偶氮胭脂红生物染色剂

苏丹红是塑料和其他合成材料着色常用的一种合成染色剂。苏丹红和偶氮染色剂均被国际癌症研究机构（IARC）划分为潜在遗传毒性物质和/或致癌物质。它们的降解产物也被认为具有致癌性。根据欧洲食品检测实验室数据，香料中苏丹红和偶氮染色剂的典型报告限值在10至50 μg/kg之间。本应用纪要介绍了一种快速而灵敏的方法，采用QuEChERS提取程序和配备MS/MS的UPLC分离对11种苏丹红和偶氮染色剂进行检测和定量。

在12分钟内完成所有列出染色剂的分离和检测。使用QuEChERS简化的样品制备和快速检测方法进行高通量的常规应用。使用ACQUITY UPLC H-Class系统和Xevo TQD降低定量限。TargetLynxTM应用软件可以快速鉴定、定量并突出显示所有超过规定限值的样品。

胭脂虫红色素是以醌类色素胭脂红酸为主要成分的红色染料，从胭脂虫（原产于中南美洲的昆虫）中提炼而得，目前广泛应用于食品、药品、化妆品等众多领域。 我国国家标准《GB2760－2007食品添加剂使用卫生标准》中规定了食品中胭脂虫红的限量值，其中：果冻中胭脂虫红（以胭脂红酸计）的最大添加量为0.05g/kg，饮料中最大添加量为0.6g/kg。 目前对食品中胭脂虫红酸的检测方法主要有高效液相色谱法、分光光度法、毛细管电泳法和薄层色谱法。日本卫生试验法中规定胭脂虫红色素的试验方法为TLC法，但是作为参考方法，也介绍了使用HPLC的测定例。 本文使用HPLC-DAD对食品中的胭脂红酸进行了测定，除了峰的保留时间外，还根据DAD吸收光谱对胭脂红酸的定性进行了确认。首先对不同浓度的标准样品作标准曲线：检测波长为280 nm，浓度为0.1-10 mg/L范围的R2=1.0000，检测波长为495 nm，浓度为0.5-10 mg/L范围的R2=0.9999，可见线性度良好；胭脂红酸浓度为10mg/L的标准品测定6次时，保留时间的重现性可达0.05% RSD，检测波长分别为280 nm和495 nm峰面积的重现性为0.19%和0.13%RSD，可见重现性非常好。

人们的生活水平在日益改善，消费意识也在不断加强，一些高质量、多功能的服装越来越受到消费者的青睐。偶氮染料(azo dyes，偶氮基两端连接芳基的一类有机化合物)是纺织品服装在印染工艺中应用最广泛的一类合成染料，用于多种天然和合成纤维的染色和印花，也用于油漆、塑料、橡胶等的着色。在特殊条件下，它能分解产生20多种致癌芳香胺，经过活化作用改变人体的DNA结构引起病变和诱发癌症，该类染料通常无色无味，不能通过人体的感觉器官感知，甚至不能通过洗涤等方式来减轻其危害。偶氮检测是国际环保要求的必检项目之一，标准规定被检产品中不得含有种偶氮染料中间体，若检测出其中一种即为不合格产品。

偶氮染料是纺织品印染工业最常用的一类合成染料，其分子结构上有两个互相以双键连接的氮原子，故称为偶氮；常用于天然或合成纤维的印花或染色；也可用于油漆、塑料和橡胶等的着色。在特殊条件下，它能分解产生20多种致癌芳香胺，经过活化作用改变人体的DNA结构引起病变和诱发癌症。因此，生活中的大部份日用品，如纺织品、鞋、皮革等都要求对部份偶氮染料进行检测。本文主要探讨的是欧盟官方所公布的EN14362标准中的22种偶氮染料加上两种内标化合物，总共24种偶氮的液相分离方法，即采用了安捷伦最新推出的Poroshell 120 EC-C18色谱柱在240 nm吸收处高效分离24种偶氮染料，基本实现基线分离。

将酸蚀后的牙磨块放入染色机中染色,染色过程环境保持37℃以模拟口腔环境,调节染色机转速为2r/ min使牙磨块在染色液与空气中循环交替,染色液应每天更换。

本文采用岛津LC-PDA-MS/MS高效液相色谱串联质谱系统，建立了含黄柏中药材中违规使用金胺O染色的定性确认方法。该方法基于色谱保留时间、UV光谱以及一级、二级质谱图定性，选择性强，准确度高，供相关行业参考。

将酸蚀后的牙磨块放入染色机中染色，染色过程环境保持379C以模拟口腔环境，调节染色机转速为2rpm使牙磨块在染色液与空气中循环交替，染色液需每天更换

影响革兰氏染色的因素多样，包括操作过程中的固定剂、染色剂浓度、媒染剂使用、脱色剂选择及时间控制，细菌的菌龄和培养条件，以及染液中的结晶紫浓度和酒精的脱色能力等。

偶氮染料是现染料市场中品种数量上最多的一种染料，由染料分子中含有偶氮基而得名。这类染料会发生还原反应形成致癌的芳香胺化合物，因此部分偶氮染料遭到禁用。同时，偶氮染料对水环境的污染也备受关注。本实验使用Sepaths全自动固相萃取仪对水中对氯苯胺进行萃取富集，并对萃取效果进行了检测。本文建立了Sepaths全自动固相萃取净化GC-MS测定偶氮染料固相萃取分析方法。回收率均在68%~94%之间，该方法简便可靠，适用于纺织品轻工等行业。

偶氮染料是现染料市场中品种数量上最多的一种染料，由染料分子中含有偶氮基而得名。这类染料会发生还原反应形成致癌的芳香胺化合物，因此部分偶氮染料遭到禁用。同时，偶氮染料对水环境的污染也备受关注。本实验使用Sepaths全自动固相萃取仪对水中20种偶染料进行萃取富集，并对萃取效果进行了检测。本文建立了Sepaths全自动固相萃取净化GC-MS测定偶氮染料固相萃取分析方法。回收率均在68%~94%之间，该方法简便可靠，适用于纺织品轻工等行业。

二、基本原理芽孢又叫内生孢子(endospore)，是某些细菌在一定的环境下生长到一定阶段在菌体内形成的含水量低、壁厚、抗逆性强的休眠体，通常呈圆形或椭圆形。细菌能否形成芽孢以及芽孢的形状、芽孢在芽孢囊内的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定细菌的依据之一。由于芽孢壁厚、透性低、不易着色，当用苯酚复红，结晶紫等进行单染色时，菌体和芽孢囊着色，而芽孢囊内的芽孢不着色或仅显很淡的颜色，游离的芽孢呈淡红或淡蓝紫色的圆或椭圆形的圈。为了使芽孢着色便于观察，可用芽孢染色法。芽孢染色法的基本原理是：用着色力强的染色剂孔雀绿或苯酚复红在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽孢内；进入菌体的染料经水洗后被脱色，而芽孢一经着色难以被水洗脱；当用对比度大的复染剂染色后，芽孢仍保留初染剂的颜色，而菌体和芽孢囊被染成复染剂的颜色，使芽孢和菌体更易于区分。

偶氮染料方法用于各种产品的着色剂，诸如纺织品、纸张、皮革、食品和化妆品等。早期研究已经证实，偶氮染料在环境中能经不同途径还原降解为胺类物质，其中有些苯胺、联苯胺衍生物为众所周知的致癌物和怀疑具有致癌性的物质，对人类健康与环境构成极大的影响与危害。因此，对偶氮染料及其代谢还原反应生成的胺类化合物必须进行监测，以充分评估其人类和环境的潜在危害。目前已知的芳胺的分析方法有分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、色谱-质谱联用色谱法和毛细管电泳法。本文介绍了气相色谱质谱联用仪对纺织品中的18种禁用芳香胺定性和定量分析。

偶氮染料是现染料市场中品种数量上最多的一种染料，由染料分子中含有偶氮基而得名。这类染料会发生还原反应形成致癌的芳香胺化合物，因此部分偶氮染料遭到禁用。同时，偶氮染料对水环境的污染也备受关注。本实验使用Sepaths全自动固相萃取仪对水中4-氯邻甲苯胺进行萃取富集，并对萃取效果进行了检测。本文建立了Sepaths全自动固相萃取净化GC-MS测定偶氮染料固相萃取分析方法。回收率均在68%~94%之间，该方法简便可靠，适用于纺织品轻工等行业。

偶氮染料被广泛的用于纺织工业中的印染着色工艺中。然而，在特定条件下，偶氮染料很容易分解出对人体有害的芳香胺类。这些芳香胺能够引起人体的DNA 发生变化甚至引发癌症。在1994 年，德国就开始禁止在日化产品中使用某些偶氮染料。在 2002 年9 月，欧盟(EU) 建立了关于偶氮染料检测与定量的法规，其中规定在纺织品中偶氮染料的最大允许含量为30 ppm。目前分析偶氮染料的方法有薄层色谱(TLC)，气相色谱(GC) 与高效液相色谱(HPLC) 等。与传统液相色谱方法比较，采用亚二微米填料的超高效液相色谱技术(UHPLC) 具有更快地分析速度，更好的分离度以及灵敏度，并能够节省大量的溶剂从而降低运行成本。在本文中，共26 种偶氮染料在10 分钟之内得到了分离（包括流动相梯度再平衡在内）。根据信噪比估算这些偶氮染料的最低检出限为0.05 μ g/mL 到5 μ g/mL。

在食品和饮品中添加食用色素可改善其口感。食用色素主要分为天然色素和人工合成色素。 天然食用色素是直接从动植物组织中提取的色素，对人体一般来说是无害，如红曲、叶绿素、姜黄素、胡萝卜素、苋菜和糖色等，就是其中的一部分。 人工合成食用色素，是用煤焦油中分离出来的苯胺染料为原料制成的，故又称煤焦油色素或苯胺色素，如合成苋菜红、胭脂红及柠檬黄等等。这些人工合成的色素因易诱发中毒、泻泄甚至癌症，对人体有害，故不能多用或尽量不用。我国国家标准《GB 2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》明确规定了这类人工色素在食品中添加的限量值。 在此，我们对苋菜红、靛蓝胭脂红、日落黄、亮蓝FCF、四碘荧光素以及酸性红52这六种人工合成色素的分析进行介绍。六种人工合成色素对不同波长的紫外线(UV)具有各不相同的最大吸收，因此可以使用DAD(二极管阵列检测器)对其进行同时分析。使用DAD可以获得最佳波长下各种人工色素的提取色谱图。通过标准样品光谱图与目标组分光谱图对比进行组分确定，可实现更精准的定量分析。

微生物微生物染色的基本原理，是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附，且吸附作用稳固；同样，碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力，易于吸附。但是，要使酸性物质染上酸性材料，必须把它们的物理形式加以改变（如改变pH值），才利于吸附作用的发生。相反，碱性物质（如细胞质）通常仅能染上酸性染料，若把它们变为适宜的物理形式，也同样能与碱性染料发生吸附作用。

偶氮染料是现染料市场中品种数量上最多的一种染料，由染料分子中含有偶氮基而得名。这类染料会发生还原反应形成致癌的芳香胺化合物，因此部分偶氮染料遭到禁用。同时，偶氮染料对水环境的污染也备受关注。本实验使用Sepaths全自动固相萃取仪对水中邻甲苯胺进行萃取富集，并对萃取效果进行了检测。本文建立了Sepaths全自动固相萃取净化GC-MS测定偶氮染料固相萃取分析方法。回收率均在68%~94%之间，该方法简便可靠，适用于纺织品轻工等行业。

偶氮染料是现染料市场中品种数量上最多的一种染料，由染料分子中含有偶氮基而得名。这类染料会发生还原反应形成致癌的芳香胺化合物，因此部分偶氮染料遭到禁用。同时，偶氮染料对水环境的污染也备受关注。本实验使用Sepaths全自动固相萃取仪对水中联苯胺进行萃取富集，并对萃取效果进行了检测。本文建立了Sepaths全自动固相萃取净化GC-MS测定偶氮染料固相萃取分析方法。回收率均在68%~94%之间，该方法简便可靠，适用于纺织品轻工等行业。

偶氮染料被广泛的用于纺织工业中的印染着色工艺中。然而，在特定条件下，偶氮染料很容易分解出对人体有害的芳香胺类。这些芳香胺能够引起人体的DNA 发生变化甚至引发癌症。在1994 年，德国就开始禁止在日化产品中使用某些偶氮染料。在 2002 年9 月，欧盟(EU) 建立了关于偶氮染料检测与定量的法规，其中规定在纺织品中偶氮染料的最大允许含量为30 ppm。目前分析偶氮染料的方法有薄层色谱(TLC)，气相色谱(GC) 与高效液相色谱(HPLC) 等。与传统液相色谱方法比较，采用亚二微米填料的超高效液相色谱技术(UHPLC) 具有更快地分析速度，更好的分离度以及灵敏度，并能够节省大量的溶剂从而降低运行成本。在本文中，共26 种偶氮染料在10 分钟之内得到了分离（包括流动相梯度再平衡在内）。根据信噪比估算这些偶氮染料的最低检出限为0.05 μ g/mL 到5 μ g/mL。

摘要： 随着人们生活水平的改善，对服装的安全性越来越重视。目前，在国内服装市场强制实行的国家标准GB 18401-2010《国家纺织产品基本安全技术规范》和GB/T 18885-2009《生态纺织品技术要求》中，对甲醛、pH值、色牢度、异味和可分解芳香胺染料五项指标都做了强制性的要求。由于违禁的偶氮染料（或可分解芳香胺染料）会分解出致癌物质，严重影响身体健康；而且该类染料通常无色无味，不能通过人体的感觉器官感知，甚至不能通过洗涤等方式来减轻其危害，所以国家标准GB 18401-2010 和GB/T 18885-2009都严格规定，禁止使用这些有致癌作用的偶氮染料。根据国标GB/T 17592-2006对纺织品禁用偶氮染料的检测方法，要实现对24种禁用的偶氮染料的分析，每个样品的色谱分析周期需要90分钟，如果面对大量待检样品时，严重影响检测效率。 岛津的超快速液相色谱可以以更快的速度和更高的质量完成以往HPLC的工作，为用户节省宝贵的时间和日常溶剂消耗，从而获得最大的投资回报。UFLCXR的高分离度可以帮助用户从容面对复杂组份（如天然产物或中草药等）分离的挑战；UFLCXR的高灵敏度帮助用户检测痕量的目标化合物；UFLCXR快速分离能力使用户轻松分析大量样品，实现高通量分析。 本文采用岛津超快速液相色谱建立了一种检测纺织品中24种禁用偶氮染料的方法。经过方法学的考察，该方法的线性、重复性和选择性均良好。

无机盐的含量直接影响着染料的品质，测定染料中的氯离子和硫酸盐是两项重要的指标。图-为采用戴安的谱睿（PRE）技术在线基体消除后，经AS色谱柱分离偶氮染料中氯离子的色谱图。

实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。詹纳斯绿B 是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态(即有色状态)，呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。实验试剂1. Ringer 溶液氯化钠 0.85g氯的化的钾 0.25g氯化钙 0.03g蒸馏水 100ml2. 1%詹纳斯绿B 溶液（原液）称取50mg 詹纳斯绿B 溶于5ml Ringer，稍加微热(30～40℃)，使之溶解，用滤纸过滤后，即为1%原液。3. 詹纳斯绿B 溶液（应用液）取1%原液1ml 加入49ml Ringer 溶液, 混匀即可。现用现配。

偶氮染料被广泛的用于纺织工业中的印染着色工艺中。然而，在特定条件下，偶氮染料很容易分解出对人体有害的芳香胺类。这些芳香胺能够引起人体的DNA 发生变化甚至引发癌症。在1994 年，德国就开始禁止在日化产品中使用某些偶氮染料。在 2002 年9 月，欧盟(EU) 建立了关于偶氮染料检测与定量的法规，其中规定在纺织品中偶氮染料的最大允许含量为30 ppm。目前分析偶氮染料的方法有薄层色谱(TLC)，气相色谱(GC) 与高效液相色谱(HPLC) 等。与传统液相色谱方法比较，采用亚二微米填料的超高效液相色谱技术(UHPLC) 具有更快地分析速度，更好的分离度以及灵敏度，并能够节省大量的溶剂从而降低运行成本。在本文中，共26 种偶氮染料在10 分钟之内得到了分离（包括流动相梯度再平衡在内）。根据信噪比估算这些偶氮染料的最低检出限为0.05 μ g/mL 到5 μ g/mL。

摘要：本方法参考《GB/T 5009.35-2003食品中合成着色剂的测定》标准，结合实际情况优化实验条件，用乙醇/氨水/水（89:1:10）溶液提取肉制品中的合成色素，取离心后的溶液浓缩后用20%柠檬酸调pH至酸性，应用EXTRA全自动固相萃取仪，使用聚酰胺柱分离、净化，淋洗液经浓缩、转换溶剂定容后，供HPLC-DAD检测，外标法定量分析。本文在优化提取溶剂后，选用EXTRA全自动固相萃取仪，免人工干预，自动完成SPE 柱活化、样品上样、目标物洗脱和收集等步骤，释放了大量实验室劳力。收集液再经氮吹浓缩、溶剂转换定容后，以高效液相色谱仪（HPLC-DAD）完成了肉制品中胭脂红色素含量的测定。

生产企业违禁添加着色剂、甜味剂，长期食用此类产品将严重危害人体健康。建立一项快速、准确的高效液相检测方法来检测食品中的违规色素是刻不容缓的事。赛智科技利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对胭脂红等5种合成着色剂进行了HPLC检测方案。

“苏丹红”是一种化学染色剂，并非食品添加剂，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四种类型。它的化学成份中含有一种叫萘的化合物，该物质具有偶氮结构，由于这种化学结构的性质决定了它具有致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用。方法优势月旭公司根据GB/T19681-2005国标方法开发了食品中苏丹红染料的检测解决方案，为您的安全健康提供保障。该方案中的月旭Welchrom? 苏丹红专用柱是基于正相保留的机理、能够有效去除食用油中的脂肪、有机酸和维生素等基质干扰，回收率稳定、重现、方法简单、快速，是用于食品中苏丹红染料分析的最佳选择。

纺织品中偶氮染料邻氨基偶氮甲苯的检测，GC/MS 方法色谱柱TRACE TG-5MS 30m× 0.25mm，0.25μ m货号26098-1520温度程序50 ℃， 保持0.5min，20 ℃ /min，150 ℃， 保持8min，20℃ /min，230℃，保持13min，20℃ /min，280℃保持1min载气He流速1mL/min进样量1μ L分流比10:1检测MS

偶氮染料被广泛的用于纺织工业中的印染着色工艺中。然而，在特定条件下，偶氮染料很容易分解出对人体有害的芳香胺类。这些芳香胺能够引起人体的DNA 发生变化甚至引发癌症。在1994 年，德国就开始禁止在日化产品中使用某些偶氮染料。在 2002 年9 月，欧盟(EU) 建立了关于偶氮染料检测与定量的法规，其中规定在纺织品中偶氮染料的最大允许含量为30 ppm。目前分析偶氮染料的方法有薄层色谱(TLC)，气相色谱(GC) 与高效液相色谱(HPLC) 等。与传统液相色谱方法比较，采用亚二微米填料的超高效液相色谱技术(UHPLC) 具有更快地分析速度，更好的分离度以及灵敏度，并能够节省大量的溶剂从而降低运行成本。在本文中，共26 种偶氮染料在10 分钟之内得到了分离（包括流动相梯度再平衡在内）。根据信噪比估算这些偶氮染料的最低检出限为0.05 μ g/mL 到5 μ g/mL。

偶氮染料被广泛的用于纺织工业中的印染着色工艺中。然而，在特定条件下，偶氮染料很容易分解出对人体有害的芳香胺类。这些芳香胺能够引起人体的DNA 发生变化甚至引发癌症。在1994 年，德国就开始禁止在日化产品中使用某些偶氮染料。在 2002 年9 月，欧盟(EU) 建立了关于偶氮染料检测与定量的法规，其中规定在纺织品中偶氮染料的最大允许含量为30 ppm。目前分析偶氮染料的方法有薄层色谱(TLC)，气相色谱(GC) 与高效液相色谱(HPLC) 等。与传统液相色谱方法比较，采用亚二微米填料的超高效液相色谱技术(UHPLC) 具有更快地分析速度，更好的分离度以及灵敏度，并能够节省大量的溶剂从而降低运行成本。在本文中，共26 种偶氮染料在10 分钟之内得到了分离（包括流动相梯度再平衡在内）。根据信噪比估算这些偶氮染料的最低检出限为0.05 μ g/mL 到5 μ g/mL。