隐色孔雀石绿纯度标准物质

由于孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿均为脂溶性化合物,在鱼体内和环境中残留时间长,并有致突变、致畸和致癌的危险性,因此其是否可作为水产养殖业中使用的兽药在国际上引起了争论。加拿大于1992 年就禁止其作为鱼场杀菌剂使用,且加拿大和美国均规定在食用鱼等水产品中禁止检出孔雀石绿和无色隐性孔雀石绿。欧盟于2002 年6 月颁布法令禁止其在作为食品鱼的鱼场中使用, 我国也于2002 年5 月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。但是,事实上,包括我国和英国在内的许多禁用孔雀石绿的国家,从对市场上销售的鱼类等水产品中孔雀石绿的监测情况来看,仍有在鱼场中非法使用孔雀石绿的现象。 基于这些在水产养殖业中非法使用孔雀石绿的现象,各国政府和消费者密切关注，由此引发各国加大力度进行孔雀石绿的监督检查,同时形成一些标准的检测体系。(一)我国的检测标准【 标准编号 】GB/T 19857—2005 【 标准名称 】水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定【 英文名称 】 Determination of malachite green and crystal violet residues in aquatic product【 起草单位 】上海出入境检验检疫局；厦门出入境检验检疫局；广东出入境检验检疫局；福建出入境检验检疫局；江苏出入境检验检疫局；北京出入境检验检疫局；宁波出入境检验检疫局。【 发布日期 】 2005-09-05【 实施日期 】 2005-09-05 【 标准编号 】 SC/T 3021-2004【 标准名称 】 水产品中孔雀石绿残留量的测定.液相色谱法【 英文名称 】 Determination of malachite green residues in fishery products High-performance of liquid chromatography【 起草单位 】 中国海洋大学 国家水产品质量监督检验中心【 发布日期 】 2004-01-17【 实施日期 】 2004-03-01 【 标准编号 】SN/T 1479-2004【 标准名称 】进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法【 发布日期 】2004-11-17【 实施日期 】2005-04-01【 发布单位 】国家质量监督检验检疫总局（二）美国的检测标准1.美国FDA规定的孔雀石绿及其代谢产物实验室检测标准 【 标准编号 】 LIB4363【 标准名称 】鱼和虾中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的LC-VIS法和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]n法【 英文名称 】 Quantitative and Confirmatory Analyses of Malachite Green and Leucomalachite Green Residues in Fish and Shrimp【 起草单位 】U.S. Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center, Denver, CO【 发布日期 】 2005-11 【 标准编号 】LIB4333【 标准名称 】测定和确认鲑鱼中隐性孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]方法【 英文名称 】Determination and Confirmation of Leucomalachite Green in Salmon: Laboratory Information Bulletin 4333【 起草单位 】Animal Drugs Research Center, Food and Drug Administration, Denver, CO【 发布日期 】2004-11 【 标准编号 】LIB4334【 标准名称 】快速液相色谱法测定鲑鱼中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的方法【 英文名称 】Determination of Malachite Green and Leucomalachite Green in Salmon with In-Situ Oxidation and Liquid Chromatography with Visible Detection【 起草单位 】Food and Drug Administration, Animal Drugs Research Center Denver Federal Center, P.O. Box 25087 Denver, CO 80225-0087【 发布日期 】2004-11 【 标准名称 】美国FDA关于孔雀石绿检测方法4333和4334的补充【 英文名称 】Amendment: Application of Laboratory Information Bulletins 4333 and 4334 for the Determination of Leucomalachite Green and Malachite Green Residues in Catfish, Basa, Tilapia, Trout, and Shrimp 【 发布日期 】 2005-10 2. 美国AOAC协会期刊规定的液相色谱检测方法（J.AOAC Int.1995,78(6):1388-1393 ） 该方法常被等同采用。（三）日本修订孔雀石绿限量标准2006年5月30日，日本厚生劳动省发布食安发第0530002号通知，根据食品卫生法（1947年第233号法律）第11条第1项的规定，规定动物用医药品孔雀石绿是一种食品中不得含有的成分，并制定了孔雀石绿的试验方法，且试验方法的分析对象为孔雀石绿及隐性孔雀石绿。 该修订公布六个月后生效，即2006年11月30日起生效。 此次修订重新制定了孔雀石绿的试验方法，同时向《修订后食品卫生法第11条第3项的相关法令的调整》（2005年11月29日食安发第1129001号当职通知）的附表3中追加如下内容，自2006年11月30日起生效。 农药名称 检出界限（ppm） 孔雀石绿* 0.002 *孔雀石绿的分析对象包括：孔雀石绿及无色孔雀石绿（孔雀石绿的代谢物） 此次修订生效前，暂且施行厚生劳动省制订的一项标准，限量0.01ppm（2005年厚省劳动省告知第497号）。

[color=#f10b00]去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品（外标），本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个（4度下）晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高？谢谢了！[/color]

Hp[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/ms中孔雀石绿与隐色孔雀石绿检测问题　　去年底换了个新柱子，跟以前一模一样的，这几个月来孔雀石绿的回收率都好低，隐色的倒很好，新配的孔雀石绿和隐色孔雀石绿的标准品(外标)，本来是孔雀石绿的色谱峰响应值比隐色孔雀石绿的大，但是放一个(4度下)晚上，就倒过来了，请问各位朋友，怎么样校正下能使孔雀石绿的回收率提高?谢谢了!

最近发现的，跑氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标时（里面不含孔雀石绿和隐色孔雀石绿）竟然出现了孔雀石绿和隐色孔雀石绿本底，响应值还不低，这是怎么回事？？[font=&]配置了一个乙腈+水+2种内标混标，内标能打出来的同时，也能打出不低响应值的孔雀石绿和隐色孔雀石绿，但是乙腈+水进样，就没有任何本底了。[/font][font=&]之前怀疑是标的问题，可是换了另一家的还是一样啊。[/font][font=&]只要加了氘代孔雀石绿、隐色孔雀石绿内标，就能出孔雀石绿、隐色孔雀石绿的峰。求救！[/font]

水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15011]SC/T 3021—2004[/url]说明一下：柱后氧化柱好象安谱有得卖，没有柱后氧化柱可以做孔雀石绿，但是不能做隐色孔雀石绿。

各位大侠，我们的仪器出现了特别奇异的现象，跪求各位大侠的紧急援助啊！我们的液质这三年检测孔雀石绿（内标法）一直都特别稳定，内外标响应值均可以到达5次方，就在前不久出现了特别奇葩的事情，只出隐色的孔雀石绿，内外标均5次方（5ppb）；而有色孔雀石绿的内外标均只有2到3次方。从3月20日开始，我们全体液质工作人员和工程师就开启了与有色孔雀石绿的一场持久战。期间我们做了大量的工作。首先，当然是怀疑检测人员配错了标准溶液，重新配！我们4个人配置的结果一样。开始怀疑标准品是否过期，然后采用了2015年最新的标准溶液，结果都一样，只出隐色，无色的响应值极其低。然后将单标和混标分别进行优化，结果质谱能够清晰的检测出有色孔雀石绿的质荷比。好吧，终于不用担心标准品的问题了。然后，仔细检查仪器的各个部件，包括液质，液相的各个配件，逐一的排查。相继，更换离子传输管；更换喷针；清洗液质包括Qo小四级杆的清洗；拆洗液相系统的各个管路；更换色谱柱。然后对各种电路板，全部都进行了排查！file:///C:\Documents and Settings\Administrator\Application Data\Tencent\Users\113495856\QQ\WinTemp\RichOle\@CNOI5TS.png结果没有变化。再然后，趁夜间对别的物质进行了测定，结果显示硝基呋喃的响应值有一点点降低，但是标曲和加标均能满足要求。隐色孔雀石绿的标曲也很漂亮，但是有色孔雀石绿标曲乱七八糟，内外标响应值依然在2-3次方。工程师看到了这个结果，无奈的说：“质谱是不会自己选择谁出谁不出的呀！”摇头叹息！再接着排查，不接色谱柱，接两通，进质谱，结果一样，有色2-3次方，无色5次方。再再然后，就是清明放假第一天，（别人放假，我们继续加班排查！好惨！），直接手动通过质谱的六通阀手动进样，额！有，有色和无色都能达到5次方！那就应该是液相的问题啦！怎么办！？工程师拆洗液相的各个地方，清洗，排查，没有发现异常！但是我们的液质人家就是测不出有色的孔雀石绿！真的快要崩溃了！工程师已经表示他已经使劲浑身解数了！我们的仪器任务量特别的大，现在出现这个问题，我们一点办法都没有，请问各位大侠，有没有遇到这样的奇葩事情呀！跪求各位的帮助！

我以前做孔雀石绿是用有色孔雀石绿标准溶液来加标的，在处理时要加入3mL的硼氢化钾还原为隐化的孔雀石绿来做，用的是GB/T 20361-2006；现在买了隐色的孔雀石绿，请问还要加3mL的硼氢化钾吗？

[color=#dc143c][size=2]维权声明：本文为rogersw原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现的，均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/size][/color][align=center][b][size=5][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量[/font][/size][/b][/align][align=center][b][size=5][font=宋体]测定方法验证报告[/font][/size][/b][/align][size=3][font=Times New Roman]1[/font][font=宋体].[/font][font=宋体]目的[/font][font=宋体]验证水产品中孔雀石绿残留量测定的方法（[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]）在本试验室的适用性。[/font][font=宋体]2.[/font][font=宋体]方法内容[/font][font=宋体]2.1 [/font][font=宋体]范围[/font][font=宋体]本方法规定了[/font][font=宋体]水产品中孔雀石绿[/font][font=Times New Roman],[/font][font=宋体]隐色孔雀石绿残留量测定的方法[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]2.2[/font][font=宋体]试剂[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中3.2中试剂。[/font][font=宋体]2.3[/font][font=宋体]仪器[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]高效液相色谱仪：WATERS2695带2996二极管阵列检测器。[/font][font=宋体]2.4 [/font][font=宋体]分析步骤[/font][font=宋体]同[/font][font=Times New Roman]GB/T 19857-2005[/font][font=宋体]方法中[/font][font=Times New Roman]3.4[/font][font=宋体]中分析步骤[/font][font=Times New Roman]2.5[/font][font=宋体]色谱条件：[/font][font=宋体]色谱柱：NovapakC-18 3.9mm(i.d)×150mm,5um加柱后氧化柱[/font][font=宋体]留动相：乙腈+乙酸铵（0.05mol/L,PH=4.5）=65+35[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流量：1.0ml/min[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]进样量：50ul[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二极管阵列检测器，波长扫描范围：200nm～650nm，定量波长618nm。[/font][font=宋体]3. [/font][font=宋体]验证结果[/font][font=宋体]3.1[/font][font=宋体]线性范围[/font][font=宋体]吸取1000.0ug/ml的孔雀石绿，隐色孔雀石绿储备液,分别配制0.01ug/ml，0.04ug/ml，0.1ug/ml，0.4ug/ml，1.0ug/ml，5个浓度系列的标准工作液。按照方法仪器条件,注入高效液相色谱仪，以峰面积比较进行定量，作绘制成标准曲线。[/font][/size][size=3][font=宋体]表1：孔雀石绿标准回归[img=700,400]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007161645_231077_1627713_3.gif[/img][/font][/size]

测定水产补品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿时，只出一个峰，帮帮忙出点主意

请问：1 孔雀石绿的标准品有两种，一种是孔雀石绿，分子量是927.01，分子式是C52H54N4O12；另一种是孔雀石绿草酸盐，分子量是463.50，分子式是 C23H25N2 C2HO4 0.5C2HO4。现在我要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]做水产品中的残留，我应该选用上述标准品中的哪一种？有什么差别？2 孔雀石绿标准品原样有固体的，也有用乙腈等溶剂溶的，我应该选择哪一种好些？好多文献中都没有交代详细的标准品的性质，所有比较迷惑，请做过的版油指导一下！

本人新人一枚，正在做孔雀石绿的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]方法。结果发现无论是氘代孔雀石绿还是孔雀石绿都有很严重的拖尾现象（10 ng/ml），但隐形孔雀石绿没有。尝试过调整乙酸铵的比例，进样量，标准品浓度，结果都没有解决。请各位大神给点意见。前一个峰为孔雀石绿，后一个为隐形孔雀石绿。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801241936445882_6318_3255643_3.jpeg[/img]

最近新开孔雀石绿项目，使用标准19857-2005 ，由于标准未指定孔雀石绿和隐色孔雀石绿标物的cas号，购买的标物是孔雀石绿草酸盐，这样的话需要换算成何种分子？报告中该怎样提现？谢谢了

（现行有效）GB/T19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定（现行有效）GB/T20361-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法（现行有效）NY/T1756-2012 饲料中孔雀石绿的测定（现行有效）SN/T1768-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢产物的快速测定方法（现行有效）SN/T3540-2013 出口食品中多种禁用着色剂的测定 液相色谱-质谱/质谱法（现行有效）SC/T3021-2004 水产品中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱法（现行有效）DB13/T1358-2011 养殖用水中孔雀石绿快速测定方法 激光拉曼光谱法（现行有效）DB21/T2288-2014 养殖水体中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱串联质谱法（现行有效）DB22/T1617-2012 饲料中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、结晶紫和隐色结晶紫的测定液相色谱-质谱/质谱法（暂无文本）（现行有效）DB34/T1421-2011 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的快速筛选测定 酶联免疫法（现行有效）DB37/T1780-2011 水产苗种中孔雀石绿、结晶紫、亚甲基蓝及其代谢物残留量的测定 液相色谱法（暂无文本）（已作废）NY/T1756-2009 饲料中孔雀石绿的测定（已废止）SN/T1479-2004 进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法（已废止）DB33/T598-2006 水产品中孔雀石绿及其代谢物残留量的测定——液相色谱-串联质谱法（已废止）DB44/T526-2008 水产种苗中孔雀石绿残留量的测定 液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T539-2008 水产品中孔雀石绿残留量的快速测定 液相色谱法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T570-2008 水体中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）（已废止）DB44/T573-2008 底泥中孔雀石绿残留量的测定—液相色谱荧光法（2016-10-31废止）（暂无文本）

请问下大家，买的孔雀石绿标准品是孔雀石绿草酸盐2(C23H25N2)*2(C2HO4)*C2H2O4，配制标样的时候，怎么换算成孔雀石绿的含量，比如1g孔雀石绿草酸盐定容至100mL，孔雀石绿的浓度是多少？

按标准GB/T 20361-2006 用液相做，标准里面标物是用显性孔雀石绿，经硼氢化钾还原为隐性孔雀石绿，有几个问题：1、用来配标的硼氢化钾的量按标准加吗，如何确保孔雀石绿完全还原为隐性，看颜色吗？2、用显性孔雀石绿配的标线，跟隐性孔雀石绿配的标线，最后的定量结果差了将近一倍，为何隐性结果较大？哪位大神有类似经历吗，俺实在看不懂了。[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09509.gif[/img]

准备申请这一项 但在方法确认实验过程中发现比如各自加标0.5 孔雀石绿回收0.4 隐性孔雀石绿回收0.6 这样看各自回收率都挺一般的但要是按照之和计还挺好的 虽然标准中要求结果报之和 但这样应该不可以吧？这二者实验中会发生转化吗？

用乙腈配置孔雀石绿、结晶紫、隐色孔雀石绿、隐色结晶紫，用后过几天就发现标准品的峰面积变了，有什么办法没？因为用LCMSMS做的，定量定不准，而且回收率也不稳定，请各位大侠指点一二。

【求助】GB/T20361-2006 用隐色孔雀石绿标准溶液对样品进行加标，实验步骤有什么改动，是否用加入硼氢化钾，多次实验中用HPLC测出的峰比较杂是为什么

一般做水产品检测兽药残留时，会用到一些标准品如孔雀石绿、沙星类等，如果过了有效期，还没用完，怎么处理呢？基本上按照CNAS认证规定还是只有销毁一条路了。标准品过期这个问题，很有必要讨论一下，因为一些标准品过期了，但有可能还有效，可以用来做其他有意义的研究，比如，可以用来做内部质量控制，就是在不通知人员样品含量的情况下，给他们送盲样，让他们来做人员间对比性试验，再根据相关检测标准判定对比性试验的结果，对内部质量控制起到帮助作用。但是，标准品的有效期规定也有一定的参照性，比如说，过了两年或5年，一些标准品的性质会发生变化，对定量分析会有影响等情况都有可能发生。举例，你的孔雀石绿和结晶紫标准品用了２年了，再重新配标准溶液时，也许显性还可以，但保留时间可能会提前，隐性的也有可能会差太多，比如，２ppb基本做不出来了，而且隐性孔雀石绿和隐性结晶紫都分不开了。。。。。来源：实验与分析

流动相：乙酸铵：乙腈（0.1%甲酸）配标溶液：乙腈图1:8月15日配制跑的图的定量图图2:流动相图3:10月31日隐性孔雀石绿100ug/ml定性图（重新称量配制，之前冰箱停电7天，储备液不能用）图4:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图图5:单标隐性孔雀石绿100ug/ml定量图，但是却检出孔雀石绿隐性孔雀石绿开封后用封口膜封上，常温干燥器中保存也容易氧化降解吗？[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313178837_3987_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311313306243_2274_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314034736_9324_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314105064_2880_5595741_3.png[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210311314377934_6486_5595741_3.png[/img]

最近做孔雀石绿等项目，发现孔雀石绿、隐色孔雀石绿都不存在空白干扰问题，但这两者的内标，空白干扰太高了。用全新的乙腈，直接装入进样小瓶，也会出很高的峰。考虑过仪器污染的问题，但孔雀石绿和隐色孔雀石绿反而没有干扰，所以目前还找不到原因。有版友遇到过吗？

今天做孔雀石绿 有些关于质谱的问题 想请教一下流动相是 乙腈：5mM乙酸铵 混标包括：孔雀石绿 银色孔雀石绿 结晶紫 隐色孔雀石绿-d55ppb是出峰正常，基线很平但做到0.5ppb或者更低时出现问题：1. 结晶紫 372-356 出峰后基线一路往上漂 飘得很高（杂峰很多）2.隐色孔雀石绿 331-316 基线及噪音很高 把峰给抬高很多求解答 谢谢

我们现在开始做孔雀石绿！想用阳性交换固相萃取小柱的方法，但国际太麻烦了，我曾经听说，有方法可以直接提取样品后，把样品液过固相萃取小柱就可以的，请问谁知道呢？我试做了很多方法，但回收很不稳定！而且结晶紫和隐色结晶紫的回收率和孔雀石绿和隐色孔雀石绿的内标回收率不一致，造成结晶紫的结果不准确？请问有谁做过的呢？

98% DB33/T598-2006孔雀石绿草酸盐≥98% 7孔雀石绿三胞胎从上述标准对孔雀石绿的描述可以看出，不同标准所采用的孔雀石绿并不是一种物质，那么，孔雀石绿究竟有哪几种形式，检测时究竟应该采用纯品还是何种化合物？为此，通过一些网站对孔雀石绿进行了一番探究，结果出乎意料！通过chemicalbook查询关键词“孔雀石绿”得到的查询结果：CASMFMW标准品名称2437-29-8C52H54N4O12927孔雀石绿569-64-2C23H25ClN2

各位大虾，本人用国标方法检测孔雀石绿 结晶紫 隐性孔雀石绿 隐性结晶紫四种物质。流动相比率为：乙腈：5mM乙酸铵=75：:25 来检标准品样，孔雀石绿和结晶紫出现很长的拖尾现象。求好的解决方法

孔雀绿与孔雀石绿是不是同一种物质？如果不是同一物质，请老师给出它们的结构式。非常感谢！

最近最孔雀石绿实验，是用乙腈提取，过酸式氧化铝柱，液质分析，分别加孔雀石绿、隐性孔雀石绿各20ppb，最终结果孔雀石绿6ppb，隐性孔雀石绿26ppb，这个结果怎么解释？是孔雀石绿转化了吗。在第二天又单独加一个孔雀石绿回收，孔雀石绿4ppb，隐性孔雀石绿几乎没有，这个又怎么解释呢。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=152821]饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法[/url]摘要建立了超高效液相色谱一串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取，提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化，使用u．PLC—MS／M进行检测。色谱条件：ACQUITY uPLC M BEH C】8柱(2．1 innl×100 rain i．d．，1．7 )，流动相乙腈0．1％甲酸溶液，梯度洗脱流速O．3 mL／min。采用电喷雾串联四极杆质谱检测。结果表明，孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng／mL时线形良好，在1～100 g／kg的添加水平条件下平均回收率为68．5％ ～91．6％ ，该方法的检测限为1．0／zg,／kg。