甲基氟苯尼考标准品

动物源性食品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考（氟甲砜霉素）的测定色谱柱：菲罗门 kinetex C18柱（100×2.1mm 2.6um）试剂溶液: 甲醇水（3+7）：300 mL甲醇与700 mL去离子水混匀；乙腈饱和正己烷：乙腈与正己烷等比例混合，取上层；[b]说明：下列所述标准工作液A、B为氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素混合标液[/b]标准中间液：氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素1.0 μg/mL内标中间液：D-CAP 1.0 μg/mL标准工作液[b]A[/b]（25 ng/mL）：吸取1.0 μg/mL标准中间液0.25 mL用30%甲醇水定容至10 mL，混匀(该溶液临用现配)；内标工作液[b]A[/b]（25 ng/mL）：吸取1.0 μg/mL内标中间液0.25 mL用30%甲醇水定容至10 mL，混匀(该溶液临用现配)；标准工作液[b]B[/b](1 ng/mL)：吸取标准工作液[b]A [/b]0.4 mL用30%甲醇水定容至10 mL，混匀 (临用现配)。上机标准曲线:分别移取0、0.1、0.2、0.4、1.0mL标准工作液[b]A[/b]（25 ng/mL），1.0mL内标工作液[b]A[/b]（25 ng/mL）于5个10mL容量瓶中，30%甲醇水定容至刻度，得标液浓度为0、0.25、0.5、1.0、2.5 ng/mL，内标溶度为2.5ng/mL。附：标准曲线配制： 外标中间液：氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素1.0 μg/mL[img=,690,237]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310617262550_9107_2166779_3.png!w690x237.jpg[/img]样品前处理：准确称样5.00 g(精确至0.01 g)于50 mL离心管中，添加氯霉素内标[sup][/sup]，加入0.5mL氨水，加入5 g 无水Na[sub]2[/sub]SO[sub]4[/sub][sup][/sup]和20 mL乙酸乙酯，用均质器以10000 r/min的速度均质1 min，15 mL乙酸乙酯[color=#ff0000]清洗均质头[/color]，加盖振摇[sup][/sup]，3500 r/min离心5 min，上清液转移至150 mL的棕色梨形瓶中，在40 ℃减压旋转蒸发至干，加入2 mL甲醇水（3+7）和2 mL 乙腈饱和正己烷溶解洗脱，高速离心分层，取下清液，用0.2 μm微孔[color=#ff0000]有机[/color]滤膜过滤，上机测试。[img=,690,393]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310619102674_6914_2166779_3.png!w690x393.jpg[/img]氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考（氟甲砜霉素）的测定涉及标准汇总、比较见表1：[img=,690,247]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310621041150_5153_2166779_3.png!w690x247.jpg[/img][b]线性范围、线性方程[/b]分别对氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考标准系列工作溶液进行测定，以标准溶液的浓度(ng/mL)与氘代氯霉素浓度的比值为横坐标，以标准溶液中被测组分峰面积与氘代氯霉素峰面积比为纵坐标，绘制标准曲线或计算回归方程，具体结果见表2。[img=,673,185]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310636522800_5170_2166779_3.png!w673x185.jpg[/img]氯霉素（0.25ng/mL）、甲砜霉素(2.5ng/mL)、氟苯尼考（氟甲砜霉素）(2.5ng/mL)MRM图：[img=,690,399]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310626212579_611_2166779_3.png!w690x399.jpg[/img][img=,690,434]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310626315649_9067_2166779_3.png!w690x434.jpg[/img][img=,657,417]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310626401955_677_2166779_3.png!w657x417.jpg[/img]鸡肉样品测定MRM图：[img=,689,363]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310629369622_5025_2166779_3.png!w689x363.jpg[/img][img=,666,443]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310629457983_2475_2166779_3.png!w666x443.jpg[/img][img=,655,416]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310629536961_3288_2166779_3.png!w655x416.jpg[/img]鸡肉样品加标氯霉素（0.25ng/mL）、甲砜霉素(2.5ng/mL)、氟苯尼考（氟甲砜霉素）(2.5ng/mL)MRM图：[img=,690,361]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310633092540_6864_2166779_3.png!w690x361.jpg[/img][img=,682,443]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310633202300_3044_2166779_3.png!w682x443.jpg[/img][img=,671,425]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310633330468_2212_2166779_3.png!w671x425.jpg[/img][img=,673,185]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310638525567_679_2166779_3.png!w673x185.jpg[/img][img=,690,437]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310639003515_512_2166779_3.png!w690x437.jpg[/img][img=,690,455]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310639089904_8264_2166779_3.png!w690x455.jpg[/img][img=,690,455]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310639089904_8264_2166779_3.png!w690x455.jpg[/img][img=,658,289]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310641135748_6268_2166779_3.png!w658x289.jpg[/img]鸡肉样品加标0.1ug/kg氯霉素提取定量子离子151.9的信噪比：[img=,690,290]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310644563180_387_2166779_3.png!w690x290.jpg[/img]鸡肉样品加标1.0ug/kg甲砜霉素提取定量子离子184.9的信噪比：[img=,685,303]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310646330148_451_2166779_3.png!w685x303.jpg[/img]鸡肉样品加标1.0ug/kg氟苯尼考提取定量子离子336.0的信噪比：[img=,690,294]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810310648135100_953_2166779_3.png!w690x294.jpg[/img]注意事项：1、[color=#ff0000]每批样品检测应包含：[/color]标液曲线、试剂空白、样品空白、样品加标、样品。2、加标回收：分别添加1 ng/mL标准工作液[b]B [/b]0.5 mL于空白样品中，氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素相当于0.1 μg/kg水平；3、负离子模式，上机前如响应不够需清洗离子源[color=#ff0000]或增加仪器平衡时间[/color]；4、初测选适用基质的任一样品加标，如遇特殊基质（如饲料、血粉等粉末样品）称1.0 g，其余步骤同肉制品，定量下限与加标水平同时提高为氯霉素1.0 μg/kg，特殊基质应选用该样品做加标回收，复测时做平行样品，如初测浓度过高，复测时应加大曲线范围或者将样品稀释后上机，保证样品浓度在曲线范围内。

10，抽取5个版友）；中奖名单：m3071659（注册ID：m3071659）馨语（注册ID：huangdm）玲儿响叮当（注册ID：jshbhh）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）zengzhengce163(注册ID：zengzhengce163)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703131618_01_708_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703131618_02_708_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================动物源性食品中氟苯尼考、氟苯尼考胺和甲砜霉素的测定方法：SPE/HPLC基质：动物组织及内脏应用编号：103020化合物：氟苯尼考 氟苯尼考胺 甲砜霉素固定相：ProElut PLS色谱柱/前处理小柱：ProElut PLS 60mg / 3ml 50/pkg样品前处理：样品准备/提取(1) 称取试样1g（精确到0.01g）置于50ml 具塞离心管中，加入15ml 乙腈 +乙酸乙酯+氨水（80+15+5）(2) 均质1min，6000 r/min，离心5 min，取出上清液。(3) 残渣按照上述步骤重复提取一次，合并两次上清液。(4) 加入5 mL 正丙醇，在45℃以下水浴减压浓缩至近干(务必蒸干)。(5) 依次加入0.5ml 甲醇，10 ml 4%NaCl 溶液溶解残渣，震荡3 min，转入50ml 具塞离心管中，加入10 正己烷，震荡3 min， 10000r/min 离心5min，弃 去正己烷层。(6) 重复（5）的操作。，然后加入0.5 mL 氨水。混匀，作为上样液待净化。SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。色谱条件：色谱柱： Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603） 流速： 0.7 mL/min 检测器：* 激发波长：225 nm 发射波长：285 nm 柱温： 30 ℃ 进样量： 20 μL 流动相： A（庚烷磺酸钠9 g/L，磷酸二氢钠1.54 g/L）：B（乙腈）=81:19文章出处：迪马科技应用实验室关键字：氟苯尼考 氟苯尼考胺 甲砜霉素 动物源食品 SPE ProElut PLS谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/dongwu(1).GIF

[align=center][font='仿宋'][size=21px]氟苯尼考胺流动相优化过程记录[/size][/font][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]由于氯霉素逐渐在畜禽养殖中被禁用，氟苯尼考作为其替代品，近年来广泛用于治疗猪、禽及鱼类的肠道及细菌性呼吸道感染疾病。研究表明，氟苯尼考在动物组织中其代谢物经水解后最终会转化为氟苯尼考胺，因此原来只检测氟苯尼考[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]含量[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]不能[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]完全反映该类物质在生物体内的残留情况，需要增加氟苯尼考胺残留量检测（以氟苯尼考和氟苯尼考胺含量之和计）才能更全面反映氟苯尼考是否残留超标。[/size][/font][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]氟苯尼考、甲砜霉素、氯霉素三者都需要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]串联质谱ESI[/size][/font][font='仿宋'][sup][size=18px]-[/size][/sup][/font][font='仿宋'][size=18px]负离子模式检测，而氟苯尼考胺需要用ESI[/size][/font][font='仿宋'][sup][size=18px]+[/size][/sup][/font][font='仿宋'][size=18px]正离子模式，因此同时检测这四种物质就存在需要在一个质谱方法里完成正负离子模式的切换，对流动相要求也不一样——正离子模式加酸有利于离子化，负离子模式加酸可能会抑制离子化。[/size][/font][/align][align=center][font='仿宋'][size=18px]方案1[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]：[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]考虑到氟苯尼考胺是在原来氟苯尼考、甲砜霉素、氯霉素三种负离子模式检测方法的基础上新增加的组分，所以优先考虑了原来的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]方法（流动相用纯水+乙腈），氟苯尼考胺纯溶剂标色谱图如图1，保留时间在1[/size][/font][font='仿宋'][size=18px] [/size][/font][font='仿宋'][size=18px]min左右，能和后面的三种负离子模式组分采集时间分开；但配制基质标[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]再[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]进样就[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]发现[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]样品空白基质对氟苯尼考胺产生特别大的干扰，严重影响定性定量分析，纯水+乙腈流动相组合显然不能满足分析要求。[/size][/font][/align][align=center][/align][align=center][img=,690,653]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310071052068794_9343_3237657_3.png!w690x653.jpg[/img][/align][align=center][font='仿宋'][size=18px]图1[/size][/font][/align][align=center][img=,690,429]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310071052166860_5638_3237657_3.png!w690x429.jpg[/img][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]图[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]2[/size][/font][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]方案[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]2[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]：[/size][/font][font='仿宋'][size=18px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]对流动相要求比较苛刻，酸、碱、盐必须是易挥发的物质，所选范围比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]方法少的多，方案[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]1[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]流动相行不[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]通，考虑在无机水相中加入0[/size][/font][font='仿宋'][size=18px].1%[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]甲酸，得到图3的色谱图。[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]由于氟苯尼考胺含有NH[/size][/font][font='仿宋'][sub][size=18px]2[/size][/sub][/font][font='仿宋'][size=18px]官能团，极性强，加酸更易形成正电荷准分子离子峰——加入甲酸后氟苯尼考胺响应值确实比方案1高一些。但随之带来的问题是保留时间[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]大幅度提前，并且峰型出现拖尾、分叉情况，并随着进样针数增多峰型越来越差，不少带有NH[/size][/font][font='仿宋'][sub][size=18px]2[/size][/sub][/font][font='仿宋'][size=18px]官能团极性强的物质在酸性条件下都或多或少存在这种现象，一般[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]解决方案是加入三乙胺等碱性“扫尾剂”使目标物尽量保持分子状态增加保留时间以改善峰型，但三乙胺在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]流动相中属于禁用物质（若流动相中使用三乙胺正离子模式会出现1[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]02[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]超高响应值的背景离子，且很难清洗干净），[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]虽然不能添加三乙胺，但给了我们提示——加入相应易挥发的碱性流动相也能起到“扫尾剂”的作用。[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][img=,690,671]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310071052326996_6136_3237657_3.png!w690x671.jpg[/img][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]图[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]3[/size][/font][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]方案[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]3[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]：根据方案2的提示，试验在无机水相中添加一定比例的氨水，纯溶剂标样得到如图4的色谱图——峰型对称、保留时间合适（能和后面负离子模式采集时间分开），图5的基质标[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]色谱图显示[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]干扰物质也能和目标物完全分离，因此使用氨水+乙腈流动相能满足实验条件。进一步研究发现，氨水的加入量多了（＞0[/size][/font][font='仿宋'][size=18px].1%[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]）会严重抑制氯霉素等三种负源物质灵敏度，经过多次试验最终确定加入[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]0.05%[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]氨水能很好的兼顾氟苯尼考胺的峰型和三种负源组分的响应[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]值，最终氟苯尼考胺、氟苯尼考、甲砜霉素、氯霉素这四种组分同时分析选用的流动相方案为[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]0.05%[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]氨水溶液+乙腈梯度洗脱[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]程序，分离度、灵敏度都能达到相应的标准要求。[/size][/font][/align][align=left][img=,690,677]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310071052428395_4867_3237657_3.png!w690x677.jpg[/img][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]图[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]4[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img=,690,678]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310071052560726_70_3237657_3.png!w690x678.jpg[/img][/align][align=left][font='仿宋'][size=18px]图[/size][/font][font='仿宋'][size=18px]5[/size][/font][/align]

[font=宋体]◇依托考昔杂质[/font][font=宋体][font=宋体] 依托考昔杂质是在依托考昔的生产或保存过程中产生的非目标化合物。这些杂质可能会影响依托考昔的纯度和药效，因此在依托考昔的生产和质量控制过程中需要严格控制其含量。依托考昔杂质有多种类型，每一种都具有不同的化学特性，如[/font][font=Calibri]CAS[/font][font=宋体]号、分子式、分子量等。例如，依托考昔杂质[/font][font=Calibri]K[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]CAS[/font][font=宋体]号为[/font][font=Calibri]349536-41-0[/font][font=宋体]，分子式为[/font][font=Calibri]C18H15ClN2O3S[/font][font=宋体]。依托考昔杂质[/font][font=Calibri]Etoricoxib[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]CAS[/font][font=宋体]号为[/font][font=Calibri]202409-33-4[/font][font=宋体]，分子式为[/font][font=Calibri]C18H15N2O2SCl[/font][font=宋体]，别名包括依托考昔、[/font][font=Calibri]5-[/font][font=宋体]氯[/font][font=Calibri]-2-(6-[/font][font=宋体]甲基吡啶[/font][font=Calibri]-3-[/font][font=宋体]基[/font][font=Calibri])-3-(4-[/font][font=宋体]甲基磺酰苯基[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]吡啶等。依托考昔杂质[/font][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]CAS[/font][font=宋体]号为[/font][font=Calibri]292067-97-1[/font][font=宋体]，分子式为[/font][font=Calibri]C18H15ClN2S[/font][font=宋体]。此外，依托考昔还可能存在其他未具体命名的杂质。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri] CATO[/font][font=宋体]标准品提供的依托考昔全套的杂质[/font][/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]这些杂质对于药物的纯度和稳定性研究至关重要，也是药物研发过程中不可或缺的一部分[/font][font=宋体]。[img=,604,518]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402182043373327_8351_6381607_3.png!w604x518.jpg[/img][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe] 广州[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]佳途科技[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]股份有限公司[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]深知药物研发与质量控制的重要性[/back][/color][/font][font=宋体][font=宋体]，[/font][font=Calibri]CATO[/font][font=宋体]标准品厂家，提供依托考昔全套[/font][/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]杂质，为客户提供更加精准、可靠的分析标准品，助力药物研发事业的快速发展[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]以满足客户在药物研发和质量控制方面的需求。[/font]