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胰蛋白酶抑制剂试剂级

仪器信息网胰蛋白酶抑制剂试剂级专题为您提供2024年最新胰蛋白酶抑制剂试剂级价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括胰蛋白酶抑制剂试剂级参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的胰蛋白酶抑制剂试剂级您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合胰蛋白酶抑制剂试剂级相关的耗材配件、试剂标物,还有胰蛋白酶抑制剂试剂级相关的最新资讯、资料,以及胰蛋白酶抑制剂试剂级相关的解决方案。

胰蛋白酶抑制剂试剂级相关的论坛

  • 【求助】(已应助)想找提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的文献

    想找提取胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的文献,先谢谢各位了!1、猪胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的分离和纯化,中国生化药物杂志,1988年 03期:1-5 2、胰岛素-胰酶联产工艺研究初报,生化药物杂志,1986年 04期:56-573、猪胰脏蛋白酶的生产,生化药物杂志,1984年 04期:1-44、亲和层析和离子交换组合技术分离胰脏中的蛋白酶及其抑制剂,生化药物杂志,1989年,1期:26-29。

  • 胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)

    名称:胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)关键词:胰蛋白酶原目的:用于急性胰腺炎检查。**科胰蛋白酶原 标准操作规程(SOP)实验室名称 项 目 编 号 制定日期急 诊 室 胰蛋白酶原 JZ022 20040620手工法。标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出,并根据下述人员批准签字:专业主管,科主任。采用免疫层析法,包括两种人胰蛋白酶原-2抗体。一种结合在蓝色的乳胶粒子上,另一种被固定在膜上,捕捉与抗原抗体复分 物并与之结合,显示阳性结果。由上海基因生物技术公司技术公司提供。 新鲜尿液。1、让贮存罐与尿液达到室温。从贮存罐中取出所需数目的试纸条,紧闭贮存罐。不要接触浸渍区,在试纸条上做好标记;2、将浸渍区浸入尿液,保持到液体进入反应区,液面不要超过黄色区域,从标本溶液中取出试纸条,水平放置。五分钟后读结果,若反应区出现:两条蓝线 一条为阴性;无蓝线时为检测失效。正常人应为阴性。1、正常人为阴性。2、急性胰腺炎时尿液中的胰蛋白酶原-2抗原明显升高,可早期诊断。1、不要让试纸条留在标本中,吸收的量过大或过小检测将不准确。2、不要超过黄色浸渍区。试纸条上面部分不能弄湿。3、不要使用已变湿的试纸条。4、如果使用前反应区有蓝色,请不要使用。5、如果没有出现质控线表示结果无效。 操作人员 部门主管 质量负责人姓 名日 期

  • 求教怎样稳定的将胰蛋白酶固定在毛细管内壁上?

    各位大侠,我现在在做将胰蛋白酶固定在毛细管内壁形成一个酶解微反应器,先是用NaOH将毛细管内壁活化,带上负电荷,然后让带正电荷的胰蛋白酶溶液(将酶配在Tris-HCl,同时含有20mM CaCl2 ,pH 8.0,低于酶的等电点)进入毛细管,通过静电吸引固定上酶,发现在做电泳时候酶的活性损失厉害,估计是酶慢慢的都掉下来了,于是我又在上述步骤后再加上进一定浓度的海藻酸钠,想形成海藻酸钙凝胶加固酶在毛细管内壁上的稳定性,但是发现酶的起始活性比不用海藻酸钠时候还要低很多,请问哪位大侠能帮忙给我建议一个好的方法,将酶稳定的固定在毛细管内壁上且活性能够损失比较少。谢谢了!

  • 请教胰蛋白酶里的常规阴阳离子怎么前处理啊

    请教各位老师,胰蛋白酶里的常规阴阳离子怎么前处理啊?因为我之前做的都是无机物,所以没有经验。我知道有机物有氧弹燃烧能做,但是实验室没有该设备,有老师做过相关的实验吗?

  • 我国“替尼类”(酪氨酸激酶抑制剂)抗肿瘤药的市场现状

    我国“替尼类”(酪氨酸激酶抑制剂)抗肿瘤药的市场现状2012年1月FDA批准辉瑞公司小分子酪氨酸激酶抑制剂阿西替尼上市,开始了又一轮抗肿瘤靶向药物研究的新高潮。酪氨酸激酶在肿瘤的发生、发展过程中起着非常重要的作用,以酪氨酸激酶为靶点进行药物研发已成为国际上抗肿瘤药物研究的热点。酪氨酸酶抑制剂在临床上通过抑制肿瘤细胞的损伤修复、使细胞分裂阻滞在G1期、诱导和维持细胞凋亡、抗新生血管形成等多途径实现抗肿瘤效果;其抗癌谱广,已经成为治疗各种癌症疾病的一线用药。伊马替尼是基于癌细胞分子作用机理而开发的第一个抗癌新药,开创了肿瘤分子靶向治疗的时代。目前我国已有8个酪氨酸激酶抑制剂上市,包括伊马替尼、厄洛替尼、舒尼替尼等,此类药物的市场情况如下表,其中只有埃克替尼一个为国产产品,其它均为进口产品。表1:酪氨酸激酶抑制剂靶向抗肿瘤药在中国上市情况通用名 商品名 中国上市年份 在中国上市的首家公司 伊马替尼 格列卫 2002 诺华 吉非替尼 易瑞莎 2004 阿斯利康 厄洛替尼 特罗凯 2006 罗氏 索拉非尼 多吉美 2006 拜耳 舒尼替尼 索坦 2007 辉瑞 尼洛替尼 达希纳 2009 诺华 达沙替尼 施达赛 2011 百时美施贵宝 埃克替尼 凯美纳 2011 浙江贝达药业有限公司 靶向治疗,是在细胞分子水平上,针对已经明确的致癌位点(该位点可以是肿瘤细胞内部的一个蛋白分子,也可以是一个基因片段),来设计相应的治疗药物,药物进入体内会特异地选择致癌位点来相结合发生作用,使肿瘤细胞特异性死亡,而不会波及肿瘤周围的正常组织细胞。由于靶向制剂可以提高药效、降低毒性,从而增强了药品的安全性、有效性和病人用药的顺应性,所以日益受到国内外医药界的广泛重视。从2011年各大公司年报数据了解到,诺华的伊马替尼销售额最大,超过46亿美元,罗氏的厄洛替尼和辉瑞的舒尼替尼销售额都超过10亿美元。表2:2011年各大药企的酪氨酸激酶抑制剂产品全球销售额通用名 企业 2011年销售额 伊马替尼 诺华 46.59亿美元 厄洛替尼 罗氏 12.51亿瑞士法郎 舒尼替尼 辉瑞 11.87亿美元 索拉非尼 拜耳 7.25亿欧元 达沙替尼 达沙替尼 8.03亿美元 尼洛替尼 诺华 7.16亿美元 吉非替尼 阿斯利康 5.54亿美元 拉帕替尼 葛兰素史克 2.31亿英镑

  • 一些蛋白质的分子量与Stokes半径

    一些蛋白质的分子量与Stokes半径:蛋白质 分子量(kD)Stokes半径(nm)乳清蛋白 12.4 2.01核糖核酸酶 13.7 1.92肌红蛋白 17.0 2.00大豆胰蛋白酶抑制剂 21.5 2.26碳酸酐酶 31.0 2.35辣根过氧化物歧化酶 40 3.00卵清蛋白 45 2.80血红蛋白(人)64.5 3.08牛血清白蛋白 70 3.65酵母醇脱氢酶 150 4.55血浆铜蓝蛋白 151 4.73谷氨酸脱氢酶 258 6.00甲状腺球蛋白 670 8.25芜菁花叶病毒 3500 ~12.0

  • 蛋白酶的相关知识

    科技名词定义中文名称:蛋白酶英文名称:protease;proteinase其他名称:蛋白水解酶(proteolytic enzyme)定义:催化蛋白质中肽键水解的酶。根据酶的活性中心起催化作用的基团属性,可分为:丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巯基蛋白酶(编号:EC 3.4.22.-).、金属蛋白酶(编号:EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.23.-)等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);酶(二级学科)

  • 了解四季豆等豆类物质

    四季豆、毛豆、豆角等豆类一定要先彻底煮熟、煮透,不可直接生吃,也不能简单焯水食用,否则其中含有的植物凝集素、胰蛋白酶抑制剂等物质容易引起食物中毒。

  • 关于牛奶中抑制剂的问题

    最近听说国外有一种新型的抑制剂,只要添加了无论牛奶中加入多少氯霉素,用什么试剂盒都检测不出来,深受牛奶商家的欢迎,诸位对于这个有没有了解啊。

  • 蛋白酶相关知识

    中文名称:蛋白酶英文名称:protease;proteinase其他名称:蛋白水解酶(proteolytic enzyme)定义:催化蛋白质中肽键水解的酶。根据酶的活性中心起催化作用的基团属性,可分为:丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巯基蛋白酶(编号:EC 3.4.22.-).、金属蛋白酶(编号:EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.23.-)等。蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶,主要由霉菌、细菌,其次由酵母、放线菌生产。该产品主要由上海斯诺美生物医学技术服务中心提供。

  • 乳酸菌抑制剂

    有没有针对乳酸菌的抑制剂?像脱氧剂能抑制细菌和霉菌等的生长,乳酸菌有这样的抑制剂吗

  • 原子吸收离子抑制剂的选择

    请教高手,样品为复方硫酸盐溶液,含高浓度的钠3.5%、钾0.8%、镁0.2%,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]怎样选择抑制剂,是否浓度太大,需要稀释多少倍合适?

  • 【金秋计划】丹参酮I与哌啶骨架杂交的强效NLRP3炎性小体抑制剂

    [size=14px] [/size] [size=14px]丹参酮是中药丹参的功效物质,丹参酮I(Tanshinone I,Tan I)是丹参酮的一个亚类,具有芳香二萜醌的结构,具有抗菌和抗炎活性。然而,其过高的亲脂性,效价较弱,溶解度低、不稳定等特质,极大地限制了丹参酮I的应用。因此,建立有效的化学演化机制,开发更有效的丹参酮Ⅰ衍生物具有重要意义。哌啶是一种重要的饱和杂环支架,是美国FDA批准的药物中最常用的氮杂环,具有良好的药理特性。该团队将丹参酮Ⅰ和哌啶的骨架杂交,得到了一类新型有效的NLRP3炎症小体抑制剂。2023年2月14日,浙江大学药学院的崔孙良和王毅团队在J Med Chem(IF=7.3)上发表题为“Scaffold Hybrid of the Natural Product Tanshinone I with Piperidine for the Discovery of a Potent NLRP3 Inflammasome Inhibitor”的文章,通过骨架杂交策略得到了一系列具有NLRP3抑制活性的丹参酮Ⅰ-哌啶杂化物,相较于丹参酮Ⅰ,这些化合物在活性、选择性和类药性具有显著改善。其中化合物5j、12a和12d对IL-1β的分泌有较强的抑制作用,在脓毒症小鼠模型中也具有较好的治疗效果。机制研究表明,这些化合物可以阻断ASC的寡聚化,抑制NLRP3炎症小体的激活,且化合物5j可与NLRP3蛋白直接结合,对NLRP3蛋白具有显著亲和力。本研究发现了一种全新结构的丹参酮Ⅰ衍生物,为NLRP3炎性体抑制剂的开发提供了新的思路。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、设计合成了36种Tan Ⅰ-哌啶杂化物前期研究发现Tan Ⅰ中的醌结构是其主要药效团,不宜进行结构修饰。因此研究团队从呋喃结构入手,通过支架杂交的策略,利用哌啶合成出了5个系列 36个Tan Ⅰ的衍生物。为了提升反应活性,在引入哌啶骨架前,研究团队将Tan Ⅰ中的醌并呋喃部分活化为富电子的苯并呋喃。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、体外生物学评价Tan Ⅰ-哌啶杂化物抗炎活性前期研究发现Tan Ⅰ具有抗炎活性,而NLRP3炎症小体作为炎症反应的核心,被证明与多种炎症性疾病相关。因此,作者选用小鼠腹膜巨噬细胞(PMs)开展了一系列体外生物学评价,首先通过MTT法发现36种Tan Ⅰ-哌啶杂化物在4 μΜ浓度无明显细胞毒性,随后发现与Tan-I相比,化合物5d、5j、10c、10f、10g、12a、12d在2 μΜ浓度下更能抑制IL-1β分泌,其中化合物12d与经典的NLRP3抑制剂MCC950活性相当。综合构效关系结果发现引入氢键受体或亲水基团可提升抑制活性(5j、12a、12d),于是作者选用化合物5j、12a、12d作为进一步的研究对象。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、化合物5j、12a和12d阻断NLRP3炎症小体激活,是广谱抑制剂NLRP3炎症小体通路包含准备和激活两个阶段,准备阶段pro-IL-1β和pro-caspase-1的表达升高,而激活阶段IL-1β和caspase-1分泌增加。作者发现化合物5j、12a、12d可抑制IL-1β和caspase-1的分泌,而对pro-IL-1β和pro-caspase-1的表达没有显著影响,表明它们通过阻断激活阶段而不是准备阶段来抑制NLRP3炎症小体活化。此外,5j、12a、12d也可以抑制尿酸钠晶体(MSU)、尼日利亚菌素(Nig)刺激的NLRP3炎症小体激活,表明5j、12a和12d是针对NLRP3炎症小体激活的广谱抑制剂。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、Tan Ⅰ-哌啶杂化物5j/12a/12d可抑制ASC寡聚化,5j可直接结合NLRP3蛋白ASC寡聚化可促进caspase-1的活化,是NLRP3炎症小体活化的标志之一。作者进一步研究化合物5j、12a、12d抑制NLRP3炎症小体的作用机制,通过免疫荧光实验发现在添加化合物5j、12a、12d和阳性药MCC950时,ASC寡聚化形成的斑点显著减少,表明它们均可抑制ASC寡聚化。接着利用表面等离子体共振分析(SPR)和细胞热位移测定(CETSA)实验证明化合物5j和NLRP3存在直接互作。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、Tan Ⅰ-哌啶杂化物在脓毒症小鼠模型的体内抗炎评价接着作者对Tan Ⅰ-哌啶杂化物5j、12a、12d进行了成药性评价,发现它们相较于Tan Ⅰ有极大的改善。进一步开展体内抗炎效果评价,发现在LPS诱导的炎症性脓毒症小鼠模型中,化合物5j、12a和12d预处理可以显著降低IL-1β的释放,显著改善肺组织病理损伤,如肺泡壁增厚明显减轻,粒细胞数量和炎症浸润显著减少。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结该研究通过骨架杂交策略得到了一系列具有NLRP3抑制活性的丹参酮Ⅰ-哌啶杂化物,与原型丹参酮Ⅰ相比,这些新的结构化合物在效力、选择性和类药性方面有显著改善,其中化合物5j、12a和12d对IL-1β的分泌具有高抑制活性。机制研究表明,这些化合物可以阻断ASC的寡聚化,抑制NLRP3炎症小体的激活,同时SPR和CETSA显示化合物5j可与NLRP3蛋白直接结合。体内研究表明它们对脓毒症小鼠模型具有较好的治疗效果,研究开发出了一种丹参酮I的简单结构修饰策略并提供了一类新的有效的NLRP3炎症小体抑制剂。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size]

  • 八大信号转导通路图示及相关靶点经典抑制剂

    信号转导通路仍然是肿瘤研究、心脑血管疾病研究和免疫系统疾病研究的主要方向之一。该文章描绘了八个经常研究到的信号转导通路,并标出相关靶点的经典抑制剂,以便研究人员能更容易地判断自己所需的抑制剂。导读: 第一页 细胞凋亡信号转导通路第二页 DNA损伤信号转导通路第三页 JAK-STAT信号转导通路第四页 MAPK信号转导通路第五页 PI3K信号转导通路第六页 受体酪氨酸激酶信号转导通路第七页 TGF-beta/SMAD信号转导通路第八页 其他信号转导通路和因子对Wnt通路的影响

  • 蛋白胨和胰蛋白胨

    本文引用自cheney《蛋白胨和胰蛋白胨简介》蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大。不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽,因此存在着各种蛋白胨,一般来说,用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白(酪蛋白、肉类)和植物蛋白(豆类)等两种。能为微生物提供C源、N源、生长因子等营养物质。因此,蛋白胨从来源上可分为动物性蛋白胨和植物性蛋白胨。胰胨、肉胨、骨胨等都是动物性蛋白胨,而大豆蛋白胨等则是植物性蛋白胨。动物性来源的蛋白胨还有:蚕蛹蛋白胨、血液蛋白胨等。   不同来源的蛋白质和不同的水解条件,其水解物中组成可千差万别。所以胨往往是一个复杂的多肽混合物。可溶于水,过热不凝固,在饱和硫酸铵中不发生沉淀但可为蛋白质沉淀剂所沉淀。可用作微生物和动物细胞培养基、特种功能性食品和化妆品的配料,也有用作啤酒等产品的稳定剂。胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone)、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基的配置。胰蛋白胨还广泛应用于高品质的抗生素、维生素、医药工业,氨基酸、有机酸、酶制剂、黄原胶等发酵工业,生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,临床用于抗炎消肿,工业上用于皮革制造,生丝处理,食品加工。在国际市场上,胰蛋白胨也属于货紧价昂的短线品种之一。   胰酪蛋白胨质量标准及其检验标准:   常规各项理化指标:   1. 澄清度(磷酸盐、碱性沉淀):无沉淀、澄清   2. 2%水溶液:透明   3. 酸碱度:6-7   4. 氨基氮:≥3%   5. 色氨酸:≥0.8%   6. 胨含量:≥80%   7. 总氮:≥13%   8. 水份:≤5%   9. 灰份:≤6%   10. 氯化钠:≤0.2%胰蛋白胨特指用胰蛋白酶酶解酪蛋白生成的蛋白胨产物,与一般蛋白胨的区别在于酶解工艺处理上,属于水解度更高、胨分子量更小更均衡的蛋白胨。

  • 土壤蛋白酶测定求助

    请教各位,有同样采用蔡红的改良茚三酮方法测定土壤蛋白酶活性的吗?用酪酸钠做基质,为什么样品的吸光度值比对照样吸光度值低?同求靠谱实用的土壤蛋白酶测定的详细方法,万分感谢

  • 我科学家发现高效安全抗肿瘤转移新型抑制剂

    中国科技网讯 最近出版的国际肿瘤学权威期刊《美国国立癌症研究所杂志》发表了题为《转化生长因子β受体Ⅰ抑制剂高效安全抑制乳腺癌转移》的研究论文。该研究由国家“千人计划”入选者、华东师大生命医学研究所、上海市调控生物学重点实验室刘明耀教授领衔的课题组研发,发现了新型抗肿瘤体内生长和转移抑制剂。 随着全球肿瘤发病率的提高,我国已成为世界上肿瘤发病和死亡的大国。预计到2030年,世界上将有1320万人死于癌症,其中1/4在中国。针对这一严峻现状,近年来,学者一直在致力于战胜这个“恶魔”。分子靶向治疗,特别是寻找肿瘤转移的分子靶向治疗是近年来肿瘤治疗研究最为活跃的领域。肿瘤分子靶向治疗药物是一种小分子靶向治疗药物,就像子弹一样,可以直接命中癌细胞,而尽可能不损伤正常细胞,因其高效安全而备受瞩目。 课题组利用计算机模拟技术,构建了以抑制转化生长因子β受体活性为抗肿瘤药物靶点的虚拟筛选模型。利用该模型,从40万个小分子化合物库中筛选确定了100个左右的小分子。这些虚拟筛选出来的小分子在实际中是否真的能抑制癌细胞生长和迁移?这就需要再通过细胞抗癌功能筛选,从中找到1—2个抗癌效果最好的小分子。结合药物化学结构改造,这些小分子就改造成了能强烈抑制乳腺癌细胞迁移的新型转化生长因子β受体Ⅰ抑制剂。 课题组把实验小鼠分为乳腺癌原位转移组、乳腺癌肺转移组和骨转移组3种转移模型,利用治疗和预防两种给药方案,把这种抑制剂用于3种不同的动物模型。实验结果均表明,该抑制剂几乎能完全抑制乳腺癌的体内转移,并且对实验动物没有毒性。 专家认为,该项研究发现了一类新型转化生长因子β受体Ⅰ抑制剂,从多个角度证明其具有良好的抑制肿瘤转移效果,尤其在多种肿瘤转移动物模型中得到了令人印象深刻的结果。(张惠虹 记者王春) 《科技日报》(2013-02-18 一版)

  • 【求助】竞争性抑制剂或变性剂

    新人做论文,检测丁烯二酸的顺反异构体,由于峰形问题,要加入磷酸,作为离子抑制剂,但是老师要求换其他的试试,以便说明选择磷酸的好处,请教一下,还有哪些是属于竞争性抑制剂或变性剂??

  • 水果中都含有特殊的植物性蛋白酶

    木瓜、苹果、菠萝、木瓜、猕猴桃等水果中都含有特殊的植物性蛋白酶,能够使肉嫩可口。可以把这些水果切成小块,或是榨成汁,在腌肉时加进去,就能起到“天然嫩肉粉”的功效。、猕猴桃等水果中都含有特殊的植物性蛋白酶,能够使肉嫩可口。可以把这些水果切成小块,或是榨成汁,在腌肉时加进去,就能起到“天然嫩肉粉”的功效。

  • 水果中都含有特殊的植物性蛋白酶

    苹果、菠苹果、菠萝、木瓜、猕猴桃等水果中都含有特殊的植物性蛋白酶,能够使肉嫩可口。可以把这些水果切成小块,或是榨成汁,在腌肉时加进去,就能起到“天然嫩肉粉”的功效。萝、木瓜、猕猴桃等水果中都含有特殊的植物性蛋白酶,能够使肉嫩可口。可以把这些水果切成小块,或是榨成汁,在腌肉时加进去,就能起到“天然嫩肉粉”的功效。

  • 蛋白酶分析方法

    各位大侠:最近在做蛋白酶(5w分子量)检测,用的是大粒径(300A)的C4和C18,流动性换过三氟乙酸、甲酸和磷酸都不行,蛋白酶都出在死时间啊!!!愁死人了,谢谢各位高手指导。

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