双烯雌酚己二烯雌酚

[font=Verdana, Arial][color=#333333][back=#f4f1e2] SN/T 1744-2018 出口动物饲料中己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚的检测方法[/back][/color][/font]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定肉中己二烯雌酚残留量.pdf http://www.instrument.com.cn/download/shtml/045986.shtml

三聚氰胺的阴影尚未散去，奶粉行业又掀起轩然大波，一则“某品牌奶粉疑致女婴性早熟”的新闻报道引起了社会各界的高度关注。我国对于奶粉中雌激素含量的检测规定了不得检出的限量，但相关具体的检测方案尚没有公布。 迪马科技作为助您保障人类食品、环境、药品安全的实验合作伙伴，根据国家及农业部公布的相关标准《GB/T 21981-2008 动物源食品中激素多残留检测方法液相色谱-质谱质谱法》和《农业部1031号公告-1-2008 动物源性食品中11种激素残留检测液相色谱－串联质谱法》，推出以下关于奶粉中雌激素检测的全面解决方案，希望对您准确检测雌、孕激素含量有所帮助，具体如下：标准品：英文名中文名货号规格CASEstriol雌三醇C132132000.1g50-27-117-beta-Estradiol17β-雌二醇C132131000.25g50-28-2β-Estradiol 17-acetate17β-雌二醇乙酸酯C132131100.1g1743-60-8ESTRADIOL-3,4-13C2雌二醇-3.4-13C2CLM-803-1.21.2ml17α-Ethinylestradiol17α-炔雌醇C132451000.25g57-63-6Estrone雌酮C132132300.1g53-16-7Estrone-2,4-d2雌酮-2.4-d2D-5005/0.050.05gDiethylstilbestrol己烯雌酚C126070000.1g56-53-1Diethyl-1,1,1’,1-d4-stilbestrol-3,3’,5,5’-d4己烯雌酚-d4D-2849/0.050.05gHexestrol己烷雌酚C142028000.1g84-16-2Hexestrol-d4己烷雌酚-d4H295303-1MG1mgDienestrol双烯雌酚C125980000.1g84-17-3Altrenogest四烯雌酮C101440000.1g850-52-2Desogestrel去氧孕烯,地索高诺酮32809-25MG25MGEstrone-D4雌酮-D4489204-100MG2.5mg53866-34-5β-Estradiol 3-benzoateβ-雌二醇安息香酸酯C132131200.1g50-50-0β-Estradiol 3-methyl ether solutionβ-雌二醇3-甲醚32749-2ML2ML1035-77-4Equilin马烯雌酮C1319305050mg474-86-2Melengestrol acetate美仑孕酮乙酸酯C148617000.1g2919-66-6Mestranol美雌醇C149150000.1g72-33-3Dienestrol己二烯雌酚C125980000.1g84-17-3 其他相关产品：英文名称中文名称货号规格β-Glucuronidase/aryl sulfatase 2mlβ-葡萄糖醛酸苷酶1.04114.00022MLSulfatase from Helix pomatia芳基硫酸酯酶，≥10,000 units/gS9626-5KU5KUBSTFA+TMCS, 99:1衍生化试剂 BSTFA+TMCS, 99:133148-20X1ML20X1MLN-Methyl-N-trimethylsilyltrifluoroacetamide activated I衍生化试剂, N-甲基-N-(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺50992-5ML-F5MLAcetonitrile HPLC, 4L乙腈,HPLC501014LMethanol HPLC, 4L甲醇,HPLC50102 4Ln-Hexane HPLC, 4L正己烷,HPLC501154LDichloromethane HPLC, 4L二氯甲烷,HPLC501174LMethyl tert-butyl ether HPLC, 4L甲基叔丁基醚,HPLC50123 4LAcetic acid HPLC, 50ml乙酸,HPLC5013250MLProElut CARB 500mg/6mL 30/pkg石墨化碳黑固相萃取柱6540530/PKGProElut NH2 500mg/6mL 30/pkg氨基固相萃取柱6330530/PKGProElut C18 500mg/3mL 50/pkgC18固相萃取柱6310430/PKGProElut PLS 500mg/6mL 30/pkgPLS固相萃取柱6800530/PKGProElut CARB/PSA 500mg/500mg/6mL 30/pkgCARB/PSA 复合柱6420530/PKGProElut CARB/NH2 500mg/500mg/6mL 30/pkgCARB/NH2 复合柱64105[/t

畜禽肉中己烯雌酚的测定测量不确定度分析依据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》、CNAL/AG06《测量不确定度政策实施指南》和CNAL/AR11《测量不确定度政策》分析1目的对畜禽肉中己烯雌酚的测定的不确定度进行分析，找出影响不确定度的因素，对不确定度进行评估，如实反应测量的置信度和准确性。2适用范围畜禽肉中己烯雌酚的测定。3 职责3.1检测人员负责按操作规程操作仪器，确保测量过程中仪器正常运转，消除各种可能影响实验结果的意外因素，了解影响不确定度的因素。3.2校核人员负责检查原始记录及不确定度的计算方法。3.3技术人员负责审核检测结果和不确定度分析结果。4不确定度分析4.1. 测定方法按照国家标准GB/T5009.108-2003《畜禽肉中己烯雌酚的测定》中规定进行测定。 检测过程为：1) 称取样品：用精度为0.1mg的精密电子天平称取50.0000g样品，称准至0.1mg。2) 样品前处理：把样品置于300mL烧杯中，加入50mL水和100mL丙酮，用组织捣碎机提取1～2分钟。匀浆液过滤后，取滤液100ml于500mL分液漏斗中。向滤液中加入10-15g无水硫酸钠，充分摇动，静置分层；取上层有机相。下层水相用50mL二氯甲烷再提取一次。合并提取液，经装有20g-30g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水后滤入250ml茄型瓶中，再以40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤液也并入茄型瓶中，用旋转蒸发器浓缩后用二氯甲烷定容到10mL。装样上机，进样1.0uL。3) 己烯雌酚标准原液：使用国家标准物质中心提供的100mg/L的标准溶液。4) 己烯雌酚标准曲线溶液：将己烯雌酚标准原液用1ml移液管和100ml容量瓶稀释成1mg/L ；再用1ml移液管和100ml容量瓶把1mg/L的标准稀释成0.01mg/L；用5ml移液管和10ml容量瓶把1mg/L的标准稀释成0.5mg/L；用1ml移液管和10ml容量瓶把1mg/L的标准稀释成0.1mg/L；用1ml移液管和50ml容量瓶把1mg/L的标准稀释成0.05mg/L。共得到1mg/L、 0.5mg/L、0.1mg/L、0.05mg/mL、0.01mg/L的标准系列溶液。5) 样品的上机分析后，在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上用5点校准曲线法进行定量。4.2. 测量流程方框示意图 4.3. 己烯雌酚含量的计算 式中：X——试样中己烯雌酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Aop——己烯雌酚的峰强度（峰面积）；Aref——己烯雌酚标准的的峰强度（峰面积）；Vop——最终定容体积，单位为毫升（mL）；Vext——提取液总体积，单位为毫升（mL）；Vclean——取用的提取液总体积，单位为毫升（mL）；Msample——试样质量，单位为克（g）；Rec——回收率。计算结果保留两位有效数字。 4.4 不确定度的来源本测试方法的不确定度来源主要来自如下几部分：4.4.1 测量重复性带来的不确定度分量 （含人员、环境、测量方法和仪器重复性等其他分量的贡献）。样品反复进行10次分析，见表1。表1 10.2050.00636×10-620.2110030.2040.00749×10-640.2300.019361×10-650.2240.013169×10-660.2130.0024×10-670.1990.011121×10-680.2130.0024×10-690.2010.010100×10-6100.2090.0024×10-6 0.211 （A类不确定度）4.4.2 样品测试全过程中引入的不确定度分量 。（B类不确定度）4.4.2.1 样品称取和前处理过程中天平准确度和容量瓶准确度引起的不确定度分量 。a 天平准确度引起的不确定度分量 天平的准确度为σ＝0.1mg，采用矩型分布计算标准不确定度。 b 100ml容量瓶准确度引起的标准不确定度分量 。允差值为±0.1ml，按矩形分布。 C. 10ml容量瓶准确度引起的标准不确定度分量 允差值为±0.02ml，按矩形分布。 ， 4.4.2.2标准溶液配制过程和GC/FPD制定校准曲线时引入的不确定度分量 。a). 己烯雌酚标准溶液引入的不确定度分量 。己烯雌酚标准溶液的浓度值为100mg/L±0.11mg/L，采用矩形分布。 b). 稀释过程中的移液管引起的不确定度分量 。1ml移液管的允差值为±0.008ml，5ml移液管的允差值为±0.025ml，都是矩形分布。1ml的移液管： ， 5ml的移液管： ， C). 容量瓶的准确度引起的不确定度分量 。10ml的容量瓶的允差值为±0.02ml，50ml的容量瓶的允差值为±0.05ml，100ml的容量瓶的允差值为±0.1ml，都是矩形分布。10ml的容量瓶： ， 50ml的容量瓶： ， 100ml的容量瓶： ， d). 10μl进样针准确度引起的不确定度分量 。允差值为±0.02μl，矩形分布。 5. 合成标准不确定度计算标准不确定度一览表标准不确定度分量u（xi）不确定度来源标准相对不确定度 样品测量重复性0.0460 样品测试全过程（ ）0.0111 样品称取和前处理（ ）1.28×10-3 标准溶液配制过程和GC/FPD制定校准曲线（ ）0.0110 天平的准确度1.15×10-3 100ml容量瓶准确度5.77×10-4 10 ml容量瓶准确度1.15×10-3 己烯雌酚标准原液浓度5.77×10-4 标准稀释过程中移液管的准确度0.0107 标准稀释过程中容量瓶的准确度1.91×10-3 10μl进样针1.15×10-3合成相对不确定度： 6. 扩展不确定度的评定扩展不确定度通过使用包含因子k=2计算得出： 7．不确定度报告按照国家标准GB/T5009.108-2003规定的检测程序进行，最后测量出本次蔬菜水果中己烯雌酚含量为：0.21（2）mg/kg。[img]http://bbs.instrument.com.cn//images/affix.gif[/img][url=http://bbs.instrument.com.cn/download.asp?ID=194104]畜禽肉中己烯雌酚的测定测量不确定度分析.doc[/url]　　[color=#DC143C][size=4][font=黑体]应疯子哥的要求，把公式及图片贴上来，在9楼-13楼有版主ROGERSW的完整佳作。[/font][/size][/color]

实验室刚扩的己烯雌酚用的是 sn/t3235-2012的标准，方法上不是己二烯雌酚才用内标么？己烯雌酚 也要用是么？如果用内标，用什么内标？，新手望大神指点

有人参加了辽宁省出入境技术中心组织的2013年能力验证计划，我报的是PTC-T062，奶粉中二苯乙烯类兽药残留量检测，乙烯雌酚，我目前在准备实验阶段，先摸索方法阶段。想讨论一下，采用那个标准？那种仪器？前处理如何做？有做个乙烯雌酚的吗？讨论一下。我的QQ 563983393，向各位大师请教该能力验证还未开始，但先准备着，摸索实验条件中。

在用液相测肉中已烯雌酚时,用内标法做的标准曲线,发现内标物没有峰出现,但如直接用标准物质做几个点做曲线则能出峰,峰形良好,请问是什么原因? 如用内标法做标准曲线,是否样品计算也要用内标法?

昨儿用GC-MS做一样，SCAN时候发现最大的4个碎片：267,159,296,121，疑似己烯雌酚二甲醚（cas号7773-34-4，不知道对不对？），想问问这个己烯雌酚二甲醚作何种用途？望指教指教。

一、案例己烯雌酚(DES)是一种人工合成的激素类药物，医学上主要用于治疗雌激素缺乏症。但是其具有促进动物生长，促进动物蛋白质的合成代谢，提高动物日增重和提高饲料转化率的作用。曾被作为动物生长促进剂用于畜禽以及水产品的养殖中。但是含有己烯雌酚的肉制品能扰乱人体内的激素平衡，导致妇女更年期紊乱，女童性早熟，男性女性化，生育能力降低；国际癌症研究机构(IARC)研究发现DES是一种致癌物质，诱发女性乳腺癌、卵巢癌等。从1981年，世界卫生组织禁止使用己烯雌酚、己烷雌酚作为动物的生长促进剂。世界各国规定食品动物养殖中不得以任何途径和方式使用DES，养殖动物及动物性食品中不得检出DES。我国农业部早已明令禁止在畜牧养殖业中使用己烯雌酚及其盐、酯等。但受利益驱动，仍有部分养殖者非法使用。为保障畜产品质量安全，我国已将其作为兽药残留监控的重点对象。二、选用的国家标准GB／T 5009．108—2003畜禽肉中己烯雌酚的测定。三、测定方法1．提取及净化精确称取5.0g绞碎肉试样，放入50mL具塞离心管中，加10.00ml。甲醇，充分搅拌，振荡20min，于3000r／min离心10min，将上清液移出，残渣中加lO.00mL甲醇，混匀后振荡20min，于3000r／min离心10min，合并上清液，此时如出现混浊，需再离心10min，取上清液过0.5μmFH滤膜，备用。2．色谱条件①紫外线检测器：检测波长230nm。②灵敏度：0.04AUFS。③流动相：甲醇+O.043mol／L磷酸二氢钠(70+30)，用磷酸调pH值至5。④流速：1mL／min。⑤进样量：20μL。⑥色谱柱：CLC—ODS—C18(5μm)6.2mm×150mm不锈钢柱。⑦柱温：室温。3．标准曲线绘制精确称取5份(每份5.0g)绞碎的肉试样，放入50mL具塞离心管中，分别加入不同浓度的标准液0、6.0μg／mL、12.0μg／mL、18.0μg／mL、24.0μg／mL，其中甲醇总量为20.00mL，使其测定浓度为0、0.30μg／mL、0.60μg/mL、0.90μg／mL、1.20μg／mL，按步骤一方法提取备用。4．测定分别取样20μL，注入HPLC柱中，可测得不同浓度DES标准溶液峰高，以DES浓度对峰高绘制工作曲线，同时取样液20μl，注入HPLC中，测得的峰高从工作曲线图中查相应含量，Rt一8.2355．结果计算式中 X一一试样中己烯雌酚的含量，mg／kg；A一进样体积中己烯雌酚的含量，ng；m——试样质量，g；V1——试样甲醇提取液总体积，mL；V2——进样体积，mL。6．试剂①甲醇。②0.043mol／L磷酸二氢钠溶液：取1g磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)溶于水，定容至500mL。③己烯雌酚(DES)标准溶液：精确称取100mg己烯雌酚(DES)溶于甲醇，移入100mL容量瓶中加甲醇定容，混匀，每毫升含DESl．0mg，储存于冰箱中。④己烯雌酚(DES)标准使用液：吸取10.00mL DES储备液，移入100mL容量瓶，加甲醇定容，每毫升含DESl00μg。⑤磷酸。7．仪器①高效液相色谱仪：具紫外检测器。②小型绞肉机。③小型粉碎机。④电动振荡器。

酶联免疫法 1 范围本标准规定了水产品中己烯雌酚残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于水产品肌肉中己烯雌酚的测定。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。3 原理测定的基础是竞争性酶联免疫抗原抗体反应，所有的免疫反应都在微孔中进行，加入己烯雌酚标准或样品溶液、己烯雌酚酶标记物、己烯雌酚抗体后，己烯雌酚与己烯雌酚酶标记物相互竞争己烯雌酚抗体的结合位点。结合的己烯雌酚酶标记物可以将无色的发色剂转化为蓝色的产物，在450nm处检测，吸收光强度与样品中的己烯雌酚浓度成反比，按校正曲线定量。4 试剂和材料本标准所用试剂除标明外，其它均为分析纯及其更高纯度，试验用水符合GB/T 6682一级水标准。4.1 叔丁基甲基醚，色谱纯。4.2 石油醚。4.3 二氯甲烷。4.4　甲醇，色谱纯。4.5　氢氧化钠，1 mol/L。4.6 磷酸，6 mol/L。4.7　百分之20甲醇的20mmol/L三羟基甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液（pH 8.5）, 百分之40、百分之70、 百分之80的甲醇溶液，此溶液现用现配。4.8 67 mmol/L 磷酸盐缓冲液（pH 7.2） ： 9.61g磷酸氢二钠,1.79g 磷酸二氢钠溶解于蒸溜水，定容至1000mL，此溶液现用现配。4.9 己烯雌酚酶联免疫定量测定试剂盒, 参见附录A。5 仪器与设备5.1 酶标仪,波长450nm。5.2 离心机，转速4000r/min。5.3 氮吹仪。5.4 电热恒温水浴锅。5.5 高速匀浆机。5.6 C18 固相提取柱，长6.5cm，内径0.7cm。5.7 固相萃取器。5.8 微型漩涡混合仪。5.9 振荡器。5.10 微量加样器：20uL, 50uL, 100uL, 250uL，1000uL。 5.11 微量多通道加样器：50uL, 100uL。

[color=#333333]请问有做乙烯雌酚的么？我们用负模式来做，标线配好了，但是怎么都不出峰，奇怪了！按照标准的条件也是做不出，按照仪器公司给的条件还是做不出，走出来的标样只有基线！[/color]

http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09508.gifRT，请问有做乙烯雌酚的么？我们用负模式来做，标线配好了，但是怎么都不出峰，奇怪了！按照标准的条件也是做不出，按照仪器公司给的条件还是做不出，走出来的标样只有基线！

[center]积分商城回馈用户第二次秒杀通知[/center][center]-- --- - --- -- -- -- -- -- -[/center]为了补偿部分第一次没有秒杀到笔记本的用户，积分商城拟定于本周五（2009.12.4）下午14：00开始第二轮秒杀活动。本次活动依然放出笔记本188个供用户99分兑换，凡没有在11月26日秒杀成功的会员均可参与。活动规则：1.本次活动每位用户只能兑换一件回馈礼品；2.活动结束后积分商城恢复2个月内只能兑换一件礼品的规则，本次兑换记录将作为用户最近一次兑换的时间计入系统；3.如有注册马甲兑换礼品的情况，一经发现除删除其所有兑换记录，所有违规帐号一概作删号处理；4.本次活动所有解释权归仪器信息网所有；

我们目前采用LC-MS-MS检测肌肉中的己烯雌酚。在提取过程中发现采用乙腈、乙醚、二氯甲烷等试剂提取，经常会出现没有回收的现象。大家也遇到过这种现象吗？ 把PH调到8左右也不管用。真郁闷。

做GB/T5009.108-2003畜禽肉中己烯雌酚的测定，其中磷酸二氢钠要配制0.043mol/L标准要求取1g磷酸二氢钠溶于水500mL。这个配制方法想不通啊，总觉得不对，算出来需要3.354g磷酸二氢钠才对吧。需要高人给预指点，谢谢

请教用氨基键合柱测油品中的单环和双环芳烃时，共轭双烯和多烯的存在对结果有什么影响？我猜测可能是共轭双烯和多烯难以与芳烃分离，会叠加在芳烃的峰上，不知道对不对。如果是，那共轭双烯和多烯会随单环还是双环出峰？谢谢

动物源性食品己烯雌酚检验方法—高效液相色谱法1　范围本方法规定了动物源性食品中己烯雌酚残留量的快速测定方法。原理试样中的残留的己烯雌酚经快速检测前处理试剂盒提供的试剂提取、浓缩、净化后用液相色谱进行检测，外标法定量。3 试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。3.1乙腈：色谱纯。3.2冰乙酸：色谱纯。3.3甲醇:色谱纯。3.4无水乙酸钠。3.5对-甲苯磺酸。3.6乙酸盐缓冲液：称取4.950g无水乙酸钠及0.950g对-甲苯磺酸，溶解于950mL水中，用冰乙酸调节溶液pH到4.5，最后用水定溶到1000mL。3.7标准品: 己烯雌酚3.8标准贮备溶液:分别称取标准品各10.0mg，用甲醇溶解后转移至10mL棕色容量瓶中，用甲醇定容，于—20℃条件下保存。使用时，用甲醇稀释上述标准储备溶液，配制成不同浓度的标准工作液。3.9己烯雌酚快速检测前处理试剂盒*。4 仪器和设备4.1高效液相色谱仪：配紫外-可见检测器。4.2匀浆机。4.3旋转蒸发仪。4.4离心机：4 000 r/min4.5聚四氟乙烯离心管:100 mL，具塞。4.6微孔滤膜:0.45 µ m。5测定步骤5.1提取、浓缩、净化准确称取已捣碎的样品10.00 g于50 mL离心管中,先加己烯雌酚快速检测前处理试剂盒中的提取剂(液体20.0 mL)、8000r/min均质1min，于4000 r/min离心5 min，取出上清液10mL用水稀释至30mL。残留物用2.0 mL蒸馏水溶解。取稀释液于层析柱中（使用前依次用5mL甲醇、5mL蒸馏水激活）挤干，加5mL洗涤剂洗涤挤干，加5mL洗脱剂洗脱，接收洗脱液，50℃水浴旋转蒸干，用1mL甲醇溶解残渣于0.45 µ m微孔滤膜过滤，供仪器测定。5.2绘制标准工作曲线移取己烯雌酚混和标准溶液， 50µ g/kg、100µ g/kg、200µ g/kg、500µ g/kg、1000µ g/kg标准工作溶液,样液用高效液相色谱仪测定，得出标准工作曲线。5.3测定5.3.1液相色谱条件a) 色谱柱: C18柱，150 mm×4.6 mm(i.d.),粒度5m b) 流动相:乙腈+乙酸盐缓冲液 (70+20,体积分数) c) 流速:1.0 mL/min d) 柱温:室温 e) 检测波长：250nmf) 进样量：20 L。5.3.2色谱测定根据样液中己烯雌酚的含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中的己烯雌酚响应值均应在仪器的检测线性范围内。5.3.3空白实验除不加试样外，按上述测定步骤进行。5.3.4结果计算用色谱数据处理机或按式（1）分别计算供试样品中的己烯雌酚残留量。 2 ci×Vω= 　…… (1)mω－样品中己烯雌酚残留量，μg/kg；ci －标准曲线上查出试样溶液中己烯雌酚标准工作溶液的浓度，μg/L；2－换算常数；V－最终定容体积数，mL；m－供试试料样品重量，g。6测定低限、回收率6.1检测限本方法的检测限己烯雌酚为10μg/kg。6.2回收率本方法回收率己烯雌酚为:85%～105%。

水产品中己烯雌酚残留量的测定 气相色谱-质谱法 1、安全要求操作时穿工作服、戴口罩和手套，提取、净化和浓缩时在通风橱中进行，避免溶液、气体吸入和皮肤接触，废液和废渣分别倒入专用容器中，按要求处理。2、急救措施皮肤接触到有机溶剂或酸、碱溶液后用清水清洗，有机溶剂或酸、碱溅入眼中用清水冲洗。3、适用范围该标准操作规程适用于鱼、虾可食部分中己烯雌酚残留量的测定。4、检测原理以乙酸乙酯提取样品中的己烯雌酚，固相萃取柱净化，硅烷化试剂衍生化后，用气相色谱-质谱仪测定，外标法定量。5、仪器设备5.1 气相色谱质谱联用仪：配备电子电离（EI）离子源。5.2 分析天平：感量0.000 01 g。5.3 旋涡混合器。5.4 高速冷冻离心机。5.5 氮吹仪。5.6 旋转蒸发仪。5.7 固相萃取装置。5.8 具塞玻璃离心管：10 mL。5.9 SLH固相萃取柱：500 mg，6 mL。5.10 样品反应瓶：2 mL，去活，螺纹口。6、试剂和溶液6.1 试验用水应符合GB/T 6682中一级水的规定。6.2 己烯雌酚标准品：纯度≥ 99%。 6.3 乙酸乙酯：色谱纯。6.4 甲醇：色谱纯。6.5 正己烷：色谱纯。6.6 无水碳酸钠：分析纯。6.7 碳酸钠溶液：10%(W/V)，称取10 g无水碳酸钠，溶于100 mL水中。6.8 己烯雌酚标准贮备液：准确称取己烯雌酚标准品0.010 g，用甲醇溶解，定容于100 mL容量瓶中，即浓度为100 μg/mL的标准贮备液，置于-18℃冰箱中保存，有效期为6个月。6.9 己烯雌酚标准工作液：临用前，准确吸取己烯雌酚标准贮备液，用甲醇稀释成浓度为0.0

雌二醇（17β－Estradiol）是天然雌激素的重要成分，为防止儿童性早熟等问题，食品中尤其是畜禽产品的雌二醇检测不容忽视。胶体金免疫层析技术（GICA）在检测小分子有机物方面越来越受到重视。其基本原理是胶体金颗粒能够稳定吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显变化，所以它可以取代酶标记抗体〔1，2〕。本实验采用标记有雌二醇单克隆抗体的胶体金颗粒与相对应的固定在硝酸纤维膜上的雌二醇结合物相结合，固定有雌二醇结合物的检测线处就显现明显的颜色〔3，4〕。本法具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本较低、结果轻易判读等优点，适用于样品的初步筛选。[b]1材料与方法[/b]11试剂与仪器氯金酸（上海化学试剂厂）；牛血清白蛋白、卵清白蛋白、兔抗鼠多抗（天津联星生物公司）；雌二醇标准品、雌二醇单抗、17β－Estradiol－6－one6－（o－carboxymethvyoxime）美国Sigma公司）；其他试剂均为国产分析纯。硝酸纤维膜、玻璃纤维膜（美国Millipore公司）；BeckmanDu530分光光度计（德国Beckman公司）；低温高速离心机（军事医学科学院）；点膜机（美国Bio－Dot公司）。12方法121胶体金的制备用三蒸水溶解氯金酸，使其终浓度为01g／L。先进行沸水浴，待氯金酸溶液煮沸后，每100ml加入1％柠檬酸三钠25ml，再沸水浴下快速搅拌，直到氯金酸溶液的颜色稳定，继续沸水浴10min〔5〕，冷却至室温后，用透射电镜镜检并用分光光度计检测颗粒均匀度及粒度。最后置于4℃冰箱保存备用。122最适标记蛋白量的确定用02mol／LK2CO3将胶体金溶液调至pH为82，然后取试管9支，分别加入10ml胶体金溶液。将雌二醇抗体逐级稀释后，各取等体积稀释液顺序加入上述试管中，混匀，另设一不加抗体的对照管。放置10min，在各管中加入01ml的10％NaCl，混匀后静置2h。观察各管中胶体金溶液变化，未加蛋白及加入量不足的溶液颜色由红变蓝，而加入蛋白量达到或超过时的溶液则保持不变。标记蛋白量即为最低稳定胶体金溶液不变色的蛋白量基础上再加20％。123胶体金探针的标记将抗体用0005molNaCl溶液透析过夜，离心除去蛋白沉淀，调至05mg／ml。取胶体金100ml，用0，2mol／LK2CO3将胶体金溶液调至pH为90，磁力快速搅拌下缓慢加入24ml稀释的雌二醇抗体，继续搅拌10min，加入牛血清白蛋白（BSA），使其最终浓度为1％，再搅拌10min。将初步制得的胶体金探针以4000r／mm离心20min；弃沉淀，上清以10000r／min离心60min；弃上清，沉淀用001mol／L的磷酸盐缓冲液（PBS）（含1％牛血清白蛋白）重新悬浮；同前离心洗涤2次，将沉淀用001mol／L的PBS（pH82，含1％BSA，002％NaN3）悬浮，4℃保存备用。124抗原的合成小分子物质难以固定在硝酸纤维膜上，只有使它连上大分子物质才能较好地固定。本实验采用混合酸酐法制备完全抗原。雌二醇－6－肟43mg，加入三正丁胺50μl，二氧六环4ml，冰浴冷却到10℃以下，加入氯甲酸乙酯15μl〔6〕。4～10℃下反应30min。配制卵清白蛋白（OVA）溶液（OVA10mg，3ml水，3ml二氧六环，1mol／L氢氧化钠03ml）。将配制好的OVA溶液加入反应液，4℃冰浴搅拌6h，反应过程中，用氢氧化钠维持pH值为8。反应完毕后，将反应液加入透析袋，透析2d。将透析液调至pH45，冰箱4℃，放置4天，有黄色沉淀出现。离心收集沉淀，冷冻干燥，4℃冰箱保存。将OVA溶于透析液内作为参比，用紫外光谱法对雌二醇－6肟－OVA进行定性检验。经紫外测定证实蛋白质已与雌二醇衍生物结合。125胶体金免疫层析试纸条制备测试条由玻璃纤维膜、硝酸纤维膜、加样纸、吸水纸4部分组成。将玻璃纤维膜裁成6mm的细条，然后放入含1％BSA、1％Tween－20的PB液中浸泡30min，37℃烘干，最后将胶体金探针灌注已处理好的玻璃纤维膜上，真空干燥备用。在硝酸纤维膜上用点膜机将上述抗原和兔抗鼠IgG喷成2条线，分别为检测线和对照线，经真空干燥后，用1％BSA、001mol／LPBS（pH90）封闭2h，以001mol／LPBS洗涤，再真空干燥。将30mm吸水纸、25mm硝酸纤维膜、6mm玻璃纤维膜、15mm加样纸，由顶部依次粘于PVC板上，裁成细条备用。126检测与判读样品：含已知浓度雌二醇样品的乙醇溶液分为3组，第1组不加雌二醇，第2组为02μg／ml雌二醇，第3组为04μg／ml雌二醇。将加样纸一端插入待测液，湿润后取出，水平放置，约3～5min，观察结果。如试纸条硝酸纤维膜上仅对照线呈一条紫红色带为阳性；如出现2条紫红色带为阴性；如质控线不出现紫红色带，无论检测线是否出现，测试结果均无效。[b]2结果与分析[/b]21胶体金颗粒大小选择胶体金颗粒吸附蛋白并显示检测结果，其大小是重要影响因素之一。胶体金颗粒的大小，由制备胶体金时加入的柠檬酸三钠量决定，当柠檬酸三钠加入越多，胶体金颗粒也越多，但颗粒直径越小，反之胶体金颗粒越大。胶体金颗粒小，结合蛋白量少，反应结合率低，另外难以显示明亮清楚的颜色，影响显色效果；胶体金颗粒大，其结合蛋白后不稳定，不易保存，另外其结合蛋白后难以通过膜〔7〕。本实验选用的胶体金颗粒直径约为15min，既可以通过膜，反应彻底，又易保存，反应结果显色清楚。22胶体金颗粒鉴定胶体金颗粒大小及均一程度是检测结果可靠的基础，制备完毕后须经质量鉴定才能应用。用BeckmanDu530分光光度计对胶体金进行扫描，发现其主峰宽度较小，表明制备的胶体金颗粒较均匀，λmax为520nm（图1），表明其粒度约为15nm〔8〕。用电镜观测结果（图2）与分光光度计测定结果一致。电镜观测是鉴定胶体金颗粒粒径及分布的标准，但这种方法不便用于日常工作使用，而用分光光度计测定操作简便，更适合实验室日常使用。图1胶体金的可见光谱图（略）23最适蛋白量阴性对照为未加抗体管，1～7管抗体浓度分别为10，12，14，16，18，20，22μg／ml，阳性对照为胶体金溶液。可见，本实验最适标记蛋白量为20μg／ml（图3）。24E2－OVA浓度用PBS（pH74）溶解E2－OVA浓度为005～10mg／ml，喷在硝酸纤维膜上作检测线，发现E2－OVA浓度越高，检测液中也需要越高浓度的E2与之竞争，检测灵敏度也就越低。但是，E2－OVA浓度低于05mg／ml，检测线颜色太弱，难用肉眼分辨。图2胶体金电镜图（略）阴性对照为未加抗体管；阳性对照为胶体金溶液图3胶体金与雌二醇抗体结合浓度确定实验（略）25检测限本实验的检测限是以完全看不见检测线为最低检测限〔9〕。将雌二醇标准品用甲醇配制成04，02，01，005μg／ml4个标准溶液，用上述检测方法进行检测（图4）。由图可见，最低检测线为100ng/ml。图4试纸条检测样品（略）26对比实验取30份样品，检测分为3组，第1组不加雌二醇，第2组加02μg／ml雌二醇，第3组加04μg／ml雌二醇，分别用GICA法与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]法（GC／MS）检测。实验结果显示，第1组2种方法均未检出；第2组GICA法阳性9粒，阴性1粒，GC／MS法阳性10粒；第3组2种方法均检测阳性。由此可见，与标准检测方法相比，GICA法准确度为9667％。27交叉反应试验实验结果显示，与己烯雌酚、炔雌酚、壬基酚、阿特拉津及双酚A等环境内分泌干扰物中的环境雌激素无交叉反应，表明该方法具有良好的特异性。[b]3小结[/b]目前，关于雌二醇的检测有气、液相色谱和光谱、质谱等方法，但其仪器昂贵、操作复杂、检测时间较长。本文建立的免疫胶体金层析法具有灵敏度高、特异性强、简便快速、成本较低、结果轻易判读等优点，且无需任何仪器，操作简单，适用于样品的初步筛选。[list][/list]

不知怎的忘记规则，一个月只能兑换一次，结果点了两个礼品，积分也扣了两次，收到礼物才发现，扣两次是不会退还没兑到礼物的那个积分吗？好可惜??????????

大家好，我最近刚开始接触试剂盒用的是德国拜发公司的试剂盒，方法是其提供的，来检验己烯雌酚我做了样品和加标的样品，可是最后加标的样品也呈现阴性，是怎么回事呢？拜托大家了

按GB/T5009.108-2003的前处理方法,用单点校正法做了鸡肉中的己烯雌酚的检测,在其保留时间的地方出的峰相当的小,或都说是没有吧(因为刚做,不知道多大的峰可以算为出峰呢),我将其定为未检出,也不知道对不对.有没有决对没有己烯雌酚的样品呢.

请问各位单扫描极谱图中二次微分是什么意思？这样处理有何作用？一次微分和半微分又是何意思？谢谢！新手求助！！！！！！

[table=100%][tr][td=2,1,650][font=宋体][/font][align=center][b][size=5]产品概要[/size][/b][/align][size=5] 雌二醇[b]（β-Estradiol）[/b]是应用广泛的甾类同化激素，被大量用于促进反刍动物的生长。但由于雌二醇存在明显的致癌性，欧美等国家已相继禁止或严格禁止使用。我国农业部第235号文件中规定，动物源性食品中雌二醇的残留限量为不得检出。由于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]（GC）分析法样本前处理及测定操作繁琐且费用高，使推广应用受到限制。[/size][align=center][b][size=5]产品用途[/size][/b][/align][size=5] 可定性、定量检测动物组织（肌肉、肝脏、虾、鱼等)、尿液、饲料、奶粉等样本中雌二醇的残留量。[/size][align=center][b][size=5]产品性能参数[/size][/b][/align][size=5] [/size][table][tr][td][size=5]产品规格[/size][/td][td][size=5]96T[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]适用范围[/size][/td][td][size=5]动物组织（肌肉、肝脏、虾、鱼等）、尿液和饲料,奶粉等[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]检测时间[/size][/td][td][size=5]1.5个小时[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]检测下限[/size][/td][td][size=5]鸡肉/肝、猪肉/肝、虾、鱼 ：5ppb饲料 ：80ppb尿液 ：2.5ppb[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]灵敏度[/size][/td][td][size=5]0.1ppb[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]前处理流程[/size][/td][td][size=5]组织：均质、振荡离心、吹干、溶解、反萃取、振荡离心、吹干、复溶[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]交叉反应率[/size][/td][td][size=5]雌 二 醇 ：100%雌二醇-3甲醚：30%炔 雌 醇 ：7%雌酚酮 ：小于0.1%苯甲酸雌二醇 ：小于0.1%雌 三 醇 ：小于0.1%[/size][/td][/tr][tr][td][size=5]结果判定[/size][/td][td][size=5]定性：根据样本孔颜色与标准品孔颜色进行比对定量：运用酶标仪进行计算[/size][/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td=2,1][size=5][i][b]无锡康纳生物科技有限公司 0510-85191271，13771068995，杨小姐[/b][/i][/size][/td][/tr][/table]

我的6分SCI论文　　我的这篇临床SCI论文是关于一个新的治疗方法的，6 分文章终于接受文章的构思主要来源于老板，在老板的鼓励下进行的写作。所用的数据相对简单，并且不多。具体的内容的话不好细说了。回头想想有几点值得总结：　　我的构思　　主要来源于新近的一篇 lancet 的文章。我们虽数据不多，但胜在数据严整，设计也算是精巧。　　我的写作　　在此之前我已发表过几篇SCI论文，所以对论文的写作构思，没什么难题。不过文章的语言上还是深受困扰。写完后老板出手帮忙让国外的朋友看了几次，我根据意见修改了几遍，最终终于定稿。　　我选的杂志　　我们的学科相对较小，杂志可选择的也不多，SCI影响因子最高的也不过5分多，因此我选杂志的时候，有点侥幸。当然老板的想法是投在专业的杂志上，那样他自己也有声望。但是我选了最好的3本本专业的正统的杂志，分数偏低，很难投。没办法只能跳出我们专业的所有杂志，发现，另外也有几本杂志可以投，而且分数比较高的也有。当然，我心头有自知之明，我们的文章，不可能有多高的水平。但是我侥幸心理还是有的，冒险一试吧。于是选了一本 6 分多的杂志投过去。本来，老板也是对 IF 比较敏感，他当然觉得越高越好，他才不在乎时间与精力呢。于是投了过去。此外，这本杂志的审稿周期较短，我觉得就算不要，我再投，也来得及。投过去第 2 天，居然就是 under review 了。心中一阵欢喜，因为没有直接被拒就是胜利。于是每天都刷电脑，查看状态。恰好到一个月的时候，回信了。大体意思就是，现在不适合发表，但是如果能够回答 review 的话，可以考虑发表。　　我的修稿　　头次修稿：写修稿意见真的很有意思。我觉得我写的修稿的意见，真的是无所不用其极奉承 reviewer 的话，写了好多，实质性的东西倒是没有多少。当然，reviewer 提的要求一定要满足，务必满足。其实，我修稿的时候，第一个reviewer 的比较和蔼，相当于没有意见。第二个人的意见，讲得不是很清晰。有一个问题，我都只能是大概猜测他问的意思。那个问题，他问我是不是，我就回答是，然后就给他扯东扯西的。我们文章确实是有硬伤，第二个 reviewer 也看出来了，也问了，我也就实话实说了，当然，回答这个问题时候，确实拍了 reviewer 的马屁，真的拍了不少。　　二次修稿：第一个 reviewer 没有意见了。但是第二个reviewer 还有意见。他第一句就是：“The authors have responded to allof my concerns, though incompletely. ”我当时看到他这句话，心头就想，多亏他手下留情呀，不然，文章一定遭毙了。然后他下面又有两个问题：一说我们的数据还有问题，二说我们新加的讨论不好：“Second, the discussion on ### is not satisfactory. I suggest theauthors rewrite to state the following:……”……是一段话近 120 个单词。在第二次修稿的时候，我又是好好的谢了 reviewer 一次，直接重写他要求写的讨论部分，重写的时候，这段最后一部分几乎全部用了他写的那 120 个单词。可谓是完全贯彻审稿人的建议。但是第二次修稿的：“To avoidany future misunderstanding, please remember that our willingness to consider arevised manuscript should not be taken as a commitment on our part to acceptit. A decision will be made only after your revised paper is re-evaluated andassigned a new priority ranking. ”这句话，着实让我心凉了半截。　　我的运气　　我确实觉得能侥幸投稿过去，侥幸的返修，然后侥幸地中了，真的觉得是我的运气。有点明知不可为而为之并且成功了的感觉。当然文章也有可取之处，这就是必然的了。我的文章阐述的是一个重要的临床问题，发表后对后来者有很大启发，这也是SCI论文的立足之本。其次我的语言肯定是过关的，找了老外修改了好几次呢。以上就是我的几点总结，指教读不上，只希望给后来者一个启发。本文转载自：莱博医学

用气质检测己烯雌酚，cis-DES线性时好时坏，怎么回事啊？整个过程处理都很细心 也还是做不好

谁知道己烯雌酚的标准溶液的稳定性大概是多久？？