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四氢非洲防己碱对照品

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  • 【第三届原创参赛】黄连中非洲防己碱色谱条件浅析

    【第三届原创参赛】黄连中非洲防己碱色谱条件浅析

    维权声明:本文为holiogodness原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。黄连中非洲防己碱色谱条件浅析背景介绍 黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云南黄连Coptis teetoides C.Y.Cheng的干燥根茎。以上三种分别习称“味连”、“雅连”、“云连”。黄连苦、寒。归心、脾、胃、肝、胆、大肠经。能够清热燥湿,泻火解毒。用于湿热痞满,呕吐,泻痢,黄疸,高热神昏,心火亢盛,心烦不寐,血热吐衄,目赤吞酸,牙痛,消渴,痈肿疔疮,外治湿疹,湿疮,耳道流脓。 黄连中生物碱是黄连中的主要活性成分,因此建立黄连中生物碱含量测定方法尤为重要, 为黄连及其制剂的工艺研究与质量控制提供评价指标与评价方法。在黄连属植物中发现的生物碱,绝大部分为苄基异喹啉类,如:原小檗碱类、阿朴菲类、双苄基异喹啉类、苯菲啶类等,其中原小檗碱类又包括有原小檗碱型、甲基原小檗碱型、假原小檗碱型、氧化原小檗碱型和四氢原小檗碱型等,这些大多是季铵型生物碱。 以下是黄连中含量较高生物碱的结构式(第4个为非洲防己碱): http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/10/201010191307_252215_2165312_3.jpg非洲防己碱色谱条件 非洲防己碱是黄连中分离得到的季铵型生物碱中的一个(第四个结构)。 此图为非洲防己碱三维液相分析图谱,色谱条件(乙腈:水=4:6;甲酸调PH=3) 色谱柱:YMC C18(250×4.6mm,5μm); 检测器:紫外 流速:1ml/min 温度:30http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/10/201010181250_252050_2165312_3.jpg谱图分析及改善 本人曾一度认为样品已变,之后查阅文献才分析得出结论:非洲防己碱为季胺型生物碱,其存在解离与游离两种不同的形式,若色谱条件不能满足,非洲防己碱只存在一种形式,就有可能一个化合物出现两个色谱峰。故季胺型生物碱色谱分析时要求流动相中加入离子对试剂SDS,使其只存在一种形式而呈现单峰。色谱条件: 流动相: 0.05mol ·L - 1 磷酸二氢钾溶液(磷酸调节pH值至3.0)-乙腈( 60∶40,含SDS 1.0g/L); 流速: 1.0ml/min; 检测波长:345nm; 色谱柱: YMC C18(250×4.6mm,5μm); 检测器: 紫外 室温: 30℃ 下图为非洲防己碱二维分析图谱:(色谱条件如上所述)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/10/201010192207_252330_2165312_3.jpg小结与讨论 此色谱条件配制繁琐,且需现配现用。若长期放置会影响分析结果。SDS加入量会影响出峰时间,SDS增多,出峰时间提前,最佳浓度为1.5g/ml。SDS最好先加入到有机相中,否则可能会出现不溶.参考文献胡 敏,黄连的生药学鉴定,Strait Pharmaceutical Journal,2009,Vol21(14):89- 90

  • 【原创大赛】原创-非洲猪瘟自检实验室试剂选择参考

    [align=center]原创-非洲猪瘟自检实验室试剂选择参考[/align]非洲猪瘟自检实验室,指的是屠宰场、食品加工企业、种猪场、规模猪场,在国家有关部门要求下,建立的以非洲猪瘟病毒核酸检测为主的微型实验室。这些实验室以前大多没有分子生物学检测基础和经验,对于如何选择试剂心中无数。下面提供一些选择试剂的看法,供参考:一、抗凝剂非洲猪瘟病毒核酸检测,对于屠宰场和种猪场、规模猪场来说,样品一般选择EDTA抗凝血。对于种猪场和规模猪场来说,采样量不大,推荐采购EDTA抗凝管。对于屠宰场来说,采购抗凝管确实方便,但也确实不便宜。农业农村部要求屠宰场采血做到全覆盖,试想一下:每支EDTA抗凝管成本约1元,屠宰场每天屠宰1000头,一年的抗凝管成本就是36万元。因此,在屠宰场看来,抗凝管是“想说爱你不容易”。在控制成本的策略下,自行配制抗凝剂成为不二之选。一般认为,1.5mg EDTA钠盐可以阻止1mL血液凝固。因此,每1mL血液需要用15 mg/mL EDTA钠盐溶液0.1mL。配制方法:(1)首先配制生理盐水溶液:取8.5g氯化钠,溶于1000mL纯水中;(2)配制EDTA溶液:取EDTA钠盐15g,溶于1000mL生理盐水溶液中,此时EDTA浓度为15mg/mL;(3)用法:取EDTA溶液0.1mL,置于塑料离心管或其它容器中,倾斜放置于37℃至45℃烘箱中烘干备用,可抗凝1mL以内的血液。使用方法:采血后立即将血液注入该离心管中,颠倒数次后混匀待用。如需抗凝更多血液,可按比例增加EDTA溶液用量。二、提取及扩增试剂1、提取试剂目前自检实验室普遍采用所谓的免提试剂盒,但站在专业的角度看,所谓的免提实际上是粗提,只不过省略了洗涤的过程。在此情况下,稀释核酸的试剂难免会对后续的扩增起到抑制作用。据报道,在不考虑试剂盒其他因素影响的情况下,提取核酸(也就是经过洗涤步骤)比免提取核酸(也就是未经洗涤步骤)灵敏度高10-100倍,反映到Ct值上,提取核酸比免提约低3-7左右。众所周知,屠宰场的待宰生猪,绝大多数是健康的。即便少数带毒,病毒量也极少。加上屠宰场采取混样检测,每个来源的生猪往往混成一份样品,有时混样比例甚至达到1:50。在此情况下,待检样品即使有病毒,其病毒核酸含量也被稀释得极低。如果再采用免提试剂盒,检测效果可想而知。综上,个人认为对于屠宰场,包括种猪场和规模猪场假定健康情况下,推荐采用核酸提取试剂盒,对于免提试剂盒应该慎用。2、扩增试剂目前荧光定量PCR扩增试剂已经非常成熟,一般的扩增试剂盒或者预混液,直接用于检测都能取得理想效果。因此,对于扩增试剂不需要过于纠结,选用推荐产品即可。3、引物探针及阳性对照在初步开放检测权限时,采用了“引物探针+提取试剂+扩增试剂”的模式,取得了不错的效果。在公布第二批试剂推荐名单前,多数实验室也是采用这种模式开展检测,包括参加各种比对试验。但遗憾的是,公布第二批名单后,引物探针及阳性对照不再供应,多数实验室也只能采购推荐名单产品。需要指出的是:目前市场上独立的DNA提取试剂盒,每个检测的成本约15元;通用的荧光定量预混液,每个检测的成本约10元;引物探针及阳性对照假设每个检测的成本为5元;合计每个样品提取及扩增的成本仅30元。而目前市场上非洲猪瘟检测试剂盒,供应价基本上每个检测在50-70元之间,无形之中增加了屠宰场及相关主体的经营成本。要知道,一个再小的屠宰场每天的检测量也有20份左右,每年增加的成本20份/天*360天*(20-40)元/份=(14.4-28.8)万元。基于此,强烈建议农业农村部考虑经济主体的经济承担能力,公布引物探针序列,并安排有关单位无偿或有偿供应阳性对照。三、消毒剂对于非洲猪瘟检测环境来说,极细小的污染都会造成实验结果的失败,甚至可能引起病毒扩散,因此做好消毒工作非常重要。对于非洲猪瘟来说,比较有效的消毒剂是0.8%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。配制方法比较简单,取8g氢氧化钠或氢氧化钾溶于水即可。需要注意的是,一次不能配制太多,最好几天内用完。而且配制好的溶液,应贮存于密封的塑料喷壶或塑料瓶内,随用随取。四、灭菌指示剂按照规定,非洲猪瘟检测剩余样品、检测产物及废弃物等,均需经高压灭菌后进行无害化处理。灭菌效果是否达到要求,是一个不容忽视的问题。灭菌效果监测包括物理监测、化学监测和生物监测。物理监测:每次灭菌时观察温度、压力和时间等灭菌参数是否符合要求。温度波动范围在+3℃以内,时间满足最低灭菌时间的要求。化学监测:每次灭菌时,取一片灭菌指示卡或灭菌指示胶带,随同灭菌物品一同放入灭菌器,待灭菌结束后观察是否按规定变色。生物监测:每隔一段时间,应进行高压灭菌器生物监测,取嗜热脂肪肝菌芽胞菌片按规定程序灭菌,结束后在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片,投入溴甲粉紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,经56℃±1℃培养7d,观察培养结果。生化监测要求较高,涉及微生物实验操作,自检实验室可委托相关单位开展检测。

  • 【第三节原创参赛】HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量

    【第三节原创参赛】HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量

    HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量摘 要目的 建立HPLC法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量的方法。方法 采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6mm×200mm,5µm)。流动相为甲醇:水(含0.03%二乙胺)=80:20,柱温30℃,流速1.0mL/min,检测波长282nm。结果 粉防己碱在6.25µg·mL-1~200µg·mL-1呈良好的线性关系(r = 0.9993),平均回收率为94.4%,RSD = 1.6%,三种方法测定防己黄芪方中粉防己碱的含量分别为0.506mg·mL-1 ,0.424mg·mL-1 和0.541 mg·mL-1 。结论 本法简便,准确,重现性好,可作为防己黄芪方中粉防己碱的含量测定方法。关键词:防己黄芪汤;粉防己碱;HPLC ;含量测定Determination of Tetrandrine in Stephania andAstragalus Combination by HPLCABSTRACTObjective: To establish a HPLC method for the determination oftetrandrine in Stephania and Astragalus Combination Method : A Hypersil BDS C18 chromatographic column (4.6mm×200mm,5µm)served as the solid phase;methanol-water(80:20)(0.03% diethylamine) was used as the mobile phase;the column temperature was at 30℃;the flow rate,1.0ml/min;UV detection wavelength[fo

  • 非洲猪瘟实验室检测资格开放时间表

    一、非洲猪瘟概述非洲猪瘟(African Swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)感染家猪和各种野猪(非洲野猪、欧洲野猪等)引起一种急性、出血性、烈性传染病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,该病也是我国重点防范的一类动物疫情。其特征是发病过程短,最急性和急性感染死亡率高达100%,临床表现为发热(达40~42℃),心跳加快,呼吸困难,部分咳嗽,眼、鼻有浆液性或粘液性脓性分泌物,皮肤发绀,淋巴结、肾、胃肠粘膜明显出血,非洲猪瘟临床症状与猪瘟症状相似,只能依靠实验室监测确诊。2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。目前,我国内地各省(市、自治区)均有非洲猪瘟疫情报告。二、实验室检测资格开放时间表1、2018年8月3日前,各实验室在我国确诊首例非洲猪瘟疫情前,有关部门对非洲猪瘟的检测并未明确进行限制。但对于含有活病毒的感染性材料,相关法律法规和文件规定必须在BSL-3实验室进行。2、2018年8月5日,指定实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟防治工作的紧急通知》,规定“除我部指定的实验室外,任何单位和个人不得擅自保存病料,不得从事疑似含有非洲猪瘟病毒样品的实验活动。”指定的实验室包括:中国动物卫生与流行病学中心(国家外来动物疫病研究中心,简称动卫中心)、中国动物疫病预防控制中心、中国兽医药品监察所、中国农科院哈尔滨兽医研究所、中国农科院兰州兽医研究所、军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所。3、2018年9月5日,省级实验室农业农村部下发《关于开展非洲猪瘟专项监测的通知》,决定各省、自治区、直辖市和新疆生产建设兵团省级畜牧兽医主管部门各推荐一个承担非洲猪瘟专项监测工作的实验室,并于2018年9月6-11日参加中国动物疫病预防控制中心组织的实验室检测能力比对。此后,通过能力比对的省级实验室,可开展非洲猪瘟实验室检测工作。4、2018年10月25日,其他实验室农业农村部下发《关于做好非洲猪瘟实验室检测工作的通知》,规定“现承担实验室检测任务的各省级动物疫病预防控制机构根据工作需要,并经省级畜牧兽医部门批准,可选择辖区内具有相应设施设备和专业技术人员,管理体系健全,近三年内未发生任何生物安全事故,具有生物安全二级或以上的实验室分担样品检测任务。受委托实验室可为高等院校、各级动物疫病预防控制机构、第三方检测机构等符合条件的实验室。”至此,各省(市、自治区)将非洲猪瘟检测权限逐渐下放至有相应管理和检测能力的实验室。实际操作中,一般是先下放至各地级市兽医实验室,然后逐步下放至县(市、区)实验室、第三方检测机构等。5、2019年1月2日,屠宰场自检农业农村部公告第119号规定:“生猪屠宰厂(场)应当在驻场官方兽医组织监督下,按照生猪不同来源实施分批屠宰,每批生猪屠宰后,对暂储血液进行抽样并检测非洲猪瘟病毒。经PCR检测试剂盒或免疫学检测试纸条检测为阴性的,同批生猪产品方可上市销售。其中,经PCR检测为阴性的,有关生猪产品可按照规定在本省或跨省销售;经免疫学检测试纸条检测为阴性的,有关生猪产品仅可在本省范围内销售。”并规定上述措施自2019年2月1日起执行。2019年3月13日农牧发7号《加强屠宰环节非洲猪瘟检测工作的通知》中指出屠宰企业开展自检,自建PCR实验室或委托实验室检测,要求生猪进场前以车为单位采集全部生猪血液样品,均匀混合后检测。跨省销售生猪产品和年屠宰10万头以上的屠宰企业以及生猪屠宰、加工一体化企业最迟于4月1日前开展非洲猪瘟自检;年屠宰5万头以上的屠宰企业最迟于5月1日前开展自检;其他屠宰企业最迟于7月1日前开展自检。6、2019年4月3日,猪肉制品加工企业自检市场监管总局、农业农村部和工业和信息化部发布《关于在加工流通环节开展非洲猪瘟病毒检测的公告》,要求猪肉制品加工企业、生猪产品经营者采购生猪产品应当批批查验其非洲猪瘟病毒检测结果(报告),不得采购没有非洲猪瘟病毒检测结果(报告)的生猪产品。猪肉制品加工企业应当参照《农业农村部办公厅关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知》(农办牧〔2019〕3号)和农业农村部第119号公告的要求,从2019年5月1日对生猪产品原料开展非洲猪瘟病毒核酸检测。7、2019年4月12日,规模猪场、种猪场自检农业农村部办公厅发布《关于加强养殖环节非洲猪瘟疫情排查工作的通知》,鼓励规模猪场、种猪场配置检测仪器设备,规范使用经农业农村部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法,自行开展非洲猪瘟检测,提高排查工作的针对性和有效性。

  • 非洲猪瘟

    18日早间,三全食品公告称,已第一时间将相关疑似批次产品从各销售渠道全部封存。2月15日,三全食品已将北京市场上的猪肉灌汤水饺全部下架。近百年全球未发生过人感染非洲猪瘟的情况“非洲猪瘟疫情不会影响猪肉及其制品的食用安全,可以放心食用猪肉及其制品。非洲猪瘟发现近100年来,全球范围内没有发生过人感染非洲猪瘟的情况。”王守伟说。中国动物卫生与流行病学中心副主任黄保续也表示,非洲猪瘟不是人畜共患病,不会感染人,同时它也不会感染除了猪之外的其他动物,不影响食品安全。世界卫生组织、联合国粮农组织、世界动物卫生组织等国际组织既没有把非洲猪瘟列入人畜共患病,也没有列入多种动物共患病。有关国家科研人员曾经将非洲猪瘟的病毒接种到犬、鼠、兔等10余种动物做感染实验,均未发生感染。“目前市场上销售的高温肉制品和低温肉制品,其加工条件均可使该病毒失活。而家庭烹饪鲜(冻)猪肉时,其温度往往在90—100℃,病毒更加容易失去活性,只要保证足够烹制时间就行。不必因为某个地方发生非洲猪瘟疫情就不吃猪肉,食堂暂停供应猪肉制品也是没有必要的。”王守伟介绍。中国有能力控制非洲猪瘟疫情2018年之前,我国一直没有非洲猪瘟。“非洲猪瘟于1921年在肯尼亚首次发现,截至2018年11月,已有60个国家先后发生非洲猪瘟疫情。但是,只有13个国家根除了疫情,根除时间为5至36年。”农业农村部畜牧兽医局副局长冯忠武说。“我国发生非洲猪瘟疫情以来,所有已发疫情均已得到及时有效处置,目前疫情呈点状发生,总体可控。但非洲猪瘟病毒在我国已形成了一定污染面,传统的生产、流通、消费方式短期内难以根本改变,疫情传播途径错综复杂,风险难以完全阻断,且目前尚无有效疫苗,以上因素共同决定了防控工作的复杂性和长期性。”农业农村部畜牧兽医局有关负责人表示。近日,农业农村部系统总结了非洲猪瘟疫病流行规律和近半年的应急处置经验,在原《非洲猪瘟疫情应急预案》和《非洲猪瘟防治技术规范(试行)》基础上,制定印发了《非洲猪瘟疫情应急实施方案(2019版)》,指导各地严格规范地做好疫情应急处置。

  • 【原创大赛】粉防己碱药理作用及测定方法

    【原创大赛】粉防己碱药理作用及测定方法

    粉防己碱药理作用及测定方法 粉防己碱 (汉防己甲素,tetrandrine,Tet)是从千金藤属防己科植物粉防己(Stephaniaterandra S.Moore) 的干燥块根中提取的一种主要活性成分,化学结构属双苄基异喹啉类化合物。近年来 ,国内外对其药理作用机制进行了较为广泛的研究。资料表明,Tet的抗心律失常、抗高血压、抗炎、抗肿瘤多药耐药性等作用均与其直接或间接拮抗钙通道和钙调蛋白有关 ,而且发现其在抗肝、肺纤维化方面有较强活性。其免疫机能调节及肿瘤防治等方面具有很好的应用景。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410241047_519756_2672081_3.jpg粉防己碱结构式1 粉防己碱药理作用1.1 心血管系统的作用(1) 抗心律失常:Tet可拮抗哇巴因及氯化钙诱发的心律失常 ,但对乌头碱及电刺激引起的心律失常拮抗作用较弱或不明显。其作用机制与维拉帕米相似 ,与拮抗Ca2+内流有关。(2) 抗心肌缺血、缺氧及再灌注损伤:Tet可减轻大鼠工作心脏缺血再灌注心肌损伤 ,促进冠脉流出液、心输出量的恢复 ;防止左心室舒张末期压和等容舒张左室内压下降时间常数的升高 ;抑制肌酸激酶释放 ,维持心肌线粒体Ca2+ 稳态,表明Tet尤对心肌舒张功能和冠脉循环的保护为优。(3) 降压作用:Tet可显著降低自发性高血压大鼠的平均动脉压 ,抑制主动脉平滑肌的持续性收缩。还有助于慢性肺源性心脏病时肺动脉高压的降低和肺腺泡内动脉构型改善。1.2 脑缺血缺氧作用 Tet可显著提高脑细胞对缺血缺氧的耐受性。Ca2+超负荷可导致大脑细胞损伤 ,细胞线粒体内Ca2+聚集致氧化磷酸化受阻 ,导致三磷酸腺苷 (ATP)耗竭 ; Ca2+激活蛋白酶和磷酸脂酶而破坏结构的完整性 ,加重脑细胞的损伤 ,加之乳酸中毒使脑细胞膜和血管通透性增加 ,引起细胞毒性脑水肿。Tet作为钙拮抗剂可阻止Ca2+ 内流 ,减轻脑水肿 ,一定程度上逆转了上述病理过程 ,对脑缺血损伤有明显的保护作用。1.3 [font=宋体

  • 河南认定13家非洲猪瘟社会第三方检测实验室

    从河南省农业农村厅兽医处获悉,河南省农业农村厅日前发布《河南省农业农村厅关于规范非洲猪瘟社会第三方实验室检测认定监管工作的通知》,组织开展2024年河南省非洲猪瘟社会第三方检测实验室认定工作。经认定,郑州牧康检测科技有限公司等13家非洲猪瘟社会第三方检测实验室合格。有效期自2024年1月4日起至2025年1月8日。[align=center][img=w700d1q75cms.jpg,600,303]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/noimg/145c7b7e-f12e-4f4a-b882-aa6b79099f69.jpg[/img][/align][align=center][img=w700d1q75cms (1).jpg,600,83]https://img1.17img.cn/17img/images/202402/noimg/6aea8ce6-23a5-4f3a-816a-2ff31efed256.jpg[/img][/align][size=14px][color=#707d8a][ 来源:人民日报客户端 ][/color][/size][size=14px][color=#707d8a][i]编辑:张圣斌[/i][/color][/size]

  • 防己黄芪汤改善类风湿性关节炎的关键靶点和生物活性成分

    [size=15px][font=宋体]类风湿性关节炎([/font][font=&]RA[/font][font=宋体])是一种严重的异质性自身免疫性疾病,防己黄芪汤([/font][font=&]Fangji HuangqiDecoction[/font][font=宋体],[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体])是一种用于治疗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的经典中药复方,由[/font][font=&]4[/font][font=宋体]种草药(防己、黄芪、白术、甘草)组成,效果令人满意。[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]以其补气强外、祛风祛湿的能力而闻名,但其治疗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的机制和生物活性化合物仍不清楚。[/font][font=&][/font][/size] [font=宋体]防己黄芪汤改善类风湿性关节炎的关键靶点和生物活性化合物,发现环氧合酶[/font][font=&]2[/font][font=宋体]([/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体])是[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]改善[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的关键靶点,粉防己碱([/font][font=&]Tetrandrine[/font][font=宋体])负责[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]对[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]作用的主要生物活性成分。机制上,粉防己碱与[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]的[/font][font=&]Tyr385[/font][font=宋体]残基结合,抑制[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]蛋白表达和抑制[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]的酶催化活性,减少前列腺素和炎性代谢物的产生,发挥抗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]作用。此外,[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]的作用优于汉防己甲素,表明[/font][font=&]FHD [/font][font=宋体]还含有其他化合物在[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]治疗[/font][font=&]RA[/font]时发挥作用,这体现了中医方剂治疗疾病的“多组分”特征。 [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]Highlights[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&]1[/font][font=宋体])[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]固定化磁珠的用于配体垂钓技术来识别作用于[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]的生物活性成分;[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=&]2[/font][font=宋体])粉防己碱([/font][font=&]Tetrandrine[/font][font=宋体])为防己黄芪汤([/font][font=&]FHD[/font][font=宋体])改善[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的生物活性成分;[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=&]3[/font][font=宋体])[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]的作用优于[/font][font=&]Tetrandrine[/font][font=宋体]表明[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]可能包含其他成分与[/font][font=&]Tetrandrine[/font][font=宋体]协同作用。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]COX-2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]蛋白是[/color][/font][font=&][color=#0070c0]FHD[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]治疗[/color][/font][font=&][color=#0070c0]RA[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的关键靶点[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体]作者首先通过网络药理学分析预测[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]改善[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的关键靶标,其中[/font][font=&]PTGS2[/font][font=宋体]为最核心靶点,[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]是[/font][font=&]PTGS2[/font][font=宋体]基因编码的蛋白酶,可能是[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]改善[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的关键靶标,且已有报道表明[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]是抗关节炎靶点,可以调节前列腺素的产生来抑制炎症。因此作者研究了[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]中作用于[/font][font=&]COX-2[/font]的生物活性成分 [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、通过[/color][/font][font=&][color=#0070c0]COX-2@MBs[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]对[/color][/font][font=&][color=#0070c0]FHD[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]进行配体捕捞和分析[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体]为了控制[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]提取液的质量,作者获得[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]提取液,质谱鉴定到[/font][font=&]23[/font][font=宋体]个特征峰,其中[/font][font=&]7[/font][font=宋体]个通过标准品确定为粉防己碱、防己诺林碱等。接着作者制备了[/font][font=&]cox-2[/font][font=宋体]固定化磁珠([/font][font=&]COX-2@MBs[/font][font=宋体]),将其与[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]溶液共孵育,并用[/font][font=&]UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url][/font][font=宋体]分析洗脱液,鉴定出[/font][font=&]11[/font][font=宋体]种成分,其中[/font][font=&]7[/font][font=宋体]个在洗脱液中含量较高,通过标准品鉴定为粉防己碱、汉防己丙素、防己诺林碱、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、甘草苷、甘草查尔酮[/font]B [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体外筛选对[/color][/font][font=&][color=#0070c0]COX-2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]酶活性有良好抑制作用的成分[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]利用商品化[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]抑制剂筛选试剂盒,测定了[/font][font=&]7[/font][font=宋体]种含量较高的成分的[/font][font=&]IC50[/font][font=宋体]值,其中粉防己碱、汉防己丙素、防己诺林碱、甘草查尔酮[/font][font=&]BIC50[/font][font=宋体]值均小于[/font][font=&]200μM[/font][font=宋体],防己诺林碱的[/font][font=&]IC50[/font][font=宋体]值最低,为[/font][font=&]17.25±1.16μM[/font][font=宋体],表明这[/font][font=&]4[/font][font=宋体]种成分对[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]酶活性有较强的抑制作用,是[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]中通过抑制[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]治疗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的潜在生物活性成分,但其抑制活性并不优于塞来昔布([/font][font=&]celecoxib[/font][font=宋体],对[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]具有选择性抑制作用,已被用于治疗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的一线药物,通过抑制[/font][font=&]COX-2 [/font][font=宋体]酶活性来抑制前列腺素的产生,从而有效缓解[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]患者的炎症症状)。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体内筛选对急性关节炎症有抑制作用的成分[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体]角叉菜胶诱导的急性水肿模型大鼠通常用于评价潜在的[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]选择性抑制剂如塞来昔布对急性炎症的抑制作用,作者发现虽然这[/font][font=&]7[/font][font=宋体]种成分均能特异性地与[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]结合,但只有粉防己碱一种成分不仅能抑制[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]酶活性,还能抑制急性炎症 [size=15px][b][font=&]5[/font][font=宋体]、粉防己碱作为[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]的主要生物活性成分通过[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]抑制胶原诱导性关节炎[/font][font=&][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体]心脏组织[/font][font=&]H&E[/font][font=宋体]染色结果显示粉防己碱不会引起[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠的心脏毒性(图[/font][font=&]5[/font][font=宋体])。粉防己碱可减轻[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠的爪水肿,显著减轻关节炎症,改善[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠的爪子和关节骨质量,降低[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠踝关节[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]水平。[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]显著改善了[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠的症状,降低[/font][font=&]CIA[/font][font=宋体]小鼠踝关节[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]水平,表明[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]是[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]治疗[/font][font=&]RA[/font][font=宋体]的关键作用靶点。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=宋体]值得注意的是,[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]组与中、高剂量粉防己碱组的[/font][font=&]AI[/font][font=宋体]评分及血清[/font][font=&]IL-6[/font][font=宋体]水平差异均无统计学意义,但低剂量粉防己碱组的这两项指标显著低于[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]组。结果表明,虽然[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]煎剂([/font][font=&]1.55 [/font][font=宋体]μ[/font][font=&]g/mL[/font][font=宋体])中粉防己碱的含量约为低剂量粉防己碱溶液([/font][font=&]1.25 mg/mL[/font][font=宋体])中粉防己碱的[/font][font=&]0.1%[/font][font=宋体],但[/font][font=&]FHD[/font][font=宋体]对胶原诱导的足部水肿和血清[/font][font=&]IL-6[/font][font=宋体]表达的抑制作用优于低剂量粉防己碱。[/font][font=&][/font][/size] [size=15px][font=宋体]此外,体外[/font][font=&]COX-2[/font][font=宋体]酶活性测定和体内角叉菜胶诱导的急性炎症试验结果表明,单独使用其他捕获组分的生物活性作用远弱于同剂量粉防己碱。结果表明,[/font][font=&]FHD [/font][font=宋体]中除了主要活性化合物粉防己碱外,还存在其他活性成分,可能与粉防己碱发挥协同作用,抑制[/font][font=&]RA[/font][font=宋体],体现了中药方剂治病“多成分”特点 [b]6、粉防己碱与COX-2蛋白结合方式的分子对接[/b] 最后,作者通过计算机模拟优化COX-2蛋白和粉防己碱的三维结构,研究了配体粉防己碱与受体COX-2的空间拟合度和能量匹配度,确定了它们的结合亲和力和结合模型。结合能为-7.35kcal/mol,粉防己碱与COX-2残基Thr212之间形成氢键。此外,粉防己碱与 COX-2 的残基 Tyr385结合,该位点被报道是COX-2 将花生四烯酸(AA)转化为前列腺素E2(PGE2)的酶催化位点之一。因此,作者推断粉防己碱竞争性地占据了AA在COX-2蛋白上的结合位点,从而减少前列腺素和炎性代谢物的产生,最终实现其抗类风湿关节炎作用 [/font][/size][/font]

  • 【原创大赛】非洲猪瘟自检实验室布局的思考

    【原创大赛】非洲猪瘟自检实验室布局的思考

    1、疫情严峻2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情,随后不断有疫情报告。2019年4月24日海南省万宁市和儋州市发生非洲猪瘟疫情,宣告内地31个省(市、自治区)无一幸免。2、自检要求农业农村部、市场监管总局等单位根据非洲猪瘟疫情态势,连续发布文件,要求屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场开展非洲猪瘟自检。那么,这些企业如何根据实际,合理布局自检实验室呢?3、条件有限根据有关规定,一个规范的分子生物学实验室,必须具备试剂制备区、标本制备区、扩增区和产物分析区,对于荧光定量PCR来说,扩增区和产物分析区可以合二为一。如此规定,对于上述企业来说,无疑是不现实的。[img=,690,447]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907032323464801_8900_1627156_3.jpg!w690x447.jpg[/img]4、因陋就简那么,如何在实验室面积不大和投入不多的情况下,尽可能防止分子生物学实验交叉污染和做好生物安全呢?一般来说,上述企业实验室能安排一间约20平方米的办公室,专门用来开展非洲猪瘟检测,已属不易。考虑到这些实验室一般都是利用成品检测试剂盒,采用核酸免提技术,简单地粗提核酸后加入体系即进行扩增,建议将实验室分为三个区,即缓冲区、核酸粗提区、扩增检测区。如下图所示:[img=,492,588]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907032324160321_4247_1627156_3.jpg!w492x588.jpg[/img]5、具体思路5.1缓冲区:设立缓冲区的目的,主要是防止交叉污染。进入缓冲区后,穿上鞋套,脱下外套,拉开推拉门进入核酸粗提区。5.2核酸粗提区:在此区域内应配备安全柜、实验台、试剂保存冰箱、金属浴或水浴锅、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、吸头等。进入该区域后,穿上工作服,戴上手套,在生物安全柜内进行核酸粗提工作。核酸粗提后,离开本区域前将工作服换下,拉开推拉门进入扩增和检测区。5.3扩增和检测区:在此区域内应配备实验台、荧光定量PCR仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]和高压灭菌器。进入本区域时换上本区专用工作服。将粗提后的核酸加入反应体系,放入荧光定量PCR进行扩增。扩增结束后,应将产物及废弃物放入高压灭菌器进行处理。离开本区域前将工作服换下。6讨论6.1本思路在条件有限的情况下,尽可能做到分区操作,并设立了缓冲间,最大程度避免了交叉污染的发生。6.2按照本思路设计时,核酸粗提区和扩增检测区之间并无缓冲。为解决这个问题,需要在以下几个方面予以注意:一是可以在扩增检测区增加一台排风扇,形成一定的负压,防止扩增检测区气流进入核酸粗提区造成污染;二是进入扩增检测区时,须提前打开排风扇形成负压,离开扩增检测区关上推拉门后方可关闭排风扇电源;三是千万不能打开扩增产物管盖,以免扩增产物逸散形成气溶胶污染;四是扩增结束后必须尽快对产物进行高压灭菌;五是离开一个分区前必须脱下本区专用工作服,进入一个分区后必须穿上本区专用工作服,避免不同分区工作服混用。只要通过种种防污染措施的实施,能最大程度避免交叉污染的发生,提高非洲猪瘟检测工作的质量。6.3尽管采取了种种预防措施,但毕竟本思路存在着先天的缺陷,有条件的实验室最好还是按照分子生物学的要求,进行严格的分区设计。

  • 非洲国家不比中国我们应该在旅行前准备些什么

    非洲国家不比中国我们应该在旅行前准备些什么  在去非洲旅游之前,有些要准备的东西也要留意一下,因为去非洲旅游,不比在家。所以一些个人生活中比较习惯的事情,未必大家都能想到,我们这里作为抛砖引玉,为大家提个醒,希望大家能因此想到更多,为大家的非洲旅游画上一个完美的句号。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R613150TN.jpg  非洲机场  行李重量  在去非洲旅游之前,大家肯定会带一些必要的换洗衣服,或者是洗漱用具等常用的物品,我们这里不是提醒您要带这些,而是提醒您,机场的行李托运是有重要要求的,每个人不得超过多少,所以,您在去非洲旅游之前,最好把您所乘坐的飞机的行李托运的重量问清楚,最好要留有富裕的,以便您回来的时候,买些旅游纪念品什么的。  带些小零食  非洲旅游国家不像是国内,随处可以买到你喜爱的零食,所以,爱吃些小零食的朋友们,最好提前准备一些,像是薯片啊,榨菜啊什么的,您喜欢的都可以带一些。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R6131G1J0.jpg  非洲的商店  生活用品要带足  年轻的女士们和男士们可以准备一些必要的生活用品,因为这些生活用品在中国可能很便宜,但是,在非洲就不见得了,因为,非洲的生活用品的价格往往是中国的3-4倍,如果您在旅行时这些用品用完了,那么在非洲买就不值得了。  在非洲旅游时千万不要理发  虽说大多数的游客不会选择在非洲旅游的过程中去理发,但是我们这里还是提醒大家一下吧,避免发生一些悲剧。因为非洲的许多国家都是不允许外国人经营美容美发生意的,所以,大街上的理发店都是当地人开的,再加上当地人的手艺不敢恭维,非洲又是个疾病高发的地方,万一划破了皮肤,造成不可估量的损失,谁负责呢。http://www.feizhoulvyou.com/uploads/allimg/130826/1-130R61320101O.jpg  小国旗  自备中国的小国旗  为什么要自备小国旗呢,主要是为了防患于未然,因为非洲这里政权更迭很容易引起动乱,危及外国人的生命安全。如果在非洲旅游期间发生了动乱,因为,中国在非洲人的眼中还是比较友善的,所以一旦发生动乱,多数情况下,中国国旗还是起作用的。  遭到抢劫时要怎么做  非洲国家的治安真是不敢恭维,如果您在旅游过程中遇到了这样的情况,请不要做任何动作,因为那样的话,很可能会为您带来不必要的伤亡。多数情况下,这些歹徒都是图财不害命的。所以正确的做法是,不要叫喊,迅速的将歹徒要的东西给他们,毕竟钱财乃身外物,保命是第一位的。之后记住他们的相貌特征,事后即使报警。  以上是我们为您总结的一些在纳米比亚旅游自由行的时候,应该注意的一些细节,希望能给您提个醒,祝您有一个安全舒适的非洲自由行。

  • 黄连-苦参不同配比中特征性成分的量-质变化相关性研究

    黄连味苦性寒,具有清热燥湿、泻火解毒的功效。《中国药典》2020年版规定黄连为毛茛科黄连属植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连C. deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云连C. teeta Wall.的干燥根茎。以上3种分别习称“味连”“雅连”“云连”,经课题组前期调研以味连产量最多,主产于我国重庆、湖北、四川等地[1]。现代研究表明,黄连含有多种活性成分,可发挥多种药理作用[2],包括抗炎、抗病毒、抗菌、抗癌、镇痛、抗抑郁、降血糖等作用,临床应用极广[3]。苦参性寒、味苦,为豆科苦参属植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根,主产于我国内蒙古、河南、山东、安徽等地[1],具有抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗炎、防治心力衰竭、心律失常及心肌缺血等多种功效[4-5]。 现代研究表明,生物碱类化合物是黄连及苦参的主要活性成分。苦参碱、氧化苦参碱可发挥抗炎、镇痛效果[6-7],其机制可能与降低促炎因子,升高抗炎因子有关;氧化苦参碱、苦参碱也可发挥抗肿瘤作用,其机制可能与抑制癌症基因表达,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞生长有关[8];而苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱也可对多种菌株具有一定的抑菌作用[9]。木兰花碱可通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)/鼠类肉瘤病毒癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)/单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)通路抑制结直肠癌SW480细胞的增殖和有氧糖酵解,从而发挥对结直肠癌的治疗效果[10];药根碱、巴马汀、表小檗碱、黄连碱、小檗碱可联合发挥降糖作用[11],其效果可能与调控丝氨酸-苏氨酸激酶1(serine/threonine kinase 1,LKB1)/ AMPK/CREB分子调节转录共激活剂2(CREB-regulated transcription coactivator 2,TORC2)信号通路抑制肝脏糖异生等有关[12];小檗碱具有抗炎作用,可保护螺旋神经节细胞免受巨细胞病毒诱导的凋亡作用,其机制与通过途径抑制线粒体活性氧的产生有关[13]。 除此之外,小檗碱、表小檗碱、巴马汀等生物碱类成分也可联合发挥抗心律失常作用[14]。基于此,选择苦参中苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱及黄连中木兰花碱、非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱来作为黄连-苦参药对的代表性药效成分,用于研究该类成分溶出量与药对配比的关系。药对作为中药配伍的最小单元,是复方研究的重要组成部分之一[15]。用于不同疾病的治疗时,不同量的配比会有不同效果的相关呈现,因此,首先需要对黄连-苦参药对配比的不同物质基础,即量-质[16]相关性进行剖析比较,为进行量-效[17]相关性提供依据,为临床合理配比提供参考[18]。 1 仪器与试药 1.1 主要仪器 Waters e2695型高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统,Waters 2998型二极管阵列检测器(PDA),美国Waters公司;BBA224S-CW型电子天平,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;TGL-16C型离心机,上海安亭科学仪器厂;EPED-E2-20TS型超纯水一体机系统,南京易普易达科技发展有限公司;GM-0.5B型真空泵,天津市津腾实验设备有限公司;KH-500V型超声器,昆山禾创超声仪器有限公司。 1.2 药品及试剂 1.2.1 药材与饮片 本研究所选择黄连(产地重庆石柱黄水,批号20230411)及苦参(产地内蒙古赤峰市,批号2020121604)药材,均经南京中医药大学药学院刘圣金教授鉴定,分别为毛茛科黄连属植物黄连C. chinensis Franch.的干燥根茎和豆科苦参属植物苦参S. flavescens Ait.的干燥根。 1.2.2 对照品 表小檗碱(批号J24HB186173)、盐酸小檗碱(批号S01A10K94340)、盐酸黄连碱(批号T21S11C125202)、药根碱(批号D18GB171805)、盐酸巴马汀(批号Z16J10X79792)、非洲防己碱(批号W14J8Z37548)、木兰花碱(批号R21M9F61834)、苦参碱(批号M14GB141405)、氧化苦参碱(批号G14N11KL130769)、槐定碱(批号F18F7S9784),HPLC质量分数均≥98%,均购自上海源叶生物科技有限公司。 1.2.3 试剂 乙腈、甲醇,色谱纯,安徽天地高纯溶剂有限公司;磷酸、盐酸、无水乙醇,分析纯,国药集团化学试剂有限公司;纯净水,屈臣氏集团(香港)有限公司;磷酸二氢钾,分析纯,南京化学试剂股份有限公司。 2 方法与结果 2.1 不同配比黄连-苦参药对指纹图谱的建立 2.1.1 色谱条件 色谱柱为Venusil XBP C18(2)(250 mm×4.6 mm,5 μm);柱温30 ℃;体积流量0.8 mL/min;流动相为乙腈-3 g/L磷酸二氢钾溶液(加入200 μL磷酸调节pH值),梯度洗脱:0~10 min,10%乙腈;10~25 min,10%~24%乙腈;25~35 min,24%乙腈;35~60 min,24%~35%乙腈;60~62 min,35%~60%乙腈;62~65 min,60%~10%乙腈;65~70 min,10%乙腈;分析时间70 min,进样量10 μL;检测波长220 nm。 2.1.2 混合对照品溶液的制备 取非洲防己碱、药根碱、表小檗碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱、木兰花碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐定碱对照品各适量,分别置于10 mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,即得各对照品储备液。分别取适量上述11种对照品储备液,置于同一10 mL量瓶中,加甲醇稀释并定容,制得上述成分质量浓度分别为0.20、0.16、0.24、0.25、0.25、0.44、0.26、0.21、0.80、0.36 mg/mL的混合对照品溶液。 2.1.3 供试品溶液的制备 制备黄连药材粉末(过二号筛)及苦参药材粉末(过三号筛),将上述黄连及苦参依照5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5共9个质量比例,进行称取后分别充分混合,并称取单一黄连药材粉末及单一苦参药材粉末作为对照药材,各比例药对总质量及单一药材质量均为12 g。每个比例平行称取各药对3份,将药对以10倍量水浸泡0.5 h后,煎煮1.5 h,取1次滤液;将滤渣加入8倍量水煎煮1.5 h,取2次滤液。将2次滤液混合后抽滤,12 000 r/min离心(离心半径10.4 cm)10 min,取上清液,取1 mL上清液加入4 mL甲醇,以0.45 μm微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。 2.1.4 精密度试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定6次,考察特征峰的保留时间和峰面积一致性。以盐酸小檗碱的保留时间和峰面积为参照分别计算相对保留时间及相对峰面积。计算得各共有峰相对保留时间的RSD<0.20%,相对峰面积的RSD<2.13%,结果表明仪器精密度良好。 2.1.5 稳定性试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.1”项下色谱条件每隔4 h进样1次,共测定24 h,考察特征峰保留时间和峰面积的一致性。以盐酸小檗碱的保留时间和峰面积为参照分别计算相对保留时间及相对峰面积。计算得各共有峰相对保留时间的RSD<0.21%、相对峰面积的RSD<2.46%,结果表明该供试品溶液在室温放置24 h内稳定性良好。 2.1.6 重复性试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,平行制6份,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,分别按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,考察特征峰保留时间和峰面积的一致性。以盐酸小檗碱的保留时间和峰面积为参照分别计算相对保留时间及相对峰面积。计算得各共有峰相对保留时间的RSD<0.18%、相对峰面积的RSD<1.57%,表明该方法重复性较好。 2.1.7 黄连-苦参药对指纹图谱的建立及相似度评价分析 将黄连及苦参药材依照“2.1.3”项下方法制备成供试品溶液(S1~S9依次为黄连-苦参比例为5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5),再按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,记录色谱图。将图谱输入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》,设置编号S7的样品(黄连-苦参为1∶3)图谱为参照,采取中位数法[19],将时间窗宽度设置为0.1 s,进行多点校正,建立黄连-苦参药对的HPLC指纹图谱和对照指纹图谱(R,图1),指认9批黄连-苦参药对的16个共有峰。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》对9批黄连-苦参药对进行相似度评价[20]。结果显示,9批黄连-苦参药对和R之间的相似度均大于0.95,这表明各批次黄连-苦参药对的相似性较好,整体质量稳定,可以用于考察黄连-苦参药对水煎液。以分离度较好、峰面积较大的小檗碱(峰16)为参照峰(S),得到9批黄连-苦参药对16个共有峰相对保留时间的RSD为0.175%~0.894%,提示各批次黄连-苦参药对共有峰的保留时间稳定 2.1.8 黄连-苦参药对指纹图谱色谱峰归属认定 通过比对单味药的色谱峰[21],不同比例配伍黄连-苦参药对HPLC指纹图谱16个共有峰中峰2~6号共5个峰均来源于单味药苦参,峰1、7~16号共11个峰来源于单味药黄连(图1)。通过对比混合对照品溶液色谱图(图2)及黄连、苦参及样品HPLC叠加图(图2)对各样品指纹图谱的各峰进行定性认证[22],得到2、3、6号峰分别为苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱,属于单味药苦参;8、11~16号峰分别为木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱,属于单味药黄连。 2.1.9 黄连-苦参药对各共有峰相对峰面积差异分析 将各比例药对中黄连-苦参药对生药量以黄连、苦参单煎样品的生药量为标准,换算成一致的量,并以黄连及苦参单煎样品峰面积作为参比,比较不同配比黄连-苦参药对的共有峰相对峰面积,结果见表2。可知在不同程度配比下,各共有峰相对峰面积均有不同程度的变化,绝大部分表现出显著性差异。除属黄连药材的10、13号峰各相对峰面积相比药材单提均有所下降外,其余峰均表现为升高,表明配比后成分的溶出对苦参总体表现为促进作用,而对黄连的不同成分表现为促进和抑制的不同作用。1、5、7号峰在黄连-苦参为2∶1时相对峰面积最大;2~4、8、10号峰在黄连-苦参为5∶1时相对峰面积最大;11~16号峰在黄连-苦参为4∶1时相对峰面积最大;6号峰在黄连-苦参为1∶3时相对峰面积最大;9号峰在黄连-苦参为3∶1时相对峰面积最大,提示在方剂中使用不同配比黄连-苦参药对治疗疾病,可能与不同配比下药对中成分的溶出变化有关[23]。 2.2 不同配比黄连-苦参药对中差异性成分含量测定 2.2.1 色谱条件 按照“2.1.1”项下色谱条件进行测定。设定在波长为205 nm时,对苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱进行测定;在波长为220 nm时,对木兰花碱进行测定;345 nm时,对非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱进行测定。此时各指标性成分均为最大吸收波长。 2.2.2 混合对照品溶液的制备 依照“2.1.2”项下方法制备混合对照品溶液。 2.2.3 供试品溶液的制备 依照“2.1.3”项下方法制备9个比例的黄连-苦参药对供试品溶液,每个比例制备3个供试品溶液作为平行对照。 2.2.4 线性关系考察及检测限、定量限 对照品母液的配制:取苦参碱、槐定碱、氧化槐果碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱对照品各适量,分别置于10 mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,制得上述成分质量浓度分别为0.98、0.40、0.85、0.35、0.31、0.35、0.36、0.36、0.35、0.81 mg/mL的对照品溶液。 取各对照品母液,逐级稀释0、2、4、8、16、32、64倍,按照“2.1.1”项下色谱条件进行测定。以各差异性成分的质量浓度为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)绘制标准曲线,进行线性回归,得回归方程,结果见表3,表明各成分线性关系良好。 依照信噪比,即S/N为3∶1及S/N为10∶1对各成分的检测限及定量限进行检测,结果见表3。 2.2.5 精密度试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.1.1”项下色谱条件连续进样6次,记录各差异性成分的峰面积。结果显示,苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱峰面积的RSD分别为1.40%、2.13%、1.37%、2.11%、0.91%、0.69%、1.25%、1.19%、0.17%、0.14%,结果表明仪器精密度良好。 2.2.6 稳定性试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,于室温放置0、4、8、12、16、20、24 h,按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,记录各差异性成分的峰面积。结果显示,苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱峰面积的RSD分别为1.57%、2.24%、2.22%、2.46%、0.22%、0.16%、0.65%、0.05%、0.14%、0.20%,表明各差异性成分在室温放置24 h内稳定性较好。 2.2.7 重复性试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,按照“2.1.3”项下方法平行制备供试品溶液6份,再按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,记录各差异性成分的峰面积,并根据标准曲线计算含量。结果显示,苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱质量分数的RSD分别为1.16%、1.24%、1.33%、1.57%、1.05%、1.19%、1.42%、1.30%、1.21%、1.22%,表明该方法重复性良好。 2.2.8 加样回收率试验 依照黄连与苦参比例1∶3,精密称取黄连药材粉末3 g及苦参药材粉末9 g,平行称取6份,分别加入含有苦参碱0.31 mg、槐定碱0.20 mg、氧化苦参碱1.52 mg、木兰花碱0.07 mg、非洲防己碱0.08 mg、表小檗碱0.27 mg、药根碱0.06 mg、黄连碱0.22 mg、巴马汀0.21 mg、小檗碱0.79 mg的对照品溶液5 mL,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,记录各标志性成分的峰面积,并计算平均加样回收率。结果显示,苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的平均加样回收率分别为100.2%、100.1%、100.3%、100.2%、101.2%、100.7%、99.8%、101.1%、100.60%、101.0%,RSD分别为0.67%、0.97%、0.89%、0.97%、0.56%、0.70%、0.57%、0.71%、0.99%、0.85%,表明该方法准确度良好。 2.2.9 不同配比黄连-苦参药对水煎液成分含量测定及比较 取9个不同比例的黄连-苦参药对药材粉末,精密称定,按照“2.1.3”项下方法制备供试品溶液,再按“2.1.1”项下色谱条件进样分析,记录各差异性成分的峰面积,并根据标准曲线计算苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量。将各比例药对中黄连-苦参药对生药量以黄连、苦参单煎样品的生药量为标准,换算成一致的量,计算各特征性成分的含量。通过SPSS 27.0软件,对数据进行单因子方差分析和显著性检验[24],结果见表4。 对含量测定结果进行系统分析。黄连-苦参比例为4∶1时,所得非洲防己碱、表小檗碱、巴马汀、小檗碱含量为各比例最高,且黄连总生物碱含量最高,与单药材提取具有显著性差异(P<0.05);黄连-苦参比例为5∶1时,所得苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高,与单药材提取具有显著性差异(P<0.05);黄连-苦参比例为1∶3时,氧化苦参碱含量为各比例最高,与单药材提取具有显著性差异(P<0.05);黄连-苦参比例为1∶1时,苦参总生物碱含量为各比例最高。与黄连、苦参各药材单提相比,各比例下苦参中总生物碱类成分的溶出均有不同程度的提升,黄连中总生物碱类成分在黄连-苦参5∶1及4∶1比例下溶出表现为提升,其他比例表现为降低。随着药对中黄连比例的降低,黄连中整体生物碱类成分呈现下降趋势。对苦参中差异性成分进行比较,随着药对中黄连比例的降低,苦参碱、槐定碱在药液中的溶出降低,而氧化苦参碱的溶出提升,3种成分呈现“U”型分布,提示3者之间的相互影响关系。 3 讨论 本研究考虑与临床应用一致,黄连-苦参药对选择水回流提取法,选择分离效果最佳的乙腈-磷酸二氢钾溶液体系,对黄连及黄连-苦参药对的色谱条件进行优化,并在190~440 nm进行全波长扫描,于220 nm下进行指纹图谱建立以求全面对待测样品的差异性成分进行测定。结果表明,本研究建立的黄连-苦参药对指纹图谱稳定有效,可全面的测定黄连-苦参药对中的标志性成分。 大量文献研究发现,黄连-苦参药对在方剂中多采用1∶5至5∶1区间配比,故选择典型的9个配比进行量-质传递对比性研究。生物碱类成分作为黄连-苦参药对的主要药效成分,研究生物碱类成分在传统方剂煎煮过程中的溶出差异,可以为临床用药提供参考。故采用建立指纹图谱方式进行定性验证,确定稳定可测的生物碱类成分,并根据“2.1.8”项下结果,选择苦参中苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱及黄连中木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱进行研究[25-26]。 本研究在最佳吸收波长下,对黄连-苦参药对不同配比中10个差异性成分进行含量测定,分析差异性成分在不同配比下的溶出变化。苦参中3种差异性成分的溶出量随黄连比例的降低呈现“U”型分布,而黄连中7种差异性成分溶出量随黄连比例的降低整体呈现降低趋势。在黄连-苦参药对中,高黄连比例更容易促进药对中差异性成分的溶出。初步分析,当黄连-苦参药对中黄连占比的降低,可能会通过改变溶液中pH值、酸碱度等性质,对二者差异性成分的溶出产生影响,也可能对其中成分的相互转化产生促进作用,其具体产生机制有待深入研究。黄连-苦参药对被应用与各类中医经典方及现代经验方剂中[27-28],但其配伍面对临床不同疾病的合理应用仍需深入研究。 本研究首次将黄连-苦参相须药对与中医传统经验方剂药效相结合,探究差异性成分药理作用与临床疾病治疗的联系。黄连-苦参比例为5∶1时,所得苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高;非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量较高,相比各药材单提含量有所提升,与单药材提取均具有显著性差异(P<0.05),与《普济方》中“相须为用,其效益彰”的方解一致,发挥各成分共同药效,达到“清热燥湿”效果。氧化苦参碱具有抗肿瘤作用,当黄连-苦参比例为1∶3时,其溶出量达到最大并与单药材提取具有显著性差异(P<0.05),与临床上使用参白解毒方进行抗结直肠道腺瘤[29]的治疗方式一致。药根碱可发挥降糖作用,在黄连-苦参比例为1∶1时含量最高,与国医大师李玉奇治疗消渴症时采用方剂中黄连-苦参药对[30]的配比一致,证明了方剂中黄连-苦参使用该比例配比的合理性。 综上所述,本研究成果预期可为开展黄连-苦参药对的量-效关系研究提供数据支撑,为临床不同疾病采用药对适宜配比用量、开发黄连-苦参药对新方剂提供借鉴。

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    [align=center]非洲猪瘟自检实验室仪器设备配置参考[/align]我国发生非洲猪瘟疫情后,农业农村部、市场监管总局等单位根据非洲猪瘟疫情态势,连续发布文件,要求屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场开展非洲猪瘟自检。对于如何配置仪器设备,这些屠宰场、猪肉制品加工企业、规模猪场、种猪场可以说是一头雾水。下面谈一些个人看法,供众多自检实验室建设时参考:一、基本原则1.满足要求主管部门对于非洲猪瘟自检的要求非常明确,那就是必须采用PCR检测。——农业农村部办公厅于2019年1月2日发布的《关于非洲猪瘟病毒检测试剂盒有关事宜的通知》规定:“应急期间,比对符合要求的检测试剂盒(试纸条)可使用至2019年6月30日”。——2019年1月4日,中国动物疾病预防控制中心公布了通过专家评审的第一经非洲猪瘟现场快速检测试剂名单,共有PCR类和试纸条类。其中规定:PCR类试剂的应用范围为“猪血液、脾脏、淋巴结、肾脏组织样品快速检测”,试纸条类的应用范围内“仅用于病(死)猪现场快速初步检测”。——6月11日,中国动物疾病预防控制中心公布了通过专家评审的非洲猪瘟现场快速检测试剂名单,共有荧光定量PCR类和等温扩增类。并规定这两类均适用于猪血液和猪组织样品快速检测。在农业农村部各类文件中,可以多次见到诸如“规范使用经我部批准或经中国动物疫病预防控制中心比对符合要求的检测方法开展非洲猪瘟检测”的描述,结合非洲猪瘟试剂评审名单,不难看出荧光定量PCR方法是自检实验室的最佳选择。2.量力而行作为自检实验室,只要检测的敏感性和特异性能达到要求即可,不必追求高大上。重要的是在满足要求的基础上,量力而行,大型肉联厂等企业,自然可以配置高档次、高通量设备,以满足大批量样品的检测;而小微企业,每天样品只有几个或者十几个,配置低通量设备即可。3.服务周到多数相关企业原来并无分子生物学实验室,也没有相关技术人员,在此情况下开展荧光定量PCR试验,如果仪器设备及试剂供应商不提供周到的服务,那结果不言而喻。4.效果满意屠宰场、猪肉制品加工企业都是肉品消费的最后一道关口,如果不把握好质量,被非洲猪瘟病毒污染的猪肉及制品,很有可能就会流向市场。因此,尽管这些自检实验室可能因陋就简,但检测效果必须达到要求,不能做样子。二、仪器设备配置参考1、试剂及样品保存本环节涉及的设备主要是冷藏/冷冻箱。抗凝血采用2℃~8℃保存,推荐药品冷藏箱;猪肉等样品及试剂多采用-20℃保存,推荐低温冰箱。在自检实验室,出于成本考虑,也可采用家用冷藏/冷冻两用冰箱,但应仔细检查,确认冷藏室不会结冰后方能使用。2、核酸提取本环节涉及的设备主要是生物安全柜、水浴/金属浴、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、离心机、匀浆设备。按照规定非洲猪瘟核酸提取必须在生物安全柜内操作。进口生物安全柜价格昂贵,每台约需6万元左右。出于成本考虑,可购置国产品牌,但最好能邀请第三方对生物安全柜进行性能测试,合格后再投入检测。净化工作台只能保护样品不受污染,但不能保护操作人员和环境不受污染,因此不推荐购置。抗凝血或匀浆后的猪肉等样品,应按规定进行灭活后方可进行DNA提取。灭活可采用水浴锅或金属浴,两者效果接近。水浴锅经济实惠,对样品盛放容器(离心管、匀浆管等)适用性广,但需要经常加水,并时常关注水位是否合适;金属浴价格稍高,使用方便,但对样品盛放容器有严格要求。根据提取试剂盒的不同,使用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]有所不同,可能涉及的规格有10μL、50μL、200μL和1000μL。推荐使用进口品牌,精度高、稳定性好;出于成本考虑也可采用国产品牌,但需进行精度和稳定性检查,符合规定方可投入检测。在进行DNA提取时,离心是必不可少的步骤,一般需要2mL/孔的高速离心机。对于需要洗涤的提取试剂盒,因离心步骤较多,建议购置台式高速离心机,最好是进口产品,其生物安全性高、噪音低、稳定性好。国产高速离心机也可,但应注意购置无刷型,以免噪音过高。对于粗提试剂盒,因步离心步骤不多,可考虑采用微型离心机(掌上型),最好同时配置2mL转子和8联管转子。在对猪肉等样品进行检测时,还需要先对样品进行匀浆。如果单位时间内猪肉等样品较多,可考虑购置匀浆机,利用钢珠在匀浆管内不断撞击样品,达到匀浆的效果,国产匀浆机目前约3万元左右。对于猪肉等样品很少的单位如规模猪场,可购置玻璃匀浆器进行样品匀浆,价格很便宜,每支约几十元,只是操作比较费时费力。注:目前自检实验室多采用免提试剂盒,但“免提”不等于“不提”,只是减少了洗涤步骤,实质是粗提。3、扩增检测本环节涉及的设备主要有荧光定量PCR仪、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]、微型离心机。荧光定量PCR仪直接关系到检测结果的好坏。在选购荧光定量PCR仪时,主要从检测效果、样品孔数、通道数等方面考虑。对于检测效果,无法直观得到结果,购置前最好参考其他已采购同类设备单位的检测情况,也可在调研时对样机进行效果测试,或在购货合同中约定进行效果测试,不能达到规定检测效果的予以退货处理。对于具体如何测试,后续会有专文进行讲解。样品孔数要结合单位时间内样品数量、是否需要在规定时间内报告结果来综合考虑,样品量多的可考虑购置96孔或48孔的设备,样品量少的可考虑购置24孔或16孔的设备。屠宰场必须在规定时间内报告结果,否则猪肉及副产品无法出具检疫证,也就不能出场。因此,对于屠宰场,应分析其样品数及每批检测时间,确保在规定时间内能检测完所有样品并报告结果,检测孔数不宜过低如8孔。而对于规模猪场、食品生产企业,对于报告结果的时间就要求不是太严格,可采购孔数稍低的设备。检测通道数不必过多考虑,对于自检实验室,购置4通道、5通道实属浪费,购置单通道或双通道即可。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]前面已有说明,本环节可能需要的2.5μL和10μL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url],最好采用进口品牌,对检测结果影响较大。4、实验环境及废弃物处理本环节涉及的设备主要有紫外消毒车、高压灭菌器等。实验检测前和检测后,均需对实验台面进行紫外线消毒。推荐购置紫外消毒车,因其移动方便、可定时关机。当然,若因陋就简购置紫外灯管也无不可,但最好能在灯管上方加上灯罩,提高消毒效果。对于检测后的样品、扩增产物、使用后的手套、口罩等个人防护用品等,按规定均需进行高压灭菌后无害化处理。推荐购置能恒温、定时的自动高压灭菌器,国产品牌的约1万元左右。若购置无恒温功能的高压灭菌器,可购置一台调压器,并反复摸索达到规定温度后维持多少电压才能恒温,并做好记号。以后在开始阶段可将调压器电压调至100%,达到规定后将电压调至维持电压,使用起来也还比较方便。三、结语非洲猪瘟自检,对于监管部门和主体企业来说都是一件新鲜事,需要不断摸索。但无论如何,检测效果、防止污染、生物安全都是不容忽视的重要内容,实验室应着重在这几个方面做好工作。

  • 218万!唐山市动物疫病预防控制中心2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购

    [font=仿宋]项目概况[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购[/font][font=仿宋]招标项目的潜在投标人应在[/font][font=仿宋]河北省公共资源交易平台( http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin)[/font][font=仿宋]获取招标文件,并于[/font][font=仿宋]2023年07月27日14点30分[/font][font=仿宋](北京时间)前递交投标文件。[/font][b][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/b][font=仿宋]项目编号:[/font][font=仿宋]TSSST202306201[/font][font=仿宋]项目名称:[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购[/font][font=仿宋]预算金额:[/font][font=仿宋]2180000[/font][font=仿宋]最高限价(如有):[/font][font=仿宋]2180000.00[/font][font=仿宋]采购需求:[/font][font=仿宋]2023年非洲猪瘟等重大动物疫病检测试剂及防疫物资采购等内容,详见招标文件第二部分“采购清单”[/font][font=仿宋]合同履行期限:[/font][font=仿宋]合同签订生效后【30】日内送货完毕。[/font][font=仿宋][font=仿宋]本项目[/font]不接受联合体投标。[/font][b][font=黑体]二、申请人的资格要求:[/font][/b][font=仿宋]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;[/font][font=仿宋]2.落实政府采购政策需满足的资格要求:该项目专门面向中小企业采购,其中预留给小微企业的比例 100%,落实中小微企业、监狱企业、残疾人福利性单位政府采购政策。单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的采购活动;为本采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的投标人,不得参加本采购项目。[/font][font=仿宋]3.本项目的特定资格要求:(1)供应商需同时具有兽药经营许可证和兽用生物制品经营许可证。(2)供应商所提供的过硫酸氢钾复合盐泡腾片消毒药生产厂家需具备兽药生产许可证、兽药GMP证书、农业农村部颁发的兽药生产批准文号;非洲猪瘟及布病检测试剂生产厂家需取得兽药生产许可证(生产范围含诊断制品生产线)、兽药GMP证书(验收范围含诊断制品生产线),农业农村部颁发的兽药生产批准文号;一次性真空采血管、一次性病毒采样管、一次性乳胶手套、医用一次性防护服的生产厂家需具备医疗器械生产许可证和医疗器械注册证。[/font][b][font=黑体]三、获取招标文件[/font][/b][font=仿宋]时间:[/font][font=仿宋]2023年07月03日至2023年07月07日,每天上午8:30至12:00,下午12:00至17:30[/font][font=仿宋](北京时间,法定节假日除外)[/font][font=仿宋]地点:[/font][font=仿宋]河北省公共资源交易平台( http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin)[/font][font=仿宋]方式:[/font][font=仿宋]其它[/font][font=仿宋]售价:[/font][font=仿宋]0元[/font][b][font=黑体]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font][/b][font=仿宋]2023年07月27日14点30分[/font][font=仿宋](北京时间)[/font][font=仿宋]地点:唐山市公共资源交易中心不见面开标室-主持台(学院北路1300号)[/font][b][font=黑体]五、公告期限[/font][/b][font=仿宋]自本公告发布之日起[/font][font=仿宋]5个工作日。[/font][b][font=黑体]六、其他补充事宜[/font][/b][font=仿宋]1.本项目采用全流程电子化招标。已在河北省公共资源交易服务平台市场主体库通资格确认(注册登记)并办理其中任意一家CA证书(包括河北CA、北京CA、山西吉大CA、联通CA、CQCCA、CFCA)的供应商可直接登录唐山市电子交易系统下载文件。未经资格确认(注册登记)的供应商可在“河北省公共资源交易平台( http://publicservice.hebpr.gov.cn/PublicService/memberlogin/memberLogin)”网站进行账号注册,点击“市场主体登录”进入系统,选择【唐山市】进入“唐山市公共资源交易综合信息平台-市场主体”系统,选择左侧“业务管理”菜单下的“填写投标信息”,找到对应项目进行投标。完成后在“交易文件下载”菜单下载相应采购文件。也可到唐山市市本级公共资源交易中心,在自主注册一体机上进行现场注册。详细注册流程可参考河北省公共资源交易平台(http://jy.xzspj.tangshan.gov.cn:8088/tangshan/)唐山市网站首页“常用下载”栏目中的《市场主体注册登记操作手册》完成注册登记。2.未通过交易平台下载招标文件的投标人,其提交的投标文件将被作为无效投标文件处理。3.如因投标人自身原因未能及时注册,上传电子投标文件,导致无法参加开标,其后果由投标人自行负责。技术支持电话:400-998-0000。CA认证服务热线:河北CA:400-707-3355;北京CA:400-994-3319;山西吉大CA:400-653-0200;联通CA:0311-85691619。CFCA:400-880-9888;CQCCA:400-819-9995等4.保证金:本次需交保证金0元5.本次招标公告只在中国河北政府采购网、河北省公共资源交易服务平台上发布。[/font][b][font=黑体]七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。[/font][font=仿宋]1.采购人信息[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称:[/font][font=仿宋]唐山市动物疫病预防控制中心[/font][font=仿宋]地[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]址:[/font][font=仿宋]唐山市光明路31号[/font][font=仿宋]联系方式:[/font][font=仿宋]0315-2592368[/font][b][font=仿宋]2.采购代理机构信息(如有)[/font][/b][font=仿宋]名[/font][font=仿宋] [/font][font=仿宋]称:[/font][font=仿宋]唐山市双腾工程项目管理有限公司[/font][font=仿宋][font=仿宋]地[/font] [font=仿宋]址:[/font][/font][font=仿宋]河北省唐山市开平区越河镇开越路429号中国北部机电五金博览集散中心30-01-1[/font][font=仿宋]联系方式:[/font][font=仿宋]0315-2822083[/font][b][font=仿宋]3.项目[/font][font=仿宋]联系方式[/font][/b][font=仿宋]项目联系人:[/font][font=仿宋]常子辰[/font][font=仿宋][font=仿宋]电[/font] [font=仿宋]话:[/font][/font][font=仿宋]0315-2822083[/font][font=仿宋] [/font]

  • 【求助】汉防己甲素前处理选择什么有机溶剂比较好?

    【求助】汉防己甲素前处理选择什么有机溶剂比较好?

    我正在做一个药物分析,但在样品前处理的时候,换了多种有机溶剂都不能得到满意的结果,该药物的信息:汉防己甲素(tetrandrine,Tet)主要存在于防己科植物粉防己的根中,是一种生物碱,为白色针状结晶。无臭、味苦。熔点217℃。旋光率α24D+263.1°(氯仿)。其在旋体熔点210℃。旋光率α20D-278°(氯仿)。其二盐酸盐熔点266℃(分解)。旋光率α27D+224.2°(水)。为双苄基异喹啉衍生物,产于我国安徽、浙江等地。Tet分子式为C38H42N2O6,分子量为622.75。Tet分子中由2个二苯醚键组成十八元大环,含有多个烷氧基,脂溶性较高,分子中含有两个甲氧异喹啉环,并具有含活泼孤电子对的氮原子和氧原子,溶于弱酸溶液,实验过程中在PH7时,Tet会发生析出,产生大量白色沉淀,溶液的稳定性降低。分子式为:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/10/200710131058_66889_1115196_3.jpg[/img]我用了甲醇,乙醚,氯仿,二氯甲烷提取,效果不是很好,没有出现明显的峰请问这个药物用什么有机溶剂提取比较好?谢谢!

  • 非洲留学生:“千里清蒸,万里红烧,我想回家”

    非洲留学生:“千里清蒸,万里红烧,我想回家”

    [align=center][/align]“赤日几时过,清风何处寻”。近日,北京不断有“非洲留学生要回乡避暑”“非洲留学生中暑晕倒”“非洲留学生晒出色差”等新闻登上热搜。在我们的印象中,非洲素来有“热带大陆”之称,气候特点就是高温、少雨、干燥,所以非洲人是比较耐热的,但现如今,生活在“热带大陆”的非洲留学生都承受不了中国的炎热,这天气究竟是有多热?别着急我来告诉你![align=center][img=,318,279]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141613_02_3251961_3.png[/img] [/align]“千里清蒸,万里红烧。”真的不是说说而已,热就算了,关键是热的时间还非常久。在7月20日,气象台连发了17天高温预警,进入大暑节气,也是“三伏天”的中伏,江苏南部、浙江中部出现了40℃的酷热天气。江苏的常熟气温达40.6℃,江阴40.2℃,无锡40℃,浙江嘉善40.8℃,纷纷打破了当地7月的历史记录。杭州的最高气温达到了40.8℃,打破了当地7月的气温极值记录(2013年7月27日和7月30日创造)。[align=center][img=,350,242]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141613_03_3251961_3.png[/img] [/align]其实不用预报我们也能明显感觉到,2017年的夏天比往年都热。国家气候中心气候服务首席艾婉秀说:“大家感觉每年夏天高温天气越来越多,这与全球变暖趋势有关,而且随着城市人口越来越密集,这样的高温天气可能会一年比一年更加严重。”就今年的高温情况,艾婉秀介绍,今年高温实际上最突出的就是北方,而且北方有些地区的高温日数已经比常年的年平均高温指数偏多。如北京,现在的高温日数是17天,常年的只有8天多,再就是天津22天,比常年多了2倍。这主要与城市热岛效应有关,这些城市人口密度大,汽车持有量高,尾气排放严重,城市的发展对高温可谓起到了推波助澜的作用。据国家污染源监控工程技术中心监测平台显示,北京2017年7月份优良天数较2016年相比,同比增加了1.5%,但在污染天数中,2017年重度污染占4%,根据2017年首要污染物占比分布图可以看出,仅臭氧一项就占了76%。而造成臭氧污染的主力军,当然就是汽车尾气的排放了。此外,汽车尾气排放中,还会产生大量的CO2。众所周知,造成全球变暖的首要因素就是CO2的超标排放。由此看来,北京的高温天气有很大一部分原因是由汽车尾气所造成的。[align=center][img=,536,241]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141613_04_3251961_3.png[/img] [/align][align=center]2016年7月与2017年7月空气等级占比分布图[/align][align=center][img=,539,274]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141614_01_3251961_3.png[/img] [/align][align=center]2016年与2017年首要污染物占比分布图[/align]【国家污染源监控工程技术中心温馨提醒】:1.出行时尽量减少开车,必要时准备一些常用的防暑降温药品;2.尽量避免午后高温时段的户外活动,对老、弱、病、幼人群提供防暑降温指导,并采取必要的防护措施;3.户外或者高温条件下的作业人员应当采取必要的防护措施;4.减少去人流量聚集的地方。

  • 74万!昆明海关技术中心氦气、非洲猪瘟试剂盒等试剂耗材采购项目

    [quote][b]项目概况[/b]昆明海关技术中心氦气、非洲猪瘟试剂盒等试剂耗材采购项目 招标项目的潜在投标人应在昆明市西山区云纺东南亚商场写字楼A座17楼2、3号(云南蓝本招标咨询有限公司)获取招标文件,并于2023年02月16日 10点00分(北京时间)前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:YNLB20230108项目名称:昆明海关技术中心氦气、非洲猪瘟试剂盒等试剂耗材采购项目预算金额:74.0310000 万元(人民币)最高限价(如有):74.0310000 万元(人民币)采购需求:详见其他补充事项合同履行期限:合同签订后自采购人发出订货通知之日起 5 个日历天内交货(详见第五章“用户需求”)本项目( 不接受 )联合体投标。

  • 非洲频现金矿开采致铅中毒事件 无辜儿童被夺命

    非洲金矿灾难:淘金热后面的黑暗 当黄金工业给全世界的金融市场带来繁荣之时,它也在悄悄地改变了产金地区人民的生活。尽管,那并不都是美好的。  非洲大陆一直都象征着美丽的风景和富饶的矿产,黄金更是这里引以为豪的资源之一。早在中世纪时,穆斯林商人乘坐骆驼,穿越撒哈拉沙漠,只为前往传说中的黄金之国—西非的马里。  而在欧洲,也广为流传着诸如黄金板凳之类有关非洲的神奇故事。甚至独立之前的加纳,还有“黄金海岸”这样的称呼。黄金,成为了古老的非洲不可分离的一部分。  然而与此同时,开采黄金也让非洲人民们付出了沉重的代价。在殖民地时代,黄金带来了装备着大炮和火枪的西方殖民者。而在独立后的当代社会,黄金和其他一切可以卖出高价的资源一样,撕裂着许多普通人得生活,乃至生命。  在尼日利亚北部扎姆法拉州的小村庄Sunke,开采金矿产生的铅末就要了孩子们的命。当地的村民们近年来竞相参与采金活动。他们用研磨机,将开采后的金矿磨成粉末,然后在村里的水井中洗去身上的灰尘。他们并不知道,这样不经意间的行为正在给这个国家带来世界上最严重的铅中毒危机。

  • 大家还记得“非洲牛郎门”事件吗?真相揭晓啦~~~

    记者获悉,为泄愤报复、诽谤他人,在网上一手制造传播“‘情妇’举报副区长、公安分局长”“中石化‘非洲牛郎门’”等谣言的犯罪嫌疑人傅学胜日前被上海市公安机关依法刑事拘留。  警方查明,傅学胜,男,1966年生,江苏省东海县人,大学文化,上海雷波信息技术有限公司董事长兼法人代表。今年5月,上海市某室内设计装饰有限公司法人代表黄某意外死亡。傅学胜与黄某因经济纠纷素有积怨,一直耿耿于怀,伺机进行报复。傅自认为当地公安机关认定排除他杀、系意外死亡的结论“太仓促”,有许多“疑点”可以做文章,自感抓到了一个良机。他要编造一个故事,把黄某意外死亡和最能吸引公众眼球、引发“轰动效应”的“官员贪腐”、“谋杀”等题材结合起来,这样既能搞臭黄某,也可攻击政府和司法机关。于是他在网上搜索并迅速“锁定”黄某公司所在地某副区长、公安分局长为攻击目标,像导演大片一样,编造了所谓《“情妇”举报副区长、公安分局长》帖文发布到网上,称其“贪污受贿20多亿、拥有60多处房产、包养10多名情妇,并杀害企业家黄某”。该谣言迅速被境内外网站、微博大量转载、评论,网民点击量逾千万次,造成了恶劣的社会影响。  警方还查明,轰动一时的中石化“非洲牛郎门”事件也是傅学胜精心策划、恶意编造的谣言。2012年12月底,傅学胜因参与中石化某项目招标失利心怀不满,为泄愤报复,把矛头对准了中石化。他花数天时间炮制并在网上发布《俄罗斯艳女门续集:中石化再曝非洲牛郎门》的造谣诽谤网帖,称“中标的公司利用‘非洲牛郎’对中石化负责招标工作的一名女处长实施性贿赂,才得以中标并获利40万美金”。为达到“轰动效应”,傅还专门花数千元雇佣了网络水军进行转载顶贴、恶意炒作。该网帖迅速成为网络热帖,三天内百度搜索相关信息达11万余条,严重损害企业形象,尤其对当事人及家庭造成了巨大的伤害。  据上海警方介绍,今年以来,上海公安机关已依法查处网络造谣传谣案件380余起、170余人。从查处的案件情况看,当前网络谣言主要呈现以下特点:一是有组织的网络水军、网络推手、网络公关公司通过发帖、删帖、炒作、造谣,制造社会热点,借机谋取经济利益;二是因个人问题编造谣言,打击报复、发泄私愤;三是一些微博“大V”为了博取眼球、赚取粉丝,不辨是非甚至捏造不实信息;四是假借“网络维权反腐”编造谣言并恶意传播。警方表示,任何利用互联网制造传播谣言、敲诈勒索等违法犯罪行为,警方都将坚决依法惩处。(来源:人民网)

  • 【原创大赛】我是如何证明某非洲猪瘟检测试剂盒存在质量问题并成功维权的

    【原创大赛】我是如何证明某非洲猪瘟检测试剂盒存在质量问题并成功维权的

    [font=宋体]我是如何证明某非洲猪瘟检测试剂盒存在质量问题并成功维权的[/font]1[font=宋体]背景[/font]2019[font=宋体]年[/font]11[font=宋体]月,本单位购入一批某品牌非洲猪瘟检测试剂盒,用于非洲猪瘟病毒核酸荧光定量[/font]PCR[font=宋体]检测。该试剂盒中的[/font]DNA[font=宋体]提取为柱式提取,[/font]DNA[font=宋体]扩增试剂为所有组分预先混合,使用时每个样品按[/font]18μL[font=宋体]预混液加[/font]2μLDNA[font=宋体]模板即可,使用非常方便。[/font][font=宋体]简单说一下该试剂盒的结果判定,在阴性、阳性对照成立的情况下,[/font]Ct[font=宋体]值小于[/font]40[font=宋体]且有典型扩增曲线的判定为阳性,否则判定为阴性。[/font]2[font=宋体]出现问题[/font][font=宋体]购入试剂盒后,本单位即投入使用。在对一个猪场抗凝血进行检测时,结果有[/font]40%[font=宋体]左右阳性,[/font]Ct[font=宋体]值介于[/font]35~38[font=宋体]左右。由于该猪场日常生物安全管理水平较高,该批抗凝血又是从准备销售给外省的生猪中抽样,出现非常猪瘟的可能性不大。出于慎重起见,第二天我们对提取的核酸重新进行扩增,结果仍有[/font]40%[font=宋体]左右阳性。[/font][font=宋体]由于阳性比例过高,且[/font]Ct[font=宋体]值较高,怀疑是污染或试剂存在问题。于是要求猪场重新采样,再次进行核酸提取和扩增,结果仍然出现[/font]40%[font=宋体]左右阳性。[/font]3[font=宋体]初步验证[/font][font=宋体]为了分析这些阳性是真阳性还是污染或试剂的问题,我们做了交叉试验,方法及结果如下:[/font] [table][tr][td] [font=宋体]项目[/font] [/td][td] [font=宋体]该试剂盒提取核酸[/font] [/td][td] [font=宋体]其他品牌试剂盒提取核酸[/font] [/td][/tr][tr][td] [font=宋体]该试剂盒扩增核酸[/font] [/td][td] [font=宋体]阳性率[/font]40% [/td][td] [font=宋体]阳性率[/font]5% [/td][/tr][tr][td] [font=宋体]其他品牌试剂扩增核酸[/font] [/td][td] [font=宋体]阳性率[/font]5% [/td][td] [font=宋体]均为阴性[/font] [/td][/tr][/table][font=宋体]据此我们认为是该试剂盒存在问题,向厂方提交了质量投诉函,要求调换货。[/font]4[font=宋体]厂家验证[/font][font=宋体]接到我们的质量投诉函后,厂方非常重视,派出技术人员打飞的直奔我们实验室进行实验。经过一系列去污染等措施,结果用该品牌试剂盒提取核酸并进行扩增,结果仍然出现阳性,但阳性率明显下降,约为[/font]10%[font=宋体]。据此技术人员认为是实验室污染所致,但对于为何仍有[/font]10%[font=宋体]阳性不予置评。此后,厂方一直未同意调换货。[/font]5[font=宋体]再次验证[/font][font=宋体]接下来,我们又进行了多次实验,并采取各种防污染措施,但阳性率一直居高不下。对此我们也没有好办法,只能将[/font]Ct[font=宋体]值超过[/font]35[font=宋体]的假阳性样品用其他扩增试剂再复核一遍。[/font][font=宋体]今年[/font]1[font=宋体]月份我们实验室新购进一批[/font]qPCR[font=宋体]预混液,并合成了一系列不同项目的引物探针(其中非洲猪瘟引物探针与某品牌序列不一致)。[/font]2-3[font=宋体]月份对不同项目的阳性样品(抗原、疫苗等)进行验证,证明合成的引物探针及[/font]qPCR[font=宋体]预混液检测效果理想(相关内容将以系列方式在原创大赛发表,敬请期待)。[/font][font=宋体]2020[/font][font=宋体]年4月1日[/font][font=宋体]对某猪场血样进行检测,血样经离心取上清(血浆),采用该品牌的DNA提取试剂盒提取核酸,检测试剂盒进行扩增,扩增图谱见图1(阳性对照是Ct值约25的那根弯弯曲曲的红线)。[img=,497,446]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006191649143759_5229_1627156_3.jpg!w497x446.jpg[/img]后采用T/CVMA5-2018《非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法》提供的引物探针,以及商品qPCR预混液,扩增图谱见图2(所有样品均为阴性,有曲线的5个是为了验证扩增效果添加的阳性核酸)。从两个扩增图谱可以看出,同样用该品牌提取试剂盒提取的核酸,用该品牌的扩增试剂,与商品qPCR预混液扩增相比,效果差异极大,不仅阳性对照存在问题,而且对于正常样品也存在很高的假阳性。[/font][img=,497,446]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006191649528277_8404_1627156_3.jpg!w497x446.jpg[/img][align=left][font=宋体]对于商品qPCR预混液的质量,可以从另一个方面来说明:添加的5份阳性核酸,系2019年4月提取后-20℃保存的,至今已近一年。5份阳性核酸当时的扩增结果与本次qPCR预混液扩增结果分别为:18.3/21.9、16.1/18.9、31.1/32.9、30.5/33.0、30.7/33.8。时隔一年两次扩增的Ct值约相差3左右,考虑到核酸保存条件、保存时间以及两次不同的扩增试剂,我们认为两次扩增结果是非常吻合的。这也从一个方面证明本次我们采用的商品qPCR预混液扩增效果非常理想。[/font][/align][align=left][font=宋体]综上,我们认为该品牌的检测试剂盒存在质量问题,要求对所购的试剂盒予以全部调换为质量合格的新品。[/font][/align]6[font=宋体]同意换货[/font][font=宋体]接到投诉函后,该公司及时与我们进行沟通,一周后同意了我们的诉求,要求我们将所有试剂盒(已使用的提供含有批号等信息的原包装盒)寄还。十天后我们收到了新批号的检测试剂盒,拆开试用,发现该试剂盒已作了改进,反应液与引物探针分两管存放,用前将反应液加入引物探针中充分混匀,然后进行实验,经验证,假阳性现象不复存在。[/font]7[font=宋体]思考[/font][font=宋体]作为生产厂家不能一味宠着使用者,还是应该从产品质量出发。目前国产试剂盒多采用反应液与引物探针分别存放的方式,每次使用需计算添加量,混合均匀后分装到每个[/font]PCR[font=宋体]孔,不是很方便。该品牌或许是考虑到这个因素,将反应液与引物探针合二为一,大大方便了使用者,却不料在检测结果上出了问题。在未解决多种试剂混合后效果不佳问题前,还是应该尊重科学,以分别存放为宜。[/font][font=宋体]作为使用者也不能一味追求方便快捷,还应该以检测质量为重。该麻烦的地方不能图省事,该分步操作的地方就应该按照要求分步操作,不能简单地合二为一。[/font][font=宋体]维权不是简单的事,一般来说生产厂家总量比较强势,有众多的技术人员分析问题所在,也有可能有“大拿”找出各种理由让使用者背锅。作为使用者来说往往缺乏相应的验证手段和理论基础,在厂家面前往往显得比较弱势。但从我们的维权之路看,只要拿出较为有力的证据,厂家还是会虚心接受诉求。[/font]

  • 非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4

    非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4

    [b][color=#cc0000]非洲马达加斯加岛 奇特的猴面包树4[/color][color=#cc0000][img=,600,799]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110261419211252_8026_1841897_3.jpg!w600x799.jpg[/img][/color][/b]

  • 应对新变种,美国宣布对非洲八国实施旅行限制

    应对新变种,美国宣布对非洲八国实施旅行限制11月26日,美国总统拜登宣布,由于对在南非发现的新冠病毒新变种的关注,美国将从11月29日开始对来自八个南部非洲国家的旅客实施旅行限制。世界卫生组织已把这一变种定为“值得关注”的变异毒株。“作为我们有更多信息之前的预防措施,我下令对来自南非和其他七个国家的航空旅行实施额外限制,”拜登在声明中说,“这些新限制措施将在11月29日生效。在我们向前迈进之际,我们将继续接受科学和我的医学团队建议的指导。”这些国家包括南非、博茨瓦纳、津巴布韦、纳米比亚、莱索托、斯威士兰、莫桑比克和马拉维。白宫高级官员表示,拜登政府是在总统首席医学顾问福奇和疾控中心的建议下,出于“格外谨慎”而实施的这项旅行限制措施,这项政策并不禁止航班,也不适用于美国公民或永久居民,但是他们与所有国际旅客一样,必须在旅行前接受检测并且结果呈阴性。

  • 非洲大陆已经凑齐10亿支新冠疫苗

    作为非盟轮值主席,南非总统拉马福萨6日在非盟虚拟会议上透露,非洲大陆目前已经通过世界卫生组织、非盟等渠道筹措了10亿支新冠肺炎疫苗。但拉马福萨指出,疫情使得本就疲弱的非洲经济雪上加霜,“新冠肺炎疫情不仅是一次严重的突发卫生事件,还是一次严重的经济和社会危机。”他强调,目前非洲仅有个别国家能够自主推动新冠肺炎疫苗接种工作,大多数国家只能寄希望于国际组织等渠道的援助,而当前拥有55个成员国的非盟则希望能在三年内完成该大陆60%人口的疫苗接种工作。截至目前,非洲新冠肺炎确诊病例超过360万例,死亡病例超过94000例,疫情形势不容乐观。其中,作为非洲大陆疫情最严重的国家,南非新冠肺炎确诊、死亡病例双双位居非洲大陆首位。

  • 辛集市农业农村局非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购公开招标

    [font=仿宋]项目概况[/font][font=仿宋]辛集市农业农村局非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购[/font][font=仿宋]招标项目的潜在投标人应在[/font][font=仿宋]凡有意参加本项目的投标人,请登录“河北省公共资源交易服务平台-辛集市”,按要求填写信息,点击“确认信息”,在“我的项目”中自行下载招标文件等相关资料,未获取完整资料,导致投标被否决的,后果自负。[/font][font=仿宋]获取招标文件,并于[/font][font=仿宋]2022年10月11日09点30分[/font][font=仿宋](北京时间)前递交投标文件。[/font][b][font=黑体]一、项目基本情况[/font][/b][font=仿宋]项目编号:[/font][font=仿宋]HBXH-2022-085[/font][font=仿宋]项目名称:[/font][font=仿宋]辛集市农业农村局非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购[/font][font=仿宋]预算金额:[/font][font=仿宋]725836[/font][font=仿宋]最高限价(如有):[/font][font=仿宋]725836[/font][font=仿宋]采购需求:[/font][font=仿宋]非洲猪瘟检测设备、试剂及物资耗材采购 一批[/font][font=仿宋]合同履行期限:[/font][font=仿宋]30天[/font][font=仿宋][font=仿宋]本项目[/font]不接受联合体投标。[/font]

  • 刚出“俄罗斯艳女门”又陷“非洲牛郎门”

    转自@新浪财经:中国青年网北京1月2日电(记者 周小璐)近日,一位网友爆料中石化一位女处长身陷“非洲牛郎门”事件,将中石化致于舆论漩涡之中。  这位知情人爆料的“非洲牛郎门”事件,是指安捷伦公司在中石化武汉乙烯项目中,利用非洲“牛郎”色诱招标公司中石化国际事业公司的一位女处长,在投资180亿元的中石化武汉乙烯项目中进行暗箱操作,在评标过程中让安捷伦非法降价30万美元低价中标,又相互配合威逼利诱武汉乙烯的用户,迫使他们同意将中标方案中一套价值80万美元的软件换成成本不足10万美元的软件,最终,安捷伦不仅非法中标,还多赚了40万美元。  消息一出,舆论哗然。截至中国青年网记者发稿时,此贴在某社区论坛点击量已高达9000多次。  为进一步求证爆料信息的真实性,中国青年网记者今天下午致电中石化办公厅外宣办有关负责人,他表示,因事发假期期间,自己对此事并不知情,会在具体核实实情后向外界披露,但这需要一个时间过程,希望公众冷静以待。事件原委究竟如何,当事人何时出面做出正面回应,中国青年网将继续跟踪此事进展。  中国青年网记者查阅了《中华人民共和国招标投标法》,其中第三十二条规定:投标人不得与招标人串通投标,损害国家利益、社会公共利益或者他人的合法权益。第四十三条:在确定中标人前,招标人不得与投标人就投标价格、投标方案等实质性内容进行谈判。第四十六条:招标人和中标人应当自中标通知书发出之日起三十日内,按照招标文件和中标人的投标文件订立书面合同。招标人和中标人不得再行订立背离合同实质性内容的其他协议。  据悉,安捷伦科技有限公司是一家多元化的高科技跨国公司,是全球电子测量、生命科学与化学分析的领导者,其产品正在化学、环保、食品、医药和生命科学领域中广泛使用。(原标题:中石化称正核实非洲牛郎门事件 将披露实情)

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