耐药性分析国家参考

结核病是严重威胁人类健康的重要传染性疾病之一。如何准确快速诊断和鉴别诊断结核病及其耐药性，对指导临床开展早期精准有效治疗至关重要。本篇主要介绍核酸质谱技术在鉴定结核病及其耐药性方面的内容…

近年来，医药行业为牟取暴利，畜牧水产养殖业为增产而大量使用抗生素，现有研究表明：多数药物在人以及动物机体内并不能被完全代谢，多数以原形和活性代谢产物的形式通过粪便排到体外。这些物质最终会通过医院污水、城市生活污水、牲畜粪便以及医药工业废水等多种途径进入水环境造成污染。本文以耐热性大肠菌群（粪大肠菌群）为指示菌，对水体中微生物对十种常用抗生素的耐药性检测方法进行了初步研究。

癌细胞通过细胞外囊泡（EVs）与全身细胞相互作用。细胞外囊泡在体内循环并传递引起恶性表型的分子信息。通过同时培养大肠癌转移淋巴节细胞和5-氟尿嘧啶，我们建立了对化疗耐药性增强的细胞。将通过超速离心分离从该细胞的培养上清液中回收的细胞外囊泡，用作体液中循环的源于癌细胞的生物标志的模型。本文通过MALDI-TOF-MS测定了细胞外囊泡中蛋白质的差异表达，这是由于其母细胞的化疗耐药性增加的结果。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

人肺耐药蛋白(LRP)检测试剂盒人肺耐药蛋白(LRP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人肺耐药蛋白(LRP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人肺耐药蛋白(LRP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肺耐药蛋白(LRP)抗原、生物素化的人肺耐药蛋白(LRP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肺耐药蛋白(LRP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

草甘膦是一种广谱除草剂,几十年来一直被用于保护各种各样的农作物。由于在农业上被大量的使用，许多杂早都产生了耐药性，寻找草甘膦的替代物引起了更多的关注。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

本应用参考国家药品标准修订公示稿，使用C18色谱柱TSKgel ODS-100Z（4.6 mm I.D.×25 cm,5 μm）对补骨脂素、异补骨脂素进行分析，可满足药典公示稿中的定量要求。

在动物源食品中较易引起兽药残留超标的主要有抗生素类、磺胺类、激素类、抗寄生虫类药物。抗生素类药物可使动物机体中的耐药致病菌很容易感染人类，而且抗生素药物残留可使人体中细菌产生耐药性，扰乱人体微生态而产生各种毒副作用；磺胺类药物主要通过输液、口服、创伤外用等用药方式或作为饲料添加剂而残留在动物源食品中，在近15年～20年，动物源食品中磺胺类药物残留量超标现象十分严重，多在猪、禽、牛等动物中发生；同时养殖业中常见的激素和 β - 兴奋剂类主要有性激素类、皮质激素类和盐酸克仑特罗等，许多研究已经表明盐酸克仑特罗、已烯雌酚等激素类药物在动物源食品中的残留超标可极大危害人类健康。

水产养殖是一个不断增长的全球性行业；预计 2030 年以后全球产量可能超过 93000 吨。随着产量提高而不断增加的兽药使用量已成为全球关注的问题。虽然针对水产养殖用兽药和非处方抗生素的使用有相应的控制和监管措施，但某些国家对耐药性和毒性的担忧仍在不断增加。美国食品进口量持续增长，因而愈发需要一种快速灵敏的筛查技术，用于检测海鲜中未经批准的水产养殖用兽药。多家制造商已经开发出使用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 来测定兽药残留的快速筛查方案。性能最佳、灵敏度最高的仪器方法当选高效液相色谱 (HPLC) 与串联质谱（MS/MS或三重四极杆/MS）联用系统，该仪器平台可显著降低背景信号，还能够准确定量测定样品基质中浓度极低的兽药。另一方面，Ionsense, Inc. 的实时直接分析质谱 (DART-MS) 有利于对组织制品中的各类兽药进行实时实验室分析，同时省去了典型 HPLC-MS 所需的标准方案和程序。通常采用费时的 ELISA 试剂盒分析个别的目标兽药，借助 DART-MS 进行分析可以实时、同步地检测多种兽药类别。

参照食品安全国家标准《GB 31660.9-2019家禽可食性组织中乙氧酰胺苯甲酯残留量的测定 高效液相色谱法》，采用东曹C18色谱柱TSKgel ODS-100V 4.6mm（I.D.）*250mm，分析乙氧酰胺苯甲酯，优化流动相乙腈比例后，分离效果优秀，达到国家标准的分离要求。

噁喹酸和氟甲喹属于第二代喹诺酮类抗菌药，氟甲喹也是目前唯一不与人类共用的一种广谱型抗菌兽药，属于氟哌酸的替代产品。随着噁喹酸和氟甲喹在兽医临床上的广泛应用，由于其耐药性和潜在的致癌性。农业部第 235 号公告中规定的猪肉肌肉、肝脏和脂肪组织中氟甲喹的最大残留限量分别为 500 μ g/kg、500 μ g/kg 和 1000 μ g/kg，猪肌肉、肝脏和脂肪组织中噁喹酸的最大残留限量则分别为 100 μ g/kg、50 μ g/kg 和 50 μ g/kg。本方法采用 Agilent Bond Elut C18 固相萃取柱结合液相色谱-荧光检测器，成功开发出了不同猪组织中氟甲喹和噁喹酸的分析方法。该方法具有良好的精密度和稳定性，适用于检测不同猪肉组织中的氟甲喹和噁喹酸残留量。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

阿奇霉素(Azithromycin,AZM)属于15元环大环内酯类(Macrolide,MAL)抗生素，临床上用于人上下呼吸道、泌尿道、皮肤及软组织感染和性传播疾病的预防和治疗，目前已被农业部列为畜禽禁用兽药。AZM违规用于畜禽养殖，会影响畜禽疫病防治和畜禽产品安全、增加细菌产生耐药性的风险、威胁人类健康。虽然国家明令禁止,但养殖环节带来的经济效益受损，养殖户将抗生素添加于饲料或针剂注射等方式给药，导致人用抗生素仍被违规使用于畜禽，已成为威胁畜禽产品安全的新隐患。

前言噁喹酸和氟甲喹属于第二代喹诺酮类抗菌药，氟甲喹也是目前唯一不与人类共用的一种广谱型抗菌兽药，属于氟哌酸的替代产品。这类药物具有很强的杀菌活力，对动物的细菌性疾病有很好的疗效。这类药物一般毒性较低，安全范围大[1]。但是随着噁喹酸和氟甲喹在兽医临床上的广泛应用，由于其耐药性和潜在的致癌性，欧盟、日本及我国均制定了其在动物组织中的最高残留限量。农业部第 235 号公告中规定的猪肉肌肉、肝脏和脂肪组织中氟甲喹的最大残留限量分别为 500 μg/kg、500 μg/kg 和 1000 ug/kg，猪肌肉、肝脏和脂肪组织中噁喹酸的最大残留限量则分别为 100 μg/kg、50 μg/kg 和 50 μg/kg[2]。

噁喹酸和氟甲喹属于第二代喹诺酮类抗菌药，氟甲喹也是目前唯一不与人类共用的一种广谱型抗菌兽药，属于氟哌酸的替代产品。这类药物具有很强的杀菌活力，对动物的细菌性疾病有很好的疗效。这类药物一般毒性较低，安全范围大[1]。但是随着噁喹酸和氟甲喹在兽医临床上的广泛应用，由于其耐药性和潜在的致癌性，欧盟、日本及我国均制定了其在动物组织中的最高残留限量。农业部第 235 号公告中规定的猪肉肌肉、肝脏和脂肪组织中氟甲喹的最大残留限量分别为 500 μg/kg、500 μg/kg 和 1000 μg/kg，猪肌肉、肝脏和脂肪组织中噁喹酸的最大残留限量则分别为 100 μg/kg、50 μg/kg 和 50 μg/kg[2]。

沙星类（Quinones，QNs）抗生素(图1)是一类人工合成的新型杀菌性抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌活性强、与其他抗菌药物无交叉耐药性以及毒副作用小、价格低廉等特点，被大量用于治疗和预防水生动物疾病及促生长。但研究表明，所使用的抗生素仅20～30%被鱼类吸收，大部分进入环境中，而这部分抗生素再次进入食物链，可能导致养殖环境中病菌耐药性的产生，导致二次污染。这不仅影响到水产养殖业的健康发展，而且还威胁着生态环境的安全。水样中残留喹诺酮类抗生素，通过饮用进入人体，可能对人体肝脏功能造成严重损伤。因此，建立水环境中这类药物的检测方法尤为重要。目前，喹诺酮类药物残留检测方法，主要包括HPLC-UV、HPLC-FD、HPLC-DVD、LC-MS/MS、LC-ESI-MS/MS，另外还有荧光光谱法、毛细管电泳法和酶联免疫法等。

噁喹酸和氟甲喹属于第二代喹诺酮类抗菌药，氟甲喹也是目前唯一不与人类共用的一种广谱型抗菌兽药，属于氟哌酸的替代产品。随着噁喹酸和氟甲喹在兽医临床上的广泛应用，由于其耐药性和潜在的致癌性。农业部第 235 号公告中规定的猪肉肌肉、肝脏和脂肪组织中氟甲喹的最大残留限量分别为 500 μ g/kg、500 μ g/kg 和 1000 μ g/kg，猪肌肉、肝脏和脂肪组织中噁喹酸的最大残留限量则分别为 100 μ g/kg、50 μ g/kg 和 50 μ g/kg。本方法采用 Agilent Bond Elut C19 固相萃取柱结合液相色谱-荧光检测器，成功开发出了不同猪组织中氟甲喹和噁喹酸的分析方法。该方法具有良好的精密度和稳定性，适用于检测不同猪肉组织中的氟甲喹和噁喹酸残留量。

在西方国家，顺铂，卡铂和奥沙利铂是使用最广泛的铂类癌症化疗药物。卡铂的有效性是由于其可以与DNA结合从而导致DNA- 铂（Pt）加合物的形成，但这也会造成DNA 的弯曲。因此在化疗后细胞必须修复DNA损伤，否则DNA复制受阻会导致细胞死亡。许多癌症患者最初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对顺铂治疗表现出耐药性，导致了癌症的复发。顺铂耐药性归因于三种主要的分子机制：DNA 修复的加速，胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对顺铂的摄入能力降低或者顺铂转运的加速。细胞内顺铂的摄入与肿瘤负荷相关，也就是说肿瘤对顺铂反应降低会导致细胞内顺铂的含量降低。所以，分析单个细胞水平对顺铂的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。过多顺铂进入细胞内会增加DNA 损伤和细胞死亡的频率。了解细胞对顺铂的摄入将能为新疗法的开发提供参考，以提高肿瘤对顺铂的敏感性。传统方法的缺陷在于铂的浓度只反映整体细胞群内的浓度而不是个体细胞内的浓度。因此，顺铂摄入在个体细胞之间的分布和差异无法通过传统方法体现。实际上，细胞对顺铂的摄入最有可能根据个体有很大差异，但至今还没有有效的方法来评估。本文介绍了一种全新的技术，可对金属在单一细胞水平上进行定量：单细胞电感耦合等离子体质谱 (SCICP-MS)。SC-ICP-MS 是以单颗粒电感耦合等离子体质谱（SP-ICP-MS）技术为基础，后者能够在溶液中对纳米粒子进行评估与定量。两种技术都基于测量单个细胞（或单个纳米颗粒）在进入等离子体时产生的离散信号的原理。每个细胞中的金属成分离子化，产生离子流，检测器以每秒100000 数据点的速度快速对信号采集测量，从而使得单个细胞中的金属含量能被定量到阿克（ag）/ 每细胞的水平。相比测量细胞内顺铂摄入的传统方法，SC-ICP-MS 所得结果的信息量更加全面。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。

喹诺酮类（Quinolones, QNs）是人工合成的一类抗菌药物，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、组织穿透力强、价格低廉等特点，已成为食品动物饲养和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，但由于细菌对喹诺酮类药物耐药性的产生和某些喹诺酮类药物的潜在致癌作用，其残留问题已引起广泛关注。本文根据《GB/T20366-2006 动物源产品中喹诺酮类残留量的测定 液相色谱 - 串联质谱法》，采用PerkinElmer QSightTM LCMSMS 建立动物源食品中喹诺酮类药物残留的解决方案。