黑色素水溶生物染色

前些天，碰见一个食品公司的人要做黑豆皮中的黑色素，可农产品检测中心的人说没有相关的标准，只能参照黑米中的糯米黑色素进行测定。请问：这样测出来的黑色素含量准确么？有没有更好的黑色素测定方法？

关于c18柱能测黑色素吗，黑色素结构包括酪氨酸

请问用高效液相色谱法测定植物黑色素（almelanin）时，应该设定的波长、流动相、进样量等条件是多少？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif

请问有谁知道用液相色谱法测定植物黑色素的条件啊？例如：流动相、波长、流速等。。。万分感谢！！

[size=15px][font=宋体]传统中药粉防己（[/font][font=&]Stephaniatetrandra S. Moore[/font][font=宋体]）是防己科千金藤属草质藤本植物，汉防己甲素（[/font][font=&]Tetrandrine[/font][font=宋体]，[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]）是一种从粉防己中提取的天然双苄基异喹啉生物碱，具有多种药理作用，包括对多种癌症具有抑制活性，然而它对黑色素瘤的影响仍不清楚。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=宋体]通过体内和体外测定发现[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]对黑色素瘤具有抑制作用，机制上，[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]是[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]的直接靶标，[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]通过泛素[/font][font=&]-[/font][font=宋体]蛋白酶体系统导致[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]降解，导致随后的[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]积累，进而导致过度的内质网应激和自噬阻断，而过表达[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]减弱[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]诱导的[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]积累。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]TET[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]抑制黑色素瘤细胞的增殖和活力[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]作者首先使用多种黑色素瘤细胞系评估了[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]的抗黑色素瘤作用，发现[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]对黑色素瘤细胞具有显著的抗增殖、周期阻滞、促凋亡作用 [/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]TET[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]通过诱导细胞骨架解聚诱导阻断的自噬通量[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&]TET[/font][font=宋体]处理后，在细胞内观察到可辨别的不规则液泡，表明其可能具有诱导细胞自噬的潜力。进一步免疫荧光和[/font][font=&]WB[/font][font=宋体]验证发现[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]处理后，自噬通量受损。考虑到到微管和微丝系统在协调自噬体与溶酶体的形成、运输和融合中的关键作用，作者研究了[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]是否扰乱了它们的正常结构。结果表明，[/font][font=&] TET[/font][font=宋体]破坏了它们在黑色素瘤细胞内的结构完整性。这些发现表明[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]诱导的细胞骨架解聚有助于阻断自噬通量 [/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]TET[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]通过触发[/color][/font][font=&][color=#0070c0]ER[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]应激诱导自噬[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]基于[/font][font=&]RNA-seq[/font][font=宋体]信号通路富集分析，作者发现[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]促进了未折叠蛋白反应（[/font][font=&]UPR[/font][font=宋体]）。鉴于在大量文献中已经确定了自噬与内质网应激之间的关联，作者验证发现[/font][font=&]ATF6[/font][font=宋体]介导的[/font][font=&]ER[/font][font=宋体]应激激活了[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]处理的黑色素瘤细胞的自噬 [/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][/b][/size][size=15px][b][font=&][color=#0070c0]TET[/color][/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]导致大量[/color][/font][font=&][color=#0070c0]ROS[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]积累[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&]RNA-seq [/font][font=宋体]结果中[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]响应途径显著富集，为了揭示[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]诱导的[/font][font=&]ER[/font][font=宋体]应激和随之而来的自噬阻断的机制，作者研究了其对[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]的影响，发现[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]治疗后线粒体自噬的激活，[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]信号激增。且伴随着[/font][font=&] ROS [/font][font=宋体]水平的激增，[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]诱导的细胞死亡、细胞增殖和细胞骨架解聚的抑制以及自噬通量的阻断，都通过用[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]清除剂[/font][font=&]NAC[/font][font=宋体]得到有效挽救[/font][font=宋体] [/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]SIRT5 [/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]被确定为[/color][/font][font=&][color=#0070c0]TET[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的直接靶标[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]接着作者采用[/font][font=&]Pulldown+MS[/font][font=宋体]方法确定了[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]的直接靶点，通过整合蛋白质亚细胞定位（线粒体）和[/font][font=&]GO[/font][font=宋体]富集分析，[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]成为潜在靶标。进一步作者通过竞争性结合实验、[/font][font=&]CETSA[/font][font=宋体]、[/font][font=&]ITC[/font][font=宋体]实验证实[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]与[/font][font=&] TET[/font][font=宋体]的直接结合，分子动力学模拟[/font][font=&]1[/font][font=宋体]揭示了[/font][font=&]SIRT5 [/font][font=宋体]和[/font][font=&] TET [/font][font=宋体]之间的结合模式。此外，作者发现[/font][font=&]SIRT5 [/font][font=宋体]在黑色素瘤组织中表现出表达增加，与患者预后不良相关，且[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]通过泛素蛋白酶体系统下调了黑色素瘤细胞中[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]的表达。 [/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]6[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]TET [/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]以[/color][/font][font=&][color=#0070c0] SIRT5 [/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]依赖性方式阻碍体内黑色素瘤的生长[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]为了验证[/font][font=&] SIRT5 [/font][font=宋体]在[/font][font=&] TET [/font][font=宋体]诱导的黑色素瘤细胞死亡中的作用，作者构建了[/font][font=&] SIRT5 [/font][font=宋体]敲低和过表达细胞，发现[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]过表达逆转了[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]诱导的黑色素瘤细胞线粒体损伤。最后通过动物模型发现，[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]治疗抑制了肿瘤体积和重量，并抑制了[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]水平，而在黑色素瘤细胞中过表达[/font][font=&]SIRT5 [/font][font=宋体]后[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]未能抑制增殖和致瘤能力[/font][font=宋体] [/font][/size] [size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0]总结[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]研究表明[/font][font=&]TET[/font][font=宋体]有效地靶向[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]，诱导[/font][font=&]SIRT5[/font][font=宋体]蛋白降解，进而导致线粒体功能障碍，表现为线粒体肿胀、线粒体自噬和[/font][font=&]ROS[/font][font=宋体]生成。研究表明[/font][font=&]TET [/font][font=宋体]是一种很有前途的治疗黑色素瘤的治疗剂[/font][/size]

一、目的要求 学习并掌握芽孢染色法。 二、基本原理 芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿（malachite green）或碱性品红（basicfuchsin）在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。三、器材 枯草芽孢杆菌，蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus），生孢梭菌（Clostridium sporogenes）； 孔雀绿染液，番红水溶液，苯酚品红溶液，黑色素溶液等。 四、操作步骤 方法1、 （1）将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。 （2）滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。 （3）用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5分钟。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约7．6％）染10分钟。 （4）倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。 （5）用番红水溶液复染1分钟，水洗。 （6）待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。 方法2、 （1）取二支洁净的小试管，分别加入0．2ml无菌水，再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔，另一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔，两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。 （2）在菌悬液中分别加入0．2ml苯酚品红溶液，充分混合后，于沸水浴中加热3—5分钟。 （3）用接种环分别取上述混合液2—3环于两片载玻片上，涂薄，风干后，将载玻片稍倾斜于烧杯上，用95％乙醇冲洗至无红色液流出。 （4）再用自来水冲洗，滤纸吸干。 （5）取1—2接种环黑色素溶液于涂片处，立即展开涂薄，自然干燥后，油镜观察，在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。

最近媒体报道的染色馒头传的沸沸扬扬，不知道有没有同行现在有在做馒头中色素的检测，有的话，能否交流下检测方法和经验？比如前处理是否有用到SPE的小柱？还是用聚酰胺粉吸附和洗脱？一般染色馒头的，色素的浓度大概在多少？大家交流下。

常用染色剂及配制供组织学诊断用的优秀常规染色剂，不仅须使细胞核和细胞浆有选择性着染，也要使结缔组织着色。苏木素-伊红染色的切片适当分色，可使这些结构得以区分，胞核表现为蓝色，胞浆和结缔组织纤维呈各种色调的粉红，因此这是一种最常用的常规染色剂。 一、苏木素-伊红染色的基本原理 苏木素是最早用于生物学上的天然染色剂之一，百余年来，一直是生物学实验室最常用的组织学中细胞核的染料，它是从苏木树的树心中提炼出来的，为浅褐色结晶或淡黄褐色的粉末状物。易溶于乙醇、甘油，也可溶于热水。苏木素本身没有染色能力，它经过氧化后，能产生具有染色能力的苏木红，苏木红又称为氧化苏木素或苏木因。 苏木素变成苏木红的过程叫作“成熟”。成熟的方法一般有两种：一种是把配制好的苏木素液在开口瓶中放置两个月以上，让其在日光和空气中的氧的作用下使之氧化。故一般地盛苏木素的瓶子放在向阳处，时间愈长，染色的效果愈好。常配制一大瓶，备长期使用。另一种方法是在苏木素液中加入氧化剂，如磺酸钠，过锰酸钾，氧化汞，双氧水等。用这种方法成熟与用第一种方法者不同的是，它放置时间愈长，染色的效果愈低。这是因为苏木红被继续氧化可生成无色的化合物，故一次不宜配制过多，还应放置40C冰箱内避光保存以延长使用时间。它的优点是配制后即可使用。 成熟的苏木素对组织并无亲和力，须加入含金属离子的媒染剂，才能达到染色的目的。一般用于明矾苏木素的媒染剂为钾明矾或氨明矾。主要是利用明矾中的铝离子和苏木红结合形成的铝沉淀色素为紫蓝色，对染色质有很大的亲和力，水和酒精都不能使其褪色。用于铁苏木素的媒染剂是三价铁离子，苏木红的铁沉淀色素为黑蓝色，不溶于水，因此，故不能配制大量含媒染剂的混合液，一般用时现配，或在染色过程中，先用铁明矾媒染，然后再染苏木素，如磷钨酸苏木素染色即是。 常规苏木素染色的对比染色是用伊红，也有采用焰红，因为焰红比伊红色泽更鲜明，此外还有采用橘黄G，比布里希猩红，波尔多红等作为对比染色。 苏木素-伊红染色，在组织病理学中，是一种日常使用最为广泛的常规染色方法。一张优质的染色切片，可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的确切依据。再根据此染色切片所见，分别进行不同的特殊染色。 二、染液的配制 在实验室内常用的苏木素染液有以下几种，不同的仅是染色时间以及比较每种染色方法彼此的优缺点，不过各有优劣。 （一）苏木素染液的配制方法如下 1.Harris氏苏木素液 甲液：苏木素 1g 无水酒精 10ml 乙液：硫酸铝钾 20g 蒸馏水 200ml 丙液：一氧化汞 0.5g 经典的配制方法是，先将甲液加热溶解后，密封待用，再将乙液加热溶解至沸，去火，待溶液仍处于小沸腾状态时再将甲液徐徐倾入其中，全部混合后，再使溶液在短时间内加热至沸腾，去火，最后，将氧化汞缓慢倾入溶液中（氧化汞一定要慢慢少量分次加入，切忌急躁。因氧化汞倒入后，溶液会迅速膨胀易沸出容器外而发生危险。）此时液体变为深紫色，待氧化汞全部放入后，再将溶液加温至沸腾片刻，立即将溶液放入流动的冷水中，并缓缓地连续摇晃至溶液完全冷却为止。隔夜后过滤，加入冰醋酸（按5%比例）混匀，再过滤后保存于冰箱内备用。 我们在实验工作中摸索了一种Harris氏苏木素的配制方法，染色效果很好，特介绍如下。 配方：（配制2000ml） 苏木素 9g 硫酸铝胺（铵明矾） 200g 氧化汞 7g（5—10g） 冰醋酸 100ml 蒸馏水 2000ml 器具： 3000毫升三角烧瓶 1个 200毫升量筒 1个 1000毫升量筒 1个 漏斗 1个（大） 滤纸 1大张 另备脱脂棉、电炉、湿抹布、大称量纸、流水槽等。 （器具要求达到化学洁净） 配法： 1．将苏木素溶于100毫升无水乙醇中，密封备用。 2．将200克铵明矾溶于2000毫升蒸馏水中，加热至沸。 3．去火。加入苏木素酒精搅拌，加热至沸。 4．去火。缓缓加入氧化汞。 5．微火煮至有金属膜产生。 6．去火。以湿抹布包住三角烧瓶的颈部。迅速放置于冷水浴中冷却，缓缓摇动烧瓶至液体完全冷却为止。 7．静置避光过夜。棉花过滤。滤液中加入冰醋酸（按5%的比例加入），混匀，滤纸过滤，备用。 注意事项： 1．配制好的苏木素液，未经使用的可长期置冰箱（冷藏）内保存。 2．盛液体的烧瓶要质优并且容积要大，防止忽速冷却对破裂和煮沸时液体溢出。 2.Hansen氏苏木素液 甲液：苏木素　　　　　　　　　　　1g 　　　无水酒精　　　　　　　　　　10ml 乙液：硫酸铝钾（钾明矾） 　　　　20g 　　　蒸馏水　　　　　　　　　　　200ml 丙液：高锰酸钾　　　　　　　　　　1g 　　　蒸馏水　　　　　　　　　　　16ml 　　先将甲液加热溶解，然后将乙液加热溶解，将甲、乙两液混合。再将丙液溶解后缓缓滴入，待全部混合后，再次煮沸一分钟，冷却后过滤，即可使用。 3.Heidenhain氏铁苏木素液 甲液：硫酸铁铵（紫色结晶）　　　　5g 　　　蒸馏水　　　　　　　　　　　100ml 乙液：苏木素　　　　　　　　　　　0.5g 　　　无水酒精　　　　　　　　　　10ml 　　　蒸馏水　　　　　　　　　　　90ml 　　此液要求硫酸铁铵只有紫色的透明结晶才能使用；苏木素是溶于洒精中然后加水。苏木素液需放置4-5周才能成熟。临用时将甲、乙两液等量混合后使用。（也可先将苏木素用无水酒精配成5%的贮备成熟，用时取10毫升加蒸馏水至100毫升使成乙液） 　　此苏木素液能染许多结构，但只能用于退行性染色法，需要熟练的分化，初学者宜用减半浓度的铁明矾分色，熟悉后再用原浓度分色。 　　此液与其它的苏木素染色技术有两个不同a.媒染剂与苏木素分开使用。b.所用的媒染剂亦用作为分色剂。 4．Ehrilich氏酸性苏木素液 主要应用一般染色和粘液，骨组织的染色 配方： 苏木素 2g 纯酒精 100ml 甘油 100ml 蒸馏水 100ml 冰醋酸 10ml 钾明矾 15g 将苏木素溶于纯酒精，再将钾明矾溶于蒸馏水中，溶解后将甘油倾人混合，然后加入苏木素酒精混合，最后加人冰醋酸，溶液全部混合后，应暴露在日光下使其自然成熟，时间约要三个月。（若加人300毫克碘酸钠，使苏木素迅速氧化则可立即使用。）此液贮存愈久染色力愈强。（可保持数年之久）染色时间5——20分钟，结果甚佳。 5．Delafreld氏苏木素液 主要应用于一般染色，弹力纤维的染色。 甲液： 苏木素 4g 纯酒精 25ml 乙液： 饱和铵明矾水溶液（约 10％）40毫升 丙液： 甘 油 100ml 甲 醇 100ml 先将苏木素溶于酒精，再将甲液混合在乙液中，置于白色瓶中并暴露在阳光下约一周，然后过滤，将丙液加人滤液中，待溶液呈暗灰色时再过滤，滤液密封保存。 6．Mayer氏明矾苏木素液 主要应用于一般染色，骨组织染色，及免疫组化染色。 配方： 苏木素 0.1g 钾明矾 5g 碘酸钠 0.02g 拘椽酸 0.1g 水合氯醛 5g 蒸馏水 100ml 先将苏木素及水煮沸溶解，加人钾明矾与碘酸钠，搅动直到全部溶解为止。再加人水合氯醛和拘椽酸，完全溶解后染液呈蓝紫色。加热煮沸五分钟，冷却后过滤即成。 此染液染切片5——15分钟，不需分化，充分水洗后，可使细胞核显蓝色并且非常细致清晰，通常用于对比染色。 7．Weigert氏铁苏木素液 甲液 苏木素 1g 无水酒精（或 95％酒精） 100ml 乙液 29％三氯化铁水溶液 4ml 蒸馏水 95ml 盐酸 1ml 临用时，取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内，染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用，因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀，所以铁作媒染液时，必须与染液分别配制和分别保存，染片时临时混合应用。 由于这是一种铁苏木素，它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用，且不会被光线退色，因此比钾矾苏木素染色较为持久。 8．Mallory氏磷钨酸苏木素

染色方法　　微生物染色方法一般分为单染色法和复染色法两种。前者用一种染料使微生物染色，但不能鉴别微生物。复染色法是用两种或两种以上染料，有协助鉴别微生物的作用。故亦称鉴别染色法。常用的复染色法有革兰氏染色法和抗酸性染色法，此外还有鉴别细胞各部分结构的（如芽胞、鞭毛、细胞核等）特殊染色法。食品微生物检验中常用的是单染色法和革兰氏染色法。1、单染色法　　用一种染色剂对涂片进行染色，简便易行，适于进行微生物的形态观察。在一般情况下，细菌菌体多带负电荷，易于和带正电荷的碱性染料结合而被染色。因此，常用碱性染料进行单染色，如美兰、孔雀绿、碱性复红、结晶紫和中性红等。若使用酸性染料，多用刚果红、伊红、藻红和酸性品红等。使用酸性染料时，必须降低染液的PH值，使其呈现强酸性（低于细菌菌体等电点），让菌体带正电荷，才易于被酸性染料染色。　　单染色一般要经过涂片、固定、染色、水洗和干燥五个步骤。　　染色结果依染料不同而不同：　　石碳酸复红染色液：着色快，时间短，菌体呈红色。　　　　美兰染色液：着色慢，时间长，效果清晰，菌体呈兰色。　　草酸铵结晶染色液：染色迅速，着色深，菌体呈紫色。2、革兰氏染色法　　革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。　　细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G—）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。　　革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别，染色反应不一样。现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物，它与碘和结晶紫的复合物结合很牢，不易脱色，阴性菌复合物结合程度底，吸附染料差，易脱色，这是染色反应的主要依据。　　另外，阳性菌菌体等电点较阴性菌为低，在相同PH条件下进行染色，阳性菌吸附碱性染料很多，因此不易脱去，阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。例如，在强碱的条件下进行染色，两类菌吸附碱性染料都多，都可呈正反应；PH很低时，则可都呈负反应。此外，两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致，阳性菌透性小，故不易被脱色，阴性菌透性大，易脱色。所以脱色时间，脱色方法也应严格控制。本文来自检验地带网　　革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：　　１）涂片固定。　　２）草酸铵结晶紫染1分钟。　　３）自来水冲洗。　　４）加碘液覆盖涂面染1分钟。　　５）水洗，用吸水纸吸去水分。　　６）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。　　７）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。　　染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。

中国首款针对黑色素瘤、脑癌、神经胶质瘤等恶性肿瘤的硼药完成中试，最快30分钟杀死癌细胞，预计2023年用于临床.

[font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/special-staining-services][b]HE[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/special-staining-services][b]染色[/b][/url]，全称为苏木精[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]伊红染色法 [/font][font=Calibri](hematoxylin-eosin staining)[/font][font=宋体]，是最基本的病理学染色技术，能够对正常组织和病理组织进行形态结构的观察。特殊染色是常规[/font][font=Calibri]HE[/font][font=宋体]染色的必要补充，能够有针对性地对组织成分进行染色，使组织病理学评价更加完善精确，在临床病理学诊断和病理组织学研究具有重要的应用价值。除常规的[/font][font=Calibri]HE[/font][font=宋体]染色外，义翘神州还提供[/font][font=Calibri]9[/font][font=宋体]种特殊染色服务，包括[/font][font=Calibri]masson[/font][font=宋体]三色染色、 [/font][font=Calibri]PAS[/font][font=宋体]染色、尼氏染色、[/font][font=Calibri]VG[/font][font=宋体]染色、苏丹黑染色、普鲁士蓝染色、油红[/font][font=Calibri]O[/font][font=宋体]染色和β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]半乳糖苷酶衰老染色等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色。包括[/font][font=Calibri]: [/font][font=宋体]胶原纤维 染色[/font][font=Calibri](Masson[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、网状纤维染色、弹力纤维染色、肌肉组织染色[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]磷钨酸 苏木素 [/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、脂肪染色[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]苏丹[/font][font=Calibri]III)[/font][font=宋体]、糖原染色[/font][font=Calibri](PAS)[/font][font=宋体]、粘液染色[/font][font=Calibri](PAS)[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特殊染色：[/font][font=宋体]病理组织切片染色技术作为病理实验室基本方法之一，具有较高的使用价值，也是目前临床外科病理最基本、最常见的形态学检验技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]实验原理：[/font][font=宋体][font=宋体]组织切片染色就是利用染料在组织切片上给予不同颜色，使其与组织或者细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。最常见的组织染色是[/font][font=Calibri]HE[/font][font=宋体]染色，另外巴菲尔生物还可开展其他特殊染色项目，如[/font][font=Calibri]masson[/font][font=宋体]染色、[/font][font=Calibri]PAS[/font][font=宋体]染色、[/font][font=Calibri]AB-PAS[/font][font=宋体]染色、[/font][font=Calibri]EVG[/font][font=宋体]染色、[/font][font=Calibri]VG[/font][font=宋体]染色、维多利亚蓝染色、番红[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]固绿染色、甲苯胺蓝染色、油红[/font][font=Calibri]O[/font][font=宋体]染色、阿利新蓝染色、碱性磷酸酶染色、瑞氏姬姆萨染色、普鲁士蓝染色、[/font][font=Calibri]TTC[/font][font=宋体]染色及髓鞘染色等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]特殊染色的应用价值[/font][font=宋体]现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益广泛，但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵，对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势，在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]比如，当细胞中出现色素，是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等，用组织化学技术区别起来很简单，所以组织化学技术，虽然已有几十年到几百年的历史，仍是一个很有实用价值的技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]常见的特殊染色方法及应用：[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Mallory[/font][font=宋体]磷钨酸苏木素染色[/font][/font][font=宋体]原理：成熟的苏木素通过钨的结合成蓝色色淀，这种色淀与所选择的组织成份能牢固地结合而呈蓝色，显示棕红色的成份是由于磷钨酸而着色。[/font][font=宋体]方法应用：[/font][font=宋体][font=宋体]临床上应用该方法对横纹肌肉瘤进行诊断，横纹肌肉瘤的组织学形态变化多样，与未分化的间胚叶肿瘤很难鉴别，采用磷钨酸苏木素染色，在瘤细胞质内发现蓝色横纹，则可以证明该肿瘤是呈横纹肌分化。该染色液也可以对炎症渗出的纤维素，[/font][font=Calibri]DIC[/font][font=宋体]的毛细血管中的纤维素、以及神经病理等方面进行染色[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PAS[/font][font=宋体]染色 [/font][/font][font=宋体]原理：高碘酸是一种氧化剂，它能破坏多糖结构的碳键。组织切片首先用高碘酸溶液氧化，使存在于组织多糖分子的乙二醇基或氨羟基的碳键打开，生成醛基化合物。暴露出来的游离醛基与无色品红溶液作用，生成新的红至紫红色复合物而得到定位。[/font][font=宋体]应用：[/font][font=宋体][font=宋体]在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究[/font] [font=宋体]，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于特殊染色服务详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/special-staining-services[/font][/font][font=Calibri] [/font]

生物体内的染色，例如某个进入生物体的颗粒能染色吗？想看一下这个颗粒进入生物体后会结合在什么部位。所以，想对颗粒进行染色处理，或者标记把，标记的话受限于仪器，最好能在TEM、SEM等显微镜下能用的。。。因为同位素世宗搞不到。。。

[size=18px][b][b]一、实验原理[/b][/b][/size] [b][size=17px]1.适用范围：[/size][/b][size=17px]芽孢染色法适用于能够形成芽孢的各类芽孢杆菌。[/size] [b][size=17px]2.原理：[/size][/b] [size=17px](1)芽孢染色法属于复[/size][size=17px]染色法，是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。[/size] [size=17px](2)芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿或碱性品红在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。 [size=17px](3)芽胞具有高度的折光性，外膜致密，渗透性低，故普通染色法不易使其着色，芽胞染色法是根据芽胞既难以着色，而一旦着色又难以脱色的特点设计的。所有芽胞染色法都基于同一个原则：采用着色力强的染料，并加热以促进标本着色，然后使菌体脱色，而芽胞上的染料仍保留，经复染后，菌体和芽胞呈现不同的颜色。[/size] [size=17px][b][b][size=17px]二、染液的配制[/size][/b][/b][/size] [b][size=17px]1.5%孔雀绿水溶液：[/size][/b][size=17px]孔雀绿5.0g，蒸馏水100mL。[/size] [b][size=17px]2.0.5%番红溶液：[/size][/b][size=17px]番红O(safranine，又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。[/size] [size=17px][b][b][size=17px]三、应用[/size][/b][/b][/size] [size=17px]芽孢染色法是生物学和医学领域中常用的实验技术，用于观察和研究细胞的结构和功能。芽孢的大小、形状及其在菌体内的位置是鉴别细菌的重要依据。[/size] [size=17px][b][b][size=17px]四、实验步骤 [/size][/b][/b][/size] [b][size=17px]1.[b]制[/b][/size][/b][size=17px][b]片[/b]：取洁净的载玻片，在载玻片上滴加一滴生理盐水，然后用接种环蘸取少量芽孢菌跟水混匀，晾干，用酒精灯固定。[/size] [b][size=17px]2.[/size][/b][size=17px][b]浸染[/b]：将固定好的涂片放入含5%孔雀绿水溶液的50[/size]℃水浴染色缸中，浸染15min。[size=17px]或者在涂片上滴加孔雀绿，用酒精灯加热，切勿干涸，要保持涂片湿润。 [/size] [b][size=17px]3.[/size][/b][size=17px][b]冲洗[/b]：取出载玻片，用水冲洗多余染液，直至出水无色为止。[/size] [b][size=17px]4.[/size][/b][size=17px][b]复染[/b]：0.5%碱性番红复染1min。[/size] [b][size=17px]5.[/size][/b][size=17px][b]冲洗[/b]：用水冲洗多余染液，直至出水无色为止，晾干。[/size] [b][size=17px]6.[/size]镜检：[/b]先低倍镜找到区域后，换油镜观察芽孢和菌体。[size=17px]菌体呈红色或粉色，而芽孢呈绿色。[/size] [size=18px][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b]五、[/b][/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b]注意事项和操作技巧[/b][/font][/size] [size=17px]1.选用适当菌龄的菌种，幼龄菌尚未形成芽孢，而老龄菌芽孢囊已经破裂。　　[/size] [size=17px]2.加热染色时必须维持在染液冒蒸汽的状态，加热沸腾会导致菌体或芽孢囊破裂，加热不够则芽孢难以着色。[/size]加热过程中要及时添加染色液，切勿让标本干涸。 3.芽孢观察也可以直接使用简单染色法。比如用番红或结晶紫染色后，芽孢不着色，菌体染色。[/size]

上海的许多超市被爆出卖染色的馒头，那么什么是染色的馒头呢？染色的馒头要如何辨别呢？辨别染色的馒头有哪些方法呢？下面我们就来了解一下。 玉米是粗粮，玉米粉制作的食品，外观、手捏感觉均比较粗糙；吃在嘴里，有些糙口。而市场上一些“玉米馒头”手感松软、细腻，吃起来感觉不到玉米的香味，而且颜色黄得不真实。标签上标注的食品添加剂是维生素C或糖，可实际调查发现，这些染色馒头添加的不是白糖而是甜蜜素，也没有专门添加维生素C，却加进去了山梨酸钾、柠檬黄等添加剂。 柠檬黄：伤害内脏、影响智力。柠檬黄又称酒石黄、酸性淡黄、肼黄。该色素具一般毒性和致泻性，如果长期或一次性大量食用含量超标的食品，可能会引起过敏、腹泻等症状，当摄入量过大超过负荷时会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定伤害。 长期影响方面，食用柠檬黄会导致儿童多动症，甚至智商降5分。它也可诱发哮喘，由柠檬黄导致的过敏和其他反应也是十分著名的，通常包括：焦虑、偏头痛、忧郁症、视觉模糊、哮喘、发痒、四肢无力等。 鉴别方法： 识别染色“玉米馒头”方法很简易，将馒头掰碎泡入水中，观看水的颜色。如果水的颜色变得与馒头的颜色一样，那就是色素馒头。水的颜色越鲜亮，色素含量越高。

一、染色方法1863年由waldeyer率先倡导用苏木素染液染细胞核，后来Mallory、Mayer等也阐述过苏木素的应用。近年来特殊染色和组织化学方法也屡有创新。Shikata(1973)，Tanka等(1981年)分别介绍了用地依红和维多利亚蓝混合液显示乙型肝炎表面抗原的方法；1987年Crocker J等推出了核仁组成区嗜银蛋白染色的技术方法以及1991年进行的乳腺肿瘤核仁组成区的研究方法等。特殊染色的分类：特殊染色方法按照所染目的物进行分类，有结缔组织、肌肉组织、神经组织、脂类物质、糖类、色素、病理的内源性沉着物、病原微生物、内分泌物质、单种细胞和性染色质、骨、血液及造血组织、核酸、酶类等。特殊染色的命名：对于特染的命名至今尚无统一的规定，多数均按发明者的姓名命名，如van Geison染色等；有的则按所用染色液命名，如甲基绿一派若宁染色、苏丹Ⅲ染色等；有的按目的物命名，如网织纤维染色；还有的采用混合命名，如试剂十人名等。二、染色目的未加染色的任何组织切片在镜下只能辨认细胞和胞核的轮廓，看不清楚其他任何结构。染色的目的就是将组织切片浸入染色剂内，经过一定的时间，将组织或细胞及其他异常成分染上不同深浅的颜色，便于在光学显微镜下进行观察。三、染色原理 染色过程是染色剂和组织细胞相结合的过程。其机理尚未完全清楚。 1、有学者认为从物理学角度看，染色剂和组织细胞的结合是“溶解”或“吸收”。例如苏丹类染色剂使脂质着色，就是利用染色剂在脂质中的溶解度大于在洒精等溶剂中的溶解度这一特性。有些染色剂是染色剂分子通过渗透和毛细血管作用而被吸收或沉淀到组织、细肋的小孔中去而着色的‘这种机制的染色是很少的。2、另有学者认为染色是染色剂相组织、细胞之间的化学性结合。如显示含铁血黄素的普鲁士反应是最典型的例子。但是，大量染色的化学反应并不象铁反应那样明确。大多数染色的原理至今仍未搞清楚，有些可能是物理性的，有些可能是化学性的，有些则可能2种机制都起作用。正因为人们对染色的原理还没有完全掌握，所以还不能很好地运用原理来控制它，在相当程度上需凭工作经验。四、染色的分类(一)普通染色最广泛应用于常规制片的苏木素和伊红染色，又称为常规染色。(二)特殊染色1．定义 专门用于显示某些特定目的物的染色方法称为“特殊染色”，它又可以理解为“选择性染色”。特殊染色对目的物的选择性是相对的。有些方法具有相对的特异性，加油红O等脂质染色，显阳性者可以肯定为脂质；有些则显示的是一类物质，如PAS呈阳性反应者有糖原、粘蛋白、网织纤维、软骨、阿米巴原虫、霉菌等许多物质和组织结构，并不能确定是哪一种具体成分。所谓特殊染色的相对性，就是一种方法可以显示多种目的物，一种目的物可以用多种方法显示，其中有些方法可能呈阳性，而有些方法则呈阴性，这就需要我们拿捏多种方法，因为有时只有依靠多种方法才能确定所要确认的目标。2．特殊染色的意义1)可以显示在常规HE染色切片中不明显的目的物,例如当病变中霉菌数量较少时，应用Gridley染色就容易发现。2)可以区别胶原纤维和平滑肌，苏丹染色可区别脑浆内的脂肪变和水池变。3)可以显示某些HE染色中不能看到的目的物。如网织纤维、星形细胞的突起、结核杆菌、螺旋茵等，都可用相应的特殊染色法显示。因此，特殊染色是常规染色的必要补允，也是染色技术中不可缺少的组成部分。它在病理诊断中起着辅助作用。

[size=14px] [/size] [size=14px]黑色素合成是一个复杂过程，由三种主要的色素合成酶催化：酪氨酸酶（TYR）、TYR相关蛋白1（TYRP1）和多巴胺互变异构酶（DCT）。TYR、TYRP1和DCT属于TYR蛋白家族（TYRs）。成熟的TYRs在胞内被转运定位于黑色素体中，进而促进合成黑色素。虽然这三种酶都参与黑色素合成，但只有TYR是黑色素生成所必需的。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]淫羊藿中一种含量高、低性毒的黄酮类成分——朝藿定B（EB），并初步证明了EB是一种黑色素生成强诱导剂和TYRs激活剂。然而，尚不清楚EB促进黑色素合成的具体机制。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1）首次对EB在色素合成药理活性进行了探究；[/size] [size=14px]2）通过体内外多种色素脱失模型上评估EB色素合成作用；[/size] [size=14px]3）EB从表达、活性和稳定性三方面靶向TYRs，从而发挥色素合成作用。[/size] [size=14px]1、EB促进黑色素产生[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者首先使用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]（HPLC）对淫羊藿提取物进行鉴定，朝藿定B（EB）是主要生物活性成分，对黑素生成和TYR激活表现出最高的效果。随后通过不同浓度（25、50和100μM）的EB处理两种黑色素瘤细胞系并检测黑色素含量，IBMX为阳参，发现EB以剂量依赖性方式显著增加细胞内黑色素含量（图1）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图1 EB以浓度依赖方式促进黑色素产生[/size] [size=14px]进一步在不同时间点（0、12、24、48和72小时）检查黑色素含量，发现EB以时间依赖性方式诱导的黑色素生成（图2）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图2 EB以时间依赖方式促进黑色素产生[/size] [size=14px]2、EB促进黑素体生物合成[/size] [size=14px]接着收集并检查了人体皮肤组织样本进一步验证 EB的促黑色素生成作用，发现EB在原代黑素细胞、人类皮肤器官培养物中诱导显著的黑色素生成作用。黑色素在黑素体中合成并储存，然后分布到周围的角质形成细胞，黑素体的数量、大小和成熟阶段反映了黑素细胞的黑色素生成能力。作者发现EB 治疗组中存在比对照组更多的黑素体，此外EB通过增加黑素体数量并促进黑素体成熟来刺激黑色素生物合成。接着对EB处理和未处理的人类原代黑素细胞进行了转录组分析，差异基因显著富集在“黑色素生物合成过程”、“黑素体/黑素体膜”等，这些数据证实了 EB 在黑色素生物合成和黑素体形成中的调节作用（图3）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图3 EB增加黑色素体的数量和成熟促进黑色素合成[/size] [size=14px]3、EB增加TYR表达[/size] [size=14px]为了阐明EB诱导黑素生成的机制，作者研究了TYR的参与，发现EB诱导的TYR在mRNA和蛋白质水平上的双重正向调节。MITF是众所周知的TYR关键调节因子，也是黑素生成的主要调节因子。作者发现EB刺激后MITF的mRNA和蛋白表达水平显著上调，表明EB通过经典的 MITF 依赖性机制上调黑素生成中TYR的表达。此外，EB可以影响转运相关基因的mRNA表达，特别是OCA2和SLC45A2，表明EB在黑素体生物发生和成熟中调节复杂的过程，这可能解释黑素体增加的变化黑素体中黑色素的数量和含量（图4）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图4 EB增加TYR表达[/size] [size=14px]黑色素的产生是由多种信号系统启动和调节的，作者接着研究了EB对黑素生成的上游信号通路的影响，发现cAMP水平和PKA表达不受EB影响，表明经典的cAMP-PKA-MITF色素沉着途径不参与EB诱导的黑素生成。相比之下，PI3K/AKT 信号通路的级联，以及MAPK途径受到影响。这些数据证明EB 控制多种色素途径来影响黑色素的产生（图5）。[/size] [size=14px]图片[/size][size=14px]图5 EB影响多条信号通路[/size] [size=14px]4、EB促进TYR活性[/size] [size=14px]在黑色素合成中，TYR是催化限速步骤（L-酪氨酸羟基化为L-多巴）的关键酶。作者接着研究了EB对TYR催化活性的影响，发现EB体外可以加速TYR与底物左旋多巴的反应速率，在细胞内以剂量依赖性方式显著增强TYR活性。进一步在斑马鱼和小鼠中开发了两种使用TYR抑制剂的脱色模型，确定了EB可以作为TYR激活剂并在体内发挥重新色素沉着作用。此外，在HQ引起的色素脱失模型中， EB有效地重新激活了皮肤TYR活性。数据表明EB通过在体外和体内促进TYR活性来发挥色素沉着作用（图6）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图6 EB促进TYR活性来发挥色素沉着作用[/size] [size=14px]5、EB对抗莫诺苯宗诱导的色素脱失[/size] [size=14px]莫诺苯宗是一种临床局部脱色剂，可以通过TYR和黑素体降解机制诱导白癜风样色素脱失。因此，作者使用单苯宗来研究EB是否发挥再色素作用并影响TYR和黑素体异常降解，发现EB 显著改善了两种黑色素瘤细胞和人类原代黑素细胞中单苯宗诱导的黑色素生成功能障碍，EB治疗可有效防止培养皮肤组织中单苯宗诱导的TYR和黑素体减少。此外，经单苯宗处理后，TYR、TYRP1、DCT和Melan-A的蛋白表达降低，而在用单苯宗和EB共同处理期间，TYR和Melan-A的表达显著上调。值得注意的是，单苯酮诱导的黑素生成抑制和TYR表达减少并不依赖于TYR活性抑制或MITF、TYR、TYRP1和DCT mRNA 表达水平的下降（图7）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图7 EB对抗莫诺苯宗诱导的色素脱失[/size] [size=14px]6、EB提高TYR和TYRP1稳定性[/size] [size=14px]莫诺苯宗会导致TYR降解，但不影响TYR转录水平。为了研究EB是否对TYR稳定性有影响，作者使用CHX抑制蛋白质合成，以排除EB本身，诱导新的合成TYR。WB发现莫诺苯宗显著降低了TYRs的稳定性，而EB处理可以有效防止这种情况，这表明EB改善了莫诺苯宗诱导的TYRs稳定性。进一步机制研究发现EB通过防止莫诺苯宗诱导的异常 TYR、TYRP1 形成、在内质网中的保留以及泛素-蛋白酶体降解系统的增强来提高 TYR、TYRP1 稳定性（图8）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图8 EB提高TYR和TYRP1稳定性[/size] [size=14px]7、EB 改善小鼠单苯酮诱导的色素脱失[/size] [size=14px]最后，作者建立了40%莫诺苯宗诱导的色素脱失模型，并同时用EB处理小鼠，探讨EB是否对单苯酮处理的小鼠体内具有再色素沉着功能，结果发现用单苯酮和EB共同治疗的小鼠在不同程度上明显改善了脱色的背毛形成，此外，单苯宗对皮肤TYR活性具有抑制作用，而与EB联合治疗可以促进皮肤TYR活性，此外，TYR、TYRP1、DCT和PMEL的mRNA水平被证实不受单苯宗影响，强调单苯宗诱导的脱色与转录调控无关。同时，EB增加了皮肤TYR、TYRP1、DCT和PMEL的mRNA表达。因此，EB可以改善经单苯酮处理的C57BL/6小鼠的TYR降解和色素脱失（图9）。[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px]图9 EB改善小鼠单苯酮诱导的色素脱失[/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px]研究发现EB在体内外表现出良好的色素合成效果，其机制研究为：1）EB通过调节GSK3β/β-catenin、p-p70S6激酶、MAPK等信号通路增加TYR的表达，并增加黑素体数量和促进黑素体成熟；2）EB促进TYR的活性；3）EB抑制泛素-蛋白酶体途径增强TYR和TYRP1的稳定性。这表明EB可靶向TYRs发挥色素合成作用（图10）。[/size]

（一）天然染料 1、苏木精 苏木精是从南美的苏木（热带豆科植物）干枝中用浸制出来的一种色素，是最常用的染料之一。苏木精不能直接染色，必须暴露在通气的地方，使他变成氧化苏木精（又叫苏木素）后才能使用，这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长，配置后时间愈久，染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体，易溶于酒精，微溶于水和甘油，是染细胞核的优良材料，他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异，用酸性溶液（如盐酸—酒精）分化后呈红色，水洗后仍恢复青蓝色，用碱性溶液（如氨水）分化后呈蓝色，水洗后呈蓝黑色。2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后，磨成粉末，提取出虫红，再用明矾处理，除去其中杂质，就制成洋红。单纯的洋红不能染色，要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸，碱性溶液有氨水、硼砂等。洋红使细胞核的优良染料，染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜，尤其适宜于小型材料的整体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。

版中发过一个关于用色素给水果“美容”的实拍贴：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130423/4690538/。朱老师和我以及许许多多关心食品安全的朋友都希望了解使用的是工业还是可食用色素。希望有能力的版友们帮忙测一测：是工业染料的，将他曝光出来；是食用色素的，让大家稍稍安心。 对描述检测及结果的版友将予以一些奖励！

如何辨别染色的馒头　　最近上海的许多超市被爆出卖染色的馒头，那么什么是染色的馒头呢？染色的馒头要如何辨别呢？辨别染色的馒头有哪些方法呢？下面我们就来了解一下。　　专家介绍，玉米是粗粮，玉米粉制作的食品，外观、手捏感觉均比较粗糙；吃在嘴里，有些糙口。而市场上一些“玉米馒头”手感松软、细腻，吃起来感觉不到玉米的香味，而且颜色黄得不真实。这种“玉米馒头”里，极有可能添加了色素等添加剂，而这种色素多以柠檬黄为主。　　鉴别方法：柠檬黄是一种合成色素，我国规定在食品加工中最大使用量极微，超量使用对食用者健康有危害。专家建议，鉴别“玉米面食”是否掺入了色素，可取少量样品加水浸泡，被柠檬黄染色的“玉米面食”滤液呈黄色。　用卫生纸鉴别染色黄鱼　　有些不法商贩把黄姑鱼染色后冒充黄鱼，这种着色的染料往往是化学染料，例如玉金黄，人食后有损健康。　　鉴别方法：用白卫生纸擦鱼身，染色的鱼会在纸上留下明显黄色；而冷冻成块的染色黄姑鱼，冰面有时也会呈现黄色；还可以将鱼浸泡在水中约5分钟，染色的鱼水可能变成啤酒色。　　鉴别黄鱼是否新鲜的办法：一般新鲜的黄鱼眼球饱满，角膜透明清亮，鳃盖紧密，鳃色鲜红，黏液透明无异味。肉质坚实有弹性，头尾不弯曲，手指压后凹陷能立即回复。鳞片完整有光泽，黏附鱼体紧密，不易脱落。　验钞机可验荧光蘑菇　　一些特白的蘑菇出现在蔬菜批发交易市场内，经检测，涂有荧光物质。　　荧光漂白剂有强烈的漂白效果。蘑菇浸泡在加有荧光漂白剂的水里，会变白、变亮，加长蘑菇保鲜时间，保持产品色泽。荧光物质被人体吸收后，不容易被分解，会加重肝脏的负担，增加致癌风险。为此，建议消费者最好挑选沾有泥土、比较干燥的蘑菇。蘑菇表面很容易被碰伤，伤口处容易被氧化，变成褐色，所以，褐色的蘑菇，才是蘑菇正常的颜色。　　有一个鉴别方法：把蘑菇靠近验钞机，让紫外线照，如发出荧光，就是被荧光物质浸泡的蘑菇。　如何鉴别橙子是否被染色　　橙子是深受人们喜爱的水果，但在选购橙子时，消费者也一定要看仔细了。　　鉴别方法：　　1染过色的橙子，表面看起来特别红艳，仔细观察，可发现表皮皮孔有红色斑点，一些橙表面甚至有红色残留物。　　2用湿巾擦拭橙子表面，如果湿巾变红，说明橙子可能被染色；没染色的橙子，湿巾擦拭后只能看到淡淡的黄色。　　3染色严重的橙子，橙蒂也会变成红色；没染色的橙，橙蒂是白绿相间的。　　4染过色的橙子，表面摸起来黏黏的；没染色的橙，摸起来比较自然。

来源：生物秀染色剂的分类一、按来源可以分为 1.天然染色剂：主要是苏木素，胭脂红，地衣红，番红花。 2.合成染色剂：是从煤焦油中提取的苯衍生物。在生物染色中还使用一些无机化合物，如硝酸银，氯化金，磺，锇酸，高锰酸钾等。 二、按主要用途分为 1.胞核染色剂：苏木素，胭脂红，甲苯胺蓝，美蓝，孔雀绿等。 2.胞浆染色剂：伊红，淡绿，橘黄G,酸性品红,苦味酸等。 3.脂质染色剂：苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑，硫酸尼罗蓝及油红等。 三、按染色剂分子中的发色团可分为九类 1.亚硝基类：发色团为亚硝基（-NO)如萘酚缘-B。 2.硝基染料：发色团是硝基（-NO2）如苦味酸。 3.偶氮类：发色团为偶氮基（-N=N-）属于这一类的染色剂的橘黄G,刚果红,俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。 4.醌亚胺类：这类染料含有两个发色团，一个是印胺基（-N=），一个是醌型苯环，如硫堇，美蓝，甲苯胺蓝O,硫酸尼罗蓝,中性红,碱性藏红花O，焦油紫等。 5.苯甲烷染料：发色团是醌型苯环，如孔雀缘，浅绿，碱性品红，酸性品红，结晶紫，甲基缘等。 6.山叮染料：发色团是醌型苯环，如派罗宁，伊红Y等。 7.蒽醌染料：此类染色剂含有色原蒽醌，如茜素和胭脂虫酸。 8.噻唑类。 9.喹啉类。 8，9类染色剂使用极少。 四、按染色剂的化学性质分类 染色剂的干粉是稳定的盐类，它们在溶液中则电离成酸性或碱性染色剂。如酸性染色剂，能够产生氢离子（H+)或其它阳离子(Na+),而其本身成为带负电荷的阴离子者。这类染色剂一般用于染细胞浆，如伊红Y，苦味酸，橘黄G等。碱性染色剂，能产生氢氧根离子（OH -)或其它负离子(如Cl-),而本身成为带正电荷的阳离子者。这类染色剂常用于染细胞核,如碱性品红等。 1.酸性染色剂：色原——助色团——Na→[色原-助色团]+Na+。常用的如伊红，酸性品红，苦味酸，橘黄G，刚果红，水溶性苯胺蓝，淡绿等酸性染料常用以染细胞浆等碱性成份。 2.碱性染色剂：色原——助色团——Cl→[色原-助色团]++Cl。常用的如苏木素,卡红,次甲基蓝,甲苯胺蓝,硫堇,美蓝等碱性染料常用以染细胞核等酸性成份。 严格地说，酸性染色剂的溶液并不一定呈酸性。同样，碱性染色剂的溶液也未必呈碱性。所谓酸性和碱性染色剂仅指它们电离后其分子的主要染色部分是阳离子还是阴离子。因此称为阳离子型染色剂或阴离子型染色剂更为适当。 常规H.E染色中苏木素染液的PH值约为7，此时胞核的化学成份电离产生H+，而其本身成为带电荷的阴离子，所以被阳离子型的碱性染料剂所着色。伊红染液为弱酸性。细胞的化学成份从溶液中获取H+而成为带正电荷的阳离子，因此与阴离子型的酸性染色剂（伊红）相结合，染作红色，这就是H.E染色分别显示核和胞浆的机制。 3.中性染色剂：这是酸性染色剂和碱性染色剂的复合物，又可称为复合染料。是由碱性染料（色碱的盐）和酸性染料（色酸的盐）配制而成。其中染色剂的分子很大，所以往往水中溶解度较低，需用酒精做溶剂。血液学中的血液涂片经常使用的瑞氏染色剂及姬姆萨染色剂就是这种混合染色剂。其中的各种不同成分可分剔使核、胞浆和颗粒着色。

为一种生物染色剂，必须同时满足两个要求：具有鲜艳透明的颜色，而且能与组织细胞相结合。染色剂分子能够显示颜色的基因，称为发色团。主要的发色团有：亚硝基和偶氮基显示的颜色较强，在染色剂中有一个这样的发色团，就可染出颜色。其他的发色团则不是这样，必须有几个发色团，有醌的分子中就有四个发色团，（2个羰基2个烯基）。 大量的合成染料都是由煤焦油蒸馏得到的，它们都是苯的衍生物，所以苯环是合成染料的基础。苯本身是无色的，但其氢原子为某发色团取代后就带有了颜色。含有发色团的苯环化合物，称为色原。 苯+发色团=色原 色原还不能很好地与组织细胞相结合，即使着了色也很容易脱去。因此仅仅具有色原还不能成为染色剂，染色剂分子中还需具备促使染色剂与组织细胞相结合的基因，这样基国在称为助色团。如—NH2 —COOH —OH —SO3H 氨基 羧基 羟基 磺酸基 氨基在溶液中形成阳离子（+），为碱性；其它羟基，羧基和磺酸基皆带阴离子（-）故为酸性。如三硝基甲苯是个色原，它虽有发色团—硝基，但因缺乏助色团，所以没有染色作用，不能称为染料。假如三硝基苯分子中的一个氢原子被羟基置换，则所生成的化合物既具有发色团而又得到了助色团—羟基，这就成了常用的酸性染料苦味酸。 这就可以看出，助色团的作用在于使色原形成盐类，可以在溶液中电离成为带电的离子，这样才能与相应的组织细胞的成份相结合。

染色技术由于微生物细胞含有大量水分（一般在80-90%以上），对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大，与周围背景没有明显的明暗差。所以，除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外，绝大多数情况下都必须经过染色后，才能在显微镜下进行观察。但是，任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的，在染色过程中微生物的形态与结构均会发生一些变化，不能完全代表其生活细胞的真实情况，染色观察时必须注意。　　本节包括四部分：　　一、染色的基本原理　　二、染料的种类和选择　　三、制片和染色的基本程序 　　四、染色方法

红花等中药饮片被曝染色 近期，国家食品药品监管总局针对目前国内市场上比较突出的中药饮片违法染色问题，对广东、安徽、甘肃、四川4个省份相关单位生产、经营或使用的部分中药饮片进行了抽样，检验结果显示红花、延胡索、西红花3个品种共22批存在染色问题。 随后，深圳药监部门检查人员分别在深圳市中医院药房仓库、亚洲大药房笋岗店、友和大药房福华店查出存在违法染色的红花、延胡索两种中药饮片，红花中检出非法添加的金橙Ⅱ、胭脂红，延胡索中检出了非法添加的金胺O. 据介绍，胭脂红为一种食用色素，之前曾经在药品加工中使用，但因为超量或者长期食用会造成肝肾损坏而被官方叫停。而金橙Ⅱ、金胺O是工业染料，金橙Ⅱ曾被非法商贩在卤制品中添加，食用后可引起食物中毒；金胺O主要用于麻、纸、皮革等染色，长期过量摄入会对人体肾脏、肝脏造成损害。中药饮片中之所以添加色素，主要是为了让"卖相"更好。

有时候要采购买指示剂，买来的是生物染色剂。请问各位版友：生物染色剂与指示剂有什么区别？