喹乙醇喹酰胺醇对照品

喹乙醇（Olaquindox），又名喹酰胺醇，化学名为N-羟乙基-3-甲基-乙-喹啉酰胺-1，4-二氧化物。喹乙醇是动物饲料添加剂。喹乙醇为一种化学合成喹恶啉类广谱抗菌药物，其抗菌作用强，对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用。合理使用喹乙醇，可以预防和治疗动物疫病，促进养殖业的发展，使用不当、使用过量或违规使用，其副作用和毒性将直接造成动物的群体危害。近年来，喹乙醇超范围滥用现象蔓延，家禽喹乙醇中毒事件时有发生，水产养殖环节发生大面积死鱼事件。虽然猪对喹乙醇远不如鸡、鸭那么敏感，但若配合饲料中添加量超过200mg/kg，亦会导致中毒。此外，喹乙醇超剂量应用还会增加其在动物组织中的残留量，从而增大细菌耐药性或对人的身体健康造成危害，　　为加强喹乙醇安全监管，有效打击违规作用喹乙醇行为，保障畜牧业和水产养殖业健康发展，确保畜禽产品和水产品质量安全，十分有必要开展饲料中喹乙醇检测。1、适用范围适用于饲料中喹乙醇的检测。2、提取将1.0 g 饲料（已粉碎均匀）置于50 mL 塑料离心管中，加入10 mL 5% 甲醇水溶液，避光振荡30 min，超声20 min，6,000 rpm 下离心10 min ；取5 mL 上清液，待净化。3、净化ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)a 活化： 2 mL 甲醇活化，2 mL 水平衡，流出液弃去；b 上样： 将待净化液加入小柱，流出液弃去；c 淋洗： 2 mL 0.1M HCl，流出液弃去，将小柱抽干；d 洗脱： 3 mL 40% 甲醇水溶液洗脱，收集流出液至2 mL，供HPLC 分析。4、色谱条件色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)流动相：甲醇/ 水= 15/85 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：UV 260 nm5、添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507271420_557379_2452211_3.png添加水平为10 mg/kg 饲料中喹乙醇检测的液相色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/07/201507271421_557380_2452211_3.png

喹乙醇又称喹酰胺醇，商品名为倍育诺、快育灵，由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性，对大多数动物有明显的致畸作用，对人也有潜在的三致性，即致畸形，致突变，致癌。因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。 本文参考GB/T 8381.7-2009 饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法，试样中喹乙醇以甲醇溶液提取，固相萃取小柱净化，反相液相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量分析。饲料中喹乙醇的测定1、适用范围适用于饲料中喹乙醇的检测。2、提取将1.0 g 饲料（已粉碎均匀）置于50 mL 塑料离心管中，加入10 mL 5% 甲醇水溶液，避光振荡30 min，超声20 min，6,000 rpm 下离心10 min ；取5 mL 上清液，待净化。3、净化ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003)a 活化： 2 mL 甲醇活化，2 mL 水平衡，流出液弃去；b 上样： 将待净化液加入小柱，流出液弃去；c 淋洗： 2 mL 0.1M HCl，流出液弃去，将小柱抽干；d 洗脱： 3 mL 40% 甲醇水溶液洗脱，收集流出液至2 mL，供HPLC 分析。4、色谱条件色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)流动相：甲醇/ 水= 15/85 流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：30 oC 检测器：UV 260 nm 5、添加回收结果http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506181447_550636_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506181448_550637_1610895_3.jpg添加水平为10 mg/kg 饲料中喹乙醇检测的液相色谱图

GB/T 8381.7-2009 饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法距离3.15晚会已经有半个月了，不知道大家还记得喹乙醇吗？喹乙醇又称喹酰胺醇，是一种化学合成的生长促进剂。由于喹乙醇长期使用会蓄积在动物体内，诱变细胞染色体畸形，此外还会造成耐药性，给人类身体健康带来潜在危害，因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》(2005版)也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703300933_05_2222981_3.png本实验按照《饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法》（GB 8381.7-2009），使用资生堂 CAPCELL PAK C18 MG II S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱，对喹乙醇标准品进行分析。1.精密度http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703300933_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704191703_01_2222981_3.png如图1所示，CAPCELL PAK C18 MG II S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱对喹乙醇标准品分析得到良好峰形。连续进样6次，精密度结果如表1所示。6次峰面积RSD为0.06%，精密度良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703300933_03_2222981_3.png2.喹乙醇标准曲线的制作配制0.1 µg/mL, 1.0 µg/mL, 5.0 µg/mL, 10.0 µg/mL, 20 µg/mL, 50 µg/mL, 100µg/mL系列标准工作液进行标准曲线的制作。以峰面积为纵坐标，标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线。由图2所示，喹乙醇0.1µg/mL—100µg/mL浓度范围内线性良好，R2=0.99993。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704191704_01_2222981_3.png注：图中色谱峰线条不平滑是由于图像在复制过程中解像度问题引起的。

GB/T 8381.7-2009饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法——ADME良好数据喹乙醇又称喹酰胺醇，是一种化学合成的生长促进剂。由于喹乙醇长期使用会蓄积在动物体内，诱变细胞染色体畸形，此外还会造成耐药性，给人类身体健康带来潜在危害，因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。《中国兽药典》(2005版)也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704191707_03_2222981_3.png在上一篇报告中，我们使用CAPCELL PAK C18 MG II色谱柱对喹乙醇标准品进行分析，可得到良好的分析结果。而实际样品中可能会出现很多杂质峰，因此本次实验使用极性更强的键合金刚烷基团的高表面极性CAPCELL PAK ADME S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱，按照相同方法对喹乙醇标准品进行分析，结果如图1所示，相比MG II色谱柱，ADME色谱柱对喹乙醇有更强的保留效果，同时有更高的理论塔板数，因此可以期待其在实际样品分析中发挥更出色的分离表现。（实际样品的实验正在进行中，还请老师们耐心等待）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703301012_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704191709_01_2222981_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703301012_03_2222981_3.png1.精密度以上述色谱条件连续进样6次，精密度结果如表2所示，6次峰面积RSD为0.05%，精密度良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703301012_04_2222981_3.png2.喹乙醇标准曲线的制作配制0.1 µg/mL, 1.0 µg/mL, 5.0 µg/mL, 10.0 µg/mL, 20 µg/mL, 50 µg/mL, 100µg/mL系列标准工作液进行标准曲线的制作。以峰面积为纵坐标，标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线。由图2所示，喹乙醇0.1µg/mL—100µg/mL浓度范围内线性良好，R2=0.99995。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/04/201704191710_01_2222981_3.png注：图中色谱峰线条不平滑是由于图像在复制过程中解像度问题引起的。

摘要：建立了可以同时检测动物源性食品中喹乙醇代谢物—3-甲基喹噁啉-2-羧酸，和卡巴氧代谢物—喹噁啉-2-羧酸的固相萃取-气相色谱质谱联用检测法。样品经偏磷酸甲醇水解，乙酸乙酯萃取和磷酸盐缓冲液反萃取，用混合阴离子交换SPE柱净化后，洗脱液氮气吹干， N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛衍生，衍生产物直接进气相色谱质谱联用仪检测。通过对猪肉、鸡肉和鸡蛋的添加回收试验，考察了方法的准确度、精密度和基质适应性。结果显示：目标分析物分别在0.5～5μg/kg质量浓度范围内呈良好线性，相关系数不低于0.9985；方法回收率达到87%～107%，相对标准偏差均小于15%；3-甲基喹噁啉-2-羧酸的检出限达到0.5μg/kg，甲基喹噁啉-2-羧酸的检出限达到0.2ug/kg；方法基质适应性良好。关键词：喹乙醇代谢物；3-甲基喹噁啉-2-羧酸；卡巴氧代谢物；喹噁啉-2-羧酸；甲酯化衍生；固相萃取；气相色谱质谱联用喹噁啉类兽药包括卡巴氧、喹乙醇、喹烯酮等品种。卡巴氧、喹乙醇曾作为抗菌促生长剂在养殖业中都得到广泛的应用。根据JECFA报告中对卡巴氧和喹乙醇的风险评估，不仅二者本身具有潜在的致畸变、致癌作用，其代谢物也可能带来健康风险。因此许多国家将卡巴氧和喹乙醇列为对食用动物禁用或限用的药物，毒理实验研究表明，喹噁啉类兽药具光敏毒性、致畸性和致癌性，欧盟已于1998年禁止其应用于可食性动物，中国兽药典(2005)明确规定，禁止在家禽及水产养殖中使用喹乙醇，但仍允许使用喹乙醇作为猪饲料添加剂。在动物体内，卡巴氧和喹乙醇经脱单氧、脱双氧后主要生成喹噁啉2-羧酸(QCA)或3-甲基喹噁啉2-羧酸(MQCA)。由于二者的原药在动物组织内代谢迅速(代谢途径见图1)，而相应的代谢产物喹噁啉-2-羧酸(QCA)和3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)则相对稳定，因此通常将这两个代谢产物作为残留分析和监控的目标物。1995年联合国粮农组织(FAO)/世界卫生组织(WHO)食品添加剂联合专家委员会(JECFA)将3-甲基喹噁啉2-羧酸(MQCA)规定为喹乙醇在动物组织中的残留标识物。2003年我国农业部规定了肌肉和肝脏组织中MQCA的最大残留限量分别为[fon