三氯三聚氰胺标准品

摘要： 依据国家标准GB/T 22388—2008，采用LabTech固相萃取提取装置、高效液相色谱系统对奶粉、牛奶中的三聚氰胺进行检测分析，固相萃取净化回收率达95%以上，液相系统快速检测奶制品中三聚氰胺含量，同时盲样检测准确度达99%以上，整套方案简单易行。

"文章介绍采用Clarus 600GCMS同时分析奶制品中三聚氰胺及其三种常见类似物，结果：该方法完全符合美国FDA 有关快速消费品中筛查三聚氰胺及其类似物的方法要求，分析结果更加准确，能有效的监控奶制品受三聚氰胺及其类似物的污染情况。"

三聚氰胺---无味、白色单斜晶体，化工中常用于塑料及肥料生产，其含氮量高且成本低，人体大量摄入三聚氰胺会引发肾结石等多种泌尿系统疾病，严重将危害生命。动物奶源原乳及乳制品食物营养丰富在市场及人们的饮食中十分常见。乳品市场广泛，市场竞争激烈，常以蛋白质含量评价乳品质量，而最常用的蛋白质检测方法为凯氏定氮法---以氮含量来推算蛋白质含量。2008年“三鹿”牌奶粉厂家以次充好，将三聚氰胺添加到奶粉中利用其氮高含量来充当蛋白质，给30万家庭带来了不同的伤害和影响。尽管已过去10余年，提起三聚氰胺仍让人心惊胆颤。本方案参考GB/T 22388-2008 《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中高效液相色谱法，以科学仪器为眼睛，探究乳品安全。

原料乳与乳制品中三聚氰胺检测的重要性三聚氰胺又称密胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料，主要用于制造三聚氰胺-甲醛树脂、粘合剂等。由于从元素组成的角度，三聚氰胺分子中氮元素含量高达66.7%，因此被某些不法商家添加到原料乳及乳制品中以提高蛋白含量。动物毒理学研究表明：三聚氰胺和尿酸结合形成结石，可诱发膀胱癌和泌尿道增生性疾病，对人类具有严重的潜在危害。原料乳与乳制品中基质成分复杂、干扰因素多、样品处理过程繁琐。本文采用全自动固相萃取仪对样品进行净化，有效地简化样品前处理过程。同时结合LC/MS/MS的多反应监测(MRM)采集方式，减少基质干扰对三聚氰胺的测定，同时也降低了检出限，为原料乳与乳制品中三聚氰胺残留检测提供了一种简单、快速、可靠的分析方法。

为加强市场监督，保障食品安全GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》标准中规定了3种测定运料乳与乳制品中三聚氰胺的方法。本方案参考上述标准中高效液相色谱法，奶粉为样品探究乳品安全。

三聚氰胺事件向我们预警了食品安全的重要性，很多牛奶、奶粉等奶制品中均含有三聚氰胺的成分，从2008-2010年都一直作为检测分析行业内的重点项目，离子色谱分析三聚氰胺具有很好的检出限和检测准确度，青岛盛瀚色谱技术有限公司开发的三聚氰胺检测分析方法在2008年国家科技部和质检总局组织的北京大比武中获得第一名的好成绩，请大家参阅

三聚氰胺俗称密胺、蛋白精，分子式为C3H6N6，是豆、乳类制品中的非法食品添加剂，曾作为蛋白质的廉价代替物被非法添加进奶粉等食品中，造成了严重的社会危害。目前，三聚氰胺已严禁直接用于食品，并有相关法律法规强调企业在购入生乳原料、原料乳粉及其加工制品时需检测三聚氰胺含量。本方案参照《GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中第一法，以乳粉为基质进行了加标验证，高中低三水平下，样品的回收率均大于80%，RSD＜10%，满足标准要求，可供客户参考。

据医学专家介绍，三聚氰胺原本是一种低毒性化工原料，动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。不法商人在某个环节添加入乳制品中，可以人为提高表观蛋白质的含量，从而达到以次充好，获取利益的目的。但由于婴幼儿每天食用奶粉量大，造成三聚氰胺的大量摄入从而引起婴幼儿的泌尿系统疾患，在患儿的尿液中甚至是肾脏细胞中都能检测出来，严重者甚至会发展为肾功能不全。月旭科技参照GB/T22388-2008检测标准，采用公司的Welchrom? P-SCX固相萃取柱（60mg/3 mL）和Ultimate? XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）液相色谱柱，建立了原料乳与乳制品中三聚氰胺的快速前处理方法和LC-UV检测方法，为广大客户提供最有力的技术支持。

应用GC-MS3100 分析测定奶粉中的三聚氰胺，参照国标GB/T 22388-2008 和地方标准DB13/T 1000-2008，采用SIM 离子扫描方式，外标法定量，对气-质联用分析条件进行了考察。该方法在乳制品中三聚氰胺的加标回收率在80-108%之间，相对标准偏差在5%以内，在0.05mg-50mg/l 之间保持良好的线性，相关系数在0.999 以上，最低检测限稳定在0.01mg/kg。

三聚氰胺俗称密胺、蛋白精，是一种用途广泛的有机化工中间品，最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂的原料，还可用作阻燃剂、减水剂和甲醛清洁剂等。

可节约成本, 缩短保留时间• 检测食品,效果较好 吡啶含量低,灵敏度高. • 样品处理简单 衍生化试剂进样体积小,进样口和柱免受污染. • 保留时间缩短,灯丝寿命更长. 摘要气相色谱和质谱(GC/MS)用于分析三聚氰胺和相关的化合物如三聚氰酸, 三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺. 该方法以 FDA方法-GC-MS 方法检测与确认三聚氰胺及其类似物,(第二版, 2007年5月7日)为基础, 经多处修改并优化了分离方法. 分析物通过相对保留时间再配合质谱方法,很容易鉴定. 分析干燥食品中的高或低浓度三聚氰胺是很成功的,基质成分不会同相关的成分共同洗脱出来.介绍2007年发生了好多宠物食品招回事件,动物食用污染食品后生病,有些已经死亡.动物生病与三聚氰胺污染有潜在联系, 尽管人们认为三聚氰胺毒性小或几乎没有毒性.三 聚氰胺是一种工业化学原料,用于塑料制品,粘胶, 阻燃剂,纺织和其它原料的生产.三聚氰胺不是食品添加剂,但在宠物食品及其它含蛋白质食品中发现有三聚氰胺. 大家认为它的毒性是由于三聚氰胺与三取氰酸结合形成水不溶性晶体. 晶体在肾脏形成, 收起疾病甚至肾衰竭.随着研究的深入, 一致认为三聚氰胺和三聚氰胺副产物经常被添加在蔬菜蛋白产品中,如小麦谷蛋白和大米蛋白. 这样可人工提高产品中蛋白质的含量. 凯氏定氮法用于测定蛋白质的含量. 也可测定氮的含量. 蛋白质分解后, 释放出氮,氮转化成氨 . 氨水含量通过滴定的方法测定,同蛋白质的含量也相关. 当样品中加入非蛋白质的含氮成分时,用此方法测定结果偏高,虚假成分太多. 三聚氰胺及其副产品加入蛋白制品中能升高蛋白的含量. 下图展示的是三聚氰胺及副产物的化学结构式,氮含量非常高, 是理想的非蛋白氮原料. 不幸的是, 三聚氰胺副产品不仅含有三聚氰胺, 还有三聚氰酸, 三聚氰酸二酰胺, 和三聚氰酸一酰胺, 导致动物毒性. 鉴于三聚氰胺的副作用, 进口产品需要检测三聚氰胺, 三聚氰酸和相关化合物的含量.

三聚氰胺呈弱碱(pKb=8)，与盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成三聚氰胺盐，遇强酸或强碱水溶液水解，胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。研究发现，在食品中只有同时含有三聚氰胺和三聚氰酸这两种化学成分时才对婴儿健康构成威胁。这样看来虽然三聚氰胺和三聚氰酸共同作用下才会导致肾结石，但是三聚氰胺在胃的强酸性环境中会有部分水解成为三聚氰酸，因此只要含有了三聚氰胺就相当于含有了三聚氰酸，其危害的本身仍源于三聚氰胺。

三聚氰胺检测的样品前处理方法 三聚氰胺是一种重要的化工材料，常用于制造三聚氰胺树脂，是建筑业中常用的防火材料，本来与食品、饲料行业毫不相干，但是发生在美国的数起饲料致死宠物的事件使两者联系在一起。经过调查，发现这些进口饲料中含有一定浓度的三聚氰胺，对此，美国食品药品监督管理局（FDA）要求饲料厂商提供三聚氰胺的检测报告，因此，三聚氰胺事件也使得分析领域掀起了检测方法的开发热潮

三聚氰胺，别名密胺、蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，被用作化工原料，不可用于食品加工或食品添加物。三聚氰胺进入体内后不能被代谢，而是从尿液中排出，因此长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，如膀胱、肾部结石，甚至膀胱癌等。

为加强市场监督，保障食品安全GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》标准中规定了3种测定运料乳与乳制品中三聚氰胺的方法。本方案参考上述标准中高效液相色谱法，对巧克力样品进行相关分析，保障食品安全，保护人类健康。

为加强市场监督，保障食品安全GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》标准中规定了3种测定运料乳与乳制品中三聚氰胺的方法。本方案参考上述标准中高效液相色谱法，以液体乳为样品探究乳品安全。

327 进行定量。方法在 0.010～0.500mg/L 范围内呈良好的线性关系。方法分析三聚氰酸和三聚氰胺的检测限分别为 0.016、0.003mg/kg，精密度为 4.5%～8.6%、3.9%～6.2% 和回收率分别为 84.0%～102.0%、88.5%～104.0%。为乳粉中三聚氰酸和三聚氰胺的检测提供了准确可靠的方法。

三聚氰胺（melamine）是一种商品掺杂物。如果使用凯氏定氮法或燃烧法通过总氮含量间接测定蛋白质的含量，加入三聚氰胺可以提高样品中表观蛋白质含量。在奶粉和谷朊粉（面筋粉）中掺杂三聚氰胺的恶性事件已经发生了很多。选择掺杂三聚氰胺这种廉价物质是因为其中氮元素含量达到66%，大约是相同质量蛋白质中氮含量的4倍。实际上，混合物中三聚氰胺的加入量达到百分之几时（远高于ppm含量水平）才能够显著降低生产成本。2007期间发生于美国的谷朊粉掺假事件中，掺假谷朊粉中三聚氰胺的含量达到了8%，而最终的宠物食品中三聚氰胺的含量低于0.2%。目前食品和药物中三聚氰胺的含量上限一般在1~2 ppm。近红外光谱并不适合于检测成品中如此低含量的三聚氰胺，但是非常适合于筛查原材料。相比于在成品中检测出三聚氰胺，如果在原材料中检测出三聚氰胺则更容易追查其来源。

采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80HR（4.6 mm IDX25cm,5μ m）参照食品安全国家标准GB31604.15-2016对食品接触材料中三聚氰胺的迁移量进行检测，可以检测出0.2ppm浓度的三聚氰胺，满足该标准中的检出限要求。在国家标准附录的色谱图中，其三聚氰胺的保留时间差异较大（分别约为5.2min、5.6min、5.6min），RSD=4.22%。而TSKgel Amide-80HR色谱柱相比之下拥有更好的出峰重现性（RSD=0.25%）。

本文根据国家标准GB/T 22388—2008 《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》，建立了利用我公司高效液相色谱LC-5500测定奶粉中三聚氰胺的方法：色谱柱：XBP-Cl8柱；流动相 ：离子对试剂缓冲液—乙腈（90+10，体积比）；流速 ：1 mL／min；进样量：20 μL；紫外检测器，波长 240 nm。柱温：40 ℃ ± 1 ℃。方法在0.8 μg/mL到80μg/mL之 间线性良好，，线性相关系数r≥0.999，泛酸的回收率在 85.45％～92.77％之间。对客户提供的奶粉样品进行检测发现，样品中未检出三聚氰胺的含量。

参照 NY/T 1372-2007，使用岛津的 GCMS-QP2010 Plus 测定了奶粉及液态奶制品中三聚氰胺的残留。对样品进行前处理，三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化后，用衍生化试剂（N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺 BSTFA+1%三甲基氯硅烷 TMCS）进行衍生，用 GCMS 进行定性分析和定量分析。检测方法完全满足目前三聚氰胺分析的要求。

参照国标方法GR/T 0004-2008，使用国产GC-MS3100气相色谱质谱联用仪测定了奶制品中三聚氰胺的残留。 1 仪器设备 1.1 GC/MS-3100气相色谱质谱联用仪1.2 其它仪器和设备见GR/T 0004-20082 操作步骤2.1样品前处理：具体见GR/T 0004-20082.2衍生化：处理好的样品加入200μl吡啶和200μl衍生化试剂（N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺BSTFA+1%三甲基氯硅烷TMCS）混匀，放于70℃反应30min进行衍生。3 GC/MS3100仪器主要配置 3.1 主机： GC/MS-3100（EI源）：3.2 配NIST标准谱库和MS3000RT工作站以及MS3000数据处理软件3.3 色谱柱：EquityTM-5 30m×0.25mm×0.25μm（或同类型） .....详细请下载全文

三聚氰胺原本是一种化工原料，与食品没有任何关系。但是由于其含氮量高达66.7%，高于普通的蛋白质平均含氮量约16%的数值，被不良企业添加到食品中，以提高其含氮量。国标 GB/T 22388-2008 中规定了原料乳及乳制品中三聚氰胺的检测方法，包括高效液相色谱法（HPLC法）、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS法）和气相色谱-质谱联用法【包括气相色谱-质谱法（GC-MS法），气相色谱-质谱/质谱法（GC-MS/MS法】。孙庆磊 17615852702

本文使用悟空K2025高效液相色谱仪测定牛奶中三聚氰胺的含量。色谱条件：C18 4.6×250mm，5μm，流速为1.0mL/min，柱温为40℃，进样量为20μL，检测波长为240nm。实验结果：三聚氰胺在测定浓度范围内具有良好的线性关系（R2=0.9998）；三聚氰胺的仪器检出限为0.064μg/mL，仪器定量限为0.212μg/mL。按照标准规定称样量，满足《GB/T 22388-2008 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中高效液相色谱法的检出限2mg/kg的要求。

本文参考GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中第二法建立了基于睿科Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪分析奶粉中三聚氰胺的检测方法，试样用1%三氯乙酸溶液提取，使用阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，内标法定量，回收率于87-97%之间，RSD=4.7。说明该方法能满足奶粉中三聚氰胺的检测。

"文章介绍了在参考《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》(GB/T22388-2008)方法下，利用PE LC对试样中的三聚氰胺进行定性和定量分析，结果：方法检出限为1mg/kg。回收率在95％左右。"

三聚氰胺（Melamine）（化学式：C3H6N6），IUPAC命名为“1，3，5-三嗪-2，4，6-三氨基”，三聚氰胺也叫密胺，是一种工业上常用的加工助剂和原料，主要应用在化工和工业方面例如塑料、纺织品等的生产和制造。比较常接触的三聚氰胺制品，例如超市中常见的仿瓷餐具和密胺树脂制品等，其主体材料就是三聚氰胺。其材质稳定耐用、加工成本低，所以应用比较广泛。本实验对三聚氰胺中的氮含量采用凯氏定氮法进行测定。

本文参考《GB/T 22388-2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》中第二法建立了基于睿科Fotector Plus全自动固相萃取分析奶粉中三聚氰胺的检测方法，试样用1%三氯乙酸溶液提取，使用阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证，内标法定量，回收率于87%-97%之间，RSD=4.7。说明该方法能满足奶粉中三聚氰胺的检测。

三聚氰胺（Melamine）为白色或无色结晶，通常用于塑料制品中合成树脂的生产中，高温和酸性条件下能引起三聚氰胺转移到食品中。三嗪类农药环丙氨嗪（Cyromazine）在极端的 pH 条件下或者光降解的条件下也能生成三聚氰胺。近来，不法厂商将三聚氰胺违法添加到宠物食品中引起宠物死亡，引起广泛的关注。因此，如何快速准确的分析食品中的三聚氰胺成为食品企业，食品监管机构和广大民众密切关注的问题。本文建立了液相色谱串联质谱（LC/MS/MS）用于宠物食品中三聚氰胺检测的方法，并将其与美国食品药品监督管理局（US FDA）公布的气相色谱质谱（GC/MS）和液相色谱（LC）方法进行了对比，结果发现 LC/MS/MS 的方法，前处理过程简单，是一种高灵敏度、高选择性的分析方法。

以下是使用三聚氰胺检测仪检测牛奶中三聚氰胺含量的一般实验操作步骤：收集实验所需材料和设备：三聚氰胺检测仪、牛奶样品、离心管、移液器、试剂瓶等。