做硝基呋喃类化合物检测用的标准品大家都是用的什么呀?有标准中说的是用对照品,有标准中用的是代谢物,不知道这其中有没有什么区别呀?大家都根据哪个标准做的呢?
各位大侠,请问有没有知道硝基呋喃代谢衍生物标准品CAS号的,急急急。。。。。。。跪谢
新手,第一次做食品中硝基呋喃类药物的检测。请做过的老师们指点一下。用硝基呋喃类代谢物标准品优化质谱参数还需要衍生么,样品前处理衍生的目的是什么? 衍生的话,它们的母离子跟子离子质量数还跟国标上一致么?国标21311里面衍生,不同浓度的基质标曲加入的衍生剂的量相同。这样会不会影响衍生的效果?
我门最近刚刚开展肉中硝基呋喃代谢物的检测。仪器是agilent 6410的质谱。但是突然发现在优化质谱条件,寻找母离子和子离子时,需要将标准品进行衍生,请教各位大侠,有没有具体的衍生化条件?越具体越好!不胜感激!
买的标准品不是硝基呋喃代谢物的,在优化仪器条件的时候标准品是否要衍生化才能用于优化?
各位做硝基呋喃的大侠,我现在刚开始做,外标法只能做到1ppb。。。是标准品衍生做的,不是现成衍生好的标准品。。看文献都能做到零点几ppb,不知道什么原因,我们是agilent仪器。。请大家指教,谢谢了
硝基呋喃标准品是不是也需要衍生后再检测?衍生的方法和样品一样吗?
请问,各同行做硝基呋喃时用的是什么品牌的标准品?觉得哪个牌子更好呢?
最近在摸索[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]测硝基呋喃的方法,标准有几个大体方法都差不多,有国标的,也有地方标准……按照标准的方法处理样品,衍生,净化,上机测定,我们现用手动进样测定,质谱中根本就没有相应的母离子和子离子,这可把我们愁坏了!开始以为把几个标准品弄混了,可是每个标准品都对不上,这是怎么回事呀?请做过硝基呋喃的大侠指点一下,会是什么问题呢?我刚刚接触[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url],对其还不熟悉,请大家最好说详细一些,通俗一些,太专业的东西还不太明白。大家一般使用哪个标准呀?或者哪个更适合初学者使用,请大家不吝赐教!谢谢!
最新检测硝代的国家标准简单快速,节省时间,衍生时间2个小时。农业部1077号公告-2-2008 水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定 高效液相色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=181362]硝基呋喃代谢物标准107722008.rar[/url]
动物源性食品中硝基呋喃类药物检测的固相萃取方法一、实验目的本实验利用固相萃取法作为样品的前处理方法,LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂用量。二、实验目标物呋喃唑酮(CAS:67-45-8),呋喃它酮(CAS:139-91-3),呋喃西林(CAS:59-87-0),呋喃妥因(CAS:67-20-9)。三、应用范围本方法适用于动物源性食品中硝基呋喃类药物的LC-MS/MS检测及确证。四、参考文献 推荐性国家标准《GB/T 21311-2007 动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱-串联质谱法》。五、实验材料 C8/SAX固相萃取柱200mg/6mL。六、实验方法1、样品前处理 将样品组织搅碎、均质。精确称取约1g(精确到0.01g)样品于15mL带螺盖的离心管中,加入1mL水和8mL甲醇,涡旋混合均匀,2000r/min离心3min(15℃),弃去上清液;加入8mL乙醇,涡旋混合均匀,2000r/min离心3min(15℃),弃去上清液;加入8mL乙酸乙酯,涡旋混合均匀,2000r/min离心3min(15℃),弃去上清液。2、水解和衍生化向质控和样品同待测样品中加入5mL 0.2mol/L的盐酸水溶液、100μL衍生化试剂、以及100μL内标工作溶液(20μg/L)和的混合标准溶液(10μg/L)。盖好盖子,充分振荡混匀,然后放入空气浴摇床,在37℃,200r/min条件下衍生化16h(过夜)。3、样品提取 加入0.3M的磷酸钠水溶液500μL。用试管滴加10mol/L的氢氧化钠溶液,涡旋混合均匀,用精密pH试纸调节pH值至7.0—7.2。9500r/min 离心10min,取上清液。4、SPE柱净化(1)活化:依次以5mL甲醇和5mL纯水预处理。(2)洗脱:上清液全部过柱,流速控制在约每秒1滴。依次以5mL水和5mL 50%甲醇/水溶液淋洗柱子。淋洗液完全通过小柱后,至少抽真空5min。以4mL 4%的甲醇氨洗脱,洗脱液用15mL试管收集。(3)浓缩定容:40℃氮气吹干。残渣以0.05%甲酸/甲醇溶液(9:1,v/v)溶解。溶解液以0.22μm的水相滤膜过滤,滤液可直接用于LC-MS/MS分析。5、LC-MS/MS条件 液相色谱-质谱/质谱仪 色谱柱:C18柱:150mm×2.1mm,2.0μm,或相当者 流动相:甲醇-5mM乙酸铵七、实验结果1、添加回收结果 向样品中加入不同水平的四环素类药物,回收率结果如下:(见表1)表1 动物组织中四环素类药物添加回收结果 样品名称 化合物名称 添加水平(ng/mL) 回收率(%) 猪肉 呋喃唑酮 50 80.75 100 82.58 呋喃它酮 50 89.74 100 90.88 呋喃西林 50 92.74 100 91.28 呋喃妥因 50 95.63 100 96.94 2、 空白样品添加农药残留物色谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508141653_560805_3310_3.jpg
请问谁有鳗鱼硝基呋喃代谢物的检测标准,最好是国家检验检疫局或日本商检局的检测标准(中文版)!谢谢了!可以发到我的邮箱:angel_dka@126.com为什么没人回复我的,没有同行吗? fsl432 没有标准吗?我在等你呢?
样品制备 制备方法:标准品衍生方法:取硝基呋喃代谢物混标200 μL,加入2 mL 0.2 mol/L 盐酸溶液和20μL 衍生剂,混合后置于37℃条件下保持4 h。注:0.2 mol/L 盐酸溶液:量取17 mL浓盐酸,用水定容至1000 mL。衍生剂:含2-硝基苯甲醛0.05 mol/L。称取0.075 g 2-硝基苯甲醛溶于10 mL二甲基亚砜,现用现配。分析条件 色谱柱:EndeavorsilTM C18 ,100×2.1 mm,1.8 μm(Cat#:87003) 流动相:A: 0.4% 甲酸水B:乙腈流速:0.2 mL/min柱温:30 ℃检测器:UV 254 nm进样量:2.0 μL梯度洗脱表时间(min)A:0.4%甲酸水B:乙腈07030370303.0120808.0020808.01703015.007030http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/2(112).PNGhttp://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/3(89).PNG
各位老师好!做液质不久,遇到一些我很纳闷的事情。水产品中硝基呋喃,农业部783公告-1-2006,但是上面提供的标准曲线浓度好小,最大才10ppb,我衍生的结果很差????1、各位老师硝基呋喃标准曲线衍生怎么做的啊,是同时做好几个浓度的衍生吗?2、听说有的人就做一个100ppb浓度的衍生,然后再把100ppb衍生好的标准溶液稀释成小点的浓度做标准曲线?3、做硝基呋喃试验要注意哪些问题呢?希望各位老师能分享一下你们的经验给我,谢谢。
请问各位大虾,硝基呋喃类代谢物的衍生物标准品为什么不可以直接用来做外标曲线的标准品?这样不就少了外标标准品也要衍生这步吗?
请问下,哪位老师用LC-MS/MS检测硝基呋喃类代谢产物,我们购买的呋喃西林标准品证书标识分子量为111.53,而标准GB/T21311-2007中母离子为209,我进了一针标样,没有209的目标峰,是怎么回事?
最近刚开始做硝基呋喃检测,参考国标GB/T 21311-2007方法,在标准品(AMOZ、AHD、AOZ、SEM)衍生化过程中发现SEM衍生效果不理想,所想要的母离子(209)比其他离子(208、210)少,子离子(166、192)更找不到,而其他三种标准品AMOZ、AHD、AOZ都正常。而用衍生化好的标准品(NBA-AMOZ、NBA-AHD、NBA-AOZ、NBA-SEM)来优化质谱条件,则正常。请问以上是何问题,是不是SEM标准品有问题,还是衍生化过程出问题,但若是衍生过程出问题,应该其他标准品也会出问题?请教高手解决,谢谢!
硝基呋喃类药物(nitrofurans)广泛用于家禽、家畜、水产、蜂等动物传染病的预防与治疗,当含有硝基呋喃类抗生素残留的食品被食用,将会对人类健康造成危害。所以,在食品安全的检测中均要检测硝基呋喃代谢物。 农业部 783 号公告 -1-2006 规定了水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的液相色谱 - 串联质谱测定法。 本标准适用于水产品中呋喃唑酮的代谢物3- 氨基-2- 噁唑烷基酮(AOZ)、呋喃它酮的代谢物5- 甲基吗啉-3- 氨基-2- 噁唑烷基酮(AMOZ)、呋喃西林的代谢物氨基脲(SEM)和呋喃妥因的代谢物1- 氨基-2- 内酰脲(AHD)残留量的测定。[align=center][img]http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/11425eb2-15a1-4463-8539-d09f50458dd9.jpg[/img][/align][align=center][img]http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/1750d0a1-3cfd-41a4-8db8-b7956f51938c.jpg[/img][/align][align=center][img]http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/81dd15e4-f3f0-4ded-b990-5cd4134d8d0e.jpg[/img][/align][align=center][img]http://img1.17img.cn/17img/images/201807/insimg/8d8ea9c4-74ab-4a44-81e3-6fcc7463b274.jpg[/img][/align]
最近要开展硝基呋喃的检测工作,之前同事也做过,标准品用原药和代谢物都试过,不知道怎么回事衍生之后都找不到母离子峰浓度也提高了,10ppm也是没有峰看到本版也有版友讨论过这个问题不知道最终大家是如何解决问题的?是衍生环节的问题,还是萃取环节的问题,还是仪器条件方面的问题?急切的期待专家能给点建议!非常感谢!
本人对肉粉这种基质复杂的样品进行处理,同时结合硝基呋喃代谢物提取时间长,提取率不高的问题进行优化,最终确定最佳的条件。[align=center][b]肉粉中硝基呋喃代谢物的高速动能前处理方法[/b][/align][align=center]王成梅[/align][align=center](山东中质华检测试检验有限公司,山东省 济宁市 邮编272000;)[/align][b]摘要:[/b]采用高速动能前处理技术,建立了快速、提取率高、回收率好的肉粉中硝基呋喃代谢物的液相色谱-串联质谱方法。处理后的样品添加同位素内标、酸水解、2-硝基苯甲醛衍生化、乙酸乙酯提取,正己烷除油,采用C18色谱柱进行分离,乙腈-0.002mol/L的乙酸铵为流动相进行梯度洗脱,多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,采用高速动能处理过的样品在60℃经过2h衍生后,四种硝基呋喃代谢物在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9990;方法的检出限在0.2ug/kg;通过三个低、中、高水平的加标,平均回收率(n=3)为91.7-105.2%,标准偏差小于3.10%。本方法采用一种新型的处理样品的方法,缩短了时间,提高了效率,增加了回收率,适合于基质复杂的肉粉中硝基呋喃代谢物的测定。关键词:高速动能;硝基呋喃代谢物; 肉粉; 液相色谱-质谱方法Quantitative Determination of Four Nitrofuran Metabolites in Meat Meal using high speed kinetic energy pretreatment technology[b]Abstract[/b]:Using high speed kinetic energy pretreatment technology, a method for the simultaneous determinatin of four nitrofuran metabolites in meat meal by liquid chromatography tandem mass spectrometry([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS)was eatalished.The method has a rapid ,high extraction and recovery rate.The homogenized sample was spiked with isotope inter standards,hydrolyzed withHCl,derivatized with nitrobenzaldehyde,extracted with ethyl acetate,and degreasing by hexane.The analysis was carried out on C18 column by gradient elution with acetonitrile-ammonium acetate as mobile phase,and detected by MS/MS system with positive electrospray ionization under multiple reaction monitoring(MRM)mode.The compounds was identified with retention time and ion ratio and quantified by the internal standard calibration curve isotope dilution technique.After 60℃ derivation,the results showed that the correlation coefficients(R20.9990)of four targets were obtained within their respective linear ranges over dynamic range of 0.2-5μg/L .The average recoveries were ranged from 91.7%-105.2% for the four targets at three spiked levels with the relative standard derivation (RSD,n=6)were under 3.10%.The method was precise and sensitivity,suitable for quantitative and qualitative analysis of four nitrofuran metabolites in meat meal.[b]Key words[/b]:High-speed kinetic energy nitrofuran metabolites meat meal [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS 硝基呋喃类药物是一种光谱抗生素,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌一及真菌等都有杀菌作用。硝基呋喃类代谢物广泛应用于畜禽和水产养殖,以治疗有大肠杆菌或沙门氏菌引起的肠炎、溃疡病等。硝基呋喃类药物在动物体内半衰期短,但是其代谢物可以和蛋白质紧密结合,残留时间长,甚至于经过高温、微波、烘烤等处理也无法降解[sup][/sup]。研究表明,硝基呋喃类及其代谢物对人体具有致癌、致畸胎副作用,欧盟已于1995年禁止在食用动物中添加硝基呋喃类药物[sup][/sup],中国卫生部在2010年就将硝基呋喃类药物硝基呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入违禁添加物质黑名单。对于硝基呋喃类药物的检测不能反映其在动物性体内真实的情况。目前对于硝基呋喃类药物的检测主要是对其代谢物的检测,主要方法有免疫分析法[sup][/sup]、液相色谱法[sup][/sup]、液相色谱-质谱法[sup][/sup]。液相色谱-质谱法灵敏度和选择性都比较高,对于基质复杂样品的检测具有明显的优势,是目前最常用的检测方法。 细胞的破碎与分离是代谢物的提取和分析中的重要步骤。高速动能处理技术是近一两年发展起来的一种新型的高科技的前处理方法。它通过一种极速的均质技术将鱼粉进行细胞破碎与分离,便于代谢物的提取。 鱼粉是由新鲜鱼类经过酶解或者蒸煮、胶磨、均质、喷雾干燥、过筛等一系列的程序生产的食品配料。其最大的特点是可以溶于水,既保留了天然鱼肉的风味,又富含营养。经过研究表明,鱼粉中粗蛋白的含量在50%以上,粗脂肪10%左右,氨基酸含量在40%-78%左右,其中人体必需氨基酸甘氨酸、精氨酸和脯氨酸含量较高。由于鱼粉在加工的过程中添加盐、防腐剂、增香剂等,导致样品基质复杂,在进行提取检测的过程中会出现分层不明显,油脂含量高等现象,难以保证检测过程中的准确性和灵敏性。目前关于鱼粉中硝基呋喃类代谢物的前处理几乎不涉及对样品的处理,因此建立一种新型的鱼粉高速动能处理技术对于硝基呋喃类代谢物的检测具有重要的研究价值和意义。本文通过高速动能前处理技术,同位素内标法,高温水解衍生快速处理。乙酸乙酯提取,正己烷除油,多重反应检测处理,从而建立一种样品前处理简单、提取速度快、净化效果好、选择性和灵敏度高的鱼粉中硝基呋喃代谢物的新型检测方法。[b]1实验部分[/b]1.1 主要仪器和试剂 Agilent1260-6460液相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦公司);高速动能仪(美国);Sigma3K15离心机(德国);IKA RV10旋转蒸发仪(德国);恒温水浴锅;涡旋混合器XW-80A(中国);电子天平Secura224-1cn(瑞士);pH计;Milli-Q去离子水发生器(美国Millipore公司)。 硝基呋喃类药物的标准品;3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)、氨基脲(SEM)以及各自的同位素内标(纯度大于99%,均购至德国Dr.Ehrenstorfer GmbH);2-硝基苯甲醛;甲醇、乙腈;甲酸铵、甲酸(HPLC级,);乙酸乙酯、正己烷、四氯化碳、氢氧化钠、盐酸、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾均为分析纯;超纯水(18.2ΜΩ)。1.2 标准溶液的配制 四种硝基呋喃代谢物标准贮备液:准确称取适量的硝基呋喃代谢物标准物质用乙腈配成1.0mg/ml的标准储配液,-18℃冷冻避光保存,有效期为三个月。四种硝基呋喃代谢物混合标准工作液(1.0μg/ml):取适量的硝基呋喃代谢物的标准贮备液用乙腈稀释成1.0μg/ml的混合工作使用液,-18℃冷藏避光保存,有效期为一个月,使用前回到室温左右。 氘代内标混合液储备液(0.1mg/mL):分别准确氘代内标物用乙腈溶解,配制成0.1mg/mL的标准储备液,-18℃冷冻避光保存,有效期为6个月。 氘代内标混合工作使用液(1mg/L):准确吸取一定量的氘代内标混合工作储备液用乙腈稀释成浓度为1mg/L的混合工作使用液,冷藏避光保存,有效期为1个月。 2-硝基苯甲醛衍生溶液:准确称取0.15g 2-硝基苯甲醛,用甲醇定容至10mL,现用现配。1.3 样品的前处理1.3.1 样品的水解和衍生 取一定的样品经过高速动能仪进行60s高速均质破碎。称取1.0g经过高速动能破碎的样品于50ml的离心管中,加入10ml的0.125mol/L的盐酸溶液,涡旋混匀1min,加入100ul2-硝基苯甲醛衍生试剂60℃恒温水浴衍生2h。1.3.2 提取 取出样品,冷却至室温。用2mol/L的氢氧化钠和1mol/L的磷酸氢二钾调节pH值至7.2左右。离心,收集上清液加入15ml的乙酸乙酯震荡30min,离心,转移上清液至另一离心管中,残渣继续用乙酸乙酯提取一次,合并清液。向上清液中加入15ml的正己烷震荡10min,离心,弃去正己烷层,重复上述操作一次。最后收集的清液于40℃条件下旋转蒸发至干,用1ml甲酸(0.2%)2.5ml的液态混合净化剂(正己烷:四氯化碳=1:1)转移至离心管中,超声,涡旋,离心,上清液过0.22μm滤膜过滤上机待测。1.3.3 UPLC色谱条件 Agilent超高效液相色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C[sub]18[/sub](1.8μm,2.1mm×50mm) 柱温:30℃;进样体积:2μL;流速:0.4ml/min;后运行:2min。梯度洗脱条件见下表1[align=center]表1 液相色谱洗脱条件[/align][align=center]Table 1 HPLCgradient elution program[/align][table][tr][td][align=center]时间(min)[/align][/td][td][align=center]A(0.1%甲酸水含乙酸铵)[/align][/td][td][align=center]B 乙腈[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]3.0[/align][/td][td][align=center]70[/align][/td][td][align=center]30[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5.1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]8.1[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]8.2[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]10[/align][/td][/tr][/table]1.3.4 质谱条件 离子源:电喷雾离子源;监测方式:多重反应检测;毛细管电压:4000V;离子源温度:350℃;脱溶剂气压力:40psi;脱溶剂气流量:11 L/min。质谱条件见下表2。[align=center]表2 硝基呋喃代谢物MRM 分析参数[/align][align=center]Table 2 Analysis parameters of nitrofuran metabolites class MRM[/align][table][tr][td][align=center]project[/align][/td][td][align=center]parent ion[/align][/td][td][align=center]Daughter ion[/align][/td][td][align=center]energy/v[/align][/td][td][align=center]fragmentor/v[/align][align=center] [/align][/td][td][align=center]pattern[/align][/td][td][align=center]acceleration voltage/v[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AOZ[/align][/td][td][align=center]236.1[/align][/td][td][align=center]133.8[/align][/td][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AOZ[/align][/td][td][align=center]236.1[/align][/td][td][align=center]103.8[/align][/td][td][align=center]17[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]AOZ-D4[/align][/td][td][align=center]240[/align][/td][td][align=center]134[/align][/td][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AMOZ[/align][/td][td][align=center]335.1[/align][/td][td][align=center]291.2[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]110[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AMOZ[/align][/td][td][align=center]335.1[/align][/td][td][align=center]261.9[/align][/td][td][align=center]12[/align][/td][td][align=center]110[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]D5-AMOZ[/align][/td][td][align=center]340[/align][/td][td][align=center]296[/align][/td][td][align=center]8[/align][/td][td][align=center]110[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AHD[/align][/td][td][align=center]249[/align][/td][td][align=center]133.9[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AHD[/align][/td][td][align=center]249[/align][/td][td][align=center]104[/align][/td][td][align=center]18[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] AHD-13C3[/align][/td][td][align=center]252[/align][/td][td][align=center]134[/align][/td][td][align=center]7[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]SEM[/align][/td][td][align=center]209[/align][/td][td][align=center]192[/align][/td][td][align=center]6[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center] SEM[/align][/td][td][align=center]209[/align][/td][td][align=center]165.9[/align][/td][td][align=center]9[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]SEM-C3,15N2[/align][/td][td][align=center]212[/align][/td][td][align=center]168[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][td][align=center]90[/align][/td][td][align=center]positive[/align][/td][td][align=center]3[/align][/td][/tr][/table][b]2结果与分析[/b] 2.1样品处理 鱼粉是一种基质复杂的粉状物质,大多数实验室是不经过样品处理的。硝基呋喃类在体内代谢迅速,代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成结合态,也就是所谓的硝基呋喃代谢物。该代谢物比较稳定可以长期保持稳定状态,从而可以在人体内长期驻留。普通的处理很难将硝基呋喃类药物和蛋白质分离。本实验通过一种新型的高速动能仪是样品在极短的时间可以进行高速的均质使样品高速分散,造成组织和细胞破碎,代谢物的流出,有利于提取。对比经过高速动能处理后的样品的提取率和回收率,数据表明经过处理的样品很少出现乳化现象,提取率也高。本实验采用高速动能处理时间短、提取率高、很大程度避免了基质复杂提取过程中造成的乳化现象,非常适合于鱼粉中硝基呋喃代谢物类的检测。2.2 酸解、衍生化 四种硝基呋喃代谢物分子质量相对比较小,进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析时,在这个质量轴范围内易受低端分子离子的影响,同时这一段背景干扰比较大,对定性和定量分析造成一定程度的干扰。硝基呋喃代谢物在酸性条件下可以和蛋白质分离加入2-硝基苯甲醛衍生试剂后可以和其结合形成比较大的分子团避开小分子离子的干扰,获得较高的灵敏度和特异性。而衍生需要在一定的温度和时间条件下才可以,目前最常用的是37℃水浴振摇16h,耗时长,出现问题给检测工作造成很大的困扰。本实验对比不同的水浴温度和水浴时间,最终确定最佳条件,节省了检测时间 (见图 1)。[img=,690,349]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707020909_01_2984502_3.png[/img]2.3线性和回收率 在对复杂基质进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS分析时常会出现基质效应,影响定量分析的准确性和精明度。本实验采用同位素内标法减少了外标法过程中存在的干扰,使定量变得更准确。分别对0.2μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、5μg/L的基质混合标准溶液进行测定,四种硝基呋喃代谢物的线性范围、线性方程、相关系数、检出限和定量限见下表3。结果表明:四种代谢物线性关系良好,检出限为0.3μg/L,相关系数均大于0.990。分别对低、中和高三个浓度进行加标回收,按照本方法进行提取、衍生和测定,平行测定3此,计算其回收率。采用统一添加水平的样品连续测定6次,计算其稳定性。结果见表4,四种硝基呋喃代谢物的平均回收率在91.7-105.2%之间,相对偏差小于3.10%,该方法适用性良好。[align=center]表3 鱼粉中四种目标物的线性范围、线性方程、相关系数、检出限和定量限[/align][align=center]Table Linear ranges,regression equations,LODs and LOQs for 4 analytes in samples[/align][table][tr][td]Analyte[/td][td]Linear ranges/(μg/L)[/td][td]regression equations[/td][td]R2[/td][td]LOD/(μg/Kg)[/td][td]LOQ/(μg/Kg)[/td][/tr][tr][td]AOZ[/td][td]0.2~5[/td][td]y=0.822736x-0.006286[/td][td]0.9997[/td][td]0.05[/td][td]0.20[/td][/tr][tr][td]AMOZ[/td][td]0.2~5[/td][td]y=2.515006x-0.022236[/td][td]0.9989[/td][td]0.05[/td][td]0.20[/td][/tr][tr][td]AHD[/td][td]0.2~5[/td][td]y=0.837220x+0.049223[/td][td]0.9997[/td][td]0.20[/td][td]0.50[/td][/tr][tr][td]SEM[/td][td]0.2~5[/td][td]y=2.210855x+0.033769[/td][td]0.9967[/td][td]0.20[/td][td]0.50[/td][/tr][/table][align=center]表4 样品的添加回收和精密度实验数据[/align][align=center]Table 4 Recoveries and repeatabilities for 4 analytes in sample[/align][table][tr][td][align=center]Analyte[/align][/td][td][align=center]Added/(μg/kg)[/align][/td][td][align=center]Recovery/%[/align][/td][td][align=center]RSD/(%,n=6)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]AOZ[/align][/td][td][align=center]0.20,0.50,1.00[/align][/td][td][align=center]91.7,94.3,97.2[/align][/td][td][align=center]2.34,2.56,2.92[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]AMOZ[/align][/td][td][align=center]0.20,0.50,1.00[/align][/td][td][align=center]92.0,93.1,99.3[/align][/td][td][align=center]2.41,2.85,2.91[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]AHD[/align][/td][td][align=center]0.20,0.50,1.00[/align][/td][td][align=center]94.6,98.7,105.2[/align][/td][td][align=center]2.69,2.19,3.10[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]SEM[/align][/td][td][align=center]0.20,0.50,1.00[/align][/td][td][align=center]82.9,95.9,96.9[/align][/td][td][align=center]2.58,2.34,2.90[/align][/td][/tr][/table][b]3结论[/b] 本方法通过引用一种新型的处理样品的技术高速动能仪,使样品在极短的时间里达到高速分散,不仅可以提高提取率而且避免了后续提取过程中出现的乳化现象。本实验称取经过高速动能仪处理过的样品加入同位素内标,加酸使呋喃代谢物和蛋白质分开,加入衍生剂2-硝基苯甲醛在60℃水浴条件下震荡衍生2h,调pH值,正己烷除油,乙酸乙酯提取,液态净化剂净化,液相色谱-串联质谱分析,建立了检测鱼粉中四种硝基呋喃代谢物的高速动能处理方法。该方法采用一种新型的分散均质技术、优化水解衍生条件,具有耗时短、处理过程简单、提取率高、灵敏度好、检出限低等优点,能够满足国内外对硝基呋喃代谢物限量的要求。
以前没做过硝基呋喃检测,弱弱的问几个问题:1.配制1.0mg/mLSEM.HCl和AHD.HCl标准溶液溶液,称取固体标准SEM.HCl和AHD.HCl 是10mg还是14.9mg和13.2mg啊?2.磷酸氢二钾溶液起什么作用啊?浓度是1.0mol/L还是0.1mol/L的啊?调节PH值还用到NaOH吗?3.2-硝基苯甲醛一定要现配现用吗?还是配一次可以用几天呢?谢谢各位了!
请教下,我们做生食水产中硝基呋喃,是按照GB/T 21311-2007 动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法 高效液相色谱/串联质谱法 ,我昨天在配置好的对照品溶液中,加了大概10倍量的邻硝基苯甲醛,37度过夜衍生,结果今天连母离子都找不到,想请教下各位是怎么做的。
做硝基呋喃四种代谢物分析,SEM、AOZ、AHD都很稳定,就是AMOZ有时会走的出来,有时一个标准系列都不出峰,想问一下大家意见,是什么原因,怎样解决这个问题.谢谢各位!!
广州市食安办对散装熟食抽检时发现,好又多超市的1批次散装烤鸡检出违禁药物呋喃唑酮的代谢物AOZ。呋喃唑酮是硝基呋喃类药物的一种,不时在水产品中被检出。以往抽检结果的发现▲ 2014年8月,深圳市食药局开展“清水”专项执法监督抽查行动对水产品质量安全进行抽检。 ● 抽查了121批次水产品,其中2批次淡水鱼检出硝基呋喃代谢物(详情可回看我们微信平台9月4日的信息)。▲ 2013年9月,深圳市食品安全监管局开展水产品批发市场专项执法抽检。 ● 抽检结果显示,罗湖区一水产批发行中黄骨鱼内检出硝基呋喃代谢物。▲2013年9月,青岛市食安办公布流通领域水产品抽检结果。 ● 抽查了140批次水产品,其中2批次检出呋喃唑酮代谢物(AOZ)超标。硝基呋喃类药物 呋喃唑酮与呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮四种药物统称为硝基呋喃类药物,是广谱抗菌药。 硝基呋喃类药物不稳定,动物摄入后容易在体内生成对应的四种代谢产物,从而残留在动物源性食品中,并通过食物链传递给人类。硝基呋喃类药物及其代谢物http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/GnnTib8oQtKAyZbYiaI2srzGTWCAEXfO5obP7RNtJqDwYYMFiahdbXYkQUBDU1ll5WD0ZrHwy3787WbB2CZia1RCzw/0主要国家和地区的规定 上世纪90年代,硝基呋喃类药物被发现对人体有一定毒副作用,目前已被多个国家和地区列为禁止在食品和动物中使用的兽药。1美国 FDA“联邦法规21章”(21CFR530.41)规定食源性动物禁止使用呋喃唑酮和呋喃妥因。2欧盟 (EC) No 470/2009《动物源食品中药理活性物质的残留限量》规定动物源性食品中不得检出硝基呋喃类药物。3韩国 2002年版《食品公典》规定猪肉中不得检出呋喃唑酮。 4中国 2002年12月24日发布的中华人民共和国农业部公告第235号及2005年10月28日发布的中华人民共和国农业部公告第560号规定,硝基呋喃类药物为在饲养过程中禁止使用的药物,在动物性食品中不得检出。2010年3月22日卫生部发布的《食品中可能违法添加的非食用物质名单(第四批)》中,明确将硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因列为非食用物质。http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/MVPvEL7Qg0EPD5jh0tV8WnQUh5DoR7UqXe88UP9HuYEcO8vV2H4JYaRAAF8m0dg1916mgEu3ia5MggE6TGEkDog/640 给企业的提示♥ 提高警惕,加强原料的质量监控,对动物源性食品,可将违禁兽药纳入重点监控因素。♥ 可要求供货商提供权威机构出具近期的、覆盖违禁兽药的产品合格证明材料。♥ 加强原料的自我检验工作,如企业自身无检测能力,可委托有资质的检测机构进行检验。
如题,请问一下各位老师,测定淡水鱼和淡水虾的硝基呋喃代谢物是用的什么标注呢?
各位大侠求助啦 本人最近在做硝基呋喃代谢物,发现标准品不能溶解。不知道各位大侠都用什么溶的,甲醇乙腈都用过就是很难溶啊。。。。。。。还有最后这四种代谢物打出来的母离子都是一样的,这是什么问题啊? 跪 求各位大侠
单位开展这个项目,但是目前没有呋喃代谢物的标准对照品,问了几家供应商都没有,不知道大家的都在什么地方买的,有没有电话可以联系
硝基呋喃原药和其代谢物有什么区别呀?标准中使用的标准物质是原药还是其代谢物呀?
目前,我正在作肉中硝基呋喃类检测,遇到了一些问题,烦请各位大侠帮忙。拜谢了!!1。内标SCA-13C15N2和国标中的SEM-13C15N是同一种物质吗?检测时的母离子和子离子和国标上的数值一样吗?2。我按照国标配置呋喃妥因和呋喃西林储备液时,怎么不溶于乙腈,各位大侠是用的什么溶剂,浓度是多大呢?3。衍生化后,我的信号在50ppb时比较低,不知道各位大侠都能将标准的溶液(不是基质加标的溶液)做到多低的浓度?4。最后,大家都是怎么处理避光操作的啊??再次感谢各位大侠!!!!
正在做硝基呋喃扩项,机器是Waters的TQ-S,第一次衍生的时候,是把内标和标样分开衍生的,用的农业部781公告,具体操作是硝基呋喃四种标样(Dr.E的固体标样),用乙腈稀释,母液100ug/mL,吸10uL50mL离心管,加入4mL水,再加0.5mL的盐酸,再加150微升0.1mol/l的邻硝基苯甲醛,涡旋振荡之后放入37℃恒温培养箱,16h后加磷酸氢二钾,然后用NaoH调pH。第一次衍生的时候,AHD和SEM的内标没有响应。后来重新配标液,继续衍生的时候,出了2-NP-2SCA的所有物质都出峰了,响应都很好。然后再配SEM单标衍生,已经配到1000-10000ppb,进0.1微升,都没任何响应。前后已经做了10天了,求各位大神指点。图如下,求版主指点!