乙二醛溶液用于分子生物

[size=3][b][font=楷体_GB2312][/font][/b][/size][align=left]分子生物学常用溶液配制[/align][size=3][b][font=楷体_GB2312]一、分子生物学常用贮存液的配制[/font][/b][/size][size=3][b][font=Times New Roman]1[/font][font=楷体_GB2312]．[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】将[/font][font=Times New Roman]29g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺和[/font][font=Times New Roman]1g N[/font][font=楷体_GB2312]，[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New Roman]60ml[/font][font=楷体_GB2312]的水中。加热至[/font][font=Times New Roman]37[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]溶解之，补加水至终体积为[/font][font=Times New Roman]100ml[/font][font=楷体_GB2312]。用滤器（[/font][font=Times New Roman]0.45μm[/font][font=楷体_GB2312]孔径）过滤除菌，查证该溶液的[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值应不大于[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312]，置棕色瓶中保存于室温。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约[/font][font=Times New Roman]0.2[/font][font=楷体_GB2312]体积的单床混合树脂（[/font][font=Times New Roman]MB-1Mallinckrodt[/font][font=楷体_GB2312]），搅拌过夜，然后用[/font][font=Times New Roman]Whatman 1[/font][font=楷体_GB2312]号滤纸过滤以纯化之。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]2[/font][font=楷体_GB2312]．[/font][font=Times New Roman]40%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]380g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺（[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=楷体_GB2312]测序级）和[/font][font=Times New Roman]20g N[/font][font=楷体_GB2312]，[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New Roman]600ml[/font][font=楷体_GB2312]的蒸馏水中。继续按上述配制[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为[/font][font=Times New Roman]1L[/font][font=楷体_GB2312]。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】见上述配制[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺的说明[/font][font=Times New Roman],40%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液用于[/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=楷体_GB2312]序列测定。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]3[/font][font=楷体_GB2312]．放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]20mg[/font][font=楷体_GB2312]放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶解于[/font][font=Times New Roman]4ml 100%[/font][font=楷体_GB2312]乙醇中，[/font][font=Times New Roman]1:10[/font][font=楷体_GB2312]稀释贮存液，用[/font][font=Times New Roman]100%[/font][font=楷体_GB2312]乙醇作空白对照读取[/font][font=Times New Roman]OD[sub]440[/sub][/font][font=楷体_GB2312]值。放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]（分子量为[/font][font=Times New Roman]1255[/font][font=楷体_GB2312]）纯品在水溶液中的摩尔消化系数为[/font][font=Times New Roman]21[/font][font=楷体_GB2312]，[/font][font=Times New Roman]900[/font][font=楷体_GB2312]，故而[/font][font=Times New Roman]1mg/ml[/font][font=楷体_GB2312]的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]处的吸光值为[/font][font=Times New Roman]0.182[/font][font=楷体_GB2312]，放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于[/font][font=Times New Roman]-20[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]是致畸剂和致癌剂[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]而不能在开放在实验桌面上进行[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]药厂提供的作治疗用途的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]波长处的光吸收确定放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]4[/font][font=楷体_GB2312]．[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L[/font][font=楷体_GB2312]腺苷三磷酸（[/font][font=Times New Roman]ATP[/font][font=楷体_GB2312]）溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】在[/font][font=Times New Roman]0.8ml[/font][font=楷体_GB2312]水中溶解[/font][font=Times New Roman]60mg ATP,[/font][font=楷体_GB2312]用[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L NaOH[/font][font=楷体_GB2312]调至[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值至[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312]，用蒸馏水定容[/font][font=Times New Roman]1ml[/font][font=楷体_GB2312]，分装成小份保存于[/font][font=Times New Roman]-70[/font][font=宋体]℃[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]5[/font][font=楷体_GB2312]．[/font][font=Times New Roman]10mol/L[/font][font=楷体_GB2312]乙酸酰溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]770g[/font][font=楷体_GB2312]乙酸酰溶解于[/font][font=Times New Roman]800ml[/font][font=楷体_GB2312]水中，加水定容至[/font][font=Times New Roman]1L[/font][font=楷体_GB2312]后过滤除菌。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]6[/font][font=楷体_GB2312]．[/font][font=Times New Roman]10%[/font][font=楷体_GB2312]过硫酸铵溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]1g[/font][font=楷体_GB2312]过硫酸铵溶解于终量为[/font][font=Times New Roman]10ml[/font][font=楷体_GB2312]的水溶液中，该溶液可在[/font][font=Times New Roman]4[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]保存数周。[/font][/size]

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。 1.冰箱:根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。 2.培养箱：37℃恒温箱用于细菌的平板培养及分子生物学实验。 3.恒温培养摇床：用于大肠杆菌等生物工程菌种的扩增。 4.水浴锅：用于保温并进行各类实验。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。含低温的水浴槽可以用于分子生物学的质粒与基因片段的连接等实验及用于42度的大肠杆菌感受态的热激。 5.烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。 6.超纯水机：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高，用自来水、蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。 7.蒸汽消毒锅：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒。 8.滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。 9.各种天平：台秤、精密电子分析天平，用于精确称量各类试剂。 10.液体体积的度量：量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯、锥形瓶等。

分子生物学作为基因工程的上游技术，其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和最终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的，以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器？ 1. 冰箱： 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱。 最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。

请教各位大侠：有谁知道乙醛、乙二醛水溶液的检测方法吗？可以用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]等仪器分析吗？具体的分析条件是什么？如色谱柱、温度测定等。急需！小妹先谢谢各位了！

有谁知道乙二醛水溶液的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]或液相分析方法吗？主要检测乙二醛含量和乙二醇残留量。急需！谢谢各位！

怎么测定乙二醛溶液中的甲醛含量?

有谁做过乙二醛溶液的标定吗？？没有国标也没有行标，国标6324.5-2008（羰基化合物）中的紫外法不适用，化学分析法又终点难判断，谁有更好的方法啊？另外，乙二醛与氢氧化钾的反应有人了解吗？

各位高手，有谁知道乙二醛水溶液的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]或液相分析方法吗？主要检测乙二醛含量和乙二醇残留量。急需！谢谢大家！

【实验目的】（1）了解实验的常规仪器、设备、耗材。（2）掌握本实验所用仪器的功能和使用方法。【实验内容】一、验室的常规仪器、设备(一) 温度控制系统：1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用来维持培养液的酸度（pH值）。37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。4. 水浴锅：用于保温。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。25-100℃水浴箱用于常规试验。5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。（二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe3+、Mo(Ⅵ)）。2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。13．超纯水：用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。（三）菌消毒设备：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。。1．蒸汽消毒锅：用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒2. 紫外线：75%乙醇 、0.1%SDS（消毒剂）一些耐高压、高温消毒且可用紫外线照射或乙醇和SDS浸泡。紫外线照射使用方便，且很方便，但灭菌效果与距离有关，且产生臭氧污染安全，用于无菌室，超净台和塑料用具的消毒。3. 滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。4. 煮沸消毒：主用于金属器械和针急需时采用。（四） 计量系统：1. 称量系统：（各种天平）台秤、托盘天平、钮力摆动天平、光电分子天平、精密电子分析天平2. 液体体积的度量：精：量筒、移液管、微量取液器粗：刻度试管、烧杯、锥形瓶3. pH值测量：pH计：测定溶液中H+的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来。pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高（小数点后两位）的pH计。4. OD值测量：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。（五）离心机：离心技术是研究生物的结构和功能中不可缺少的一种物理技术手段。因为各种物质在沉淀系数、浮力、和质量等方面有差异，可利用强大的离心力场，使其分离、纯化和浓缩。目前有各种各样的离心机。可供少于0.05ml到几升的样品离心之用。离心技术应用广泛，包括收集和分离细胞、细胞器和生物大分子等。据其转速的不同，可分为以下几种类型：1. 普通离心机：最大转速6000 r/m ，最大离心力6000g①医用或台式离心机：是离心机中最简单而廉价的，最常用于收集快速沉降系数的物质，如红细胞、粗大的沉淀物、酵母菌和细菌等。②低速冷冻离心机：主要用于细胞、细胞核、细胞膜和细菌的沉淀和收集等。 22. 高速离心机：最大转速25000 r/m ，最大离心力89000g有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。3. 超速离心机：最大转速9000 r/m ，最大离心力694000g。4. 台式超速离心机：最大转速12000r/m ，最大离心力625000g。（六）超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。超净台按气流方向的不同大致有几种类型：①侧流式：净化后气流，从左侧或右侧通过工作台面，流向对侧，或者从上往下或从下往上流向对侧，他们都能形成气流屏障而保障台面无菌。缺点：在净化气流和外边气体交界处，可因气体的流向而出现负压，使少量的未净化气体混入，而造成污染。②外流式：气流是面向操作人员的方向流动，从而保证外面气体不能混入。缺点：在进行有害物质实验时，对操作人员不利，但可采用有机玻璃把上半部分遮挡起来，使气流往下方流出。

乙二醛溶液能用304不锈钢箱加热么，要做一个大箱，最高温80，最低温40，循环使用，长期接触空气。

扫描电镜用4%戊二醛溶液干什么？

本书广泛汇集了生物化学与分子生物学的一些重要技术和方法中常用的试剂、反应条件等方面的资料，主要以表或图的形式表达，便于读者在进行研究或实验时参考使用。一些原需繁琐计算的数据，从表格或图中随手可以查到。由于本书主要采用图和表的方式，因此与同样篇幅的图书相比，信息量大。为了便于非生物化学与分子生物学工作领域的读者理解，书中对一些基本概念也作了简单的介绍。这类书国外也不多见、90年代出版的手册，仅有LABF八X系列。其中已出版的有分子生物学、细胞生物学、细胞培养、生物化学、酶学及全白质等，在国内图书馆还很少见到。链接：：：http://www.instrument.com.cn/download/Paper_detail.asp?id=30917

(一) 温度控制系统：1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要，必须具备不同控温级别的冰箱，最常使用的有：4℃、-20℃、-80℃冰箱。4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等。-80℃适合某些长期低温保存的样品、纯化的样品、特殊的低温处理消化液等的保存。0-10℃的冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验。2．液氮罐：有些实验材料、某些器官组织、细胞株、菌株及纯化的样品等，要求速冻和长期保存在超低温环境下，就需要一个液氮罐（-196℃）具有经济、省力和较好地保持细胞生物学特性的优点。3．培养箱：37℃恒温箱用于细菌的固体培养和细胞培养。CO2培养箱适用于培养各种细胞，可恒定地提供一定量的CO2（通常5%），用来维持培养液的酸度（pH值）。37℃恒温空气摇床可进行液体细菌的培养。4. 水浴锅：用于保温。25-100℃水浴摇床可用于分子杂交试验，各种生物化学酶反应等试验的保温。25-100℃水浴箱用于常规试验。5. 烘箱：主用于烘干实验器皿，有些需要温度高些，有些需要温度低些。用于RNA方面的实验用具，需要在250℃烤箱中烘干，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干。（二）水的净化装置：随着分子生物学的飞速发展，许多实验对水纯度的要求越来越高。1. 蒸馏水皿：单蒸水常难以满足实验要求。双蒸水、三蒸水配液，许多实验要去离子水。多次蒸馏水可除去水中挥发性杂质，不能完全除去水中溶解的气体杂质（Mn2 、Cu2 、Zn2 、Fe3 、Mo(Ⅵ)）。2. 离子交换器：去离子水—用离子交换法制取的水，称去离子水。去离子效果好，但不能除去水中的非离子型杂质，其中常含有微量的有机物（树脂等）。3．超纯水：用蒸馏水、离子交换水、反渗透纯水做为供水，磁铁耦合齿轮泵作用使水循环。用于PCR、PCR氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等。（三）菌消毒设备：分子生物学所用大部分试剂，而且实验用具都应严格消毒灭菌。。1．蒸汽消毒锅：用于小批量物品的随时消毒。大批实验物品、试剂、培养基可使用大型消毒且定时进行消毒2. 紫外线：75%乙醇 、0.1%SDS（消毒剂）一些耐高压、高温消毒且可用紫外线照射或乙醇和SDS浸泡。紫外线照射使用方便，且很方便，但灭菌效果与距离有关，且产生臭氧污染安全，用于无菌室，超净台和塑料用具的消毒。3. 滤器滤膜：不耐高温、高压的试剂用其处菌。4. 煮沸消毒：主用于金属器械和针急需时采用。（四） 计量系统：1. 称量系统：（各种天平）台秤、托盘天平、钮力摆动天平、光电分子天平、精密电子分析天平2. 液体体积的度量：精：量筒、移液管、微量取液器粗：刻度试管、烧杯、锥形瓶3. pH值测量：pH计：测定溶液中H 的直接电位的仪器，主要通过一对电极，在不同的pH溶液中产生不同的电动势用pH值表示出来。pH试纸：只适用于培养液、酚饱和液、缓冲液或其它试剂溶液的pH值的粗略估计。而大部分试剂的配制要求严格的pH值，需精确度高（小数点后两位）的pH计。4. OD值测量：光密度、分光光度计是利用物质在可见光和紫外线区域中的吸收光谱来鉴定该物质的性质及其含量的一种仪器。它是由光源、单色器、吸收池、接收器、测量仪表或显示屏幕所组成。OD值是许多溶液中溶质定量的方便指标之一，通过所产生的单色光而测定某一溶液对该单色光的吸收值，利用它可进行核酸溶液定量和纯度的初步判断。（五）离心机：离心技术是研究生物的结构和功能中不可缺少的一种物理技术手段。因为各种物质在沉淀系数、浮力、和质量等方面有差异，可利用强大的离心力场，使其分离、纯化和浓缩。目前有各种各样的离心机。可供少于0.05ml到几升的样品离心之用。离心技术应用广泛，包括收集和分离细胞、细胞器和生物大分子等。据其转速的不同，可分为以下几种类型：1. 普通离心机：最大转速6000 r/m ，最大离心力6000g①医用或台式离心机：是离心机中最简单而廉价的，最常用于收集快速沉降系数的物质，如红细胞、粗大的沉淀物、酵母菌和细菌等。②低速冷冻离心机：主要用于细胞、细胞核、细胞膜和细菌的沉淀和收集等。 22. 高速离心机：最大转速25000 r/m ，最大离心力89000g有冷冻和常温两种，多用于制备和手收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸铵沉淀物以及免疫沉淀物等。3. 超速离心机：最大转速9000 r/m ，最大离心力694000g。4. 台式超速离心机：最大转速12000r/m ，最大离心力625000g。（六）超净工作台：内有紫外灯、照明灯、还应有酒精灯火焰、75%乙醇等灭菌的设备，是一种提供局部洁净度的设备。其原理是鼓风机驱动空气，经过低、中效的过滤器后，通过工作台面，使实验操作区域成为无菌的环境。超净台按气流方向的不同大致有几种类型：①侧流式：净化后气流，从左侧或右侧通过工作台面，流向对侧，或者从上往下或从下往上流向对侧，他们都能形成气流屏障而保障台面无菌。缺点：在净化气流和外边气体交界处，可因气体的流向而出现负压，使少量的未净化气体混入，而造成污染。②外流式：气流是面向操作人员的方向流动，从而保证外面气体不能混入。缺点：在进行有害物质实验时，对操作人员不利，但可采用有机玻璃把上半部分遮挡起来，使气流往下方流出。（七）电泳系统：电泳技术是检测、鉴定各种生物大分子的纯度、含量及描述它们的特征，甚至还是分离、纯化、回收和浓缩样品的工具之一。核酸和蛋白质等都带有电荷，当它们被置于电场中时，能够移动。电泳装置由两部分组成：电源装置和电泳槽装置。① 电泳装置：电源需经稳流通过稳压器，既能提供稳定的直流电，又能输出稳定的电压。可用于三种：常度稳压电泳仪：输出电压0-500v 0-15mA中度稳压电泳仪：输出电压400-1000v高度稳压电泳仪：输出电压1000以上的电源装置。② 电泳槽装置：分两种水平式电泳槽：一般分为微型电泳槽和大号水平式电泳槽垂直式电泳槽：分垂直平板电泳槽和圆柱形电泳槽装置。（八）PCR仪：Polymerase Chain Reaction仪，也称DNA热循环仪，基因扩增，它是使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行的DNA变性，引物复性，DNA聚合酶催化的延伸反应三个过程。（九）凝胶成像分析系统:对电泳后含溴乙锭（EB）核酸样品的观察分析。（十）干燥设备： 31. 真空加热干燥箱：核酸在硝酸纤维素膜和尼龙膜上固定，用于杂交实验。2. 电泳凝胶干燥箱：电泳后的凝胶进行脱水干燥的仪器，一般可将凝胶干燥到一些玻璃纸上，干燥后的凝胶易于保存。3. 液氮冷冻干燥：适用于活性蛋白质样品的干燥与结晶。4. 真空泵：许多实验都需要抽真空。如：乙醇沉淀后核酸样品的干燥，电泳凝胶的干燥等。（十一） 其他1. 微波炉：便于一些溶液的快速加热和定温加热，电泳琼脂糖凝胶配制、溶化等。2. 制冰机：用于制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境，以减少核酸酶或蛋白质酶的水解。3. 层析装置：（色谱分离）是一种分离多组分混合物的有效物理方法。真空印记系统，DNA合成/测序仪：这些都是对核酸进行深入研究的必备仪器。4. 磁力搅拌器：多角度旋转混匀器、快速振荡混合器：用于混合仪器。5. 组织匀浆器：超声组织及细胞破碎器，用其进行样品的分离提纯实验。6. 通风橱：很多溶剂能逸出毒气，必备柜 ，放射性试验还要有有机玻璃屏蔽。7. 玻璃蒸馏器、电热加帽、变压器：用于酚等有机溶剂的蒸馏。8. Tip头、Eppendorf管：微管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]tip头（吸液尖）、Eppendorf管（微量离心管）可洗涤，硅化消毒后反复使用。对一些要求严格的实验，如RNA的提取、保存等操作，应使用新的消毒tip头与Eppendorf管。另外还应备有常用规格的离心管（1000ml、500 ml、250 ml、50 ml、7 ml等）及96孔、24孔、12孔、6孔的细胞培养塑料平板等。9. 小型设备、用具：定时器、滤膜、保鲜膜、防护眼镜鸭嘴镊、常规的玻璃或塑料器皿（包括平皿、试管、烧杯、量瓶、试剂分液漏斗、避光保存的试剂应使用棕色试剂瓶，如饱和酚、巯基乙醇等）、记号笔、各种手套PE、乳胶、家用、防酸的等）

结构分子生物的发展梁栋材 (中科院生物物理所，生物大分子国家实验室，北京，100101) 伦琴发现X射线后的一百年间，X射线在物质结构研究上立下了永不磨灭的伟大功绩。1912年劳埃发现晶体的X射线衍射，开创了晶态物质结构的新纪元。仅隔了22年Bernal和Crowfoot在1934年就成功地拍摄到第一张蛋白质 (胃蛋白酶) 单晶体的X射线衍射照片。事隔21年后的1953年Perutz发现了同晶置换法可以解决生物大分子晶体结构测定中的相位问题，从而蛋白质晶体学开始踏上自己发展的伟大历程。在1957年和1959年Kendrew和Perutz分别获得了肌红蛋白和血红蛋白的低分辨率 (6?和5?) 结构，在此期间Watson和Criek共同建立了DNA双螺旋的结构模型。他们的伟大成就为分子生物学奠定了基础。从1957年到1967年的十年里，随着溶菌酶结构之后，胰凝乳蛋白酶A、核糖核酸酶、核糖核酸酶S和羧肽酶也分别获得了高分辨率的结果，表明蛋白质晶体学已经成为一门成熟的学科。从六十年代末进入七十年代，蛋白质晶体学从对生物大分子三维结构测定迈入生物大分子三维结构与其生物学功能之间的关系研究，从而它既是分子生物学研究的有力的重要手段，同时也开始为结构分子生物学的建立和发展历程创造着条件。生物大分子发挥其生物学功能必需具备：(1) 稳定的特征的三维结构，(2) 其三维结构在各个水平上的运动。 随着学科的交叉渗透和迅速发展，一个极其重要的分支学科--结构分子生物学正在高速发展，并已成为当前生物学中的一个重要前沿学科。结构分子生物学是结构生物学中的一个最重要、最活跃的研究层次，它是在分子层次上从结构角度特别是从三维结构的角度研究和阐明当前生物学中各个前沿领域的重要学科问题。结构分子生物学是一个包括生物、物理、化学和计算数学等多学科交叉的前沿，其中心任务就是生物大分子的结构与其生物功能关系的研究。 结构分子生物学对生物大分子 (包括多亚基、多分子的复合物及复杂的复合体) 三维结构及其运动的研究手段主要有：X射线晶体衍射--蛋白质晶体学，二维及多维核磁共振谱，电子晶体学及电镜三维重组，中子衍射，其他包括应用傅里叶变换技术的各种谱学方法。他们都各有自身特有的优越性和不足。然而，无论从已测定生物大分子三维结构的数量上、精确度上或其发展潜力上，X射线单晶衍射方法--蛋白质晶体学--至今及可见的将来仍将占统治地位，都是其他手段不可相比的和不可代替的生物大分子三维结构研究手段。八十年代迅速崛起的蛋白质工程及药物设计已充分显示蛋白质晶体学方法是处于不可取代的重要地位，也表明结构分子生物学是生物高技术应用研究的重要前提和保证。 在结构分子生物学领域中由于学科上的重大突破和杰出成变而荣获诺贝尔奖金的科学家，前后有：F. H. C. Crick和J. D. Watson (1962年生理与医学奖)，M. F. Perutz和J. C. Kendrew (1962年化学奖)，D. C. Hodgkin (1964年化学奖)，A. Klug (1982年化学奖)和R. Huber (1988年化学奖) 等，他们都是蛋白质晶体学家。 当前结构分子生物学在国际上的发展趋势有如下几个方面的特点： 以蛋白质为主要手段的生物大分子三维结构测定在高速度发展。 结构分子生物学的迅速兴起和发展，它在近些年来的生物物理学研究中已经毫无疑问地占据了主流的位。 结构分子生物学的研究成果越来越受到生命科学各个领域的重视和引用。 国际上很多难度高、意义重大的三维结构均是以蛋白质晶体学手段在近几年突破的。 结构研究已由单一分子进入研究分子之间相互作用的复合物和分子体系的结构。 蛋白质晶体学研究从生物大分子静态 (时间统计) 的结构分析开始进入了动态 (时间分辨) 的结构研究及力学分析。 技术和方法高速发展。 基础研究不断深入与扩展的同时，应用研究在迅速发展。 激烈的竞争机制已打破了传统的学院工的研究体制和格局。

1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于

关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还没有满意的答案。现在把他们链接过来，希望有高手们能给出自己的见解。[color=#DC143C]PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及 3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。那么他们的区别是什么？各自的配制方法是怎么样的？[/color]无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如为Na2HPO412H2O，则为2.89g）KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。我们用的都是第二种磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢lanping 2007-9-17 17:21这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较简单，没有K+离子， 只起到缓冲PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多； 用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCl 和 KCl调节离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。xydqq 2007-9-18 09:32既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊网络伯牙 2007-9-18 17:16血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？ [s:49]网络伯牙 2007-9-18 17:17我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了xydqq 2007-9-18 17:23[quote]引用第3楼网络伯牙于2007-09-18 17:16发表的:血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？ [s:49][/quote]我没说血清撒。。。。。。 我们用的又没加K，我是说加了K的的xydqq 2007-9-18 17:24不加NACL会怎么样啊？多省钱啊lanping 2007-9-20 21:14在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。xydqq 2007-9-21 00:19哦 晓得了，0.8%的NACL差不多就是生理盐水的浓度。。。。。 [s:46]ps:哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。

想问一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测丙烯醛和乙醛标准物质大家都在哪里买的，比如GB/T 5750.10-2006中乙醛 丙烯醛的测定，看的需要标准物是丙烯醛和乙醛溶液w（CH3CHO）=40%，还有HJ/T 36-1999固定污染源排气中丙烯醛的测定，需要买丙烯醛标准气体还是买丙烯醛呢？可是丙烯醛又是剧毒，是不是不好买啊？

用紫外-可见分光光度计测定DNA水溶液的吸光度时,吸光度A值第二圈比第一圈小0.01,是什么原因阿,一般???要是说是因为紫外灯照过比色皿中DNA溶液时,导致水份挥发了,呐DNA的吸光度液应该变大才对阿???到底怎么回事阿请高人指教,谢谢^_^

[font=隶书][/font][font=黑体][/font][font=新宋体][/font][font=楷体_GB2312][/font][font=宋体][size=2]关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还是不能确定正确的答案。现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我会把最终的正确解答整理出来，提供给大家。xydqq 2007-9-16 15:47 PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及 3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。(来自百度知道)无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2） NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g（如为Na2HPO412H2O，则为2.89g） KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。我们用的都是第二种磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢lanping 2007-9-17 17:21这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和PBS配方就比较简单，没有K+离子， 只起到缓冲PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混匀，可以得到不同PH的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多； 用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是NaCl 和 KCl调节离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。xydqq 2007-9-18 09:32既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的NACL作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊网络伯牙 2007-9-18 17:16血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？ [s:49]网络伯牙 2007-9-18 17:17我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了xydqq 2007-9-18 17:23[quote][b]引用第3楼[i]网络伯牙[/i]于[i]2007-09-18 17:16[/i]发表的[/b]:血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？ [s:49][/quote]我没说血清撒。。。。。。 我们用的又没加K，我是说加了K的的xydqq 2007-9-18 17:24不加NACL会怎么样啊？多省钱啊lanping 2007-9-20 21:14在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。xydqq 2007-9-21 00:19哦 晓得了，0.8%的NACL差不多就是生理盐水的浓度。。。。。 [s:46]ps:哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。鸟类需用的生理盐水浓度是0.75%。称取0.75克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。两栖类需用的生理盐水浓度是0.65%。称取0.65克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到100毫升。[/size][/font]

用紫外-可见分光光度计测定DNA水溶液的吸光度时,吸光度A值第二圈比第一圈小0.01,是什么原因阿,一般???要是说是因为紫外灯照过比色皿中DNA溶液时,导致水份挥发了,呐DNA的吸光度液应该变大才对阿???到底怎么回事阿请高人指教,谢谢^_^

甲缩醛的企业质量标准如下： 项 目 要 求 外 观 无色透明液体 甲缩醛含量 % 85--98 甲醇含量 % 14 水含量 % 0.2 我收集的《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定甲缩醛》一文中，仅给出以下甲缩醛标准溶液浓度，以便绘制标准曲线：0.005、0.025、0.050、0.100、0.150、0.200、0.250、0.500、0.750、1.00mg/l十个系列，分别取0.2ul测定其峰高，以浓度和峰高绘制标准曲线。可没有讲明用什么物质来配制，比例是多少，数量是多少，参考HG/T2721-95 三乙胺（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法）的测定方法中，三乙胺的标准溶液的配制，四个标准浓度样，三乙胺的浓度取样量不变，加入的其他试剂：一乙胺、二乙胺、无水乙醇、乙腈、水，在四个标样中取样量或者说数量是变化的，请教问题： 问题一：甲缩醛标准样中浓度是变化的，是否要加入其他试剂如：甲醛、甲醇、水，若要加入，其加入数量是多少？是加入其中的一种试剂或是三个均加入？ 问题二：我的同事说：三乙胺标准样的制备，仅需要加入一乙胺、二乙胺、无水乙醇、乙腈、水的一种就可绘制标准曲线，而不需要全部加入以上五种试剂绘制标准曲线，这种说法对吗？

1、 分子生物学：是一门从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。 2、 医学分子生物学：是分子生物学的一个重要分支，又是一门新兴交叉学科。它是从分子水平上研究人体在正常和疾病状态下的生命活动及其规律，从分子水平开展人类疾病的预防、诊断和治疗研究的一门科学。 3、酶工程：过去主要是通过生物化学方法从各种材料中提取、制备酶制剂。现在主要应用基因工程技术制取酶制剂。 4、蛋白质工程：过去主要是采用化学方法对纯化的蛋白质进行结构改造，制备出有特定功能的蛋白质。现在主要应用基因工程技术，从改造目的基因的结构入手，在受体细胞中表达不同结构的蛋白质。 5、微生物工程：又称发酵工程是利用微生物特定性状，使微生物产生有用物质或直接用于工业化生产的技术。 6、DNA的甲基化：DNA的一级结构中，有一些碱基可以通过加上一个甲基而被修饰，称为DNA的甲基化。 7、 CG岛：在整个基因组中存在一些成簇、稳定的非甲基化CG，这类CG称为CG岛。 8 、信使RNA：从DNA分子转录的RNA分子中，有一类可作为蛋白质生物合成的模板，称为信使RNA。 9、顺反子：由结构基因转录生成的RNA序列亦称为顺反子。 10、 帽子结构：5端第1个核苷酸是甲基化鸟嘌呤核苷酸，它以5端三磷酸酯键与第2个核苷酸的5端相连，而不是通常的3、5磷酸二酯键。 11 、核酶：在没有任何蛋白质（酶）存在的条件下，某些RNA分子也能催化其自身或其它RNA分子进行化学反应，即某些RNA具有酶样的催化活性，这类具有催化活力的RNA被命名为核酶。 12、 蛋白质的变性：蛋白质分子爱到物理化学因素（如加热、紫外线、高压、有机溶剂、酸、碱等）的影响时，可使维持空间结构的次级键断裂，性质改变，生物活性丧失，称为蛋白质的变性。 13、蛋白质的复性：导致蛋白质变性的因素除去后，某些蛋白质又可重新回复天然构象，表现出天然蛋白质的生物活性，称为蛋白质的复性。 14、 基因：是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位，是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。 15、 基因组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。 16、 操纵子：是指数个功能上相关联的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。转录单位：储存RNA和蛋白质肽链序列信息的结构基因与指导转录起始部位的序列（启动子）和转录终止的序列（终止子）共同组成转录单位。 17、 启动子：是RNA聚合酶结合的区域，操纵基因实际上不是一个基因，而是一段能被特异阻遏蛋白识别和结合的DNA序列。 18、 质粒：是细菌细胞内携带的染色体外的DNA分子，是共价闭合的环状DNA分子，能独立进行复制。 19 、质粒的不相容性：具有相同复制起始位点和分配区的两种质粒不能共存于一个宿主菌，这种现象称为质粒的不相容性。 20、 转位因子：即可移动的基因成分，是指能够在一个DNA分子内部或两个DNA分子之间移动的DNA片段。 20、自私DNA：核生物基因组中也存在一些可移动的遗传因素，这些DNA顺序并无明显生物学功能，似乎为自己的目的而组织，故有自私DNA之称。 21、 自杀基因：将某些细菌、病毒和真菌中特异性的基因转导入肿瘤细胞，此基因编码的特异性酶类能将原先对细胞无毒或毒性极低的前体物质在肿瘤细胞内代谢成毒性物质，达到杀死肿瘤的目的，这类前体转移酶基因称为自杀基因。 22 、断裂基因：真核生物的结构基因是不连续的，编码氨基酸的序列被非编码序列所打断，因而被称为--在编码序列之间的序列称为内含子，被分隔开的编码序列称为外显子。 23、 顺式调控元件（顺式作用元件）：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的DNA序列。 24 、反式作用因子：一些蛋白质因子可通过结合顺式作用元件而调节基因转录活性，这些蛋白质因子称为反式作用因子。真核细胞内含有大量的序列特异性的DNA结合蛋白，其中一些蛋白的主要功能是使基因开放或关闭，称为反式作用因子，简称反式因子。 25、 启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。 事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A。在此范围内，颗粒的干扰相对较小，结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低，或者过高（超过光度计的测试范围）。最后是操作因素，如混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；混合液不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项。除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A320一般是0。

PCR................................................................................................................................. 2RT-PCR............................................................................................................................ 4琼脂糖核酸电泳............................................................................................................... 6胶回收纯化DNA.............................................................................................................. 6大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）.......................................................................... 7乙醇沉淀DNA.................................................................................................................. 8酶 切............................................................................................................................. 8连 接............................................................................................................................... 8感受态细胞的制备............................................................................................................ 9转 化............................................................................................................................. 10重组子的筛选和鉴定...................................................................................................... 10真核细胞的转染.............................................................................................................. 11转染细胞的稳定筛选....................................................................................................... 11重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量.......................................................................... 12肿瘤细胞体外传代培养及保种........................................................................................ 13肿瘤动物模型的建立...................................................................................................... 14小鼠尾静脉注射方法...................................................................................................... 14肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验........................................................................................ 14人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养................................................................................. 14实验动物免疫方案.......................................................................................................... 15血清制备........................................................................................................................ 16ELISA............................................................................................................................ 16血清学筛选克隆新抗原/新基因....................................................................................... 17ELISPOT........................................................................................................................ 20藻酸盐包裹实验............................................................................................................. 21重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作................................................................... 21（细菌内同源重组AdEasy System）............................................................................... 21组织病理技术................................................................................................................. 26免疫组化染色................................................................................................................. 27流式细胞仪常用的几种检测方法..................................................................................... 29Western Blot(免疫印迹法)................................................................................................ 34PVDF膜上蛋白的可逆染色............................................................................................. 37人肿瘤抗原的识别与鉴定............................................................................................... 39－免疫沉淀实验流程...................................................................................................... 39蛋白质组实验流程.......................................................................................................... 41SDS-PAGE胶染色.......................................................................................................... 44数据库搜索(Databases search)......................................................................................... 45主要的公共数据库及网址............................................................................................... 46蛋白质的序列分析流程................................................................................................... 48聚丙烯酰胺凝胶的配制................................................................................................... 49双向电泳常用溶液配方................................................................................................... 51分子生物学常用溶液配制............................................................................................... 53另外给大家推荐一个资料共享的地方http://www.yiqi120.com/zlzx.asp,好东西大家一同分享.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=128143]国内某重点实验室分子生物学实验方法与总结[/url]

2006，07两年，是国外发酵技术大批登陆大陆的两年，在06年后，大陆的发酵工业（不仅仅是科研，中试，而是大生产），正式进入了分子时代。分子技术对发酵行业的影响，在工业上的体现有两点，1，调控方面，由工艺技术的生理水平调整，进入生化水平的代谢流加强与敲除控制。比如说，（我拿有机酸举例子，因为初级代谢研究的更多些）以往代谢流调控，以谷氨酸为极端，使用营养缺陷型，并破坏细胞膜，使产物在胞外积累。但是，由于有些通路代谢的先天不足，某些产物（如琥珀酸）不会积累，而没有商品化，另外，产品产量很难继续提高。而做了分子水平的改进后，以上问题就得以解决了。作为经典发酵，代谢调控对应是用工艺手段，菌种用诱变，以工艺为重。而现代发酵，分子调控，菌种和工艺是分不开的，有时，工艺唯一的目的，就是保证菌种出于某种特定状态而已。2，产物方面，以往产物决定于菌种筛选，但分子时代，A,如果是初级代谢产物，则通过DNA水平调控和改变代谢流实现，B,如果是其他代谢产物，（不管来源是什么，动物，植物），则找到基因，导入细胞表达（大肠杆菌或酵母等）。分子生物学，并不是分子水平的生物，或生化，或生理学。其实，它是指分子水平的DNA学，除了DNA外, 对其他有机物也是围绕与DNA的关系展开的。考虑到在我们发酵生理学的视点下，DNA的价值，是蛋白的信息载体，而一切生理变化，都是蛋白活性的宏观表达。那么，目前的生物技术，可以认为只有两个大的方面（或技巧）：1，通过分子水平DNA技术，抑制细胞内源蛋白活性。2，表达细胞外源蛋白及其活性。 表现在宏观上，就可以实现代谢流调控，蛋白产品的获得，用外源酶合成或催化反应等。比如像代谢流调控，我们找到编码琥珀酸脱氢酶的基因，并敲除之，使这个蛋白不能表达，则从琥珀酸到延胡索酸的反应不能进行，来积累琥珀酸，属于第一种情况。我们敲除PTSG这个基因，使细胞对各种不同的糖没有选择性，也属于第一种情况，而引入另一个基因，使糖代谢加强，就是第二种情况了。在合成PHA时，外源基因指导合成三个外源酶，并在细胞内表达活性，就属于第二种情况。当然，表达外源蛋白最典型的，还是直接以被表达蛋白为产品，不过当蛋白需要被修饰时（如糖基化），就又需要这两种技巧的配合或反复使用了。 这样得到的菌株，生产产物的代谢十分直接，往往转化率在90%或以上。但是，细胞本身的活力比较弱，也会有大量的宏观上类似回复突变的生理问题。这就是为什么我说：“现代发酵，分子调控，菌种和工艺是分不开的，有时，工艺唯一的目的，就是保证菌种处于某种特定状态而已。”----因为，许多本来由我们过程工程师在生理水平控制的代谢，分子技术已经帮我们在种子阶段解决了，而同时，又丢给我们一些不大不小的新问题。以往，类似味精发酵，获得初级代谢产品，并减少中间代谢产物和副产物，需要工艺近似苛刻的控制，而现在，就不必了。 以上是分子技术在经典发酵视角下的情形。而通过分子生物学技术改造过的基因工程菌，由于其特殊的营养和环境需求，往往对发酵原料有较高的要求。安琪试剂级酵母浸粉产品无论是产品颗粒度、流动性、分散性、抗吸潮能力、溶液吸光度、颜色、磷酸盐沉淀等感官指标，还是产品中多肽、氨基酸、核苷酸、维生素、微量元素等营养物质含量指标均达到国际先进水平；通过微生物的培养效果测试，产品使用效果也完全可以与进口产品媲美，且不同批号的产品品质具备高度的一致性，完全可以替代进口同类产品在生物发酵产业中予以应用；另外，安琪产品在销售价格上则具备相当大竞争优势，可以有效帮助解决相关生物发酵企业面临的成本瓶颈。

甲醛/乙醛水溶液GC-TCD可以测定么？请问所使用的条件如何？毛细管柱还是填充柱？

能否用于强酸强碱溶液？如盐酸或氢氧化钠谢谢

[table=100%][tr][td]我现在想用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测定水溶液中乙二醇的浓度（乙二醇的水溶液为稀溶液），就这一种物质，是用内标法还是用外标法？？？我现在用外标法测的，但是峰面积差别很小时，求出的浓度差别也很大，不是特别准。。我能不能用内标法算？？？？如果行的话，内标物是什么？？？请各位支招，非常感谢。。。[/td][/tr][/table]

我用碱性过硫酸钾消解-盐酸萘乙二胺分光光度法测试总氮含量。溶液配置后测试，空白吸光度为0.03，但溶液放置3天后再测试，空白吸光度为1.12，经试验验证，空白吸光度的增大是由过硫酸钾溶液和氢氧化钠溶液导致，请教各位大侠，过硫酸钾溶液和氢氧化钠溶液应如何保存，才能避免溶液中含氮量的增加？备注：过硫酸钾溶液和氢氧化钠溶液是分开配置，分开储存的。