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二氨基嘌呤脱氧核苷

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二氨基嘌呤脱氧核苷相关的论坛

  • 液质联用测脱氧核苷三磷酸响应值降低!特别低!

    [color=#444444]最近在建立液相质谱测细胞内脱氧核苷三磷酸,但是响应值特别低。最开始试的时候用的是500 ng/mL的标准品,MRM都有 10^3左右,结果后来氮气用完了新的一直没来,中间断气了三天之后就一直响应值特别低,autotune后,其他人用ESI positive都正常了,结果我这个用ESI negative的还是只有一百多,提高了十倍浓度照样只有两三百,最开始试的时候用连接柱不上色谱柱都有10^3的。已经试过不同pH的流动相,从sigma买了新的标准品,换过配样品的溶剂等等,一直没啥改善,求各位大侠指点迷津!谢谢![/color][color=#444444]用的是Agilent 6410,ESI negative,Phenomenex Luna Aminopropyl做HILIC,流动相是20mM NH4Ac pH 9.45和乙腈,流速0.2 mL/min,Gas Temp 300 C,Gas Flow 10L/min,Nebulizer 25 psi,Capillary Negative 3000V。[/color]

  • 液质联用测脱氧核苷三磷酸响应值降低!特别低!

    [color=#444444]最近在建立液相质谱测细胞内脱氧核苷三磷酸,但是响应值特别低。最开始试的时候用的是500 ng/mL的标准品,MRM都有 10^3左右,结果后来氮气用完了新的一直没来,中间断气了三天之后就一直响应值特别低,autotune后,其他人用ESI positive都正常了,结果我这个用ESI negative的还是只有一百多,提高了十倍浓度照样只有两三百,最开始试的时候用连接柱不上色谱柱都有10^3的。已经试过不同pH的流动相,从sigma买了新的标准品,换过配样品的溶剂等等,一直没啥改善,求各位大侠指点迷津!谢谢![/color][color=#444444]用的是Agilent 6410,ESI negative,Phenomenex Luna Aminopropyl做HILIC,流动相是20mM NH4Ac pH 9.45和乙腈,流速0.2 mL/min,Gas Temp 300 C,Gas Flow 10L/min,Nebulizer 25 psi,Capillary Negative 3000V。[/color]

  • 【分享】一起分享核苷酸

    【分享】一起分享核苷酸

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/10/200910241555_177765_1610969_3.jpg[/img][color=#DC143C]核苷酸 [/color]   一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。又称核甙酸。戊糖与有机碱合成核苷,核苷与磷酸合成核苷酸,4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸,许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能,如与能量代谢有关的三磷酸腺苷(ATP)、脱氢辅酶等。某些核苷酸的类似物能干扰核苷酸代谢,可作为抗癌药物。根据糖的不同,核苷酸有核糖核苷酸及脱氧核苷酸两类。根据碱基的不同,又有腺嘌呤核苷酸(腺苷酸,AMP)、鸟嘌呤核苷酸(鸟苷酸,GMP)、胞嘧啶核苷酸(胞苷酸, CMP)、尿嘧啶核苷酸(尿苷酸,UMP)、胸腺嘧啶核苷酸(胸苷酸,TMP)及次黄嘌呤核苷酸(肌苷酸,IMP)等。核苷酸中的磷酸又有一分子、两分子及三分子几种形式。此外,核苷酸分子内部还可脱水缩合成为环核苷酸。   核苷酸是核糖核酸及脱氧核糖核酸的基本组成单位,是体内合成核酸的前身物。核苷酸随着核酸分布于生物体内各器官、组织、细胞的核及胞质中,并作为核酸的组成成分参与生物的遗传、发育、生长等基本生命活动。生物体内还有相当数量以游离形式存在的核苷酸。三磷酸腺苷在细胞能量代谢中起着主要的作用。体内的能量释放及吸收主要是以产生及消耗三磷酸腺苷来体现的。此外,三磷酸尿苷、三磷酸胞苷及三磷酸鸟苷也是有些物质合成代谢中能量的来源。腺苷酸还是某些辅酶,如辅酶Ⅰ、Ⅱ及辅酶A等的组成成分。   在生物体内,核苷酸可由一些简单的化合物合成。这些合成原料有天门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及 CO2等。嘌呤核苷酸在体内分解代谢可产生尿酸,嘧啶核苷酸分解生成CO2、β-丙氨酸及β-氨基异丁酸等。嘌呤核苷酸及嘧啶核苷酸的代谢紊乱可引起临床症状(见嘌呤代谢紊乱、嘧啶代谢紊乱)。   核苷酸类化合物也有作为药物用于临床治疗者,例如肿瘤化学治疗中常用的5-氟尿嘧啶及6-巯基嘌呤等。   有些核苷酸分子中只有一个磷酸基,所以可称为一磷酸核苷(NMP)。5''-核苷酸的磷酸基还可进一步磷酸化生成二磷酸核苷(NDP)及三磷酸核苷(NTP),其中磷酸之间是以高能键相连。脱氧核苷酸的情况也是如此。   体内还有一类环化核苷酸,即单核苷酸中磷酸部分与核糖中第三位和第五位碳原子同时脱水缩合形成一个环状二酯、即3'',5''-环化核苷酸,重要的有3'',5''-环腺苷酸(cAMP)和3'',5''-环鸟苷酸(cGMP)。

  • 脱氧管的替代者--脱氧仪

    脱氧管的替代者--脱氧仪在色谱载气、半导体研究、制取高纯气体等应用场合,特别在毛细管气相色谱系统中,以及在使用TCD或ECD检测器时,为提高色谱柱和检测器使用寿命,使气路稳定地工作和使分析结果更准确,载气的氧含量都要求必须严格控制,最好能控制在0.1PPM以内。目前,常用的脱氧设备是脱氧管,主要分为可再生的不锈钢管和不能再生的透明玻璃管两种类型,均在常温下工作,体积小,价格也便宜(基本在千元内,少数千元以上),脱氧效果基本上也能满足应用要求。不过,客户在使用脱氧管过程中也遇到了越来越多的棘手问题:第一,脱氧量少。一支脱氧管用于高纯氮(99.999%)脱氧最多脱5瓶,而用于纯氮(99.99%)脱氧不到1瓶,由于脱氧量少,一般几个月甚至几周就须寄回厂家再生或更换脱氧管,因此增加了很多繁琐的更换工作。第二,性价比低。尽管脱氧管只有几百元,但每支脱氧管用于高纯氮(99.999%)脱氧最多脱5瓶,按每支脱氧管最少500元价格计算,脱一瓶高纯氮至少100元。第三,气密性差。由于脱氧量少,因此经常需要更换脱氧管,而脱氧管的更换是一项技术活,每次更换时难免会带入一些空气,但如带入较多的空气,会使脱氧管很快失效,严重的会影响到色谱仪的灵敏度甚至破坏仪器。针对脱氧管市场的“少低差”现状,诞生了一款脱氧仪。该设备不但脱氧效果远好于脱氧管,脱氧深度可达0.01PPM,而且还能除水和二氧化碳等杂质。不仅如此,最大的优点是彻底克服了市场上脱氧管的“少低差”缺陷:第一,脱氧量多。一台脱氧仪用于高纯氮(99.999%)脱氧至少脱300瓶,用于纯氮(99.99%)脱氧至少脱30瓶,而且对进气气源的纯度要求也远低于脱氧管。第二,性价比高。一台脱氧仪售价4500元左右,按一支脱氧管可以脱300瓶高纯氮计算,脱一瓶高纯氮至多15元。第三,气密性好。由于脱氧仪脱氧量多,一旦接入气路,几年甚至十几年都不用更换。因此不存在气密性差的问题,也不用担心对用气仪器有影响。

  • ADME色谱柱的特性 ~以核苷作为标准品的全新评价方法~

    ADME色谱柱的特性 ~以核苷作为标准品的全新评价方法~

    ADME色谱柱的特性 ~以核苷作为标准品的全新评价方法~键合金刚烷基的ADME色谱柱对极性化合物的保留与分离具有良好表现,因此适用于对代谢产物的分析。目前为止,我们一直是基于对10种标准物质的测定结果对ADME色谱柱特性进行评价的(参照http://bbs.instrument.com.cn/topic/6210561);本次,我们将采用全新的评价体系,以核苷类化合物作为标准物质,分别使用CAPCELL PAK ADME、CAPCELL PAK C18 AQ、CAPCELL PAK C18 MGII、2款他社杂化型ODS色谱柱及1款他社高极性ODS色谱柱(粒径均为5 μm)进行分析,考察各款色谱柱的溶出行为并进行比较。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161023_02_2222981_3.png【HPLC conditions】Column size : 2.0 or 2.1 mm i.d. x150 mm Mobile phase : 10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH = 95 / 5Flow rate : 0.2 mL/minTemperature : 40 ˚CDetection : UV 254 nmInj. vol. : 1 μLSample dissolved in : H2O(100 ppm each)如图2,键合金刚烷基的CAPCELL PAK ADME色谱柱保留能力最强。根据所得结果计算得到的参数见表1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/02/201702161035_01_2222981_3.png将各款色谱柱对应的尿嘧啶核苷(峰1)、2’-脱氧尿苷(峰2 )、鸟嘌呤核苷(峰3)与2’-脱氧鸟苷(峰5)的分配系数比进行比较,可知与其他C18色谱柱相比,CAPCELL PAK ADME对应参数值最大,说明其对羟基具有优秀的识别能力;同时,将尿嘧啶核苷(峰1)与5-甲基尿苷(峰4)的分离系数比进行比较,可知ADME色谱柱对于甲基也具有适度的识别能力,因此对于疏水性化合物来说,具有与C18[/col

  • 生物化学名词解释大全 第7章

    第七章 1,核苷(nucleoside):是嘌呤或嘧啶碱通过共价键与戊糖连接组成的化合物。核糖与碱基一般都是由糖的异头碳与嘧啶的N-1或嘌呤的N-9之间形成的β-N-糖键连接。 2,核苷酸(uncleoside):核苷的戊糖成分中的羟基磷酸化形成的化合物。 3,cAMP(cycle AMP):3ˊ,5ˊ-环腺苷酸,是细胞内的第二信使,由于某部些激素或其它分子信号刺激激活腺苷酸环化酶催化ATP环化形成的。 4,磷酸二脂键(phosphodiester linkage):一种化学基团,指一分子磷酸与两个醇(羟基)酯化形成的两个酯键。该酯键成了两个醇之间的桥梁。例如一个核苷的3ˊ羟基与别一个核苷的5ˊ羟基与同一分子磷酸酯化,就形成了一个磷酸二脂键。 5,脱氧核糖核酸(DNA):含有特殊脱氧核糖核苷酸序列的聚脱氧核苷酸,脱氧核苷酸之间是是通过3ˊ,5ˊ-磷酸二脂键连接的。DNA是遗传信息的载体。 6,核糖核酸(RNA):通过3ˊ,5ˊ-磷酸二脂键连接形成的特殊核糖核苷酸序列的聚核糖核苷酸。 7,核糖体核糖核酸(Rrna,ribonucleic acid):作为组成成分的一类 RNA,rRNA是细胞内最 丰富的 RNA . 8,信使核糖核酸(mRNA,messenger ribonucleic acid):一类用作蛋白质合成模板的RNA . 9, 转移核糖核酸(Trna,transfer ribonucleic acid):一类携带激活氨基酸,将它带到蛋白质合成部位并将氨基酸整合到生长着的肽链上RNA。TRNA含有能识别模板mRNA上互补密码的反密码。 10,转化(作用)(transformation):一个外源DNA 通过某种途径导入一个宿主菌,引起该菌的遗传特性改变的作用。 11,转导(作用)(transduction):借助于病毒载体,遗传信息从一个细胞转移到另一个细胞。 12,碱基对(base pair):通过碱基之间氢键配对的核酸链中的两个核苷酸,例如A与T或U , 以及G与C配对 。 13,夏格夫法则(Chargaff’s rules):所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等(A=T),鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔含量相等(G=C),既嘌呤的总含量相等(A+G=T+C)。DNA的碱基组成具有种的特异性,但没有组织和器官的特异性。另外,生长和发育阶段`营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。 14,DNA的双螺旋(DNAdouble helix):一种核酸的构象,在该构象中,两条反向平行的多核甘酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。碱基位于双螺旋内侧,磷酸与糖基在外侧,通过磷酸二脂键相连,形成核酸的骨架。碱基平面与假象的中心轴垂直,糖环平面则与轴平行,两条链皆为右手螺旋。双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm, 两核甘酸之间的夹角是36゜,每对螺旋由10对碱基组成,碱基按A-T,G-C配对互补,彼此以氢键相联系。维持DNA双螺旋结构的稳定的力主要是碱基堆积力。双螺旋表面有两条宽窄`深浅不一的一个大沟和一个小沟。 15.大沟(major groove)和小沟(minor groove):绕B-DNA双螺旋表面上出现的螺旋槽(沟),宽的沟称为大沟,窄沟称为小沟。大沟,小沟都、是由于碱基对堆积和糖-磷酸骨架扭转造成的。 16.DNA超螺旋(DNAsupercoiling):DNA本身的卷曲一般是DNA双`螺旋的弯曲欠旋(负超螺旋)或过旋(正超螺旋)的结果。 17.拓扑异构酶(topoisomerse):通过切断DNA的一条或两条链中的磷酸二酯键,然后重新缠绕和封口来改变DNA连环数的酶。拓扑异构酶Ⅰ、通过切断DNA中的一条链减少负超螺旋,增加一个连环数。某些拓扑异构酶Ⅱ也称为DNA促旋酶。 18.核小体(nucleosome):用于包装染色质的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的。 19.染色质(chromatin): 是存在与真核生物间期细胞核内,易被碱性染料着色的一种无定形物质。染色质中含有作为骨架的完整的双链DNA,以及组蛋白`非组蛋白和少量的DNA。 20.染色体(chromosome):是染色质在细胞分裂过程中经过紧密缠绕`折叠`凝缩和精细包装形成的具有固定形态的遗传物质存在形式。简而言之,染色体是一个大的单一的双链DNA分子与相关蛋白质组成的复合物,DNA中含有许多贮存和传递遗传信息的基因。 21.DNA变性(DNAdenaturation):DNA双链解链,分离成两条单链的现象。 22.退火(annealing):既DNA由单链复性、变成双链结构的过程。来源相同的DNA单链经退火后完全恢复双链结构的过程,同源DNA之间`DNA和RNA之间,退火后形成杂交分子。 23.熔解温度(melting temperature,Tm):双链DNA熔解彻底变成单链DNA的温度范围的中点温度。 24.增色效应(hyperchromic effect):当双螺旋DNA熔解(解链)时,260nm处紫外吸收增加的现象。 25.减色效应(hypochromic effect):随着核酸复性,紫外吸收降低的现象。 26.核酸内切酶(exonuclease): 核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶中能够水解核酸分子内磷酸二酯键的酶。 27.核酸外切酶(exonuclease):从核酸链的一端逐个水解核甘酸的酶。 28.限制性内切酶(restriction endonuclease):一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。 29.限制酶图谱(restriction map):同一DNA用不同的限制酶进行切割,从而获得各种限制酶的切割位点,由此建立的位点图谱有助于对DNA的结构进行分析。 30.反向重复序列(inverted repeat sequence):在同一多核甘酸内的相反方向上存在的重复的核甘酸序列。在双链DNA中反向重复可能引起十字形结构的形成。 31.重组DNA技术(recombination DNA technology):也称之为基因工程(genomic engineering).利用限制性内切酶和载体,按照预先设计的要求,将一种生物的某种目的基因和载体DNA重组后转入另一生物细胞中进行复制`转录和表达的技术。 32.基因(gene):也称为顺反子(cistron).泛指被转录的一个DNA片段。在某些情况下,基因常用来指编码一个功能蛋白或DNA分子的DNA片段。

  • 【“仪”起享奥运】基于液相色谱-质谱技术的芦西丁-DNA加合物快速筛查

    [size=16px] [/size] [size=16px]目的 建立基于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-三重四级杆质谱(LC-QQQ-MS)及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-高分辨质谱(LC-HRMS)技术的DNA加合物通用型“发现-确证”分析策略,研究茜草中潜在遗传毒性物质芦西丁(lucidin,Luc)与3种2'-脱氧核苷的直接反应性和代谢反应性,筛查和确证可能的Luc特异性DNA加合物。 方法 采用与DNA加合物具有相同质谱碎裂模式的3种2'-脱氧核苷,建立和优化三重四极杆质谱中性丢失和伪中性丢失扫描模式下未知DNA加合物的非靶向筛查方法,以及高分辨数据依赖性扫描模式下的加合物靶向确证方法。将Luc与2'-脱氧核苷在Ⅰ相代谢激活和未激活条件下分别孵育,筛查生成的特异性DNA加合物,再通过特征性质谱碎裂离子进行结构验证。 结果 优化后的伪中性丢失扫描对脱氧核苷脱糖基的检测灵敏度可达pgmL-1级别。在Luc与脱氧核苷体外孵育模型中,发现并确证了6种Luc-DNA加合物,包含2种2'-脱氧胞苷(dC)加合物、2种2'-脱氧腺苷(dA)加合物、2种2'-脱氧鸟苷(dG)加合物,并对其结构进行了表征。Luc-DNA加合物的生成随着Luc暴露量、暴露时间的增加而升高,存在显著的剂量-反应、时间-反应关系,且该种结合无需代谢激活即可发生。 结论 所建立的DNA加合物“发现-确证”策略灵敏度高、准确性好,能够提供分子水平上加合物的结构信息,适用于评估Luc暴露所致的DNA损伤,为其毒性机理研究和再评价提供了有力数据支持,也为中草药中潜在遗传毒性成分快速筛查提供了重要的方法参考。[/size]

  • 脱氧管的变化

    脱氧管的变化

    瓦里安气相GC450,自带脱氧管与脱水管,脱氧管与脱水管内绿色脱氧剂变为黑色为失效,看看脱氧管与脱水管内的绿色脱氧剂的变化吧。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304051029_433987_1645480_3.jpg左边为moisture filter(水分过滤器),右边为oxygen filter(氧气过滤器)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304051031_433989_1645480_3.jpg这是左边moisture filter(水分过滤器)的大图,全部为绿色,顶部是照相光线问题,不是发黑。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/04/201304051031_433988_1645480_3.jpg这是右边为oxygen filter(氧气过滤器)的大图,可见底部绿色已经变黑,等绿色全部变为黑色,就需要更换脱氧管了,也需要K人民币,国外东西贵呀。

  • GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    [align=left][color=black]核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。根据碱基的不同,分别有胞嘧啶核苷酸(CMP)、腺嘌呤核苷酸(AMP)、尿嘧啶核苷酸(UMP)、[/color]鸟嘌呤核苷酸(GMP)及次黄嘌呤核苷酸(IMP)等。由于核苷酸类化合物的极性较强,在常规反相C18色谱柱上难以保留,通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。[/align][align=left][b]第一部分[color=red]CAPCELL PAK C18 AQ[/color]检测方法[/b][/align][align=left][/align][align=left][b]C[color=black]APCELL PAK C18 AQ[/color][/b][color=black]色谱柱可耐受纯水条件,适用于极性较大物质的高水相条件下的分析,因此也非常适合《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》。[/color][color=black]按照国标方法,对核苷酸标准品以及样品进行分析,可得到良好线性以及定量分析结果;对30个样品进行前处理后进行分析,样品中各核苷酸与其前后杂质分离良好,且不同样品之间各核苷酸的保留时间相一致。[/color][/align][align=left][b][color=red] [/color][/b][/align][align=left][b]《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》方法微调[/b][/align][align=left][img=,600,248]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051502543279_7587_2222981_3.jpg!w813x337.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051503129151_4402_2222981_3.jpg!w776x226.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left] 下表为样品定量浓度结果[/align][align=left][img=,600,126]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051455159701_7741_2222981_3.jpg!w900x190.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,221]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456000129_1190_2222981_3.jpg!w844x311.jpg[/img] 上图为核苷酸样品与标准品的对比谱图[/align][align=left][/align][align=left]基于个别样品分析时遇到的CMP与其前杂质未得到良好分离的情况,通过对洗脱条件进行调整,可实现CMP与其前杂之间的良好分离。[/align][align=left][img=,600,215]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456501881_4082_2222981_3.jpg!w843x303.jpg[/img][img=,600,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456507871_7358_2222981_3.jpg!w900x263.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left][b]第二部分[color=red]CAPCELL PAK ADME[/color]色谱柱的分析[/b][/align][align=left][color=black]CAPCELLPAK ADME[/color][color=black]键合了笼状金刚烷基团,兼具高极性和疏水性特点,对高极性化合物有出色的保持和分离效果。[/color]在国标原条件下,不论是标准品还是样品均可使用CAPCELL PAK ADME得到5种核苷酸的良好保留与分离结果。[/align][align=left]值得注意的是,ADME色谱柱的溶出顺序与常规反相C18色谱柱不尽相同,再次印证了其独特的保留分离模式。对于不局限于C18色谱柱的老师来说,具有独特溶出模式的CAPCELL PAK ADME色谱柱是分析强极性化合物的不二之选。[/align][align=left][img=,500,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051457304991_1509_2222981_3.jpg!w758x525.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸标准品的分析结果[/color][/align][align=left][/align][align=left][img=,500,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051458490969_9562_2222981_3.jpg!w758x527.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸实际样品的分析结果[/color][/align]

  • GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定

    [align=left][/align][align=left][color=black]核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。根据碱基的不同,分别有胞嘧啶核苷酸(CMP)、腺嘌呤核苷酸(AMP)、尿嘧啶核苷酸(UMP)、[/color]鸟嘌呤核苷酸(GMP)及次黄嘌呤核苷酸(IMP)等。由于核苷酸类化合物的极性较强,在常规反相C18色谱柱上难以保留,通常通过添加离子对试剂等方式增强保留。[/align][align=left][b]第一部分[color=red]CAPCELL PAK C18 AQ[/color]检测方法[/b][/align][align=left][/align][align=left][b]C[color=black]APCELL PAK C18 AQ[/color][/b][color=black]色谱柱可耐受纯水条件,适用于极性较大物质的高水相条件下的分析,因此也非常适合《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》。[/color][color=black]按照国标方法,对核苷酸标准品以及样品进行分析,可得到良好线性以及定量分析结果;对30个样品进行前处理后进行分析,样品中各核苷酸与其前后杂质分离良好,且不同样品之间各核苷酸的保留时间相一致。[/color][/align][align=left][b][color=red] [/color][/b][/align][align=left][b]《GB 5413.40-2016 婴幼儿食品和乳品中核苷酸的测定》方法微调[/b][/align][align=left][img=,600,248]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051502543279_7587_2222981_3.jpg!w813x337.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051503129151_4402_2222981_3.jpg!w776x226.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]下表为样品定量浓度结果[/align][align=left][img=,600,126]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051455159701_7741_2222981_3.jpg!w900x190.jpg[/img][/align][align=left][img=,600,221]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456000129_1190_2222981_3.jpg!w844x311.jpg[/img]上图为核苷酸样品与标准品的对比谱图[/align][align=left][/align][align=left]基于个别样品分析时遇到的CMP与其前杂质未得到良好分离的情况,通过对洗脱条件进行调整,可实现CMP与其前杂之间的良好分离。[/align][align=left][img=,600,215]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456501881_4082_2222981_3.jpg!w843x303.jpg[/img][img=,600,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051456507871_7358_2222981_3.jpg!w900x263.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left][b]第二部分[color=red]CAPCELL PAK ADME[/color]色谱柱的分析[/b][/align][align=left][color=black]CAPCELLPAK ADME[/color][color=black]键合了笼状金刚烷基团,兼具高极性和疏水性特点,对高极性化合物有出色的保持和分离效果。[/color]在国标原条件下,不论是标准品还是样品均可使用CAPCELL PAK ADME得到5种核苷酸的良好保留与分离结果。[/align][align=left]值得注意的是,ADME色谱柱的溶出顺序与常规反相C18色谱柱不尽相同,再次印证了其独特的保留分离模式。对于不局限于C18色谱柱的老师来说,具有独特溶出模式的CAPCELL PAK ADME色谱柱是分析强极性化合物的不二之选。[/align][align=left][img=,500,346]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051457304991_1509_2222981_3.jpg!w758x525.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸标准品的分析结果[/color][/align][align=left][/align][align=left][img=,500,347]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903051458490969_9562_2222981_3.jpg!w758x527.jpg[/img][/align][align=left][color=black] 上图为CAPCELL PAK ADME对5种核苷酸实际样品的分析结果[/color][/align][align=left][color=black][/color][/align][align=left][color=black][/color][/align][align=left][/align]

  • 请教8-羟基脱氧鸟苷酸的分离萃取方法

    我要检测的指标是8-羟基脱氧鸟苷酸,它是DNA中鸟嘌呤的氧化产物,在尿中以原形代谢,所以我用C-18固相萃取柱(6ml,500mg)萃取尿液,下面是处理方法:尿液在10℃1500g.离心5分钟除去沉淀,上清液以0.2μm微孔滤膜过滤,然后上清液用C-18固相萃取柱(6ml,500mg)萃取,将C-18固相萃取柱连接于12端口的真空泵,C-18柱事先用5ml甲醇 和5ml水平衡,然后,以2ml的尿液上柱,柱子用去离子水配置的3ml 6℅甲醇冲洗,接下来柱子用6ml去离子水冲洗,8-OhdG用去离子水配置的2ml 10℅乙腈洗提,收集洗提液,有机溶剂在纯氮60℃,30分钟下蒸发,最后,样品的体积用水调整到0.5ml,50μl样品上高压液相柱。现在我的问题是我在尿液中加入标准品或单独加入标准品固相萃取柱对其没有保留,既是我在尿样中8-OH-dG峰并不增加,而单独上标准品在上柱是就有标准品大量留出,而在洗脱液中含量很低。各位专家,请帮助解决一下!

  • 脱氧管失效确认

    有一种脱氧管,使用玻璃+有机玻璃封装,可清楚的看到脱氧管内脱氧剂的颜色。使用前,脱氧剂为绿色的小颗粒;使用中,脱氧剂由进气端向出气端逐渐变成黑色;失效后,脱氧剂完全变成黑色。

  • 为什么说更换脱氧管是一项技术活

    我们在以前的一篇文章中,提到脱氧管的更换是一项技术活。今天我们就详细说说为什么说更换脱氧管是一项技术活。先说说脱氧管的安装和拆卸,然后谈谈脱氧管的保管。在安装前,要仔细阅读说明书,熟悉安装程序,确定好脱氧管的接入位置,在气源和用气设备之间如果还有其他净化管设备(如脱水、脱碳、脱烃等设备),要将脱氧管安装在靠近用气设备一侧,脱氧管一般是最后一道净化设备。并按安装位置需要准备好两个长度合适的气管,一般用Φ3的不锈钢管或紫铜管(注意:橡皮管和PE管管壁会渗透氧分子,造成二次污染,不能用),并将管内的灰尘和油污洗净,吹干,依次在洗好的气管两端各套上螺帽和压环。然后按以下步骤进行安装:1,首先要搞清楚脱氧管的气流方向,了解进气端和出气端(注意:有些脱氧管没有方向规定)。2,然后用一根气管与气源连好,并用小气流吹扫气管和减压器内的空气,待把空气排净后再进行下一步操作,注意:该气流要一直保持到整个安装结束。3,待上步把空气排净后,再将脱氧管的入口端堵头螺帽拧开,快速而正确地将气源管路连接到脱氧管,上紧螺帽,用力适当,以不漏气为准。4,打开脱氧管出口端的堵头螺帽,同样要快速而正确连接另一根气管管,上紧螺帽,用力适当,以不漏气为准,最后,连上用气设备,调试完毕,关门气源。当脱氧管脱氧剂饱和失效后(根据颜色变化或仪器响应状况),就要拆卸脱氧管,首先,需要打开气路的气流,然后在不停气流的情况下,先打拧开脱氧管出口端,立即用原配堵头密封,再拧开脱氧管入口端,并立即密封好,最后关闭气源。关于脱氧管的保管:1,脱氧管两端堵头螺帽在使用前绝对不能松动,以防空气从两端扩散到脱氧管内部,使脱氧管很快失效,2,脱氧管内紧密装填脱氧剂颗粒,保管和安装使用时不得用力碰撞或摔打。3,长时间停用时,应使管两端与空气隔绝状态,

  • [实验室建设] 生物实验室常用英文单词

    一、化学试剂1、氨基酸alanine (Ala, A) 丙氨酸valine (Val, V) 缬氨酸leucine (Leu, L) 亮氨酸isoleucine (Ile,I) 异亮氨酸proline (Pro, P) 脯氨酸phenylalanine (Phe, F) 苯丙氨酸tryptophan (Trp, W) 色氨酸methionine (Met, M) 蛋氨酸glycine (Gly, G)甘氨酸serine (Ser, S)丝氨酸threonine (Thr, T)苏氨酸cysteine (Cys, C)半胱氨酸tyrosine (Tyr, Y) 酪氨酸asparagines (Asn, N) 天冬氨酸glutamine (Gln, Q)谷氨酰胺lysine (Lys, K)赖氨酸arginine (Arg, R)精氨酸histidine (His, H) 组氨酸aspartic acid (Asp, D)天冬氨酸glutamic acid (Glu, E)谷氨酸2、核苷酸adenosine 阿糖腺苷guanosine 鸟嘌呤核苷cytidine 胞二磷胆碱thymidine胸腺嘧啶脱氧核苷uridine尿嘧啶核甙deoxy-脱氧3、其他化学试剂Acetic acid glacial 冰乙酸Boric acid (H3BO3,61.83) 硼酸Calcium chloride 2-hydrate (CaCl2.2H2O, 147.02) D(+) Glucose (180.16)EDTA tetrasodium dihydrate (EDTA-Na4.2H2O,416.20)Ethanol absolute 无水乙醇Ethylene diamine tetraacetic acid disodium salt dyhydrate (EDTA-Na2.2H2O,372.24)Sodium acetate trihydrate (3H2O,136.08) 含三个水分子的乙酸钠Sodium chloride 氯化钠Sodium dodecyl sulphate (288.38)十二烷基硫酸钠Tris-(hydroxymethyle)-aminomethane (Tris,121.14)Tryptone 胰蛋白胨Yeast extract 酵母提取物Agar 琼脂Ampicillin 氨苄西林Potassium acetate醋酸钾Isopropanol异丙醇Lithium chloride氯化锂PEG8000 聚乙二醇8000RNAse A RNA酶AHydrochloric acid盐酸Sodium hydroxide氢氧化钠Ammonium acetate醋酸铵Isoamyl alcohol异戊醇Chloroform氯仿

  • 亲,你知道怎么更换脱氧管吗?

    亲,你知道怎么更换脱氧管吗?

    [img=,655,655]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105271954287884_5273_2743955_3.jpg!w655x655.jpg[/img]小黑?:瞎编,那个啥,实验室的脱氧管已经全黑报废了,新买的脱氧管刚到,第一次上手我需要注意什么呢??瞎编:这个换脱氧管的要领就是一个字,要非常快?。我们都知道脱氧管的作用就是除去载气中的氧,以达到保护色谱柱(和色谱系统,譬如ECD检测器)?。安装新的脱氧管之前一定要确认是开着氮气操作,可以适当的将氮气减压阀的分压调低一点,方便控制?。特别是新气瓶切换或者中间还有其他净化装置的,可以将旧脱氧管连接口断开,充分吹扫后再连接上新的脱氧管?一端。因为脱氧管填料填充的时候以及运输的时候会出现一些固体粉末,所以当需要连接脱氧管另外一端时,建议先将出气口放空,直到载气将内部的粉尘吹干净,再连接?上管路。[img]https://ss1.bdstatic.com/70cFvXSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=1070522202,729254815&fm=26&gp=0.jpg[/img]?小黑:要非常快?,不是四个字吗?那瞎编其实我们实验室用的都是高纯氮,脱氧管好像颜色变得也不是很厉害,我是不是可以不用脱氧?管这种东西呢??瞎编:是否要用脱氧管?,具体看你的实验要求了。如果目前你的实验用是非极性或者弱极性的色谱柱,检测器也不是ECD那么可以?忽略脱氧管。但如果你用的是极性色谱柱或强极性色谱柱或搭配ECD检测器,那么你就必须要增加脱氧管,否则你的色谱柱和检测器?很容易受到污染,?降低使用的寿命。上一篇文章《关于GC气源的选择及注意事项》中有提到载气的要求?以及选择。[img]https://ss2.bdstatic.com/70cFvnSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=2254915494,3880121274&fm=15&gp=0.jpg[/img]小黑:哦哦原来这个不起眼的小配件这么重要?呢。那这个脱氧管?一般多久换一次呢??瞎编:。。。。这个只能根据你实际的使用频率和载气的纯度了,譬如你载气纯度不够或者每次你都把载气用到一干二净,?那么你的脱氧管也会很快失效的。假如你的仪器是机械阀控制,使用结束后你没有把阀门关紧,空气回流,那么也会导致你的?脱氧管很快失效。所以这个没有一个准确的说法?哈。但根据给官方的答案,有人曾经做过实验,平均5瓶高纯氮气可以消耗?1根脱氧管哈,所以其实你认为的高纯也不一定就?很高纯。[img]https://ss1.bdstatic.com/70cFuXSh_Q1YnxGkpoWK1HF6hhy/it/u=1373874612,1030314959&fm=11&gp=0.jpg[/img]小黑?:瞎编,文字还是不够生动形象呀,能不能整个?视频带文字的呢?瞎编?:没有问题呀,?请看下面的视频讲解哈。?小黑:瞎编这次忘记开美颜了哦,?啊哈哈哈。原来脱氧管还有其他造型,我才知道呢。瞎编?:嗯是的,不过视频拍摄过程都是就地取材,也没有去没有可以去彩排和准备你将就一下哈?。里面的不锈钢材质的并非脱氧管而是?除烃管哈。其实脱氧管有很多类型,不同厂家?设计的不太一样。你可以看看?。譬如下面?所示:[img]https://mmbiz.qlogo.cn/mmbiz_png/libE0ZpwsmGWMZYwWqOQU9OABaibPSJKPXibt5SxC2HtpCUsNKPjoYZ9U6ic7atDa6OWxH3vAqs1VEYlxibEib9CSVHw/0?wx_fmt=png[/img]

  • 【求助】请教GaAs脱氧工艺

    本人长期做II-VI族分子束外延,对III-V族不大了解,因此向各位高手请教:1、GaAs脱氧时衬底真实温度是否在600C附近,如何脱氧?曾听说脱氧过程中需要喷As以防止表面As的挥发,避免形成Ga滴,是否如此?2、如何判断100晶向衬底脱氧结束?是否应该等再构出现才基本可以判断,什么再构,2*3还是3*2?如何计算脱氧时间?我曾经在211晶向的GaAs衬底上脱氧,未喷As,也未出现再构,同样可以外延好的样品,以上两点疑问是否属实,望各位分子束外延高手帮忙解答。

  • 【分享】植物生长调节剂的种类

    按用途分有以下几种:用途 适用的植物生长调节剂名称延长贮藏器官休眠 青鲜素,萘乙酸钠盐,萘乙酸甲酯。打破休眠促进萌发 赤霉素、激动素、硫脲,氯乙醇,过氧化氢。促进茎叶生长 赤霉素、6—苄基氨基嘌呤,油菜素内酯,三十烷醇。促进生根 吲哚丁酸,萘乙酸,2,4—D,比久,多效唑,乙烯利,6—苄基氨基嘌呤。抑制茎叶芽的生长 多效唑,优康唑,矮壮素,比久,皮克斯,三碘苯甲酸,青鲜素,粉绣宁。促进花芽形成 乙烯利,比久,6—苄基氨基嘌呤,萘乙酸,2,4—D,矮壮素。抑制花芽形成 赤霉素,调节膦。疏花疏果 萘乙酸,甲萘威、乙烯利、赤霉素、吲熟酯,6—苄基氨基嘌呤。保花保果 2,4—D,萘乙酸,防落素,赤霉素,矮壮素,比久,6—苄基氨基嘌呤。延长花期 多效唑,矮壮素,乙烯利,比久。诱导产生雌花 乙烯利,萘乙酸,吲哚乙酸,矮壮素。诱导产生雄花 赤霉素切花保鲜 氨氧乙基乙烯基甘氨酸,氨氧乙酸,硝酸银,硫代硫酸银。形成无籽果实 赤霉素,2,4—D,防落素,萘乙酸,6—苄基氨基嘌呤。促进果实成熟 乙烯利,比久。延缓果实成熟 2,4—D,赤霉素,比久,激动素,萘乙酸,6—苄基氨基嘌呤。延缓衰老 6—苄基氨基嘌呤,赤霉素,2,4—D,激动素。提高氨基酸含量 多效唑,防落素,吲熟酯。提高蛋白质含量 防落素,西玛津,莠去津,萘乙酸。提高含糖量 增甘膦,调节膦,皮克斯。促进果实着色 比久,吲熟酯,多效唑。增加脂肪含量 萘乙酸,青鲜素,整形素。提高抗逆性 脱落酸,多效唑,比久,矮壮素。

  • 【资料】蛹虫草及其培养基中主要核苷类成分的分析比较

    采用高效液相色谱法测定虫草中的核苷类成分,优化后的色谱条件为YMC-Polyamine 柱(250mm × 4.6mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相:乙腈- 水(V/V):0~15min 为90:10,15~20min 为86.5:13.5,20~30min 为75:25,30~35min 为70:30;流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:259nm;进样量:10μL。结果表明:胸腺嘧啶、虫草素、尿嘧啶、腺苷、腺嘌呤、尿苷、鸟嘌呤、次黄嘌呤均能得到较好分离,该方法稳定性好、精密度高、重现性好,适用于虫草中的核苷类成分的分析。经分析发现,蛹虫草子实体核苷类物质组成大致相似,但含量差异非常显著,同时发现蛹虫草培养基残基及固体发酵产物中虫草素含量较高,其他核苷类成分很少,因此认定蛹虫草培养基残基及固体发酵产物是非常优良的分离纯化虫草素的原料。

  • 脱氧管是不是失效了

    脱氧管是不是失效了

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408041308_508985_2666664_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408041309_508986_2666664_3.jpg大家帮忙看看我们气质的脱氧管是不是需要更换了,脱氧管型号CP17973

  • 求购脱氧柱

    求脱氧柱(60-80mesh),规格:1/8英寸*0.4m。急!!!有知道的还请告知啊,谢谢了。

  • 【求助】关于变色脱氧管的更换。

    请教1、变色脱氧管据说可以再生,具体是怎么操作啊?2、在脱氧管完全变色后还用了ECD,听人说重新更换脱氧管后要进行清洁检测 器,这个又怎么具体操作啊?

  • 【求助】脱氧管求助

    【求助】脱氧管求助

    各位大虾,我没装过脱氧管,现在要装,那位好心人事能教我怎么装不,最好能赐视频一段。不胜感激。

  • 【分享】有机溶剂的脱氧

    有机溶剂的脱氧1. 冷冻-抽气法 这是最常用也是最为有效的溶剂脱氧的方法。在Schlenk瓶或者厚壁的密封容器中加入所要脱氧的溶剂,浸入液氮中冷冻。当溶剂彻底固化后,抽真空2-3分钟。然后升温至溶剂液化。然后再度冷却,抽真空,如此反复三遍,最后一遍升温的同时通惰性气体。脱氧的溶剂在密封的Schlenk瓶中通常可以保存1-2天。 2. 超声下气体交换 粗略的脱氧,可以采用在常压下反复的用超声波脱气0.5-1分钟,然后通入惰性气体。如此反复5-10个循环,可以用于HPLC或者不太严格的无氧反映。3. 吹洗 这种方法是三种方法中最为简略的,通常不能用于严格的反应,它的优点在于适用于大量溶剂的简单处理。就像字面意思所说的,也就是将惰性气体鼓泡通过溶剂30分钟到一个小时。需要注意的是,操作过程中要防止溶剂的挥发和这一过程中水汽的凝结。

  • 【讨论】如果GCMS安装载气脱氧管,在换载气钢瓶时,如何操作才能最大限度避免空气(氧气)进入脱氧管?

    发过一个关于“GCMS是否安装载气脱氧管”有奖调查的帖子,从目前回帖的情况看,绝大多数朋友都安装氦气脱氧管。参看帖子:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100922/2807180/index.shtml现在请教大家,脱氧管的容量本身很小,同时氦气里的氧含量也很微量,单用于除去氦气里的氧,会用很长时间的。但空气的氧气很高,如果有较多空气进入脱氧管,哪就可能会使得脱氧管很快饱和而失效。如果GCMS安装载气脱氧管,在换载气钢瓶时,如何操作才能最大限度避免空气(氧气)进入脱氧管?

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