BioSuite SEC柱
蛋白分析与鉴定单克隆抗体与重组蛋白质越来越多的被作为生物治疗性制剂。相应的,LC和LC/MS方法也作为有力的分离技术而占据了重要地位,用于支持蛋白鉴定和稳定性测试。沃特世蛋白分离技术(PrST:Protein Separation Technology)产品包括反相、离子交换和分子筛色谱柱,能够很好的应对这些分离挑战。此外,我们基于HPLC的BioSuite、SEC、IEX、HIC和反相HPLC柱为这些大分子分离提供了杰出的色谱性能。BioSuite SEC柱BioSuite UHR(超高分辨,Ultra-High Resolution)、HR(高分辨,High Resolution)和标准SEC柱填料,使用了坚硬但仍可浸润的硅胶基质填料,在pH 2.5-7.5条件下稳定。如标准曲线图中所示,BioSuite SEC填料的排阻限由硅胶填料的颗粒孔径所决定。SEC的填料孔径以及色谱柱长是决定分离效率的重要参数。BioSuite 4μm粒径的UHR柱,提供最大分离效率,之后分别是BioSuite HR柱和BioSuite标准柱。为了使分析柱(如4.6mm或7.8mm内径)或制备柱(如21.5mm)的柱寿命最大化,我们推荐使用BioSuite保护柱。使用BioSuite 250, HR 5μm SEC柱对BSA聚集体进行LC/MS分析BioSuite分子筛色谱柱一览表产品描述 填料基质 柱内径 柱长 柱体积 推荐样品浓度 推荐样品体积 部件号BioSuite 125, 4 μm UHR SEC Silica 4.6 mm 300 mm 4.98 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 40 μL 186002161BioSuite 250, 4 μm UHR SEC Silica 4.6 mm 300 mm 4.98 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 80 μL 186002162BioSuite UHR Guard SEC Silica 4.6 mm 35 mm — — — 186002163BioSuite 125, 5 μm HR SEC Silica 7.8 mm 300 mm 14.33 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002164BioSuite 250, 5 μm HR SEC Silica 7.8 mm 300 mm 14.33 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002165BioSuite 450, 8 μm HR SEC Silica 7.8 mm 300 mm 14.33 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002166BioSuite HR Guard SEC Silica 6 mm 40 mm — — — 186002167BioSuite 125, 10 μm SEC Silica 7.5 mm 300 mm 13.25 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002168BioSuite 125, 13 μm SEC Silica 21.5 mm 300 mm 108.9 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 1.6 mL 186002169BioSuite 250, 10 μm SEC Silica 7.5 mm 300 mm 13.25 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002170BioSuite 250, 13 μm SEC Silica 21.5 mm 300 mm 108.9 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 1.6 mL 186002171BioSuite 450, 13 μm SEC Silica 7.5 mm 300 mm 13.25 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 200 μL 186002172BioSuite 450, 17 μm SEC Silica 21.5 mm 300 mm 108.9 mL 不大于 8 mg/mL 不大于 1.6 mL 186002173BioSuite Guard SEC Silica 7.5 mm 75 mm — — — 186002174BioSuite Guard SEC Silica 21.5 mm 75 mm — — — 186002175* 使用BSA蛋白作为标准品,含盐(0.1M氯化钠或0.1M硫酸钠)的50mM磷酸缓冲液作为洗脱液。可行的蛋白载量将由于分离洗脱液、样品复杂度以及样品中所含的蛋白种类而有所不同。总的说来,要使分辨率最大化,用稀释的蛋白样品溶液,尽可能以最小的进样量进样。* 注意:对于BioSuite UHR SEC柱(4.6mm内径),合适的操作流速为0.1-0.4mL/min。使用能够在此流速条件下进行操作的HPLC系统(例如Waters Alliance HPLC系统),对获得优化的UHR SEC柱性能至关重要。BioSuite UHR SEC柱的蛋白标准曲线样品:甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da),丙种球蛋白(Gamma globulin, MW 155,000Da),BSA(66,330 Da),-乳球蛋白(Beta lactoglobulin, MW 18,400 Da),溶菌酶(Lysozyme,14,300 Da),细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da),三甘氨酸(Triglycine, 189 Da)。色谱柱: BioSuite 250, UHR SEC, 4.6 mm x 300 mm, 4 μm BioSuite 125, UHR SEC, 4.6 mm x 300 mm, 4 μm部件号: 186002162 (BioSuite 250) & 186002161 (BioSuite 125)流动相:0.15M磷酸钠,pH 6.8流速: 0.35 mL/min柱温: 25 °C检测: UV @ 220 nm色谱柱 球形蛋白分子量范围 支链型葡聚糖 线性PEG/PEOBioSuite 125 5,000–150,000 1,000–30,000 500–15,000BioSuite 250 10,000–500,000 2,000–70,000 1,000–35,000BioSuite HR SEC柱的蛋白标准曲线样品:甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da),IgG(MW 156,000 Da),BSA(66,330 Da),卵清蛋白(Ovalbumin, MW 43,000 Da),过氧化酶(Peroxidase, MW 40,200 Da),b-乳球蛋白(Beta lactoglobulin, MW 18,400 Da),肌球素(Myoglobin, 16,900 Da),核糖核酸酶(Ribonuclease A, MW 13,700 Da),细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da),甘氨酸四聚物(Glycine tetramer, 246 Da)色谱柱:BioSuite 450, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 8 μm BioSuite 250, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 5 μm BioSuite 125, HR SEC, 7.8 mm x 300 mm, 5 μm部件号: 186002166 (BioSuite 450), 186002165 (Biosuite 250), & 186002164 (BioSuite 125)流动相:0.1M磷酸钠,pH 7.0,含有0.3M氯化钠流速: 1.0 mL/min柱温: 25 °C检测: UV @ 220 nm色谱柱 球形蛋白分子量范围 支链型葡聚糖 线性PEG/PEOBioSuite 125 5,000–150,000 1,000–30,000 500–15,000BioSuite 250 10,000–500,000 2,000–70,000 1,000–35,000BioSuite 450 20,000–1,000,000 4,000–500,000 2,000–250,000BioSuite标准SEC柱的蛋白标准曲线样品:甲状腺球蛋白(Thyroglobulin, MW 670,000 Da),IgG(MW 156,000 Da),BSA(66,330 Da),卵清蛋白(Ovalbumin, MW 43,000 Da),过氧化酶(Peroxidase, MW 40,200 Da),b-乳球蛋白(Beta lactoglobulin, MW18,400 Da),肌球素(Myoglobin, 16,900 Da),核糖核酸酶(Ribonuclease A, MW 13,700 Da),细胞色素C(Cytochrome C, MW 12,400 Da),甘氨酸四聚物(Glycine tetramer, 246 Da)。色谱柱: BioSuite 450, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 13 μm BioSuite 250, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 13 μm BioSuite 125, SEC, 7.5 mm x 300 mm, 10 μm部件号: 186002172 (BioSuite 450), 186002170 (BioSuite 250) & 186002168 (BioSuite 125)流动相:0.1M磷酸钠,pH 7.0,含有0.3M氯化钠流速: 1.0 mL/min柱温: 25 °C检测: UV @ 220 nm色谱柱 球形蛋白分子量范围 支链型葡聚糖 线性PEG/PEOBioSuite 125 5,000–150,000 1,000–30,000 500–15,000BioSuite 250 10,000–500,000 2,000–70,000 1,000–35,000BioSuite 450 20,000–1,000,000 4,000–500,000 2,000–250,000我们还提供BioSuite 4.6mm、7.8mm、7.5mm内径的分析柱,以及21.5mm内径制备柱。