质，由膜联蛋白通道传入神经纤维上的嘌呤受体。[/font][/align][align=left][font='calibri']对于呈鲜分子，必须具有带正[/font][font='calibri']电[/font][font='calibri']、带负电荷[/font][font='calibri']和[/font][font='calibri']亲水性残基分子团，三种分子团分别接触对应的感受器才能令人感受到鲜味。以谷氨酸钠为例，其鲜味主要是由[/font][font='calibri']α[/font][font='calibri']-NH[/font][font='calibri'][size=13px]3[/size][/font][font='calibri'][size=13px]+[/size][/font][font='calibri']和[/font][font='calibri']γ[/font][font='calibri']-COO[/font][font='calibri'][size=13px]-[/size][/font][font='calibri']两个静电基团[/font][font='calibri']互相吸引而形成五元环结构。[/font][font='calibri']对于呈鲜的氨基酸，事实上都可以归属于谷氨酸钠类型，它们的共同是是都具有一个[/font][font='calibri'][size=13px]-[/size][/font][font='calibri']O-(C)[/font][font='calibri'][size=13px]n[/size][/font][font='calibri']-O[/font][font='calibri'][size=13px]-[/size][/font][font='calibri']（n[/font][font='calibri']=3-9[/font][font='calibri']）的骨架结构，当n[/font][font='calibri']=5[/font][font='calibri']时其鲜味最强，而当n[/font][font='calibri']=5[/font][font='calibri']时该物质即为氨基戊二酸——也就是谷氨酸——这也是谷氨酸钠可作为代表性的鲜味氨基酸的原因。而谷氨酸的分子结构中不仅有鲜味受体的结合位点，也同时具有酸、甜、苦、咸感受器的结合位点——这也就解释了为什么在p[/font][font='calibri']H[/font][font='calibri']不同的环境下谷氨酸钠会表现出截然不同的风味。[/font][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108042205358074_7881_1608728_3.png[/img][/align][align=center][font='times new roman'][color=#000000]图[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]2[/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]. [/color][/font][font='times new roman'][color=#000000]谷氨酸分子结构及其上的受体结合位点[/color][/font][/align][align=center][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]引自[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]龚骏[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]陶宁萍[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]顾赛麒[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000].[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]食品中鲜味物质及其检测研究方法概述[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000][J].[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000]中国调味品[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=6px][color=#000000],2014,39(01):129-135.[/color][/size][/font][/align][align=left][font='calibri']对于核苷酸类的鲜味剂，有研究指出核苷酸呈鲜必须满足两个条件：只有核糖部分5[/font][font='calibri']’[/font][font='calibri']碳原子上链接磷酸基的5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']核苷酸才能表现出鲜味活性；只有嘌呤部分的第六位碳原子上有一个羟基的5[/font][font='calibri']’-[/font][font='calibri']核苷酸才能产生鲜味。进一步的研究表明了，只有嘌呤类的核苷酸才会呈现出鲜味，而其他类型的核苷酸不呈鲜鲜味。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]三[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]谷氨酸钠的工业生产与应用[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman']现今谷氨酸钠的生产主要采用发酵法[/font][font='times new roman']，该法基本可分为以下三个阶段：[/font][/align][align=left][font='times new roman']1[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']淀粉水解为葡萄糖[/font][/align][align=left][font='times new roman']2[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']葡萄糖发酵，生成谷氨酸[/font][/align][align=left][font='times new roman']3[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']发酵液制成味精[/font][/align][align=left][font='times new roman']以上三个阶段分别对应了生产厂的糖化、发酵、提取和精制四个主要车间，其中，核心为谷氨酸中和提取和浓缩结晶。[/font][/align][align=left][font='times new roman']而目前提取谷氨酸主要采用冷冻等电[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']离子交换法，该法主要操作如下：[/font][/align][align=left][font='times new roman']发酵液在等电罐中一边用冷冻盐水缓慢搅拌冷却降温至[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']℃，一边用硫酸调[/font][font='times new roman']Ph[/font][font='times new roman']值至[/font][font='times new roman']3.22[/font][font='times new roman']，沉淀后离心即得粗谷氨酸[/font][font='times new roman']；[/font][/align][align=left][font='times new roman']在装有[/font][font='times new roman']60[/font][font='times new roman']～[/font][font='times new roman']65[/font][font='times new roman']℃底水的中和罐中加入谷氨酸，搅拌，并缓慢加入纯碱溶液，中和至[/font][font='times new roman']Ph[/font][font='times new roman']值[/font][font='times new roman']6.2[/font][font='times new roman']～[/font][font='times new roman']6.4[/font][font='times new roman']；[/font][/align][align=left][font='times new roman']待中和液降温至[/font][font='times new roman']50[/font][font='times new roman']℃以下，加入适量的硫化钠溶液以除铁；然后用粗谷氨酸回调[/font][font='times new roman']Ph[/font][font='times new roman']值至[/font][font='times new roman']6.2[/font][font='times new roman']～[/font][font='times new roman']6.4[/font][font='times new roman']，并升温至[/font][font='times new roman']60[/font][font='times new roman']℃，再加入粉末活性炭，搅拌半小时后送入压滤机压滤[/font][font='times new roman']；[/font][/align][align=left][font='times new roman']再将滤液用颗粒活性炭柱二次脱色得清液；清液送入真空煮晶锅内在[/font][font='times new roman']60[/font][font='times new roman']～[/font][font='times new roman']70[/font][font='times new roman']℃下蒸发浓缩，加入晶种[/font][font='times new roman']；[/font][/align][align=left][font='times new roman']放料后，经育晶槽，再离心分离得结晶味精，母液或经脱色后再蒸发结晶，精制收率可达理论量的[/font][font='times new roman']92%[/font][font='times new roman']。[/font][/align][align=left][font='times new roman']但是该法提起谷氨酸后的尾液化学需氧量高、产生量大、酸碱消耗量大等缺点，与现今提倡的清洁绿色生产不符。目前也有如连续等电[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']转晶法等更清洁的新提取方法。[/font][/align][align=left][font='times new roman']除发酵法之外，也有如[/font][font='times new roman']α[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']酮戊二酸合成法[/font][font='times new roman']，[/font][font='times new roman']丙烯腈合成法[/font][font='times new roman']等方法。[/font][/align][align=left][font='times new roman']α[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']酮戊二酸合成法[/font][font='times new roman']是使[/font][font='times new roman']NH[/font][font='times new roman'][size=13px]4[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]+[/size][/font][font='times new roman']和供氢体还原性辅酶[/font][font='times new roman']II[/font][font='times new roman']（[/font][font='times new roman']NADPH[/font][font='times new roman']）存在的条件下，α[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶（[/font][font='times new roman']GHD[/font][font='times new roman']）的催化下，发生还原氨基化反应，或转氨酶（[/font][font='times new roman']AT[/font][font='times new roman']）催化转氨反应，或谷氨酸合成酶（[/font][font='times new roman']GS[/font][font='times new roman']）催化，形成谷氨酸。[/font][/align][align=left][font='times new roman']谷氨酸发酵液与盐酸离心搅拌并育晶、搅拌、沉淀生成谷氨酸钠。[/font][/align][align=left][font='times new roman']丙烯腈合成法[/font][font='times new roman']是[/font][font='times new roman']在[/font][font='times new roman']120~150[/font][font='times new roman']℃和[/font][font='times new roman']20~30MPa[/font][font='times new roman']条件下，钴催化剂局部选择催化丙烯腈氢甲酰化，生成[/font][font='times new roman']3-[/font][font='times new roman']氰基丙醛（直链醛产率为[/font][font='times new roman']80%[/font][font='times new roman']），然后通过[/font][font='times new roman']Strecker[/font][font='times new roman']降解反应（斯特雷克氨基酸合成反应）合成生成[/font][font='times new roman']L-[/font][font='times new roman']谷氨酸钠。这种办法曾经是一种工业生产工艺路线，但被更经济的办法取代。[/font][/align][align=left][font='times new roman']谷氨酸钠广泛作为调味剂使用，其强烈的鲜味即使稀释[/font][font='times new roman']3[/font][font='times new roman']000[/font][font='times new roman']倍仍能感受到，一般用量为[/font][font='times new roman']0[/font][font='times new roman'].2[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']0.5[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']。[/font][/align][align=left][font='times new roman']除了单独使用之外，也常与其他核酸调味剂（如[/font][font='times new roman']I[/font][font='times new roman']MP[/font][font='times new roman']）配成复合调味剂，可提升效果。与食盐共存时也能增强呈味作用。[/font][/align][align=left][font='times new roman']我国规定各类食品生产中可按需适量使用谷氨酸钠。而关于味精会对人体有害的言论大[/font][font='times new roman']部分属无稽之谈，研究表明只有在短时大量摄入的情况下才可能产生影响。[/font][/align][align=left][font='times new roman']除调味剂外，谷氨酸钠也可作为医药试剂。由于谷氨酸在肝脏氮代谢中发挥着重要作用，当肝功能受损时，血液中含氮量提高会引起氮代谢紊乱和肝昏迷，因此医药上可用谷氨酸钠预防肝昏迷。同时谷氨酸也可作为脑组织的供能物质[/font][font='times new roman']，因此谷氨酸钠也用于脑营养剂。[/font][/align][align=left][font='times new roman']谷氨酸钠也有用于有机合成中间体，[/font][font='times new roman']可[/font][font='times new roman']用于[/font][font='times new roman']助剂、渗透膜、丝蛋白改性、皮革助剂、生物医学材料、改性再生胶原纤维等[/font][font='times new roman']，但该应用[/font][font='times new roman']占[/font][font='times new roman']的比例极小[/font][font='times new roman']。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]四、[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]国标相关指标及检测方法[/size][/font][/align][font='calibri']我国对于谷氨酸钠的生产及使用标准主要有三份，分别为GB 2760-2014、[/font][font='calibri']GB 2720-2015[/font][font='calibri']与[/font][font='calibri']GB/T 8967-2007[/font][font='calibri']，前两份分别为食品国家安全标准的视频添加剂使用标准和味精的强制性标准，第三份则是关于谷氨酸钠（味精）生产的推荐性标准。[/font][font='calibri']关于[/font][font='calibri']GB 2720-2015[/font][font='calibri']与[/font][font='calibri']GB/T 8967-2007[/font][font='calibri']中关于味精产品的标准摘录如下图：[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108042205360017_6074_1608728_3.png[/img][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108042205360905_5211_1608728_3.png[/img][/align][align=left][font='times new roman']标准中[/font][font='times new roman']同样也定义了加盐味精和增鲜味精两种产品，前者指在谷氨酸钠（味精）中定量添加了精制盐的混合物，后者指在谷氨酸钠（味精）中定量添加了核苷酸二钠[/font][font='times new roman'][[/font][font='times new roman']包括[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']’-[/font][font='times new roman']鸟苷酸二钠（[/font][font='times new roman']GMP[/font][font='times new roman']）、[/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman']’-[/font][font='times new roman']肌苷酸二钠（[/font][font='times new roman']IMP[/font][font='times new roman']）或呈味核苷酸二钠（[/font][font='times new roman']IMP[/font][font='times new roman']+GMP[/font][font='times new roman']）[/font][font='times new roman']][/font][font='times new roman']等增味剂的混合物。[/font][font='times new roman']国标中要求以上两种衍生产品均需在[/font][font='times new roman']9[/font][font='times new roman']9[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']味精基础上进行添加生产，也同样有对含量等理化性质的要求，此不再列出赘述。[/font][/align][align=left][font='times new roman']对于谷氨酸钠，国标中对各个指标也有检测方式的规定。[/font][/align][align=left][font='times new roman']谷氨酸钠含量这一重要指标使用经典滴定法进行测定，在乙酸（醋酸）存在下，用高氯酸标准溶液滴定样品中的谷氨酸钠。终点指示可以采用传统的颜色指示剂——以[/font][font='times new roman']α[/font][font='times new roman']-[/font][font='times new roman']萘酚苯基甲醇为指示剂，滴定至溶液变绿色，即为终点。或是使用自动电位滴定仪，利用电位指示终点，实现自动化滴定。[/font][/align][align=left][font='times new roman']因为谷氨酸钠中含有一个[/font][font='times new roman']不对称[/font][font='times new roman']的[/font][font='times new roman']手型[/font][font='times new roman']碳原子，分子具有旋光异构体，也可使用旋光法对谷氨酸钠含量进行测定，使用旋光仪即可测定旋光度，并计算出样品中谷氨酸钠含量。[/font][/align][align=left][font='times new roman']除以上国标中规定的检测方法外，实验室中也可采用全自动氨基酸分析仪，其原理是通过阳离子交换柱将氨基酸分离，并通过显色反应测定不同氨基酸的吸光度。[/font][/align][align=left][font='times new roman']关于其他几项指标，透光率与[/font][font='times new roman']p[/font][font='times new roman']H[/font][font='times new roman']均有对应仪器可直接测定，氯化物、铁及硫酸盐含量也均可以使用滴定法进行测定——只需选择对应的滴定剂和指示剂即可。[/font][/align][align=left][font='times new roman']而核苷酸类的鲜味剂可以直接使用检测核苷酸的实验方法，包括紫外分光光度法，毛细管电泳，离子交换色谱和高效液相色谱等。[/font][/align][align=left][font='times new roman'][size=18px]五[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=18px]结语[/size][/font][/align][align=left][font='times new roman']毫无疑问地，随着生活水平的提高人们对于味觉上的感受越来越高，尤其在现今所提倡与流行的健康绿色饮食的大背景下，针对人们在饮食方面提出的新要求，我认为包括调味剂在内的食品添加剂都应该考虑这些新的需要，以顺应时代的变化发展，改善人民生活品质。而对此，除了严格执行国家安全生产标准，为人民提供合规优质产品以外，对于[/font][font='times new roman']更为健康，绿色的新型添加剂的开发也需加速进行。对于鲜味分子而言，随着[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']世纪分子生物科技与计算机技术的迅猛发展，一大批诸如细胞微流控，细胞芯片等具有方便、快速、有效等新优点的新检测技术如雨后春笋，同时分子动力学等学科研究也步步前进，毫无疑问这将有益于继续探究鲜味分子与受体蛋白之间的相互作用机理，并在此基础上有目的地改造、设计及合成新的鲜味分子。[/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]参考文献：[/color][/size][/font][/align][font='times new roman'][1][/font][font='times new roman']刘源[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']王文利[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']张丹妮[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']食品鲜味研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国食品学报[/font][font='times new roman'],2017,17(09):1-10.[/font][font='times new roman'][2][/font][font='times new roman']黄毅梅[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']邓丰[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']李静[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']我国味精行业清洁生产技术的应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']广东轻工职业技术学院学报[/font][font='times new roman'],2015,14(02):14-18.[/font][font='times new roman'][3][/font][font='times new roman']龚骏[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']陶宁萍[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']顾赛麒[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']食品中鲜味物质及其检测研究方法概述[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国调味品[/font][font='times new roman'],2014,39(01):129-135.[/font][font='times new roman'][4][/font][font='times new roman']孙芝杨[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']鲜味剂的应用及发展前景[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国调味品[/font][font='times new roman'],2011,36(06):1-3+9.[/font][font='times new roman'][5][/font][font='times new roman']武彦文[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']欧阳杰[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']氨基酸和肽在食品中的呈味作用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国调味品[/font][font='times new roman'],2001(01):19-22.[/font][font='times new roman'][6]GB 2760-2014 [/font][font='times new roman']食品安全国家标准食品添加剂使用标准[/font][font='times new roman'][7]GB 2720-2015 [/font][font='times new roman']食品安全国家标准味精[/font][font='times new roman'][8]GB/T 8967-2007 [/font][font='times new roman']谷氨酸钠（味精）[/font]
用8967旋光法做纯味精的谷氨酸钠，结果却高于100%，然后比旋光度也高于25.3，是什么原因呢
根据《8967》用旋光法做纯味精的谷氨酸钠，在26.4℃测得的旋光值266.6，换算结果谷氨酸钠大于100%。然后比旋光度28.1℃，值为266.3，换算后也大于25.3。是什么原因导致的呢，之前十几度的时候比旋光度也超标准限量要求
采用GB 5009.43-2016对味精中谷氨酸钠进行检测，采用第三法 酸度计法，结果大大超过了100%；再换成第二法 旋光法，结果正常了，99.2%左右。大家有没有遇到过这种情况？用酸度计法经常超过100%。
鸡精谷氨酸钠检测时，原样品敞口放置一段时间，对谷氨酸钠检测值影响大吗？望老师不吝赐教
5009.43第一法，用高氯酸滴定谷氨酸钠的反应原理是什么，对萘酚苯甲醇乙酸指示剂的变色原理是什么？
最近做月桂酰谷氨酸钠分析，活性物的测定，相关文献及方法显示用GB/T 5173-2018 进行我们按照这个标准进行测定，现象很明显，但是测定结果严重偏低！请问有没有做过该物质活性含量测定的？
旋光法测试味精中谷氨酸钠的含量1. 原理 味精中谷氨酸钠含量是味精行业的一个重要指标，其含量的高低直接决定味精的好坏。谷氨酸钠分子结构中有不对称原子，具有光学活性，因此用旋光仪测定其溶液旋光度，便可换算出谷氨酸钠的含量。2. 测量2.1 仪器和试剂P850A全自动旋光仪（海能仪器）旋光管（200mm）电子天平(感量1mg）100mL容量瓶味精（市售）浓盐酸（分析纯）2.2 操作过程2.1 精确称取样品10g（精确至0.0001g），加少量水稀释并转移至100mL容量瓶中，变搅拌边加入16mL分析纯浓盐酸，冷却后，定容至100mL容量瓶中。2.2 开启旋光仪，待仪器稳定后，用配制试剂的蒸馏水校正零点。2.3 用待测溶液将旋光管洗涤三次，然后注满待测液，置于旋光仪中（不能有气泡），分别测试试样的旋光度和比旋度并记下，同时记下测试时溶液的温度。2.3 结果计算旋光度的计算公式：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457948_2599013_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457949_2599013_3.jpg比旋度的计算公式：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457950_2599013_3.jpg3. 结果与讨论 表1 味精中谷氨酸钠的旋光度和浓度测试结果T（℃）α（°）X（%）平均值（%）相对平均偏差（%）19.72.50599.599.60.08%19.92.50699.620.1[size=12p
1、L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？ L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终定论。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。 2、哪种培养基中可以省去加酚红？ 酚红在培养基中用作PH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，(特别是雌激素)。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。 3、二价离子抑制胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？ 二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。4、培养基中丙酮酸钠的作用是什么？ 丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。 5、室温下配制的Tris-HCl溶液，在37℃使用时PH值是多少？ 缓冲液PH值随温度变化而变化。下表列出了50mM Tris-HC 溶液在4℃，25℃，37℃时，不同PH值。 50mM Tris-HC 溶液在4℃，25℃，37℃时，不同PH值 4°C 25°C 37°C 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 8.7 8.8 8.9 9.0 9.1 9.2 9.3 9.4 8.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 8.7 8.8 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5
1、搅拌式动物细胞培养罐 搅拌式培养罐靠搅拌桨提供液相搅拌的动力，它有较大的操作范围、良好的混合性和浓度均匀性，因此在生物反应中被广泛使用。但由于动物细胞没有细胞壁的保护，因此对剪切作用十分敏感，直接的机械搅拌很容易对其造成损害，传统的用于微生物的搅拌培养罐用作动物细胞的培养显然是不合适的。所以，动物细胞培养中的搅拌式培养罐都是经过改进的，包括改进供氧方式、搅拌桨的形式及在培养罐内加装辅件等。 (1)供氧方式的改进 一般情况下搅拌式培养罐还常伴有鼓泡，为细胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪切也很敏感，所以人们在供氧方式的改进上做了许多工作。笼式供氧是搅拌式动物细胞培养罐供氧方式的一种，即气泡用丝网隔开，不与细胞直接接触。培养罐既能保证混合效果又有尽可能小的剪切力，以满足细胞生长的要求。北野昭一报道了一个经过改进的搅拌式动物细胞培养罐，整体呈梨形，搅拌置于培养罐底部，在搅拌轴外装了一个锥形不锈钢丝网与搅拌轴一起转动。轴心处的鼓泡管在丝网内侧鼓泡，丝网外侧的细胞不与气泡直接接触。 (2)搅拌桨的改进 搅拌桨的形式对细胞生长的影响非常大，这方面的改进主要考虑如何减小细胞所受的剪切力。有人对搅拌桨的形式作了改进，并在反应器内加装了辅件，实验证明改进后的反应器适用于对剪切力敏感的细胞进行高密度培养。反应器采用了一个双螺旋带状搅拌桨，顶部的法兰盖上安装了3块表面挡板。每块挡板相对于径向的夹角为30°，垂直插入液面。挡板的存在减小了液面上的旋涡。这个反应器维持了较小的剪切力，实验中用于昆虫细胞的培养，最终的培养密度达到6×106个/mL，成活率在98%以上。 2、非搅拌式动物细胞培养罐 搅拌式细胞培养罐用于动物细胞培养存在的最大缺点是剪切力大，容易损伤细胞，虽然经过各种改进，这个问题仍很难避免。相比之下，非搅拌式培养罐产生的剪切力较小，在动物细胞培养中表现出了较强的优势。 (1)填充床反应器填充是在反应器中填充一定材质的填充物，供细胞贴壁生长。营养液通过循环灌流的方式提供，并可在循环过程中不断补充。细胞生长所需的氧分也可以在反应器外通过循环的营养液携带，因而不会有气泡伤及细胞。这类反应器剪切力小，适合细胞高密度生长。 (2)中空纤维反应器中空纤维培养罐由于剪切力小而广泛用于动物细胞的培养。这类培养罐由中空纤维管组成，每根中空纤维管的内径约为200μm，壁厚为50～70μm。管壁是多孔膜，O2和CO2等小分子可以自由透过膜扩散，动物细胞贴附在中空纤维管外壁生长，可以很方便地获取氧分。 (3)气升式细胞培养罐气升式生物反应器(airliftbioreactor)也是实现动物细胞高密度培养的常用设备之一，其特点是结构简单，操作方便。有人在气升式反应器中利用微载体培养技术，研究了Vero细胞高密度培养的工艺条件。证明气升式反应器中悬浮微载体培养Vero细胞，在加入适量保护剂、营养供应充足的情况下，细胞可以正常生长至长满微载体表面，终密度可达1.13×106个/mL。
味精中谷氨酸钠的测定、以及酱油中氨基酸态氮的测定、根据国标Gb5009.43，（前面处理我就不说了）为什么要先使用氢氧化钠滴定Ph到8.2后再加甲醛（掩蔽剂）、可以开始就加入么？求指点
[align=center][b][size=14pt][font=等线]如何做好细胞培养？[/font]—实验室细胞培养技术面面观[/size][/b][/align][align=center][size=11pt]会议时间[/size][size=11pt]：[/size][size=11pt]2020年[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]月[/size][size=11pt]17[/size][size=11pt][font=等线]日[/font]1[/size][size=11pt]4[/size][size=11pt]:00[/size][/align][b][size=12pt]内容[/size][size=12pt]介绍：[/size][/b][size=10.5pt]1. 细胞培养简介[/size][size=10.5pt]；[/size][size=10.5pt]2. 细胞培养实验室[/size][size=10.5pt]：实验室安全等级、培养设备[/size][size=10.5pt]/耗材[/size][size=10.5pt]、无菌技术；[/size][size=10.5pt]3. 细胞培养基础[/size][size=10.5pt]：细胞系、细胞培养环境（[/size][size=10.5pt]PH，CO2浓度，温度，湿度）[/size][size=10.5pt]；[/size][size=10.5pt]4. 细胞培养方案[/size][size=10.5pt]：贴壁细胞传代、悬浮细胞传代、细胞冻存、细胞复苏、细胞计数；[/size][size=10.5pt]5. 细胞培养常见问题[/size][size=10.5pt]：细胞污染、细胞太稀、细胞消化过度、细胞复苏状态不佳。[/size][b][size=12pt]讲师[/size][size=12pt]介绍：[/size][size=11pt]雷俊[/size][size=11pt]:[/size][/b][size=11pt]北京大学细胞生物学博士博士研究生期间，主要从事细胞周期事件与肿瘤发生关系的研究，具有细胞生物学、蛋白质组学等学科背景，精通分子细胞生物技术、成像技术等研究手段。现任瑞沃德生命科技有限公司细胞产线产品经理。[/size][b]报名地址：[/b][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html][u][font='Times New Roman'][color=#0000ff]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10287.html[/color][/font][/u][/url]
名称：细胞培养操作规程关键词：细胞培养目的：建立一套适用的培养操作规程，进行无污染条件下体外细胞扩大培养。主体内容：操作步骤：1、紫外灯照射超净台30分钟（根据实际情况，可适当延长或缩短照射时间，但时间长一点总比时间短一点安全。）2、将培养液、PBS、胰酶放在37℃水浴中温育（每次用多少，温育多少，这样既可节约温育的时间，又可延长药品的使用期限。）3、超净台照射30分钟后，关闭紫外，打开照明，打开排风10分钟后再次进入细胞培养室。（注意：要打开排风10分钟后再进行操作，这样才能保证循环的风是无菌的。同时还会避免有菌的风直接吹到人的呼吸道中，对人体也有一定的保护作用）4、戴上口罩及手套（有条件的最好戴上帽子，不过也没关系，我们实验室就没戴）5、用70-75%的酒精擦试实验物品，然后拿入超净台中。6、操作时注意以下几点：尽量在酒精灯火焰附近操作，但如果管子里有细胞就要离火焰有一定距离了，否则细胞要烫死了；不要重复使用移液管（即吸一次后，就换新的管）；不要在敞开的容器上方操作；手上的酒精不要擦太多，否则靠近酒精灯时容易把手烧到（我想很多人都有过被烧的经历吧）；其实操作是很简单的，但一定要仔细。尤其是第2步许多人都不注意，细胞平时放在37℃培养，如果加入的PBS或胰酶温度太低，会对细胞有操伤的，虽然这种损伤短期内察觉不到，但时间长了，就会显现出来。
细胞培养知识1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。 5 何谓FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。
细胞培养FAQ： 1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。 5 何谓FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。 6 培养细胞时应使用5 % 或10% CO2？或根本没有影响？ 一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。 7 何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素？ 除于特殊筛选系统中外， [font=宋
谷氨酸钠的干燥失重检测，大家用98℃还是103℃？两种方法差距大吗？望老师不吝赐教
关键词（必填项目）：胚胎干细胞培养目的（必填项目）：正确规范胚胎干细胞培养背景知识（选填项目）：无。原理（选填项目）：无主体内容：目录一、细胞二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代三、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法四、移植细胞的准备细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。4．J1rtTA-rtTA表达J1细胞，由Dr. Jaenish的实验室友情提供。5．表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞，由Dr. Nagy的实验室提供。一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶DMEM是500ml。贮存液 DMEM(高糖) [/s
[color=#444444]原理上味精谷氨酸钠含量测定可以和酱油氨基酸态氮的测定方法一样，实际上甲醛法就是同一个方法。现在我们用测酱油的比色法测味精含量，结果却差的很离谱。测到味精含量在[/color][color=#444444]2900[/color][color=#444444]％，大了很多，感觉不知道出错在哪里。哪位高手指点下啦[/color]
简单介绍一下细胞培养技术，本人这段时间主要做细胞工作，和大家共勉吧！细胞培养技术一、细胞培养的条件和要求 二、细胞分离 三.体外培养细胞龄的计算四.细胞鉴别试验 五、细胞计数六、细胞传代 七、细胞的冻存和复苏 八、细胞培养用水处理 九、选择小牛血清的微量细胞培养检查法 十、葡萄糖测定法 十一、乳酸测定法十二、细胞培养方式
1 实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室. 2 常用设施及设备 (1)超净工作台:也称净化工作台,分为侧流式,直流式和外流式三大类. (2)无菌操作间:一般由更衣间,缓冲间和操作间三部分组成.操作间放置净化工作台及二氧化碳培养箱,离心机,倒置显微镜等.缓冲间可放置电冰箱,冷藏器及消毒好的无菌物品等. (3)操作间:普通培养箱,离心机,水浴锅,定时钟,普通天平及日常分析处理物(4)洗刷消毒间:烤箱,消毒锅,蒸馏水处理器及酸缸等. (5)分析间:显微镜,计算机及打印机等. 3 培养器皿 常用细胞培养器皿有培养瓶,培养板,培养皿等.常准备量是使用量的三倍.器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品.常用的器皿有下面几种. (1)液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液,血清等液体,常用规格有500ml,250ml, 100ml等几种. (2)培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等几种. (3)培养皿:用于开放式培养及其它用途.分直径30mm,60mm,120mm等几种. (4)吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体.常用1ml和10ml两种.短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种. (5)离心管:离心管是细胞培养中使用最广泛的器皿,根据用途不同形态各样,常用于细胞培养的离心管有大腹式尖底离心管和普通尖底离心管两类.前者分别为50ml,30ml,15ml;后者则多为10ml和5ml. (6)其它:如三角烧瓶,烧杯,量筒,漏斗,注射器等.4 细胞培养温度 维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度.不同种类的细胞对培养温度要求也不同.人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡.培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能受到一定损伤,但仍有可能恢复;在40-41℃1小时,细胞会普遍受到损伤,仅小半数有可能恢复;41-42℃1小时,细胞受到严重损伤,大部分细胞死亡,个别细胞仍有恢复可能;当温度在43℃以上1小时,细胞全部死亡.相反,温度不低于0℃时,对细胞代谢虽有影响,但并无伤害作用;把细胞放入25-35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减慢;放在4℃数小时后,再回到37℃培养,细胞仍能继续生长.细胞代谢随温度降低而减慢.当温度降至冰点以下时,细胞可因胞质结冰受损而死亡.但是,如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油),可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存. 5 合适的气体环境 气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳.氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分.开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中.二氧化碳既是细胞代谢产物,也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值.大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响.但细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长.但有一些细胞也喜欢偏碱环境中生长,如成纤维细胞最适合pH是7.4-7.6.每种细胞都有其最适pH值.
1. 如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2. 何时须更换培养基？视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。3. 可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。4. 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。5. 何谓FBS, FCS, CS, HS ?FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。6. 培养细胞时应使用5% 或10% CO2？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO3-/CO3 2-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5% CO2 培养细胞。7.Hank's 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用，不需要CO2培养箱。原因是什么？Hank's 平衡盐溶液(HBS)和Earle's平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别？HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Eagles (2.2 g/L)中比在Hanks (0.35 g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2 中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。8. 细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。9. 悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中， 稀释细胞浓度即可， 若培养液太多时， 可将培养角瓶口端稍微抬高， 直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶， 加入新鲜培养基稀释至适当浓度， 重复前述步骤即可。10. 冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后， 须立即放入37℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。11. 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。12. 附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53 mM EDTA Na4。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于-20 ℃，避免反复冷冻解冻造成trypsin 之活性降低， 并可减少污染之机会。13. 欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞， 其离心速率一般为300xg (约1 000 rpm)，5-10 分钟， 过高之转速， 将造成细胞死亡。14. 细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5-10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90-95% 原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO 稀释时会放出大量热能， 故不可将DMSO 直接加入细胞液中， 必须使用前先行配制完成。15. DMSO 之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade之DMSO (如Sigma D2650)， 其本身即为无菌状况， 第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于4℃， 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质， 并可减少污染之机会。若要过滤DMSO， 则须使用耐DMSO 之Nylon 材质滤膜。16. 冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃30~60 分钟→ (-20℃ 30 分钟*) → -80℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃至-80℃以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微 降低一些。17. 细胞欲冷冻保存时， 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial， 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。
本人不是生物，医学出身，但现在博士期间的研究工作与生物医学相关，想学细胞培养技术，但课题组里没有师兄师姐可以请教，请问全国有没有哪个机构可以提供细胞培养的培训？ps：本人只了解过一些细胞培养的理论知识，从未进行过实际操作，希望培训能以实际操作为主。谢谢！
注意事项： 1.配制溶液时必须用新鲜的蒸馏水。2.安装蔡式滤器时通常使用孔径 0.45 微米 和 0.22 微米滤膜各一张，放置位置为 0.45 的位于 0.22 微米的滤膜上方，并且要特别注意滤膜光面朝上。 3.配制 RPMI1640 培养基时因为还要加入小牛血清，而小牛血清略偏酸性，为了保证培养液 PH 值最终为 7.2 ，可在配制时调 PH 至 7.4 。 细胞培养的一般过程 一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。R 理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置 4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。 三、培养将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的 PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和 CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。四、冻存及复苏为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度?－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入 37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。
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