使用四丁基溴化铵作离子对,有机相使用乙腈会降低离子对作用吗?
请教一下有经验的老师,岛津 C-18 4.6X150mm的色谱柱再用过离子对试剂(四丁基溴化铵)后,对柱子性能有什么影响吗?相对没用过之前柱子会不会变差?
各位大虾们好。请教一个问题。我的流动相是磷酸氢二铵、甲醇、四丁基溴化铵。四丁基溴化铵是离子对试剂。现在我手头只有分析纯的。请问可以用做流动相吗?我的甲醇是色谱纯的。谢谢指教了
大家都知道离子对试剂对色谱柱有比较大的损伤,但到底离子对试剂是伤害柱子的那个部分,这一点我一直不太明白,这方面介绍资料似乎也没有太多,请大家一起讨论一下,目的只有一个,就是弄清楚原因,然后避免它损伤柱子的情况,延长色谱柱的使用寿命。在这里我们从大家最熟悉C18为出发点,C18填料上面包含有硅胶基质上的Si-O-Si键,有链接C18长链的Si-C键,还有有C18长链。常用的两类离子对试剂如:四丁基溴化铵Br-N(CH2CH2CH2CH3)4、辛烷磺酸钠 NaSO3-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH3,它们到底是怎么伤害的柱子?请各位版友发表高见,奖励积分!
【序号】:5【作者】: 宓英其【题名】:不同阴离子化2-羟丙基三甲基铵类壳聚糖的制备、活性及性能研究【期刊】:中国科学院大学(中国科学院烟台海岸带研究所)【年、卷、期、起止页码】:2019【全文链接】:https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFD201902&filename=1019909665.nh&uniplatform=NZKPT&v=Tb5dxN6PyXtwEP263qxVa4fkRlfspmQqPGAe_cjbNcQGjz0XyrMMcWgIhyqvAxg1
使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时,样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留,这时要加入相应的离子对试剂,将分析物上的离子进行结合,形成在柱子上有保留的分子。我们使用离子对试剂将它留住。一、离子对试剂的定义:离子对试剂是由强亲水离子形成,反作用于样品分子的中性离子对。因此,可用于同时分离带电分子和非带电分子。二、适用范围:一般可适用所有色谱固定相。当使用长链的离子对试剂时,如:十六烷基硫酸铵或十二烷基硫酸钠,色谱柱将选用反相色谱柱。三、使用浓度:离子对试剂的适用浓度短链离子对试剂:5×10-3mol/L 长链离子对试剂:5×10-4mol/L使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时,样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留,这时要加入相应的离子对试剂,将分析物上的离子进行结合,形成在柱子上有保留的分子。就像是一个物质要穿色谱柱而过时,我们使用离子对试剂将它留住。离子对试剂是在高效液相色谱法中引入了离子色谱方法的一种表现。它主要是作用于样品和固定相之间的一种物质,所以在选择离子对试剂时,要考虑色谱柱的填料和样品的酸碱性。离子对试剂的种类和浓度对分离效果都有较大的影响.离子对试剂种类的选择依赖于被分离样品的性质.被分离溶质是强酸或强碱,离子对试剂可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸,如被分离的溶质是弱酸或弱碱,则选用的离子对试剂必须是强碱或强酸.对于溶质结构性质相差较大的混合样品,离子对试剂种类的选择并没有特殊要求.离子对试剂疏水性的差别可以通过调节离子对试剂浓度和有机溶剂浓度获得满意的分离效果。离子对试剂用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。广泛应用于生物化学,药物学,和石油化工等领域。一、用于酸性化合物 1、四丁基氢氧化铵(10%水溶液) 2、四丁基溴化铵3、十二烷基三甲基氯化铵二、用于碱性化合物 1、戊烷磺酸钠2、己烷磺酸钠 3、庚烷磺酸钠4、辛烷磺酸钠5、癸烷磺酸钠离子对试剂是高效液相色谱专用试剂,主要分析测试有机碱类离子化合物,代替离子交换法,具有可靠的分离效果。也可用于分析多肽和蛋白质,是制备抗静电聚脂纤维的中间体.常用离子对试剂1-戊烷磺酸钠 CAS:22767-49-31-己烷磺酸钠 CAS:2832-45-31-庚烷磺酸钠 CAS:22767-50-61-辛烷磺酸钠 CAS:5324-84-51-癸烷磺酸钠 CAS:13419-61-91. 选择一根适合的色谱柱,常为C18柱;2.准备流动相时仅使用HPLC级别的水和色谱级试剂;3.选择能给出最佳分离度的流动相成分和浓度;4.如果样品中有非离子化物质,在尝试离子化分离之前首先优化分离情况;5.选择合适的离子对系列试剂以提供相应的离子配对:对于酸性分析物使用酸性离子对试剂;对于碱性分析物使用碱性离子对试剂;6.通过比较选择所得分离度最好的离子对试剂;7.一旦离子对试剂已经确定,调节流动相的pH值将分离度最大化;因为微小的pH值改变对保留性质和选择性都有较大的影响,所以仔细小心的小幅度调节pH值;8.理想状况下,流动相中的离子对试剂浓度应为0.005M,但是稍微增加离子对试剂可能会稍微增加保留性质并因此优化分离情况。在过去,带电荷分析物的色谱分离通过离子抑制(小心调节流动相PH值以使分析物非离子化)来达到。然而,要确定离子抑制状态下的最佳流动相PH值,却往往需要额外的摸索过程。含有一个以上的可离子化成分的样品,通常是不稳定的。离子抑制的局限性导致了一种新的、更普遍适用的方法进行可离子化物质色谱分离的方法:离子对色谱。离子对色谱由Gordon Schill博士于1973年建立,其方法是将离子性化合物添加到流动相中以促使离子与带电荷分析物形成配对离子。这些试剂由带有可离子化终端的烷基链组成。当在反相条件下用于常见的憎水性HPLC固定相时,离子对试剂可选择性的增加带电荷分析物的保留时间。尽管离子交换色谱已经成为常见的分离模式,它并非在所有情况下都起作用。较离子交换色谱,离子对色谱的优点在于:ü缓冲液制备简单;ü碳链长度选择众多,可用于增加保留时间、改善分离性质;ü显著缩短分离时间;ü同时分离离子化和非离子化分析物;ü有效改善峰形对色谱柱伤害较大。离子对试剂会对色谱柱造成不可逆的伤害,离子对试剂和固定相结合产生不可逆吸附,进而影响固定相活性位点。比如十八烷基硅胶键合色谱柱,离子对试剂会影响色谱柱键合,从而达到分析样品的作用。这种反应对色谱柱影响很大,而且离子对试剂很难从色谱柱上冲洗干净,会大大缩短色谱柱的使用寿命。ü实验条件不稳定。离子对试剂的浓度与其样品的保留时间有直接的影响,而且离子对试剂对pH值比较敏感,配制流动相时要求精确度较高。否则直接影响实验的重复性和重现性
如题,我准备试试四丁基溴化铵做离子对试剂 ,不知能不能用ELSD(蒸发光散射检测器)做检测器,如果用过的话,请大家帮忙指点
[align=left]1、作用原理[/align][align=left] “加入离子对试剂后,它可以与待分析的物质(多为在溶液状态时显以与离子对试剂相反的电荷)结合成离子对而呈中性,这样非极性就表现出来,从而在色谱柱上有保留行为。”[/align][align=left] 我觉得离子对试剂很像胶黏剂,一头以离子吸引住待测物(也是离子),另一头以碳链与固定性作用,从而把待测物保持在固定相上 。它的优点和缺点,都是因为这样的特性。[/align][align=left] 2、试剂选择[/align][align=left] “离子对分为正离子对和负离子对,分析酸性样品(确切的说应该是作用基团)用正离子对试剂,分析碱性样品用负离子对试剂。[/align][align=left] 正离子对试剂可以吸附带负电荷的样品组分,负离子对试剂反之。戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠……十二烷基磺酸钠都属于负离子对试剂;四丁基溴化铵、四丁基硫酸氢铵一类属于正离子对试剂。[/align][align=left] 离子对要考虑样品体系的复杂性和干扰物的特性,先用原则一般尽可能使用碳链短的先,这样可以避免强保留造成对柱子效能的影响,同时,浓度尽可能的低,以保证对柱子填料的稳定性影响最小及清洗方便。”[/align][align=left] 看来做实验下手轻点儿好,从碳链短的开始,从低浓度开始,不行再慢慢加。不过这次的使用经验是从碳链长度中等的开始,可以更快看到效果,节约摸索分析条件的时间。同时流动相PH值尽可能低以确保离子化程度。[/align][align=left] 3、试剂的使用[/align][align=left] “离子对试剂不一定是表面活性剂,如己烷和庚烷磺酸钠,又如三乙胺活四丁基溴化胺,不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷盐就没有泡末,用四丁基溴化胺也不产生气泡。十二烷基磺酸钠(或硫酸钠),或者十六烷基溴化钠(CTAB,一种做阴离子用的阳性表面活性剂),在浓度高的时候容易产上泡末。做HPLC时流动相里加的SDS或CTAB浓度一般不会太高,一般在0.1%以下,而且流动相里有甲醇等有机溶剂,高浓度的有机溶剂有破乳的作用,因此,混合后的流动相泡末应该不会很多。另外,做电泳加入的SDS量很大的比如做蛋白质SDS胶,或者毛细管电泳里的MECC,SDS浓度很高,而且没有或者有很少比例的有机改性剂,当然会有气泡,跟HPLC不完全相同。”[/align][align=left]达人们的意思我看明白了,就是有点泡沫不要怕,确保溶液摇匀就好。[/align][align=left]使用离子对试剂时,调节保留时间的方式与普通反相不同,变化有机相比例没有改变PH值来得有效。[/align][align=left] “当流动相PH值较高时,样品以中性形式存在,那么正电荷较少,相应的保留较弱;当流动相PH值较低时,样品便以质子碱H+形式的离子状态存在,那么正电荷与固定相上带负电荷的-SO3强烈吸附,相应的保留会非常强。”[/align][align=left] “再说明一下B物质的pKa,其值为10.5,在pH为4.5、3.8时都以离子态存在,这点没错,虽然都是离子态,都是99%以上,但从量上说还是有点不一样的。任何物质以离子态存在时都有一个平衡的状态:B+(H+)==(BH+),这里存在着一个平衡常数K(或者说离解常数),于是pH不同时,H+不同,对应的B、BH+也不同。所以才会出现pH不同,保留值会不同。[/align][align=left] 另外我认为4.5和3.8的pH相差不大,其改变对物质的保留值影响不会很大,因为在流动相中还受到很多因素的影响。”[/align][align=left]4、使用后清洗[/align][align=left] 大家都强调离子对试剂要冲洗较长时间才能洗去。想想也知道那简直是一定的,使用前平衡了老半天呢,要是轻易就能洗去就怪了。[/align][align=left] 对于多数离子对试剂,清洗还是比较简单的,平时的水——甲醇就能奏效,只是时间必须长点,2小时比较好。[/align][align=left] 有些例子比较特殊:[/align][align=left] “如果用TBA的话应该需要好好洗洗柱子,因为这种胺类的东西不容易洗干净,且会慢慢溶解硅胶。 通常TBA是用0.1%的磷酸,(其中含有100mM 高氯酸钠)与甲醇 1:1 来洗。磷酸的作用是调节pH, 高氯酸钠可以把胺带下来,甲醇增加对有机物的溶解度。”[/align][align=left] “根据试验经验,SDS在酸中的溶解性较差,因为它是强碱弱酸盐,在酸性条件下可以生成不溶于水的弱酸十二烷基磺酸,但此酸在有机相中溶解性较好,所以即使在水相中有不溶解的SDS,在加入有机相后反而会使之溶解。所以在流动相中不含有其他盐时,完全可以用比例较高的有机相水洗涤。”[/align][align=left]5、其他[/align][align=left] 很早就知道,醋酸铵可以起部分离子对试剂的作用,没想到TFA也可以。[/align][align=left] “英文文献中是经常称之为ion-pair reagent的!而且不只是用来掩蔽填料上残留的活性硅羟基,TFA的氟端还能与分析物的疏水部分相“配对”呢”[/align][align=left] “我觉得缓冲液可以更准确的控制所需的PH值,而加酸所得到的PH值不够稳定,很容易随着温度、流动相组成的微小变化而改变,但是缓冲液中的盐成分对色谱柱的使用寿命来讲不是什么好事。[/align][align=left] 选用酸还是缓冲液来控制流动相PH值,最好依据分析方法的耐用性来选择!保留性、选择性对PH的变化不是很敏感的话,加酸应该就可以了![/align][align=left] 另外:磷酸盐缓冲液和醋酸盐缓冲液可以控制的PH值范围是不同的![/align][align=left] 磷酸盐可以控制PH值范围在2.1~3.1和6.2~8.2[/align][align=left] 醋酸盐可以控制的PH缓冲范围是3.8~5.8”[/align][align=left] 离子对试剂的使用应该还有很多不同的见解,希望有经验的同行补充! [/align]
关于离子对试剂,普遍认为的是对离子和目标物离子形成的疏水的缔合物,并且降低了其极性,因而得于保留。我的弱智问题是:假如我离子对试剂是四丁基溴化铵,用来分析有机弱酸。那么为什么是四丁基铵正离子和有机酸根阴离子形成缔合物?氯离子不能阻止它们作用吗?是不是氯离子和四丁基铵正离子作用没有有机酸根阴离子和四丁基铵正离子作用强所导致的吗?问题比较弱智,我是很困惑的。
聚羟丙基二甲基氯化铵现在只知道CAS 25988-97-0,为一种聚合物,含量一般50%-60%,现在想用HPLC测一下,安捷伦的1260,试了EXTEND/XDB C18色谱柱,都是没保留,有没有测这类物质推荐的色谱柱和流动相
正在做萘的异丙基化反应,因为2,6-二异丙基萘和2,7-二异丙基萘标样太贵了,请教各位大牛,这两种物质在色谱中出峰顺序哪个在前?哪个在后? 非常感谢!!
反相离子对色谱法测定马尾松松针中莽草酸的含量 马廉举, 刘 新(重庆医科大学药学院, 重庆400016)摘要 目的: 建立反相离子对色谱法测定马尾松松针中莽草酸的含量方法。方法: 采用D iamonsil C18色谱柱( 250 mm @ 41 6 mm, 5 Lm ), 流动相为5 mmo l/L磷酸溶液( 先用2 mo l/L氢氧化钠调至pH 612, 再加入四丁基溴化铵, 使其浓度为1 mm o l/L)-甲醇( 90B10), 检测波长为217 nm, 流速为11 0 m l/m in, 柱温为25e 。结果: 莽草酸在5~ 300 Lg /m l范围内与峰面积呈良好的线性关系( r= 01 9999), 样品的平均回收率为97151%, RSD为0199%。结论: 此方法准确、简便, 适用于马尾松松针中莽草酸的定量分析。关键词 莽草酸; 马尾松松针; HPLC; 离子对
色谱缓冲液中加入四丁基溴化铵和四丁基硫酸氢铵有何作用,两种试剂有何区别
我最近要做一些羧酸样品的HPLC检测,由于出峰太快,一些峰挤在一起,我想用点离子对试剂在C18柱上做。 大家认为用哪些离子对试剂较好? 我买了四丁基溴化铵,但有人说含卤素的对柱子不好。我想考虑四丁基硫酸铵、四丁基磷酸铵、四丁基氢氧化铵等等。 大家有什么好的意见或建议吗?
专家您好,用四丁基氢氧化铵作为离子对试剂,采用c18柱,用几天后柱效下降明显,请问是什么原因?是否用水清洗柱子时,四丁基氢氧化铵未冲出。多谢!
哪位大虾知道四丁基溴化铵的液相色谱分析条件?
[b][font='Times New Roman'][font=宋体]问题描述:流动相中加入离子对的目的、效果、分离原理[/font][/font][font=宋体]分别[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]是什么?怎么选择离子对试剂,加入量如何选择?[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]解答:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]([/font]1[font=宋体])流动相中[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]加入离子对试剂的目的是为了在流动相或是固定相中产生一种[/font]([font=宋体]或多种[/font][font=Times New Roman])[/font][font=宋体]与溶质分子电荷相反的离子的物质,产生的离子能够与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而达到使目标物在色谱柱上有效保留的目的,最终实现分离。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在选择离子对试剂的时候,首先需要考虑目标物的理化性质[/font][/font][font=宋体]。[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]通常在用于分离酸性化合物时,一般选用四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵等离子对试剂[/font][/font][font=宋体];[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]在分离碱性化合物时,一般选用戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠等离子对试剂。同时,选用离子对试剂时,一般尽可能优先选用碳链短的离子对试剂,浓度尽量的低,这样可以有效避免离子对试剂强保留对色谱柱产生的不可逆影响。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font]3[font=宋体])[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]离子对试剂的加入量要尽量的少,在一定范围内,离子对加入量跟目标物保留正相关,由于跟固[/font][/font][font=宋体]定[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]相存在作用,所以一旦超过浓度,不仅不会增加目标物保留,反而会减少[/font][/font][font=宋体]保留[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]。一般长链离子对试剂加入浓度在[/font]0.5mmol/L[font=宋体]左右,短链离子对试剂加入浓度在[/font][font=Times New Roman]5mmol/L[/font][font=宋体]左右,根据情况可适当增加,原则上不超过推荐浓度的[/font][font=Times New Roman]2[/font][font=宋体]倍。[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体][img=,256,256]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103172147361204_7262_3389662_3.jpg!w256x256.jpg[/img][/font][/font]
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=66225][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测定1,3,5-三(3-二甲基氨丙基)六氢三嗪[/url]
[font=&]流动相为四丁基氢氧化铵和甲醇,梯度洗脱,为什么空白溶剂基线不稳,尤其有机相高时会出现好多鼓包峰,影响杂质积分,排除了仪器和流动相问题,怀疑是色谱柱问题(,哪位大佬帮忙解释一下,这种情况怎么处理1.使用到离子对试剂(如四丁基氢氧化铵)的流动相在使用过程中有什么注意事项?[/font][font=&]2.使用后应该如何冲洗色谱柱,急!!![/font][font=&]3.平衡时间是否很长,一般多久[/font]
想请教一下大家,是否了解二甲基二烯丙基氯化铵的性质,在给水处理上能起什么作用,谢谢!
液相实验中通常会用到离子对试剂,如四丁基溴化铵和四丁基氢氧化铵,像这样同类型试剂对HPLC分析时有什么不同吗?各位大侠们有没有这方面的经验?希望具体一点的。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em23.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em23.gifhttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em23.gif
样品分析时,加入离子对试剂的作用是什么啊?四丁基硫酸氢胺和四丁基溴化铵各有什么作用呢?
1.使用到离子对试剂(如四丁基氢氧化铵)的流动相在使用过程中有什么注意事项?2.用后应该如何冲洗,急!!!3.平衡时间是否很长,一般多久[em09503]
HPLC法1 应用范围本法适用于唇膏、雪花膏、化妆品及痱子粉等化妆品中的异丙基甲酚的测定。2 原理样品中的异丙基甲酚在H2SO4介质条件下,用二氯甲烷萃取,然后蒸干萃取液,用乙醇定容。将乙醇溶液注入高效液相色谱仪,以荧光检测器检测,与同样处理的已知标准溶液比较进行定性和定量测定。3 试剂3.1 异丙基甲酚的标准溶液:精确称取异丙基甲酚50.0mg溶于乙醇中定容至50.0ml。取此溶液5.0ml用乙醇稀释至50ml,此液1.0ml含100.0μg异丙基甲酚。3.2 内标准溶液:精确称取百里酚25.0mg溶于水500.0ml乙醇中。3.3 柱填充剂:氨丙基硅烷键合硅胶,十八烷基硅烷键合硅胶。3.4 流动相:已烷 乙醇(9 1) 水 乙腈(1 1)。4 仪器4.1 高效液相色谱仪:具荧光检测器。5 分析步骤5.1 样品的预处理精确称取样品约0.5~2.5g(2),加饱和NaCl溶液50ml,移入分液漏斗中,加10%H2SO4 1ml,30ml二氯甲烷,振摇5min,静置分层.水层再各用20ml二氯甲烷提取二次,合并全部二氯甲烷,用50ml水洗涤,用无水硫酸钠脱水后(3),在旋转蒸发器上(水浴约40℃)蒸去二氯甲烷(4),于残留物中加入内标液5.0ml(5),用乙醇定容至50ml(6)作为待测溶液。5.2 测定5.2.1高效液相色谱条件5.2.1.1色谱柱(7):氨丙基硅烷键合硅胶(内径4.6mm、长250mm)。流动相:己烷一乙醇(9+1)。流速:1.2m1/min。5.2.1.2色谱柱(8):十八烷基硅烷键合硅胶(内径4.6mm、长15Omm)。流动相:水 乙腈(1 1)。流速:1.0ml/min。5.2.2荧光检测器波长:激发波长280nm,荧光波长305nm。5.2.3定性:取5.0ml标准溶液与5.0ml内标溶液于50.0ml容量瓶中,混匀,然后加乙醇至刻度。取此液2.5进行高效液相色谱分析,从得到的色谱图求出内标物对异丙基甲酚的相对保留时间。同样取2.5μl待测溶液,如上述方法操作。从得到的峰求出对内标物的相对保留时间与标准溶液时行比较而定性。5.2.4定量:取2.5μl待测溶液进行高效液相色谱分析。通过异丙基甲酚的峰高(或者峰面积)与内标物质的峰高(或者峰面积)之比,从预先做成的标准曲线中求出待测溶液中异丙基甲酚的浓度A(μg/m1)。5.2.5标准曲线的制备:分别取异丙基甲酚标准溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0及6.0ml于50.0ml容量瓶中,分别于每个容量瓶中加入内标准溶液5.0ml,立即加乙醇至50.0m1。分别取2.5μl此溶液进行高效液相色谱分析,求出异丙基甲酚与内标物的峰高(或峰面积)之比值,做标准曲线。6 计算c=A×V/(m×1000×1000)×100式中;c-一样品中异丙基甲酚的含量,%;A――从标准曲线上查得待测溶液中异丙基甲酚浓度,μg/m1。V一-测定用待测溶液的体积,m1;M-一样品质量,g。
大家好。我在试着用C18柱做硒的形态分析。流动相中我要用到离子对试剂四丁基溴化铵。这个柱子之前有人用过,用到过一种离子对试剂半胱氨酸。我在网上看到,有人建议一种C18柱只用一种离子对试剂;但是也有人说,只要用新的流动相充分平衡就可以了,可以用另一种离子对试剂。我很忐忑。不知道该从哪种意见。现在请诸位大侠们好好赐教下吧。小女子这厢多谢了![img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif[/img]
请问各位,四丁基溴化铵与四丁基磷酸铵有什么区别?可以替代使用吗?
[color=#444444]第一次用离子对色谱(四丁基硫酸氢铵)测定ATP ADP和AMP,流动相A:0.01%四丁基硫酸氢铵 20mM 磷酸缓冲液 pH5.0,流动相 B: 0.01% 四丁基硫酸氢铵, 200mM 磷酸缓冲液 pH4.0,10%乙腈。 柱子是agilent XDB C18反相柱,色谱条件是70%A 梯度走到50%然后回到70%。刚开始三种物质分离效果很好,但测定一段时间后(约24h)突然就出现了问题,三种物质无法分开,并且在色谱柱上基本无保留,从进样到岀峰就1min(之前分别是5min 8min和12min)。应该是柱子的问题,但不知道该如何处理,请高手赐教。[/color]
酸性流动相和离子对试剂系统对色谱柱有哪些损害?缓冲盐和离子对试剂相比哪个对柱子的损害更大?另外,缓冲盐对强极性化合物是不是有很好的保留?希望各位朋友给予解答,先谢谢各位了!
请问zxhcnf版主,在HPLC的方法开发中,针对流动相中缓冲盐和离子对试剂的比例如何确定,也就是说假如用50mmol/L的磷酸二氢钠缓冲溶液和10mmol/L四丁基溴化铵离子对试剂作流动相,这二者是按1:1比例的混合吗?或者说这方面有什么规则?欢迎各位版友参加讨论。
求助给位,我想问一下四丁基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、苄基三甲基溴化铵怎么做红外,它们都很容易潮解的,吸水性很强,我问一下,做红外的时候样品怎么处理,或者这些物质的标准红外数据在哪可以查到啊