[font=SimSun, STSong, &]经过查询,发现免疫球蛋白只是一种普通蛋白质的名称,并不和现有的药品名称相同,且牛初乳里面就含有免疫球蛋白物质,那么添加了牛初乳,产品名称可以叫免疫球蛋白吗?某些地方叫免疫球蛋白的产品,被叫停和查处,请问,如果配料表里面添加了牛初乳,免疫球蛋白可以作为食品名称吗?[/font]
10版药典规定人免疫球蛋白中甘氨酸含量要用液相做,以前我们没做过这个实验,现在在研究,求助,一针进去,出的峰都有哪些峰是我们需要的,保留时间大概在什么时候?
请问有小伙伴用上海恒远生物科技有限公司免疫球蛋白的试剂盒吗?
哪位朋友知道奶制品中的IgG (免疫球蛋白 G) 检测方法啊?谢谢!
静注人免疫球蛋白分子大小分布的峰是怎么样的啊?刚生产出来的产品是不是没有裂解峰出来的啊?放久了才会有的吗?求解
初乳中免疫球蛋白IgG检测一般都用什么方法?
日前,中国农业大学生物学院赵要风教授、李宁院士在9月份出版的两期免疫学杂志(the Journal of Immunology)上连续发表文章探讨动物免疫球蛋白基因的进化问题。通过与澳大利亚、瑞典科学家以及云南大学张亚平院士研究组、本校生物学院张子丁教授的合作,两位教授研究小组在一种原始哺乳动物鸭嘴兽中发现了一种新的免疫球蛋白类型并命名为IgO(the Journal of Immunology,2009,183(5):3285-93)。IgO是近几十年来在哺乳动物中发现的除IgM,IgD,IgG,IgA和IgE外的唯一新类型,它包括四个固定区结构域和一个铰链区结构,在结构表现为低等动物IgY与哺乳动物IgG的中间体形式而且与两者均具有基因序列同源性,明确证明了哺乳动物IgG来源于低等动物的IgY。同时他们发现鸭嘴兽IgD(包含10个固定区结构域,无铰链区)与高等哺乳动物IgD结构(2到3个固定区结构域和一段铰链区)上具有显著差异,但与鱼类、两栖类和爬行类IgD结构上相同。这些结果表明作为最原始的哺乳动物,鸭嘴兽免疫球蛋白基因同时混合了高等哺乳动物与低等脊椎动物的特征。在另外一项研究中(the Journal of Immunology,2009,183(6):3858-64),两位教授与瑞典及美国研究人员合作对爬行类动物绿安蜥的免疫球蛋白基因进行了详细研究,发现这类爬行类动物中缺乏负责黏膜免疫的IgA基因。两位教授在免疫球蛋白基因方面的研究对了解基因在脊椎动物中的进化提供了有意义的线索。
如何增加裂解峰的量,以实现人免疫球蛋白单体峰与裂解峰如何实现分离度大于1.5?
要做免疫球蛋白的非还原性SDS-PAGE,需要注意什么?1、想用6%的分离胶,4.2%的浓缩胶,是否可以?2、样品处理缓冲液,与通常的还原性上样缓冲液不一样的就是不加DTT或巯基乙醇,对吗?3、电泳时的电压是否要小些,以减少产热,但长时间电泳,是否会破坏胶(6%已经很软了)?4、现在我用的丙烯酰胺的C值为3%(0.9g双叉丙烯酰胺加29.1g丙烯酰胺)是否合适,特别是对于这种低交联度的凝胶是否合适,是否要修改C值?5、将来染色时能否用热的染色液,或者在微波炉中加热?(我们现在12%或15%的胶是在热的染色液中染色的。)
今天去给客户安装了液相色谱仪,客户主要用它来检测血浆蛋白粉中免疫球蛋白G的含量,对于液相色谱仪安装已经有一些小小经验,所以仪器送到之后很快的我们就把仪器安装好了,仪器安装好之后呢肯定是要调试和验收的,验收中的安装已经完成,接下来我们运行确认和性能确认,既然要检测血清蛋白,那我们就通过检测它来完成后面的任务吧。首先我们完成运行确认,准备我们实验需要的流动相,流动相A:称取5.6765g磷酸氢二钠和4.6478g磷酸二氢钾至1000mL容量瓶中,加水定容至l000 mL,配制成pH-6.5,浓度为0.05 mol/L的磷酸盐缓冲液。流动相B:称取甘氨酸3.7535g与1000mL容量瓶中,加入800 mL水溶解,再加入4.75 mL6 mol/L的盐酸,用水定容至1000 mL,配制成pH-2.5,浓度为0.05 mol/L的甘氨酸盐酸缓冲液。[img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953502175_13_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,248,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060945498254_8247_3763765_3.jpg!w690x945.jpg[/img] 将两种流动相经过过滤和脱气处理后,连接到我们的输液泵上,输液泵在第一次使用时要打开排液阀,将注射器安装到废液口,用注射器进行手动吸液当衍生试剂进入注射器内,观察并确定进液管内无明显气泡后关闭排气阀,换上废液管后开始运行输液泵。此时必须要确定泵腔内有液体且无气泡才可以运行泵,否则运行泵时会损坏泵头。两个泵都要经过此操作后才可以开始运行。打开我们的泵,查看机器是否可以顺利通过自检,检测泵的流速和流动相混合比例的准确度。随后打开检测器和工作站,我们用的色谱柱是HiTrap[sup]TM [/sup] Protein G HP柱,1mL。设置好实验所需参数:流动相梯度洗脱程序[table][tr][td][align=center]时间(min)[/align][/td][td][align=center]流速(mL/min) )[/align][/td][td][align=center]流动相A(%)[/align][/td][td][align=center]流动相B(%)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]4.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]5.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]15.5[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]22.0[/align][/td][td][align=center]0.4[/align][/td][td][align=center]100 0[/align][/td][td][align=center]0[/align][/td][/tr][/table]检测波 长280nm。让流动相冲洗整个系统,查看基线,等待基线平稳。[img=,306,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949079532_4842_3763765_3.jpg!w690x765.jpg[/img] [img=,316,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060949585645_8170_3763765_3.jpg!w690x742.jpg[/img] [img=,268,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060957536288_7365_3763765_3.jpg!w690x874.jpg[/img][img=,321,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944094564_753_3763765_3.jpg!w690x730.jpg[/img] [img=,285,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060944599785_6578_3763765_3.jpg!w690x822.jpg[/img] 在这该阶段我们可以把标准品配制出来,首先我们来了解一下免疫球蛋白G,它是血清主要的抗体成分,占血清免疫球蛋白的百分比较多,大约占75%,但它只有40%-50%在血清中,其余在组织当中。它的主要功能是在机体免疫中起到保护作用,它也是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白。通过胎盘获取的母体免疫球蛋白G在出生后数月对防御白喉、[url=https://baike.baidu.com/item/%E9%BA%BB%E7%96%B9][color=#000000]麻疹[/color][/url]、脊髓灰质炎等感染起着重要作用。它的结构想一个“Y”字型,如图:[img=,357,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060948093745_2090_3763765_3.jpg!w440x418.jpg[/img] [img=,255,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908060953036898_4160_3763765_3.jpg!w690x920.jpg[/img] [img=,190,340]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908061003393034_7645_3763765_3.jpg!w690x1230.jpg[/img] 称取免疫球蛋白G标准品0.0102g(纯度=97%)置于10mL容量瓶,并用流动相A定容到10mL,摇匀,脱气。浓度为1mg/mL。取配置好的标准溶液母液,用流动相A稀释成浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL的标准工作液。检测进样阀的精密度:将标准溶液母液取20μL在检测波 长280nm条件下进样,连续进样6次,计算其相对标准偏差RSD=0.94%。依次进样标注品工作液20μL,由时间进行定性,峰面积进行定量。得出其平均相关系数r=0.9999。免疫球蛋白G检出质量浓度以3倍信噪比(s/N=3)计算,最低检出质量浓度为0.1 mg/mL。原本还有一步已知浓度样品的检测,前处理方法如下:称取0.1g精确至0.0001曲血浆蛋白粉于15mL的塑料离心管中,准确加入10mL流动相A,涡旋振荡10min,4 000 r/min离心5 min,取上清液经微孔膜(0.22μm)过滤,滤液待测。但是由于今天已知浓度的样品没有到,所以我们无法进行样品进样,但是建议大家在安装仪器时最好用已知浓度的样品进样验证仪器的准确性。好了,今天就到这里啦!
β-乳球蛋白属于乳白蛋白还是属于乳球蛋白里面的一种成分?最近看到有两种版本,其一,说是属于乳白蛋白里面的一种成分,乳白蛋白包括α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和血清白蛋白。乳球蛋白即免疫球蛋白。其二,乳白蛋白包括α-乳白蛋白和血清白蛋白,乳球蛋白包括β-乳球蛋白和免疫球蛋白。现在不知道哪种说法对,请各位指教!!!谢谢!!!
要做免疫球蛋白的非还原性SDS-PAGE,需要注意什么?1、想用6%的分离胶,4.2%的浓缩胶,是否可以?2、样品处理缓冲液,与通常的还原性上样缓冲液不一样的就是不加DTT或巯基乙醇,对吗?3、电泳时的电压是否要小些,以减少产热,但长时间电泳,是否会破坏胶(6%已经很软了)?4、现在我用的丙烯酰胺的C值为3%(0.9g双叉丙烯酰胺加29.1g丙烯酰胺)是否合适,特别是对于这种低交联度的凝胶是否合适,是否要修改C值?5、将来染色时能否用热的染色液,或者在微波炉中加热?(我们现在12%或15%的胶是在热的染色液中染色的。)
一、原理:本法系依据特异性抗体(免疫球蛋白)F a b段与红细胞上已包被的相应抗原结合,抗体暴露出F c段补体Clq的结合位点,从而激活后续的补体各成分,最终导致红细胞的细胞膜受到攻击、破裂,释放出血红蛋白。通过溶血反应动力学曲线,计算人免疫球蛋白激活补体活性的功能指数(4 ) ,以此测定供试品F c段生物学活性。二、试剂(1) P B S (pH7.2) 称取无水磷酸氢二钠1.02g,无水磷酸二氢钠0.34g、氣化钠8.77g,加适量水溶解,用lmol/L氢氧化钠溶液或盐酸溶液调p H 值至7.2,再加水稀释至1000ml。( 2 )钙-镁贮备液 称取氯化钙1.10g、氯化镁5. 0 8 g ,加水25ml使溶解。( 3 )巴比妥-钙镁贮备液称取氯化钠51.85g、巴比妥钠6.37g,加水1000ml使溶解,加人钙-镁贮备液3.125ml,用lmol/L盐酸溶液调p H 值至7. 3,再加水稀释至1250ml。除菌过滤后4°C保存备用。( 4 )牛白蛋白-巴比妥缓冲液称取牛血清白蛋白0. 15g加入巴比妥-钙镁贮备液20 m l中,加水溶解并稀释至100ml。临用前配制。(5) 1. 3mg/L 鞣酸 P B S (pH7. 2) 溶液A 液称取鞣酸l m g ,加PBS (pH7.2) 10ml,使溶解。B 液量取 A 液 0.1ml,加 F*BS (pH7. 2) 7.5ml,混匀,即得,临用前配制。(6) 10%氯化铬溶液称取氯化铬5g,加生理氯化钠溶液50ml使溶解。4°C保存(可保存半年)。(7) 1 % 氯化铬溶液取1 0 %氯化铬溶液0. lml,加生理氯化钠溶液0.9ml,混匀。临用前配制。(8)敏化红细胞的制备A 液取健康人抗凝的O 型血3 人份以上混合,用P B S 洗涤3 次,最后一次以每分钟2 0 0 0转离心1 0分钟分离红细胞。取适量压积红细胞悬浮于1 . 3 m g / L鞣酸P B S(1 : 4 0 ) , 置3 7 ° C水浴中轻摇3 0分钟后再用P B S 洗涤3次,最后用P B S 制备成2. 5 % 红细胞悬浮液。B 液用P B S适当稀释的白喉类毒素或腮腺炎病毒与1 % 氯化铬溶液0.25ml混合(1 0 : 1 ) 后,置37°C水浴中轻摇1 5分钟。将A 液、B 液按1 : 4 混合,置37°C水浴中轻摇3 0分钟。离心,去上清液,用P B S将沉淀(敏化红细胞)洗涤3 次,用牛白蛋白-巴比妥缓冲液悬浮红细胞,调节至适宜浓度,使其在波长5 4 1 n m处的吸光度为1.0土0. 1。
保健食品中免疫球蛋白IgG含量测定具体方法在附件中,里面的方法中,样品测定:先用五倍体积重蒸水洗柱,再用10倍体积的流动相A平衡住,进样按下列程序洗脱[table=200][tr][td]时间[/td][td]流速[/td][td]A% [/td][td]B% [/td][td]梯度 [/td][/tr][tr][td] 0.0[/td][td]0.4 [/td][td] 100[/td][td] [/td][td]- [/td][/tr][tr][td] 0.5[/td][td] 0.4[/td][td] 100[/td][td] [/td][td] 11[/td][/tr][tr][td] 4.0[/td][td] 0.4[/td][td] 100[/td][td] [/td][td] 6[/td][/tr][tr][td] 4.5[/td][td] 0.4[/td][td] 0[/td][td]100 [/td][td] 6[/td][/tr][tr][td] 14.5[/td][td] 0.4[/td][td] 0[/td][td] 100[/td][td] 6[/td][/tr][tr][td] 15.0[/td][td] 0.4[/td][td] 100[/td][td] 0[/td][td] 11[/td][/tr][tr][td] 18.0[/td][td] 0.4[/td][td]100 [/td][td] 0[/td][td] 11[/td][/tr][/table]请问大家:1.用五倍体积重蒸水,是谁的五倍体积? 2.里面的梯度怎么设定??我的工作站是LCsolution,梯度表中那个格是梯度?? 谁用过这个方法,我应该注意什么大家帮帮我,经理让我尽快做出数,我快哭了,我没做过~~大家帮帮我
我们实验室有岛津液相,由于要测定免疫球蛋白,我们买了HI-Trap Protein G柱,但是不知道该如何使用,请问各位有使用过的没有,我们该如何是正常像普通柱子那样上到液相上,还是有其他的用法,还有该如何的步骤平衡系统,进完样后,我们又该如何冲洗柱子,如何保存柱子?谢谢各位哈,我们是新手,不会,希望能给我一个详细的方法,谢谢各位啦!
[b][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【序号】:4【作者】: 曹翠岩【题名】:N-糖链/糖肽纯化与免疫球蛋白G Fc糖基化定量分析[/back][/color][/font][/b][align=left][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【期刊】:大连理工大学 博士论文[/back][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【年、卷、期、起止页码】:2022[/back][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【全文链接】:[/back][/color][/font][url=https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C447WN1SO36whLpCgh0R0Z-ia63qwICAcC3-s4XdRlECrS5ECsmZMDd20ZXc0ZZUotUGtkXc-cNy_5YsXaID81b6&uniplatform=NZKPT]N-糖链/糖肽纯化与免疫球蛋白GFc糖基化定量分析研究 - 中国知网 (cnki.net)[/url][/align][align=left] [/align]
博晖创新是一家专门从事临床人体元素分析检测系列产品的研发、生产、销售以及售后服务的企业。2012年5月公司成功登陆深圳创业板。 博晖创新12月5日晚间公告,公司收购广东卫伦生物制药有限公司的30%股权。 广东卫伦拥有《药品生产许可证》及《药品GMP证书》,广东卫伦下属单采血浆子公司拥有《单采血浆许可证》。此外,广东卫伦拥有通过国家GMP认证的血液制品生产线以及符合国家标准的动物实验室一座,目前已取得的血液制品再注册批准文件包括人血白蛋白(5个规格)、冻干静注人免疫球蛋白(pH4)(2个规格)、人免疫球蛋白(1个规格)、乙型肝炎人免疫球蛋白(2个规格)、破伤风人免疫球蛋白(1个规格)、狂犬病人免疫球蛋白(3个规格)等。 紧接着,博晖创新宣布以16.27元/股的价格大安制药48%的股权,交易价格合计6.62亿元。 大安制药属于医药行业中的血液制品子行业,主要从事血液制品的研发、生产和销售,主要产品包括人血白蛋白和人免疫球蛋白。其目前共持有人血白蛋白16个规格批件、人免疫球蛋白2个规格批件、乙型肝炎人免疫球蛋白3个规格批件、破伤风人免疫球蛋白1个规格批件,所有品种规格均已取得再注册批件。目前大安制药人血白蛋白2个规格、人免疫球蛋白2个规格的产品可正式生产上市销售。 收购完成后,博晖创新形成了“血液制品+体外诊断”的战略布局。血液制品行业具有需求刚性、资源稀缺、特许经营等特点,因此一直以来行业景气度较高,并受到国家政策的重点扶持。通过收购大安和卫伦,博晖创新得到了稀缺的血液制品产业链,其打造血液制品大平台的前景可以期待。 但是据了解,大安制药是一家至今亏损的制药公司。跨界进军血液制品的博晖创新是否能如愿以偿?
GB/T 5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定!有人做过这个方法没,用的什么液相色谱柱啊,我在网上找不到这种色谱柱,求做过的大侠指点下!
WS 281-2008 狂犬病诊断标准2008-02-28发布,2008-09-01实施,现行有效。该标准实施之日起,GB 17014-1997《狂犬病诊断标准及处理原则》废止。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=147886]WS 281-2008 狂犬病诊断标准[/url]
[font=宋体, SimSun][size=15px]蛋白质按来源可以分为动物蛋白和植物蛋白,两者所含的氨基酸是不同的。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]一般说,植物蛋白和动物蛋白从本质上没有太大的区别,但是在氨基酸组成和数量上有一定的不同。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]尽管植物蛋白取材来源广泛,但其蛋白的种类和相对数量与人体的要求有一定差距。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]例如,植物蛋白中缺乏免疫球蛋白[i][/i],谷类中则相对缺乏赖氨酸等。植物蛋白的消化、吸收要比动物蛋白差,但是植物蛋白的优势是不含有胆固醇。动物蛋白相对与人类的营养结构比较吻合,其蛋白质的种类和结构更加接近人体的蛋白结构和数量,而且一般都含有人体必需的8种氨基酸(特别是蛋制品和奶制品),所以动物蛋白质比植物蛋白质营养价值高。[/size][/font]
问了很多经销商,都没有这种标准品,含量≥95%就可以
功能性蛋白及一例分析自19世纪中叶荷兰化学家Gerardus Mul-der从动物组织和植物体中提取出蛋白质以来,人们发现了越来越多的蛋白质,据估计生物界中蛋白质的种类可达1010~1012之多;在这如此众多的蛋白质中,功能性蛋白发挥着极其重要的生理功能 。功能性蛋白也有人称其为活性蛋白。它们的特点是都有识别功能,能与其他分子特异性结合.完成各种复杂的生命活动:在结构上主要是一些球状蛋白质。1 功能性蛋白的种类按其作用方式不同可分为酶蛋白、运输蛋白、运动蛋白、免疫球蛋白、毒蛋白、激素蛋白(1)酶蛋白: 细胞的生长和繁殖、代谢物的合成和分解、能量的产生和利用,这些过程所需要的物质都是通过无数的生物化学反应来提供的.而这些反应又都是在一类特殊蛋白质—酶蛋白的催化下完成的。酶的催化效率极高,且具有高度的专一性,也正是这种高度的专一性使一种特定的酶只能作用于一种或少数几种结构相似的化合物,这就要求有各种不同的酶去作用于不同的化合物。在酶的作用下,生物细胞才得以合成各种复杂的化合物,也才能使各种大分子物质被分解、吸收和利用.且这些反应都要在适合于生物体本身的温度、压力和pH值等非常温和的条件下进行,能使生物细胞按照这种方式进行化学变化是蛋白质最重要的功能之一。常见的酶蛋白如淀粉酶使淀粉分解形成葡萄糖,蛋白酶、肽酶使蛋白质分解为氨基酸;溶菌酶使细菌细胞壁中的肤聚糖被破坏;凝血系统酶的有序作用使凝血过程得以有条不紊地进行.合成酶能合成多种体内所需要的大分子物质。应用举例:由于近年来鱼粉资源价格上涨,冷向军等人通过向鱼粉含量较低(10﹪)的饲料个添加蛋白酶AG使鱼的前肠蛋白酶有显著提高。同样有实验证明在玉米-豆粕型粮食中添加蛋白酶可以改善肉鸡的生长性能,提高蛋白质的消化率。(2)运输蛋白:有些蛋白质起载体的作用可以运输特定的物质到达必须的部位,使其完成特定的功能,这种蛋白质称为运输蛋白。如哺乳动物的血红蛋白能将氧从氧气充裕的肺内运送到各个组织中去:血清蛋白能与游离脂肪酶等多种物质结合,并将这些物质在脂肪组织与身体的其他部位间运送(最典型的β1-脂蛋白可随血流运输脂肪),铁传递蛋白能传递血液中的铁。无脊椎动物体内的血蓝蛋白,大豆根瘤中的豆血红蛋白也起着输送氧气的作用。另外还有一些能携带物质通过细胞膜进出细胞的蛋白质,如细菌过膜运输中的载体蛋白等,它们都属于运输蛋白。(3)运动蛋白:参与运动功能的蛋白质种类较多如脊椎动物中骨骼肌的主要成分就是肌动蛋白和肌球蛋白,肌肉的收缩就是靠着这两种互相联系的平行丝状蛋白相对滑动来完成的;细菌的运动器官——鞭毛也是由鞭毛蛋白组成的;绿藻的运动也离不开蛋白质;有丝分裂的完成,精子的运动等都与运动蛋白有关,所以绝大多数生物的运动和收缩过程都是运动蛋白参与的结果。应用举例:邱永忠等人在研究烟草花叶病毒(TMV)在植物细胞间的运动时发现用体外定位突变引起L株上,被点突变的DNA体外转录成RNA后感染感病烟草,结果定位突变的L株表型30kD蛋白基因四种位点不同的移码突变和一种基因中间大部分缺失的突变体均使病毒不能感染植株。这证明TMV 30kD蛋白与病毒运动有关,而与病毒复制无关。同时因为胞间连丝一般只能让小于1kD的分子通过,其通透范围远小于病毒颗粒,也小于折叠的病毒核酸分子,Wolf等实验证明正时因为30kD蛋白才使得植株分子半径扩散了三倍多。(4)免疫球蛋白:指具有抗体活性的动物蛋白。主要存在于血浆中,也见于其他体液、组织和一些分泌液中。脊椎动物的免疫系统能抵抗外来的入侵物质,如病毒、细菌以及其他机体的细胞,当外来的这些入侵物质(抗原)进入机体后就会激发机体的免疫系统而产生特异性的免疫球蛋白(抗体),通常每一种抗体对于相应的某一特定抗原具有高度的专一性,抗原与抗体结合形成抗原-抗体复合物.使入侵物质——抗原失活而排出体外,从而消除外来物质对机体的干扰。由此看来蛋白质不仅参与了高等动物的免疫反应,而且起着重要的作用,由于抗原和抗体结合的高度专一性,必然有数量众多的抗体作用于不同的抗原物质,据估计抗体的类型可能有10O万种,即免疫球蛋白可能有100万种之多。(5)毒蛋白:动物、植物和微生物都可以产生某些特殊的物质来防御敌害,这些物质中绝大多数是蛋白质类物质,由于它们对高等动物具有毒性,故称为毒蛋白。蝎类能产生毒性很强的蝎毒蛋白.用来攻击敌害,保护自己;蛇类产生的神经毒素和心赃毒素其主要成分也是小分子量的蛋白质;毒蘑菇中的相当一部分蘑菇毒素也是蛋白质;细菌产生的毒素,毒性极强的肉毒梭菌毒素(人的致死量小于19m)和破伤风痉挛毒素、白喉杆菌毒素等外毒素均是蛋白质。应用举例:王峰等人研究核糖体失活蛋白(RIPS)是一类能够抑制细胞核糖体合成蛋白质,从而导致宿主死亡的毒蛋白,广泛存在于植物、细菌中。发现其在在细胞内的转运途径研究很多,目前较为清楚的是逆向转运途径,其中以蓖麻毒素、志贺菌毒素、霍乱毒素为代表,大体过程为:内吞一内吞小体一高尔基体一内质网一胞液。(6)激素蛋白:是由特殊细胞所产生的一类物质,它们通过与靶细胞或系统内其它器官的相互作用来发挥其代谢上的功能,其实许多激素本身就是蛋白质,这样的蛋白质称为激素蛋白,它们在生物合成上具有重要的功能。如胰高血糖素、胰岛素、胃泌素、生长激素、促甲状腺激素、促肾上腺皮质激素和促脂解激素等均是蛋白
[font='calibri'][size=13px]MC2-1数显折光仪[/size][/font]1、 [size=18px]应用场景[/size][size=18px]犊牛对初乳中免疫球蛋白的吸收率在出生后达到高峰,并且在出生后的72h内吸收量会迅速下降。因此,尽早饲喂初乳是保证犊牛充分吸收免疫球蛋白,获得被动免疫并转为主动免疫的关键点,所以说把控初乳的质量非常重要。[/size]2、 [size=18px]质量判定对照表[/size][size=18px]初乳质量判定表:[/size][table][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]折射仪[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]IgG mg/mL[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]质量判定[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]>22%[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]>50[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]好[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]20.0-21.9%[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]24.99-49.9[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]一般[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]<19.9%[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]<25[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]差[/size][/font][/align][/td][/tr][/table]3、 [size=18px]操作步骤[/size][size=18px]首先点击read开机,打开测样区盖,加入纯净水校准,长按CAL,仪器显示屏闪CAL,在快速点击一下,屏幕显示0.00说明仪器校准成功,将纯净水倒出,冲洗一下后,拿吸水纸擦干,不要划到玻璃,我们要测的样本是初乳,选择S01模式下检测初乳,在检样区加入样本初乳,盖上盖子避免阳光直射,点击read开始测量,2s后屏幕显示测量数值。测量完毕后将样本倒掉,用纯净水戏精,吸水纸擦干。仪器静置自动关机。[/size]4、 [size=18px]测量结果[/size][table][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]样品名称[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]折光率%[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]1[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.3[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]2[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.6[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]3[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.4[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]4[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]21.9[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]5[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.4[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]6[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.0[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]平均值[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]22.27[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]STD[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]0.24[/size][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font='calibri'][size=18px]CV[/size][/font][/align][/td][td][align=center][font='calibri'][size=18px]1.09%[/size][/font][/align][/td][/tr][/table]5、 [size=18px]注意事项[/size][size=18px]1.仪表每次测量完一种样品后,请清洗并擦干滴液口。[/size][size=18px]2.不要残留腐蚀性物质在滴液口上。[/size][size=18px]3.在对腐蚀性液体进行完测量后,请尽快清洗滴液口以避免对棱镜和金属表面造成不可修复的损伤.。[/size][size=18px]4.擦洗时请使用柔软的布或纸进行擦拭,避免划伤滴液口玻璃。 [/size][size=18px]5.滴管和无尘布不使用时,请用清水洗干净,晾干后再放入包装盒内.。[/size][size=18px]6.如果长时间不使用仪表,请卸下电池,并在干燥阴凉环境下保存。[/size]
乳清蛋白定义:一种存在于几乎所有哺乳动物乳汁中的蛋白质,由123个氨基酸残基组成,其氨基酸序列和立体结构均与溶菌酶同源,是乳糖合酶的一个亚基。 所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);氨基酸、多肽与蛋白质(二级学科) 乳清蛋白主要成分 β-乳球蛋白 具备最佳的氨基酸比例,支链氨基酸含量极高,对促进蛋白质合成和减少蛋白质分解起着重要的作用,有助于健身爱好者塑造优美体型。 α-乳白蛋白 是必需氨基酸和支链氨基酸的极好来源,也是唯一能与金属元素和钙元素结合的乳清蛋白成分。最近的研究更发现,它可能具有抗癌功能。此外乳白蛋白在氨基酸比例结构方面,以及在功能特性上与人乳都非常相似的。临床研究显示,富含α-乳白蛋白的婴儿配方奶粉是安全的。 免疫球蛋白 具有免疫活性,能够完整地进入近端小肠,起到保护小肠粘膜的功能。 乳铁蛋白 抗氧化,消灭或抑制细菌,促进正常细胞生长,提高免疫力。 作为乳清蛋白(优恩乳清蛋白)特有的一种蛋白质组分,乳铁蛋白可以为运动员带来几种重要的益处。牛奶乳铁蛋白在成年人体内是以完整蛋白质的形式被吸收的,其健康益处包括潜在抗菌活性和抗病毒特性,防止致病微生物在肠道内生长,刺激免疫系统和调节组织损伤造成的炎症。乳铁蛋白在铁和骨骼代谢方面的重要作用是运动员尤为关心的。 在乳清中发现的乳铁蛋白被证实对骨骼代谢也具有直接的益处。在细胞培养研究中,乳铁蛋白具有促进造骨细胞和软骨细胞增殖的功能,并能增加其生理含量,这一效果超过其他骨骼生长因子,如IGF-1和TGFb。乳铁蛋白在骨骼代谢中具有合成的作用对于骨骼健康和预防骨质疏松症具有重要意义。 并且,肌体内的氧气输送离不开铁。乳铁蛋白(铁传递蛋白的一种)的一个重要功能是使血液中的细胞结合铁。乳铁蛋白阻隔并溶解铁,从而控制肠道代谢中的可利用铁。因此,乳铁蛋白在维持血红细胞、血色素和氧气运输的健康调节方面也担当重要作用。
我现在想检测乳品中的乳球蛋白含量,一般样品的制备是取1ml乳制品样品,依次加入1ml水和2ml样品缓冲液,沸水浴煮3~5分钟,磁力搅拌4小时,离心去除脂肪,取清液分装备用,样品在-20℃可保存6个月。请问标准品怎样制备?一般上样的话,多大浓度比较好?
[color=black]猪伪狂犬病毒荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法的模块化构建及实践[/color][color=black]1 前言[/color][color=black]猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(Pseudo rabies virus,PRV)引起的猪的急性传染病。该病在猪呈暴发性流行。可引起妊娠母猪流产、死胎,公猪不育,新生仔猪大量死亡,育肥猪呼吸困难、生长停滞等,是危害全球养猪业的重大传染病之一。[/color][color=black]伪狂犬病毒属于疱疹病毒科(Herpesviridae)、猪疱疹病毒属,病毒粒子为圆形,直径150~180nm,核衣壳直径为105~110nm。病毒粒子的最外层是病毒囊膜,它是由宿主细胞衍生而来的脂质双层结构。囊膜表面有长约8~10nm呈放射状排列的纤突。[/color][color=black]伪狂犬病毒是疱疹病毒科中抵抗力较强的一种。在37℃下可存活7h,8℃可存活46天,而在25℃干草、树枝、食物上可存活10~30天,但短期保存病毒时,4℃较-20℃冻结保存更好。病毒在pH4~pH9之间保持稳定。5%石炭酸经2min灭活,但0.5%石炭酸处理32天后仍具有感染性。0.5%~1%氢氧化钠迅速使其灭活。对乙醚、氯仿等脂溶剂以及福尔马林和紫外线照射敏感。[/color][color=black]伪狂犬病毒在全世界广泛分布。伪狂犬病自然发生于猪、牛、绵羊、犬和猫,另外,多种野生动物、肉食动物也易感。水貂、雪貂因饲喂含伪狂犬病毒的猪下脚料也可引起[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%BC%AA%E7%8B%82%E7%8A%AC%E7%97%85%22 \t %22_blank][color=black]伪狂犬病[/color][/url][color=black]的暴发。[/color][color=black]猪是伪狂犬病毒的贮存宿主,病猪、带毒猪以及带毒鼠类为本病重要传染源。不少学者认为,其他动物感染本病与接触猪、鼠有关。[/color][color=black]在猪场,伪狂犬病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪,另外,被伪狂犬病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。而空气传播则是伪狂犬病毒扩散的最主要途径,但到底能传播多远还不清楚。人们还发现在邻近有伪狂犬病发生的猪场周围放牧的[/color][url=https://baike.baidu.com/item/%E7%89%9B%E7%BE%A4%22 \t %22_blank][color=black]牛群[/color][/url][color=black]也能发病,在这种情况下,空气传播是惟一可能的途径。在猪群中,病毒主要通过鼻分泌物传播,另外,乳汁和精液也是可能的传播方式。[/color][color=black]除猪以外的其他动物感染伪狂犬病毒后,其结果都是死亡。猪发生伪狂犬病后,其临诊症状因日龄而异,成年猪一般呈隐性感染,怀孕母猪可导致流产、死胎、木乃伊胎和种猪不育等综合症候群。15日龄以内的仔猪发病死亡率可达100%,断奶仔猪发病率可达40%,死亡率20%左右;对成年肥猪可引起生长停滞、增重缓慢等。[/color][color=black]伪狂犬病的发生具有一定的季节性,多发生在寒冷的季节,但其他季节也有发生。[/color][color=black]新生仔猪感染伪狂犬病毒会引起大量死亡,临诊上新生仔猪第1天表现正常,从第2天开始发病,3~5天内是死亡高峰期,有的整窝死光。同时,发病仔猪表现出明显的神经症状、昏睡、呜叫、呕吐、拉稀,一旦发病,1~2日内死亡。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点,有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。15日龄以内的仔猪感染本病者,病情极严重,发病死亡率可达100%。仔猪突然发病,体温上升达41℃以上,精神极度委顿,发抖,运动不协调,痉挛,呕吐,腹泻,极少康复。断奶仔猪感染伪狂犬病毒,发病率在20%~40%左右,死亡率在10%~20%左右,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。成年猪一般为隐性感染,若有症状也很轻微,易于恢复。主要表现为发热、精神沉郁,有些病猪呕吐、咳嗽,一般于4~8天内完全恢复。怀孕母猪可发生流产、产木乃伊胎儿或死胎,其中以死胎为主无论是头胎母猪还是经产母猪都发病,而且没有严格的季节性,但以寒冷季节即冬末春初多发。[/color][color=black]伪狂犬病的另一发病特点是表现为种猪不育症。近几年发现有的猪场春季暴发伪狂犬病,出现死胎或断奶仔猪患伪狂犬病后,紧接着下半年母猪配不上种,返情率高达90%,有反复配种数次都屡配不上的。此外,公猪感染伪狂犬病毒后,表现出睾丸肿胀、萎缩,丧失种用能力。[/color][color=black]由于猪伪狂犬病毒可以通过精液传播,一旦公猪感染伪狂犬,则在短时间内可快速导致整个猪场母猪群感染该病。而猪伪狂犬病又可通过乳汁传播,故感染伪狂犬病的母猪又可快速导致整个猪场的仔猪感染该病。因此,非常有必要对种猪(公猪、母猪)进行猪伪狂犬病进行病毒核酸监测,并实施猪伪狂犬病实施净化措施。[/color][color=black]2 模块化检测方法思路[/color][color=black]总体思路是:将动物疫病荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测分为三个模块,核酸提取采用DNA/RNA共提试剂,核酸扩增采用预混液+引物探针方式,质控品利用抗原或商品化疫苗自制。具体思路如下:[/color][color=black]——核酸提取采用DNA/RNA共提试剂;[/color][color=black]——引物探针严格按照标准方法,委托生物工程公司合成;[/color][color=black]——反应体系中其他成分,采购商品化q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液;[/color][color=black]——质控品:阳性对照采用商品化疫苗,测定结果后按一定比例稀释,保存备用。[/color][color=black]——反应体系:设为20μL,其中包含:预混液(2×)10μL、ROX 0.4μL为固定量,引物探针加入量根据检测标准中的终浓度予以换算,加灭菌水补足18μL,RNA模板为2μL;[/color][color=black]——反应条件首先按照标准中的条件开展摸索,如达到预期效果则予以固定;如效果不佳则参照预混液及引物探针推荐条件进行适当调整。[/color][color=black]3 材料和方法[/color][color=black]3.1 病毒[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗。[/color][color=black]3.2 试剂[/color][color=black]DNA/RNA共提试剂盒:FastPure Viral DNA/RNA Mini Kit试剂盒,南京诺维赞生产;[/color][color=black]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液:AceQ Universal U+ Probe Master Mix V2,南京诺维赞生产。[/color][color=black]3.3 引物探针[/color][color=black]按照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》提供的序列,委托上海生工合成,引物稀释成10μmol/L、探针稀释成5μmol/L,分装成小包装冷冻保存备用。具体序列如下:[/color][color=black]检测gH基因引物探针序列:[/color][color=black]正向引物:5’-ACGCTCGGCTTCCTCTCC-3’[/color][color=black]反向引物:5’-GGTAGTCGTCGCTCTCGTG-3’[/color][color=black]探 针:5’-FAM-TCGCGCATCGTCTGGTGCAT-BHQ1 -3’[/color][color=black]检测gE基因引物探针序列:[/color][color=black]正向引物:5’-GCTGTACGTGCTCGTGAT-3’[/color][color=black]反向引物:5’-TCAGCTCCTTGATGACCGTGA-3’[/color][color=black]探 针:5’-VIC-CACAACGGCCACGTCGCCACCTG-BHQ1 -3’[/color][color=black]3.4 反应体系[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》所载反应体系,按照终浓度一致原则予以转化。具体转换方法:[/color][color=black]——反应体系总体积设定为20μL;[/color][color=black]——将标准中反应体系的10×[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer、MgCl2、dNTPs、Taq酶等成分转换为q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液10μL(推荐量);[/color][color=black]——因使用ABI7500荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪,故在体系中加入ROX 0.4μL;[/color][color=black]——标准中gH基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.2μmol/L,gE基因正向引物、反向引物、探针的终浓度分别为0.2μmol/L、0.2μmol/L和0.12μmol/L,故在修改后的体系中加入量为0.4μL、0.4μL、0.8μL和0.4μL、0.4μL、0.48μL;[/color][color=black]——总DNA加入量修改为2μL(根据经验该加入量已经足够);[/color][color=black]——根据上述各成分用量,补充体积的无核酸酶水修改为4.72μL。[/color][table][tr][td][color=black]标准方法[/color][/td][td][/td][td][/td][td][color=black]修改方法[/color][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]10Χ [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Buffer[/color][/td][td][align=center][color=black]5.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]2Χ q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]Taq酶(5U/μL)[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]ROX[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]dNTPs(100mmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.5[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]MgCl2[/color][/td][td][align=center][color=black]0.25[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gH基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.8[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gH基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.4[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因正向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]gE基因探针(5μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.48[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因反向引物(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]1.0[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]4.72[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]gE基因探针(10μmol/L)[/color][/td][td][align=center][color=black]0.6[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]2.0[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]无核酸酶水[/color][/td][td][align=center][color=black]23.95[/color][/align][/td][td][/td][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]20[/color][/align][/td][/tr][tr][td][color=black]内参质粒[/color][/td][td][align=center][color=black]0.2[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总DNA[/color][/td][td][align=center][color=black]10[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][tr][td][color=black]总体积[/color][/td][td][align=center][color=black]50[/color][/align][/td][td][/td][td][/td][td][/td][/tr][/table][color=black]3.5 反应条件[/color][color=black]参照GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》推荐的扩增程序,结合ABI7500荧光采集时间不能少于34s的要求,进行预试验。扩增程序如下:[/color][color=black]50℃2min →95℃2min →(95℃15s → 60℃34s)*40[/color][color=black]如扩增结果理想,则不做修改直接采纳,否则进行适当调整。[/color][color=black]4 试验结果[/color][color=black]对猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)进行核酸检测,结果较理想。扩增曲线如下:[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009251442207825_7042_1627156_3.jpg[/img][/align][color=black]注:因猪伪狂犬疫苗BK61株属于gE基因缺失苗,故gE基因未能检出。[/color][color=black]5 阳性质控的制备[/color][color=black]根据GB/T 35911-2018 《伪狂犬病病毒荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法》规定,阳性对照应Ct≤30。对猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)适当稀释后进行再次检测,结果如下:[/color][table][tr][td][align=center][color=black]稀释倍数[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^0[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^1[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^2[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1:10^3[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]PRV疫苗(BK61株)[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]19.12[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]22.58[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]25.90[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]29.58[/color][/align][/td][/tr][/table][color=black]经综合判定,最后采用猪伪狂犬病毒疫苗(BK61株)作1: 10^2稀释,分装为200μL/管作为阳性质控,Ct值约26,-70℃冻存备用。[/color][color=black]6 讨论[/color][color=black]6.1 检测工作更加方便高效[/color][color=black]一是在核酸提取环节采用了DNA/RNA共提试剂,待检样品经一次提取核酸,除可应用于伪狂犬病毒、圆环病毒、非洲猪瘟等DNA病毒项目检测外,还可应用于口蹄疫、蓝耳病等RNA病毒项目检测;[/color][color=black]二是由于实验室储备了足够量的q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液,在开展检测时,不必担心部分检测量较少的项目由于试剂组分不足而罢工事件的发生;[/color][color=black]三是由于q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]预混液适用于多数DNA病毒项目的检测,在检测任务发生重大变化时,可以方便地调整检测项目,不必担心试剂不足或浪费情况的发生。[/color][color=black]6.2 阳性质控品制备方便[/color][color=black]猪伪狂犬病毒疫苗是较常用的动物免疫用疫苗,只需对疫苗进行含量测定,进行一定比例的稀释即可作为实验室内部的阳性质控品。[/color][color=black]6.3 适用性有待进一步验证[/color][color=black]尽管在构建新方法时,对适用性进行了验证,但由于缺少伪狂犬全基因疫苗,因此对于gE基因的适用性未对进行验证。对于其他毒株,尤其是较新型的变异株是否有效,尚有待进一步观察和验证。[/color][color=black]6.4 严格依法依规操作[/color][color=black]如果有关法律法规或上级有关部门出台政策,要求采用获批准的成品试剂盒用于检测,则实验室必须及时停止自建方法的使用。[/color]
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=107758]狂犬病暴露后处置工作规范(试行)[/url]
T/DYZL 006-2019 乳免疫蛋白粉 α-乳白蛋白
[font=宋体]抗体,作为一类特殊的蛋白质,在免疫系统中发挥着至关重要的作用,它们能够特异性地识别并中和外来病原体,如细菌和病毒。而蛋白质,作为生命活动的基础分子,具有多种多样的功能,从酶催化到结构支撑,无所不包。抗体与蛋白的区别在于,抗体是一类具有特定功能的蛋白质,而蛋白质则是更广泛的一类生物分子。本文将深入探讨抗体与蛋白的具体区别,并详细解析抗体蛋白的结构与功能,为读者提供一个全面而深入的理解。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体与蛋白的区别?[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]定义:[/font][font=宋体][font=宋体]抗体([/font][font=Calibri]antibody[/font][font=宋体])是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型[/font][font=Calibri]ABO[/font][font=宋体]型中的抗[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]和抗[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]和不完全抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等,国际上用抗[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]免疫球蛋白预防因[/font][font=Calibri]Rh[/font][font=宋体]血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎,抗核抗体([/font][font=Calibri]ANA[/font][font=宋体])、抗[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]抗体用于系统性红斑狼疮,抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等;治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical][b]抗体相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白:[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白质是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。氨基酸是蛋白质的基本组成单位。它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的[/font][font=Calibri]16%~20%[/font][font=宋体],即一个[/font][font=Calibri]60kg[/font][font=宋体]重的成年人其体内约有蛋白质[/font][font=Calibri]9.6~12kg[/font][font=宋体]。人体内蛋白质的种类很多,性质、功能各异,但都是由[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]多种氨基酸([/font][font=Calibri]Amino acid[/font][font=宋体])按不同比例组合而成的,并在体内不断进行代谢与更新。点击查看:[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review][b]蛋白相关资源[/b][/url][/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]区别与联系:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]蛋白质还是有一定的区别以及关联性的,虽然说抗体是蛋白质,但是蛋白质不一定是抗体。[/font] [font=宋体]主要是因为抗体是通过人体内的浆细胞所产生的,而且还可以喝相应的抗原特异性相互结合,这样在一定程度上就能发挥出蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]抗体[/font][font=宋体]蛋白[/font][font=宋体]结构[/font][font=宋体]解析[/font][font=宋体]:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]抗体是一种免疫球蛋白,由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞产生。抗体的单体是一个[/font][font=Calibri]Y[/font][font=宋体]形的分子,有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条多肽链组成。其中包括两条相同的重链,以及两条相同的轻链,之间由双硫键连接在一起。每条重链[/font][font=Calibri]50kDa[/font][font=宋体],每条轻链[/font][font=Calibri]25kDa[/font][font=宋体],轻重链间存在二硫键链接。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]轻链[/font][font=宋体][font=宋体]轻链包括可变区和恒定区,可变区约占轻链的[/font][font=Calibri]1/2[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]重链[/font][font=宋体][font=宋体]重链包括可变区和恒定区。根据重链的不同,可以将抗体分为不同的种类,例如哺乳动物[/font] [font=Calibri]Ig [/font][font=宋体]的重链有α、δ、ε、γ和 μ 五种[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]相对应可以将哺乳动物[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]分为 [/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG [/font][font=宋体]和 [/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]五类。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可变区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端存在一段氨基酸序列变化较大的区域,该区域称为可变区。可变区中存在可以与抗原特结合的部位,即抗原结合位点。一个抗体有两个抗原结合位点,可以同时结合两个抗原分子。在可变区中有三个区域的序列高度变化,成为高变区([/font][font=Calibri]hypervariable region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]HVR[/font][font=宋体])又称为抗原互补决定区([/font][font=Calibri]complementarity determining region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体])。可变区主要通过其[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]CHR[/font][font=宋体]区形成[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个环状结构与抗原特异性结合。可变区中非[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]部分成为骨架区([/font][font=Calibri]framework region[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]FR[/font][font=宋体]),其氨基酸组成和排列变化相对[/font][font=Calibri]CDR[/font][font=宋体]较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]恒定区[/font][font=宋体][font=宋体]抗体分子[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端氨基酸序列相对稳定,该区域称为恒定区。同一种抗体的恒定区是相同的。抗体轻链的恒定区由一个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域构成;重链的恒定区由[/font][font=Calibri]3-4[/font][font=宋体]个串联的[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]结构域及一个用于增加灵活性的铰链区构成。[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]有三个结构域([/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]),[/font][font=Calibri]IgD[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IgM[/font][font=宋体]有四个结构域([/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH4[/font][font=宋体])。不同种类抗体的铰链区存在一定的差异,[/font][font=Calibri]IgA[/font][font=宋体]的铰链区较短,[/font][font=Calibri]IgD [/font][font=宋体]的铰链区较长,[/font][font=Calibri]IgM [/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IgE [/font][font=宋体]无铰链区。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]分子在木瓜蛋白酶的作用下可以被降解为两个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段及一个[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]段由抗体轻链的可变区、轻链的恒定区、重链的可变区及重链恒定区构成。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段包含了所有抗体分子共有的蛋白质序列以及各个类别独有的决定簇。[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]段有多种生物学活性,具有结合补体、结合[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体、通过胎盘等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多关于[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function][b]抗体的结构和功能[/b][/url]详情:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-structure-function[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]
生产中需要一种比较简便、快速的监测仪器,请予指教。