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酪氨酸磷酸化抑制剂标

仪器信息网酪氨酸磷酸化抑制剂标专题为您提供2024年最新酪氨酸磷酸化抑制剂标价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括酪氨酸磷酸化抑制剂标参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的酪氨酸磷酸化抑制剂标您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合酪氨酸磷酸化抑制剂标相关的耗材配件、试剂标物,还有酪氨酸磷酸化抑制剂标相关的最新资讯、资料,以及酪氨酸磷酸化抑制剂标相关的解决方案。

酪氨酸磷酸化抑制剂标相关的方案

  • LC-MS/MS检测人血浆中15种酪氨酸酶抑制剂类抗肿瘤药物含量
    本文建立了一种使用岛津液相色谱质谱联用仪内标法测定人血浆中15种酪氨酸酶抑制剂类抗肿瘤药物含量分析方法。血浆样品经含同位素内标物的甲醇进行蛋白沉淀后,取上清加水稀释后即可进样分析,一针进样,5分钟即可完成15种酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)抗肿瘤药物分析,分别考察了方法的线性、准确度和精密度性能。结果显示各分析物线性范围内标准曲线相关系数均大于0.999,方法准确度在90%~110%之间,精密度RSD均在0.9%~9.36%之间,可满足临床日常检验需求。该方法分析速度快,灵敏度高,专属性强,前处理简单,可为相关从业人员提供参考。
  • 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒
    人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)抗原、生物素化的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂B(CSTB)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)检测试剂盒
    人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)检测试剂盒人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)抗原、生物素化的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒
    人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)抗原、生物素化的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒
    人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒中文名称 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒英文名称 Human cystatin / cystatin C (Cys-C) ELISA kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)抗原、生物素化的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
  • 使用近红外光谱学和化学计量学鉴别真伪磷酸二酯酶抑制剂
    本项研究选择性的针对5 型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂。这一类药主要用于治疗勃起功能障碍,另外也可以用于治疗良性前列腺增生(BPH)和肺动脉高压。该应用文章阐述了如何使用PerkinElmer 带AssureID™ 和Spectrum 10™ 软件的Spectrum Two N™ FT-NIR 光谱仪鉴定西地那非、他达拉非和伐地那非片剂的真伪。
  • 探究人源葡萄糖转运蛋白的外表面抑制剂分子机制
    颜宁团队与清华大学Jiang Xin团队通过晶体结构解析,对GLUT家族蛋白与抑制剂之间的相互作用进行了深入的探究,并结合Monolith分子互作检测阐明了抑制剂SA47的作用方式,为发现用于治疗开发的 GLUTs 表面抑制剂提供了分子基础。
  • LUMiSizer:沥青质抑制剂研究的重要工具
    直到20世纪30年代,沥青质研究的重点仍然是了解其分子结构。对沥青质沉积机理和抑制剂作用的研究可以帮助工业界提出新的、更多的建议和有效的解决方案。然而,到目前为止,大多数沥青质沉积研究都涉及模型系统。在本研究中,我们使用LUMiSizer分析仪来评估沥青质沉积。使用LUMiSizer分析仪可以直接测量使用大量絮凝剂和不同化学成分抑制剂的巴西原油中的沥青质沉降。LUMiSizer分析仪用于测试重油中沥青质沉淀的抑制剂。评估提高絮凝剂浓度对相分离的影响,以监测沉降和沥青质絮凝的可能性。样品谱图还表明,样品是多分散的,随着时间的推移,絮凝随着絮凝剂浓度的变化而改变。从本研究的制备方法来看,加速沉淀表明抑制剂的作用是阻止聚集物的生长,而不是其初始形成。此外,LUMiSizer分析仪可以直接在不稳定的原油和添加剂中评估时间相关实验的性能,以及以往被传统方法忽视的抑制剂选择信息。
  • 酶抑制剂的作用和抑制原理说明
    酶反应抑制剂,简称“抑制剂”。一类能降低酶促反应速率的物质。会使酶的必需基团或活性部位的性质和结构发生改变,从而导致酶活性降低或丧失。按与酶结合的强度和方式,分可逆抑制剂和不可逆抑制剂。
  • 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)检测试剂盒
    人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)检测试剂盒人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗原、生物素化的人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)检测试剂盒
    人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)检测试剂盒人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)抗原、生物素化的人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA试剂盒
    人糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA试剂盒人糖原磷酸化酶M(PYGM)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人糖原磷酸化酶M(PYGM)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人糖原磷酸化酶M(PYGM)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人糖原磷酸化酶M(PYGM)抗原、生物素化的人糖原磷酸化酶M(PYGM)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖原磷酸化酶M(PYGM)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 磷酸化协同超声波处理对玉米淀粉改性的研究
    试验研究磷酸化协同超声波处理对玉米淀粉物理性质的影响。比较三聚磷酸钠浓度、超声功率、超声时间、温度4个影响因素对淀粉的交联度、透明度、凝胶强度、糊化特性的影响。试验结果表明:磷酸化协同超声波处理可有效改玉米淀粉交联度、透明度,凝胶强度和淀粉糊化特性。磷酸化协同超声波可以有效对玉米淀粉进行改性。
  • STING抑制剂片段筛选
    由NanoTemper和药明康德子公司Crelux合作完成的STING抑制剂片段筛选案例。包括阳性化合物TSA实验验证STING蛋白结合活性,片段化合物单点筛选及亲和力排序实验。
  • 人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒
    人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)抗原、生物素化的人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人3-硝基酪氨酸(3-NT)检测试剂盒
    人3-硝基酪氨酸(3-NT)检测试剂盒人3-硝基酪氨酸(3-NT)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人3-硝基酪氨酸(3-NT)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人3-硝基酪氨酸(3-NT)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人3-硝基酪氨酸(3-NT)抗原、生物素化的人3-硝基酪氨酸(3-NT)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人3-硝基酪氨酸(3-NT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 4种苦味抑制剂对3种苦味成分的掩味效果
    目的探讨4种苦味抑制剂(大豆多糖、HP-β -CD、黄原胶、阿斯巴甜)对3种苦味成分(穿心莲内酯、芦荟苷、氧化苦参碱)的掩味效果。方法采用口尝法,以苦度降低值为指标,分析加入不同浓度苦味抑制剂后溶液的苦度变化规律;采用电子舌法,选择大豆多糖、HP-β -CD作为掩味物质,比较它们对各苦味成分的掩味效果。
  • 内标掺入SILAC法用于小量组织的蛋白质组及磷酸化蛋白质组定量
    在这篇工作中,我们采用内标掺入 SILAC 的定量方法对大鼠胰岛进行了蛋白质组以及磷酸化蛋白质组的定量研究。通过对 SILAC 培养基的成分比例调整,我们优化了 INS-1E 细胞的标记方法。胰岛内包含多种细胞类型,如α 细胞,β 细胞,δ 细胞等,我们发现采用 INS-1E 细胞系(一种β 细胞系)已经可以较好的覆盖胰岛的全蛋白质组和磷酸化蛋白质组。若关心胰岛中的α 细胞的话,则可以标记α 细胞系来作为内标掺入胰岛。此外,我们还可以采用多种细胞系作为内标,这种称为“Super SILAC”的方法来完成对复杂组织蛋白质的全覆盖。 在磷酸化蛋白质组学流程中,我们采用了自制的基于StageTip 的TiO2萃取小柱来灵活的实现小量样品的磷酸化肽段富集。样品量始终是磷酸化以及其他一些翻译后修饰研究绕不过去的话题,一般来说只有增加样品量,并采取适当的预分级手段才能更深度的去覆盖这些翻译后修饰蛋白质组。ThermoFisher 也提供了商业化的 IMAC 试剂盒(Cat # 88300),鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性,这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。
  • 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)检测试剂盒
    人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)检测试剂盒人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗原、生物素化的人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)检测试剂盒
    人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)检测试剂盒人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)抗原、生物素化的人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 使用LC-MS/MS同时检测四种免疫抑制剂
    免疫抑制剂是对机体的免疫反应具有抑制作用的药物,能抑制与免疫反应有关细胞(T细胞和B细胞等巨噬细胞)的增殖和功能,能降低抗体免疫反应。常用的免疫抑制剂包括他克莫司、环孢霉素A、西罗莫司、依维莫司等。免疫抑制剂主要用于器官植抗排斥反应和自身免疫病如类风湿性关节炎、红斑狼疮、皮肤真菌病、膜肾球肾炎、炎性肠病和自身免疫性溶血贫血等。由于其治疗窗窄,在药动学和药效学上存在着明显的个体差异,且血药浓度与给药剂量间相关性不佳,给临床治疗增加了相当的难度。因此,免疫抑制剂在临床应用中需进行治疗药物监测,所测值作为临床评价疗效及毒副反应的指标。传统免疫学方法进行血药浓度监测时特异性较差,不能完全区分免疫抑制剂与其代谢物。例如:FK506目前已被发现至少有9个体内代谢物,代谢产物互为同分异构体,并且部分代谢产具有免疫活性。这些代谢物与母药存在交叉免疫反应,使测得值高于实际值,重现性差。检测所需时间较长。另外,新的免疫抑制剂如依维莫司,LC-MS/MS可能是目前唯一能够采用的方式。LC-MS/MS相比操作简单、分析速度快,所需样品量少,灵敏度高,特异性好,结果更加可靠,重现性好,能完全区分药物本身及其代谢产物。
  • 天津兰力科:固态汞合金电极吸附伏安法测定酪氨酸
    采用白合金粉与汞混合制成汞合金糊, 涂布在固体石蜡碳糊电极表面, 固化后制得固态汞合金电极,并首先应用于酪氨酸的测定。在含Co2 +的pH 912的硼砂- NaOH底液中, 用线性扫描伏安法在- 0180~ - 1130V范围内进行扫描, 酪氨酸于- 1105 V出现灵敏的还原峰, 酪氨酸的浓度与峰电流在110 ×10 - 7 ~110 ×10 - 5mol /L范围内呈线性关系。该法已用于复方氨基酸注射液中酪氨酸含量的测定, 加标回收率达96%~102%。该电极既保留了汞电极的优点, 又避免了汞电极有毒、使用不方便的缺点。
  • 基于二氧化钛富集策略的人类磷酸化蛋白质组大规模鉴定
    在这部分工作中,我们采用了高 pH 反相色谱结合二氧化钛富集以及二氧化钛富集结合强阳离子交换分级两条技术路线来对实现对 Hela 细胞的磷酸化蛋白质组的深度覆盖。最终我们的实验一共鉴定到了 8,696 个蛋白质上的近 40,000 个磷酸化位点。 在二氧化钛富集结合强阳离子交换分级的技术路线中,SCX 分级的梯度还值得进一步优化,对于这种组分较少的预分级方法,阶梯洗脱会是一个更好的选择。这种大规模的磷酸化肽段富集方法对样品的起始量要求比较高,如果样品较少的话,建议采用二氧化钛富集结合强阳离子交换的策略,一般 2 mg 起始蛋白就能得到较多的磷酸化位点鉴定。ThermoFisher也提供了商业化的 IMAC 试剂盒(Cat # 88300),鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性,这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。
  • 人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒
    人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 规格:96T/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)抗原、生物素化的人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度
  • 基于二氧化钛富集策略的人类 磷酸化蛋白质组大规模鉴定
    在二氧化钛富集结合强阳离子交换分级的技术路线中,SCX 分级的梯度还值得进一步优化,对于这种组分较少的预分级方法,阶梯洗脱会是一个更好的选择。这种大规模的磷酸化肽段富集方法对样品的起始量要求比较高,如果样品较少的话,建议采用二氧化钛富集结合强阳离子交换的策略,一般 2 mg 起始蛋白就能得到较多的磷酸化位点鉴定。ThermoFisher 也提供了商业化的 IMAC 试剂盒(Cat # 88300),鉴于 IMAC 和 TiO2 对磷酸化肽段富集有着较好的互补性,这两者联用会对磷酸化蛋白质组的深度覆盖达到更好的效果。
  • 多酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂的筛选及抗肿瘤活性研究
    多金属氧酸盐(polyoxometallates,POMs)由于结构的多样性以及其在分子尺寸、表面电荷分布、氧化还原电位、极性、酸性、溶解性及热稳定性等方面高度可调的分子特性,在材料,磁学,催化,尤其是医药科学等领域都有着广泛而重要的应用。肿瘤一直是威胁人类健康的一大顽疾。研究表明,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylaseinhibitors,HDACi)可以通过改变组蛋白或转录因子的乙酰化状态诱导肿瘤细胞生长、分化或凋亡,具有明显的抗肿瘤活性。本论文首次将多酸类药物用于HDACi的筛选,从近400种POMs化合物中筛选出了五类13种与已知HDACi具有相同作用效果的多金属氧酸盐化合物。这五类POMs化合物分别是:1.夹心型钨锗酸盐化合物PA-304 PA-312 PA-313 PA-315 PA-317;2.三有机锡取代的钨锗酸盐化合物PA-320;3.过渡金属连接二钛取代的Keggin型钨磷酸盐形成的化合物PA-324 PA-331 PA-332PA-330;4.临床有机药物与Anderson型多阴离子形成的超分子化合物PA-301 PA-303;5.含Ti的三聚杂多钨锗酸盐化合物PA-334。实验中以PA-320为代表化合物,对其抗肿瘤活性做了初步的验证。绿色荧光蛋白质粒报告基因的荧光照片显示PA-320可以诱导绿色荧光蛋白发光增强,且发光的强度要强于已知临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA的作用效果。直观的说明PA-320可以刺激p21基因表达增加。逆转录PCR(RT-PCR)和DNA电泳的结果证实,不同浓度的PA-320处理的细胞,其细胞中p21基因的表达量与用临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂BUA处理细胞后的作用效果相同。说明PA-320有和临床HDACi相同的作用功效,可以刺激p21基因的表达增加。据文献报道HDAC1对p21WAF1/CIP1基因的抑制作用最为显著。PA-320对瞬时转染的HDAC1-7的实验结果证实,在转染了HDAC1的同时加入一定浓度PA-320刺激后,p21WAF1/CIP1基因启动子报告基因的活性明显增强,HDAC1的活性明显受到抑制。瞬时转染HDAC实验证明多金属氧酸盐化合物PA-320可以很好的抑制HDAC的活性。MTT实验结果证实PA-320对Hela细胞,LNCaP细胞,293T细胞,SW620细胞四种癌细胞均有抑制作用。实验测得对四种癌细胞的IC50值分别为38.8679μg/ml,45.1477μg/ml,44.4783μg/ml和9.2771μg/ml。说明PA-320可以在相对较低的浓度下(100μg/ml),PA-320的抑制浓度也是比较低的。说明PA-320对肿瘤细胞有很好的抑制效果。
  • 一种用于磷酸肽鉴定和磷酸化位点定位的新型自动化、高选择性磷酸肽富集方法
    针对 HUPO 磷酸肽挑战赛,使用 AgilentAssayMAP Bravo 平台和 LC/Q-TOF 系统进行自动化磷酸肽富集以实现定性和定量分析。执行 CID 肽鉴定实验,在“磷酸肽”样品中鉴定出 437 种特有肽段,其中包括94 种磷酸肽。鉴定出 HUPO 序列表中的所有 89 种非磷酸肽。ECD 实验基于 89个非磷酸肽序列确定了 96 种磷酸肽的磷酸化位点。还将序列表中未列出的其余肽返回给 HUPO。在富集的“磷酸肽-酵母”样品中,鉴定出 287 中特有肽段,其中包括 264 种特有磷酸肽。富集的总体选择性约为 92.0%。此外,从富集的“磷酸肽-酵母”样品中仍鉴定出加入酵母中 96 种磷酸肽中的95 种。与开展本研究中的其他实验室相比,安捷伦从富集样品中回收的磷酸肽数量最多。
  • 基于口尝法和电子舌法的多类苦味抑制剂对盐酸小檗碱的抑苦效能及抑苦规律研究
    目的探讨多类苦味抑制剂(bitterness suppressants,BS)对代表性苦味物质盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BBR)的抑苦效能及抑苦规律。
  • 卓光仪器:电位滴定法检测酪氨酸含量
    酪氨酸属于芳香族氨基酸,是人体的半必需氨基酸之一,酪氨酸的代谢性紊乱将导致一些遗传性疾病,因此医药上常用作氨基酸类营养药,治疗脊髓灰质炎、脑炎、甲状腺机能亢进等疾病。还可以促进黑色素的形成,减轻白癜风症状。本文参考药典中的方法,采用 88%甲酸进行前处理,分别用 3M 氯化钾和 1M 的氯化锂作为电极填充液进行对比, 结果显示无明显差别。
  • LTQ-Velos-Pro-Orbitrap-Elite在磷酸化蛋白质组学中的应用
    从上述结果可以得出,LTQ-Velos-Pro-Orbitrap-Elite检测结果可靠性高,系统稳定性高,质谱质量轴稳定性高,在短时间内可以鉴定到大量高可信的磷酸化修饰肽段以及磷酸化位点,可以很好的应用于磷酸化蛋白质组学研究,同时本次实验还说明对样本使用TiO2进行多次重复富集可以显著提高样本中磷酸化肽段的比例,提高磷酸化肽段与位点的鉴定数目。

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