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二苄基氟尿嘧啶标准

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二苄基氟尿嘧啶标准相关的论坛

  • 求助：5-氟尿嘧啶壳聚糖微球的制备与表征

    作者：何冰题目：5-氟尿嘧啶壳聚糖微球的制备与表征期刊：天津大学年份：2007链接：http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&QueryID=4&CurRec=186&dbname=CMFD0911&filename=2008186937.nh&urlid=&yx=

  • 47.7 高效液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

    47.7 高效液相色谱法测定人血浆中内源性尿嘧啶二氢尿嘧啶含量

    作者：肖力 任斌 陈小陆 李瑞明 刘怡 容颖慈 蓝缨（作者单位：中山大学附属第一医院药学部,广东,广州,510080 ）摘要：目的:建立准确测定内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的高效液相色谱法.方法:以氟尿嘧啶(5-FU)为内标,醋酸乙酯-异丙醇混合液(85:15)为提取溶剂;色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 靘);流动相A-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.5),B-乙腈,梯度洗脱;流速为0.8 mL·min-1;柱温为4 ℃;检测波长为204 nm(0～14.5 min),254 nm(14.5～35 min).结果:尿嘧啶和二氢尿嘧啶线性范围为8～500 靏稬-1,线性回归方程分别为C(UH2)=61.760 8Y+0.506 5,r=0.999 8;C(U)=95.201 1Y-3.064 0,r=0.999 3,(n=7).最低检测质量浓度均为5 靏稬-1.尿嘧啶方法回收率为99.3%～107.0%,二氢尿嘧啶方法回收率为95.0%～98.3%.尿嘧啶日内RSD小于6.5%,日阍RSD小于11.7%,二氢尿嘧啶目内RSD小于9.2%,日间RSD小于12.4%.结论:本方法可用于内源性尿嘧啶和二氢尿嘧啶血药浓度的常规监测.谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208142006_383845_1609970_3.jpg

  • C18色谱柱测柱效——尿嘧啶的作用

    测试C18色谱柱的柱效，用到尿嘧啶，主要是看该色谱柱的死时间大小。由于尿嘧啶出峰时间短，理论塔板数也相应较小。近日遇到这样的投诉，甲苯的塔板数可以达到证书上的85%，但是客户觉得尿嘧啶的塔板数过小，为难的是厂家的证书上连尿嘧啶的塔板数都没有，那么尿嘧啶的塔板数是否具有参考的价值呢

  • 安捷伦6495液质联用想着对尿嘧啶摸方法

    [color=#444444]最近用安捷伦6495[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]想着对尿嘧啶摸方法，TIC图里面母离子不出峰，而且在最开始的时候有倒峰，靠近最后的时候有一个149的不知知道是什么的峰，求大神解答[/color]

  • 【求助】（已应助）求幾篇 文獻

    1.氟尿嘧啶与5种常用输液配伍的稳定性 [中国医院药学杂志 Chinese Journal of Hospital Pharmacy] 邢启德 , 姜丽玲 , 吕培霖 2.氟尿嘧啶与8种常用输液配伍的稳定性考察 A Study of the Stability of Fluorouracil in Different Conventional Infusion Fluids [医药导报 Herald of Medicine] 林能明 , 方罗 , 吴烨芳 , LIN Neng-ming , FANG Luo , WU Ye-fang 3.氟罗沙星注射液与5种输液配伍的稳定性观察 [海南医学 Hainan Medical Journal] 李丽静 , 郭建永 4.含β-D-糖苷的5-氟尿嘧啶类抗肿瘤药物的合成 Synthesis of β-D-glucoside-containing 5-fluorouracil derivatives [华中师范大学学报（自然科学版） Journal of Central China Normal University(Natural Sciences)] 於海情 , 魏佳 , 刘漪 , 石德清 5.含糖苷的5-氟尿嘧啶类抗肿瘤药物的合成 [有机化学 Chinese Journal of Organic Chemistry] 於海情 , 刘漪 , 石德清 6.1-(四氢呋喃-2-基)-3-[4-(O,O-二烷基硫代磷酰基,S-亚甲基羰基氧代)丁基]-5-氟尿嘧啶的合成 Synthesis of 1-(tetrahydrofuran-2-yl)-3-[4-(O,O-dialkyl-thiophosphoryl, S-methylenecarbonyloxo)butyl]-5-fluorouracil [华中师范大学学报（自然科学版） Journal of Central China Normal University(Natural Sciences)] 李小菊 , 石德清 7.1-苄基-5-氟脲嘧啶-3-N-β-D-糖苷的合成及表征 The Synthesis and Characterization of 1-Benzyl-3-N- (β-D-glucoside- 1-yl)- 5-fluorouracil [合成化学 Chinese Journal of Synthetic Chemistry] 周峰岩 8.含氨基酸席夫碱的5-氟尿嘧啶类衍生物的合成及Raman光谱分析 Synthesis and Raman Spectral Analysis of Novel 5-fluorouracil Derivatives Containing Amino Acid Schiff Base [光散射学报 Chinese Journal of Light Scattering] 阮敏 , 叶勇 , 石德清 , 薛理辉 , 沈爱国 , 谢微 , RUAN Min , YE Yong , SHI De-qing , XUE Li-hui , SHEN Ai-guo , XIE Wei 9.N′-苄基-5-氟脲嘧啶-N3-β-D-糖苷的合成及表征 Synthesis and characterization of N1-benzyl-N3 (β-D-glu-coside-1-yl )-5-fluorouracil [化学试剂 Chemical Reagents] 周峰岩 氟尿嘧啶类抗癌药物新发展 New development in the anticancer drugs of fluorouracil [岭南现代临床外科 Lingnan Modern Clinics in Surgery] 罗兴喜 , 陈涛 10.新型含环状α-羟基膦酸酯的N1-(四氢呋喃-2-基)-5-氟尿嘧啶衍生物的合成 Synthesis of Novel 1-Furanidin-2'-yl-5-fluorouracil Derivatives of Cyclic α-Hydroxyphosphonates [有机化学 Chinese Journal of Organic Chemistry] 石德清 , 魏佳 , 谭效松 , SHI , De-Qing , WEI , Jia , TAN , Xiao-Song 11.5-氟尿嘧啶衍生物的研究进展 Research progress of 5-fluorouracil derivatives [化学试剂 Chemical Reagents] 王卫东 , 谭祥中 , 胡茂林 12.糖苷合成研究(ⅩⅦ)--1-芳磺酰基-3-N-(β-D-乙酰基葡萄糖醛酸甲酯-1-基)-5-氟脲嘧啶的合成和表征 STUDIES ON SYNTHESIS OF GLYCOSIDES( X Ⅶ )-The Synthesis and Characterization of 1-Arylsulfonyl-3-n- (β-d-MethylAcetylglucuronate-1-YL)-5-Fluorouracil [山东大学学报（理学版） Journal of Shandong University(Natural Science)] LU Min 13.5-氟尿嘧啶衍生物的合成及其抗癌活性研究进展 Synthesis and Antitumor Activity Development of 5- fluorouracil Derivatives [河北师范大学学报（自然科学版） Journal of Hebei Normal University(Natural Science Edition)] 扈靖 , 刘彦钦 , 韩士田 , 扈琳 14.12-钨硼酸5-氟尿嘧啶盐的合成及抗癌活性研究 Synthesis and Anti-liver Cancer Activity of 5-Fluorouracil Salt of 12-Tungstoboric Acid [高等学校化学学报 Chemical Journal of Chinese Universities] 李娟 , 李静 , 齐燕飞 , 王宏芳 , 王恩波 , 胡长文 , 许林 , 吴新宇

  • 皮肤渗透剂研究进展

    化妆品功效性原料物经皮吸收，主要是通过角质层和活性表皮浸润真皮，直接作用于靶细胞。皮肤对大多数功效性原料物是经皮给药的屏障，许多化妆品功效性原料物透皮给药后，渗透速率达不到治疗要求，所以，寻找促进化妆品功效性原料物透皮吸收的方法，是开发透皮给原科物系统的关键。它包括物理方法和化学方法。研究得最多的是化学方法是使用渗透促进剂，此外，化学方法，还有化学结构改造，如合成具有较大透皮速率的前体药物，使用微乳、脂质体等技术，对蛋白质等水溶性大分子原洲物，离子导入和超声波等物理方法应用较多。化妆品渗透促进剂常用的可分为以下几类，见表1。 【这个表格 导不进来 大家可以看看下面 23 4楼】表1 渗透促进剂一览表 类型 举例 药物 作用机制亚砜类 二甲基亚砜（DMSO）、癸基甲基亚砜（DCMS） 氢化可的松、水杨酸、溴乙啡啶、茶碱、氟灭酸、丙炎松等 角质层细胞内蛋白质变性；破坏角质层细胞间脂质的有序排列；脱去角质层脂质，脂蛋白吡咯烷酮类 2-吡咯酮、5-甲基-2-吡咯酮、1,5-二甲基-2-吡咯酮 ******、正辛醇、苯甲酸、倍他米松、甲灭酸 低浓度分配进入角蛋白，高浓度影响角质层脂质流动性并促进药物在角质层的分配；增加角质层的含水量Azone及其类似物 Azone 氯林可霉素磷酸酯、褐霉素钠、氟尿嘧啶、丙缩羟强龙、地塞米松、醋酸环戊酮缩去炎松 渗入皮肤角质层，降低细胞间脂质排列的有序性；脱去细胞间脂质形成孔道；增加角质层含水量；降低角质层脂质的相转变温度脂肪酸及其酯 油酸、肉豆蔻酸异丙酯、丙二醇二壬酸酯、癸二酸二乙酯 水杨酸、雌二醇、芬太尼、********、肝素、吲哚美辛 渗入角质层脂质，影响其有序排列；降低角质层脂质双分子层的相转变温度；引起角质层脂质固–液相分离和晶型转变；增加药物在角质层的分配表面活性剂 月桂醇硫酸钠、泊洛沙姆 氟灭酸、水杨酸 使角质层脂质排列无序化；乳化皮肤表面脂质，改善药物在角质层的分配醇类 乙醇、异丙醇、正十二醇、正辛醇 水杨酸、雌二醇、纳洛酮、左旋-18-甲基炔诺酮 作为溶剂增加药物在角质层的溶解度；脱去角质层脂质；渗入角质层脂质，影响其排列有序性多元醇类 丙二醇、丙三醇 水杨酸、5-氟尿嘧啶 使角蛋白溶剂化，占据蛋白质的氢键结合部位，减少药物-组织间的结合；增加并用的其他渗透促进剂在角质层的分配萜烯类 桉树脑、d-苎烯、橙花叔醇 普鲁卡因、吲哚美辛、5-氟尿嘧啶、肝素 促进药物在角质层的扩散；破坏角质层细胞间脂质屏障；提高组织电导率，打开角质层极性孔道；增加药物从基质向角质层的分配胺类 尿素、十二烷基-N,N-二甲基氨基乙酯 5-氟尿嘧啶 促进角质层水化，在角质层形成亲水性孔道；破坏角质层脂质结构酰胺类 二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺 ******、正辛醇、氢化可的松 低浓度时分配进入角蛋白区，高浓度时影响角质层脂质的流动性环糊精类 环糊精、2-羟丙基-环糊精 Liavozolel 将药物形成包合物，提高溶解度，并可把药物分子传递到皮肤表面氨基酸及其酯 L-异亮氨酸、十二烷基焦谷氨酸酯 雌二醇、左旋-18-甲基炔诺酮、茶碱 松弛皮肤的角蛋白，影响角质层脂质排列的有序性大环化合物 十五烷酮 氢化可的松 增加药物在角质层中的溶解度有机溶剂类 醋酸乙酯 水杨酸 破坏角质层脂质排列的密实性磷脂类 卵磷脂、豆磷脂、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺 二氢麦角胺、异三梨醇硝酸酯、茶碱、吲哚美辛 促进药物从基质中释放，增加药物在皮肤中的扩散；作用于角质层细胞膜脂质，改善其渗透性

  • GB5413.40 核苷酸标准品

    求助：GB5413.40 核苷酸标准品中有5种核苷酸的标准品要购买，不知道应该买哪里的。请教各位，能具体告知下购买的品牌和货号吗？胞嘧啶核苷酸 CMP：标准品，C9H14N3O8P，纯度≥99%次黄嘌呤核苷酸 IMP：标准品，C10H13N4O8P，纯度≥99%鸟嘌呤核苷酸 GMP：标准品，C10H14N5O8P，纯度≥99%尿嘧啶核苷酸 UMP：标准品，C9H13N2O9P，纯度≥99%腺嘌呤核苷酸 AMP：标准品，C10H14N5O7P，纯度≥99%

  • ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～

    ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～

    ADME色谱柱的特性　～以核苷作为标准品的全新评价方法～键合金刚烷基的ADME色谱柱对极性化合物的保留与分离具有良好表现，因此适用于对代谢产物的分析。目前为止，我们一直是基于对10种标准物质的测定结果对ADME色谱柱特性进行评价的（参照http://bbs.instrument.com.cn/topic/6210561）；本次，我们将采用全新的评价体系，以核苷类化合物作为标准物质，分别使用CAPCELL PAK ADME、CAPCELL PAK C18 AQ、CAPCELL PAK C18 MGII、2款他社杂化型ODS色谱柱及1款他社高极性ODS色谱柱（粒径均为5 μm）进行分析，考察各款色谱柱的溶出行为并进行比较。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_02_2222981_3.png【HPLC conditions】Column size : 2.0 or 2.1 mm i.d. x150 mm Mobile phase : 10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH = 95 / 5Flow rate : 0.2 mL/minTemperature : 40 ˚CDetection : UV 254 nmInj. vol. : 1 μLSample dissolved in : H2O(100 ppm each)如图2，键合金刚烷基的CAPCELL PAK ADME色谱柱保留能力最强。根据所得结果计算得到的参数见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161035_01_2222981_3.png将各款色谱柱对应的尿嘧啶核苷（峰1）、2’-脱氧尿苷（峰2 ）、鸟嘌呤核苷（峰3）与2’-脱氧鸟苷（峰5）的分配系数比进行比较，可知与其他C18色谱柱相比，CAPCELL PAK ADME对应参数值最大，说明其对羟基具有优秀的识别能力；同时，将尿嘧啶核苷（峰1）与5-甲基尿苷（峰4）的分离系数比进行比较，可知ADME色谱柱对于甲基也具有适度的识别能力，因此对于疏水性化合物来说，具有与C18[/col

  • 【已应助】求助2个文献,谢谢

    1壳聚糖及其复合物纳米粒子制备与蛋白质缓释性能论文专业：环境科学论文主题：壳聚糖 壳聚糖季铵盐 蛋白质 纳米粒子 可控释放 海藻酸钠 PEG2海藻酸钙微粒药物控制释放体系的制备及其体外释药研究关键词： 微粒 释药 海藻酸钠 壳聚糖 5-氟尿嘧啶 所属学科： 通用高分子材料来源： 2007年全国高分子学术论文报告会（2007.10.9-13 成都）百度出来的，不知道能不能查到，谢谢

  • 【分享】一起分享核苷酸

    【分享】一起分享核苷酸

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/10/200910241555_177765_1610969_3.jpg[/img][color=#DC143C]核苷酸　[/color]　　　一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。又称核甙酸。戊糖与有机碱合成核苷，核苷与磷酸合成核苷酸，4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸，许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能，如与能量代谢有关的三磷酸腺苷（ATP）、脱氢辅酶等。某些核苷酸的类似物能干扰核苷酸代谢，可作为抗癌药物。根据糖的不同，核苷酸有核糖核苷酸及脱氧核苷酸两类。根据碱基的不同，又有腺嘌呤核苷酸(腺苷酸，AMP)、鸟嘌呤核苷酸(鸟苷酸，GMP)、胞嘧啶核苷酸(胞苷酸， CMP)、尿嘧啶核苷酸(尿苷酸,UMP)、胸腺嘧啶核苷酸（胸苷酸，TMP）及次黄嘌呤核苷酸(肌苷酸，IMP)等。核苷酸中的磷酸又有一分子、两分子及三分子几种形式。此外，核苷酸分子内部还可脱水缩合成为环核苷酸。 　　核苷酸是核糖核酸及脱氧核糖核酸的基本组成单位，是体内合成核酸的前身物。核苷酸随着核酸分布于生物体内各器官、组织、细胞的核及胞质中，并作为核酸的组成成分参与生物的遗传、发育、生长等基本生命活动。生物体内还有相当数量以游离形式存在的核苷酸。三磷酸腺苷在细胞能量代谢中起着主要的作用。体内的能量释放及吸收主要是以产生及消耗三磷酸腺苷来体现的。此外，三磷酸尿苷、三磷酸胞苷及三磷酸鸟苷也是有些物质合成代谢中能量的来源。腺苷酸还是某些辅酶，如辅酶Ⅰ、Ⅱ及辅酶A等的组成成分。 　　在生物体内，核苷酸可由一些简单的化合物合成。这些合成原料有天门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及 CO2等。嘌呤核苷酸在体内分解代谢可产生尿酸，嘧啶核苷酸分解生成CO2、β－丙氨酸及β-氨基异丁酸等。嘌呤核苷酸及嘧啶核苷酸的代谢紊乱可引起临床症状（见嘌呤代谢紊乱、嘧啶代谢紊乱）。 　　核苷酸类化合物也有作为药物用于临床治疗者，例如肿瘤化学治疗中常用的5-氟尿嘧啶及6-巯基嘌呤等。 　　有些核苷酸分子中只有一个磷酸基，所以可称为一磷酸核苷(NMP)。5''-核苷酸的磷酸基还可进一步磷酸化生成二磷酸核苷(NDP)及三磷酸核苷(NTP)，其中磷酸之间是以高能键相连。脱氧核苷酸的情况也是如此。 　　体内还有一类环化核苷酸，即单核苷酸中磷酸部分与核糖中第三位和第五位碳原子同时脱水缩合形成一个环状二酯、即3''，5''-环化核苷酸，重要的有3''，5''-环腺苷酸(cAMP)和3''，5''-环鸟苷酸(cGMP)。

  • 【求助】替加氟注射液中有关物质的检测，峰型很差！！！？？？

    【求助】替加氟注射液中有关物质的检测，峰型很差！！！？？？

    求助各位大侠，今天刚接到一个项目，按照药典2010中规定检测替加氟注射液中有关物质。按照药典规定以流动相配置含替加氟0.2mg/ml的供试品，进样后发现，替加氟的色谱峰严重变形了，如下图所示。而含量测定时，替加氟的峰型完全正常，不对称度约为1.02。 请大侠们不吝赐教啊。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011061747_257752_1633097_3.jpg前一个峰时氟尿嘧啶的， 后一个峰是替加氟。。。。。郁闷了 调了好些条件，替加氟的形状基本上不变。 但是此溶液稀释10倍后，100ul进样，峰型仍然很好。。。

  • 关于尿素中缩二脲检验标准的疑问

    国标GB/T2441.2-2010中分光光度计法测定缩二脲，标准曲线是扣除了空白吸光度的，样品测定时，采用的水做参比，空白试验及试样各对应一个吸光度，姑且分别命名为A2和A1,以对应公式中m2和m1；那么问题来了，A2对应的是试剂吸光度（可能含缩二脲），A1对应的是样品中缩二脲加试剂的吸光度。用A1和A2代入缩二脲标准曲线，怎么看都不合理，虽然测定结果和直接以空白试验做参比的相差不大，但意义相差太大。相当于空白吸光度在代入公式后，缩二脲无中生有，样品吸光度也存在同样的问题，算的的缩二脲质量不是本色真实的值。各位大佬，是怎么理解的，谢谢！

  • 缩二脲有标准物质么？

    如题，我找了半天，值发现缩二脲有CP，高一点都没有啊，连AR都没有啊……这怎么溯源啊？相关标准里有提纯的步骤，但是怎么保证缩二脲一定提纯好了？

  • 如何进行色谱柱柱效的测试？

    如何进行色谱柱柱效的测试？

    有时候接到客户电话咨询，我现在分离某某化合物分离效果不好了，原来分得挺好的，现在咋就分不了了，是色谱柱污染还是仪器问题呢？遇到这种情况，我们首先对色谱柱进行柱效测试，不同品牌色谱柱对柱效测试的方面略有不同，下面以Dikma色谱柱测柱效为例来说明如何测柱效：分别精密称取下列标准品，溶解在15ml乙腈：水=65：35的溶液中。1、尿嘧啶：0.0015g2、苯甲酸甲酯：30ul3、甲苯：200ul4、萘：0.025g然后，按照以下色谱条件进行HPLC分析色谱柱如图所示规格250 × 4.6 mm流动相乙腈: 水 = 65:35流速1.0 mL/min柱温30 oC检测器UV 254 nm进样量2.0 μL样品1. 尿嘧啶2. 苯甲酸甲酯3. 甲苯4. 萘http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505211453_546927_2452211_3.png

  • 【求助】样品的出峰在死时间之前是怎么回事?

    大家好,我有一根Hypersil BDS C18的色谱柱,我有甲醇/水=70/30作流动相,以尿嘧啶作测死时间.测得此色谱柱的死时间是3.1min,另外我又用硝酸铵作为样品来测此柱子的死时间,结果是3.2min.这样相关不是很多，可以接受。现在我用60%的乙腈水作流动相测我的一样品,结果样品的很多杂质在1-2min出峰,难道说样品中的杂质比硝酸铵或是尿嘧啶的极性还要大?要是这样的话,这些在2min以内出的峰怎么来算其容量因子?那不是成了负数？请大家帮助解决！

  • 使大家一目了然的RNA整理

    绝大部分RNA分子都是线状单链，但是RNA分子的某些区域可自身回折进行碱基互补配对，形成局部双螺旋。在RNA局部双螺旋中A与U配对、G与C配对，除此以外，还存在非标准配对，如G与U配对。RNA分子中的双螺旋与A型DNA双螺旋相似，而非互补区则膨胀形成凸出（bulge）或者环（loop），这种短的双螺旋区域和环称为发夹结构（hairpin）。发夹结构是RNA中最普通的二级结构形式，二级结构进一步折叠形成三级结构，RNA只有在具有三级结构时才能成为有活性的分子。RNA也能与蛋白质形成核蛋白复合物，RNA的四级结构是RNA与蛋白质的相互作用。正是由于RNA具有复杂的二、三级结构，而这些结构又会引起核酸电泳时的速度变化，使得电泳的速度与其分子量大小不一定呈正相关，故而RNA电泳需要用变性电泳的方法（这里我不多说变性的方法）。 　　（一） tRNA的结构　　tRNA约占总RNA的15%，tRNA主要的生理功能是在蛋白质生物合成中转运氨基酸和识别密码子，细胞内每种氨基酸都有其相应的一种或几种tRNA， 因此tRNA的种类很多，在细菌中约有30~40种tRNA，在动物和植物中约有50~100种tRNA。　　1. tRNA一级结构：　　tRNA是单链分子，含73~93核苷酸，分子质量为24 000～31 000，沉降系数4S。含有10%的稀有碱基。如二氢尿嘧啶（DHU）、核糖胸腺嘧啶（rT）和假尿苷（ψ）以及不少碱基被甲基化, 其3’端为CCA-OH，5’端多为pG, 分子中大约30%的碱基是不变的或半不变的，也就是说它们的碱基类型是保守的。　　2. tRNA二级结构：　　tRNA二级结构为三叶草型。配对碱基形成局部双螺旋而构成臂，不配对的单链部分则形成环。三叶草型结构由4臂4环组成。氨基酸臂由7对碱基组成，双螺旋区的3’末端为一个4个碱基的单链区-NCCA-OH 3’，腺苷酸残基的羟基可与氨基酸α羧基结合而携带氨基酸。二氢尿嘧啶环以含有2个稀有碱基二氢尿嘧啶（DHU）而得名，不同tRNA其大小并不恒定，在8-14个碱基之间变动，二氢尿嘧啶臂一般由3~4对碱基组成。反密码环由7个碱基组成，大小相对恒定，其中3个核苷酸组成反密码子（anticodon），在蛋白质生物合成时，可与mRNA上相应的密码子配对。反密码臂由5对碱基组成。额外环在不同tRNA分子中变化较大可在4~21个碱基之间变动，又称为可变环，其大小往往是tRNA分类的重要指标。TψC环含有7个碱基，大小相对恒定，几乎所有的tRNA在此环中都含TψC序列，TψC臂由5对碱基组成。　　3. tRNA的三级结构：　　二十世纪七十年代初科学家用X线射衍技术分析发现tRNA的三级结构为倒L形（图3-20b）。tRNA三级结构的特点是氨基酸臂与TψC臂构成L的一横，-CCAOH3’末端就在这一横的端点上，是结合氨基酸的部位，而二氢尿嘧啶臂与反密码臂及反密码环共同构成L的一竖，反密码环在一竖的端点上，能与mRNA上对应的密码子识别，二氢尿嘧啶环与TψC环在L的拐角上。形成三级结构的很多氢键与tRNA中不变的核苷酸密切有关，这就使得各种tRNA三级结构都呈倒L形的。在tRNA中碱基堆积力是稳定tRNA构型的主要因素。　　（二）mRNA　　原核生物中mRNA转录后一般不需加工，直接进行蛋白质翻译。mRNA转录和翻译不仅发生在同一细胞空间，而且这两个过程几乎是同时进行的。真核细胞成熟mRNA是由其前体核内不均一RNA（heterogeneous nuclear RNA，hnRNA）剪接并经修饰后才能进入细胞质中参与蛋白质合成。所以真核细胞mRNA的合成和表达发生在不同的空间和时间。mRNA的结构在原核生物中和真核生物中差别很大。下面分别作一介绍：　　1. 原核生物mRNA结构特点　　原核生物的mRNA结构简单，往往含有几个功能上相关的蛋白质的编码序列，可翻译出几种蛋白质，为多顺反子。在原核生物mRNA中编码序列之间有间隔序列，可能与核糖体的识别和结合有关。在5’端与3’端有与翻译起始和终止有关的非编码序列，原核生物mRNA中没有修饰碱基， 5’端没有帽子结构，3’端没有多聚腺苷酸的尾巴（polyadenylate tail，polyA尾巴）。原核生物的mRNA的半衰期比真核生物的要短得多，现在一般认为，转录后1min，mRNA降解就开始。　　2. 真核生物mRNA结构特点　　真核生物mRNA为单顺反子结构，即一个mRNA分子只包含一条多肽链的信息。在真核生物成熟的mRNA中5’端有m7GpppN的帽子结构，帽子结构可保护mRNA不被核酸外切酶水解，并且能与帽结合蛋白结合识别核糖体并与之结合，与翻译起始有关。3’端有polyA尾巴，其长度为20~250个腺苷酸，其功能可能与mRNA的稳定性有关，少数成熟mRNA没有polyA尾巴，如组蛋白mRNA，它们的半衰期通常较短。

  • Nature|天津工生所：新一代碱基编辑技术开发获进展

    碱基编辑（base editing，BE）作为前沿的基因组编辑技术，能够在基因组水平上实现精确、高效的单碱基编辑。该技术广泛应用于基础研究、基因治疗和细胞工厂构建等领域。常用的DNA碱基编辑器主要是通过将可编程的DNA结合蛋白（如Cas9）与碱基脱氨酶融合实现的，包括胞嘧啶碱基编辑器（CBE）、腺嘌呤碱基编辑器（ABE）以及糖基化酶碱基编辑器（GBE）等，可以实现C-to-T、A-to-G以及C-to-G等种类的碱基编辑。然而，这些碱基编辑器是针对C和A碱基的直接编辑，且所包含的脱氨酶可能导致非Cas9依赖的DNA或RNA脱靶。中国科学院天津工业生物技术研究所研究员毕昌昊带领的合成生物技术研究团队，联合研究员张学礼带领的微生物代谢工程研究团队，[b]开发了不依赖脱氨酶（deaminase-free，DAF）的碱基编辑器DAF-CBE和DAF-TBE，分别在大肠杆菌中实现C-to-A、T-to-A的碱基颠换，在哺乳动物细胞中实现C-to-G、T-to-G的碱基颠换编辑。?[/b]该研究通过定向进化改造了人源尿嘧啶糖基化酶（UNG）的两个突变体UNG（N204D）和UNG （Y147A），获得了两种高活性的DNA糖基化酶，分别可以作用于胞嘧啶碱基的CDG4和胸腺嘧啶碱基的TDG3。进而，研究将这两种DNA糖基化酶与nCas9（Cas9、D10A）融合，构建了CDG4-nCas9和TDG3-nCas9两种碱基编辑器，用于在大肠杆菌中进行C-to-A和T-to-A的编辑。实验结果显示，CDG4-nCas9和TDG3-nCas9在大肠杆菌中的编辑效率最高分别达到58.7％和54.3％。进一步，研究针对Homo sapiens密码子优化版本的CDG4-nCas9和TDG3-nCas9，在HEK293T细胞中实现了C-to-G和T-to-G的颠换编辑，编辑效率分别达到38.8%和48.7%。这两种编辑器的脱靶效果低于常用的胞嘧啶碱基编辑器（BE4max）和糖基化酶碱基编辑器（CGBEs）。因此，研究将这两个编辑器命名为DAF-CBE和DAF-TBE。此外，通过进一步的工程改造，该团队优化了CDG和TDG的空间位置，得到了DAF-CBE2和DAF-TBE2的新版本。它们的编辑窗口从原来的间隔序列（protospacer sequence）5'端移动到中间区域，且C-to-G和T-to-G的编辑效率分别提高了3.5倍和1.2倍。DAF-CBE和DAF-TBE实现了人诱导多功能干细胞（hiPSC）高效编辑。综上所述，[b]经过定向进化改造，该团队开发的DAF-CBEs和DAF-TBEs碱基编辑器在大肠杆菌和哺乳动物细胞中实现了高效的碱基颠换编辑，无需使用脱氨酶。与现有的引导编辑器（prime editing）或糖基化酶碱基编辑器（GBEs）相比，DAF-BEs具有相当的编辑效率、更小的尺寸和更低的脱靶率，这扩展了碱基编辑器的编辑类型，为工业菌株铸造和生物医药等领域的相关研究提供了新的技术工具。?[/b]近日，相关研究成果发表在《自然-生物技术》（[i]Nature Biotechnology[/i]）上。研究工作得到国家重点研发计划、国家自然科学基金、天津市合成生物技术创新能力提升行动专项、中国科学院青年创新促进会和天津市自然科学基金的支持。[url=https://www.nature.com/articles/s41587-023-02050-w][color=#ff0000]论文链接[/color][/url][align=center][img]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/ac641426-7515-499c-b780-d1c8c7b21f00.jpg[/img][/align][align=center]DAF-BEs碱基编辑器的设计及进化[/align][来源：天津工业生物技术研究所][align=right][/align]

  • 新色谱柱验收

    新色谱柱验收需要严格按照报告重现吗，要跟出厂报告多接近才是可以接受的？尿嘧啶就测死体积，中间两峰就看分离度，最后一个峰看柱效？如果尿嘧啶保留时间合适但柱效很低，怎么办？我感觉做到跟厂家出厂报告接近很困难，哪些因素导致的差异？

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