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佐匹克隆异构体标准品

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佐匹克隆异构体标准品相关的论坛

  • 佐匹克隆高效液相色谱峰峰形差怎么办

    [color=#444444]要求摸出佐匹克隆HPLC色谱条件,C18柱,乙腈和水相(磷酸盐缓冲液)=40:60,PH=3.5时峰形很差 ,理论塔板数很低,峰拖尾很严重,由于该药可能是手性药物,峰形的裂分会不会是对映异构体的拆分?怎样解决?[/color]

  • 【讨论】克隆动物吃还是不吃 克隆食品安全性如何?

    自从1996年世界上第一只体细胞克隆羊“多利”在英国诞生以来,克隆技术似乎变得越来越普及,各国很多科学家都掌握了这种技术,更有许多科学家雄心勃勃,朝着克隆动物产品产业化的目标进发。  在中国,已经有数家科研机构有能力克隆动物,并让不少的克隆动物存活下来。中国科学院动物所首席研究员陈大元、2007年12月刚当选为中国工程院院士的中国农业大学李宁教授等,都已经成功培养出克隆牛,中国工程院院士、上海医学遗传研究所所长曾溢滔也在克隆牛和羊的工作上稳步前进。  药物也好,牛排也好,克隆技术最终的目标,都是制造产品送进人的身体里,所以,“克隆离餐桌有多远”这个问题,永远吸引人们的关心。美国FDA认可了部分克隆动物食品的安全性以后,中国大众也开始讨论克隆食品能不能吃的问题。  关于克隆食品的安全性,中国农业大学李宁教授介绍说,目前国内还没有相关的标准出台,有关部门领导碰面时会提及标准问题,但距离正式的探讨还有距离。“中国与美国的情况不同,美国的产业部门会向FDA提出制定克隆动物食品标准的要求。”李宁教授说,产业部门的呼吁已有五六年之久,FDA关于安全性的标准和认可姗姗来迟。为此,产业部门极为不满。他在国外参加学术会议时,常常听到国外专家的抱怨。但在国内,动物产品生产的各个环节分属不同部门管理,很难有部门主动“应战”。  但李宁教授认为,目前中国克隆动物产品距离产业化还有“漫长的道路”,原因并不在于缺乏安全性审查的标准,因为安全性标准完全可以参照国外既有的标准。他认为,真正的距离在于技术。“个别的科研团体能够克隆,是不可能实现产业化的。”  陈大元教授同样不够“乐观”。他自己带领的克隆牛研究,就还没有达到理想的“效率”。2002年陈大元的团队培养出第一批克隆牛,14头成功克隆的牛最后只存活下5头牛犊,第一头克隆牛在出生不久以后夭折。2003年在新疆成功的31头克隆牛,也只有12头存活。不久前,中科院一个研究小组培育的克隆牛,全部存活,这几乎是克隆实验中的“奇迹”,陈大元介绍说,这次“例外”的原因,科研人员正在研究当中。  尽管有“例外”发生,克隆动物存活率低的问题,仍然是目前克隆技术产业化的瓶颈,如果没有新的方法解决,对产业化的期待,也许还为时尚早。不过,陈大元认为,最近日本和美国实现了“诱导多能干细胞”技术,如果尽快把这一技术应用到克隆中,那么产业化也许可以早点到来。“只要是健康存活下来的克隆动物,作为食物就跟传统动物没有两样,是安全的,问题在于我们的技术还没有能力批量地生产克隆动物产品。”陈大元说。  “1980年初,外国哺乳动物克隆研究走得很快,中国科学界直到1990年才追上克隆技术的步伐。”陈大元说。不过,上世纪90年代以后,中国克隆技术的进步,立即进入加速度,兔、鼠、猪、牛、羊等等动物的克隆,都被中国的科学家实现。陈大元把这个时期形容为“登峰造极”。2000年以后,随着克隆技术的成熟,世界各地的科学家开始探索克隆产业化,中国的科研工作者也加入了实现产业化的努力当中。在很多国外研究者看来,中国人的智慧和勇气,常常能制造轰动性的成果,在克隆动物产品产业化的领域,中国的表现也值得期待。

  • 农业部氯氰菊酯标准品中4个同分异构体的名称

    各位版友老师好: 如题,求助关于农药标准品中同分异构体的问题。我们用气质做氯氰菊酯,一般都是4个峰,皮下倒是从来没有详细区分这四个究竟是什么同分异构体,而标准物质证书上也没有写明。但是,今天皮下上司给了一份农药名录,需要核查是否能够检测,其中就有lambda-cypermethrin,beta-cypermethrin,alpha-...... 所以特上来求助,万分感激!~

  • 【求助】差向异构体HPLC如何做标准曲线

    我检测的药物用HPLC检测的过程中出现两个峰,α异构体和β异构体,这个药物随着时间的变化α异构体和β异构体间发生转化,在做标准曲线的时候遇到了问题:怎样以两个峰面积和为纵坐标,浓度为横坐标做标准曲线呢?望高手不吝赐教,感谢!

  • 【讨论】克隆肉和克隆奶是否安全?

    近日,新型食品及其加工咨询委员会(ACNFP)在一次公开会议上,评价了由克隆牛及其后代加工成的肉乳制品的安全性,并在《新型食品法规》基础上决定是否批准克隆肉乳制品。 新型食品及其加工咨询委员会(ACNFP)指出: 克隆肉乳制品同普通的肉乳制品在成分上是一致的,因此克隆肉乳制品不可能导致食品安全风险。 有关肉乳制品在成分上的证据较为有限,进一步表明肉乳产品受动物喂养环境的影响证据是必需的。 消费者可能希望由克隆动物及其后代加工成的产品具有明确的标识。 针对以上观点,食品标准局首席科学家安德鲁。维奇(Andrew Wadge)表示,由克隆牛及其后代加工成的肉乳制品同普通的肉乳制品没有本质的区别,因此克隆肉乳产品不可能导致食品安全风险。 食品标准局委员会将在12月的会议继续讨论克隆肉乳制品的安全性,该委员会将认真考虑ACNFP的观点、欧洲委员会对克隆肉乳产品的禁令以及其它的意见,最终将其建议提供给部长。

  • 单克隆抗体药物质量控制中的HPLC分析技术

    抗体是一种结构复杂的生物大分子,由多个氨基酸组成。即便是天然的抗体,其结构也是各不相同。抗体药物中使用到的单克隆抗体(IgG)在生产工艺(细胞培养、分离纯化)与保存过程中易发生不均一性的变化,包括抗体蛋白的二聚体、多聚体、脱酰胺化、末端氨基酸突变以及糖链部分的结构差异。这些不均一性会使药物的药效、安全性方面受到影响。 而随着生产工艺及分析手段的进步,单克隆抗体类药物的质量控制将更加严格。高效液相色谱(HPLC)作为一种分离技术,在蛋白质、抗体等生物大分子的分离分析方面已得到越来越广泛的应用。 高效液相色谱法(HPLC)可对抗体药物以及重组蛋白药物中的不均一性进行有效地分析。比如,尺寸排阻色谱法(SEC)利用了分子空间结构的不同,可对抗体多聚体、片段、PEG化蛋白等样品进行有效分析。离子交换色谱(IEC)、疏水色谱(HIC)、反相(RPC)以及亲水色谱法(NPC/HILIC)可对抗体中的带电异构体、结构异构体,或者由于糖基化、脱酰胺化和氧化等作用引起的杂质进行高分辨率分析。 近年来,科学家们一直致力于在生物药分离领域开发具有革新性的色谱分离介质,基于尺寸排阻、离子交换色谱等多种HPLC分离技术实现了对抗体多聚体、各种抗体异构体的高效分离,在抗体药物的质量控制方面提供了有效地监控手段。

  • 【讨论】克隆食品——安全吗??

    英国食品标准局(Food Standards Agency)日前确认,来自克隆牛的牛肉和牛奶与常规法生产的牛肉和牛奶之间并不存在本质差异,不可能产生食品安全风险。目前在美国,出售来自克隆动物的食品是合法的,但这种行为在欧洲是被禁止的。大家说说, 克隆食品——安全吗??

  • 【讨论】克隆食品,你会吃吗?

    [b]什么是克隆食品?[/b]  克隆是英文clone的音译,简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。  科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术。克隆食品,简单地说,就是指克隆动物生产的肉和奶。 美国食品和药物管理局(FDA)于2008年宣布,经过克隆的牛、猪和山羊以及它们的后代均可以安全食用,克隆牛产的奶也可安全食用。 FDA称,科学家就克隆技术安全性问题在全球各地进行了数十次相关研究,研究结果显示,从生物角度来说,以上克隆动物以及它们的后代与按传统方式繁殖的同类没有什么不同,它们的肉和人们今天食用的肉也没什么两样。 据报道,随着美国批准克隆动物的奶制品和肉制品上市销售,我国在未来也许会允许克隆食品的销售。

  • 多溴异构体怎么做?

    多溴那么多异构体!标准品也不可能都买。现在就买了些常规的,大概二十几个。做的时候先SCAN一下,在已有标准品的出峰位置看一下,然后定性定量。但是其他的怎么弄呢,而且异构体的出峰时间相差也比较大?

  • 中检所标准品同分异构体混合物吗?

    大家有没有用过中检所的抗生素标准品的?如头孢氨苄、阿莫西林等,我正在用,结果用液质联用检测出两个色谱峰,质谱结果显示,这两个峰都是同一种物质,猜测标准品不纯,是同分异构体的混合物,大家有没有类似的遭遇?

  • 单克隆抗体克隆化技术

    经过抗体测定的阳性孔,可以扩大培养,进行克隆,以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长,互相争夺营养和空间,而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早,太早细胞性状不稳定,数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞,经过一段时期培养之后,也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失,使部分细胞丧失产生抗体的能力,所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说,免疫性强的抗原克隆次数可少一些,但至少要3~5次克隆才能稳定。克隆化的方法很多,包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。一、有限稀释法1.材料① 微量培养盘,盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞(即饲养细胞)每孔2万~4万。② HT培养基2.操作方法① 取出抗体阳性孔细胞,用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色,计数。② 用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。③ 用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘,每孔0.05ml,细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。④ 5%CO2饱和湿度,37℃培养。⑤ 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况,选择只有一个集落生长的孔,弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。⑥ 克隆大量繁殖后,布满孔底的1/3~1/2时,测培养液抗体。⑦ 抗体阳性孔细胞,移到有饲养层的组织培养瓶中,并传2~4代就可以脱离饲养细胞,建成克隆株。二、软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长,而达到克隆化,具体操作如下:1.配2.5%的琼脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。2.将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合,置45℃水浴预热。3.将琼脂糖与DMEM液混合,即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液,并加75×108 脾细胞。4.每块平皿加10ml,于室温中凝固。5.DMEM中的细胞与DMEM―琼脂1:1混合,将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上,使其全部覆盖。6.放入CO2箱饱和湿度,37℃培养10天。7.用PBS配制0.6%琼脂糖,于沸水浴溶解后,置45℃,在保温情况下取一试管,迅速加入0.1ml 25%羊红血球,0.2ml豚鼠补体,2.7ml 0.6%琼脂糖。8.用3ml琼脂糖―羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育1h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围,可筛选抗羊红血球Ig。三、显微镜操作法在直径6cm培养皿中,加入1ml 1.0×108 细胞悬液放置5%CO2饱和湿度,37℃温箱中放置30min以上,倒置显微镜下,寻找那些与周围相距甚远的单个细胞,将毛细管口(一头有直角弯头毛细管,一头连接一尺长乳胶管,用口控制液体进入)水平置放于液面上,左右微动,直到看见管口,对准细胞,吸入毛细管,将管中细胞移到预先加有2.0×104~5.0×104 饲养细胞96孔板内,培养后,即可获得单个细胞形成的克隆。四、荧光激活分离法用一种荧光激活细胞分类器(Fluorescein Activafed Cell Sorter,FACS)。其基本原理是:将细胞经荧光抗体染色后,经喷嘴形成单个细胞的线形液滴,在莱塞光激发下,荧光素发射荧光,此信号由光电倍增管接收,再结合细胞形态大小产生光散射信号,经电脑处理,产生信号并与预定的信号对比,根据细胞荧光强度及细胞大小不同,将细胞分成不同级别,在电场中发生偏离,而分别收集于不同容器中。

  • 多克隆与单克隆抗体的生产及应用

    [font=宋体][font=宋体]抗体具备与特定抗原结合的独特能力,在生物学、医学及生物医学研究中发挥着举足轻重的作用。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体([/b][/url][/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b][font=Calibri]MAbs[/font][font=宋体])[/font][/b][/url][/font][font=宋体]和[/font][font=宋体][font=宋体]多克隆抗体([/font][font=Calibri]PAbs[/font][font=宋体])已成为免疫学研究、诊断及疫苗质量控制中不可或缺的工具。本文将[/font][/font][font=宋体]简单介绍[/font][font=宋体]这两种抗体生产[/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]关键步骤及其优化策略。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、多克隆抗体的生产与应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]多克隆抗体的制备涉及抗原制备、动物选择、佐剂配置[/font][font=宋体]和[/font][font=宋体]注射方案等多个环节。在抗原制备时,应确保其质量与数量,以保证免疫反应的特异性。动物种类的选择则需考虑所需抗体量[/font][font=宋体]和[/font][font=宋体]血液样本获取的难易程度等因素。注射方案应根据动物种类和佐剂特性制定,并在注射后密切监测动物的反应,确保免疫过程的顺利进行。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]多克隆抗体因其制备周期短、成本相对较低,广泛应用于[/font][font=宋体]基础[/font][font=宋体][font=宋体]研究。然而,由于其来源于多种[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆,特异性相对较低,因此在某些需要高度特异性的应用场景中,其应用受到一定限制。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、单克隆抗体的生产与应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体则是由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的,具有高度特异性。[/font][/font][font=宋体]通过杂交瘤技术制备小鼠单克隆抗体的[/font][font=宋体][font=宋体]生产过程涉及[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的生成、与骨髓瘤细胞的融合、杂交瘤细胞的克隆与选择以及抗体的扩大生产等步骤。其中,[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的生成和通过腹水诱导法生产抗体是基于实验动物的关键[/font][/font][font=宋体]步骤[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]单克隆抗体因其高度的特异性和可重复性,广泛应用[/font][font=宋体]于[/font][font=宋体]基础研究、诊断[/font][font=宋体]检测[/font][font=宋体]和医疗领域。例如,在疾病诊断中,单克隆抗体可以精确地识别并定位病原体,为疾病的早期发现和治疗提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]为优化免疫反应,建议在抗原制备时[/font][font=宋体]确保[/font][font=宋体]其质量与纯度,注射前进行充分的质量控制。在选择动物种类时,应综合考虑抗体需求量、血液样本获取的难易程度以及抗原与动物间的系统发育关系。此外,佐剂的选择和制备也至关重要,需确保混合物的稳定性和质量,谨慎选择注射途径和注射量。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]多克隆抗体与单克隆抗体各具特色,分别适用于不同的研究场景。通过优化生产过程中的各个环节,我们可以提高抗体的质量和产量,为生物医学研究和临床应用提供更加精准、有效的工具。未来,随着技术的不断进步,这两种抗体将在更多领域展现其独特的价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]本篇文章由义翘神州进行整理,同时提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services]单克隆定制服务[/url]和[url=https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services]多克隆抗体制备服务[/url],详情可点击了解![/b]参考文献:[/font][font='Segoe UI'][color=#212121]Leenaars M, Hendriksen CF. Critical steps in the production of polyclonal and monoclonal antibodies: evaluation and recommendations.[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#212121] [/color][/font][i][font='Segoe UI'][color=#212121]ILAR J[/color][/font][/i][font='Segoe UI'][color=#212121]. 2005 46(3):269-279. doi:10.1093/ilar.46.3.269[/color][/font][font=Calibri] [/font]

  • 【讨论】您会选择克隆牛的肉和奶吗?

    英国的食品安全顾问委员会说,跟传统方法饲养的牛相比,克隆牛产出的牛肉和牛奶的成分没有不同,不太可能形成食品安全风险。  英国新食品和新工艺管理委员会说,出于对动物安全的关心,消费者可能仍旧希望来自克隆动物和它们后代的产品,能贴上明显标签。欧洲委员会最近提议,五年内禁止在欧洲把克隆动物作为食品。欧盟成员国和欧盟议会最近正就此展开辩论。不过克隆动物后代的肉类或奶制品不在禁令范围内。食品安全监督机构食品标准局今年较早时说,发现在没获当局批准的情况下,有来自克隆牛后代的牛肉进入英国的食物链和被消费者食用。伦敦大学玛丽皇后学院遗传学家柯伦说,委员会的结论与其他国家监督机构的发现一致。 您觉得安全吗?您会选择克隆牛的肉和奶吗?

  • 【转帖】克隆牛奶牛肉:吃还是不吃?

    [size=3] 英国食品标准署8月4日发布公告说,发现有两头克隆公牛的肉制品已流入市场,另有两头克隆母牛所产的牛奶是否流入市场尚不确定。这起克隆动物食品“溜”上餐桌的事件再次引发了公众对克隆动物食品的安全、管理等问题的关注和争议。克隆动物食品(以及转基因食品)能不能放心食用?21世纪的人们究竟该怎样看待克隆(转基因)动物食品?它会给我们带来什么?本期科技文摘约请专家试图就这些热门话题作出回答,敬请读者关注。 争议: “牛奶等来自健康克隆动物的食品目前看来是安全的,但必须按规定获准才能上市。”——英国食品标准署 “克隆动物食品中所含的维生素、脂肪、蛋白质、氨基酸等含量与普通动物食品无异,经克隆食品喂养长大的实验鼠也没有出现不良反应。” ——美国FDA “现有克隆技术效率低下,会对动物造成不必要的痛苦。”——英国防止虐待动物协会 “还没有令人信服的论据证实克隆动物食品的安全性。”——欧盟下属科学与新技术伦理欧洲小组 克隆的意义,表面上是用不同于两性结合繁衍后代的方式创造生命,但更重要的是要利用克隆动物获得新的生物产品,包括肉类、乳品和蛋,这些食物就可以统称为克隆动物食品 [/size]

  • wb抗体选择单克隆还是多克隆

    [font=宋体][font=Calibri]wb[/font][font=宋体]抗体选择单克隆还是多克隆抗体呢?首先要看你做的是什么物种,根据物种特异与否选择单抗或者多抗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一般小鼠、大鼠等常用模式动物可以选择鼠源单克隆抗体,其特异性较好,如果是不常见动物模型,建议选择多克隆抗体。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当然,单抗或者多抗也不是一定的,需要去查询抗原决定簇的归属,一般是找到抗体所对应的特异氨基酸序列,到数据库与你要做的物种进行比对,如果匹配度较高([/font][font=Calibri]85%[/font][font=宋体]以上),则建议购买尝试。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二抗的选择相对就简单了,根据一抗的种属特异性进行二抗选择即可。[/font][font=宋体][font=宋体]如一抗选用鼠源([/font][font=Calibri]Mouse[/font][font=宋体])抗体,则二抗选用抗小鼠抗体即可([/font][font=Calibri]e.g. Goat Anti-Mouse[/font][font=宋体]),注意二抗的反应特性(荧光、生物素或[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]偶联等)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]其次就是多查阅文献,查看和[/font] [font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]实验相关的 [/font][font=Calibri]SCI [/font][font=宋体]文献,查看要做的种属和指标关联度高的文献。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]实验应该如何选择一抗和二抗[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为[/font] [font=Calibri]IgM[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgE [/font][font=宋体]五类,它们的重链分别为 [/font][font=Calibri]mu, gamma, alpha, delta, epsilon [/font][font=宋体]链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]可分为 [/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG2[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG4 [/font][font=宋体]四个亚类。 轻链分为两种类型,[/font][font=Calibri]kappa[/font][font=宋体]链和[/font][font=Calibri]lambda[/font][font=宋体]链,但每种抗体中只存在一种类型的轻链。 [/font][/font][font=宋体][font=宋体]二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如[/font] [font=Calibri]western blot[/font][font=宋体](通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体](以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]如何选择二抗[/font][font=宋体]——根据一抗种属及类型选择合适的二抗[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]广义上是指专门和进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,上海信帆生物科技有限公司为您的科研工作提供适合和全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也会有不同的检测方案,因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求,一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑:【一抗的种属来源】[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠 [/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体],那么相应的二抗就应当是抗小鼠 [/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]。如果单克隆一抗是小鼠 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]的某一亚类([/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG2a[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG2b[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]IgG3[/font][font=宋体]),那么几乎所有的抗小鼠 [/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]都可以与之结合,或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠 [/font][font=Calibri]IgG1[/font][font=宋体],那么你可以选择抗[/font][font=Calibri]IgG1 [/font][font=宋体]的二抗,此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]亚类的情况下,可以选用抗相应物种 [/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里,如双标实验里,如果其中一个一抗是山羊来源的,一个是小鼠来源的,则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗,这时候,二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。有相应的驴来源的二抗,非常适合做类似双标的免疫实验。【二抗的耦联标记】[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]和碱性磷酸酶 [/font][font=Calibri]AP [/font][font=宋体]或其衍生物,[/font][font=Calibri]PAP[/font][font=宋体]),荧光基团([/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]、 [/font][font=Calibri]Rhodamine[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Texas Red[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Rhodamine[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Dylight [/font][font=宋体]等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于 [/font][font=Calibri]Western Blot [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体],常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用 [/font][font=Calibri]Biotin/Avidin[/font][font=宋体]检测系统。在一些荧光检测方案中,则需要选择不同的荧光标记;而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供单抗和多抗制备服务,同时有[/font][font=Calibri]Western Blot[/font][font=宋体]检测服务,详情可以关注[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services][b]多克隆抗体制备服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service][b]Western Blot[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service][b]检测服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 单克隆抗体的制备过程及原理是什么?

    [font='calibri'][size=13px]单克隆抗体的制备过程及原理是什么?[/size][/font][font='宋体'][size=13px]义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]针对定制单克隆抗体,义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作,完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台, 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等,来选择最合适的技术平台。 此外,义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术,确保最终鉴定到最佳的抗体,以满足研究、诊断和治疗领域等应用。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体的制备原理:[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体(MAb)是针专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体的制备过程:[/size][/font][font='宋体'][size=13px]1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。[/size][/font][font='宋体'][size=13px][url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url]推荐:https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/size][/font]

  • 制备单克隆抗体的基本流程及原理

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体[/b][/url]([/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体])源于单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆,具有高度的均一性和特异性,仅针对某一特定抗原表位。在生物医学研究、疾病诊断以及某些疾病治疗(如传染病和癌症)中单克隆抗体发挥着至关重要的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前,制备单克隆抗体的主流技术包括[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体抗体库技术[/b][/url]和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]单个[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]细胞技术[/b][/url]。杂交瘤技术通过融合免疫小鼠的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞,筛选出能够特异性分泌抗体的杂交瘤细胞,进而生产并纯化得到单克隆抗体。噬菌体抗体库技术则利用基因工程技术,将抗体基因与噬菌体基因相连接,使抗体以融合蛋白的形式呈现在噬菌体表面,通过与靶蛋白的结合,筛选出具有特定亲和力的噬菌体展示抗体。而单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术则基于每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞仅含有一对功能性的重链和轻链,每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞仅产生一种特异性抗体的特性,直接从单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增抗体基因,从而获得单克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]制备单克隆抗体的基本流程:[/font][/b][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体])抗原制备[/font][/font][font=宋体][font=宋体]一般来说,抗原可以是蛋白(天然蛋白或重组蛋白)、多肽、小分子等。依据需求选择和制备合适的免疫原对于抗体开发至关重要。义翘神州在蛋白抗原、多肽抗原制备积累了丰富的经验,可提供专业的抗原制备服务。另外,义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白产品,可作为抗原用于动物免疫和抗体筛选,欢迎订购。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])动物免疫[/font][/font][font=宋体][font=宋体]通常选用[/font][font=Calibri]Balb/c[/font][font=宋体]小鼠作为免疫动物,根据抗原的特性制定免疫方案,包括免疫抗原纯度、抗原量、免疫方法和途径等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫方法一般有常规免疫法、脾内一次性免疫法、短程免疫法和体外免疫法等,免疫途径主要有皮下注射、腹腔注射和静脉注射。脾内一次性免疫法具有用量少、免疫程序短、不加佐剂且所得单克隆抗体的特异性较高等特点。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]常规免疫周期如下:第一次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]弗氏完全佐剂,皮下注射)、第二次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]弗氏不完全佐剂,皮下注射)、第三次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]不加佐剂,皮下或静脉注射)、第四次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]不加佐剂,静脉注射)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])细胞融合[/font][/font][font=宋体]细胞融合前准备:[/font][font=宋体][font=宋体]脾淋巴细胞制备:取已经免疫的[/font][font=Calibri]Balb/c[/font][font=宋体]小鼠的脾脏,制备淋巴细胞,通常每只小鼠可得[/font][font=Calibri]1x10^8-2.5x10^8[/font][font=宋体]个脾细胞;同时摘除眼球采血,并分离血清作为抗体检测时的阳性对照血清。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]骨髓瘤细胞制备:骨髓瘤细胞应该和免疫动物属于同一品系,便于细胞融合以及产生大量[/font][font=Calibri]Ab[/font][font=宋体]。融合前骨髓瘤细胞维持的方式,对成功得到杂交瘤非常重要。目的是使骨髓瘤细胞处于对数生长的时间尽可能长,融合前不能少于[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周;冻存的细胞在复苏后要生长[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]周才能处于适合于融合的状态。[/font][/font][font=宋体]饲养细胞:常用的饲养细胞有胸腺细胞、正常脾细胞和腹腔巨噬细胞。饲养细胞促进杂交瘤细胞增殖的机制可能是释放非种属特异性的生长刺激因子,为杂交瘤细胞提供必要的生长条件;也可能是满足新生杂交瘤细胞对细胞密度的依赖性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞融合:细胞融合方法有病毒介导的细胞融合、聚乙二醇([/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体])介导细胞融合、电融合。[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]融合相邻骨髓瘤和[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]或抗体分泌细胞的质膜,形成具有两个或更多核的单细胞。异核体保留这些核,直到核膜在有丝分裂前溶解。电融合通过施加脉冲电场连接相邻细胞的膜。电融合比[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]更加有效,结果具有重现性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体])杂交瘤筛选以及单克隆鉴定[/font][/font][font=宋体][font=宋体]骨髓瘤细胞和脾细胞融合之后,由于细胞融合是随机的,因此要利用[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]培养基筛选杂交瘤细胞。骨髓瘤细胞缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶([/font][font=Calibri]HGPRT[/font][font=宋体]),对氨蝶呤钠敏感,在[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]选择培养液中不能生长;免疫脾细胞虽然有[/font][font=Calibri]HGPRT[/font][font=宋体],但不能在体外无限繁殖。因此只有融合的杂交瘤细胞,才能在[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]选择培养液中无限繁殖。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]得到融合的杂交瘤细胞后,需要进一步筛选特异性抗体。将融合的细胞进行充分有限稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]至数个细胞之间([/font][font=Calibri]30%[/font][font=宋体]的孔为[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]才能保证每个孔中是单个细胞),培养后取上清液用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]法选出抗体高分泌性的细胞,这一过程常被称作克隆化。将这些阳性细胞再进行克隆化,应用特异性抗原包被的[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后进行冻存、体外培养或动物腹水培养。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体])单克隆抗体大量制备[/font][/font][font=宋体]利用杂交瘤细胞大规模制备单克隆抗体主要有两种方式:体外培养法和腹水制备法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]体外培养可以采用单层细胞培养的形式,也可以采用悬浮培养的形式。单层细胞培养法是各个实验室最常用的,是将杂交瘤细胞加入培养瓶中,用完全培养基培养,细胞浓度以[/font][font=Calibri]1.0X10^6~2.0X10^6[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]/mL[/font][font=宋体]为宜,然后收集培养上清液。如果想在体外高效率地大量制备单克隆抗体,就必须高密度培养杂交瘤细胞,充分利用培养基的立体空间。单位体积内细胞数量越多,产生的单克隆抗体就越多,浓度就越高,产量就越大。义翘神州提供杂交瘤体外培养抗体生产服务,成功率[/font][font=Calibri]99%[/font][font=宋体],可采用低血清或无血清培养基进行高密度悬浮培养,生产规模从毫克级到克级不等,满足客户的不同需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]腹水制备法是通过将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,并产生腹水,可得到大量的腹水单抗。这种方式能够在相对短的时间内获得大量高浓度的抗体,而且成本低、操作相对简单以及不需要复杂的培养条件。然而,这种方法也有一些限制,比如腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体技术:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]杂交瘤技术:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 【求助】氰戊菊酯RR+SS 异构体 RS+SR异构体

    欧盟限量基准中规定了氰戊菊酯:RR+SS 异构体 RS+SR异构体的限量。两个异构体在不同的物体中限量是不一样的,请问一下,我现在没有他们单独的标准品,怎么通过峰来判断,在保留时间上氰戊菊酯有两个峰,这四种同分异构体是怎么出峰的,出峰顺序是怎么样的。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用仪[/color][/url],DB-5柱,非常感谢!

  • 【求助】请教一个关于分析同分异构体的问题?

    我在分析一种天然提取的同分异构体,我是采用把它们都归一成一个峰,通过改变分析条件,还是把几个异构体分开,来测,都是用异构体的混合物的标准品作标样,没有每一个异构体的标准品。也就是说即使分开了,计算时也还是把几个面积加在一起计算。我想问这两种方法,哪一个可行?如果都可行的话,哪一个最准确。有一个老师给我说,不能将它们分开,分开后,校正系数无法计算,因为分子量相同,只是结构不同,最后无法计算含量。对此我不是很理解,如果标样和试样都能分开的话,计算不是也没有问题吗?咨询一下大家的意见?

  • 单克隆抗体技术的理论基础与基本应用

    [font=宋体][b]单克隆抗体技术的基本原理[/b][/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体([/font][font=Calibri]monoclonal antibody, mAb[/font][font=宋体])是由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。单克隆抗体在生物医学研究、疾病诊断和某些疾病治疗(如传染病和癌症)中是十分重要的工具。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当前常见的[b][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology]单克隆抗体制备技术[/url][/b]主要有杂交瘤、噬菌体抗体库和单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术。其中,杂交瘤技术是将免疫小鼠的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选具有特异性抗体分泌功能的杂交瘤细胞,进而生产纯化获得单克隆抗体。噬菌体抗体库技术是利用基因工程技术将抗体的基因连接到噬菌体中,并以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面,通过与靶蛋白的结合,完成噬菌体展示抗体的筛选。单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术是根据每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞只含有一对功能性的重链和轻链,每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞只产生一种特异性抗体的特性,可以直接从单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增抗体基因获得单克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]义翘神州拥有四大单克隆抗体开发平台,为客户提供多样化的抗体制备服务套餐,覆盖从抗原设计与制备、动物免疫到获得纯化抗体的完整流程,满足您的研究需求。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]一、杂交瘤技术制备单克隆抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]杂交瘤技术是经典的单克隆抗体制备技术,具体流程为:[/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]抗原制备;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])动物免疫;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体])筛选杂交瘤细胞获得分泌目标抗体的阳性单克隆杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体])扩大培养阳性单克隆杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体])单克隆抗体大量制备。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了杂交瘤开发技术平台,已成功开发了[/font][font=Calibri]19000[/font][font=宋体]株以上杂交瘤阳性克隆,可以根据客户的最终应用需求,制定个性化的抗原设计、动物免疫、克隆筛选及抗体鉴定方案,生产高质量的单克隆抗体,满足客户的不同需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、噬菌体抗体库技术制备单克隆抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]噬菌体抗体库技术也是一种制备单克隆抗体的方法。通常首先是从外周血或脾、淋巴结等组织中分离[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞,提取[/font][font=Calibri]mRNA[/font][font=宋体]并反转录为[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体],以扩增所有的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]片段。然后构建[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]等形式的抗体组合文库,使外源抗体基因表达的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体外壳蛋白[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]pVIII[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端。 最后,经过“吸附[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]洗涤[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]扩增”过程筛选并富集特异性抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]噬菌体抗体库开发平台包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤,义翘神州能为客户提供个性化的抗体定制服务,包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属的抗体发现服务。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]三、单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术制备单克隆抗体[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术是独立于杂交瘤技术和噬菌体展示技术的、新一代的单克隆抗体开发技术。其技术流程是从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞,通过单细胞[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]技术从单个抗体分泌[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]重链和轻链可变区基因,然后在哺乳动物细胞内表达获得具有生物活性的单克隆抗体。该技术保留了轻重链可变区天然配对,具有基因多样性好、效率高和所需细胞数量少的优点。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞两大技术平台,可提供一站式的单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体制备服务,包括从免疫原制备到单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分选、鉴定、及抗体生产等步骤。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]文章来源:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology[/font][/font]

  • 单克隆抗体的优势、局限性及其应用领域

    [font=宋体][font=宋体]单克隆抗体是由单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、特异性针对某一抗原表位的抗体。通过使用杂交瘤技术,科学家们将具有分泌特异性抗体能力的致敏[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合,形成了独特的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞杂交瘤。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1975[/font][font=宋体]年分子生物学家[/font][font=Calibri]G.J.F.[/font][font=宋体]克勒和[/font][font=Calibri]C.[/font][font=宋体]米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体[/b][/url][b]的优势和局限性[/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体].单克隆抗体的优点[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](1)[/font][font=宋体]杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](2)[/font][font=宋体]可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](3)[/font][font=宋体]由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如[/font][font=Calibri]IRMA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](4)[/font][font=宋体]由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体].单克隆抗体的局限性[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](1)[/font][font=宋体]单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](2)[/font][font=宋体]单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](3)[/font][font=宋体]制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高 。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体的应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]如今,单克隆抗体广泛应用于癌症治疗、医疗诊断和基础研究等方面。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①癌症治疗应用[/font][font=宋体][font=宋体]用于癌症治疗的单克隆抗体旨在结合癌症细胞表面的抗原,相比于健康细胞,这种抗原通常在癌细胞过表达。通过[/font][font=宋体]“瞄准”这些抗原,抗体可以锁定癌细胞,并在免疫系统中充当其他免疫战士的“战斗号令”。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]美国食品和药物管理局([/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体])已经批准了[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]多种单克隆抗体用于治疗不同类型的癌症,包括乳腺癌、头颈癌、肺癌、肝癌、膀胱癌、黑色素瘤以及霍奇金淋巴瘤等。有报道称,单克隆抗体首次用于晚期黑色素瘤,将部分患者的生存延长了[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]年之久。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②医疗诊断应用[/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体的出现,已经变革了多种疾病的实验室诊断。它们可作为生物化学分析的诊断试剂,也可作为疾病诊断影像的工具。基于单抗试剂的诊断检测一般可用于实验室中的放射免疫测定([/font][font=Calibri]RIA[/font][font=宋体])和酶联免疫吸附测定([/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体])。[/font][/font][font=宋体]单克隆抗体已用于例如妊娠、激素紊乱、传染病和癌症等疾病的早期诊断。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③基础研究应用[/font][font=宋体][font=宋体]在基础研究中,研究人员可以使用单克隆抗体通过蛋白质印迹、流式细胞术、免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])、酶联免疫吸附测定([/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体])等多种方法来识别目标分子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-development][b]单克隆抗体开发[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/mab-development[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 关于环氧七氯异构体的疑问

    环氧七氯包含两种同分异构体,分别为内环氧七氯(trans-, isomer A,28044-83-9)和外环氧七氯(cis-, isomer B,1024-57-3)而国标“GBT 5009.19-2008 食品中有机氯农药多组分残留量的测定”中只提及环氧七氯,请问各位专家我在选择标准品时应该选择同分异构体混合物还是其中一种?

  • 单克隆抗体的应用你知道多少?

    [font=宋体][font=宋体]单克隆抗体是由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤([/font][font=Calibri]hybridoma[/font][font=宋体])抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞杂交瘤。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1975[/font][font=宋体]年分子生物学家[/font][font=Calibri]G.J.F.[/font][font=宋体]克勒和[/font][font=Calibri]C.[/font][font=宋体]米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体的优势和局限性[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体].单克隆抗体的优点[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](1)[/font][font=宋体]杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](2)[/font][font=宋体]可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](3)[/font][font=宋体]由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如[/font][font=Calibri]IRMA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](4)[/font][font=宋体]由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体].单克隆抗体的局限性[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](1)[/font][font=宋体]单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](2)[/font][font=宋体]单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri](3)[/font][font=宋体]制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高 。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体的应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体].检验医学诊断试剂[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]作为检验医学实验室的诊断试剂,单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点,广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用,很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体].蛋白质的提纯[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体是亲和层析中重要的配体。将单克隆抗体吸附在一个惰性的固相基质(如[/font][font=Calibri]Speharose 2B[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]4B[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]6B[/font][font=宋体]等)上,并制备成层析柱。当样品流经层析柱时,待分离的抗原可与固相的单克隆抗体发生特异性结合,其余成分不能与之结合。将层析柱充分洗脱后,改变洗脱液的离子强度或[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体],欲分离的抗原与抗体解离,收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]. 肿瘤的导向治疗和放射免疫显像技术[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]将针对某一肿瘤抗原的单克隆抗体与化疗药物或放疗物质连接,利用单克隆抗体的导向作用,将药物或放疗物质携带至靶器官,直接杀伤靶细胞,称为肿瘤导向治疗。另外,将放射性标记物与单克隆抗体连接,注入患者体内可进行放射免疫显像,协助肿瘤的诊断。单克隆抗体主要为鼠源性抗体,异种动物血清可引起人体过敏反应。因此,制备人[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]人单克隆抗体或人源化抗体更为重要,但此方面仍未取得明显进展。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url],有需求可查看详情[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology][b]单克隆抗体技术[/b][/url]详情:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology[/font][/font]

  • 单克隆抗体技术:基本原理与流程

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology][b]单克隆抗体技术[/b][/url]的基本原理是利用单一的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆培养出具有高度一致性的抗体组织。通过将能产生特定抗体的单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞与骨髓肿瘤细胞进行融合,生成一种既能产生所需抗体,又能无限增殖的杂交瘤细胞。这种技术所得到的抗体仅来自一种类型的细胞,这与多克隆抗体或由多种类型细胞产生的多株抗体形成了鲜明对比。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]当前常见的单克隆抗体制备技术主要有杂交瘤、噬菌体抗体库和单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术。其中,杂交瘤技术是将免疫小鼠的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选具有特异性抗体分泌功能的杂交瘤细胞,进而生产纯化获得单克隆抗体。噬菌体抗体库技术是利用基因工程技术将抗体的基因连接到噬菌体中,并以融合蛋白的形式展示在噬菌体的表面,通过与靶蛋白的结合,完成噬菌体展示抗体的筛选。单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术是根据每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞只含有一对功能性的重链和轻链,每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞只产生一种特异性抗体的特性,可以直接从单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增抗体基因获得单克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单克隆抗体技术流程[/b][/font][font=宋体]①杂交瘤技术制备单克隆抗体[/font][font=宋体]杂交瘤技术是经典的单克隆抗体制备技术,具体流程为:[/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]抗原制备;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])动物免疫;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体])筛选杂交瘤细胞获得分泌目标抗体的阳性单克隆杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体])扩大培养阳性单克隆杂交瘤细胞;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体])单克隆抗体大量制备。(点击了解杂交瘤技术的操作步骤)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州建立了杂交瘤开发技术平台,已成功开发了[/font][font=Calibri]19000[/font][font=宋体]株以上杂交瘤阳性克隆,可以根据客户的最终应用需求,制定个性化的抗原设计、动物免疫、克隆筛选及抗体鉴定方案,生产高质量的单克隆抗体,满足客户的不同需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②噬菌体抗体库技术制备单克隆抗体[/b][/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体抗体库技术[/b][/url]也是一种制备单克隆抗体的方法。通常首先是从外周血或脾、淋巴结等组织中分离[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞,提取[/font][font=Calibri]mRNA[/font][font=宋体]并反转录为[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体],以扩增所有的[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]片段。然后构建[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]等形式的抗体组合文库,使外源抗体基因表达的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体外壳蛋白[/font][font=Calibri]pIII[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]pVIII[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端。 最后,经过“吸附[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]洗涤[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]扩增”过程筛选并富集特异性抗体。(点击了解噬菌体抗体库技术的操作步骤)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]噬菌体抗体库开发平台包括噬菌体展示抗体库构建、淘洗、单克隆鉴定和阳性克隆重组表达等步骤,义翘神州能为客户提供个性化的抗体定制服务,包括鼠源单克隆抗体、兔源单克隆抗体、鸡源单克隆抗体和全人源抗体等多个种属的抗体发现服务。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]③单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术制备单克隆抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术是独立于杂交瘤技术和噬菌体展示技术的、新一代的单克隆抗体开发技术。其技术流程是从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞,通过单细胞[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]技术从单个抗体分泌[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]重链和轻链可变区基因,然后在哺乳动物细胞内表达获得具有生物活性的单克隆抗体。该技术保留了轻重链可变区天然配对,具有基因多样性好、效率高和所需细胞数量少的优点。(点击了解单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术的操作步骤)[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞和[/font][font=Calibri]Beacon[/font][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞两大技术平台,可提供一站式的单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体制备服务,包括从免疫原制备到单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分选、鉴定、及抗体生产等步骤。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 单克隆抗体与多抗定义、制备、应用上有何区别?

    [font=宋体]本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗与多抗的定义:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体(单抗)。而由多个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体(多抗)。从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗和多抗制备上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]经过特定抗原处理过的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]培养基筛选、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为[/font][font=Calibri]balb/c[/font][font=宋体]小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过[/font][font=Calibri]3~4[/font][font=宋体]次免疫,[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此多抗制备周期比单抗的短,多抗首次制备价格也比单抗要低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗多抗应用上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的单克隆抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]中有杂带,在[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应[/font][font=Calibri]*[/font][font=宋体]的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多([/font][font=Calibri]WB/IP/IF/ICC[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测,可以选择制备多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。目前提供单克隆抗体定制服务和多克隆抗体定制服务。想了解更多关于单抗和多抗区别详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=宋体]多克隆抗体定制服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体制备:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

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